UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD CIENCIAS QUÍMICAS...
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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD CIENCIAS QUÍMICAS MODALIDAD: SISTEMATIZACIÓN TEMA: VERIFICACIÓN DEL INTERVALO DE REFERENCIA DE LAS DETERMINACIONES DE AMILASA Y LIPASA EN EL LABORATORIO LAB-CENTRO ILLINGWORTH TRABAJO DE TITULACIÓN PRESENTADO COMO REQUISITO PREVIO PARA OPTAR AL GRADO DE QUÍMICO FARMACÉUTICO AUTORES LINDA EVELYN GARBOA PÉREZ LEONARDO XAVIER OCHOA DÍAZ TUTOR DR. ING. QF. LUIS FERNANDO CAZAR UBILLA Mgs. GUAYAQUIL – ECUADOR 2016
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UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD CIENCIAS QUÍMICAS
MODALIDAD:
SISTEMATIZACIÓN
TEMA:
VERIFICACIÓN DEL INTERVALO DE REFERENCIA DE LAS
DETERMINACIONES DE AMILASA Y LIPASA EN EL
LABORATORIO LAB-CENTRO ILLINGWORTH
TRABAJO DE TITULACIÓN PRESENTADO COMO REQUISITO PREVIO
PARA OPTAR AL GRADO DE QUÍMICO FARMACÉUTICO
AUTORES
LINDA EVELYN GARBOA PÉREZ
LEONARDO XAVIER OCHOA DÍAZ
TUTOR
DR. ING. QF. LUIS FERNANDO CAZAR UBILLA Mgs.
GUAYAQUIL – ECUADOR
2016
APROBACIÓN DEL TUTOR
En calidad de tutor del Trabajo de Titulación, Certifico: Que he asesorado,
guiado y revisado el trabajo de titulación en la modalidad de
sistematización, cuyo título es VERIFICACIÓN DEL INTERVALO DEREFERENCIA DE LAS DETERMINACIONES DE AMILASA Y LIPASAEN EL LABORATORIO LAB-CENTRO ILLINGWORTH presentado por
Linda Evelyn Garboa Pérez, con cédula de ciudadanía N°0916625635, y
Leonardo Xavier Ochoa Díaz, con cédula de ciudadanía N°0931117667,
previo a la obtención del título de Químico y Farmacéutico.
Este trabajo ha sido aprobado en su totalidad y se adjunta el informe de
Antiplagio del programa URKUND. Lo Certifico.
Guayaquil, 25 de Julio del 2017
____________________________FIRMA TUTOR DE TESIS
DR. ING. QF. LUIS FERNANDO CAZAR UBILLA Mgs.
CERTIFICADO DEL TUTOR
INFORME DE ANTI-PLAGIO DEL PROGRAMA URKUND.
El plagio encontrado durante la revisión del trabajo denominado
VERIFICACIÓN DEL INTERVALO DE REFERENCIA DE LASDETERMINACIONES DE AMILASA Y LIPASA EN EL LABORATORIOLAB-CENTRO ILLINGWORTH, fue del 1%, según lo certifica el programa
URKUND.
_______________________________FIRMA TUTOR DE TESIS
Dr. Ing. Q.F. LUIS CAZAR UBILLA Mg.
CERTIFICADO DEL TRIBUNAL
El Tribunal de Sustentación del Trabajo de Titulación de la Sra. LINDAEVELYN GARBOA PÉREZ, y el Sr. LEONARDO XAVIER OCHOA DÍAZdespués de ser examinado en su presentación, memoria científica y
defensa oral, da por aprobado el Trabajo de Titulación.
________________________________
Q.F. ANA DELGADO GARCÍA Mg.PRESIDENTE DEL TRIBUNAL
_____________________________ _____________________________Q.F. PATRICIA JIMÉNEZ GRANIZO Mg Q.F. NILDA CEDEÑO ALBÁN Mg.DOCENTE-OPONENTE DEL TRIBUNAL DOCENTE-OPONENETE DEL TRIBUNAL
___________________________________Ab. FRANCISCO PALOMEQUE ROMERO
SECRETARIO GENERAL
CARTA DE AUTORIA DE TITULACIÓN
Guayaquil, 25 de Julio del 2017
LINDA EVELYN GARBOA PÉREZ y LEONARDO OCHOA DÍAZ, autores
de este trabajo declaramos ante las autoridades de la Facultad de
Ciencias Químicas de la Universidad de Guayaquil, que la
responsabilidad del contenido de este TRABAJO DE TITULACIÓN, nos
corresponde exclusivamente; y el patrimonio intelectual de la misma a la
Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad de Guayaquil.
Declaramos también es de nuestra autoría, que todo el material escrito,
salvo el que está debidamente referenciado en el texto. Además,
ratificamos que este trabajo no ha sido parcial ni totalmente presentado
para la obtención de un título, ni en una Universidad Nacional, ni una
Extranjera.
____________________ _____________________LINDA GARBOA PÉREZ LEONARDO OCHOA DÍAZC.I. 0916625635 C.I. 0931117667
AGRADECIMIENTO
Al Dios eterno que nos dio la vida, por mantenernos con salud y darnos la
oportunidad de seguir adelante sin desfallecer. A nuestros padres, pilar
fundamental de nuestras vidas, que con cariño, amor y paciencia nos apoyaron
en todo para alcanzar y terminar nuestras metas. A nuestro tutor el Dr. Ing. Q.F.
Luis Cazar Ubilla Mgs, quién nos ayudó en todo momento compartiendo sus
conocimientos y demostrando ser una persona de gran calidad humana. Al Dr.
Vicente Illingworth Ashton quien colaboró de manera incondicional y solidaria a la
realización de nuestro estudio. A nuestros familiares y amigos que nos
impulsaron a seguir adelante.
ÍNDICE
APROBACIÓN DEL TUTOR…………………………………………………………….i
CERTIFICADO DEL TUTOR…………………………………………………..……….ii
CERTIFICADO DEL TRIBUNAL………………………………………………………iii
CARTA DE AUTORIA DE TITULACIÓN…………………………………….………..iv
AGRADECIMIENTO……………………………………………………………….……v
ÍNDICE……………………………………………………………………...….….….....vi
ÍNDICE DE GRÁFICOS…………………………………………………………..........ix
ÍNDICE DE TABLAS………………………………….………………………….……...x
ÍNDICE DE ABREVIATURAS………………………….………………..…………..…xi
RESUMEN……………………………………………….………………………..…....xii
ABSTRACT…………………………………………….……………………………….xiii
INTRODUCCIÓN……………………………………….……………………………….1
PROBLEMA…………………………………………….……………………………......4
JUSTIFICACIÓN…………………………………………….…………………………..5
HIPÓTESIS……………………………………………………….……………………...6
OBJETIVO GENERAL………………………………………….………………….…...7
OBJETIVOS ESPECÍFICOS…………………………………….………………….….7
CAPÍTULO I REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA………..…….…...……..……….…….…8
1.1 Intervalos de referencia: Generalidades………...….........................................8
1.2 Obtención de los intervalos de referencia………………………………..……..10
1.3 Verificación de los intervalos de referencia…………………………………….12
1.4 Amilasa……………………………………………………………………….…….13
1.5 Lipasa……………………………………………………………………..………..15
Capítulo ll MATERIALES Y MÉTODOS……………………………………………..17
2.1 Lugar de la investigación.....….…………………………………………………..17
2.2 Periodo de la investigación……………………………………….……………...17
2.3 Universo………………………………….………………………………………...17
2.4 Muestra………………...…………………………………………………………...17
2.5 Variables…….……………………………………………………………………...17
2.6 Tipo de investigación...……….….……………………………………………….18
2.7 Diseño de la investigación…………………………………………………....…..18
2.8 Técnicas de la investigación………............................................................... 18
2.8.1 Protocolo para la verificación de los V. de referencia……….………………18
2.8.2 Selección de individuos de referencia…….…………………………………..19
2.8.2.1 Criterios de Exclusión………………………………………………………...19
2.8.2.2 Índice de masa corporal……………………………………………………...19
2.8.3 Técnicas de Muestreo directo……….…………………………………………20
2.8.4 Recolección y tratamiento de muestra sanguínea…..………………………20
2.8.5 Determinación de Amilasa y Lipasa…………………………………………..21
2.8.5.1 Amilasa…………………………………………………………………………21
2.8.5.2 Lipasa………………………………………………………...........................22
2.8.6 Gestión del intervalo de referencia……………………………………………23
2.9 Equipos……………………………………………………………………………..23
Capitulo lll RESULTADOS Y DISCUSIÓN……………………………….....………24
CONCLUSIONES……………………………………..…….…………………………31
RECOMENDACIONES……………………………………………………………..…32
BIBLIOGRAFÍA…………………………………………………………………………33
ANEXO # 1 Cronograma de actividades.……………………………..…………….35
ANEXO # 2 Encuesta…………………………………………………..….………….36
ANEXO # 3 Reporte de la aplicación EP Evaluator Amilasa……..……...……….38
ANEXO # 4 Reporte de la aplicación EP Evaluator Lipasa………...……………..39
ANEXO # 5 Inserto Amilasa………………………..…………………..…………….40
ANEXO # 6 Inserto Lipasa……………………..……………………………….…….45
ÍNDICE DE GRÁFICOS
Gráfico I: Resultados de las encuestas……………………………………………...25
Gráfico II: Resultado de preguntas realizadas a mujeres…………………………25
Gráfico III: Dispersión de los datos analíticos de Amilasa………………………...27
Gráfico IV: Histograma de frecuencia de Amilasa………………………………….28
Gráfico V: Dispersión de los datos analíticos de Lipasa…………………………..29
Gráfico VI: Histograma de frecuencia de Amilasa………………………………….30
ÍNDICE DE TABLAS
Tabla I: Operacionalización de las variables……………………………………..…18
Tabla II: Criterios de Exclusión……………………………………………………….19
Tabla III: Índice de Masa Corporal…………………………………………………...20
Tabla IV: Equipos………………………………………………………………………23
Tabla V: Resultados de las encuestas………………………………………………24
Tabla VI: Resultado de preguntas realizadas a mujeres…………….…………….25
Tabla VII: Datos analíticos de Amilasa………………………………………………26
Tabla VIII: IR Amilasa………………………………………………………………….27
Tabla IX: Análisis estadísticos de los resultados de Amilasa……………………..27
Tabla X: Distribución de los resultados de Amilasa………………………………..28
Tabla XI: Datos analíticos de Lipasa…………………………………...……………28
Tabla XII: IR Lipasa……………………………………………………………………29
Tabla XIII: Análisis estadísticos de los resultados de Lipasa……………………..29
Tabla XIV: Distribución de los resultados de Lipasa…………………………….…30
ÍNDICE DE ABREVIATURAS
CLSI: Clinical & Laboratory Standards Institute (Instituto de Estándares Clínicos y
de Laboratorio).
IFCC: International Federation of Clinical Chemistry (Federación Internacional de
Química Clínica).
IMC: Índice de masa corporal
IR: Intervalos de Referencia
OMS: Organización Mundial de la Salud.
RESUMEN
Los intervalos de referencia son una herramienta esencial para un laboratorio
clínico ya que puede comparar sus resultados y saber si se apegan o no la
realidad del paciente. Dichos resultados permiten que el doctor se oriente y
pueda dar su opinión profesional del estado fisiológico del individuo. En Ecuador
como en muchos otros países, se utilizan IR extraídos de los insertos del
fabricante; sin embargo la guía CLSI y la IFCC recomiendan que cada
laboratorio debe contar con sus propios valores. La norma ISO 15189:2012
decreta que la revisión de los intervalos de referencia forma parte de los
requerimientos especializados para la acreditación del laboratorio. El presente
estudio tiene como objetivo verificar los intervalos de referencia de Amilasa y
Lipasa sérica en adultos aparentemente sanos, en la población que acude al
Laboratorio Lab-Centro Illingworth de Guayaquil. Se realizó encuestas, en la cual
participaron 132 personas, habiendo sido seleccionadas 20 en base a criterios
de exclusión y tomando en cuenta el IMC (OMS). El equipo utilizado para las
determinaciones analíticas, fue el analizador de química clínica Cobas 6000 de
Roche. Para la evaluación de los resultados se usó la aplicación EP Evaluator
versión 11 en periodo de prueba, verificando que los resultados están dentro del
intervalo propuesto por el fabricante. De esta manera se concluye, que los
intervalos de referencia utilizados por el laboratorio son válidos para la población
en estudio.
Palabras claves: Intervalo de referencia, Amilasa, Lipasa, verificación.
ABSTRACT
Reference intervals are an essential tool for a clinical laboratory because it
can compare their results and know whether or not the patient's reality is
attached. These results allow the doctor to orient himself and give his
professional opinion of the physiological state of the individual. In Ecuador as in
many other countries, IRs are used from the manufacturer's inserts; However the
CLSI guideline and the IFCC recommend that each laboratory should have its
own values. The ISO 15189: 2012 standard decrees that the revision of the
reference intervals is part of the specialized requirements for laboratory
accreditation. The present study aims to verify the reference intervals of serum
amylase and lipase in apparently healthy adults, in the population that goes to
Lab-Centro Illingworth in Guayaquil. Surveys were conducted, in which 132
people participated, having been selected 20 based on exclusion criteria and
taking into account the BMI (WHO). The equipment used for analytical
determinations was Roche's Cobas 6000 clinical chemistry analyzer. For the
evaluation of the results, the EP application Evaluator version 11 was used
during the test period, verifying that the results are within the range proposed by
the manufacturer. In this way it is concluded that the reference intervals used by
the laboratory are valid for the study population.
Key words: Reference interval, Amylase, Lipase, Verification
INTRODUCCIÓN
Así como la tecnología avanza, los seres humanos nos volvemos cada vez
más exigente al momento de adquirir un servicio u producto. Ecuador no es la
excepción con respecto a la remodelación de sus laboratorios clínicos con
equipos avanzados, los cuales proveen datos o resultados confiables. Sin dejar
de mencionar otro punto para destacar es la atención de primera al paciente.
Para emitir un criterio, cualquier resultado de concentración de una magnitud
bioquímica tiene que ser comparado con información de referencia para que
adquiera significado. (Gonzáles, 2014). Los IR en los laboratorios juega un rol
importante en la supuesta valoración de la condición orgánica del paciente, esto
faculta que el profesional de la salud pueda tener números clínicamente
rentables que lo orienten a tomar decisiones acertadas y ejecutar asi una
excelente interpretación clínica. Debido a esto es indispensable que toda prueba
de diagnóstico se validada y verificada.
Si un resultado se encuentra dentro o no de los intervalos establecidos, es
quizás, el componente más importante en el laboratorio, donde la mayoría, usan
rangos publicados en los insertos del reactivo, aunque es de suponer que deben
establecer sus propios para asegurarse de que aplican a su población.
“En la mayoría de los casos, la interpretación de los datos generados en el
laboratorio clínico se lleva a cabo una relación con los datos obtenidos en una
población de referencia. Habitualmente, esta población de referencia se
identifica con una población formada por individuos aparentemente sanos”.
(Gonzáles, 2014)
“La población está formada por un número asequible, limitado y
representativo de individuos. Los resultados obtenidos en este subconjunto
serán más o menos representativos de la población, según el número de
integrantes de la muestra, de modo que, cuanto mayor sea el número de
individuos que integran la muestra, mejor serán los resultados”. (González, 2014).
Pero estos individuos deben ser propios del lugar de referencia, puesto que
existe variabilidad biológica entre una población y otra y esto es debido a los
componentes genéticos.
“Las variables principales en los valores de referencia serían de carácter pre-
analíticas que pueden afectar los resultados del estudio, incluyendo la edad, la
dieta, el género, el ritmo circadiano, la raza, la posición del cuerpo, los
medicamentos, la actividad física, el estado socioeconómico, la historia médica y
el ayuno”. (Olay, 2013)
“El establecimiento de los intervalos de referencia requiere una planificación,
control y una documentación cuidadosa de cada aspecto del estudio. Así los
intervalos de referencia resultantes están bien caracterizados en términos de la
variación atribuible a factores pre-analíticos y analíticos. Estos protocolos
formales son particularmente útiles cuando un laboratorio necesita establecer
sus propios intervalos de referencia para un examen particular. Esta situación
podría ocurrir si un laboratorio ha modificado un método previamente aprobado
por la FDA o ha desarrollado un método propio. Desafortunadamente, estos
protocolos son costosos y pueden resultar inaccesibles para establecimientos
más pequeños. Incluso los grandes laboratorios son cada vez más dependientes
de los fabricantes para establecer científicamente los intervalos de referencia
sólidos que puedan ser verificados utilizando acercamientos más simples, de
menor costo y que impliquen menos trabajo”. (Westgard, 2013)
El presente estudio verificará los intervalos de referencia propuestos por el
fabricante, para parámetros analíticos que no son de rutina, pero, que si tienen
importancia médica para el diagnóstico diferencial de enfermedades
pancreáticas, como es el caso de la Lipasa y la α-Amilasa, y se llevará a cabo
en el Laboratorio clínico Lab-Centro Illingworth acreditado con la norma ISO
15189-2012, ubicado en la ciudad de Guayaquil.
PROBLEMA
Hablar de Intervalos de Referencia a nivel de clínica o personal médico es de
gran interés, ya que la interpretación de los resultados emitidos es una práctica
fundamental en las decisiones del paciente, y se puede caer en el error de
excluir una persona aparentemente sana de una enferma. Para ello, es
necesario comparar los resultados obtenidos frente al intervalo de referencia
establecida para cada población.
Cada laboratorio clínico debe implantar sus correspondientes IR esto es
sugerido por entidades especializadas, porque un resultado anunciado sin
aquellos no poseen importancia alguna, sin embargo hay laboratorios que no
cuentan con sus propios intervalos debido a esto, los toman de los insertos de
casas comerciales que generalmente son extranjeras, donde las personas están
expuestos a otras condiciones de vida.
Establecer los IR en un laboratorio es una tarea muy compleja porque en
primer lugar se debe de contar con toda la información genética y fisiológica de
la población en estudio, luego convencer a las personas para que se ajusten a
los distintos parámetros y así puedan ser parte de una agrupación de estudio.
En base a lo anteriormente expuesto, los laboratorios deberían verificar los
intervalos que están usando, por ser más factible, pero no todos lo hacen. En
química clínica existen estudios referentes a parámetros analíticos que por ser
de rutina tienen mayor interés, pero con respecto a los perfiles pancreáticos las
informaciones son escasas.
¿Son válidos los intervalos de referencia de Amilasa y Lipasa sérica
propuestos por el fabricante para la población en estudio?
JUSTIFICACIÓN
Los resultados obtenidos tendrán buena utilidad para el grupo en estudio,
laboratorios que derivan sus muestras y demás usuarios a los que el Laboratorio
clínico Lab-Centro Illingworth presta sus servicios, debido a que ayudará al
diagnóstico de alguna patología a nivel pancreático y consecuentemente un
adecuado tratamiento para mejorar la calidad de vida de los pacientes, y tendrán
la certeza de que los intervalos debidamente verificados proporcionados a ésta
población, serán clínicamente útiles.
HIPÓTESIS
Los intervalos de referencia de Amilasa y Lipasa sérica en adultos
aparentemente sanos utilizados en el laboratorio Lab-Centro Illingworth de la
ciudad de Guayaquil, son equivalentes a los propuestos por el fabricante de
reactivos, por lo tanto, si aplica a nuestra población.
OBJETIVO GENERAL:
Verificar los intervalos de referencia de Amilasa y Lipasa sérica en
adultos aparentemente sanos, propuestos por el fabricante.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
Seleccionar mediante encuesta a personas aparentemente sanas.
Determinar los valores de Amilasa y Lipasa en suero sanguíneo.
Relacionar los valores obtenidos en la investigación con los
intervalos de referencia proporcionados por el fabricante.
Capítulo IREVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
1.1. Intervalos de referencia: Generalidades
La interpretación de cualquier análisis de laboratorio clínico implica un proce-
so importante de comparación del resultado del paciente, con un "intervalo de
referencia" para la prueba en cuestión. Algunas proporcionan una respuesta
sencilla de "sí" o "no", que serían las denominadas pruebas cualitativas: test rá-
pidos de detección de patógenos, de embarazo, etc. Para la mayoría de las
pruebas de laboratorio, el significado de un resultado depende del contexto en el
cual se interprete. Habitualmente, un informe de laboratorio presentará sus resul-
tados acompañados de un intervalo de referencia. (Jiménez Alés, 2008)
Una teoría de los valores de referencia que proporciona definiciones, princi-
pios y procedimientos para la determinación y el uso de valores de referencia fue
desarrollada por el Grupo de Expertos (EPTRV), de la Federación Internacional
de Química Clínica y Medicina de Laboratorio (IFCC) y la Comisión Permanente
de Valores de Referencia del Consejo Internacional para la Estandarización en
Hematología (ICSH). (Horowitz et al. 2010)
Los IR son un conjunto de valores de una magnitud biológica determinados
con un procedimiento de medida específico en su totalidad, y obtenidos en un
solo individuo o en una población de referencia, que cumplen unos criterios defi-
nidos. (Ricart, 2013)
Los intervalos de referencia pueden estar asociados con buen estado de sa-
lud o con otros aspectos fisiológicos o patológicos, y suelen ser utilizados por
diferentes razones. En todos los casos, permiten relacionar o comparar los datos
observados y obtenidos en una población aparentemente sana. Esta compara-
ción a continuación, se convierte en parte del proceso de toma de decisiones
con respecto al significado del valor observado y el estado del sujeto que se está
probando. (Horowitz et al. 2010)
Los valores de referencia son obtenidos por la observación o medición en los
individuos que pertenecen al grupo de muestra de referencia, definida por un
porcentaje específico (por ejemplo, el centro de 95%). (Horowitz et al. 2010)
Los valores de referencia biológicos dependen, obviamente, de la población
en observación. Esta evidencia debe tenerse siempre en cuenta, ya que es posi-
ble que, por ejemplo, los valores de cierta magnitud biológica observados en
individuos sanos de los países escandinavos, sean diferentes de los examinados
en individuos sanos de los países mediterráneos. Por otro lado, los valores de
referencia de una magnitud biológica dependen del procedimiento empleado
para la medida de la misma; no todos los métodos de medida de que se dispone
para medir una magnitud están sometidos a la misma variabilidad metrológica,
por lo que la mayoría de procedimientos de medida conducen a resultados dife-
rentes entre sí. (Fuentes, 2011)
Por las dos razones citadas en el párrafo anterior, se puede afirmar que, en
general, los intervalos de referencia biológicos que aparecen en los libros u otras
publicaciones, incluso en los más prestigiosos, no deben utilizarse con fines
diagnósticos. Sólo pueden utilizarse con cierta fiabilidad aquellas publicaciones
en las que conste, sin ninguna ambigüedad, la descripción de la población de
referencia y el procedimiento de medida utilizado, siempre y cuando, tanto la
población como el procedimiento de medida coincidan con los que afectan al
paciente en estudio. (Fuentes, 2011)
En cuanto a la variabilidad biológica se toman en cuenta distintos factores
como el lugar en donde reside el paciente, puede ser en ciudades que poseen
altura como por ejemplo Quito, sus valores de referencia son importantes en
estas poblaciones debido a la disminución parcial de oxígeno que afecta a la
concentración de la hemoglobina, el hematocrito y los indicadores hematimétri-
cos alterando así los resultados. (Sáenz, et al. 2008)
Otro factor seria en las mujeres embarazadas debido a que producen muchos
cambios en los procesos químicos del cuerpo, por ello existen muchas pruebas
de laboratorio e intervalos de referencia propios para las pacientes en periodo de
gestación como por ejemplo los parámetros hematológicos. (Horowitz et al. 2010)
“Se prefiere el término "intervalo de referencia" al de "valor normal" porque en
el primero la población de está claramente definida. En lugar de dar la idea de
que sus resultados se comparan con el concepto abstracto y a menudo erró-
neamente considerado como "normal", el intervalo de referencia indica que sus
resultados se están considerando dentro de un contexto más adecuado. Cuando
se examinan los resultados de una misma prueba, pero en diferentes poblacio-
nes, rápidamente se puede dar cuenta de que lo que es normal en una población
puede no serlo en la otra”. (Jiménez Alés, 2008)
1.2. Obtención del intervalo de referencia
La producción de valores de referencia para la salud asociados, y la posterior
estimación de los intervalos para un analito dado, debe llevarse a cabo de
acuerdo con un protocolo bien definido. Este esquema debe ser aplicado para
establecer valores de referencia para un nuevo componente, a un grupo diferen-
te de personas, o de un nuevo método de análisis con la mejora de la sensibili-
dad y especificidad analítica para un analito. (Horowitz et al. 2010)
Para la obtención de dichos intervalos de referencia, la CLSI ha propuesto los
siguientes pasos:
Establecer una lista de interferencias analíticas y fuentes de variabilidad
biológica.
Establecer la selección de los criterios de partición y elaborar un cuestio-
nario apropiado, diseñado para revelar estos criterios en los individuos
potenciales de referencia.
Ejecutar un formulario, en que el paciente nos brinde el consentimiento
informado por escrito, donde indique su participación en el estudio de los
intervalos de referencia, y que por último deberá completar un cuestiona-
rio.
Clasificar los individuos potenciales de referencia basados en los resulta-
dos del cuestionario y los resultados de otras evaluaciones de salud
apropiadas.
Establecer criterios de exclusión del grupo de muestra de referencia en
base a las evaluaciones, las cuales indican una falta de buena salud en el
paciente.
Decidir sobre un número apropiado de individuos de referencia en consi-
deración a los límites de confianza deseados.
Preparar adecuada y coherentemente a las personas seleccionadas para
la recolección de muestras para la medición de un analito.
Recolectar y manejar las muestras biológicas correctamente y de una
manera consistente con la rutina.
Agrupar los valores de referencia mediante el análisis de las muestras de
acuerdo con el respectivo análisis.
Inspeccionar los antecedentes de los valores de referencia y preparar un
histograma para evaluar la distribución de los datos.
Identificar posibles errores y / o valores atípicos de datos.
Analizar los valores de referencia, es decir, seleccionar un método esta-
dístico en el cual se puedan comparar los intervalos observados y los
propuestos.
Documentar todos los pasos y procedimientos mencionados anteriormen-
te.
1.3. Verificación de intervalos de referencia
En cuanto a la poca practicabilidad que tiene la estimación de los intervalos
de referencia en grandes poblaciones es muy complicado, debido a que requiere
de mucho tiempo en caso de que quisiéramos investigar los intervalos de refe-
rencia en la ciudad de Guayaquil, sería demasiado tedioso realizar un estudio
súper detallado de dichos intervalos y llevaría mucho tiempo. Por eso la CLSI
recomienda que los laboratorios verifiquen los intervalos de referencia que los
proveedores o fabricantes de los kits comerciales proponen para realizar estu-
dios en zonas o en lugares pequeños, por ejemplo: en la Facultad de Ciencias
Químicas.
La guía EP28-A3c de la CLSI establece un método alternativo para la verifi-
cación de los intervalos de referencia. Este método consiste en seleccionar 20
individuos adultos aparentemente sanos, que previamente acepten participar. El
procedimiento de aceptación de los intervalos de referencia es el siguiente: (Ho-
rowitz et al. 2010)
Para la interpretación de los resultados, el procedimiento consiste en deter-
minar si 2 individuos como máximo se encuentran fuera del rango del intervalo
de verificación, representando el 10%, indican que el intervalo propuesto es veri-
ficado. En el caso de que sean 3 o 4 individuos lo cual representaría el 15 y el 20%
estaría fuera del intervalo de referencia que se está verificando lo cual se tendría
que ensayar con 20 individuos ¨sanos¨ nuevamente. Por último, si los individuos
fueran más de 5, que sería el 25% fuera del intervalo, se tiene que establecer
nuevos intervalos de referencia. (Lazo, Y., López, A. 2015)
Las personas que intervienen para la determinación de un intervalo de refe-
rencia no necesariamente tienen que ser adultos jóvenes. De hecho, el grupo de
trabajo rechaza, en general, el concepto de un "patrón oro" inequívoco de jóve-
nes, adultos sanos y sugiere que los intervalos de referencia relacionados con la
edad, en muchos casos, pueden ser más clínicamente apropiados. Sin embargo,
el grupo de trabajo también reconoce que algunos cambios relacionados con la
edad en los valores de laboratorio pueden no representar una buena salud. (Ho-
rowitz et al. 2010)
El grupo de trabajo apoya firmemente el uso de técnicas de muestreo directo,
en el que las observaciones de los individuos se seleccionan de una población
de referencia utilizando criterios específicos, bien definidos. Cuando estos crite-
rios se aplican antes de que se recoja las muestras y se analizaron, se refiere
como a priori. Si se aplican estos mismos criterios después de la recogida de la
muestra, se denomina a posteriori. Sin embargo, el grupo de trabajo también
reconoce que, en algunas circunstancias (por ejemplo, pediatría), puede ser par-
ticularmente difícil de usar técnicas de muestreo directo. En estos casos, algunos
investigadores han defendido el uso de técnicas indirectas, en el que las perso-
nas no se consideran, pero ciertos métodos estadísticos son aplicados a los va-
lores en una base de datos. El grupo de trabajo no aprueba estos métodos como
enfoques primordiales para establecer los intervalos de referencia. (Horowitz et
al. 2010)
1.4. Amilasa
Son enzimas glucolíticas que hidrolizan los enlaces éter (glucósidicos) de las
cadenas de polisacáridos de las sustancias amiláceas, degradándolas a oligosa-
cáridos polisacáridos y monosacáridos que son más solubles en medio acuosos.
Se producen principalmente en las glándulas salivales (sobre todo en las glándu-
las parótidas) y en el páncreas. (Garrido, 2011)
La amilasa a su vez se clasifica en:
Alfa amilasa: cataliza la hidrolisis al azar los enlaces α 1,4 glucosídicos
de la región central de la cadena de amilosa y amilopectina exceptuando
las moléculas cercanas a la ramificación obteniendo como resultados
maltosa y oligosacáridos de varios tamaños.
Beta amilasa: Es una exoenzima que ataca a los enlaces α 1,4 glucosídi-
cos en la parte externa de la cadena del almidón, la β amilasa separa
unidades de maltosa a partir de los exámenes no reductores de esta por
hidrolisiis alterna de los enlaces glucosídicos.
La determinación de la α-amilasa juega un papel importante en la valoración
de las enfermedades del páncreas ya que éstas presentan síntomas clínicos
poco especifico .La α-amilasa se emplea sobre todo en el diagnóstico y segui-
miento de la pancreatitis aguda. La hiperamilasemia no sólo puede producirse en
la pancreatitis aguda o en la fase inflamatoria de la pancreatitis crónica, sino
también en la insuficiencia renal por filtración glomerular reducida, los tumores
pulmonares u ováricos, la neumonía, las afecciones de las glándulas salivales, la
cetoacidosis diabética, el trauma cerebral, así como en intervenciones quirúrgi-
cas o en caso de una macroamilasemia. Para confirmar la especificidad pancreá-
tica, se recomienda determinar adicionalmente otra enzima específica del pán-
creas, como la lipasa o la α-amilasa pancreática. (Roche, AMYL2. 2013)
Los numerosos métodos descritos para la determinación de la α-amilasa mi-
den la reducción del sustrato de forma viscosimétrica, turbidimétrica nefelométri-
ca o amiloclástica o bien registran la formación de productos de degradación por
sacarimetría o cinéticamente por reacciones sucesivas catalizadas por enzimas.
(Roche, AMYL2. 2013)
La β-amilasa es también sintetizada por bacterias, hongos y plantas. Los
tejidos animales no contienen β-amilasa, aunque puede estar presente en mi-
croorganismos saprófitos del tracto gastrointestinal. Tiene un pH óptimo de 12. El
procedimiento a nivel laboratorio es utilizar tres métodos distintos: – “salting out”
con sulfato de amonio – cromatografía en columna de DEAE-celulosa – filtración
en gel utilizando Sephadex G-200. El uso más importante es la producción de
jarabes y en la industria de la panificación, ya que hidrolizan el almidón y produ-
cen los azúcares (glucosa y maltosa). (Polo, D., Quituisaca, M. 2011)
1.5. Lipasa
Son enzimas lipolíticas, tienen como función principal catalizar la hidrólisis de
los triglicéridos liberando gliceroles. Es decir que, al hidrolizar las uniones de los
esteres de los triglicéridos, provocan que los productos creados puedan ser eli-
minados en un medio acuoso al ser más soluble. Los productos creados son
monoglicéridos, diglicéridos o gliceroles. Estas enzimas suelen requerir un pH
neutro o alcalino 7, 7.5 a 9. (Garrido, 2011)
Esta enzima en humanos se encuentra en la leche materna, la consideran
idéntica a la enzima colesterol estereasa, por lo que se supone que es de origen
pancreático y llega a las glándulas mamarias a través de la circulación sanguí-
nea. (Garrido, 2011)
A nivel internacional, la determinación de la actividad de la lipasa ha adquirido
mayor importancia gracias a su alta especificidad y su liberación rápida. Después
de una pancreatitis aguda, la actividad de la lipasa aumenta en el plazo de 4 a 8
horas, alcanza su máximo a las 24 horas y vuelve a disminuir tras 8 a 14 días.
Sin embargo, no existe correlación alguna entre la actividad de la lipasa determi-
nada en suero y el grado de la lesión pancreática. (Roche, LIPC. 2013)
Se han puntualizado considerables métodos para determinar la lipasa en los
que la disminución del substrato se mide por turbidimetría o nefelometría o se
comprueban los productos de degradación formados. (Roche, LIPC. 2013)
Capítulo IIMATERIALES Y MÉTODOS
Con la finalidad de verificar los intervalos de referencia de los parámetros
analíticos Amilasa y Lipasa sanguínea, se llevó a cabo lo siguiente:
2.1 Lugar de investigación
El estudio se realizó en el Laboratorio de diagnóstico clínico Lab-Centro
Illingworth de la ciudad de Guayaquil.
2.2 Período de la investigación
Enero a mayo 2017.
2.3 Universo
La población la conformaron 132 personas adultas de ambos sexos,
aparentemente sanas, que asistieron al laboratorio Illingworth durante el período
de estudio.
2.4 Muestra
La muestra está constituida por 20 personas seleccionadas en base a
criterios de exclusión, conforme a lo establecido en la Guía CLSI EP28- A3c
(2010).
2.5 Variables
Variable independiente: Intervalo de referencia.
Variable dependiente: Verificación del intervalo de referencia.
Variable interviniente: Pacientes aparentemente sanos que asisten a Lab-
centro Illingworth.
Tabla I: Operacionalización de las variables
VARIABLES CONCEPTUALIZA-CIÓN
INDICA-DOR UNIDADES
DEPENDIENTEVerificaciónde Intervalo
de referencia
Comprobar oconfirmar lo que
declaró el proveedorde reactivo, mediantecálculos que encierran
un porcentaje devalores específicospara una población.
Criterios dela CLSI
EP28A3c%
INDEPENDIEN-TE
Intervalo deReferencia
Conjunto de valo-res que se encuentranentre dos límites da-
dos.
Propuestopor el fabri-
canteU/L
Elaborado por: Garboa L. y Ochoa L.
2.6 Tipo de investigación
Se realizó un estudio transversal, prospectivo y observacional.
2.7 Diseño de la Investigación
No experimental
2.8 Técnicas de la investigación
2.8.1 Protocolo para la verificación de los valores de referencia
Selección de individuos de referencia
Técnicas de muestreo directo
Recolección y tratamiento de muestras sanguíneas
Determinación de Amilasa y Lipasa
Gestión del Intervalo de Referencia
2.8.2 Selección de individuos de referencia
La selección de la población de referencia se realizó mediante una encuesta
(ver anexo 2), que permitió averiguar algunas características de los participantes,
a los cuales se les dio a conocer los objetivos del trabajo a realizar, a fin de que
faciliten el consentimiento informado de intervenir en este estudio.
2.8.2.1 Criterios de Exclusión
Los criterios de exclusión que se tomaron en cuenta en el ensayo, son:
Tabla II: Criterios de exclusiónConsumo de alcohol Lactancia
Transfusión Obesidad
Presión sanguínea elevada Ocupación laboral
Abuso de drogas Anticonceptivos orales
Prescripción de drogas Embarazo
Factores genéticos Cirugía
Hospitalización reciente Consumo de tabaco
Enfermedad reciente Abuso de vitaminas
Fuente: Guía CLSI EP28-A3c 3era edición, octubre 2010
2.8.2.2 Índice de masa corporal
Con la finalidad de completar la información necesaria se obtuvieron de los
participantes sus medidas antropométricas como son el peso y la talla,
calculando así el IMC (índice de masa corporal) para saber si tienen o no un
peso aceptable utilizando la siguiente Tabla.
Tabla III: Índice de Masa Corporal
CATEGORÍA INTERVALO Kg/m2
Bajo peso ≤ 18,5Aceptable 18,5 - 24,9Sobrepeso ≥ 25Obesidad ≥ 30
Fuente: Organización Mundial de la Salud
2.8.3 Técnicas de muestreo directo
Para la realización de la encuesta, se empleó técnicas de muestreo directo,
que consiste en obtener la información proporcionada por el participante previo a
la recolección de la muestra sanguínea.
2.8.4 Recolección y tratamiento de muestra sanguínea
La persona estaba sentada, en una posición cómoda, recostada sobre el
espaldar; se seleccionó el sitio para la punción, que fue el brazo izquierdo del
individuo.
Las muestras sanguíneas se obtuvieron por punción venosa previo ayuno de
8 horas en tubos con sistema al vacío de 8,5 mL sin anti-coagulante, con gel y
activador de coagulación.
La muestra extraída se rotuló y coloco en gradilla, que luego fueron
trasportadas en un recipiente adecuado hasta el área de análisis.
Luego en una centrífuga verificada se procedió a separar el suero a 1042 g
durante 5 minutos a temperatura ambiente. El suero se analizó dentro del plazo
de 3 a 4 horas siguientes.
Las muestras fueron procesadas en el analizador automático modular
COBAS 6000, Roche. En cuanto los Reactivos y calibradores, son exclusivos del
fabricante correspondiente a este instrumento puesto que se trata de un equipo
cerrado.
2.8.5 Determinación de Amilasa y Lipasa
La determinación de los parámetros analíticos para el grupo de referencia se
realizó por los siguientes métodos:
2.8.5.1 Amilasa
El método se basa en el probado proceso de degradación del sustrato 4,6-
etilideno-(G7)-1,4-nitrofenil-(G1)-α,D-maltoheptaósido (Ethylidene Protected
Substrate = EPS) por la α-amilasa y la consecuente hidrólisis de todos los
productos de degradación a p-nitrofenol por la acción de la α-glucosidasa
(liberación del cromóforo del 100 %). Los resultados del método correlacionan
con los obtenidos por CLAR (cromatografía de líquidos de alta resolución).
(Roche, AMYL2. 2013)
El principio de la prueba se fundamenta en el test enzimático colorimétrico
conforme con lo estipulado por la IFCC. Los oligosacáridos definidos tales como
el 4,6-etilideno-(G7) p-nitrofenil-(G1)-α,D-maltoheptaósido (etilideno-G7PNP) se
desdoblan bajo la acción catalítica de la α-amilasa. La-glucosidasa actúa sobre
los fragmentos G2PNP, G3PNP y G4PNP así formados que se hidrolizan
entonces completamente a p-nitrofenol y glucosa. (Roche, AMYL2. 2013)
Esquema de reacción simplificado:
5etilideno − ) + 5 O α−amilasa⎯⎯⎯⎯ 2etilideno − + 2 + 2etilideno− + 2 PNP + etilideno −2 + 2 + + 14 α⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯⎯ +5 + 14 )
a) PNP ≜ p-nitrofenolb) G ≜glucosa
La intensidad cromática del p-nitrofenol formado, es directamente
proporcional a la actividad de la α-amilasa. Se determina midiendo el aumento
de la absorbancia. (Roche, AMYL. 2013).
2.8.5.2 Lipasa
El presente método se basa en el desdoblamiento de un substrato cromático
específico para la lipasa emulsionado con ácidos biliares, el éster 1,2-O-dilauril-
rac-glícero-3-ácido glutárico-(6-metilresorufina). El test comprueba
específicamente la actividad de la enzima pancreática combinando el ácido biliar
con la colipasa. En caso de ausencia de colipasa, la actividad de la lipasa es
prácticamente inexistente. La colipasa activa solamente la lipasa pancreática y
no las otras enzimas lipolíticas presentes en el suero. La alta proporción de
colatos garantiza que las esterasas presentes en el suero no pueden reaccionar
con el substrato cromático debido a la alta tensión negativa de la superficie.
(Roche, LIPC. 2013).
El principio de la prueba se fundamenta en el test enzimático colorimétrico
con éster de 1,2-O-dilauril-rac-glícero-3-ácido glutárico-(6-metilresorufina) como
substrato. El sustrato cromático de lipasa, el éster de 1,2-O-dilauril-rac-glícero-3-
ácido glutárico-(6-metilresorufina) es desdoblado bajo la acción catalítica de la
solución de lipasa alcalina formando 1,2-O-dilauril-rac-glicerol y un producto
intermedio inestable, el éster de ácido glutárico-(6-metilresorufina). En una
solución alcalina, éste se descompone espontáneamente para formar ácido
glutárico y metilresorufina. La adición de detergente y co-lipasa aumenta la
especificidad analítica para la lipasa pancreática. (Roche, LIPC. 2013).
Esquema de reacción simplificado:
é 1,2 − − − − í − 3 − á á− (6 − ) ⎯⎯⎯ é 1,2 − − − −− + á á − (6 )é á á− (6 − ) óá á á+
La intensidad cromática del colorante rojo formado es directamente
proporcional a la actividad de la lipasa y puede ser determinada
fotométricamente. (Roche, LIPC. 2013).
2.8.6 Gestión del intervalo de referencia.
Los datos han sido procesados utilizando la aplicación EP Evaluator versión
11 en periodo de prueba, (Data Innovations, 2017). Este software es un conjunto
de módulos estadísticos para la validación y verificación de métodos.
2.9 Equipos
Tabla IV: Equipos
DETALLE MARCA MODELO SERIE
Analizador de QuímicaClínica Hitachi Cobas 6000
C501 15J0-20
Centrífuga Clay Adams Dinac II 127084
Elaborado por: Garboa L. y Ochoa L.
Capítulo IIIRESULTADOS Y DISCUSIÓN
Los resultados obtenidos de las encuestas fueron organizados en una tabla
de datos que se presenta a continuación. Se realizaron 132 encuestas a
personas que acudieron al laboratorio y previamente aceptaron participar en el
estudio.
Tabla V: Resultados de las Encuestas
PREGUNTAS SI NO
1.- ¿Se considera usted una persona sana? 116 16
2.- ¿Hace usted ejercicios regularmente? 72 60
3.- ¿Ha estado enfermo recientemente? 26 106
4.- ¿Está tomando algún medicamento? 23 109
5.- ¿Sufre de hipertensión? 3 126
6.- ¿Está tomando suplementos vitamínicos? 19 113
7.- ¿Está expuesto a una sustancia química peligrosa en su trabajo? 12 120
8.- ¿Usted fuma? 13 119
9.- ¿Consume usted una dieta especial? 8 124
10.- ¿Usted bebe alcohol frecuentemente? 21 111
11.- ¿Actualmente se encuentra en cuidado de un médico? 11 121
12.- ¿Ha sido hospitalizado recientemente? 5 127
13.- ¿Existen trastornos de la salud hereditarios en su familia? 42 90
14.- ¿Ha tomado aspirina o cualquier otro medicamento para el dolor recientemente? 31 101
15.- ¿Ha tomado algún medicamento para el resfriado? 22 110
16.- ¿Ha tomado algún medicamento para la alergia? 27 105
17.- ¿Ha tomado antiácidos recientemente? 5 127
18.- ¿Está tomando usted píldoras para adelgazar? 3 129Elaborado por: Garboa L. y Ochoa L.
Gráfico I
De los 132 participantes, 76 fueron mujeres, a las cuales se les hicieron
preguntas específicas.
Tabla VI: Resultado de preguntas realizadas a mujeres
PREGUNTA PARA MUJERES SI NO1.- ¿Está menstruando? 31 452.- ¿Está usted en terapia de reemplazo hormonal? 0 763.- ¿Está embarazada? 0 764.- ¿Está dando de lactar? 0 765.- ¿Está usted usando implantes o anticonceptivos orales? 10 66
Elaborado por: Garboa. L y Ochoa. L
Gráfico II
0
50
100
150
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
Núm
ero
de p
erso
nas
Número de pregunta
Resultado de las Encuestas
SI NO
020406080
1 2 3 4 5
Núm
ero
de m
ujer
esen
cues
tada
s
Número de pregunta
Resultado de preguntas realizadas amujeres
SI
NO
Se seleccionaron 20 individuos potenciales de referencia, basados en los
resultados de la encuesta, de la evaluación de sus medidas antropométricas y de
la aplicación de los criterios de exclusión.
Los valores obtenidos de Amilasa, el número de orden dado por el laboratorio,
la edad y sexo de los participantes se muestran en la siguiente tabla.
Tabla VII: Datos analíticos de AmilasaSECUENCIA ORDEN EDAD /AÑOS SEXO RESULTADO
1 2219048 23 F 662 2222113 26 F 653 2219049 26 F 694 2215787 23 F 675 2215785 31 M 716 2215777 40 F 747 2215779 26 F 868 2215781 28 F 749 2215792 22 F 64
10 2215798 32 F 8411 2215853 25 M 8112 2216555 27 M 7013 2216953 37 M 8414 2220661 29 M 7415 2221975 23 M 5716 2222749 25 M 7317 2224517 23 F 6418 2224829 20 F 6119 2224841 24 M 4320 2224847 24 F 84
Elaborado por: Garboa L. y Ochoa L.
Gráfico III
La siguiente tabla muestra el intervalo de referencia de Amilasa propuesto por
el fabricante. De 20 seleccionados no se excluyó ni uno, demostrando que se
aprueba el 100% de los datos ya que no superó el 10% permitido de datos fuera.
Tabla VIII: IR Amilasa
Intervalo de Referencia AmilasaPropuesto 28 a 100 U/LResultados (Total/Excl) 20/0Max/Obs fuera 10,0%/0,0%Pasa Si
Fuente: EP Evaluator (Anexo 3)
La siguiente tabla muestra el análisis estadístico de los resultados obtenidos
para Amilasa, donde se observa el intervalo para el grupo de referencia.
Tabla IX: Análisis estadístico de los resultados de Amilasa
Análisis estadísticoMedia 70,5 U/LSD 10,6Mediana 70,5Rango 43 a 86Fuente: EP Evaluator (Anexo 3)
020406080
100
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
Amila
sa (U
/l)
Individuos de referencia
Dispersión de los datos analíticos deAmilasa
Resultados
En la verificación del intervalo de referencia para amilasa, la distribución de
los resultados sigue una distribución paramétrica.
Tabla: X Distribución de losResultados de Amilasa
Intervalo Percent Count< 28 0 0
28 - 37 0 038 - 47 5 148 - 58 5 159 - 69 35 770 - 80 30 681 - 90 25 5
91 - 100 0 0> 100 0 0
Gráfico IVHistograma de frecuencia de
Amilasa
Fuente: EP Evaluator (Anexo 3)Fuente: EP Evaluator (Anexo 3)
Los resultados de Lipasa se muestran en la siguiente tabla:
Tabla: XI Datos analíticos de LipasaSECUENCIA ORDEN EDAD /AÑOS SEXO RESULTADOS
1 2219048 23 F 292 2222113 26 F 223 2219049 26 F 254 2215787 23 F 375 2215785 31 M 376 2215777 40 F 267 2215779 26 F 348 2215781 28 F 269 2215792 22 F 31
10 2215798 32 F 3211 2215853 25 M 2212 2216555 27 M 2913 2216953 37 M 3014 2220661 29 M 2415 2221975 23 M 2516 2222749 25 M 5417 2224517 23 F 4518 2224829 20 F 3219 2224841 24 M 1820 2224847 24 F 27
Elaborado por: Garboa L. y Ochoa L.
Gráfico V
La siguiente tabla muestra el intervalo de referencia de Lipasa propuesto por
el fabricante. De 20 seleccionados no se excluyó ni uno, demostrando que se
aprueba el 100% de los datos ya que no superó el 10% permitido de datos fuera.
Tabla: XII IR Lipasa
Intervalo de Referencia LipasaPropuesto 13 a 60 U/LResultados (Total/Excl) 20/0Max/Obs fuera 10,0%/0,0%Pasa Si
Fuente: EP Evaluator (Anexo 4)
La siguiente tabla muestra el análisis estadístico de los resultados obtenidos
para Lipasa, donde se observa el intervalo para el grupo de referencia.
Tabla: XIII Análisis estadísticos de los resultados de Lipasa
Análisis estadísticoMedia 30,3 U/LSD 8,3Mediana 29Rango 18 a 54Fuente: EP Evaluator (Anexo 4)
0
20
40
60
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
Lipa
sa (U
/l)
Individuo de referencia
Dispersión de los datos analíticos deLipasa
RESULTADOS
En la verificación del intervalo de referencia para Lipasa, la distribución de los
resultados sigue una distribución paramétrica.
Tabla: XIV Distribución de losResultados de Lipasa
Distribución de los ResultadosIntervalo Percent Count
< 13 0 013 - 19 5 120 - 26 35 727 - 33 35 734 - 40 15 341 - 47 5 148 - 54 5 155 - 60 0 0
> 60 0 0Fuente: EP Evaluator (Anexo 4)
Gráfico VIHistograma de frecuencia de
Lipasa
Fuente: EP Evaluator (Anexo 4)
CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados obtenidos, el Intervalo de Referencia propuesto
por el fabricante es válido para ser utilizado en el laboratorio Lab-Centro
Illingworth para que sea reportado dentro de los informes.
Se analizaron los valores de Amilasa dando como resultado un intervalo de
43 – 86 U/L y para Lipasa 18 – 54 U/L, no se hallaron valores atípicos que
cayeran fuera de los intervalos propuestos por el fabricante.
Los resultados obtenidos permitieron determinar con seguridad que los
intervalos de referencia son aplicables a la población en estudio, ya que no
mostraron variación entre los datos obtenidos de los intervalos propuestos por el
fabricante.
RECOMENDACIONES
Cada laboratorio debe comprobar si los intervalos de referencia pueden
aplicarse a su grupo de pacientes, de caso contrario debería establecer sus
propios valores.
Se debería realizar un estudio multicéntrico a gran escala con el fin de
establecer Intervalos de Referencia propios a nuestra población.
Sería recomendable que en próximos estudios con relación al tema que
también se estudie a efecto de ver si existen diferencias significativas entre el
hombre, mujer y edad.
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http://alcoy.san.gva.es/laboratorio/Web/Teoria%20valores%20referencia.pdf
ANEXO # 1CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
TEMA: Verificación de intervalos de referencia de las determinaciones de
Amilasa y Lipasa en Laboratorio Lab-Centro Illingworth.
ACTIVIDADESREALIZADAS
2016 2017
OC
TUB
RE
NO
VIEM
BR
E
DIC
IEM
BR
E
ENER
O
FEB
RER
O
MA
RZO
AB
RIL
MA
YO
JUN
IO
Realización de lasencuestas X X X X X
Recolección demuestras X X X X X
Toma de medidasantropométricas X X X X X
Procesamiento delas muestras X X X X X
Tabulación de lasencuestas X X X
Tratamiento de losresultados X
Elaborado por: Garboa L. y Ochoa L.
ANEXO # 2Encuesta realizada a las personas que aceptaron participar en el
estudio.TODA LA INFORMACIÓN SOLICITADA ES ESTRICTAMENTE CONFIDENCIAL Y SE USA EXCLUSIVA-MENTE PARA VERIFICAR ITERVALOS DE REFERENCIA PARA EL DIAGNÓSTICO DE LAS ENFERME-DADES DE LA POBLACION QUE ASISTE AL LABORATORIO. GUAYAQUIL, ECUADOR.PACIENTE I.D# MUESTRA #NOMBRE: TELÉFONO
APELLIDOS NOMBRE
DIRECCIÓN:PROVINCIA CANTÓN DOMICILIO
EDAD SEXO M F RAZAALTURA PESOOCUPACIÓNNOMBRE DEL MÉDICO¿SE CONSIDERA USTED UNA PERSONA SANA? SI NO¿HACE USTED EJERCICIOS REGULARMENTE? SI NOSI ES ASÍ ¿CON QUE FRECUENCIA?¿CON QUE GRADO DE DIFICULTAD? BAJO 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 VIGOROSO¿HA ESTADO ENFERMO RECIENTEMENTE? SI NOSI ES ASÍ, ¿CUÁNDO? ¿QUÉ TUVO?¿ESTÁ TOMANDO ALGÚN MEDICAMENTO? SI NO¿CUÁL?¿SUFRE DE HIPERTENSIÓN? SI NO¿ESTÁ TOMANDO SUPLEMENTOS VITAMÍNICOS? SI NOSI ES ASÍ, ¿CUÁL?¿ESTÁ EXPUESTO A UNA SUSTANCIA QUÍMICA PELIGROSA EN SU TRABAJO? SI NOSI ES ASÍ, ¿CUÁL?¿USTED FUMA? SI NO¿CON QUÉ FRECUENCIA?¿CONSUME USTED UNA DIETA ESPECIAL? SI NOSI ES ASÍ POR FAVOR DESCRÍBALA¿USTED BEBE ALCOHOL FRECUENTEMENTE? SI NOSI ASÍ ES, ¿CON QUE FRECUENCIA?¿ACTUALMENTE SE ENCUENTRA EN CUIDADO MÉDICO SI NOSI ES ASÍ, ¿POR QUÉ?¿HA SIDO HOSPITALIZADO RECIENTEMENTE? SI NOSI ES ASÍ, ¿POR QUÉ? ¿CUÁNDO?¿EXISTEN TRASTORNOS DE SALUD HEREDITARIOS EN SU FAMILIA? SI NOSI ASÍ ES, DESCRÍBALA¿HA TOMADO ASPIRINA O CUALQUIER OTRO MEDICAMENTO PARA SIEL DOLOR RECIENTEMENTE?
NO
SI ES ASÍ, ¿CUÁL? ¿CUÁNDO?¿HA TOMADO ALGÚN MEDICAMENTO PARA EL RESFRIADO? SI NOSI ES ASÍ, ¿CUÁL? ¿CUÁNDO?¿HA TOMADO ALGÚN MEDICAMENTO PARA LA ALERGIA? SI NOSI ES ASÍ, ¿CUÁL? ¿CUÁNDO?¿HA TOMADO ANTIÁCIDOS RECIENTEMENTE? SI NOSI ES ASÍ, ¿CUÁL? ¿CUÁNDO?¿ESTÁ TOMANDO USTED PÍLDORAS PARA ADELGAZAR? SI NOPARA MUJERES¿ESTÁ MENSTRUANDO? SI NOSI ES ASÍ, ¿CUÁNDO?¿CUÁNDO FUE SU ÚLTIMO PERÍODO?¿ESTÁ USTED EN TERAPIAS DE REEMPLAZO HORMONAL? SI NO¿ESTÁ EMBARAZADA? SI NOSI ES ASÍ, CUÁNDO ES SU FECHA DE PARTO¿ESTÁ DANDO DE LACTAR? SI NO¿ESTÁ USTED USANDO IMPLANTES O ANTICONCEPTIVOS ORALES SI NO
Fuente: Horowitz et al. 2010
CONSENTIMIENTO:
Yo, _____________________________ con CI# _________________ autorizo a Lab-
Centro Illingworth a utilizar mi muestra con fines mencionados en el encabezado.
ANEXO # 3
Reporte de la aplicación EP Evaluator
ANEXO # 4Reporte de la aplicación EP Evaluator
