Alergia Diagnostico

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    20-Jul-2016
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  • ALERGIA MECANISMOS INMUNOLOGICOS METODOS DE DIAGNOSTICODr. Edgar Matos BenavidesInmunologo Alergologo

  • PREVALENCIA DE LAS ENFERMEDADES ALERGICASEN LA POBLACION PEDIATRICA GENERAL

    En la actualidad se estima que: un 3% de los nios son alrgicos a alimentos un 8 % presentan dermatitis atpica entre un 8 % y un 10% padecen asma casi un 20 % sufren de rinitis o rinoconjuntivitis.

  • La mitad de la poblacin mundial ser alrgica en 2050

    El Pas, martes 24 de junio de 2003

  • ENFERMEDAD ALERGICA: ETIOLOGIAPredisposicinGENETICAExposicin aALERGENOSENFERMEDAD ALERGICACONTAMINACIONHUMO TABACOVIRUS-BACTERIAS

  • ALERGIA Reaccin exagerada de defensa a una sustancia particular, que puede ser inhalada, ingerida o inoculada en nuestro cuerpo y provocar una respuesta inmunolgica de tipo inflamatorio.

  • Alergia una Enfermedad Sistmica RINITIS ALERGICACONJUNTIVITISSINUSITISOTITISRGEALERGIA ALIMENTARIADERMATITIS ATOPICAASMA BRONQUIAL AlergiaURTICARIAANGIOEDEMAPRURIGO PORINSECTOS

  • histamina,factor quimiotctico de los eosinfilosfactor quimiotctico de los neutrfilosleucotrienos prostaglandinas y tromboxanos factor activador de las plaquetas IL- 4 e IL- 5 vasodilatacin aumento de la permeabilidad vascular postcapilar edema contraccin de la musculatura lisa aumento de la secrecin de las glndulas mucosas

  • Componentes principales que se requieren para que la reaccin alrgica se desencadene

    IgE

    ALERGENOS

    Mastocitos

    HistaminaLeucotrienos

  • 1Identificar y relacionar la clnica del paciente con los posibles alrgenos: HISTORIA CLNICA Etapas diagnsticas2Demostracin de sensibilizacin mediada por IgE para el o los alergenos sospechoso:P CUTNEA, IgE SRICA ESPECFICA3Confirmacin de que el alrgeno es el responsable de la clnica:P de PROVOCACION o EXPOSICIN CONTROLADATEST DE ACTIBACION DE BASOFILOS

  • PRUEBA CUTANEA INTRAEPIDERMICA

  • PRUEBA CUTANEA INTRAEPIDERMICA+Dimetro 3 mm15 minutos

  • solo estn indicadas en el estudio de la alergia medicamentosa y venenos

  • Prick-Film. Lectura de prick test con Escner

  • Prick-Film. Lectura de prick test con Escner

  • Aplicacin Alergenos Puncin con LancetaSecado Piel Espera de Reaccin

    Contorneado de Habones Traslado a Hoja Codificada Lectura Escner Impresin Resultados

  • FUNDAMENTO RIDA.pdfLa prueba se basa en el principio del anlisis del immunoblot. Los alrgenos especiales estn pegados a la superficie de las membranas de la nitrocelulosa que se colocan en un canal de reaccin. .

  • Comparacin con el mtodo de referencia (IgE):Comparacin con el skin-prick test:Sensibilidad: 84.3 %Sensibilidad: 95.1 %

  • FUNDAMENTO immulite.pdfIMMULITE 2500 3gAllergy IgE Especfica es un anlisis enzimoinmunomtrico quimioluminiscente en fase slida, en dos pasos, Se basa en cinticas en fase lquida en formato de bola10,11 . Representa un avance significativo sobre los mtodos convencionales basados en la unin de los alrgenos a un soporte slido, como los discos de papel. Los alrgenos se unen covalentemente a una matriz polmero/copolmero soluble, la cual a su vez est marcada con un ligando. El uso de un copolmero aminoacdico aumenta la cantidad de alrgeno que puede soportar la matriz.

  • FUNDAMENTOUNICAPSYSTEM.docUniCAP IgE total es un anlisis cuantitativo in vitro para la medida de IgE total en muestras humanas del suero o del plasma. Anti-IgE, covalente unida a ImmunoCAP, reacciona con el IgE total en el espcimen paciente.Se los anticuerpos contra IgE marcados con una enzima se agregan para formar un complejo. Se agrega una solucin de desarrollo y una para parar la reaccin.Despus de parar la reaccin, la fluorescencia se mide. La fluorescencia es directamente proporcional con la concentracin de IgE en la muestra..

  • Tecnologa ImmunoCAP CAP SystemImmunoCAP

  • ImmunoCAPCapacidad de ligando: tubo recubierto; disco papel; esponja celulosa

    TuborecubiertoImmunoCAPDisco papelactivadoEsponja celulosaactivada150150 Fases slidas:

  • IgE del paciente

    Alergenos (Anti-IgE acoplado al ImmunoCAP)

    Anti-IgE paciente unido a enzima -GalactosidasaComplejo: Alergeno-IgE paciente

    Sustrato de la enzima -GalactosidasaComplejo: Alergeno-IgE paciente-Anti-IgE

    Reaccin enzimtica: -Galactosidasa

    Sustrato no fluorescente Sustrato fluorescente DeteccinFEIA: Fluoroenzimoimmunoensayo

  • N. Liappis, A. Starke, Allergologie, Jahrgang 20; no 6/1997: 291-295Reproducibilidad del Sistema ImmunoCAP

  • Patrn WHO 75/502 Tecnologa ImmunoCAPEl primer test alergolgico del mundo con calibracindirecta segn patrones 2 IRP WHO 75/502 pera IgE.

  • Similitudes y diferencias entre la tecnologa Phadia ImmunoCAPin vitro y la prueba cutnea in vivo Referencia: From In Vitro Veritas Broschyre

  • IG E Especifica

  • Tests de screening

  • Tests de screening

  • Tests de screening

  • Tests de screening

  • Tests de screening

  • 1.-La identificacin precoz de los nios que padecern asma persistente es de capital importancia2.-La atopia es el principal factor de riesgo en el padecimiento de asma

    3.-Es posible reconocer la atopia, desde muy temprana edad, identificando la sensibilizacin a alimentos y a inhalantes4.-En nios con dermatitis atpica, la presencia de esta sensibilizacin tiene un alto valor pronstico de evolucin futura a asmaConclusiones

  • 1Identificar y relacionar la clnica del paciente con los posibles alrgenos: HISTORIA CLNICA Etapas diagnsticas2Demostracin de sensibilizacin mediada por IgE para el o los alergenos sospechoso:P CUTNEA, IgE SRICA ESPECFICA3Confirmacin de que el alrgeno es el responsable de la clnica:P de PROVOCACION o EXPOSICIN CONTROLADATEST DE ACTIBACION DE BASOFILOS

  • COMO SE Dx ALERGIAS2PRUEBAS CUTANEASIg E Srica

    1 HISTORIA CLINICA

    3PRUEBAS DE PROVOCACIONTEST DE ACTIVACION BASOFILOS

    BASOFILOS

    TAB

  • CITOMETRIA DE FLUJO

  • CITOMETRIA DE FLUJOProcedimiento que mide caractersticas de dispersin y fluorescencia que poseen las clulas conforme pasan por un rayo de luzLas clulas interaccionan con un rayo de luz causando dispersin dependiendo del tamao y la complejidad

  • CITOMETRIA DE FLUJODIGITALIZACION REPRESENTACION GRAFICA ANALISIS

  • Test de Activacion de Basofilos (TAB)Es una herramienta til en el diagnstico in vitro de las reacciones de hipersensibilidad inmediata a los Alergenos, Medicamentos, si estas son causados por mecanismos dependientes de IgE u otros mecanismos que conduzcan a la liberacin de histamina.

  • MARCADORES CELULARESCD63CD203cEs una protena granular tetraespan de 53 Kda Est anclada en los grnulos de la membrana de los basfilos Por CM se detecta Anti CD63 PE y anti IgE FITC

    Es un Ag de superficie, expresado en basfilos humanos recientemente reconocida por el Acm 97A6Es una ectoenzima multifuncional llamada pirofosfatasa ectonucleotide phophodiesterase 3 (E-NPP3)

  • La poblacin celular de inters se marca con anticuerpos monoclonales en presencia del alrgeno. Previamente al anlisis por citometra de flujo, los eritrocitos se someten a lisis. A continuacin se excluyen los linfocitos T (clulas positivas CD3) y despus se analizan los basfilos utilizando la expresin de CRTH2 y CD203c. Los basfilos no activados y en reposo se identifican como CRTH2posCD203cdimCD3neg, mientras que los basfilos activados in vitro se identifican como CRTH2posCD203cbrightCD3neg. FUNDAMENTO

  • muestra

  • TEST DE ACTIVACIN DE BASFILOS USANDO CD203C VERSUS PRUEBAS CUTANEAS EN LA DETERMINACION DE REACCIONES ADVERSAS A METAMIZOL: UN ESTUDIO PILOTO

    Matos Edgar1, Loyola-Sosa Steev1,2, Paredes Jos1, Inocente Rosario1, Paiva Mario1, Ros Hugo1, lvarez Marco11 Instituto de Hemafresis y Terapia Celular (IHEMATEC)2 Universidad Peruana Cayetano Heredia

  • Mtodos y MaterialesParticiparon 40 pacientes: 75.0% (30/40) con historia clnica positiva.

    Historia Clnica de RAM AINEAINE no MetamizolMetamizolPruebas CutneasTest de Activacin de Basfilos CD203cPrick TestIntradermorreaccin

  • Resultados% sensibilizacin por RAM a Metamizol (30/40) segn:Prick Test: 0.0% (0/30)Intradermorreacin: 3.3% (1/30)TAB CD203c: 13.3% (4/30)

    PRUEBAS CUTNEASPrick TestIntradermorreacinTAB CD203cPositivoNegativoPositivoNegativoPositivo04 (FN)13 (FN)Negativo036036TOTAL040139

  • ResultadosPT vs. TAB-CD203c:Sensibilidad: 0.0%Especificidad: 100.00% Valor Predictivo Negativo: 90.0%IR vs. TAC-CD203c:Sensibilidad: 25.0%Especificidad: 100.00% Valor Predictivo Negativo: 92.3%Valor Predictivo Positivo: 100.0%

  • ConclusionesSe tiene exitosamente una primera fase de evaluacin de desempeo del TAB-CD203c.TAB-CD203c presenta mejor performance para determinar alergia a frmacos; tipo Metamizol, frente a pruebas cutneas. Es necesario realizar estudios que evalen el costo-beneficio del uso del TAB-CD203c.

  • DISCUSIONLa BAT constituye una herramienta diagnstica valiosa de inters en el estudio de reacciones de hipersensibilidad inmediata a los medicamentos. Reproduce in vitro mecanismos de hipersensibilidad involucrados en reacciones alrgicas inmediatas.Tambin permite el diagnstico de reacciones alrgicas y pseudoalrgicas, particularmente por medicamentos que a menudo no son detectables por tcnicas serolgicas como la determinacin de IgE especfica.

  • DISCUSIONLa reproducibilidad intra-ensayo es muy notable en la alergia a medicamentos con coeficiente de variacin intra-ensayo de 0.89 (P