practica de bromatologia

INFORME N°1 BROMATOLOGIA USP

PRACTICA N°1

“DETERMINACION DEL NUMERO TOTAL DE BACTERIAS DE UNA MUESTRA”

FUNDAMENTO

Se trata de conocer el número total de microorganismos presentes en la muestra . Este número

no guarda relación con el de microorganismos patógenos por lo que no puede usarse como

índice de su presencia y sólo debe considerarse un indicador de las características higiénicas

generales del alimento.

Para observar las bacterias teñidas, hay que proceder previamente a su fijación. Puesto que la inmensa

mayoría de las bacterias son incoloras, la única forma de observarlas bien en el microscopio óptico

consiste en incrementar su contraste. Esto se consigue mediante su teñido con colorantes o mediante la

disposición de una óptica especial de contraste.

OBJETIVOS

Emplear las técnicas para la determinación del número total de bacterias en una

muestra.

Realizar la lectura microscópica correspondiente.

Realizar los cálculos matemáticos respectivos para la determinación.

Emplear la técnica correspondiente para la tinción utilizada en la observación

microscópica.

OLAYA ORTIZ TRICSY DAYAN MBLGO : DANILO ABANTO IBAÑEZ

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MATERIALES Y EQUIPO

Chaqueta

Guantes

Laminas

Marcador

Papel toalla

Regla

Asa bacteriológica milimetrada

Aceite de inmersión

Microscopio

REACTIVO

Tinción Gram

MUESTRA

Cebada

PROCEDIMIENTO O TECNICA

1. Limpiamos y ordenamos nuestra mesa de trabajo.

2. Procedemos con un marcador dibujar un cuadrado (1cm)en medio de la lamina

3. Se realizó el extendido con el asa bacteriológica colocamos una gota en el cuadrado

que habíamos dibujado dejamos secar , para su coloración

4. La coloración que utilizamos fue tinción Gram.

5. Luego de coloreada se observó en el microscopio utilizando objetivo de 100x

RESULTADOS

Luego de haber hecho la respectiva lectura , se obtuvieron los siguientes resultados ,

en esta práctica utilizamos la siguiente formula.


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Lo que pude contar fueron 2 colonias

FM = Factor microscópico

FM = AE (área de extensión)

ACM (área de concentración de la muestra)

AE = 1 cm2 = 100 mm2

ACM = π r2

ACM = 3.1416 x 0.09

= 0.025434

FM = 100

0.025434.----trabaje con 0.025

FM = 4000mm2

X = media del número de bacterias contadas

X = # cel contadas

10 campos

Mi número de colonias fue 0.2 colonias /campo

V = volumen de la muestra por asa bacteriológica

El volumen fue de 0.001

DISCUSIONES

No hubo , un buen conteo de bacterias en la muestra , por lo que se barrió al hacer

los lavados / no penetro muy bien la coloración empelada o también por que la


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Bac/ml = FM . X . V

N° Bact/ml = FM . X . V

= 4000 x0.2 x 0.001

= 0.8 bact/ml


muestra estaba limpia . y esto pudo deberse a que el extendido no tuvo un secado

correcto.

CONCLUSIONES

Esta práctica ayudo mucho a ampliar mis conocimientos acerca de del conteo del

número total de bacterias en una muestra.

BIBLIOGRAFIA

http://bagginis.blogspot.pe/2014/07/guia-practica-del-laboratorio.html


4


http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20general/12-metodos%20de%20recuento.htm

ANEXOS


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A1 :CHAQUETA A2:GUANTES

A3: TINCION GRAM A4: MICROSCOPIO

A5 : ASAS CALIBRADAS


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A6: MARCADOR A7: PAPEL TOALLA

A7: ACEITE DE INMERSION A8: LAMINAS

A8 : CEBADA

PRACTICA N°2

EVALUACION DE LA CALIDAD DE LA LECHE POR L A PRUEBA DE REDUCCION – PRUEBA DE AZUL DE METILENO

FUNDAMENTO

la mayoría de los gérmenes de la leche elaboran reductasas que modifican el potencial de óxido-

reducción de la misma. Para demostrar ese fenómeno basta añadir a la leche una sustancia que

se decolore al pasar de la forma oxidada a la forma reducida. La rapidez con que cambia de

color está en función de la población bacteriana y, por ello, puede ser un índice del grado de OLAYA ORTIZ TRICSY DAYAN MBLGO : DANILO ABANTO IBAÑEZ

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contaminación de la leche. El colorante más empleado es el azul de metileno, pero también se

pueden utilizar la resazurina y el cloruro de 2, 3, 5, trifenil-tetrazolium, ya que son colorantes

fácilmente absorbibles por las células vivas.

La reducción del azul de metileno es un método indirecto de estimar el contenido bacteriano

y se relacione con la calidad ,se observa únicamente con qué rapidez el colorante añadido a la

leche , se transforma con el hidrogeno de las sustancias nutritivas y por las enzimas

bacterianas en leucobase incolora .

En general se admite que la decoloración es más rápida cuanto mayor es el número de

microorganismos en la leche. Sin embargo, las bacterias presentan distinta habilidad para reducir

el azul de metileno, así el Streptococcus liquefaciens, los gérmenes del grupo coliaerógenos y

los de la putrefacción (Bacillus subtilis) se muestran muy activos. Las células somáticas

presentes en la leche también influye mucho en la velocidad de decoloración, sobretodo los

leucocitos.

La reducción del azul de metileno es un método indirecto de estimar el contenido bacteriano

y se relacione con la calidad ,se observa únicamente con qué rapidez el colorante añadido a la

leche , se transforma con el hidrogeno de las sustancias nutritivas y por las enzimas

bacterianas en leucobase incolora .

Cuando más bacterias reductoras haya en la leche, tanto más rápidamente se realiza el

cambio de color.

El tiempo de reducción se expresa en horas desde el inicio de la incubación hasta la

decoloración completa.

CALIFICACION DE L A LECHE:

Leche Muy buena: más de 4 horas

i. Leche Buena: 3-4 horas

ii. Aceptable: Más de 30 minutos a menos de 3 horas

iii. Mala: Menos de 30 minutos

OBJETIVOS


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Determinar la calidad de una muestra de leche , midiendo el intervalo de tiempo

requerido para decoloración de una mezcla colorante leche color azul , hasta el

blanco

MATERIALES Y EQUIPOS

Guantes

Chaqueta

Tubos 16x 150 tapa rosca

Gradilla

Mechero

REACTVO

Azul de metileno

Solución fisiológica 0.02%

MUESTRA

Leche del mercado modelo

PROCEDMIENTO O TECNICA

1) Colocamos nuestro material de trabajo en la mesa

2) Procedemos a rotular los tubos con (P) problema (+) control positivo (-) control

negativo.

3) Los tubos ya rotulados los colocamos en la gradilla.

4) A los cada uno de los tubos le pipeteamos la cantidad de 10 militros de leche. al tubo

del control negativo se le coloca 1ml de agua destilada; tubo problema y tubo

positivo se le agrega 1 ml de azul de metileno . luego de haber colocado

rápidamente taparlos.

5) Lo colocamos en el mechero a los dos tubos (tubo problema y tubo positivo ) hasta

que de un pequeño hervor.

6) Observamos la reacción.

RESULTADOS

TUBO PROBLEMA

Después de 10 minutos de reposo se observó que cambio de Solución azul a blanco


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TUBO CONTROL NEGATIVO

Solución blanca

TUBO CONTROL POSITIVO

También cambio el color de azul a blanco

R1: Tres tubos con sus respectivas muestras R2: tubos decolorados

DISCUSIONES

CONCLUSIONES


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BIBLIOGRAFIA

o http://ocw.um.es/cc.-de-la-salud/higiene-inspeccion-y-control-alimentario/

practicas-1/practica-2-determinacion-de-la-calidad-higienica


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ANEXOS


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A1: chaqueta A2: Guantes

A3: Gradilla A4: Tubos 16x 150 tapa rosca

A5: leche del mercado modelo


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A6: Azul de Metileno A7: Agua destilada

A8: Marcador A9: Mechero


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http://www.greensolutionscr.com/image/cache/data/D%C2%B4Notas/marcador%20permanente-500x500.jpg

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