LECTURA INTERPRETADA ANTIBIOGRAMA

INTERPRETACION DEL ANTIBIOGRAMAVICTOR HUGO SEGURA LOPEZMR PATOLOGIA CLINICAENERO 2017

INTRODUCCIONHerramienta de la actividad clnica diaria Determina in vitro la respuesta a uno o varios antimicrobianosPrimer escaln en el reconocimiento de los mecanismos de resistencia Se basa en datos Microbiolgicos Farmacodinamicos

CONCEPTOS CLAVESAntibiograma: Tcnica in vitro en la cual bajo determinadas condiciones estandarizadas, un microorganismo es expuesto a un antimicrobiano, anotndose el efecto observado tras un periodo de incubacin. HERRAMIENTA* Concentracin Inhibitoria Mnima (MIC): Concentracin de un antimicrobiano a la cual se inhibe el crecimiento de una UFC(Unidad Formadora de Colonia)de un microorganismo. PUNTOS DE CORTE (Categoras de tratamiento)*

CONCEPTOS CLAVESCategoras ClnicasSensible o Susceptible (S): El microorganismo es inhibido cuando se utilizan las concentraciones del antibitico recomendado de acuerdo al sitio de infeccin.Intermedio(I): La respuesta puede ser menos predecible que en aislamientos susceptibles. Esta categora podra ser eficaz en sitios donde se alcancen concentraciones altas del antibitico.Resistente(R): Aislamiento que no son inhibidos por las concentraciones del antibitico que se alcanzan habitualmente en el organismo

Red MIVA: Red de Vigilancia de la Comunidad Valenciana. http://www.sefh.es/53congreso/documentos/ponencias/ponencia774.pdf

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OBJETIVOS

CIM Y CBMS/CS/CS/CS/CS/CS/CABABABABABCONTROL SIN ABC/CC/CC/CC/CC/CC/C

MTODOS - ANTIBIOGRAMA

Mtodos AntibiogramaDifusin: Habitualmente cualitativos. Atendiendo al halo de inhibicin que aparece alrededor del disco, se clasifican los microorganismos como sensibles (S), intermedios (I) o resistentes (R) segn sea la eficacia obtenida por el agente amtimicrobiano frente al microorganismo.

Sistema Epsilon-Test: Mtodo de antibiograma por difusin que en lugar de discos utiliza tiras de papel graduadas con valores de CMI e impregnadas con un antibitico en forma de gradiente de concentracin. La interseccin del halo de inhibicin con la tira de papel indica la CMI del microorganismo para dicho antibitico

Mtodos AntibiogramaDilucin: Es un estudio cuantitativo. Se emplean una serie de tubos con distintas concentraciones de agente antimicrobiano (4-128 g/ml). Se observa el crecimiento de los microorganismos mediante la aparicin de turbidez, o el cambio de color del indicador incorporado al medio.

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MTODO DE DIFUSIN

PRINCIPIO DEL MTODO

Mtodo de Difusin en Disco (Baeur-Kirby)Es el mas difundido.Prueba la inhibicin o resistencia de los microorganismos, enfrentndolos con los medicamentos que se encuentran impregnados en pequeos discos.

Medio de cultivo utilizadoMueller HintonSu reproducibilidad aceptable. Baja concentracin de inhibidores, condicin crtica para evaluar sulfonamidas, trimetoprim y tetraciclina. El crecimiento satisfactorio de patgenos no exigentes. Existir ya gran experiencia en estudios de susceptibilidad.

Inoculacin de la placa Con un hisopo estril en tres direcciones inocule toda la placa (giros de 60).

Aplicacin de sensidiscos

separacin: los discos deben de estar separados24 mm (del centro de un sensidisco al otro ms cercano).

Cantidad: 12 unidades en placas de 150mm y 5 unidades en placas se 100mm.

Cultivo en 24 48 Horas

Lectura e interpretacin de los resultados

Categoras de interpretaron:Sensible: El microorganismo presenta un gran rea de inhibicin causada por el frmaco. 95% xito Intermedio: Se presenta un halo de inhibicin mas reducido.Resistente: Presenta muy poco o casi nada de halo.

Medicin de los halos

Despus de incuba las placas del antibiograma se proceder a la lectura de este.Se usa una regla y se mide el radio del halo de inhibicin partiendo de desde donde est el disco de antibitico hasta donde se inhibi el crecimiento.La longitud obtenida despus se compararn con estndares que nos dirn si el medicamento ser efectivo o no en el tratamiento.

AntibiticoResistenteIntermediaSusceptibleAmpicilina 1314 - 16 17Amikacina 1415 16 17Sulfisoxasol 1213 - 16 17Gentamicina 1213 14 15Cloranfenicol 1213 - 17 18Ceftriaxona 1214 20 21Ciprofloxacina 1516 - 20 21Tetraciclina 1415 - 18 19AcidoNalidixico 1314 18 19Estrptomicina 1112 14 15anamicina 1314 - 17 18Trimetroprim/Sulfametoxasol 1011 15 16

METODOS CONVENCIONALESLos mtodos convencionales o fenotpicos, a su vez pueden ser:a)Cuantitativos:permiten conocer la CIM de un antimicrobiano frente a un determinado microorganismo (en ug/ml), lo que es de gran utilidad al momento de definir las dosificaciones, especialmente en pacientes crticos. Existen mtodos cuantitativos de referencia oGold standard(ya sea micro o macro dilucin en caldo y/o dilucin en agar) y aquellos que no son de referencia (E-test,Just-One), pero que facilitan de manera importante la realizacin de antibiograma por CIM en la prctica diaria a la vez que da flexibilidad respecto de a qu antimicrobianos estudiar la CIM y a cules no.b)Cualitativos(difusin en disco o Kirby Bauer), que a travs de la medicin de un halo en mm permite correlacionar con la CIM y entregar una categora de Susceptible, Intermedio o Resistente frente a cada antimicrobiano.c)De screening y punto de corte,permiten separar cepas con algn mecanismo de resistencia especfico, de aquellas que no lo poseen. Para esto, existen diversos agares cromgenos o descreening, que contienen una concentracin de antimicrobiano que constituye el punto de corte para identificar las cepas resistentes.

METODOS AUTOMATIZADOSLos mtodos automatizados disponibles son:a)Microdilucin rpida(mtodos comerciales fenotpicos: Vitek, Phoenix, Microscan). Estos mtodos, al igual que la identificacin automatizada, consisten en paneles con pocillos miniaturizados que contienen diferentes concentraciones de antimicrobianos, segn los puntos de corte que permiten diferenciar cepas resistentes de cepas intermedias o sensibles. Estos paneles o tarjetas contienen antimicrobianos definidos para los distintos grupos de microorganismos (bacilos, cocceas, levaduras, gram positivo, gram negativo), se ingresan al equipo respectivo, el cual mediante turbidimetra establece las CIM de cada cepa. Actualmente estos equipos cuentan consoftwaresde interpretacin o reglas de experto, para informar resultados coherentes de susceptibilidad. Estos equipos permiten realizar la identificacin (ya sea bioqumica o por MALDI) y estudio de susceptibilidad en forma integrada.b)PCR(mtodos comerciales genotpicos), que detectan presencia de genes de resistencia conocidos, o bien,c)La deteccin de perfiles protemicosmediante MALDI-TOF post exposicin a un determinado antimicrobiano.

matriz assisted laser desorption ionization time-of-flight.Amplificacion, termociclador, ADN Polimerasa, Multiplicacion.28

Mtodo Automatizado:Este mtodo se basa en micro diluciones sobre micro tubos. El crecimiento bacteriano se va a observar por la turbidez o fluorescencia de los micro tubos.Es til para examinar una gran cantidad de muestras

CONCEPTOS

Interpretacin de ATB: Donde se realiza la categorizacin clnica, es decir, definir como sensible, intermedio o resistente un resultado del antibiograma en funcin de los valores de CMI o de halos de inhibicin establecidos por diferentes comits nacionales e internacionales**, y que diariamente realizan los laboratorios de microbiologa.Lectura Interpretada de ATB: La lectura interpretada del antibiograma es una prctica habitual en el laboratorio de microbiologa como complemento de la interpretacin o de la categorizacin clnica de los resultados de sensibilidad. Consiste en el reconocimiento fenotpico de los mecanismos de resistencia y permite, a partir de ste, la inferencia de fenotipo inicial. Asimismo, condiciona la modificacin de las categoras clnicas y la deduccin de los valores de sensibilidad de antimicrobianos no incluidos en el antibiograma.

**CLSI, ECAST, MENSRA, etc.

Clinical and Laboratory Standards Institute en Estados Unidos2, el European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing en Europa3y la Mesa Espaola de Normalizacin de la Sensibilidad y Resistencia a los Antimicrobianos431

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LECTURA INTERPRETADA DE ANTIBIOGRAMAEs un anlisis fenotpico de los resultados de las pruebas de sensibilidad, fundamentado en el conocimiento de los mecanismos de resistencia y en su expresin fenotpica

Lectura Interpretada del Antibiograma: Puntos ImportantesIdentificacin correcta de la bacteriaConocimiento de las resistencias naturalesIdentificacin de las resistencias adquiridasConocimiento de la Epidemiologia localUtilizacin de los ATB marcadores de resistencia*Utilizacin de Tcnicas confirmatorias

USO ADECUADO DE LOS ANTIBIOTICOS

IDENTIFICACION GRAM POSITIVOS

Cocos Gram PositivosCatalasa

StaphylococcusStreptococcus EnterococcusCoagulasaS. AureusS. pseudointermediusS. epidermidisS. SaprofiticusS. HominisS. HaemolyticusS. lugdunensis

80% son Resistentes a Homlogos de Meticilina y Penicilina

S. ViridansS. pneumoniaeS. PyogenesS. agalactiaeEnterococcus sp

ESTRUCTURA PARED GRAM POSITIVOS

IDENTIFICACION GRAM NEGATIVOS

Bacilos Gram NegativosFermentacin de Azucares

E. ColiKlebsiella sppEnterobacter sppCitrobacter sppSerratia marcescens

Pseudomona aeuroginosaAcinobacter baumanniiBurkholderiacepaciaEdwardsiella corrodenseStenotrophomonas maltophilia

Oxidasa

Pseudomona aeuroginosaBurkholderiacepacia

Acinobacter baumanniiStenotrophomonas maltophilia

ESTRUCTURA PARED GRAM NEGATIVOS

Diferencia en la estructura celular

Principal factor que contribuye para diferencias en mecanismos de resistencia

BIBLIOGRAFIAhttp://new.paho.org/hq/dmdocuments/2011/Guia_inside_LR.pdfhttp://appswl.elsevier.es/watermark/ctl_servlet?_f=10&pident_articulo=80000504&pident_usuario=0&pcontactid=&pident_revista=51&ty=35&accion=L&origen=apccontinuada&web=www.apcontinuada.com&lan=es&fichero=v7n4a404pdf001.pdf&anuncioPdf=ERROR_publi_pdfhttp://www.revclinesp.es/es/interpretacion-del-antibiograma-eleccion-del/articulo/13053735/http://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia-clinica-28-articulo-lectura-interpretada-del-antibiograma-enterobacterias-S0213005X10002193http://www.elsevier.es/es-revista-revista-medica-clinica-las-condes-202-articulo-nuevas-tecnologas-en-diagnstico-microbiolgico-S0716864015001510http://www.sefh.es/53congreso/documentos/ponencias/ponencia774.pdf