EFECTO DE LA APLICACIÓN DE TRES TRATAMIENTOS TÉRMICOS AL OREGANÓN

Plectranthus amboinicus (Lour.)

EN EL CRECIMIENTO DE AEROBIOS MESÓFILOS MOHOS Y LEVADURAS.

Introducción

El Oreganón Plectranthus amboinicus (Lour.)es empleado tradicionalmente

en resfriados, expectorante, como diurético, Antiinflamatorio, depurativo, en el

tratamiento de cálculos renales y biliares. Antiespasmódico, para la artritis y

como antirreumático (1). .por todas estas propiedades es muy buscada encon-

trándoce en recintos donde no existe permiso sanitario, como, en las calles a la

interperie, arrojadas en el suelo, en material antihigiénico, en lugares cerrados,

pero unidos a otras hiervas ocasionando contaminación cruzada. Es por ello

que se hace necesario la investigación del efecto que puede causar la aplica-

ción de tratamientos térmicos (cocción, fusión, ebullición), en el crecimiento

de microorganismos para determinar el tratamiento más efectivo en la inhibi-

ción de bacterias y mohos; se intento reproducir en el laboratorio los tratamien-

tos que las personas le aplican a el Oreganón normalmente, ya que la mayoría

utiliza esta hierba en infusiones, decocciones y ebullición para el tratamien-

to de sus respectivas dolencias. Aunque algunos autores señalan que esta

hierba posee componentes activos que producen efecto bacteriostático sobre cepas de S

aureus (2)

Materiales y Métodos

Tratamientos físicos aplicados:

Muestra: Oreganón fresco comprado en los establecimientos del área del cen-

tro

Macerado y sin macerar.

La muestra se les aplico un pre-acondicionamiento a 50g de muestra retirán-

dole las hojas en mal estado y lavándolo, luego se tomaron 10 g para macerar

y 10g sin macerar haciendo diluciones seriadas peptonada 0,1% hasta 10 -5 y

ser sembrados en PCA (Agar Plate Count) a 37°C por 48h y YGC (Extracto

de levadura-glucosa-cloranfenicol) a 25°C por 5 días en la oscuridad y los 30g

restantes se maceraron para posteriormente ser aplicados los tratamientos tér-

micos respectivos.

Tratamientos térmicos.

Los 30g macerados fueron divididos en 3 porciones de 10g para luego ser

aplicados tres tratamientos a cada porción. Estos fueron aplicados con la finali-

dad de observar cual era más efectivo en la inhibición del crecimiento bacte-

rias y hongos. Se adicionaron 90ml de agua destilada en 2 matraces para infu-

sión y cocción y 96 ml para ebullición para compensar las pérdidas de agua por

evaporación y se llevaron a calentamiento hasta alcanzar una temperatura ade-

cuada.

Tratamiento térmico Temperatura ºC Tiempo (min)

Infusión 55 5

Cocción 90 15

Ebullición 100 5

Cuadro1. Temperatura y tiempo aplicado a cada muestra.

Luego se dejo enfriar.

Para la determinación de aerobios mesófilos, mohos y levaduras mediante re-

cuento estándar en placa, se les realizaron diluciones seriadas con agua pepto-

nada hasta 10-5, posteriormente se sembró 1mL de cada dilución en la placa de

Petri y luego se le adicionó PCA atemperado y YGC las diluciones de 10-3 y

10-5 de cada una de las muestras y se incubaron. Transcurrido el tiempo incu-

bación correspondiente se realizo el recuento estándar en placas y la observa-

ción al microscopio, tinción Gram y tinción simple para levaduras y mohos.

Resultados

Macerado y sin macerar: en la determinación de aerobios mesófilos. Se

observaron colonias incontables, cocos y bacilos Gram positivos.

Muestra testigo Mohos % de Incidencia

Sin macerar

Aspergillus spp

Rhizopus spp

19,96

10,07

Geostrichum spp

Cladosporium spp

39,92

30,03

Macerado

Aspergillus spp

Rhizopus spp

0.33

33

Geostrichum spp

Cladosporium spp

33,33

33,33

Figura 1 Aspergillus spp (macroscopica) figura 2 Aspergillus spp (microscopica). Figura 3 Rhizopus spp (macroscopica) Figura 4 Rhizopus spp (microscopica). Figura 5 Geotrichum spp (macroscopica) Figura 6 Geotrichum spp (microscopica). Figura 7 Cladosporium spp (macroscopica) Figura 7 Cladosporium spp

Discusión de Resultados

En las muestras testigo (sin macerar y macerado) se determinó gran cantidad

de aerobios mesófilos y mohos de diferentes tipos, esto debido a que las

muestras fueron adquiridas en lugares con malas condiciones sanitarias, es-

tando en contacto con tubérculos y raíz y además no recibieron ningún trata-

miento térmico que inhibiera el crecimiento de los mismos.

En la determinación de aerobios mesófilos infusión para cocción y ebulli-

ción se lograron evidenciar crecimiento de cocos y bacilos gram positivos

resistentes a altas temperatura, esto debido a que la planta no se encontraba en

buenas condiciones al momento de la compra aunado a esto las malas condi-

ciones que presentaba el establecimiento tanto para la presentación de la hier-

ba como la presentación del mismo local, donde las unían a todas las demás

hierbas (como raíces que están en contacto directo con el suelo) ocasionando

contaminación cruzada.

En la determinación de mohos y levaduras en las placas de infusión, cocción

y ebullición presentaron crecimiento de Geostrichum sps presentando un

porcentaje de incidencia del 50, 50 y 100% respectivamente, el cual es un

hongo que se encuentra en el suelo, aire, plantas entre otros por tal motivo

puede encontrarse en el oreganón, mas sin embargo es un hongo que causa

serias afecciones ya que se caracteriza por lesionar el aparato digestivo y res-

piratorio además de síntomas de diarrea. También se presento crecimiento de

Cladosporium spp con un porcentaje de incidencia de 50 y 50% en infusión y

concion de excepto en ebullición puesto que no resistió temperatura de 100 °

C estos se encuentran comúnmente en material vegetal muerto. Algunas espe-

cies son patógenas de plantas se manifiesta patológicamente por abscesos

cerebrales y en ocasiones por ulceras en la piel o lesiones en el pulmón. En

Venezuela el Oreganón (Plectranthus amboinicus Lour).no posee una norma

que indique la carga microbiana apta en esta hierba.

Conclusiones

El tratamiento más efectivo fue el de ebullicion puesto que inhibio

el crecimiento del hongo cladosporium spp en un 100% y dis-

minuyo el crecimiento de aerobios mesófilos, puesto que en la

muestra control el numero de estos microorganismos era incon-

table y en ebullición 1,7x105 UFC/g.

El hongos más comun que mantuvo resistencia los tres tratamien-

tos fue el Geostrichum sps,

Los tratamientos térmicos de infusión y cocción no fueron efectivos

para la inhibición de crecimiento bacterias y hongos ya que el

Geostrichum sps y Cladosporium spp resistieron los trata-

mientos aplicados, presentándose en un a 50% en cada una.

Las hierbas compradas en los establecimientos no poseen ningún

control sanitario, ya que no reciben ningún acondicionamiento,

ni tratamiento de conservación de la calidad.

Literatura citada: 1. Menéndez Rosa y Pavón Vania . 1999. Plecthranthus amboinicus (lour.) spreng. Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos (CIDEM). Artículo de revisión. REV CUBANA PLANT MED; 3

(3):110-15. 2Gurgel Ana, da Silva Jackeline, Grangeiro Ana, Xavier Haroudo, Oliveira Rinalda, Pereira Maria & de Souza Ivone. (2009). Antibacterial Effects of Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng (Lamiaceae) in Methicil-

lin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) Department Pharmacological Science and Department of Antibiotics, Cidade Universitária, Pernambuco,Brazil.28 (3): 460-4

Tratamiento

térmico

Mohos % de

Incidencia UFC/g de

aerobios

mesófilos

Morfología

y afinidad

tintorial

Infusión

Geostrichum spp

Cladosporium spp

50%

50%

Incontables Cocos y

bacilos

Gram positi-

vos

Cocción

Geostrichum spp

Cladosporium spp

50%

50%

1,535X105 Cocos y bacilos

Gram negati-

vos

Ebullición

Geostrichum spp

Cladosporium spp

100% 0%

1,07X105 Cocos y bacilos

Gram positi-

vos

Arias Leidy; Rojas Emily

Universidad Centroccidental “Lisandro Alvarado”, Decanato de Agronomía, Laboratorio de Microbiología Aplicada, Programa de Ingeniería

Agroindustrial. Apdo 3001. e-mail: lei.dy16@hotmail.com, emilylaflaca@hotmail.com.

Cuadro 2 %de incidencia de las muestras testigo.

Cuadro 2. Determinación de aerobios mesófilos, mohos y levaduras.

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