Manual de Bioquimica

El Manual de Prcticas de Laboratorio de Bioqumica, es una obra diseada y creada en la Universidad Pedaggica de El Salvador. En la modificacin y diseo de esta obra intervinieron:

Lic. Carlos Garca Navarro (Docente de la Universidad Pedaggica de El Salvador) Juan Carlos Prez Majano (Laboratorista de la Universidad Pedaggica de El Salvador)

Manual de Prcticas de

Laboratorio de Bioqumica

Presentacin

La bioqumica es la ciencia que estudia la composicin qumica de los seres

vivos, especialmente las protenas, carbohidratos, lpidos y cidos nucleicos,

adems de otras pequeas molculas presentes en las clulas y las

reacciones qumicas que sufren estos compuestos que les permiten obtener

energa y generar biomolculas propias. La bioqumica se basa en el concepto

de que todo ser vivo contiene carbono y en general las molculas biolgicas

estn compuestas principalmente de carbono, hidrgeno, oxgeno,

nitrgeno, fsforo y azufre. Es la ciencia que estudia la base qumica de la

vida: las molculas que componen las clulas y los tejidos, que catalizan las

reacciones qumicas del metabolismo celular como la digestin, la

fotosntesis y la inmunidad, entre otras.

El Manual Prcticas de Laboratorio de Bioqumica, es un material didctico

que presenta una serie de experimentos, en los cuales podrs realizar

muchas experiencias como Carbohidratos, Lpidos, Protenas, otras.

Prcticas de Laboratorio de Bioqumica, esta diseado de acuerdo al

Programa de Estudio, cubriendo todas las unidades y objetivos planteados.

Las prcticas podrn realizarse de forma segura acatando las normas y reglas

de uso de laboratorio.

Para que el trabajo de laboratorio sea eficaz por favor tomar en cuenta las

recomendaciones de tu docente.

Esperando que este manual sea de mucha utilidad a los estudiantes que

realizan las prcticas de laboratorio y que de alguna manera logren

comprender las Ciencias Naturales.

"Los conceptos y principios fundamentales de la ciencia son invenciones

libres del espritu humano "Albert Einstein

ndice

Contenido Pg.

Introduccin

4 5

Reglamento interno de Laboratorio de

Qumica y Biologa

6 7

Recomendaciones generales del trabajo en el

laboratorio

8 9

Prctica 1

Carbohidratos: Prueba para azucares reductores y no reductores. Parte I

10 15

Prctica 2

Carbohidratos: Reacciones de Hidrlisis (Almidn y Sacarosa). Parte II

16 20

Prctica 3

Lpidos 21 28

Prctica 4

Protenas: Desnaturalizacin, prueba de Biuret y Xantoprotica.

29 37

Prctica 5

Extraccin de ADN (cido Desoxirribonucleico)

38 41

Prctica 6

Obtencin de pectinas 42 46

Bibliografa 47

Universidad Pedaggica de El Salvador Facultad de Educacin

Escuela de Ciencias Naturales y Exactas

4 Manual de Prcticas de Laboratorio Bioqumica

INTRODUCCIN

La bioqumica estudia la base molecular de la vida. En los procesos vitales

interaccionan un gran nmero de substancias de alto peso molecular o

macromolculas con compuestos de menor tamao, dando por resultado un

nmero muy grande de reacciones coordinadas que producen la energa que

necesita la clula para vivir, la sntesis de todos los componentes de los

organismos vivos y la reproduccin celular.

Al conjunto de reacciones que suceden dentro de los seres vivos se le llama

metabolismo.

Actualmente se conoce a detalle la estructura tridimensional de las

macromolculas de mayor importancia biolgica, los cidos nucleicos y las

protenas, lo que ha permitido entender a nivel molecular sus funciones

biolgicas.

Gracias al conocimiento de la estructura de los cidos nucleicos, se

esclarecieron los mecanismos de transmisin de la informacin gentica de

generacin a generacin, y tambin los mecanismos de expresin de esa

informacin, la cual determina las propiedades y funciones de las clulas, los

tejidos, los rganos y los organismos completos.

Conocer a detalle la estructura de varias protenas ha sido muy til en la

especificacin de los mecanismos de las reacciones enzimticas.

Prcticamente todas las reacciones que integran el metabolismo son

reacciones enzimticas.

El tipo de especie qumica y los mecanismos de accin que intervienen en el

almacenamiento, replicacin y transferencia de la informacin gentica, as

como las reacciones que forman el metabolismo son prcticamente




idnticos, desde las bacterias hasta los organismos superiores. No todas las

clulas contienen y expresan la misma informacin, pero las reacciones que

s llevan a cabo, utilizan enzimas prcticamente idnticas. De hecho las

diferencias y similitudes entre ellas se han utilizado para establecer la

secuencia de aparicin de las especies. Los virus tienen algunas variantes, por

ejemplo; los cromosomas de los retrovirus estn constituidos por molculas

de ARN y en algunos fagos (virus que atacan a las bacterias) tienen ADN de

una sola cadena. Los virus no cuentan con un metabolismo que les permita

vivir en forma autnoma, slo se pueden reproducir y expresarse dentro de

las clulas que invaden.

Las reacciones que constituyen el metabolismo estn localizadas en

determinadas estructuras celulares que forman unidades discretas que se

llaman organelos. Las reacciones se llevan a cabo en los lugares en donde se

encuentran las enzimas que las catalizan. La clula no es un saco sin

estructura, sino que es un sistema muy complejo y altamente organizado. En

la subseccin 1.1.2, denominada Citologa, se encontrar la descripcin de las

estructuras celulares.

En seguida vamos a presentar la informacin ms relevante, para la

toxicologa, sobre las macromolculas biolgicas en lo que se refiere a su

estructura y funcin. Frecuentemente se mencionar la localizacin dentro

de la clula de los sitios donde se sintetizan y actan.




Reglamento Interno de Laboratorio de Qumica y Biologa

1. Cada grupo de laboratorio es atendido por el profesor de la ctedra,

quien es el responsable del buen desarrollo de las prcticas y del

cuidado del equipo de laboratorio.

2. El laboratorista entregar a cada grupo el equipo de laboratorio

correspondiente a la prctica a ejecutarse y ser el encargado de

revisarlo y recibirlo cuando finalice la prctica.

3. Cada grupo de laboratorio estar dividido en mesas de trabajo, de las

cuales se elegir un representante, quien ser el responsable del

equipo ante su profesor.

4. Cualquier prdida o dao del equipo de laboratorio, ser cargado a

todos los miembros de la mesa; s no se detectara la mesa en la que

hubo dao o prdida se cargar a toda la seccin.

5. Est prohibido fumar, beber, comer, contestar celulares o usar

cualquier otro distractor que pueda perturbar su trabajo dentro de las

instalaciones del laboratorio.

6. En la mesa de trabajo solamente se tendr el manual y tiles que

ayuden a desarrollar su prctica, sus bolsos sern colocados en las

gavetas o en un lugar donde no perjudiquen la perfecta realizacin de

la prctica.

7. Cada representante entregar al profesor, en orden y en buen estado,

el equipo que se ha utilizado durante la prctica.




8. Al finalizar la prctica, los miembros de la mesa de trabajo, se

encargarn de dejar limpio, tanto el equipo de laboratorio como el

espacio fsico donde trabaj.

9. Se requiere de la puntualidad de docentes como de los estudiantes

para el mayor aprovechamiento de la prctica.

10. La entrega del reporte de laboratorio quedar sujeta a las indicaciones

del docente.

11. Ser obligatorio que los alumnos posean su gabacha; de no ser as, no

se permitir el ingreso al laboratorio.

12. Adems de la gua de laboratorio, el alumno deber de obtener los

siguientes artculos para uso en el laboratorio: rollo de papel higinico,

detergente, Fsforos, Tirro o vieta y Toalla pequea.




Recomendaciones generales del trabajo en el laboratorio.

El aula de laboratorio es el lugar destinado para la realizacin de actividades

experimentales.

Para aprovechar al mximo cada actividad de aprendizaje, es conveniente ser

cuidadoso y disciplinado; para esto se tiene que tomar en cuenta las

siguientes recomendaciones:

1. Es necesario seguir en detalle todas las instrucciones dadas por el

profesor o la persona encargada del laboratorio.

2. Antes de realizar una prctica se debe de leer cuidadosamente lo que

se va a hacer durante el desarrollo de la misma y preparar los aparatos

y materiales necesarios para evitar contratiempos, equivocaciones y

desperdicios de materiales.

3. Se realizar un examen previo la cual demostrara que sabe lo que va a

realizar en el laboratorio.

4. Revisar que el material y/o equipo est limpio y en buen estado antes

de comenzar la prctica para que no afecte los resultados.

5. Una vez concluida la prctica debe limpiar y ordenar adecuadamente

los instrumentos y equipo utilizado sobre la mesa de trabajo, donde

luego revisara el laboratorista para verificar que el material est en

buenas condiciones.

6. Al terminar el trabajo experimental, es importante que analice y

comente con su profesor y compaeros los resultados alcanzados y




que obtenga conclusiones sobre el trabajo realizado, procure adems,

aclarar las dudas que tenga para la elaboracin del informe.

7. Limpiar todos los materiales qumicos, especialmente los de vidrio, con

detergente y abundante agua, luego con agua destilada si la hay. Los

tubos son lavados con cepillo, posteriormente djelos que se escurran.

8. No calentar lquido combustible directamente a la llama como son:

Benceno, ter, gasolina y otras sustancias inflamables.

9. Cuando utilice cidos y bases fuertes y los vierta en el desage, utilice

bastante agua, djela correr y vierta la sustancia.

10. Es recomendable identificar en todos los casos la ubicacin exacta del

botiqun de emergencia.

11. No probar los reactivos en la boca, para pipetear cidos o sustancias txicas, debe usarse perillas en las pipetas y si no hay, debe utilizarse probetas de baja graduacin (10 25ml).

12. Antes de abrir un frasco, es necesario leer las indicaciones sealadas

en su etiqueta, y deben seguirse siempre en forma detallada.

13. Por ningn motivo debe darse al equipo de laboratorio un uso

diferente de aquel para el cual fue diseado.

14. Cuando se use gas, las llaves deben quedar bien cerradas; es necesario

revisarlas al final de la sesin.

15. Cuando se use el cabello largo, ste debe sujetarse para evitar

accidentes.




Fundamentacin terica

Los carbohidratos son los compuestos orgnicos ms abundantes de la

biosfera y a su vez los ms diversos. Normalmente se los encuentra en las

partes estructurales de los vegetales y tambin en los tejidos animales, como

glucosa o glucgeno. Estos sirven como fuente de energa para todas las

actividades celulares vitales. Son complejos terciarios en los cuales el

hidrgeno y el oxgeno estn en igual proporcin que el agua. Los ms

comunes son los sacridos, los cuales se dividen tambin en monosacridos o

azcares simples, disacridos y polisacridos. Como ejemplos tenemos a:

Prctica 1 Carbohidratos: Pruebas para azucares reductores y no

reductores. Parte I

Objetivo Identificar las diferentes clases de carbohidratos e hidrolizar el enlace de

disacridos.

Identificar la propiedad reductora de los carbohidratos.




Los carbohidratos se pueden clasificar en:

1. Monosacridos: Llamados tambin azcares simples. Son los azcares

ms sencillos, no se hidrolizan y contienen de 3 a 6 tomos de carbono

(desde triosas hasta hexosas). Los ms importantes son la glucosa, la

sacarosa, xilosa y fructosa.

2. Oligosacridos: Son polmeros de monosacridos que se pueden

hidrolizar produciendo un bajo nmero de monosacridos.

Comprenden desde disacridos hasta hexasacridos. El ms notable es

la lactosa (disacrido).

3. Polisacridos: Son compuestos formados por la unin de muchos

monosacridos. Se hidrolizan produciendo muchas molculas de

monosacridos. El ms importante es el almidn. Tambin stos

presentan una diferente isomera.

4. Aldotriosas: Presentan un carbono asimtrico, dos ismeros

(enantimero).

5. Aldotriosas: Presentan dos carbonos asimtricos distintos, ocho

ismeros (cuatro pares).

6. Aldohexosas: Presenta cuatro carbonos asimtricos distintos, diecisis

ismeros (cuatro pares).

Con respecto a la configuracin de un carbohidrato, la estructura patrn es el

aldehdo glicrido. El glcido que tiene el ltimo oxidrilo del carbono

asimtrico hacia la derecha pertenece a la serie D. En caso contrario, es de la

serie L. D y L son imgenes especulares y tambin antpodas pticos, pero las

letras D y L no se refieren al sentido del poder rotatorio.




Existen reactivos que pueden identificar a los Carbohidratos:

Reaccin de Fehling: Se basa en el carcter reductor de los monosacridos y

de la mayora de los disacridos (excepto la sacarosa). Si el glcido que se

investiga es reductor, se oxidar dando lugar a la reduccin del sulfato de

cobre (II), de color azul, a xido de cobre (I), de color rojo-anaranjado. Un

excelente sustituto para ste reactivo sera el reactivo de Benedict, el cual

identifica a cualquier clase de carbohidrato.

Reaccin de Lugol: La coloracin producida se debe a que el yodo se

introduce entre las espiras de la molcula de almidn. No es por tanto, una

verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin

que modifica las propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la

coloracin azul violeta producto de haber identificado una cetosa.

Reaccin de Molish: Todos los sacridos pueden ser degradados o

hidrolizados hasta transformarlos en las unidades de monosacridos que los

constituyen. La hidrlisis qumica, requiere de catalizadores (cidos

minerales) y de calor. La hidrlisis puede seguirse controlando algunas

propiedades qumicas como el poder reductor. La hidrlisis del almidn

produce azcares de peso molecular cada vez menor hasta convertirse

ntegramente en monosacridos: almidn, dextrina, eritro dextrina, alfa y

beta acrodextrina, maltosa y D-glucosa.

Reaccin de Salivanoff: El cido clorhdrico caliente del reactivo deshidrata a

las cetohexosas para formar hidroximetilfurfural ms rpido que las

aldohexosas correspondientes. Las cetohexosas reaccionan con el Resorcinol

del reactivo para dar compuestos de color rojo oscuros, las aldohexosas

forman compuestos de color ligeramente rosados.




Materiales Sustancias

Tubos de ensayo

Pipeta

Probeta de 10ml y 25ml

Gotero

Beaker 400ml (2)

Mechero Bunsen

Base soporte, malla de asbesto

Agitador

Fsforos *

Toalla pequea *

Pinza para tubos de ensayo

Solucin de glucosa *

Solucin de fructosa *

Solucin de sacarosa *

Solucin de lactosa *

Solucin de almidn *

H2SO4 [ ]

Reactivo de Benedict

Reactivo de Molish

Reactivo de Fehling A y B

Lugol

Reactivo de Benedict

Reactivo de Barfoed

Reactivo de Salivanoff

*Material que traer el alumno

Desarrollo Experimental

Reaccin con el Reactivo de Fehling

1. En un tubo de ensayo agregar 3ml de solucin de Carbohidratos.

2. Al tubo de ensayo con la solucin de carbohidrato agregar 1ml de

Reactivo de Fehling A y 1ml de Fehling B.

3. Calentar el tubo en bao Mara y observar lo que sucede

Preguntas del experimento

1. Qu color torna la solucin con el reactivo de Fehling?

2. Qu ocurri con la solucin de carbohidrato cuando se someti a

bao de Mara?




3. En que momento la reaccin ser positiva o ser negativa?

Prueba con Reactivo de Molish

1. A 2 ml de carbohidratos; agregar 2 gotas de reactivos de Molish.

Mezclar bien ambas sustancias.

2. Seguidamente vierta 2 ml H2SO4concentrado procurando no mezclar

los lquidos. (Inclinar el tubo y dejar ir la sustancia por las paredes del

tubo).

Preguntas del experimento

1. Qu color observa en la interface de los lquidos?

2. Qu otras sustancias, adems del alfa naftol podran ser usados

como reactivos?

3. Qu grupo de sustancias dan la prueba de Molish?

4. Por qu muchas protenas dan la prueba de Molish?

5. Explique los cambios ocurridos en los carbohidratos.

Prueba con el Reactivo de Benedict

1. Poner en dos tubos separados 2 ml de reactivo de Benedict

2. Agregar 4 gotas de solucin de carbohidratos, mezclar bien y poner

todos los tubos al mismo tiempo en agua hirviendo por 3 minutos

3. Enfriar espontneamente (no enfriar con agua fra de chorro).

Compare el color desarrollado en cada uno y tabule los datos o

resultados.

Preguntas del Experimento

1. Cul es el color del precipitado?

2. Discutir la qumica de la prueba




3. Cul es la diferencia entre el reactivo de Benedict y reactivo de

Molish?

Prueba con el Reactivo de Barfoed

1. Poner 3 ml de reactivo de Barfoed, en varios tubos de ensayo, agregar

1 ml de solucin de carbohidratos cuya reaccin se quiere conocer.

Mezclar bien, y poner los tubos al mismo tiempo en agua hirviendo

por un minuto y ms, hasta que note el cambio de algunos de ellos.


1. Qu carbohidratos se oxidan ms rpidamente?

2. Cul es la objecin de hervir por un tiempo ms largo?

3. Puede usarse la prueba de Barfoed en la orina para investigar glucosa

en vez de Benedict?

Prueba con el Reactivo de Salivanoff

1. Poner 3 ml de reactivo de Salivanoff en tres tubos de ensayo, agregar 3

gotas de solucin de carbohidratos a cada uno de ellos, colocar los

tubos en agua hirviendo y calentar hasta que el color se desarrolle en

uno o ms tubos.


1. Qu carbohidrato da la prueba positiva en el tiempo ms corto?

2. Puede usarse esta prueba para distinguir la sacarosa de la fructosa. 3. Cules fueron azucares reductores? 4. Cules No fueron azucares reductores? 5. Qu diferencia existe entre un cido aldnico y uno aldarico? cite

ejemplos




Fundamentacin Terica

El polisacrido estructural ms abundante es la celulosa, componente

principal de las plantas superiores. La hidrlisis total de la celulosa,

empleando cidos, produce D Glucosa. La hidrlisis parcial produce

celulosa. La celulosa (papel) puede transformar sea en azcar por

tratamiento por acido relativamente concentrado; otro polisacrido, con

funcin de reserva, es el almidn.

Las propiedades del almidn son diferentes a las de la glucosa como se

evidenciar mediante la hidrlisis del almidn para generar glucosa. Todos

los polisacridos son hidrolizados en sus constituyentes monosacridos, por

la accin de cidos diluidos. Esta es una reaccin gradual que puede

observarse durante el tiempo de la sesin de laboratorio. Es por tanto

recomendable que usted inicie el proceso de hidrlisis al comenzar la sesin

de laboratorio y luego proceda con el resto de las pruebas. La hidrlisis del

almidn se puede evidenciar con dos pruebas:

1. Desaparicin del color azul caracterstico de la prueba del yodo.

2. Aparicin de glucosa, un azcar reductor. La aparicin de glucosa se

evidenciar mediante la prueba de Benedict.

Prctica 2 Carbohidratos: Reacciones de Hidrlisis (Almidn y

Sacarosa). Parte II

Objetivo Obtener monosacridos a partir de un polisacrido por hidrlisis

total con cido fuerte.





Beaker 250ml, 400ml, 50ml

Mechero bunsen

Malla de asbesto, aro metlico y base soporte

Tubos de ensayos

Probeta de 10ml

Vidrio de reloj

Pipeta y gotero

Papel litmus

Almidn *

Lugol

HCl [ ]

NaOH 5N

Sacarosa (solido)

Agua destilada

Bicarbonato de sodio *

Reactivo de Barfoed

* Material que traer el alumno


Prueba del yodo

1. En un Beaker de 250ml proceda a calendar 50ml de agua destilada

hasta ebullicin.

2. Mientras tanto, en un Beaker de 50ml haga una mezcla de 2gr de

almidn con 10ml de agua destilada.

3. Al agua hirviendo (1) agregue la mezcla de almidn (2) agitando y dejar

que contine hirviendo hasta que la mezcla se vuelva traslcida.

4. Enfre 5ml de la solucin hervida, en un tubo de ensayo y guarde el

resto.




5. Aada 5ml de agua destilada al resto del almidn que quedo en el

Beaker (2) y transfiera la suspensin en un tubo.

6. A cada uno de los dos tubos de ensayo (con almidn hervido y

enfriando y con el almidn no hervido), agregue 3 gotas de Lugol.

7. Compare los colores obtenidos en ambos tubos.

Hidrlisis acida del almidn

1. Emplee el resto del almidn hervido y solubilizado que quedo en el

Beaker del experimento anterior.

2. Una vez fro, agregue 1.5ml de HCl concentrado (medirlo en probeta

de 10ml), mezclar bien y cubra el Beaker con un vidrio reloj. Caliente la

solucin permitiendo una ebullicin suave.

3. Desde el momento que comience a calentar, tome una gota de

solucin (con gotero o pipeta) a intervalos de 1 minuto, y colquela en

una depresin del bloque comparador o pgina de papel bond para

hacer la prueba del yodo.

4. Note los cambios de color en la prueba, segn la hidrlisis progresa en

el tiempo. (cuando al aplicar la prueba del yodo se nota que persiste el

color del reactivo, se enfra la solucin y se le aade 3ml de NaOH 5N)

la solucin debe ser acida al papel litmus.

5. Tome unos 2ml de solucin e investigue el azcar reductor con la

prueba de Benedict.




Hidrlisis acida de la Sacarosa

1. Disuelva 1 gr de sacarosa en 25 ml de agua destilada.

2. Coloque en dos tubos de ensayo 5 ml a cada uno.

3. Enumralos y el tubo 1 dejarlo en reposo (Muestra patrn).

4. Al tubo 2 agrega 5 gotas de acido clorhdrico concentrado.

5. Colocar en bao de mara por unos 5 minutos.

6. Dejarlo enfriar y agrega Bicarbonato de sodio hasta que no se produzca

efervescencia.

7. Agrega 3 ml de Barfoed a los tubos 1 y 2 y colocar en bao de mara.

8. Observa lo sucedido.

Preguntas del experimento realizado

1. Qu organismos son capaces de dirigir la celulosa? Por qu?

2. Qu uso industrial tienen las pectinas?

3. Qu son los pectatos?

4. Con que propiedad fsica cree que esta relacionado la pectina en los

frutos y vegetales?

5. Qu son las hemicelulosas?




6. Cul es la diferencia entre mucoprotenas o mucinas y glicoprotenas?

7. Es la reaccin de Tollens positiva para todos los carbohidratos?

Explique

8. Explique la reaccin del yodo con el almidn

9. Cul es la diferencia estructural entre la celulosa, la amilasa y

Amilopectna?

10. Cul es la accin del NaOH y del NaHCO3?

11. Escribe las reacciones respectivas del NaOH y del NaHCO3?

12. Por qu razn la prueba de Barfoed solamente dio positiva con el

tubo 2 y con el 1 NO?

13. Escriba la reaccin de hidrlisis total o parcial del almidn y sacarosa.





Los lpidos son un grupo heterogneo de compuestos orgnicos. Su

estructura qumica vara y, con ella, tambin lo hacen sus propiedades y su

funcin. Dentro de ellos se encuentran las grasas, que se dividen en

saturadas e insaturadas. Estas ltimas, las vegetales y las del pescado (Omega

3) son las ms saludables.

Los lpidos son un grupo muy heterogneo de compuestos orgnicos,

constituidos por carbono, hidrgeno y oxgeno principalmente, y en

ocasiones por azufre, nitrgeno y fsforo.

En los alimentos existen fundamentalmente tres tipos de lpidos:

1. Grasas o aceites (tambin llamados triglicridos o triacilglicridos)

2. Fosfolpidos

3. steres de colesterol, que muestran un componente comn: los cidos

grasos.

Prctica 3 Lpidos

Objetivos Identificar la solubilidad de los lpidos.

Comprobar la reaccin caractersticas que identifica a los lpidos.

Realizar hidrlisis de las grasas y su importancia industrial.




Los cidos grasos son molculas orgnicas formadas mayoritariamente por

carbono, hidrgeno y oxgeno. Dependiendo de su estructura qumica se

clasifican en:

1. cidos grasos saturados (AGS): Son aquellos en los que sus tomos de

carbono tienen todos sus lugares de unin saturados por tomos de

hidrgeno.

2. cidos grasos insaturados (AGI): Son aquellos en los que dos de sus

tomos de carbono tienen cada uno un enlace sin saturar con

hidrgeno, es decir, faltan dos tomos de hidrgeno. Se forma as lo

que se denomina un doble enlace.




3. cidos grasos poliinsaturados (AGP). Son aquellos en los que ms de

dos tomos de carbono tienen lugares no saturados con tomos de

hidrgeno (formando dos o ms dobles enlaces).

Grasas y aceites: Los aceites y las grasas (visibles o de depsito) constituyen

un 98% de los lpidos totales de la dieta y estn formados casi exclusivamente

por triglicridos, que contienen cidos grasos de los tres tipos mencionados

junto con una molcula de glicerol. Las grasas a temperatura ambiente son

slidas ya que estn compuestas principalmente por cidos grasos saturados,

que poseen una temperatura de fusin ms alta que la ambiental. Por el

contrario, los aceites a temperatura ambiente son lquidos debido a la gran

proporcin de cidos grasos monoinsaturados (insaturados) y poliinsaturados

que contienen.

Grasa saturada: La grasa saturada est presente en los productos de origen

animal y en dos aceites de procedencia vegetal, el de coco y el de palma, as

como en productos derivados de stos o que los contengan.

Los cidos grasos saturados ms comunes son el lurico, palmtico, mirstico y

esterico. Los cidos grasos saturados hacen ms sabrosos los platos, adems

de provocar sensacin de saciedad. Sin embargo, un consumo elevado de los

mismos, junto con la ingesta de colesterol exgeno (procedente de los

alimentos) puede ocasionar graves problemas cardiovasculares al obstruir las

arterias.

Grasa insaturada o aceites

Mono-insaturada: El cido oleico es el componente principal del aceite de

oliva gracias al cual se le atribuyen beneficiosas propiedades sobre diversas

patologas.




Poliinsaturada: Presenta en su composicin cidos grasos con uno o ms

dobles enlaces en su estructura qumica, lo que hace que se oxide con mayor

facilidad y se formen radicales libres que pueden dar lugar a compuestos

potencialmente cancergenos.

Fosfolpidos: Los fosfolpidos de la dieta constituyen un aporte de cidos

grasos, aunque de menor importancia que los triglicridos. No obstante,

intervienen en funciones de transporte de lpidos en el plasma y desempea

un importante papel en la constitucin de la membrana celular y en la vaina

de mielina de las neuronas.

Colesterol: Su estructura es completamente diferente a la de los cidos

grasos. No es considerado un nutriente esencial. Sin embargo, es

fundamental desde el punto de vista celular para la formacin de la

membrana celular.


Tubos de ensayo

Probeta 10ml

Pipeta

Beaker 100ml, 250ml y 400ml

Balanza de tres brazos

Agitador

Soporte, aro metlico

Embudo de vidrio

Papel filtro

Huevos (2) *

Fsforos *

Toalla de tela *

Capsula de porcelana

Mechero Bunsen

Aceite de algodn *

Manteca vegetal *

cido esterico

Cloroformo

Acetona

Alcohol etlico

Alcohol 95%

Sulfato de sodio anhdrido

Benceno

Anhdrido actico

cido sulfrico concentrado

Agua destilada

*Material que traer el alumno





Prueba de solubilidad

1. En tres tubos de ensayo colocar aproximadamente 5 ml de agua.

2. Agregar a cada uno una muestra de los siguientes lpidos: aceite de

algodn, manteca vegetal y cido esterico. Agitarlos

3. Agregar al tubo de ensayo que contiene el aceite una pizca de

detergente. Agitar

4. Depositar la mezcla en vaso precipitado de 250 ml que contenga 100

ml de agua y dejar en reposo.

5. Realizar las observaciones y concluir.

6. Agregar a cada uno de los lpidos, para comprobar su solubilidad.

7. Repetir el procedimiento agregando 2ml de cloroformo en tres tubos

de ensayo.

8. Colocar una pequea muestra de lpidos a cada uno. Agitar.


1. Por qu los lpidos No son solubles en agua?

2. Qu accin realiza el detergente en la solubilidad?

3. Qu son las miscelas?




4. Por qu los lpidos son solubles en cloroformo?

5. Qu otros solventes pueden solubilizar las grasas?

Extraccin de Lpidos

1. Rotar el huevo suavemente sobre la mesa durante 2 minutos.

2. Separe la yema de la clara de un huevo y pnganlos respectivamente

en 2 Beakers de 100 ml, previamente pesados y anote el peso de cada

fraccin.

3. Agregue a la yema 15 ml del alcohol de 95% y agite bien, con un

agitador de vidrio por varios minutos, para precipitar las protenas.

4. Agregue 25ml de cloroformo, agite tres minutos aproximadamente y

filtre a travs de un papel filtro previamente pesado.

5. Lave el precipitado proteico que quedo en el embudo 3 veces, usando

10 ml de Cloroformo cada vez agitando con un agitador. No agregue la

siguiente porcin sino hasta que la primera haya drenado

completamente. Seque en bao de Mara.

6. Pese la protena y calcule el porcentaje de protena en la yema de

huevo.

7. A los lpidos de la yema de huevo disueltos en cloroformo, agregar 2

cucharaditas de Na2SO4 anhdrido y agite por 5 minutos para remover

el agua del solvente. Filtre dentro de una cpsula de porcelana

previamente pesada y evapore a bao de Mara hasta que desaparezca

el olor a solvente. Enfre y pese, calcule el porcentaje de lpidos en la

yema.





1. Qu parte del huevo es rica en grasa?

2. Explique el efecto sobre la yema de huevo del:

a) Alcohol

b) Cloroformo

c) Sulfato de sodio Anhdrido

Investigar:

1. Qu es el colesterol? y como se clasifica.

2. Por qu las grasas saturadas son ms dainas que las insaturadas?

3. Qu tipos de grasas estn presentes en la yema del huevo?

Hidrlisis Alcalina de una grasa

Saponificacin

1. Colocar 10 gamos de manteca en un Beaker de 250 ml.

2. Agregar10 ml de alcohol. Agitar.

3. Calentar con cuidado la mezcla y mantener agitacin constante desde

este momento.

4. Agregar por porciones 15 ml de una solucin de Hidrxido de sodio;

mantener la agitacin constante. Hasta evaporar el solvente y parte de

la solucin.




5. Colocar la solucin jabonosa en notro Beaker que contenga 2ml de

solucin de cloruro de sodio y dejar en reposo.

6. Realizar la prueba de jabn; colocando una pequea muestra obtenida

en un Beaker con agua y agitar hasta formar espuma.

7. Anotar las observaciones.


1. Cul es la composicin qumica de la manteca vegetal?

2. Qu accin tiene el alcohol y calor utilizado?

3. En que consiste la saponificacin?

4. Escriba la reaccin qumica.

5. Qu otros lcalis se pueden utilizar para preparar jabones?

6. Cmo se clasifican los jabones?

7. Qu diferencia existe entre un jabn y un shampoo?

8. Investigar la preparacin de los jabones lquidos.




Fundamentacin terica

Las protenas son compuestas de carbono, oxigeno hidrogeno y nitrgeno. La

mayora de ellas contienen adems azufre, y algunos fsforos. Sus molculas

son de proporciones coloidales, todas son muy complejas molecularmente y

tienen alto peso molecular. La molcula proteica esta compuesta de una

combinacin de aminocidos por condensacin. Las proteasas, peptonas,

pptidos y aminocidos son derivados de las protenas formados en sntesis e

hidrlisis.

Hay ciertas reacciones coloreadas que dan las protenas y dependen de los

aminocidos presentes en la molcula proteica. Todas dan la reaccin de

Biuret. Se basa en una reaccin tpica de los enlaces peptdicos, en la cual los

tomos de cobre del reactivo se unen a los grupos amino, lo que provoca una

coloracin rosa - violcea. Las que contienen tirosina dan las reacciones

Xantoprotica.

Prctica 4 Protenas: Desnaturalizacin, prueba de Biuret y

Xantoprotica.

Objetivos Determinar las propiedades fsicas y qumicas de las protenas.

Realizar pruebas cualitativas de identificacin de aminocidos.

Comprender la importancia de la desnaturalizacin de protenas

dentro de los organismos vivos.




Observaremos tambin en esta prctica como se destruye los enlaces que

mantienen estable la conformacin globular de las protenas, de manera que

stas queden con una estructura filamentosa; con lo cual pierden su

solubilidad y precipitan en forma de cogulos. La desnaturalizacin se

efectuar sometiendo una disolucin de protenas a cambios de pH, a

alteraciones de concentracin del medio y a variaciones de la temperatura.

Las protenas son clasificables segn su estructura qumica en:

Protenas simples: Producen solo aminocidos al ser hidrolizados.

Albminas y globulinas: Son solubles en agua y soluciones salinas

diluidas (ejemplo: lactoalbmina de la leche).

Glutelnas y prolannas: Son solubles en cidos y lcalis, se encuentran

en cereales fundamentalmente el trigo. El gluten se forma a partir de

una mezcla de glutennas y gliadnas con agua.

Albuminoides: Son insolubles en agua, son fibrosas, incluyen la

queratina del cabello, el colgeno del tejido conectivo y la fibrina del

coagulo sanguneo.




Protenas conjugadas: Son las que contienen partes no proteicas. Ej.:

nucleoprotenas.

Protenas derivadas: Son producto de la hidrlisis.

En el metabolismo, el principal producto final de las protenas es el amonaco

(NH3) que luego se convierte en urea (NH2)2CO2 en el hgado y se excreta a

travs de la orina.

Definicin y propiedades generales

Las protenas son sustancias complejas, en estrecha relacin con la materia

viviente, constituyen una de las tres clases fundamentales de alimentos; las

otras son: carbohidratos y grasas. Estn compuestas, parcialmente o

totalmente, por cadenas de aminocidos unidos por enlaces peptdico, de

donde observamos que una protena es, un polipptido del tipo:

- CO NH CH CO NH CH CO NH

R R

Cabe decir que las protenas son compuestos de peso molecular elevado,

desde varios miles a muchos millones.

Peso molecular de las protenas

Nombre Peso Molecular

Insulina 6,000 (monmero)

Ribonucleasa 13,000

Citocromo C 13,000

Loctalbmina 174,000

Mioglobina 175,000




Protena de Bense Jones 35,000 y 37,000

Lactoglubulina 38,000

Pepsina 39,000

Albmina de huevo 44,000

Hemoglobina 68,000

Ureasa 480,000

Tiroglobulina 630,000

Miosina 840,000

Actomiosina 4 millones

Virus del mosaico del tabaco 40 millones

Tromboplastilina del pulmn 167 millones

Virus de la influenza 200 a 322 millones

Algunas, son solubles en agua, otras necesitan para disolverse, la presencia

de sales o de pequeas cantidades de cidos o bases y otras, se disuelven

solo por la accin de reactivos que modifican mucho su estructura. La

protena media es una entidad muy sensible, ya que al exponerse al calor I a

pH extremos, a agentes tenso activos y a diversos reactivos, experimentan

una serie de modificaciones llamadas en conjunto desnaturalizacin, lo que

hace variar cierto numero de sus propiedades.

Las protenas poseen grupos inicos libres cargados elctricamente y es por

esta razn que se combinan con reactivos inicos, producindose en algunos

casos, compuestos insolubles. Ahora bien, la reaccin de tales grupos con los

iones hidrgeno e hidroxilo, indican que las protenas, al igual que los

aminocidos, son anfteras.

En general son slidas e incoloras y no hidrolizadas, producen algunas

reacciones de coloracin, como las de Biuret.




En las protenas cuya funcin es netamente estructural su gran tamao,

constituye una ventaja, ya que esto limita su difusibilidad y limita a la

protena a su radio de trabajo.

Estructura

Segn se ha sealado anteriormente, las cadenas largas de aminocidos

enlazadas por uniones peptdicas se llaman: polipptido; pues bien, se

designa como estructura primaria de la protena, al numero y orden de los

aminocidos en dichas cadenas, las cuales se mantienen dentro de la

molcula proteica, por medio de diversos mecanismos. Uno de ellos, es la

unin di-sulfuro, que conectadas cadenas paralelas de pptidos, haciendo un

enlace relativamente estable y por lo tanto resistente a la ruptura, en las

condiciones habituales de desnaturalizacin.

Dos cadenas de pptidos unidas por un enlace di-sulfrico.

Adems de este tipo de mecanismos, hay otra fuerza importante relacionada

con la conservacin de la estructura de una molcula proteica, que es la del

enlace de hidrgeno que se produce cuando el nitrgeno y el oxigeno de una

mima cadena o de diferentes, comparten un protn.




Enlaces de Hidrgeno

Y son los enlaces de hidrgeno entre los grupos de una sola cadena peptdico

los que plieguen dichas, cadenas formando una estructura helicoidal. Los

enlaces de hidrgenos aislados, son muy dbiles, pero la accin conjunta de

un gran nmero de ellos en la molcula de protenas, produce una estructura

estable.

La plegadura de las cadenas de polipptido en una estructura enrollada,

mantenida por uniones di-sulfuro y por enlaces de hidrogeno, constituye la

estructura secundaria de la protena; y a la disposicin e interrelacin de las

cadenas torcidas de protenas en capas especificas, en cristales o en fibras, se

le denomina estructura terciaria de la protena.

Es probable que estas estructuras sean determinadas entre s, por la

estructura de los aminocidos de la cadena primaria del polipptido, o sea

que, una vez que se ha formado la cadena, los grupos qumicos que se

extienden desde los aminocidos dirigen el enrollamiento especifico

(estructura secundaria) y la agregacin de cadenas enrolladas (estructura

terciaria).




Adems de las estructuras primaria, secundaria y terciaria, algunas protenas

pueden desplazar un cuarto nivel de organizacin en el cual se pueden

combinar varias unidades manomricas, cada una con estructuras primaria,

secundaria y terciaria apropiadas. Esta asociacin de unidades semejantes

confiere a la protena de una estructura cuaternaria.


Tubos de ensayo

Probeta de 10ml

Pipeta

Tirro *

Mechero Bunsen

Soporte, aro metlico y malla de asbesto

Beaker de 400ml y 250ml

Pinza para tubos de ensayo

Toalla pequea *

Huevos (2) *

Disolucin de albumina *

Acido Clorhdrico

Solucin saturada de NaCl

Hidrxido de sodio

Leche *

Sulfato de cobre al 1%

Acido Ntrico

Reactivo de Millon

Reactivo de Hopkins Cole

Acido Sulfrico



Desnaturalizacin

1. En 4 tubos de ensayo agregar 2ml de albmina a cada uno, y

numerarlos.

2. Aadir al numero 1, 2ml de HCl, al numero 2, 2ml de solucin saturada

de NaCl, al numero 3, 2ml de NaOH y a al numero 4, calentar

suavemente. (Los nmeros cuatro con albumina, leche y clara de

huevo hacerlo de una sola vez)




3. Repetir el paso 1 y 2 sustituyendo la albmina por leche y luego por

solucin de clara de huevo.

4. Anotar los resultados para cada proceso.

Prueba de Biuret

1. Preparar tres tubos de ensayo y colocar en cada uno 2ml de las

disoluciones proteicas.

2. Aadir en cada tubo 2ml de disolucin de hidrxido de sodio. Agitar y

dejar caer cuatro o cinco gotas de solucin al 1% de sulfato de cobre.

3. Anotar los resultados.

Prueba Xantoprotica

1. Preparar dos tubos de ensayo y verter en cada uno 2ml de las

disoluciones proteicas.

2. Aadir 2ml de cido ntrico en cada tubo. Anotar la coloracin.

3. Calentar en bao Mara y volver a anotar los resultados.

Reaccin de Millon

1. Aada 5 gotas de reactivo de Millon a 3ml de solucin de protena.

2. Calentar en bao de Mara (no exceda el reactivo, por que no se

obtendrn los resultados esperados). Observe los resultados




Reaccin de Hopkins Cole

1. Aada 2ml de reactivo de Hopkins Cole a 2ml de solucin de

protenas, mezclar bien, inclinar el tubo y verter con mucha precaucin

3ml de H2SO4 concentrado. Hasta formar capas de solucin; si no

aparece color deje reposar por unos minutos, o rote el tubo para que

se unan los dos lquidos.


1. Qu le ocurre al calentar las protenas con un cido?

2. En qu consiste una desnaturalizacin de protenas?

3. Qu tipos de agentes desnaturalizantes existen?

4. Cul es la importancia biolgica de una desnaturalizacin?

5. Una protena desnaturalizada podr dar la reaccin de Biuret? Razona la respuesta.

6. Qu son las protenas?

7. Elabora un listado de 10 protenas indicando su importancia biolgica.

8. Qu diferencia existe entre una desnaturalizacin y una hidrlisis de una protena?

9. Qu le sucede a la protena cuando se le agrega este reactivo?

10. Elabora un cuadro descriptivo con las pruebas realizadas.





El ADN es una molcula presente en todas las clulas de los seres vivos y es la

encargada de codificar todo lo que nosotros somos, desde el color del pelo

hasta las protenas que tenemos en nuestra sangre.

El ADN es una molcula presente en todas las clulas de los seres vivos y es la

encargada de codificar todo lo que nosotros somos, desde el color del pelo

hasta las protenas que tenemos en nuestra sangre.

Prctica 5 Extraccin de ADN (cido Desoxirribonucleico)

Objetivo Realizar la extraccin de ADN a travs de una muestra vegetal.




El ADN es una molcula cargada que esta asociada a protenas y en el caso de

los organismos eucariontes est encerrado dentro de un ncleo. Para extraer

el ADN primero es necesario romper las clulas y luego se necesita separar el

ADN del resto de los componentes celulares como protenas y membranas

lipdicas. Un detergente es una solucin capaz de disolver las membranas y

as permitir que stas se separen del resto de los componentes. Adems este

detergente es capaz de unir las protenas que estn junto al ADN. La sal de

mesa tiene un catin que se une a la molcula de ADN y hace que cambie sus

propiedades qumicas, permitiendo que el ADN precipite en presencia de

alcohol. El alcohol adems disuelve los azcares y protenas. El ablandador de

carne hace que las protenas remanentes se disgreguen permitiendo que el

ADN adquiera ms flexibilidad.

La extraccin de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los

iones salinos son atrados hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su

disolucin y posterior extraccin de la clula. Se empieza por lisar (romper)

las clulas mediante un detergente, vacindose su contenido molecular en

una disolucin tampn en la que se disuelve el ADN. En ese momento, el

tampn contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN,

carbohidratos, protenas y otras sustancias en menor proporcin. Las

protenas asociadas al ADN, de gran longitud, se habrn fraccionado en

cadenas ms pequeas por accin del detergente.

Slo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampn y detergente,

para lo cual se utiliza alcohol isoamlico.





Tubo de ensayo grande (2)

Beaker de 250ml y 400ml

Sal de mesa *


Probeta de 10ml y 25ml

Vegetales para extraer ADN *

Cuchillo *

Licuadora *

Colador pequeo *

Hielo *

Pipeta

Agitador

Agua destilada

Bicarbonato de sodio

Detergente liquido o champ *

Alcohol isoamlico



1. Preparar el tampn con los siguientes ingredientes y mantener en la

nevera o en un bao de hielo triturado lo siguiente:

2. En un Beaker agregar 120ml de agua, si es posible destilada y si no

mineral (No usar agua del grifo), 1.5gr de sal de mesa, preferiblemente

pura, 5gr de bicarbonato de sodio, 5ml de detergente lquido o

champ.

3. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que

se pueda conseguir (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en

cuadraditos.




4. Triturar la muestra con un poco de agua en una licuadora accionando

las cuchillas a impulsos de 10 segundos. As se rompern muchas

clulas y otras quedarn expuestas a la accin del detergente.

5. Mezclar en un recipiente limpio 5ml del triturado celular con 10ml del

tampn fro y agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos.

6. Separar despus los restos vegetales ms grandes del caldo molecular

hacindolo pasar por un colador lo ms fino posible.

7. Retirar 5ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y aadir con una

pipeta 10ml de alcohol isoamlico enfriado. Se debe dejar escurrir

lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo ste

inclinado. El alcohol quedar flotando sobre el tampn.

8. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la

separacin entre el alcohol y el tampn. Remover la varilla hacia

delante y hacia atrs y poco a poco se irn enrollando los fragmentos

de mayor tamao de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla

atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedar adherido a

su extremo con el aspecto de un copo de algodn mojado.


Por qu se utiliza detergente para la extraccin de ADN?

Qu funcin desempea la licuadora?

Investigue otra forma para extraer el ADN?





Obtencin de pectinas

Las sustancias ppticas se hallan casi universalmente distribuidas en los

tejidos vegetales, donde actan como materiales de adhesin entre las

clulas, particularmente en los tejidos de las frutas. La pectina es importante

en la industria de alimentos, debido a las propiedades gelificntes. Esta se

obtiene en escala comercial como un subproducto en la industria de las

frutas ctricas.

Los subproductos de la industria de zumos de frutas, bagazos de manzanas y

albedos de ctricos (limn, naranja, toronja) constituyen bsicamente las

fuentes industriales de pectinas.

La pectina, de la palabra griega Pekos (denso, espeso, coagulado), es una

sustancia mucilaginosa de las plantas superiores. Esta sustancia se asocia con

la celulosa y le otorga a la pared celular la habilidad de absorber grandes

cantidades de agua. La celulosa tiene un importante rol en la estructura ya

que le da rigidez a las clulas, mientras que la pectina contribuye a su

textura.

Prctica 6 Obtencin de pectinas

Objetivo Obtencin de pectinas a partir de la corteza de toronja para

determinar el porcentaje de esta.




Durante mucho tiempo, el ama de casa ha utilizado la pectina contenida en

las frutas in situ para espesar jaleas. Su extraccin industrial se inici a

principios del siglo XX.

El parmetro qumico ms importante es el grado de esterificacin (M), es

decir, el nmero de funciones carboxilo esterificadas por 100 grupos

galacturonicos; esto permite distinguir dos grupos de pectinas:

Pectinas fuertes metiladas (H.M. mayor 55%)

Pectina dbilmente metiladas (L.M. menor 45%)

Los procedimientos de fabricacin se basan en una hidrlisis, separacin y

recuperacin.

Las posibilidades de obtencin de pectina y substancias extensamente usadas

en las industrias alimenticias y farmacuticas y que no se fabrican en

cantidades necesarias en nuestro pas, a partir de un desperdicio

insuficientemente industrializado: La cscara de naranja.

En la actualidad en Mxico se tienen grandes cantidades de cscara de

naranja de las cuales se emplean, una pequea parte para forraje y para

extraerle el aceite esencial, airndose o quemndose la mayor parte debido a

las dificultades que presenta su almacenamiento, pues es necesario secarla

para evitar que se fermente.

La pectina se puede extraer industrialmente de otras frutas como la

manzana, pern, membrillo y algunos ctricos, como el limn, toronja y lima;

se escoger la naranja debido a que es una de las frutas que ms se producen

en nuestro pas.




La pectina es un coloide natural, lioflico, reversible, es decir; puede

disolverse en agua, precipitarse, secarse y volver a disolver sin afectar sus

propiedades.

La pectina es soluble en agua y en ella se dispersa para dar soluciones muy

viscosas, esta solubilidad disminuye cuando aumenta su tamao molecular.

En solucin las pectinas presentan grandes reas superficiales que estn

relacionadas con su carga elctrica negativa. Esta carga vara segn la

proporcin de grupos carboxilos libres y aparentemente responsables de la

rpida precipitacin de las pectinas con electrolitos de diferentes potenciales

elctricos.

La pectina es soluble en alcohol, acetona, ter y casi todos los disolventes

orgnicos. Algunos electrolitos como: cloruro de Aluminio, Sulfato de

Amonio, Sulfato de Cobre, Cloruro Frrico, Sulfato de Magnesio y Sulfato de

Aluminio, precipitan a la pectina en solucin, en condiciones apropiadas de

P.H. y concentracin, en este caso se presenta ms bien una coagulacin

semejante a la que ocurre cuando a ciertos coloides se les aade un

electrolito apropiado que neutraliza las cargas trayendo por consecuencia

una precipitacin por el aumento de volumen de las partculas que se unen

entre s.


Toronjas *

Navaja *

Mechero bunsen

Malla de asbesto, aro metlico y base soporte

Beaker de 400ml, 250ml y 100ml

Probeta de 100ml


Agua destilada

Acido Clorhdrico 12N

Alcohol 95%

Lugol

Solucin alcohlica de NH4OH 4%.

Solucin alcohlica de oxalato de amonio




Erlenmeyer

Papel pH

Baln de destilacin

Refrigerante

Gasa *

Tubos de ensayo



1. Haga cisuras en la corteza del ctrico como las lneas de una bola de

baloncesto.

2. Desprenda las secciones de la corteza con la mayor cantidad de albedo

posible (capa blanca). Ponga a hervir 100ml de agua en un Beaker.

3. Pese la totalidad de la corteza.

4. Pese dos secciones de corteza; luego obtenga de ellas el albedo y

pselo.

5. Pese 10gr y colquelos en un Erlenmeyer.

6. Agrguele 25ml de agua caliente, agite de 1 a 2 minutos, decante el

agua, gurdela.

7. Agrguele a la pulpa 50ml de agua destilada y 1ml de HCL 12N. Mida

el pH que debe ser 2 muy prximo a dos.

8. Coloque el matraz un refrigerante y reflujo por 15 minutos.




9. Filtre el reflujado con una gasa.

10. Al filtrado agrguele un volumen igual de alcohol 95%.

11. Al bagazo hacer la prueba de celulosa.

12. Filtre el proceso nmero 10 con gasa. Lave el precipitado con solucin

alcohlica de NH4OH al 4%.

13. Seque el producto y pselo.

14. Mientras realiza el paso 11, el decantado del paso 6, tome 4ml y ponga

dos en cada tubo de ensayo y agregue a uno 4ml de solucin alcohlica

de oxalato de amonio. Si no observa precipitado, agregue 3ml de alcohol

de 95%.

Realiza tus observaciones y conclusiones.




BIBLIOGRAFA

1. Conn, Eric E. Stumpf, Paul K. Bruening, George. Doi, Roy H. (2004),

Bioqumica fundamental, Segunda Edicin. Limusa Wiley, Mxico.

2. Betancourt, Herbert A. Espinosa U. Eduardo. (1984), Bioqumica y

fundamentos de qumica orgnica, MINED, El Salvador.

3. Mathews, Chritopher K. Holde, K. E. Ahern, Kevin G. (2002),

Bioqumica, Addison Wesley, Madrid.

4. http://es.wikipedia.org/wiki/Bioqu%C3%ADmica

5. http://www.arrakis.es/~rfluengo/bioquimica.html

6. http://www.um.es/molecula/indice.htm

Manual de Bioquimica

Documents

Transcript of Manual de Bioquimica