UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS...

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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA

TRABAJO DE TITULACIÓN PRESENTADO COMO REQUISITO PREVIO PARA OPTAR POR

EL GRADO DE QUÍMICA Y FARMACÉUTICA

TEMA:

¨ESTUDIO DE LA TOXICIDAD AGUDA DE MUCILAGOS OBTENIDOS DE EXTRACTOS DE

Malva pseudolavatera y Malva sylvestris. ¨

AUTORAS:

• CAROLINE ELIZABETH ALMEIDA VILLAMAR

• MISHELLE ALEJANDRA ARMIJOS VILLEGAS

TUTORA:

Q.F. FRANCISCA PATRICIA JIMENEZ GRANIZO, Mg.

COTUTORA:

Q.F. GLENDA SARMIENTO TOMALA, Mg.

GUAYAQUIL- ECUADOR

2019 -2020

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FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA

UNIDAD DE TITULACIÓN

FICHA DE TESIS/ TRABAJO DE GRADUACIÓN

TÍTULO Y SUBTÍTULO: ¨ESTUDIO DE LA TOXICIDAD AGUDA DE MUCILAGOS OBTENIDOS DE EXTRACTOS DE Malva pseudolavatera y Malva

sylvestris. ¨

AUTOR(ES) (apellidos/nombres): CAROLINE ELIZABETH ALMEIDA VILLAMAR MISHELLE ALEJANDRA ARMIJOS VILLEGAS

REVISOR(ES)/TUTOR(ES) (apellidos/nombres):

TUTOR REVISOR: Q.F. PILAR ASUNCION SOLEDAD CANARTE TUTOR: Q.F. FRANCISCA PATRICIA JIMENEZ GRANIZO, Mg.

INSTITUCIÓN: UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

UNIDAD/FACULTAD: FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

MAESTRÍA/ESPECIALIDAD: QUIMICA Y FARMACIA

GRADO OBTENIDO: TERCER NIVEL – QUÍMICA Y FARMACÉUTICA

FECHA DE PUBLICACIÓN: No. DE PÁGINAS: 102

ÁREAS TEMÁTICAS: FITOQUIMÍCA Y FARMACOLOGÍA

PALABRAS CLAVES/ KEYWORDS: malva, mucilagos, extractos, dosis.

RESUMEN/ABSTRACT (150-250 palabras): El objetivo de estudio fue la evaluación de la toxicidad aguda oral de los mucilagos obtenido de los extractos de hojas de Malva sylvestris y Malva pseudolavatera. Para el estudio; se utilizaron 8 grupos de ratones y uno de control sin tratamiento de 5 hembras cada uno, las dosis administradas fueron 2000, 300, 50 y 5 mg/Kg. Se registro el peso inicial, a los siete y catorce días post administración, diariamente se tomó el consumo de agua, balanceado y presencia de signos tóxicos; según guía de la OECD 420. Los resultados en las primeras cuatros horas de observación (post administración) se observó que a la dosis (2000mg/kg) de ambos extractos; 2 de los 5 ratones presentaron, acicalamiento, heces blandas y orina del color del extracto durante la primera hora. Posterior a este tiempo estos signos desaparecieron. A dosis inferiores los animales no presentaron ningún signo y en cuanto a los pesos corporales, el consumo de alimento y agua no presentaron diferencias significativas entre los grupos. De acuerdo a los análisis histopatológicos de los órganos tomados (riñón, hígado y estómagos), no se observaron daños a nivel de tejidos y presentaron una estructura similar al control normal en todos los grupos a las dosis ensayadas, la aparición de leves lesiones en los órganos es indicativa de que el funcionamiento del organismo se encuentra sometido a sustancias que aceleran su metabolismo, por ello es la posible congestión vascular en hígados y riñones. ADJUNTO PDF: SI CONTACTO CON AUTOR/ES:

Teléfono: 098239076

0967970757

E-mail: [email protected] [email protected]

CONTACTO CON LA INSTITUCIÓN: FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

Teléfono: 042293680

E-mail: www.fcq.ug.edu.ec

mailto:[email protected]

mailto:[email protected]

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FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA


Guayaquil, 10 de junio del 2020

Dra. Q.F. Zoila Luna Estrella, Mgs.

VICEDECANA FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL Ciudad. - De mis consideraciones:

Envío a Ud. El informe correspondiente a la REVISIÓN FINAL del Trabajo de Titulación ¨ESTUDIO DE LA TOXICIDAD AGUDA DE MUCILAGOS OBTENIDOS DE EXTRACTOS DE Malva pseudolavatera y Malva sylvestris. ¨ del o de los estudiantes ALMEIDA VILLAMAR CAROLINE ELIZABETH y ARMIJOS VILLEGAS MISHELLE ALEJANDRA. Las gestiones realizadas me permiten indicar que el trabajo fue revisado considerando todos los parámetros establecidos en las normativas vigentes, en el cumplimento de los siguientes aspectos:

Cumplimiento de requisitos de forma:

• El título tiene un máximo de 16 palabras.

• La memoria escrita se ajusta a la estructura establecida.

• El documento se ajusta a las normas de escritura científica seleccionadas por la Facultad.

• La investigación es pertinente con la línea y sublíneas de investigación de la carrera.

• Los soportes teóricos son de máximo 6 años.

• La propuesta presentada es pertinente.

Cumplimiento con el Reglamento de Régimen Académico:

• El trabajo es el resultado de una investigación.

• El estudiante demuestra conocimiento profesional integral.

• El trabajo presenta una propuesta en el área de conocimiento.

• El nivel de argumentación es coherente con el campo de conocimiento.

Adicionalmente, se indica que fue revisado, el certificado de porcentaje de similitud, la valoración del tutor, así como de las páginas preliminares solicitadas, lo cual indica el que el trabajo de investigación cumple con los requisitos exigidos.

Una vez concluida esta revisión, considero que las estudiantes están aptas para continuar el proceso de titulación. Particular que comunicamos a usted para los fines pertinentes.

Atentamente,

Q.F. PILAR SOLEDISPA CAÑARTE,Msc

C.I. No.: 0909244352

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CERTIFICADO PORCENTAJE DE SIMILITUD

Habiendo sido nombrado Q.F Patricia Jiménez Granizo Mg, tutor del trabajo de titulación certifico que el presente trabajo de titulación ha sido elaborado por ALMEIDA VILLAMAR CAROLINE Y ARMIJOS VILLEGAS MISHELLE, con mi respectiva supervisión como requerimiento parcial para la obtención del título de QUIMICAS Y FARMACEUTICAS.

Se informa que el trabajo de titulación: ¨ESTUDIO DE LA TOXICIDAD AGUDA DE

MUCILAGOS OBTENIDOS DE EXTRACTOS DE Malva pseudolavatera y Malva

sylvestris.¨, ha sido orientado durante todo el periodo de ejecución en el programa anti

plagio URKUND, quedando el 0% de coincidencia.

_________________ Q.F. FRANCISCA PATRICIA JIMÉNEZ GRANIZO, Mg. C.I. 090602392-4

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Guayaquil, 10 de Julio del 2020

APROBACIÓN DEL TUTOR

En calidad de tutora del trabajo de titulación, certifico: que he asesorado, guiado y

revisado el trabajo de titulación en la modalidad de investigación, cuyo título es:

“ESTITUDIO DE LA TOXICIDAD AGUDA DE MUCILAGOS OBTENIDOS DE EXTRACTOS DE

Malva pseudolavatera y Malva sylvestris”, presentado por ALMEIDA VILLAMAR

CAROLINE ELIZABETH, con C.I. 0923236970 Y ARMIJOS VILLEGAS MISHELLE

ALEJANDRA, con C.I. 0951910967, previo a la obtención del título de Químico (as)

Farmacéutico (as).

Este trabajo ha sido aprobado en su totalidad y se adjunta el informe de Antiplagio

del programa URKUND, quedando el 0% de coincidencia. Lo certifico:


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Guayaquil, 10 de junio del 2020

CERTIFICACIÓN DEL TUTOR REVISOR

Habiendo sido nombrado Q.F. PILAR ASUNCION SOLEDISPA CANARTE, tutor

revisor del trabajo de titulación ¨ESTUDIO DE LA TOXICIDAD AGUDA DE MUCILAGOS

OBTENIDOS DE EXTRACTOS DE Malva pseudolavatera y Malva sylvestris. ¨, certifico

que el presente trabajo de titulación elaborado por ALMEIDA VILLAMAR CAROLINE

ELIZABETH, con C.I 0923236970 y ARMIJOS VILLEGAS MISHELLE ALEJANDRA, con C.I.

0951910967, con mi respectiva supervisión como requerimiento para la obtención

del título de QUÍMICAS y FARMACÉUTICAS, en la carrera Química y Farmacia de la

Facultad de Ciencias Químicas, ha sido REVISADO Y APROBADO en todas sus partes,

encontrándose apto para su sustentación.

Q.F. PILAR SOLEDISPA CAÑARTE,Msc C.I. No.: 0909244352

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FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA


Guayaquil, 01 de septiembre del 2020

Q.F. PILAR SOLEDISPA CAÑARTE, Msc PRESIDENTE – MIEMBRO DEL TRIBUNAL

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DEDICATORIA

Le dedico este logro en primer lugar a Dios porque sin él no soy nada y con su infinito

amor he llegado a esta meta.

A mis padres, Alberto Vargas quien ha sido el pilar de mi familia y me ayudado a

seguir adelante, dándome un fiel ejemplo de trabajo y esfuerzo; Lilian Villamar la mujer

que siempre ha creído en mí y me acompañado en todas las difíciles etapas de mi vida,

se ha desvelado y sacrificado porque yo sea mejor que ella. Se lo dedico a ellos por su

confianza en mí.

A mis hermanos, Vanessa y Albertito que me han brindado siempre su aliento

durante toda mi vida.

A mi abuelo Antonio Villamar por ser mi segundo padre y siempre estar pendiente

inculcándome los buenos modales; el respeto y la honestidad que son los principales

valores para lograr nuestros objetivos

Finalmente, a mi esposo Erick Tomalá parte fundamental de este logro quien ha

estado durante la mayor parte de mi carrera ayudándome y motivándome a terminar

mis estudios con su amor incondicional

Caroline Elizabeth Almeida Villamar

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DEDICATORIA

Este trabajo de titulación se lo dedico primero que nada a mi Dios, porque sin sus

bendiciones durante el camino no hubiera sido posible todo esto.

A mis maravillosos padres Karina Villegas y Vicente Armijos quienes han sido mi

ejemplo a seguir, ellos los que siempre me dicen que no importa la edad ni las

circunstancias, los sueños se cumplen y las metas se alcanzan con mucho esfuerzo; que

mejor regalo que ver a su “Princesa” Graduada. Gracias por cada ayuda, por cada

repelada, por cada consejo. Papitos de mi corazón son todo para Mi.

A mi Esposo Edwin Mosquera y a mi precioso hijo Mateito Ezequiel quienes son Mi

hogar, mi Familia que junto a Dios hemos formado con tanto empeño, respeto,

paciencia y Amor. A ustedes dedico cada triunfo y cada derrota porque sé que con la

ayuda de ustedes sabre levantarme para seguir adelante.

A mis hermanos Vicente y Danielito, que como hermana mayor mi anhelo es verlos

también graduados y con título Universitario, espero ser ese ejemplo a seguir,

contagiarles mis ganas de ser mejor y darles ese orgullo a nuestros padres.

A mis abuelitos que sin duda alguna han orado tanto para que su nietita sea toda una

“Doctorita” como ellos me dicen.

Y definitivamente a mis amigas de aula, de risas, de lágrimas, amigas que se han

convertido en las mejores durante mi carrera universitaria; Caroline, Majito; Hermanas

que la vida me regalo Lisseth y Brigette.

Mishelle Alejandra Armijos Villegas

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AGRADECIMIENTO

En primer lugar, le doy gracias a Dios por enseñarme el sentido de la vida por

otorgarme el poder del conocimiento y brindarme fortaleza para poder llegar a esta

meta.

Agradezco a mi madre por ser una mujer luchadora y sacrificar noches enteras

desvelándose por mí y amanecerse para acompañarme a la parada del bus de camino a

la universidad y siempre esperar un mensaje mío diciendo "mami ya voy a casa”, por

sacrificar muchas cosas por un cuaderno mío, por ser mi mayor ejemplo de fortaleza y

de lucha. Gracias a ti por esas palabras de aliento y a veces ser dura conmigo gracias a

ello hoy puedo comprender que para lograr algo tengo que esforzarme.

Gracias a mi padre por ser el hombre que ha sabido sostener nuestro hogar, por

proveer todo lo necesario para yo llegar a graduarme, todas esas tardes de trabajo

arduo para poder llegar a casa y solventar mis gastos universitarios que hoy están dando

sus frutos. Gracias padre por siempre apoyarme.

Agradezco a mis hermanos, Vanessa por ser mi hermana y la principal persona de la

que quiero ser ejemplo a seguir, a mi hermano Alberto por todos sus abrazos sonrisas y

todo lo bonito que sin él saberlo influye en mí. A mi abuelo quien ha sido como mi

padre por siempre ser atento conmigo, preocuparse por cómo voy en los estudios, y

enseñarme valores importantes.

Le agradezco a mi esposo por todo su esfuerzo amor, paciencia y las palabras de

aliento que supo darme en los momentos más difíciles de mi carrera, por ayudarme

entender ciertos temas de estudio y por siempre querer lo mejor para mi e incentivarme

a seguir.

Quedó completamente agradecida con mi tutora Q.F Patricia Jiménez Mg. y cotutora

QF Glenda Sarmiento Mg. que sin duda con sus conocimientos han sido parte

fundamental de este logro, para poder obtener el título de Química y Farmacéutica.

Así también estoy muy agradecida con mis amigas María José y Mishelle que

finalmente se han convertido en un tesoro. Finalmente, a mi Mejor amiga y hermana de

toda la vida, Saraí, quien siempre ha dispuesta a brindarme una palabra de aliento en

mis momentos difíciles y sonrisas en nuestras mejores etapas.

Caroline Elizabeth Almeida Villamar

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AGRADECIMIENTO

Gracias a dios por permitirme tener y disfrutar de mi familia.

Gracias a mi familia por ayudarme a cumplir con excelencia en el desarrollo de esta

tesis y apoyarme en cada decisión; Gracias por creer en mí. Gracias a la vida porque

cada día me demuestra lo hermosa y lo justa que puede llegar a ser.

A mis padres que con tanto esfuerzo ayudaron a su niña para que sea una gran

profesional. No siempre es apoyo económico, basta con palabras de aliento para que

sea un apoyo incondicional.

A mi esposo que con mucho amor y paciencia supo sobrellevar cada desvelada, supo

levantarme en cada caída y falta de ánimos que tuve. Quien se ha esforzado día a día

para apoyarme en todo lo que he necesitado durante mi carrera. A mi hijo Mateito

porque Él es mi motor principal para ser quien soy para darle una vida digna junto a su

papito.

A mis hermanitos que, aunque no los vea seguido sé que soy su ejemplo a seguir

como hermana mayor.

A mi suegra por cuidar, alimentar, y proteger cada día a mi Mateito para que yo

pudiera salir a estudiar.

También debo agradecer a cada uno de los docentes que hizo parte de este proceso

de formación, que dejan como producto a esta profesional que ama lo que hace y le

apasiona cada detalle referente a su carrera.

A mi tutora Dra. Patricia Jiménez y cotutora Dra. Glenda Sarmiento que con mucha

paciencia y con su gran experiencia en sus conocimientos colaboraron para que esta

tesis tome forma.

No ha sido sencillo el camino hasta ahora, pero debo admitir que estoy muy orgullosa

de mí misma, no negare que muchas veces me desanime, sentí que me tenía que rendir,

pero definitivamente nada ni nadie pudo impedir que siguiera adelante.

Mishelle Alejandra Armijos Villegas

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INDICE

INTRODUCCIÓN ..................................................................................................... 1

CAPITULO I: PROBLEMA ......................................................................................... 3

I.1. Planteamiento y Formulación del Problema .................................................... 3

I.2. Justificación e Importancia ............................................................................... 4

I.3. Hipótesis ........................................................................................................... 5

I.4. Objetivos ........................................................................................................... 5

I.4.1 Objetivo general: ..................................................................................... 5

I.4.2 Objetivos específicos: .............................................................................. 5

I.5. Operacionalización de las Variables ................................................................. 6

I.5.1 Variables dependientes: .......................................................................... 6

I.5.2 Variables independientes: ....................................................................... 6

CAPITULO II: MARCO TEORICO .............................................................................. 9

II.1. Antecedentes ................................................................................................ 9

II.2. Marco teórico.............................................................................................. 10

II.2.1 Malva sylvestris ..................................................................................... 10

II.2.2 Descripción botánica ............................................................................. 10

II.2.3 Uso medicinal ........................................................................................ 12

II.2.4 Componentes principales ...................................................................... 12

II.2.5 Toxicidad de la Malva sylvestris ............................................................ 13

II.2.6 Efectos secundarios de la Malva. .......................................................... 14

II.3. Malva pseudolavatera ................................................................................ 14

II.3.1 Descripción ............................................................................................ 14

II.3.2 Descripción botánica ............................................................................. 15

II.3.3 Componentes activos ............................................................................ 15

II.3.4 Propiedades terapéuticas ..................................................................... 16

xvii

II.3.5 Mucílagos .............................................................................................. 16

II.3.6 Funciones fisiológicas de los mucílagos en las plantas ......................... 17

II.3.7 Efecto Laxante ....................................................................................... 18

II.3.8 Eliminación de toxinas........................................................................... 18

II.3.9 Extractos ................................................................................................ 19

II.3.10 Dosis ...................................................................................................... 19

II.3.11 Respuesta a la dosis .............................................................................. 19

II.3.12 Toxicología ............................................................................................. 19

II.3.13 Estudios de toxicidad preclínicos .......................................................... 20

II.3.14 Toxicología experimental ...................................................................... 20

II.3.15 Ensayos de toxicidad aguda .................................................................. 21

II.3.16 Clasificación de toxicidad aguda según la DL50 .................................... 21

II.3.17 Fase rápida sin determinación de DL50 ................................................ 22

II.3.18 Efecto tóxico .......................................................................................... 22

II.3.19 Efectos adversos .................................................................................... 22

II.4. Directrices para la valoración de toxicidad ................................................. 22

II.4.1 Método de dosis fija (OCDE 420) .......................................................... 23

II.4.2 Método arriba y abajo (UDP). Guía OECD 425 ...................................... 23

II.5. Requisitos y características relacionados al uso de animales

experimentales ............................................................................................................. 23

II.5.1 Ética y uso de animales ......................................................................... 23

II.5.2 Infraestructura para la experimentación con animales ........................ 24

II.5.3 Microambiente ...................................................................................... 24

II.5.4 Macroambiente ..................................................................................... 24

II.5.5 Tipo de luz y grado de iluminación ....................................................... 24

II.5.6 Las 3 R de la experimentación ............................................................... 25

xviii

II.5.7 Histopatología ....................................................................................... 25

III. CAPITULO III: MATERIALES Y METODOS ..................................................... 27

III.1. Tipo de investigación .................................................................................. 27

III.1.1 Método científico .................................................................................. 27

III.1.2 Métodos teóricos .................................................................................. 27

III.1.3 Método estadístico ............................................................................... 27

III.2. Equipos, Aparatos, Materiales y Reactivos ................................................. 28

III.2.1 Equipos .................................................................................................. 28

III.2.2 Aparatos ................................................................................................ 28

III.2.3 Materiales ............................................................................................. 29

III.2.4 Reactivos ............................................................................................... 29

III.3. Muestra ....................................................................................................... 29

III.4. Metodología experimental ......................................................................... 29

III.4.1 Animales de experimentación............................................................... 29

III.4.2 Condiciones experimentales ................................................................. 30

III.4.3 Recolección de las especies de Malva. .................................................. 30

III.4.4 Obtención de mucilagos obtenidos de extractos de Malva

pseudolavatera y Malva sylvestris .......................................................................... 30

III.4.5 Conformación de grupos ....................................................................... 30

III.4.6 Administración de extractos ................................................................. 31

III.4.7 Periodo de observación ......................................................................... 31

III.4.8 Pienzo y agua ......................................................................................... 32

III.4.9 Registro de peso .................................................................................... 32

III.4.10 Necropsia ............................................................................................... 32

III.4.11 Análisis macroscópico de la mucosa gástrica........................................ 32

III.5. Diagrama de método .................................................................................. 33

xix

III.6. Estudios histopatológicos ........................................................................... 34

IV. CAPÍTULO IV RESULTADOS Y DISCUSIONES ................................................. 35

Iv.1. Pesos corporales de los biomodelos ........................................................... 35

iv.2. Semana intermedia post administración .................................................... 37

iv.3. Semana final post administración .............................................................. 39

iv.4. Consumo de pienzo y agua durante los dias de experimentación ............. 41

iv.4.1 agua ....................................................................................................... 41

IV.4.2 Pienzo .................................................................................................... 44

IV.5. Signos tóxicos observados durante el tiempo de evaluación ..................... 48

IV.5.1 Signos clínicos observados durante el tratamiento con mucilagos

obtenidos de las hojas de Malva pseudolavatera. ................................................. 48

IV.5.2 Signos clínicos observados durante el tratamiento con mucilagos

obtenidos de las hojas de Malva sylvestris. ............................................................ 53

IV.6. Observaciones macroscópicas de órganos al finalizar la experimentación 57

IV.7. Resultados de la valoración microscópica .................................................. 57

IV.8. Discusiones.................................................................................................. 63

V. CONCLUSIONES .......................................................................................... 65

VI. RECOMENDACIONES .................................................................................. 65

VII. BIBLIOGRAFIA ............................................................................................ 66

VIII. GLOSARIO .................................................................................................. 72

IX. ANEXOS ..................................................................................................... 73

INDICE DE TABLAS

Tabla I Operacionalización de Variables ........................................................................... 6

Tabla II Descripción Botánica de M. sylvestris ................................................................ 11

Tabla III: Tipos de datos en toxicología ........................................................................... 21

Tabla IV: Clasificación de toxicidad aguda según la DL50 .............................................. 21

xx

Tabla V Comparación de la ganancia de peso corporal durante los siete primeros días de

la experimentación.......................................................................................................... 38

Tabla VI Comparación de la ganancia de peso corporal del día siete al día catorce de

experimentación ............................................................................................................. 41

Tabla VII Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda

oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva pseudolavatera Grupo control. ...... 48

Tabla VIII Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda

oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva pseudolavatera a una dosis de 2000

mg/Kg. ............................................................................................................................. 49

Tabla IX Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda


mg/Kg. ............................................................................................................................. 50

Tabla X Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda


mg/Kg. ............................................................................................................................. 51

Tabla XI Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda


mg/Kg. ............................................................................................................................. 52

Tabla XII Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda

oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva sylvestris a una dosis de 2000 mg/Kg.

......................................................................................................................................... 53

Tabla XIII Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda

oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva sylvestris a una dosis de 300 mg/Kg.54

Tabla XIV Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda

oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva sylvestris a una dosis de 50 mg/Kg.55

Tabla XV Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda

oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva sylvestris a una dosis de 5 mg/Kg. . 56

INDICE DE FIGURAS

Figura 1 Malva sylvestris ................................................................................................ 10


xxi

Figura 3 Componentes principales de la M. sylvestris ................................................... 12


Figura 5 Malva pseudolavatera ..................................................................................... 14

Figura 6 Mucilagos de M. pseudolavatera y M. sylvestris. ............................................ 17

INDICE DE GRÁFICOS

Gráfico I Peso promedio inicial de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las

hojas de Malva pseudolavatera en el estudio de toxicidad aguda oral ......................... 35

Gráfico II Peso promedio inicial de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las

hojas de Malva sylvestris en el estudio de toxicidad aguda oral .................................... 36

Gráfico III Peso promedio a los siete días de experimentación de los grupos tratados con

mucilagos obtenidos de las hojas de Malva pseudolavatera en el estudio de toxicidad

aguda oral. ...................................................................................................................... 37

Gráfico IV Peso promedio a los siete días de experimentación de los grupos tratados con

mucilagos obtenidos de las hojas de Malva sylvestris en el estudio de toxicidad aguda

oral. ................................................................................................................................. 37

Gráfico V Peso promedio a los catorce días de los grupos tratados con el extracto de

mucilagos M. pseudolavatera en el estudio de la toxicidad aguda oral ........................ 39

Gráfico VI Peso promedio a los catorce días de los grupos tratados con el extracto de

mucilagos M. sylvestris en el estudio de la toxicidad aguda oral. .................................. 40

Gráfico VII Consumo de agua (ml) durante los primeros siete días de la experimentación

de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de Malva pseudolavatera en

el estudio de Toxicidad Aguda Oral. ............................................................................... 41

Gráfico VIII Consumo de agua (ml) durante los primeros siete días de la experimentación

de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de Malva sylvestris en el

estudio de Toxicidad Aguda Oral. ................................................................................... 42

Gráfico IX Consumo de agua (ml) durante los últimos siete días de la experimentación de

los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de Malva pseudolavatera en el

estudio de Toxicidad Aguda Oral. ................................................................................... 43

xxii

Gráfico X Consumo de agua (ml) durante los últimos siete días de la experimentación de

los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de Malva sylvestris en el

estudio de Toxicidad Aguda Oral .................................................................................... 43

Gráfico XI Consumo de pienzo (g) durante los siete primeros días de la experimentación

de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de extractos de las hojas de Malva

pseudolavatera en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. ................................................ 44

Gráfico XII Consumo de pienzo (g) durante los siete primeros días de la experimentación


sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. ........................................................... 45

Gráfico XIII Consumo de pienzo (g) durante los siete últimos días de la experimentación


pseudolavatera en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. ................................................ 46

Gráfico XIV Consumo de pienzo (g) durante los siete últimos días de la experimentación


sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. ........................................................... 46

INDICE DE DIAGRAMA

Diagrama 1 Diagrama del método ................................................................................ 33

INDICE DE ANEXOS

Anexo A M. pseudolavatera y M. sylvestris, secado al ambiente .................................................. 73

Anexo B Previo al secado en la estufa ........................................................................................... 73

Anexo C Post secado en la estufa .................................................................................................. 73

Anexo D Molienda de hojas de M. pseudolavatera y M. sylvestris. .............................................. 74

Anexo E Extracto acuoso de Malva pseudolavatera (izquierda) - Malva sylvestris (derecha) ....... 74

Anexo F Conformación de grupos ................................................................................................. 75

Anexo G Pesado diario del Pienzo. ................................................................................................ 75

Anexo H Registro el volumen de agua ingerida diaria. ................................................................. 75

Anexo I Disección de los biomodelos al día 14. ............................................................................. 76

Anexo J Observación macroscópica de los órganos (Riñón, estomago e hígado) cada grupo. ...... 76

Anexo K Colocando los órganos en formol. ................................................................................... 76

Anexo L Post Formol, los órganos separados por grupos para el estudio microscópico. ............... 76

xxiii

FACULTAD: CIENCIAS QUÍMICAS

CARRERA: QUIMICA Y FARMACIA

UNIDAD DE TITULACION

“ESTUDIO DE LA TOXICIDAD AGUDA DE MUCILAGOS OBTENIDOS DE EXTRACTOS DE Malva pseudolavatera y Malva sylvestris”:

Autores: Almeida Villamar Caroline Elizabeth Armijos Villegas Mishelle Alejandra

Tutor: Q.F Patricia Jiménez Granizo Mg.

RESUMEN

El objetivo de estudio fue la evaluación de la toxicidad aguda oral de los mucilagos

obtenido de los extractos de hojas de Malva sylvestris y Malva pseudolavatera. Para el

estudio; se utilizaron 8 grupos de ratones y uno de control sin tratamiento de 5 hembras

cada uno, las dosis administradas fueron 2000, 300, 50 y 5 mg/Kg. Se registro el peso

inicial, a los siete y catorce días post administración, diariamente se tomó el consumo de

agua, balanceado y presencia de signos tóxicos; según guía de la OECD 420. Los

resultados en las primeras cuatros horas de observación (post administración) se

observó que a la dosis (2000mg/kg) de ambos extractos; 2 de los 5 ratones presentaron,

acicalamiento, heces blandas y orina del color del extracto durante la primera hora.

Posterior a este tiempo estos signos desaparecieron. A dosis inferiores los animales no

presentaron ningún signo y en cuanto a los pesos corporales, el consumo de alimento y

agua no presentaron diferencias significativas entre los grupos. De acuerdo a los análisis

histopatológicos de los órganos tomados (riñón, hígado y estómagos), no se observaron

daños a nivel de tejidos y presentaron una estructura similar al control normal en todos

los grupos a las dosis ensayadas, la aparición de leves lesiones en los órganos es

indicativa de que el funcionamiento del organismo se encuentra sometido a sustancias

que aceleran su metabolismo, por ello es la posible congestión vascular en hígados y

riñones.

Palabras clave: malva, mucilagos, extractos, dosis.

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FACULTAD: CIENCIAS QUÍMICAS

CARRERA: QUIMICA Y FARMACIA

UNIDAD DE TITULACION

“ACUTE TOXICITY STUDY OF MUCILAGES OBTAINED FROM EXTRACTS OF Malva pseudolavatera and Malva sylvestris”

Authors: Almeida Villamar Caroline Elizabeth Armijos Villegas Mishelle Alejandra

Advisor: Q.F Patricia Jiménez Granizo Mg

ABSTRACT

The objective of the study was to evaluate the acute oral toxicity of the mucilages

obtained from Malva sylvestris and Malva pseudolavatera leaf extracts. For the study; 8

groups of mice were used and one of control without treatment of 5 females each, the

doses administered were 2000, 300, 50 and 5 mg / Kg. The initial weight was recorded,

at seven and fourteen days after administration, daily water consumption was taken,

balanced and the presence of toxic signs; according to OECD 420 guide. The results in

the first four hours of observation (post administration) it was observed that at the dose

(2000mg / kg) of both extracts; 2 of the 5 mice presented, grooming, soft stools and

urine of the color of the extract during the first hour. After this time these signs

disappeared. At lower doses the animals did not show any sign and in terms of body

weights, food and water consumption did not show significant differences between the

groups. According to histopathological analyzes of the organs taken (kidney, liver and

stomachs), no tissue damage was observed and they presented a structure similar to

normal control in all groups at the doses tested. In histopathology, the appearance of

slight lesions in the organs is indicative that the functioning of the organism is subject to

substances that accelerate its metabolism, therefore it is the possible vascular

congestion in livers and kidneys.

Keywords:mallow,mucilages,extracts,doses.

1

INTRODUCCIÓN

En los siglos antiguos salieron a la luz nuevas alternativas terapéuticas mediante el

uso de fármacos, para dar un gran impulso en el ámbito farmacéutico en los tiempos

futuros. Debido a la gran composición químicas de diferentes especies vegetales se vio

necesario realizar análisis pre clínicos para conseguir alternativas medicinales o

encontrar toxicidad después de su ingestión en altas dosis.

Malva popular forma parte de la familia Malváceas. Poseen un color característico

azulado o lila en sus flores Y sus hojas son vellosas pecioladas y distantes entre sí.

Generalmente florecen en dos estaciones del año Tales como son primavera y verano.

Esta especie pueden llegar a medir hasta 1 m de altura, aunque es una planta

originaria de toda Europa, Norte de Asia y África hoy en día tiene distribución mundial.

Malva pseudolavatera o conocida como Malva blanca, es miembro de la clase

Equisetopsida, subclase Magnoliidae, superorden Rosanae, orden Malvales, familia

Malvaceae y género Malva. Es una hierba anual de tallos erectos de 0.8 – 2.0 m de

altura, un poco pubescente, con pelos estrellados o simples de base bulbosa.

En la composición de ambas aparecen mucílagos (15-20%) en las flores y en las

hojas, antocianósidos que dan color a las flores, vitaminas A, B1, B2, C y carotenos.

Posee también ácidos p-cumarínico, clorogénico y cafeico, flavonoides, taninos y

aceites esenciales derivados de la palma, grasas y esteres.

Esta especie es usada para tratar patologías comunes como malestares en el

estómago, escalofríos y enfermedades respiratorias; para esto se realizan infusiones

con las hojas encontradas en las plantas. En remedios tópicos se utiliza para el dolor de

dientes, forúnculos, abscesos y mastitis, lo cual sugiere que tendría una actividad

antibacteriana.

Hay muy poca información bibliográfica acerca de los beneficios e importancias de

las flores de esta planta y sobre la toxicidad que pueden generar sus componentes, sus

propiedades medicinales ejercen efecto en el tracto respiratorio, así como en el

2

sistema gastrointestinal siendo usado de forma oral, al ser usado de forma tópica

actúa de manera positiva cuando se trata de afecciones dermatológicas y oculares.

Debido a la diversidad de plantas medicinales existentes en el Ecuador que no han

sido estudiadas a profundidad hemos visto necesario realizar estudios de toxicidad a

los mucilagos de extractos de Malva pseudolavatera y Malva sylvestris las cuales son

usadas de forma terapéutica.

Se requiere tener precaución sobre el uso de la fitoterapia. Las plantas, debido a

que poseen muchos metabolitos puede constituir un perjuicio si no se conoce a que

dosis podría generar o aparecer signos tóxicos que pueden ir desde una producción de

diarrea hasta la muerte.

Esto se encuentra enmarcado en lo que se podría llamar por un lado seguridad y

por otro lado eficacia; ambos deben determinarse de forma preliminar en ensayos

preclínicos, para de esta forma garantizar el uso de las especies vegetales.

Esta información generada serviría como aporte puesto que aparte de establecer

signos tóxicos, también se puede llegar a evidenciar órganos dianas que sufren alguna

alteración a causa de diferentes dosis administradas.

3

CAPITULO I: PROBLEMA

I.1. Planteamiento y Formulación del Problema

Desde la antigüedad, el hombre ha dependido de las plantas para tratar diversas

enfermedades, por su gran desempeño en el ámbito medicinal. (1) Sin embargo, estas

deben ser empleadas racionalmente y ser valorados de acuerdo a la relación riesgo-

beneficio.

En la actualidad existe la tendencia a efectuar estudios botánicos, químicos y

farmacológicos de nuevas especies para el tratamiento de enfermedades, el presente

estudio está basado en la necesidad de estudiar estas plantas para evitar el efecto

toxico que podrían tener las mismas, al ser administradas en diferentes dosis.

¿Cuáles serán los signos de toxicidad que muestran los biomodelos usados en la

experimentación a los que se le ha tratado y dosificado con mucilagos obtenidos de

los extractos de Malva sylvestris y Malva pseudolavatera en diferentes dosis?

4

I.2. Justificación e Importancia

Malva sylvestris y M. pseudolavatera en la antigüedad y actualmente se emplean en

la medicina natural, sobre todo por su riqueza de sus mucilagos, un tipo de fibra

soluble con efecto demulcente.

Son popularmente usadas para combatir trastornos digestivos y estomacales como

la gastritis, úlcera gástrica, la diarrea o el estreñimiento.

A través del tiempo, el hombre ha dependido de las plantas para el tratamiento de

sus enfermedades, ya que desempeñan una importante función en la medicina.(1)

Sin embargo, estas deben ser empleadas racionalmente y ser valorados de acuerdo

a la relación riesgo-beneficio.(2)

Actualmente las intoxicaciones agudas son consideradas una problemática, sobre

todo por morbilidad y mortalidad del mundo.

Ciertas organizaciones afirman que la mayor parte de los habitantes hacen uso de

las plantas como medicamento natural, para la satisfacción en la atención primaria de

salud, en la mayor parte estos tratamientos implican el uso de extractos o de los

principios activos de las plantas.

En Ecuador el Centro de información y asesoramiento toxicológico registro 3.878

personas tratadas por intoxicación de las cuales el 3% fueron por ingerir infusiones de

distintos tipos de plantas.

Si bien cabe la posibilidad de que los mucílagos (componente principal de Malva

sylvestris y pseudolavatera) retrasen la absorción de otras drogas administradas, malva

contiene nitratos, que en ciertas condiciones se convierten en nitritos en el aparato

digestivo y que al combinarse con la hemoglobina forman metahemoglobina y se

bloquea el transporte de oxígeno a los tejidos. Contienen también el ácido

graso malválico, ácido ciclopropénico con actividad carcinogénica aumentando la

actividad de la aflatoxina B1 (micotoxinas).(3)

5

I.3. Hipótesis

Los animales de experimentación tratados con los extractos acuosos de mucilagos

obtenidos de las hojas de Malva pseudolavatera, a una dosis definida presentan igual

porcentaje de afectación en comparación con los que se le ha administrado el extracto

acuoso de mucilagos obtenidos de las hojas de Malva sylvestris.

I.4. Objetivos

I.4.1 Objetivo general:

• Estudiar la toxicidad aguda de los mucilagos obtenidos de extractos de Malva

pseudolavatera y Malva sylvestris.

I.4.2 Objetivos específicos:

• Determinar la dosis aguda a la que los mucilagos obtenidos de extractos de

Malva pseudolavatera y Malva sylvestris, presenten mortalidad o signos tóxicos

siguiendo las directrices de la guía de la Organización de Cooperación y Desarrollo

(OECD)

• Evaluar macroscópico y microscópicamente los órganos de cada grupo de

animales a los que se le ha administrado diferentes dosis, para la determinación del

grado de afectación a nivel celular.

6

I.5. Operacionalización de las Variables

I.5.1 Variables dependientes:

• Peso corporal de los animales (g)

• Consumo de balanceado (g)

• Consumo de agua (ml)

• Presencia de mortalidad

• Presencia de signos tóxicos

• Evaluación macroscópica de órganos de los animales

• Evaluación microscópica de órganos de los animales

I.5.2 Variables independientes:

• Dosis (mg/kg)

• Mucilagos (extractos de M. sylvestris y M. pseudolavatera)

Tabla I Operacionalización de Variables

TIPO DE

VARIABLE VARIABLE CONCEPTUALIZACIÓN INDICADOR

DEP

END

IEN

TE

DEP

END

IEN

TE

Peso corporal

El peso corporal es la fuerza que

genera la gravedad sobre el cuerpo. (1)

Generalmente a los 21 días de edad

mantienen un peso de aproximadamente

11 a 14 gramos(4)

gramos

Consumo

de balanceado

El acceso al alimento debe ser libre y

dosificado de acuerdo con los

requerimientos, así cuando los animales

gramos

7

se albergan en grupos, debe haber

suficientes puntos de alimentación para

minimizar la competencia por el alimento

y asegurar que todos los ratones tengan

acceso al alimento.(4)

Consumo

de agua

El agua debe ser potable y

suministrarse libremente durante toda la

vida del animal, puede ser en frascos

bebederos de vidrio o de policarbonato. El

agua debe ser acidificada, esterilizada

mediante autoclave o por método de

filtración(4)

ml

Presencia

Mortalidad

La mortalidad es un valor medible, y

puede hacerse en relación a cualquier ser

vivo, por ejemplo, mortalidad de peces,

de animales en peligro de extinción, de

animales domésticos etcétera, lo que se

efectúa en un período determinado de

tiempo, en general anual., para encontrar

a tasa de mortalidad. (2)

%

Presencia

de signos

tóxicos

La acción tóxica la ejercen mediante

modificaciones de las funciones del

organismo a nivel celular, bioquímico o

molecular que darán lugar a una

manifestación observable, efecto.(5)

P=Presencia

0= Ausencia

Evaluación

macroscópica

de órganos de

Se emplea en el terreno de la

biología para calificar a aquello que

puede observarse sin la necesidad de

utilizar un microscopio. Lo macroscópico,

Diámetro

Color

Volumen

8

II.

los animales por lo tanto, es detectable a simple vista,

a diferencia de lo microscópico. (6)

Aspecto

Evaluación

microscópica

de órganos de

los animales

Todo aquello que no se puede ver a

simple vista y que para poder verlo es

necesario aumentar la forma de verlo

mediante un microscopio. Según esta

definición un cuerpo es microscópico

cuando solo es posible verlo mediante un

microscopio. (6)

Órganos

afectados

IND

EPEN

DIE

NTE

EXTRACTOS

Sustancia muy concentrada que se

obtiene de una planta, semilla u otra cosa

por diversos procedimientos.(6)

Extracto

acuoso de

mucilagos

obtenidos de

Malva

pseudolavatera

y Malva

sylvestris

DOSIS

Es la concentración de una sustancia a

la cual el organismo está expuesto y en la

cual se ha de contabilizar la cantidad de

tóxico total por las diferentes vías de

entrada. (6)

mg/kg

https://www.areaciencias.com/El_Microscopio.htm

9

CAPITULO II: MARCO TEORICO

II.1. Antecedentes

Especies pertenecientes a la familia Malvaceae tales como Malva sylvestris y Malva

pseudolavatera son originaria de Europa, Asia y África. En medicina ancestral algunas

partes de estas plantas son utilizadas para curar diversas afecciones. Se ha considerado

que especialmente las hojas de estas dos especies poseen diversos beneficios,

ejerciendo actividad inflamatoria, antiulcerogenico, incluso anticancerígeno por su

gran fuente de flavonoides y mucilagos. (7)

En diversos estudios fitoquímicos realizados en M. pseudolavatera y M. sylvestris se

determinó la presencia de taninos, flavonoides y mucilagos, principios activos que les

dan distintas propiedades terapéuticas.(8)

Los estudios de Toxicidad aguda se encuentran dentro de los ensayos preclínicos

necesarios para evidenciar el potencial toxico de una sustancia que puede

determinarse mediante análisis cualitativos y cuantitativos de manifestación que

indiquen toxicidad durante las horas próximas a la administración de dosis única o

múltiple.(9)

En la actualidad no se han reportado investigaciones científicas que demuestren

niveles de toxicidad de mucilagos de M. sylvestris y M. pseudolavatera al ser usadas en

infusiones por sus propiedades medicinales.

10

Figura 1 Malva sylvestris

II.2. Marco teórico

II.2.1 Malva sylvestris

Malva sylvestris planta originaria de los países europeos, corresponde a la familia

de las malváceas, tiene el aspecto y la característica herbácea, también suele aparecer

a manera de una planta erguida o declinada. (10)

Es una planta utilizada comúnmente por sus diferentes beneficios entre ellos:

dolencias gástricas, enfermedades en la piel, trastornos respiratorios, molestias en el

periodo de menstruación en las mujeres, etc. (11)

FUENTE: Novara, 2012 (12)

Wu Y, Qiu A y otros autores citaron que los efectos farmacológicos son resaltados

en dos partes principales de dicha planta como son las hojas y sus flores, ya que son

fuentes de diferentes flavonoides y mucílagos.(11)

II.2.2 Descripción botánica

Malva sylvestris

REINO Plantae

SUBREINO Tracheobionta

11

DIVISION Magniolophyta

CLASE Equisetopsida

SUBCLASE Magnoliidae

SUPERORDEN Rosanae

ORDEN Malvales

FAMILIA Malvaceae

SUBFAMILIA Malvoideae

GENERO Malva

ESPECIE M. sylvestris

Tabla II Descripción Botánica de M. sylvestris

ELABORADO POR: (AUTORAS)

Gasparetto JC, cito que la planta Malva sylvestris tiene flores con medidas de 3 a 5

cm de ancho, con un epicáliz con 3 partes ovaladas y con puntas de lanza, el cáliz tiene

5 lóbulos con bellosidades triangulares y tiene los sépalos soldados entre sí, sus

petalos son mucho mas grandes que el caliz que los recubre, tiene varios estambres,

sencillas y fibrosas son sus hojas, su color es verde inclusive en el momento que están

secos, tienen peciolos grandes y redondos, poseen ápices esfericos de 7 a 15 cm de

diámetro.(7)

FUENTE: Gasparetto et al., 2012, p. 173 (7)


12

II.2.3 Uso medicinal

Los estudios realizados indican que la M. sylvestris es utilizada como purgante de

baja intensidad , tambien se la emplea como desintoxicante del hígado y combate la

agrura estomacal. (7)

También es muy utilizada en el ámbito culinario, con ella se suelen preparar

consomés, ensaladas y otros diferentes platos. (7)

En el ámbito farmacéutico puede ser utilizada para dolores abdominales,

congestión nasal y otras afecciones.(7)

II.2.4 Componentes principales

Castillo EF, afirma junto a análisis fitoquímicos que en diferentes tipos de extractos

de las hojas de M. sylvestris, presentan componentes químicos como: flavonoides,

esteroides, compuestos fenólicos, saponinas.

Los estudios también revelaron contiene mucilagos, vitamina C, betacarotenos,

tiamina, riboflavina, taninos y aceites esenciales. (13)

Figura 3 Componentes principales de la M. sylvestris

FUENTE: Castillo Saavedra, 2010 (13)

13

Se han encontrado altos contenidos de proteína arabinogalactan (AGP), los

componentes más abundantes fueron: galactosa (57.6 % mol), arabinosa (31.0% mol),

manosa (3.5% mol), ácido glucurónico (3.2% mol), glucosa (2.5% mol), xilosa (1.8

mol%) y ramnosa (0.4 mol%).(7)

II.2.5 Toxicidad de la Malva sylvestris

Fuente: De Sevilla, Ascensión, & Alcántara, 2018 (14)

M. sylvestris, por ser una planta silvestre y cosechada en el campo, debe ser

manejada con una serie de precauciones, ya que las hojas y las flores son utilizadas

para su consumo. Los peligros al momento de ser ingeridas es que podría estar

contaminada con compuestos químicos como los organofosforados, pesticidas,

organoclorados, fungicidas, insecticidas y hasta bacterias. (15)

A pesar de ser una planta que no se la considera toxica puede llegar a presentar

efectos secundarios y las hojas suelen contener elevado contenido de nitrato.(15)


14

II.2.6 Efectos secundarios de la Malva.

Se podrían manifestar efectos secundarios como: dolor de estómago o hinchazón,

estreñimiento, náuseas, diarrea. Esta planta tiene un alto contenido de fibra por lo que

es recomendable consumirla con uno o dos vasos de agua al día, para así evitar que

haya obstrucciones en el intestino. La fibra de la Malva suele hincharse dentro del

organismo aumentando su tamaño.(16)

II.3. Malva pseudolavatera

II.3.1 Descripción

“Florece en territorios costeros, cercano Oriente y Mediterráneo; introducida

también en Sudamérica (Ecuador). En la antigüedad se usaba como laxante, remedio

para la gripe, antitusivo e inflamatorio. En ciertas provincias de España las frutas

crudas, las hojas tiernas y tallos las consumen.”(17)

FUENTE: Oliveira, Bovini, Bortoluzzi, Boff, & Boff, 2019 (18)

“En Portugal, se usa como antiinflamatorio, analgésico, cicatrizante y laxante. la

decocción de M. pseudolavatera era usada para lavar las heridas de los animales. En

Figura 5 Malva pseudolavatera

15

humanos la decocción o infusión se utilizaba en enemas, lavados y como gotas para los

ojos. Las hojas se aplicaban frotándolas en picaduras de insectos.” (17)

En Ecuador crece en la región centro sur que abarca las provincias de Tungurahua y

Chimborazo a una altitud entre 2500-2700 metros sobre el nivel del mar (msnm).

II.3.2 Descripción botánica

Malva pseudolavatera suele confundirse con los otros tipos de malva por su aspecto

muy parecido, lo que la diferencia de las demás es que tiene el epicáliz más pequeño

que el cáliz. Tiene sépalos que se encuentran alrededor del fruto, está envuelta de

pelos duros, los pétalos de las flores son de color rosa con una base blanquecina (19).

Posee tallos que creen de 10 a 30 dm, tienen vellosidades y no es leñoso. El cáliz

suele ser de forma ovalada o redonda y las hojas pueden medir de 4 a 10 cm. Las flores

presentan pétalos de 1 a 1.6 cm el color de esta es una combinación entre blanco y

rosa y a su vez tienen venas de color oscuro (20).

Las partes más importantes de esta especie son los frutos, flores y las hojas,

especialmente en el ámbito farmacéutico y culinario.

Para obtener una excelente cosecha de estas flores es recomendable recolectarlas

previo a su florecimiento, en primavera. Se recomienda recolectar las hojas después

que las flores hayan brotado su esplendor. Las regiones donde se encuentran

fácilmente la Malva Pseudolavatera es en la costa y en la sierra, entre montículos de

tierra y los matorrales.(21,22)

II.3.3 Componentes activos

“Los mucílagos son abundantes, su flor comprende cianósidos. Sus hojas contienen

vitaminas: A, B1, B, y C; en las flores estas vitaminas se encuentran como una sustancia

colorante llamada malvina que se descompone en malvidina y glucosa.” (21,22)

16

II.3.4 Propiedades terapéuticas

Desde la antigüedad en el país de España, la Malva pseudolavatera se la ha utilizado

como laxante, preventivo de la tos, antiinflamatorio entre otros. En el caso de estar

expuesto a una picadura, se las frotaban en el lugar afectado la cual deshinchaba y

aliviaba el dolor.(17)

II.3.5 Mucílagos

Es un polisacárido heterogéneo el cual está formado por diferentes azucares y

principalmente por el ácido urónico. (23)

“Son estructuras poliméricas grandes, amorfas y traslúcidas, altamente ramificadas

construidas a partir de muchas unidades diferentes de azúcar (ramnosa, galactosa,

glucosa, fructosa, arabinosa, trehalosa, manosa, fucosa) y ácido urónico (glucurónico y

galacturónico), son altamente hidrófilos y forman geles en contacto con el agua.”(23)

Sevilla U y otros autores citaron, que uno de los principales componentes de la

Malva pseudolavatera son los mucílagos, los cuales son los responsables de los efectos

terapéuticos que tiene dicha planta, estos tienen la capacidad de absorber más de cien

veces su peso con el agua por lo tanto aumenta su volumen cuando entra en contacto

con esta. (14)

Los mucílagos podemos encontrar en diferentes partes de la planta y en cantidades

variadas, como en las hojas podemos encontrar de 6,0 a 7,2%, flores 3,8 a 7,3% y en las

raíces 7,5%.(7)

“Los mucílagos pueden ejercer su mecanismo de acción citoprotector de tres formas:

formando una cubierta protectora sobre las mucosas, restauración epitelial y

estabilización de las membranas plasmáticas y participación en la recuperación de

enzimas con restauración de la relación colesterol/fosfolípidos.”(23)

17

II.3.6 Funciones fisiológicas de los mucílagos en las plantas

a) Poseen gran capacidad de retención por lo que forman depósitos de agua

inhibiendo la desierta deshidratación formando una capa húmeda alrededor

de la semilla.

b) Almacenadores de energía al ser polisacáridos.

c) Evita el daño mecánico protegiendo a la planta con su resistencia.

d) Los mucílagos han sido usados para introducir diversos tipos de raíces en la

tierra.

e) Especies como la Drosera rotundifolia producen cebo para atrapar a sus

presas.(14)

En la industria farmacéutica y medicinal se destaca por su capacidad de formar

soluciones viscosas al entrar en contacto con el agua por su característica espesante y

estabilizante, debido a los grupos hidroxilos encontrados en su composición los cuales

se hidratan y forman puentes de hidrogeno.(14)

FUENTE: (AUTORAS)

Figura 6 Mucilagos de M. pseudolavatera y M. sylvestris.

18

II.3.7 Efecto Laxante

El uso de mucílagos es considerado importante para tratar problemas digestivos, Al

poseer acción higroscópica este absorbe demasiada agua provocando la hinchazón del

intestino y aumentando la cantidad de heces fecales, para posteriormente estimular

las paredes del intestino y finalmente entrar en contacto con las heces y el agua, lo

cual provocará ablandar el material fecal logrando la fácil expulsión a través de la

defecación.(24)

Los mucílagos, siendo considerados laxantes son los más usados para combatir el

estreñimiento, el cual impide desarrollar el proceso de digestión correctamente. Esta

sustancia debe ser ingerida con suficiente cantidad del agua por motivo de que tiende

a absorber demasiado líquido y podría resecar el contenido intestinal empeorando el

problema digestivo A largo plazo.(25)

II.3.8 Eliminación de toxinas

Gracias a su propiedad laxante, los mucílagos permiten la expulsión mediante

residuos fecales de distintas sustancias compuestas por toxinas acumuladas en el

tracto intestinal. Enfermedades como cáncer de colon o hemorroides suelen aparecer

cuando no existe una correcta digestión y eliminación de residuos o heces.(26)

“El consumo de estas fibras solubles ayuda a que estos residuos abandonen más

rápido el organismo, evitando así su acumulación. Además, al secuestrar estas

sustancias dentro de su estructura de gel, disminuye su exposición en el intestino y por

lo tanto reduce el riesgo de los daños que éstos podrían provocar.” (27)

El mucílago es una fibra soluble especialmente recomendada en casos de Colesterol

alto y Triglicéridos, gracias a su propiedad de absorber agua y formar un gel capaz de

retener nutrientes en el intestino. (28)

19

II.3.9 Extractos

Estos generalmente son obtenidos del vegetal desecado, suelen ser de consistencia

sólida, líquida o intermedia. Se clasifican por su consistencia y concentración del

principio activo los cuales son: extractos fluidos, secos, blandos y crioextractos.(29)

II.3.10 Dosis

Es aquella que determina la toxicidad, también, es la proporción de una sustancia

nociva que ha sido administrada y que produce una consecuencia toxica. Esta se

exhibe en unidades de mg/Kg de peso corporal.(30)

II.3.11 Respuesta a la dosis

La respuesta a la dosis encierra la llamada relación dosis-respuesta. En este caso no

importa cuál sea la respuesta obtenida para la medición, el vínculo entre el nivel de

respuesta de un sistema biológico y el número de sustancia tóxica administrada, acoge

una apariencia invariable, posicionándolo como concepto principal e importante para

el estudio de la toxicología. (30)

Giannuzzi L. citó, que existen dos tipos de relaciones entre dosis y la respuesta,

primero es la dosis y el efecto en donde este proporciona la respuesta de un mismo y

único organismo a diferentes dosis de la sustancia química, lo cual significa que a

mayor intervalo de dosis el efecto será proporcional, segundo está la dosis y la

respuesta en donde representa la presencia de varias respuestas a dosis

diferentes.(30)

II.3.12 Toxicología

Esta ciencia esta direccionada a estudiar especialmente a los mecanismos de acción

de los agentes tóxicos, elaboración e interpretación de las pruebas que determinan la

toxicidad de los agentes.(31)

Así mismo intervienen en esta descripción la valoración cuantitativa de la exactitud

y continuidad de estos efectos correspondientes con la exhibición de los órganos vivos.

20

Incluso estudia los procedimientos para manifestar, reconocer y estimar su nivel de

toxicidad. (30)

Giannuzzi L citó, que la toxicologia investiga la correlación en medio de un elemento

químico y métodos biológicos para asi porder definir la cantidad de deterioro eventual

que genera las consecuencias desfavorable al inviduo (30)

Así mismo, es la ciencia que estudia la naturaleza, sustancias químicas y agentes

físicos, sus mecanismos de acción, los cuales tienen incidencia en sus efectos adversos,

siendo así posible la presencia de enfermedades en los individuos; se encarga de

estudiarlos, identificarlos y solucionarlos de acuerdo a su nivel tóxico.(30)

II.3.13 Estudios de toxicidad preclínicos

Mediante estudios clínicos no se han reportado resultados fiables, que afirmen

acción farmacológica de una planta, por ellos es necesario realizar un análisis

preclínico para esclarecer propiedades toxicológicas, farmacodinámicas y

farmacocinéticas de la sustancia en estudio. (32)

II.3.14 Toxicología experimental

La Toxicología experimental esta direccionada a identificar el nivel y a qué tipo de

toxicidad está expuesto ya sea aguda, crónica o generen daños al cerebro y al sistema

nervioso central, etc. (33)

En el ámbito científico es indispensable tener conocimiento acerca de los diferentes

métodos abreviados que facilitan la determinación de toxicidad aguda y conllevan a

conocer mucho más esta ciencia, los cuales fueron designados para cumplir con las 3

¨R¨ (reducción, refinamiento y reemplazo). La finalidad de este principio es disminuir el

uso y evitar la mortalidad de los biomodelos con fines científicos, determinando la

toxicidad mediante signos y síntomas manifestados visualmente.(34)

21

TIPOS DE DATOS EN TOXICOLOGIA

DATOS CUÁNTICOS Mortalidad

Incidencia de signos fármaco-

tóxicos

DATOS GRADUADOS Peso corporal

Consumo de alimento

Tabla III: Tipos de datos en toxicología

Elaborado por: (AUTORAS)

II.3.15 Ensayos de toxicidad aguda

La toxicidad aguda es la dosis única en mayor concentración donde su última fase es

el sacrificio del biomodelo dándose por terminada la experimentación, lo cual se

efectúa mediante el método de dosis letal 50 (DL50) teniendo como consecuencia el

50% de mortalidad de los biomodelos en la fase final de experimentación. Luego, se les

administra el extracto o sustancia a investigar, procediendo a observar

minuciosamente durante máximo 14 días. Culminado el tiempo máximo los

biomodelos pasaran por el proceso de ser sacrificados junto a la autopsia.(35)

II.3.16 Clasificación de toxicidad aguda según la DL50

SUSTANCIAS SEGÚN LA DL50 VÍA ORAL

I Muy tóxica DL50 < 25mg/kg

II Toxica DL50 < 250mg/kg

III Nociva DL50 < 2000mg/kg

IV Sin toxicidad aguda DL50 > 5000mg/kg

Tabla IV: Clasificación de toxicidad aguda según la DL50 FUENTE: María & Navarro, 2018 (36)

22

II.3.17 Fase rápida sin determinación de DL50

“Se determinan acorde a su peso, tipo de biomodelo de experimentación y

sustancia de prueba en rangos de 5-50mg/Kg; 50-500mg/Kg sin exceder los 2g/Kg en

dosis única a administrar.”(35)

II.3.18 Efecto tóxico

Este efecto es causado por una o más sustancias químicas nocivas en el cuerpo,

personas o ciudades enteras que se presenta mediante alteraciones físicas y

biológicas. El nivel del efecto toxico es evaluado en razón a su magnitud y rigidez,

enlazada a la dosis en que se haya administrado la sustancia química nociva.(30)

Cualquier turbación de las funciones naturales del organismo de un ser humano que

ha sido expuesto a toxinas es considerado como efecto tóxico, Giannuzzi L afirma que

“Sólo se consideran como desviaciones significativas los cambios irreversibles o los

cambios que permanecen por un período prolongado después de que la exposición ha

cesado.”(30)

II.3.19 Efectos adversos

También llamado efecto secundario, se presenta de manera inesperada durante un

tratamiento, producen cambios estructurales de células o tejidos los cuales son

característicos de una enfermedad, stress o en contacto con factores ambientales,

durante el desarrollo de un organismo. Consecuentemente, disminuye la capacidad de

resistir o llevar una vida con normal funcionamiento.(30)

II.4. Directrices para la valoración de toxicidad

La toxicidad de cualquier sustancia debe ser valorada mediante directrices como:

• Directrices de OCDE (Organization for Economic Cooperation and Development)

23

II.4.1 Método de dosis fija (OCDE 420)

El método de dosis fija es considerado alterno a la prueba clásica aguda encontrado

en la OECD N°420, basado en la agrupación de 5 biomodelos por sexo usados en la

valoración de dosis previamente determinadas (5, 50, 300, 2000mg/Kg). Si en la

primera dosificación existe presencia de mortalidad se dará lugar a la siguiente dosis,

la cual será considerada como toxicidad evidente. El sistema global armonizado

permite clasificar una sustancia tóxica con la condición de que esta no sea mortal ni

lacerante.(37)

II.4.2 Método arriba y abajo (UDP). Guía OECD 425

“El método OECD 425 permite la estimación de una DL50 con un intervalo de

confianza, y los resultados permiten clasificar a la sustancia química dentro del Sistema

Globalmente Armonizado en productos químicos que causan toxicidad aguda.”(38)

Al realizar los estudios respectivos es importante resaltar gran cantidad de datos de

la sustancia sometida a investigaciones, y teniendo una base sólida de un sin número

de investigaciones In Vivo o In Vitro, estudios toxicológicos, la importancia de los

estudios es salvaguardar a la población y todo su alrededor.(39)

II.5. Requisitos y características relacionados al uso de animales

experimentales

II.5.1 Ética y uso de animales

Este valor es importante para todos, pero más significativo para las personas que se

encuentran dentro del área de análisis con el uso de ratas y ratones. Existen ciertos

valores que debe cumplir un investigador tales, como la importancia de la vida y la

empatía por biomodelos que usan para sus trabajos, además se espera seguir

buscando otras maneras de investigar y poder hacer uso de los biomodelos.(40)

24

El uso de animales en experimentación es ético cuando no hay otra alternativa y su

propósito está vinculado con la obtención de un bien mayor.(41)

II.5.2 Infraestructura para la experimentación con animales

El bioterio no solo debe cubrir las necesidades de los animales, sino también del

personal que trabaja en él. Para ello, su infraestructura incluye diferentes áreas que se

engloban en dos zonas: zona sucia (área administrativa, vestuario, almacenaje,

eliminación de desechos e incineración) y zona limpia (área de recepción de animales,

cuarentena, salas de alojamiento y crianza, laboratorios, quirófano y áreas de limpieza

y esterilización).(41)

II.5.3 Microambiente

Este es el área física donde el animal tendrá un espacio que sea suficiente para

movilizarse con facilidad, está compuesto por alimento, agua, jaula y cama, es

importante asegurar el estado de higiene y protección de plagas.(42)

II.5.4 Macroambiente

Esta zona consiste en factores muy importantes para el biomodelo los cuales son la

temperatura, luz, y ventilación los mismos que deben ser controlados constantemente

ya que si existe alguna alteración podría ocasionar cambios en los biomodelos,

también puede producirse cambios en los resultados y hasta en el tipo de

respuestas.(43)

II.5.5 Tipo de luz y grado de iluminación

“El entorno de desarrollo para animales de experimentación debe constar de

lámparas fluorescente que simule la luz del día; de modo que cada jaula independiente

a su ubicación reciba la misma cantidad de alumbrado, sin provocar alteraciones

25

clínicas. Se sugieren 12 horas luz y 12 horas de oscuridad, utilizando reloj

temporizador.” (42,43)

II.5.6 Las 3 R de la experimentación

“Russel y Burch describieron el principio de las tres R de la experimentación

humanizada para con los animales, como cualquier técnica que remplace, reduzca y

refine.”(44)

Los tres términos importantes para mejorar la eficacia de los trabajos investigativos

con los biomodelos.

• Reemplazo: A lo largo del tiempo se ha buscado disminuir el uso de

animales de experimentación o al menos reemplazarlos con animales menos

propensos al sufrimiento. Se ha evaluado otras posibles metodologías que no incluyan

la investigación In vivo, al contrario, liberen al animal de todo contacto con

laboratorios experimentales. La tecnología y las matemáticas podrían ser eficaces para

desarrollar este tipo de estudios. (45)

• Reducción: disminuir el uso excesivo de animales con fines

investigativos.(40)

• Refinamiento: evitar someter a los animales de experimentación a

situaciones doloras o stress, para garantizar mejores resultados y menor

sufrimiento.(40)

II.5.7 Histopatología

Corresponde a un análisis profundo realizado en órganos extraídos durante la

disección, para este análisis es necesario el uso de métodos establecidos clínicamente,

y utilizando los utensilios quirúrgicos apropiados.(46)

Es la ciencia que estudia los antecedentes y la morfología celular de un órgano o

tejidos alterados por sustancias conocidas o desconocidas, se encarga de analizar los

cambios físicos no visibles al ojo humano.(46)

26

Luego de haberse realizado el estudio macroscópico por el analista se procede con

el microscópico el cual se lleva a cabo por un profesional Patólogo. El fin de este

estudio es afirmar, plantear o contribuir a lo observado macroscópicamente,

brindando apoyo científico a la investigación.(47)

Existen situaciones en que nivel macroscópico es imposible declarar razón de

mortalidad o de afectación a nivel de tejidos u órganos, por esto su importancia.

También aporta importantes detalles que permiten dar explicación a distintos daños

que pueden producir la muerte.(47)

27

III. CAPITULO III: MATERIALES Y METODOS

III.1. Tipo de investigación

III.1.1 Método científico

El método empleado en este estudio es una investigación experimental y

observacional para el estudio de la toxicidad aguda de mucilagos obtenidos de

extractos de Malva pseudolavatera y Malva sylvestris en animales de laboratorio. El

estudio de toxicidad aguda se realizó conforme a lo detallado en según la guía 420 de

la OECD, que describe el método de clases toxicas agudas.

• Criterios de inclusión: Ratones hembras de 20-25g, biológicamente sanos.

III.1.2 Métodos teóricos

Se empleó el método Hipotético-Deductivo, el trabajo plantea una hipótesis de

investigación, que mediante los resultados obtenidos poder establecer que si la

respuesta anticipada es aceptada o rechazada.

III.1.3 Método estadístico

Durante el desarrollo de la investigación se han obtenido diversos datos, los cuales

se analizaron estadísticamente para obtener promedio, desviación estándar, y con la

aplicación de Análisis de Varianza (ANOVA), realizando una comparación de medias; se

pudo definir si presentan diferencias significativas entre los grupos de biomodelos

sometidos al estudio.

28

III.2. Equipos, Aparatos, Materiales y Reactivos

III.2.1 Equipos

Estereoscopio

Sorbona

Balanza

Balanza analítica

III.2.2 Aparatos

• Equipo de disección

• Mesa de disección

• Sonda intragástrica

Marca 6ZEISS

Modelo StemiDV4

Marca REMADEL

Modelo JG-120

Marca Shimadzu

Serie UW8200S

Marca Shimadzu

Serie AUX220

29

III.2.3 Materiales

• Vasos de precipitación

• Probeta

• Pipeta

• Envases de plástico esterilizado

• Jaulas plásticas

• Malla metálica

• Bebederos

• Matraz Aforado 1000ml

III.2.4 Reactivos

• Agua destilada

• Cloroformo al 10%

• Cloruro de Sodio al 0,9%

III.3. Muestra

Precipitados obtenidos a partir de los extractos acuosos de Malva pseudolavatera y

Malva sylvestris.

III.4. Metodología experimental

III.4.1 Animales de experimentación

En este estudio de toxicidad aguda oral se emplearon 45 ratones hembras, con un

peso promedio de 25± 2 gramos al momento del experimento y con tres semanas de

edad. Los biomodelos fueron adquiridos de laboratorios del Instituto de Nacional de

Investigación en Salud Pública (INSPI) y trasladados al bioterio de la facultad de

Ciencias Químicas.

30

III.4.2 Condiciones experimentales

los animales de experimentación fueron sometidos a condiciones de climatización

por 7 días. El proceso de climatización incluyó humedad de 30-70% temperatura: 23 a

25°C y un fotoperiodo de 12h luz y 12h oscuridad.

III.4.3 Recolección de las especies de Malva.

Las hojas son las partes de ambas especies usadas para este estudio, siendo estas

recolectadas en la ciudad de Riobamba provincia de Cotopaxi – Ecuador. Las hojas

seleccionadas no presentaron presencia de hongos.

III.4.4 Obtención de mucilagos obtenidos de extractos de Malva

pseudolavatera y Malva sylvestris

La obtención del extracto fue realizada a partir del material seco pulverizado y

previamente tamizado, correspondiente a los dos tipos de Malva.

Se pesaron 20 g de cada Malva por separado, humectándolas se agregó 200ml de

agua destilada, se procedió a calentar hasta ebullición. Posteriormente, se filtró y la

solución, se rotulo y se almaceno durante 24 horas. Se obtuvo el precipitado, se los

seco en la estufa durante 24 horas a 30°C. El producto final se trituro, peso y se

almaceno para su posterior dosificación.

III.4.5 Conformación de grupos

• Se conformaron ocho grupos de trabajo y un grupo de control, de los cuales se

registró el peso inicial y fueron repartidos en cinco animales por jaula identificadas

según el tratamiento administrado.

Tales como:

• Grupo 1: Solución del extracto de mucilagos de Malva pseudolavatera en una

concentración de 2000 mg/kg

31


concentración de 300 mg/kg.





• Grupo 5: Solución del extracto de mucilagos de Malva sylvestris a en una

concentración de 2000 mg/kg

• Grupo 6: Solución del extracto de mucilagos de Malva sylvestris en una






• Grupo control: agua destilada.

Previo al inicio de la experimentación se les retiro la comida y el agua,

manteniéndolos en sus jaulas.

III.4.6 Administración de extractos

La vía de administración utilizada fue la oral, utilizando para ello una sonda buco-

esofágica adaptada a una jeringa. La administración del extracto se fue 0.5 ml por

animal, correspondiendo dicho volumen de acuerdo al peso corporal.

III.4.7 Periodo de observación

Permanecieron en observación continua durante cuatro horas, donde se procedió a

registrar la presencia de síntomas clínicos y tóxicos para la evaluación de la toxicidad

aguda. Posteriormente de realizo observación diaria por 14 días.

32

III.4.8 Pienzo y agua

Durante la investigación se les raciono la comida (75g) y agua (300ml) y se les tomo

el volumen y peso de consumo diario.

III.4.9 Registro de peso

En el día séptimo se procedió a pesar a los animales para determinar variaciones de

peso corporal durante los días que duro el ensayo.

III.4.10 Necropsia

Finalmente, fueron sacrificados siguiendo los principios éticos de las tres Rs, se

realizó la gastrectomía mediante incisión abdominal para la extracción de hígado,

estómago y riñones.

III.4.11 Análisis macroscópico de la mucosa gástrica

Fueron observados en un estereoscopio marca ZEISS modelo Stemi DV4. Culminada

la observación se fijaron los órganos de los grupos en solución de formol al 10 % para

su conservación y posterior análisis histopatológico.

33

III.5. Diagrama de método

A continuación, se detalla el flujograma que corresponde a la determinación de la

dosis toxica aguda de los extractos de las especies vegetales objeto de esta

investigación.

Diagrama I. Diagrama de Métodos

Adquisición de los animales de

experimentación

Administración de extractos de Malva sylvestris

y Malva pseudolavatera.

Registro de pesos corporal inicial.

Preparación de las muestras a administrar a cada grupo.

Formación de grupos de biomodelos a ensayar.

Periodo de climatización

Observación diaria de presencia de signos tóxicos.

Fijación en formol para Estudios Histopatológicos.

Observación macroscópica y microscópica de los órganos

extraídos de cada grupo.

Pesos de los animales (7 y 14 días postratamiento).

Registro de consumo de pienso y agua de los diferentes grupos.

Análisis e interpretación de resultados

Conclusiones y recomendaciones

Diagrama 1 Diagrama del método ELABORADO POR (AUTORAS)

34

III.6. Estudios histopatológicos

Para conservar la calidad de los primeros alcoholes, los tejidos deben permanecer

en alcohol al 60% o 70% hasta que estén listos para ser procesados. Si esto se hace

rutinariamente, los primeros alcoholes (80-95%) van a permanecer más claros y el

porcentaje de los alcoholes va a ser más constante. No hay ventaja alguna en formar

atajos durante el procesamiento. Los resultados pueden ser especímenes pobres e

incompletamente deshidratados, aclarados e infiltrados.

El método utilizado fue de Hematoxilina y Eosina de Mayer.

Fijación. - Formalina neutra al 10%, estabilizada, fijadores de Bouin o de Zenker.

Secciones. Parafina, de 3 a 8 micrones.

Soluciones:

Hematoxilina de Mayer

Solución de Eosina- Floxina.

Procedimiento.

1. Desparafinice las láminas e hidrátelas hasta llegar al agua ¨Dezenkerice¨ si es

necesario antes de teñir.

2. Tiña en solución de Hematoxilina de Mayer por 15 minutos.

3. Lave en agua corriente apenas tibia por 15 minutos.

4. Coloque agua destilada.

5. Coloque en Etanol al 80% de 1 a 2 minutos.

6. Contraste en solución de Eosina-Floxina por 2 minutos. 7. Deshidrate y aclare a

través de 2 cambios cada uno de 95% Etanol absoluto y Xileno, 2 minutos cada uno. 8.

Montar con medio resinoso.

35

IV. CAPÍTULO IV RESULTADOS Y DISCUSIONES

IV.1. PESOS CORPORALES DE LOS BIOMODELOS

Al registrar los pesos iniciales y al ser analizados por un análisis de varianzas

(ANOVA) se comprobó que no presentaban diferencias significativas entre los grupos.

Elaborado por (AUTORAS)

En relación a los datos proporcionados en la primera toma de pesos corporales de

los grupos que serán tratados con mucílagos obtenidos de las hojas de M.

pseudolavatera, tenemos que el Grupo control presentó peso promedio de: (27,8 ±

1,7), Grupo 1 (29,4 ± 2,3), Grupo 2 (28,1 ± 2,9), Grupo 3 (29 ± 0,9), Grupo 4 (28,5 ± 3,1)

27,8

29,44

28,14

29

28,48

26

26,5

27

27,5

28

28,5

29

29,5

30

GRUPOCONTROL

GRUPO 1 GRUPO 2 GRUPO 3 GRUPO 4

PES

OS

PR

OM

EDIO

(G

)

GRUPOS TRATADOS

Gráfico I Peso promedio inicial de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de Malva pseudolavatera en el estudio de toxicidad aguda oral

36

Gráfico II Peso promedio inicial de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de

las hojas de Malva sylvestris en el estudio de toxicidad aguda oral ELABORADOR POR (AUTORAS)

En el gráfico II se observa los promedios de la Primera toma de pesos corporales de

los grupos que se serán tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de M. sylvestris,

tenemos en Grupo control (27,8 ± 1,7), Grupo 5 (26,9 ± 1,1), Grupo 6 (29,1 ± 1,5),

Grupo 7 (27,4 ± 2,2), Grupo 8 (29,0 ± 1,9).

27,8

26,88

29,1

27,44

29,04

24,5

25

25,5

26

26,5

27

27,5

28

28,5

29

29,5

30

GRUPOCONTROL


PES

OS

CO

RP

OR

ALE

S

GRUPOS

37

IV.2. SEMANA INTERMEDIA POST ADMINISTRACIÓN

Después de los siete días de administración de los mucílagos obtenidos de las hojas

de M. pseudolavatera; se realizó la toma de peso de los animales, y no evidenció una

variación significativa de peso entre los grupos.

Se puede observar en los datos expuestos que el Grupo control presento un peso

promedio de (28,6 ± 2,5), Grupo 1 (29,9 ± 1,5), Grupo 2 (30,0 ± 4,0), Grupo 3 (29,3 ±

1,2), Grupo 4 (28,8 ± 2,1).

Gráfico III Peso promedio a los siete días de experimentación de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de Malva pseudolavatera en el estudio de toxicidad aguda oral.

ELABORADO POR (AUTORAS)

Gráfico IV Peso promedio a los siete días de experimentación de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de Malva sylvestris en el estudio de toxicidad aguda oral.


28,6

29,9 30,0

29,3

28,8

27,0

27,5

28,0

28,5

29,0

29,5

30,0

30,5

GRUPOCONTROL


PES

OS

CO

RP

OR

ALE

S (G

)

GRUPOS

28,6

27,1

29,3

27,4

29,1

25,0

26,0

27,0

28,0

29,0

30,0

31,0

GRUPOCONTROL


PES

OS

CO

RP

OR

ALE

S (G

)

GRUPOS

38

En el gráfico IV indica que el grupo control tiene un peso promedio de (28,6± 2,5),

grupo 5 (27,1 ± 1), grupo 6 (29,3 ± 0,90), grupo 7 (27,4 ± 1,6), grupo 8 (29,1 ± 1,2).

No evidenció una variación significativa de peso entre los grupos.

En la Tabla V se observa en los datos expuestos que a la dosis de 300 mg/Kg (grupo 2)

del extracto de M. pseudolavatera los animales presentaron mayor porcentaje de

ganancia de peso (7%) en los siete primeros días de post administración, a diferencia

de la M. sylvestris que no mostro ganancia significativa de peso en las diferentes dosis.

Grupos Peso promedio inicial (g)

Peso al séptimo día (g)

Diferencia de peso (g)

Porcentaje de ganancia

G. control 27,8 28,6 0,8 3%

1 29,4 29,9 0,5 2%

2 28,1 30,0 1,9 7%

3 29,0 29,3 0,3 1%

4 28,5 28,8 0,3 1%

5 26,9 27,1 0,2 1%

6 29,1 29,3 0,2 1%

7 27,4 27,4 0,0 0%

8 29,0 29,1 0,1 0%

Tabla V Comparación de la ganancia de peso corporal durante los siete primeros días de la experimentación con M. pseudolavatera y M. sylvestris


39

IV.3. SEMANA FINAL POST ADMINISTRACIÓN

En la segunda semana de observación se tomaron nuevamente los pesos de los

biomodelos para comprobar si existe una variación al ser tratados con los mucilagos

extraídos de las hojas de Malva pseudolavatera y Malva sylvestris, no hay registros de

referencia bibliográfica, mediante la experimentación se comprobó que los grupos

tratados no presentaron diferencias estadísticas entre grupos.

A los catorce días el grupo control obtuvo un peso promedio de (29,5 ± 2,7), grupo 1

(30,9 ± 2,2), grupo 2 (31,2 ± 3,9), grupo 3 (30,8 ± 1,1), grupo 4 (29,8 ± 4,2).

Gráfico V Peso promedio a los catorce días de los grupos tratados con el extracto de mucilagos M. pseudolavatera en el

estudio de la toxicidad aguda oral. Elaborado por (Autoras)

29,5

30,9

31,22

30,82

29,78

27,5

28

28,5

29

29,5

30

30,5

31

31,5

32

GRUPOCONTROL


PES

OS

CO

RP

OR

ALE

S

GRUPOS

40

Transcurrido los catorce días de tratamiento el grupo control presento un peso

promedio de (29,5 ± 2,7), grupo 5 (27,5 ± 1,6), grupo 6 (29,2 ± 2,5), grupo 7 (28,2 ±1,9),

grupo 8 (28,9± 2,0).

En la Tabla VI podemos observar la diferencia de peso del día siete hasta el día

catorce, en el cual se muestra el porcentaje de peso ganado. A la dosis de 2000 mg/Kg

(Grupo 1) de M. pseudolavatera hay un incremento de 6% de peso, a diferencia del

grupo 5 que a la dosis de 2000 mg/Kg de M. sylvestris solo obtuvo un 3% de ganancia

de peso.

Transcurridos los catorce días de la experimentación se observa que el grupo con

mayor ganancia de peso fue el grupo 2 al que se le administró 300 mg/Kg de M.

pseudolavatera con un 11% de porcentaje de ganancia total, seguido del grupo 1 al

cual se le administró 2000 mg/Kg de M. pseudolavatera con un incremento total de 8

%, así mismo el (Grupo 8) que tuvo un mínimo (1%) de ganancia de peso total fue al

que se le administró 5 mg/Kg de M. sylvestris.

Gráfico VI Peso promedio a los catorce días de los grupos tratados con el extracto de mucilagos M. sylvestris en el estudio de la toxicidad aguda

oral. Elaborado por (Autoras)

29,5

27,5

29,2

28,2

28,9

25,5

26,0

26,5

27,0

27,5

28,0

28,5

29,0

29,5

30,0

30,5

GRUPOCONTROL


PES

OS

CO

RP

OR

ALE

S

GRUPOS

41

Tabla VI Comparación de la ganancia de peso corporal del día siete al día catorce de experimentación


IV.4. CONSUMO DE PIENZO Y AGUA DURANTE LOS DIAS DE

EXPERIMENTACIÓN

IV.4.1 AGUA

Consumo de agua (ml) durante la primera semana de observación de los grupos

tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de M. pseudolavatera y sylvestris en el

estudio de la toxicidad aguda oral.

Grupos Peso promedio al séptimo día (g)

Peso a los catorce días (g)

Diferencia de peso (g)



total

G. control 28,6 29,5 0,9 3% 6%

1 29,1 30,9 1,8 6% 8%

2 30,0 31,2 1,2 4% 11%

3 29,3 30,8 1,5 5% 6%

4 29,4 29,8 0,4 1% 2%

5 26,6 27,5 0,9 3% 4%

6 28,2 29,2 1,1 4% 4%

7 27,4 28,2 0,8 3% 3%

8 28,7 28,9 0,2 1% 1%

33,0 31,637,4

33,3 34,3

0,0

10,0

20,0

30,0

40,0

50,0

GRUPOCONTROL


PR

OM

EDIO

GRUPOS

Gráfico VII Consumo de agua (ml) durante los primeros siete días de la experimentación de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de Malva pseudolavatera en el estudio de Toxicidad Aguda

Oral. ELABORADO POR (AUTORAS)

42

Gráfico VIII Consumo de agua (ml) durante los primeros siete días de la experimentación de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de

Malva sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. ELABORADO POR (AUTORAS)

Durante los siete primeros días, bajo la administración de mucilagos de las hojas de

M. pseudolavatera el consumo de agua del grupo control tuvo un promedio de (33 ±

3,5), el grupo 1 (31,6 ± 5,0), el grupo 2 (37,4 ± 3,7), el grupo 3 (33,3 ± 3,1), el grupo 4

(34,3 ± 5,7); y de la M. sylvestris el grupo 5 (31,71 ± 4,1), el grupo 6 (29 ± 7,3), el grupo

7 (31,1 ± 7,0), el grupo 8 (29,4 ± 6,3).

Mediante la experimentación se comprobó que los grupos tratados no presentaron

diferencias estadísticas entre grupos.

33,0

31,7

29,0

31,1

29,4

25,0

26,0

27,0

28,0

29,0

30,0

31,0

32,0

33,0

34,0

35,0

GRUPOCONTROL


PR

OM

EDIO

GRUPOS

43

Consumo de agua (ml) durante la segunda semana de observación de los grupos

tratados con los mucilagos obtenidos de las hojas de M. pseudolavatera y sylvestris en

el estudio de la toxicidad aguda oral.

Gráfico IX Consumo de agua (ml) durante los últimos siete días de la experimentación de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las hojas de Malva pseudolavatera en el estudio de Toxicidad Aguda Oral.


32,9

37,0

32,6 32,6 32,7

28,029,030,031,032,033,034,035,036,037,038,039,0

GRUPOCONTROL


PR

OM

EDIO

S

GRUPOS

32,9

35,3

34,133,6

36,6

29,0

30,0

31,0

32,0

33,0

34,0

35,0

36,0

37,0

38,0

GRUPOCONTROL


PR

OM

EDIO

S

GRUPOS

Gráfico X Consumo de agua (ml) durante los últimos siete días de la experimentación de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de las hojas

de Malva sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. ELABORADO POR (AUTORAS)

44

En los gráficos IX y X se observa los promedios de consumo de agua (ml) de la última

semana de administración de los mucílagos obtenidos de los dos tipo de Malva; el

grupo control (32,9 ± 5,9), el grupo 1 (35,3 ± 3,9), el grupo 2 (34,1 ± 5,7), el grupo 3

(33,6 ± 5), el grupo 4 (36,6 ± 4,1), el grupo 5 (37 ± 4,5), el grupo 6 (32,6 ± 5,8), el grupo

7 (32,6 ± 5,3), el grupo 8 (32,7 ± 5).

Mediante la experimentación se comprobó que los grupos tratados no presentaron

diferencias estadísticas entre grupos en el consumo de agua.

IV.4.2 Pienzo

Consumo de pienzo (g) durante la primera semana de observación de los grupos

tratados con mucilagos obtenidos de extractos M. pseudolavatera y sylvestris en el


23,2

24,725,1

24,1

25,7

21,0

22,0

23,0

24,0

25,0

26,0

27,0

GRUPOCONTROL


PR

OM

EDIO

GRUPOS

Gráfico XI Consumo de pienzo (g) durante los siete primeros días de la experimentación de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de extractos de las

hojas de Malva pseudolavatera en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. ELABORADO POR (AUTORAS)

45

En relación a los datos proporcionados en los gráficos XI y XII, indican que, en la

primera semana de experimentación tenemos que el grupo control presentó una

ingesta de pienzo de (23,2 ± 1,9), grupo 1 (24,7 ± 1,7), grupo 2 (25,1 ± 2), grupo 3 (24,1

± 1,8), grupo 4 (25,7 ± 1,9); grupo 5 (23,2 ± 1,9), grupo 6 (24,8 ± 1,8), grupo 7 (23,5 ±

1,8), grupo 8 (24,1 ± 1,8).

En el proceso se comprobó que los grupos tratados no presentaron diferencias

estadísticas entre grupos, lo que indica no hay una alteración en la ingesta del

balanceado.

23,2 23,2

24,8

23,5

24,1

21,5

22,0

22,5

23,0

23,5

24,0

24,5

25,0

25,5

GRUPOCONTROL


PR

OM

EDIO

GRUPOS

Gráfico XII Consumo de pienzo (g) durante los siete primeros días de la experimentación de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de

extractos de las hojas de Malva sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral.


46

Consumo de pienzo (g) durante la segunda semana de observación de los grupos

tratados con mucilagos obtenidos de extractos M. pseudolavatera y sylvestris en el


23,70

25,01

25,7025,07

26,23

21,00

22,00

23,00

24,00

25,00

26,00

27,00

GRUPOCONTROL


PR

OM

EDIO

S

GRUPOS

Gráfico XIII Consumo de pienzo (g) durante los siete últimos días de la experimentación de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de extractos de las

hojas de Malva pseudolavatera en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. ELABORADO POR (AUTORAS)

Gráfico XIV Consumo de pienzo (g) durante los siete últimos días de la experimentación de los grupos tratados con mucilagos obtenidos de extractos de las

hojas de Malva sylvestris en el estudio de Toxicidad Aguda Oral. ELABORADO POR (AUTORAS)

23,7

25,1

23,924,1

23,6

22,0

22,5

23,0

23,5

24,0

24,5

25,0

25,5

GRUPOCONTROL


PR

OM

EDIO

S

GRUPOS

47

En los gráficos XIII y XIV indicaron que, los datos el grupo control presentó una ingesta

de pienzo de (23,7 ± 1,6), grupo 1 (25,0 ± 1,7), grupo 2 (25,7 ± 1,9), grupo 3 (25,1 ±

1,6), grupo 4 (26,2 ± 1,7), grupo 5 (25,01 ± 2), grupo 6 (23,9 ± 1,9), grupo 7 (24,1 ± 1,6),

grupo 8 (23,6 ± 1,5).

Al realizar el análisis no presentaron diferencias estadísticas entre grupos; lo que indica

que no hay una alteración en la ingesta del balanceado.

48

IV.5. Signos tóxicos observados durante el tiempo de evaluación

IV.5.1 Signos clínicos observados durante el tratamiento con mucilagos obtenidos de las hojas de Malva pseudolavatera.

GRUPO CONTROL 4H DIAS

1 2 3 4 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Dificultad respiratoria 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Heces blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Incoordinación motora 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

0= Ausencia P= Presencia

Tabla VII Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva pseudolavatera Grupo control.


Durante el tiempo de observación de los animales de experimentación el Grupo Control, no presentaron signos tóxicos.

49

GRUPO 1 M. pseudolavatera

Conc. 2000 mg/kg

4H DIAS

1 2 3 4 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Dificultad respiratoria 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Heces blandas P P 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Incoordinación motora 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Acicalamiento P 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Tabla VIII Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva pseudolavatera a una dosis de 2000 mg/Kg.


Durante las dos primeras horas se evidencio dos de los signos tóxicos que fueron las heces blandas y el acicalamiento que se presentó solo

en la primera hora, transcurrido ese tiempo los signos tóxicos desaparecieron.

50

GRUPO 2 M. pseudolavatera Conc. 300 mg/Kg

4H DIAS

1 2 3 4 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Heces blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Tabla IX Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva pseudolavatera a una dosis de 300 mg/Kg.


Durante el tiempo de observación de los animales de experimentación el Grupo 2, no presentaron signos tóxicos.

51


Conc. 50 mg/Kg

4H DIAS

1 2 3 4 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Heces blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

O= Ausencia P= Presencia

Tabla X Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva pseudolavatera a una dosis de 50 mg/Kg.



52


Conc. 5 mg/Kg

4H DIAS

1 2 3 4 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Heces blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Tabla XI Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva pseudolavatera a una dosis de 5 mg/Kg.



53

IV.5.2 Signos clínicos observados durante el tratamiento con mucilagos obtenidos de las hojas de Malva sylvestris.

GRUPO 5 M. sylvestris

Conc. 2000 mg/Kg

4H DIAS

1 2 3 4 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Heces blandas P P 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Acicalamiento P 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

0=Ausencia P= Presencia

Tabla XII Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva sylvestris a una dosis de 2000 mg/Kg.


Durante las dos primeras horas se evidencio dos de los signos tóxicos que fueron las heces blandas y el acicalamiento que se presentó solo

en la primera hora, transcurrido ese tiempo los signos tóxicos desaparecieron.

54


Conc. 300 mg/kg

4H DIAS

1 2 3 4 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Heces blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

0= Ausencia P=Presencia

Tabla XIII Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva sylvestris a una dosis de 300 mg/Kg.



55


Conc 50 mg/Kg

4H DIAS

1 2 3 4 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Heces blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Tabla XIV Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva sylvestris a una dosis de 50 mg/Kg.



56


Conc. 5 mg/kg

4H DIAS

1 2 3 4 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Agresividad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Letargia 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Heces blandas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Inmovilidad 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Temblor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Acicalamiento 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Temor 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Diarrea 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0


Tabla XV Signos observados durante los días de experimentación de la Toxicidad aguda oral de mucilagos extraídos de las hojas de Malva sylvestris a una dosis de 5 mg/Kg.



57

IV.6. Observaciones macroscópicas de órganos al finalizar la experimentación


En lo referente a los órganos diana extraídos y observados macroscópicamente, al

finalizar la experimentación no se observó presencia de alteraciones en su estructura.

IV.7. Resultados de la valoración microscópica

Resultados histopatológicos

Grupo Control

Hígados. - Congestión portal y sinusoidal discretos (+).

Estómagos. - Leve descamación apical en la región del epitelio glandular fúndico.

(+). Una pequeña zona aparece ulcerada en la región fúndica. - la pared de la región

está muy delgada.

Riñones. - Congestión vascular en las dos zonas (+).

GRUPO/ ORGANOS

CONTROL 1 2 3 4 5 6 7 8

Hígado 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Riñones 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Estómago 0 0 0 0 0 0 0 0 0

0=Ausencia P=Presencia

Riñón Hígado Estomago

58

GRUPO 1 (2000 mg/Kg M. pseudolavatera)

Hígados. - Ligera congestión portal con la presencia de un micro aneurisma

superficial. Las células Kuffer son visibles como formas bacilares basófilas.

Riñones. - Normales

Estómagos. - Se observa una buena actividad glandular en la región fúndica con leve

descamación celular en la luz.


Hígados. - Aparecen con una congestión portal y sinusoidal discreta (+).

Estómagos. - Igualmente se observa una descamación discreta de células apicales,

con actividad glandular en la región fúndica normal.

Riñones. - Discreta congestión vascular en la zona cortical (+).



59


Hígados. - En un órgano se observa pequeñas zonas de degeneración grasa en el

centro del lobulillo y además se observa una congestión portal. (+) y el otro hígado

presenta además congestión sinusoidal (+).

Riñones. - Leve congestión en las dos zonas (+).

Estómagos. - Se observa una descamación discreta en la luz con leve vacuolización

del epitelio apical, todo esto en la zona fúndica de los dos estómagos (+).


Hígados. - Un hígado presenta un micro aneurisma parenquimal y discreta

congestión portal al igual que el otro órgano (+).

Riñones. - Congestión vascular en zona cortical (+).

Estómagos. - De paredes delgadas y una ligera descamación celular apical. LA

actividad glandular es importante en la región fúndica.



60

GRUPO 5 (2000 mg/Kg M. sylvestris)

Hígados. - En los dos órganos se observa congestión portal y sinusoidal (+).

Riñones. - Ligera congestión zona cortical (+).

Estómagos. - Descamación celular apical en la zona glandular fúndica (+), además

un segmento de duodeno muestra infiltrados de células inflamatorias en la zona

glandular.


Hígados. - Presentan congestión vascular, portal y parenquimal (+).

Riñones. - Congestión vascular en la zona cortical (+).

Estómagos. - Luz dilatada y de pared delgada en la región fúndica, con descamación

celular apical manifiesta (++). Una zona del duodeno aparece con células inflamatorias

en la región glandular. El páncreas esta normal.



61


Hígados. - Presentan ligera congestión parenquimal y portal (+).

Riñones. - Se observa congestión vascular en la zona cortical (+).

Estómagos. - Presentan en la región fúndica paredes delgadas y dilatadas,

mostrando en su luz una descamación celular apical (++) y una actividad glandular

manifiesta.


Hígados. - Uno de ellos presenta ligera degeneración grasa centrolobuliliar, la

congestión portal y parenquimal se observa en los dos (+).

Riñones. - Congestión vascular en zona cortical (+).

Estómagos. - Paredes delgadas en la región fúndica con descamación epitelial apical

(++) y a veces vacuolización celular (+) en la zona pilórica.



62

Dictamen General.- La aparición casi similar de leves lesiones en los tres órganos

estudiados con pequeñas variaciones en grado de presentación entre los diferentes

grupos es indicativo de que el funcionamiento orgánico se encuentra sometido a la

acción forzada de sustancias que aceleran el metabolismo especialmente

hepatocardiorenal, posiblemente por ello es la respuesta vascular (congestión) en

hígados y riñones y al aumento de la función glandular gástrica con algunos bemoles

propios de la individualidad orgánica.

63

IV.8. Discusiones

Desde la antigüedad, las plantas han sido de vital importancia para el tratamiento

de diversas dolencias y enfermedades para el ser humano siendo usadas de diferentes

maneras, sacando provecho de sus propiedades terapéuticas y beneficios para el

organismo, incluyendo estas plantas medicinales en sus hábitos.(1)

A pesar de no existir suficiente información que afirme que las hojas y flores de las

plantas de especie Malva produzcan efectos tóxicos, se ha indagado estudios que

afirman o rechazan la presencia de toxicidad de esta especie.

Benso B y otros autores citaron que; M. sylvestris, por ser una planta silvestre y

cosechada en el campo debe ser manejada con una serie de precauciones ya que las

hojas y las flores son utilizadas para su consumo, los peligros al momento de ser

ingeridas es que podría estar contaminada con compuestos químicos como los

organofosforados, pesticidas, organoclorados, fungicidas, insecticidas y hasta

bacterias.(15)

A pesar de ser una planta que no se la considera toxica puede llegar a presentar

efectos secundarios y las hojas suelen contener elevado contenido de nitrato.(15)

En cuanto, al desarrollo de esta metodología alterna de toxicidad aguda, indican

que ante ausencia de información con respecto a la toxicidad del extracto a analizar es

aceptable manejar un nivel límite de 2000 mg/kg de peso corporal.(9)

La administración de las sustancias de ensayo restantes no produjo mortalidad ni

síntomas atribuibles a toxicidad y las investigaciones encargada de estudiar diversas

patologías a nivel macro-anatómicos no mostraron cambios drásticos en el ensayo,

además de no observarse alteraciones clínicas como lo indica Toledo B y otros autores

en su estudio de “toxicidad aguda de extractos de plantas medicinales por un método

alternativo”(9).

Respecto a extractos de los mucílagos obtenido de hojas de M. pseudolavatera y M.

sylvestris, los resultados en cierto punto concuerdan con los encontrados por Martínez

M. (48) que al estudiar hojas secas de Psidium guajava en un estudio toxicológico

64

preclínico mediante los procedimientos de dosis letal media (DL50) en ratones suizos

OF1 y toxicología alternativa, método de las Clases de Toxicidad (CTA) en ratas Wistar.

Estos investigadores realizaron también la evaluación de agentes capaces de generar

toxicidad de dos extractos, provocando una inducción de segregación somática en

poco tiempo, en el hongo de la especie A. nidulans y un estudio realizado

directamente en la medula del biomodelo con el fin de inducir los micronúcleos.

Utilizando el límite de dosis de 2000 mg/Kg no hubo presencia de mortalidad en ambos

biomodelos y los resultados microscópicos no presentaron daños relacionados al

efecto toxico de la especie investigada.(48)

Durante el ensayo de toxicidad aguda oral, con dosis de 2000 mg/kg no se

presentaron síntomas o signos tóxicos, ni muerte durante la experimentación.

Constantemente se observó una conducta normal en los animales, esto concuerda con

el estudio realizado por Guaycha N, y otros autores. (49)

65

V. CONCLUSIONES

• Con la administración de diferentes dosis administradas (2000, 300, 50, 5

mg/Kg) de M. pseudolavatera y M. sylvestris no presentaron mortalidad, ni signos

tóxicos.

• Los resultados obtenidos del análisis macroscópico y microscópico indicaron

que los extractos obtenidos de mucilagos de Malva sylvestris y Malva pseudolavatera

no producen afectación a nivel tejido en órganos ensayados (riñón, hígado y

estómagos).

VI. RECOMENDACIONES

• Realizar un estudio histopatológico a nivel gastrointestinal.

• Realizar una evaluación de toxicidad Subcrónica y Crónica.

66

VII. BIBLIOGRAFIA

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72

VIII. GLOSARIO

• Decocción: La decocción se usa para principios activos que no sufran

alteraciones con la temperatura; generalmente, las raíces, hojas, flores y

pedúnculos foliados se hierven en agua durante unos 15 minutos, mientras

que las ramas y otras partes más duras pueden precisar hasta una hora,

tiempo durante el cual deberá ir reponiéndose el agua evaporada.

• Farmacodinamia: Acción de los medicamentos y efectos que tiene en el

organismo vivo.

• Farmacocinética: Es el estudio de cómo el organismo procesa el fármaco, se

estudian la absorción, la distribución, el metabolismo y la excreción (ADME)

del fármaco, además de la biodisponibilidad, llamados con frecuencia ADME,

determinan la concentración del fármaco en el organismo.

• Herbáceo: Que tiene el aspecto o las características de la hierba.

• Histología: Parte de la biología que estudia la composición, la estructura y

las características de los tejidos orgánicos de los seres vivos

• Infusión: Acción de sumergir una sustancia orgánica en un líquido caliente,

pero sin que llegue a hervir, para que se disuelvan sus partes solubles.

• Maceración: La maceración se realiza a temperatura ambiente y los líquidos

que con más frecuencia se utilizan son el agua y el alcohol o combinación de

ambos, aunque también pueden emplearse vinos tintos o blancos.

• Macroscópico: Que se ve a simple vista sin ayuda del microscopio.

• Microscópico: Que se realiza mediante el microscopio.

• Mortalidad: Cantidad de personas o animales que mueren en un lugar y en

un período de tiempo determinados en relación con el total de la población.

• Mucílago: Es una sustancia vegetal viscosa, coagulable al alcohol. También

es una solución acuosa espesa de una goma o dextrina utilizada para

suspender sustancias insolubles y para aumentar la viscosidad.

73

IX. ANEXOS

Anexo B Previo al secado en la estufa

Elaborado por (Autoras)

Anexo C Post secado en la estufa Elaborado por (Autoras)

Anexo A M. pseudolavatera y M. sylvestris, secado al ambiente ELABORADO POR (AUTORAS).

74

Anexo D Molienda de hojas de M. pseudolavatera y M. sylvestris. Elaborado por (Autoras)

Anexo E Extracto acuoso de Malva pseudolavatera (izquierda) - Malva sylvestris (derecha)


75

Anexo G Pesado diario del Pienzo.


Anexo F Conformación de grupos Elaborado por (Autores)

Anexo H Registro el volumen de agua ingerida diaria.


76

Anexo I Disección de los biomodelos al día 14. Elaborado por (Autoras)

Anexo J Observación macroscópica de los órganos (Riñón, estomago e hígado) de cada grupo.


Anexo K Colocando los órganos en formol.


77

Anexo L Post Formol, los órganos separados por grupos para el estudio microscópico.


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