Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de ...
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CARRERA DE BIOQUÍMICA CLÍNICA Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma doméstica en el Parque “La Carolina” Trabajo de investigación presentado como requisito previo para la obtención del título de Bioquímico Clínico AUTORAS: Sandra Pamela Cangui Panchi Karol Mishel Delgado Juca TUTORA: MSc. Rommy Ivette Terán Soto Quito, 2019
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA DE BIOQUÍMICA CLÍNICA
Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma doméstica
en el Parque “La Carolina”
Trabajo de investigación presentado como requisito previo para la obtención del título
de Bioquímico Clínico
AUTORAS: Sandra Pamela Cangui Panchi
Karol Mishel Delgado Juca
TUTORA: MSc. Rommy Ivette Terán Soto
Quito, 2019
ii
Derechos de autor
Nosotras, Sandra Pamela Cangui Panchi con CC.1724490584 y Karol Mishel Delgado Juca con
CC. 1717394264 en calidad de autoras y titulares de los derechos morales y patrimoniales del
trabajo de titulación Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma doméstica
en el Parque “La Carolina”, modalidad presencial, de conformidad con el Art. 114 del
CÓDIGO ORGÁNICO DE LA ECONOMÍA SOCIAL DE LOS CONOCIMIENTOS,
CREATIVIDAD E INNOVACIÓN, concedemos a favor de la Universidad Central del Ecuador
una licencia gratuita, intransferible y no exclusiva para el uso no comercial de la obra, con fines
estrictamente académicos. Conservamos a nuestro favor todos los derechos de autor sobre la
obra, establecidos en la normativa citada.
Así mismo, autorizamos a la Universidad Central del Ecuador para que realice la digitalización
y publicación de este trabajo de titulación en el repositorio virtual, de conformidad a lo
dispuesto en el Art. 144 de la Ley Orgánica de Educación Superior.
Las autoras declaran que la obra objeto de la presente autorización es original en su forma de
expresión y no infringe el derecho de autor de terceros, asumiendo la responsabilidad por
cualquier reclamación que pudiera presentarse por esta causa y liberando a la Universidad
Central del Ecuador de toda responsabilidad.
_____________________________ _____________________________
Sandra Pamela Cangui Panchi Karol Mishel Delgado Juca
CC. 1724490584 CC. 1717394264
iii
Aprobación del tutor
Yo, MSc. Rommy Ivette Terán Soto en calidad de tutora del trabajo de titulación, modalidad
proyecto de investigación Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma
doméstica en el Parque “La Carolina”, elaborado por las estudiantes Sandra Pamela Cangui
Panchi y Karol Mishel Delgado Juca de la Carrera de Bioquímica Clínica, Facultad de Ciencias
Químicas de la Universidad Central del Ecuador, considero que el mismo reúne los requisitos
y méritos necesarios en el campo metodológico y en el campo epistemológico, para ser
sometido a la evaluación por parte del jurado examinador que se designe, por lo que lo
APRUEBO, a fin de que el trabajo sea habilitado para continuar con el proceso de titulación
determinado por la Universidad Central del Ecuador.
En la ciudad de Quito, a los 21 días del mes octubre de 2019
_________________________
Firma de la Tutora
MSc. Rommy Ivette Terán Soto
CC. 1708168966
iv
Aprobación del informe final por parte del tribunal
El Tribunal constituido por: MSc. Rommy Terán, MSc. Inés Echeverría y MSc. Iván Tapia.
Luego de Calificar el Informe Final de Investigación del trabajo de titulación denominado
Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma doméstica en el Parque “La
Carolina” previo a la obtención del título de Bioquímico Clínico presentado por las señoritas
Sandra Pamela Cangui Panchi y Karol Mishel Delgado Juca, APROBAMOS el trabajo
presentado.
En la ciudad de Quito, a los 8 días del mes noviembre de 2019
Para constancia de lo actuado firman:
v
Dedicatorias
A mi hermano Danny
por darme siempre fortaleza
por toda la felicidad que has traído a mi vida
y por ser luz en mi camino.
A mis padres Marlene y Milton
por todo su amor y sacrificio
por tomarme de la mano y nunca soltarme
por proteger mis sueños y ayudarme a cumplirlos
y sobre todo por haber sembrado en mí
valores y principios que me acompañarán el resto de mi vida.
Pamela Cangui
Dedico este trabajo a Dios, a mis padres y hermano,
que son los pilares fundamentales en mi vida y
gracias a ellos he logrado llegar hasta aquí, como persona y profesional.
Karol Delgado
“La ciencia es bella y por esa belleza es que debemos trabajar en ella”
Marie Curie
vi
Agradecimientos
A Dios por iluminar mi vida, guiar mi camino y dotarme de inteligencia, sabiduría y fuerza.
A la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Central del Ecuador y a todos sus docentes por
haber formado mi espíritu investigador e infundirme amor y pasión por la ciencia, en especial gracias a la
MSc. Rommy Terán, a la MSc. Inés Echeverría y al MSc. Iván Tapia por su confianza y apoyo para hacer
posible la realización de este trabajo de investigación.
A toda mi familia y amigos por sus consejos, palabras de aliento, apoyo y amor incondicional, por confiar
en mí y siempre motivarme a ser una mejor persona.
Y a todos quienes influyeron positivamente en mi vida para enseñarme a soñar, a superarme y a dar lo
mejor de mí para alcanzar mis metas.
A todos ustedes, siempre mi gratitud.
Pamela Cangui
vii
Una etapa de mi vida culmina con grandes lecciones y personas, además con un gran amor por la ciencia
y con muchos sueños por delante. Agradezco en primer lugar a Dios porque con su amor y apoyo me he
podido formar como persona y profesional.
A mis padres Marco Delgado y Verónica Juca por ser la luz en mi vida, el ejemplo de lucha y
perseverancia, por nunca alejarse de mi lado y haberme inculcado grandes valores para cumplir una meta
profesional, les dedico todo mi esfuerzo y amor puesto en toda mi formación académica y en este trabajo.
Gracias por ser unos maravillosos padres que han formado una persona cargada con una mochila llena
de buenos recuerdos, lecciones, amor, consejos y sabiduría que mira hacia el futuro con grandes
expectativas y con mucha fuerza para seguir cumpliendo todos mis sueños.
A mi pequeño hermano Kevin Delgado por haberme dado impulso y amor para siempre seguir adelante y
sobre todo ayudarme a ser un gran ejemplo en su vida.
A mis abuelos, tíos y primos que siempre apoyaron mis estudios, gracias por todos los consejos y amor.
A mi amiga Pamela Cangui por haber sido mi apoyo más grande dentro y fuera de las aulas, por ser una
gran amiga y compañera. Cuando comenzamos la universidad prometimos cumplir muchas metas y una
de ellas era graduarnos juntas, ha sido un honor ser su compañera y realizar este trabajo juntas. De igual
manera a su familia, por abrirme las puertas de su casa y aportar su granito de arena en mis estudios.
A mis compañeros, profesores y demás personas que de alguna manera influyeron positivamente en mi
educación y me enseñaron las bases para seguir construyendo un futuro dentro de la ciencia.
Por último a la Universidad Central del Ecuador por ofrecerme una educación de calidad y a mi tutora
MSc. Rommy Terán y lectores MSc. Inés Echeverría y al MSc. Iván Tapia por su ayuda, confianza y tiempo
para culminar este trabajo de investigación.
Karol Delgado
viii
Índice de contenido
Derechos de autor ....................................................................................................................... ii
Aprobación del tutor .................................................................................................................. iii
Aprobación del informe final por parte del tribunal ................................................................. iv
Resumen .................................................................................................................................. xiii
Abstract ................................................................................................................................... xiv
Introducción ............................................................................................................................... 1
Capítulo I .................................................................................................................................... 3
El Problema ................................................................................................................................ 3
1.1. Planteamiento del problema ............................................................................................ 3
1.2. Formulación del problema .............................................................................................. 4
1.3. Preguntas de investigación o directrices ......................................................................... 4
1.4. Objetivos ......................................................................................................................... 5
1.4.1. Objetivo general ....................................................................................................... 5
1.4.2. Objetivos específicos ................................................................................................ 5
1.5. Justificación e importancia .............................................................................................. 5
Capítulo II .................................................................................................................................. 7
Marco Teórico ............................................................................................................................ 7
2.1. Antecedentes ................................................................................................................... 7
2.2. Fundamento teórico ......................................................................................................... 8
2.2.1. Zoonosis ................................................................................................................... 8
2.2.1.1. Definición .............................................................................................................. 8
2.2.1.2. Epidemiología ....................................................................................................... 8
2.2.1.3. Modos de transmisión de las enfermedades zoonóticas ........................................ 9
2.2.1.4. Zoonosis causada por Salmonella spp. ................................................................ 12
2.2.1.5. Zoonosis causada por otras bacterias .................................................................. 31
2.2.1.6. Medidas preventivas de enfermedades zoonóticas .............................................. 32
2.3. Marco legal .................................................................................................................... 34
2.4. Hipótesis ........................................................................................................................ 38
2.4.1. Hipótesis de trabajo ................................................................................................ 38
2.4.2. Hipótesis nula ......................................................................................................... 38
2.5. Sistema de variables ...................................................................................................... 38
Capítulo III ............................................................................................................................... 39
Marco Metodológico ................................................................................................................ 39
3.1. Diseño de la investigación............................................................................................. 39
3.2. Población y muestra ...................................................................................................... 39
3.3. Materiales y métodos .................................................................................................... 42
3.3.1. Materiales ............................................................................................................... 42
3.3.2. Métodos .................................................................................................................. 43
3.4. Operacionalización de las variables .............................................................................. 44
3.5. Técnicas e instrumentos de recolección de datos .......................................................... 45
3.6. Técnicas de procesamiento y análisis de datos ............................................................. 45
ix
Capítulo IV ............................................................................................................................... 46
Análisis y Discusión de Resultados ......................................................................................... 46
4.1. Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma doméstica y su
comparación ......................................................................................................................... 46
4.2. Porcentaje de muestras de heces caninas y de palomas recolectadas cerca de alimentos o
agua que fueron positivas para Salmonella spp. .................................................................. 48
4.4. Porcentaje del color de las muestras de heces caninas y de palomas que fueron positivas
para Salmonella spp. ............................................................................................................ 52
4.5. Porcentaje de la consistencia de las muestras de heces caninas y de palomas que fueron
positivas para Salmonella spp. ............................................................................................. 53
4.6. Porcentaje del aspecto de las muestras de heces caninas y de palomas que fueron
positivas para Salmonella spp .............................................................................................. 55
4.7. Porcentajes de muestras positivas para Salmonella spp. en cada lugar de recolección del
Parque “La Carolina” ........................................................................................................... 56
4.8. Porcentaje de aislamiento de otras bacterias zoonóticas y no zoonóticas identificadas por
pruebas bioquímicas ............................................................................................................. 59
Capítulo V ................................................................................................................................ 64
Conclusiones y Recomendaciones ........................................................................................... 64
5.1. Conclusiones ................................................................................................................. 64
5.2. Recomendaciones .......................................................................................................... 66
Bibliografía ............................................................................................................................... 69
ANEXOS .................................................................................................................................. 76
x
Lista de tablas
Tabla 1. Especies y subespecies de Salmonella spp. y sus reservorios más frecuentes….…….14
Tabla 2. Principales agentes bacterianos causantes de enteritis….…………………….……..15
Tabla 3. Características de las colonias de varias especies en el medio selectivo XLDA……..30
Tabla 4. Identificación de las cepas más frecuentes de enterobacterias……………………….31
Tabla 5. Agentes zoonóticos bacterianos más comunes en infecciones entéricas…………….32
Tabla 6. Operacionalización de las variables………………………………………………...44
Tabla 7. Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma doméstica.…………46
Tabla 8. Muestras de perros y palomas recolectadas cerca de alimentos o agua que fueron
positivas para Salmonella spp.………………………………………………………………...49
Tabla 9. Datos de las muestras fecales donde se aisló Salmonella spp…..…….........................50
Tabla 10. Muestras secas y frescas de perros y palomas en las que se aisló Salmonella spp…..50
Tabla 11. Color de las muestras de perros y palomas de las que se aisló Salmonella spp….......52
Tabla 12. Consistencia de las muestras de perros y palomas donde se aisló Salmonella spp….53
Tabla 13. Aspecto de las muestras de perros y palomas que fueron Salmonella spp.
positivas………………………………………………………………………………………55
Tabla 14. Sitios del Parque “La Carolina” donde se recolectó muestras fecales positivas para
Salmonella spp.……………………………………………………………………………….56
Tabla 15. Prevalencia máxima posible de muestras caninas y de paloma doméstica de los sitios
donde los resultados fueron negativos para Salmonella spp.………………………………….59
Tabla 16. Crecimiento bacteriano de las muestras fecales de perros y palomas………………59
Tabla 17. Otras bacterias aisladas de las muestras de perros y palomas………………………60
Tabla 18. Muestras de perros y palomas con una, dos o tres cepas aisladas…………………...61
xi
Lista de gráficos
Gráfico 1. Esquema de clasificación taxonómica del género Salmonella…………………….12
Gráfico 2. Transmisión de Salmonella spp…………………………………………………...14
Gráfico 3. Clasificación de las subespecies de Columba livia………………………………...19
Gráfico 4. Distribución del ave Columbia livia a nivel mundial………………………………19
Gráfico 5. Cambios inducidos en la célula hospedadora por la acción del SST3 SPI-1……….23
Gráfico 6. Inflamación transitoria de los enterocitos………………………………………….24
Gráfico 7. Formación de la SCV e inducción del SST3 SPI-2 en el interior de la célula
hospedadora………………………………………………………………………………….. 25
Gráfico 8. Fisiopatogenia de Salmonella spp. y complicaciones post-infección……………...26
Gráfico 9. Distribución geográfica del Parque “La Carolina” del Distrito Metropolitano de
Quito…………………………………………………………………………………………..40
xii
Lista de anexos
A. Conceptualización de variables ........................................................................................... 76
B. Número de atenciones con diagnósticos de fiebre tifoidea, paratifoidea y otras infecciones
debidas a Salmonela spp. en el Distrito Metropolitano de Quito ............................................. 77
C. Características generales y enfermedades causadas por enterobacterias ............................. 78
D. Instrumento de recolección de datos ................................................................................... 80
E. Matriz de validación de instrumentos .................................................................................. 82
F. Fotografías de la investigación……………………………………………………………..85
xiii
TÍTULO: Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma doméstica en el Parque
“La Carolina”
Autoras: Sandra Pamela Cangui Panchi y Karol Mishel Delgado Juca
Tutora: MSc. Rommy Ivette Terán Soto
Resumen
La zoonosis es considerada un problema de salud pública a nivel mundial y una de las
enfermedades con mayor incidencia es la salmonelosis ocasionada por Salmonella spp. debido
a que sobrevive a condiciones ambientales extremas y su transmisión más reportada es mediante
el contacto directo con animales y alimentos contaminados con materia fecal. Los animales son
los reservorios zoonóticos más importantes, de estos los perros y las paloma doméstica
(Columba livia) tienen una cercana convivencia con el ser humano y excretan el patógeno hasta
tres meses posteriores a la infección, por estas razones sus deposiciones se escogieron como
objeto de estudio. En la investigación se determinó la prevalencia de Salmonella spp. en heces
caninas y de paloma doméstica en el Parque “La Carolina”. Se recolectaron 100 muestras de
heces de cada animal anotando las características macroscópicas como color, consistencia,
aspecto y tipo, seguidamente en el análisis microbiológico se pesó un gramo de la muestra en
agua peptonada tamponada, luego de 24 horas de incubación a 37 °C se pasó 1mL del caldo al
medio Rapapport Basiliadis Borth durante 24 horas a 41.5 °C. Se diferenciaron las colonias en
XLDA y se aisló en TSA para la identificación mediante pruebas bioquímicas. Los resultados
obtenidos fueron 3% de prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y 5% en heces de
paloma doméstica. Al mismo tiempo, se realizó un análisis estadístico de las características
macroscópicas de la materia fecal para establecerlas como factores de riesgo que indiquen la
presencia de Salmonella spp., concluyendo que estas dos variables no tienen una correlación
significativa. La prevalencia obtenida en perros y palomas concuerda con otros estudios
realizados donde las palomas son el reservorio con mayor zoonosis y se concluye que la
existencia del microorganismo en la materia fecal de perros y palomas representa un grave
problema de salud por la eliminación del patógeno y la contaminación de agua y alimentos.
PALABRAS CLAVE: ZOONOSIS, SALMONELLA SPP., HECES, PERROS, PALOMA
DOMÉSTICA.
xiv
TITLE: Prevalence of Salmonella spp. in canine and domestic pigeon feces in the park “La
Carolina”
Authors: Sandra Pamela Cangui Panchi y Karol Mishel Delgado Juca
Tutor: MSc. Rommy Ivette Terán Soto
Abstract
Zoonosis is considered a public health problem worldwide and one of the diseases with the
highest incidence is salmonellosis caused by Salmonella spp. because it survives extreme
environmental conditions and its most reported transmission is through direct contact with
animals and food contaminated with fecal matter. Animals are the most important zoonotic
reservoirs, of these dogs and domestic pigeons (Columba livia) have a close coexistence with
the human being and excrete the pathogen up to three months after infection, for these reasons
their depositions were chosen as the object study. In the investigation the prevalence of
Salmonella spp. in canine and domestic pigeon feces in the "La Carolina" Park. 100 samples of
feces from each animal were collected, noting the macroscopic characteristics such as color,
consistency, appearance and type, then in the microbiological analysis a gram of the sample
was weighed in buffered Peptonated Water, after 24 hours of incubation at 37 ° C passed 1mL
of the broth to the Rapapport Basiliadis Borth medium for 24 hours at 41.5 ° C. Colonies were
differentiated in XLDA and isolated in TSA for identification by biochemical tests. The results
obtained were 3% prevalence of Salmonella spp. in canine feces and 5% in feces of domestic
pigeons. At the same time, a statistical analysis of the macroscopic characteristics of the stool
was carried out to establish them as risk factors that indicate the presence of Salmonella spp.,
Concluding that these two variables do not have a significant correlation. The prevalence
obtained in dogs and pigeons is consistent with other studies conducted where pigeons are the
reservoir with greater zoonosis and it is concluded that the existence of the microorganism in
the fecal matter of dogs and pigeons represents a serious health problem due to the elimination
of the pathogen and the Water and food contamination.
KEYWORDS: ZOONOSIS, SALMONELLA SPP., FECES, DOGS, DOMESTIC PIGEONS.
1
Introducción
A nivel mundial la zoonosis es un problema de salud pública y en Ecuador se indica que el
80% de las patologías causadas por zoonosis se producen mediante el contacto con los animales,
ya que los seres humanos se exponen a sus fluidos y desechos biológicos tanto directa como
indirectamente, esta última en especial a través del consumo de alimentos contaminados, ya sea
por virus, bacterias, parásitos y hongos (Ministerio de Salud Pública, 2008).
La salmonelosis es una de las principales enfermedades infecciosas zoonóticas que afecta a
los animales y al ser humano, la bacteria causante se denomina Salmonella spp. que tiene una
distribución a nivel mundial. Varias investigaciones indican que en su transmisión pueden estar
implicados reservorios zoonóticos de animales como perros, aves, cerdos, conejos, vacas, entre
otros y debido a que el contacto con el humano es diario, se ha considerado de mayor interés
investigar a los perros y a las aves para establecer un enlace con la contaminación alimentaria
y su materia fecal, lo que podría desencadenar en infecciones a los seres humanos que pueden
iniciar con una enteritis, pero a la vez ocasionar varias complicaciones principalmente, en
grupos vulnerables como niños, adultos mayores, embarazadas e inmunodeprimidos (Herrera
& Jabib, 2015).
En varias investigaciones se logró aislar Salmonella spp. en las heces de perros y palomas,
como en el estudio realizado en México D.F. donde se analizaron las muestras fecales de
humanos, aves, cerdos y perros, aislando tres bacterias principales: Salmonella spp. Shigella
spp. y Escherichia coli (J. Gonzáles, Vargas, Almanza, López, & Barrera, 2013). En otro
estudio ejecutado en Turquía se identificaron cuatro cepas de Salmonella enteritidis y dos de
Salmonella typhimurium en heces caninas (Bagcigil et al., 2007) y en la frontera entre México
y Estados Unidos se aislaron 47 cepas de diferentes serotipos de Salmonella spp. en perros
callejeros y 19 cepas en perros domésticos, sumando un total de 66 cepas (Jay-Russell, Hake,
Bengson, Thiptara, & Nguyen, 2014). En análisis realizados en Japón se encontró Salmonella
typhimurium y Salmonella cerro en 17 (3,9%) de 436 muestras de materia fecal de palomas
(Tanaka, Miyazawa, Watarai, & Ishiguro, 2005) y en Uruguay se aisló Salmonella grupo O:9
(24,4%) de los sueros de aves (L Betancor et al., 2010). Por lo tanto, sería importante establecer
datos en la ciudad de Quito que es la segunda más poblada de Ecuador. Se eligió el Parque “La
Carolina” debido a que transcurren cientos de familias cada fin de semana, exponiéndose a los
desechos de perros domésticos y callejeros, así como de las palomas ya que los árboles y otros
lugares del parque son su hábitat natural.
Este Trabajo Final de Titulación se estructura de la siguiente manera:
Capítulo I. El Problema: incluye el análisis de la problemática con un contexto espacial y
temporal, además se establece la importancia y justificación en las que se fundamenta la
investigación y se detalla el objetivo general y los objetivos específicos del estudio.
Capítulo II. Marco Teórico: respaldado en referencias bibliográficas indica los antecedentes
de la investigación y basándose en la conceptualización de variables (Anexo A) se desarrolla el
2
fundamento teórico con los temas más relevantes del proyecto para el conocimiento del lector,
se incluye también el marco legal que vincula el proyecto con el ámbito legal, se citan distintos
artículos y finalmente se describen las hipótesis y variables con las que se trabajaron en la
investigación.
Capítulo III. Marco Metodológico: argumenta el diseño que se usó en el estudio aclarando
el paradigma, nivel y los tipos de investigación; además, se describe la población y la muestra,
los métodos y materiales para el análisis microbiológico que se basaron en el “Manual para la
Vigilancia, Prevención y Control Sanitario de Agentes Zoonóticos y Zoonosis relacionada a la
Paloma Doméstica” del Ministerio de Salud de Perú y el “Instructivo Técnico para la Detección
de Salmonella spp” según la norma ISO 6579:2002. También se diseñó la tabla de
operacionalización de las variables que es una matriz única y particular del estudio y permite
conocer los instrumentos y la ruta de la investigación. Finalmente, se describen las técnicas e
instrumentos de recolección de datos con su modo de validación y las técnicas de procesamiento
y análisis de datos.
Capítulo IV. Análisis y Discusión de Resultados: la metodología microbiológica aplicada
ayudó a aislar el microorganismo y establecer la prevalencia de Salmonella spp. en el 3% de
100 muestras de la materia fecal de perros y 5% de 100 muestras de la materia fecal de palomas
domésticas. Además se determinó que las características macroscópicas de las muestras de
materia fecal como: tipo, color, consistencia y aspecto, no son factores de riesgo que indiquen
la presencia de Salmonella spp. porque el análisis entre las variables no es estadísticamente
significativo. También se identificaron otros agentes zoonóticos y no zoonóticos, patógenos y
de flora normal de perros y palomas.
Capítulo V. Conclusiones y Recomendaciones: considerando los resultados y la información
bibliográfica, se recomendaron alternativas para la prevención de enfermedades zoonóticas y
la transmisión de agentes zoonóticos a través de reservorios.
Anexos: se incluyen al final del documento y aportan información adicional e importante
que es necesaria para el avance y la comprensión de la investigación.
3
Capítulo I
El Problema
1.1. Planteamiento del problema
La Organización Mundial de la Salud (OMS) define a las enfermedades zoonóticas como un
grupo de infecciones transmitidas de animales a seres humanos debido su contacto directo e
indirecto, a través de mordeduras, arañazos, saliva, caspa y especialmente por el contacto con
sus excrementos. La zoonosis se considera un problema de salud a nivel mundial, ya que ha
provocado 600 millones de casos de enfermedades transmitidas por alimentos y 420 000
muertes en el año 2015. En estas estadísticas se incluyen con mayor prevalencia 11 agentes
etiológicos causantes de 230 000 muertes al año por enfermedades diarreicas, destacando a
Salmonella entérica no tifoidea como principal patógeno por su afectación invasiva
(Organización Mundial de la Salud, 2015a).
Según la Organización Panamericana de la Salud (OPS) de los 1 415 patógenos humanos
conocidos en el mundo 61% son zoonóticos. Entre los principales reservorios de enfermedades
zoonóticas se encuentran insectos, roedores, aves y mascotas que son la fuente principal de
infección para el hombre por los diversos microorganismos de los que son portadores;
principalmente, a la población en riesgo (embarazadas, niños, adultos mayores e
inmunodeprimidos) (The Center for Food Security & Public Health, 2015). De aquí radica no
solo su importancia médica sino también económica, ya que en los países en vías de desarrollo
como los de Latinoamérica, se presentan pérdidas incalculables mucho más altas que en los
países industrializados debido al desconocimiento sobre la temática y su afectación en la salud
pública (Organización Panamericana de la Salud, 2017).
Un estudio realizado en el Centro de Bienestar Animal “La Perla” en Medellín-Colombia
indica que luego de analizar la materia fecal de 44 perros se logró aislar 4 cepas de Salmonella
spp. (Fonnegra, Londoño, & Hernandez, 2009). Otra especie importante que causa zoonosis es
Columba livia o mejor conocida como “paloma doméstica” que por sucesos como la migración
y el incremento de su población adapta su hábitat en los distintos parques, provocando la
exposición al humano y a otros animales de contraer diversas enfermedades por partículas
fecales dispersas en el ambiente que contaminan alimentos y bebidas, así se han calculado 30
enfermedades transmisibles. Un estudio realizado en la ciudad de Chillán-Chile indica que de
100 palomas analizadas el 11% estaban infectadas por Salmonella spp. (D. Gonzáles et al.,
2007).
En Ecuador se ha registrado que el 80% de patologías infecciosas están relacionadas con el
contacto cercano entre animales y humanos, principalmente con la materia fecal. Las
enfermedades pueden ser causadas por virus, bacterias, parásitos y hongos, por lo que en el país
se ha implementado el “Programa de Control de la Zoonosis” (Ministerio de Salud Pública del
Ecuador, 2008). Según el “Registro Diario Automatizado de Consultas y Atenciones
Ambulatorias” (RDACAA) y la “Plataforma de Registro en Atenciones de Salud (PRAS)” del
Ministerio de Salud Pública del Ecuador conjuntamente con la “Coordinación General de
4
Planificación y Gestión Estratégica” y la “Dirección Nacional de Estadística y Análisis de
Información de Salud”, indican que el número de atenciones con diagnósticos de fiebre tifoidea,
paratifoidea y otras infecciones debidas a la Salmonela spp. registrados entre los años 2013-
2018 en la ciudad de Quito son alarmantes debido a que el patógeno es zoonótico e incluso se
reportan casos de septicemia (Anexo B) (Dirección Nacional de Estadística y Análisis de
Información de Salud, 2019).
El problema radica en la falta de hábitos de saneamiento de los dueños de las mascotas, lo
que causa que la materia fecal se encuentre expuesta en distintas áreas de la ciudad de Quito,
también influye el incorrecto lavado de manos, el consumo de alimentos de ventas ambulantes
(muchas veces en condiciones insalubres) y el número excesivo de animales callejeros y aves
que son portadores sintomáticos y asintomáticos de varias enfermedades. Por todas estas
razones, la investigación se realizó en el Parque ¨La Carolina¨ porque es el más visitado de la
ciudad, se ha registrado que aproximadamente 50 000 personas llegan a este lugar cada fin de
semana y el 35% lleva a sus mascotas (El Comercio, 2009).
Por lo tanto, si el estudio no se desarrolla se mantendría el desconocimiento sobre el riesgo
en la salud pública y la transmisión zoonótica de diversos agentes patógenos como Salmonella
spp. esto a la vez limitaría la aplicación de medidas sanitarias para el control de los distintos
reservorios zoonóticos, por lo que los niveles de mortalidad y morbilidad por este agente
seguirían incrementando y provocando un impacto negativo en la salud y en la economía del
país.
1.2. Formulación del problema
¿Hay presencia de Salmonella spp. en la materia fecal de perros y paloma doméstica en el
Parque “La Carolina” del Distrito Metropolitano de Quito?
1.3. Preguntas de investigación o directrices
¿Cuál es el reservorio de bacterias zoonóticas que evidenció mayor prevalencia de
Salmonella spp.?
¿Alguna de las características macroscópicas en las heces positivas para Salmonella spp.
es un factor de riesgo que indique la presencia del microorganismo en la muestra?
¿Qué zona del Parque “La Carolina” mostró mayor prevalencia de Salmonella spp. en
las heces de perros y paloma doméstica?
¿Cuántas muestras de materia fecal de perros y paloma doméstica se encontraron
cercanas a alimentos o agua?
¿Se aislaron otros agentes bacterianos zoonóticos y no zoonóticos en las heces caninas
y de paloma doméstica?
5
1.4. Objetivos
1.4.1. Objetivo general
Determinar la prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma doméstica
muestreadas en el Parque “La Carolina” del Distrito Metropolitano de Quito.
1.4.2. Objetivos específicos
Definir el reservorio de bacterias zoonóticas con mayor prevalencia de Salmonella spp.
Determinar si alguna de las características macroscópicas en las heces positivas para
Salmonella spp. son factores de riesgo que indiquen la presencia del microorganismo.
Determinar la zona del Parque “La Carolina” con mayor prevalencia de Salmonella spp.
en las muestras fecales de perros y paloma doméstica.
Establecer la cantidad de muestras de materia fecal de perros y paloma doméstica que
se encuentran cercanas a alimentos o agua.
Aislar otros agentes bacterianos zoonóticos y no zoonóticos en las heces caninas y de
paloma doméstica.
1.5. Justificación e importancia
La elevada prevalencia e incidencia de enfermedades zoonóticas tanto a nivel mundial como
en el Ecuador se ha convertido en un problema de salud pública, por lo que es importante la
realización de investigaciones dirigidas a conocer tanto los patógenos y las enfermedades que
pueden causar en la población. La investigación está orientada a la zoonosis causadas por la
bacteria Salmonella spp. debido a la elevada prevalencia e incidencia de enfermedades
reportadas en la ciudad de Quito que incrementan la morbilidad y mortalidad causando impacto
en las áreas de salud y economía; además, este microorganismo tiene la facilidad de sobrevivir
a condiciones ambientales extremas y contamina varios huéspedes que infectan al humano. Los
perros y las palomas son reservorios importantes debido a la cercana convivencia que tienen
con el ser humano, su elevada población y la facilidad de contaminar fómites para la transmisión
del patógeno que ocasiona enteritis en humanos causando diarreas persistentes, náuseas,
vómito, cefalea, deshidratación grave, dolor abdominal, fiebre y que pueden evolucionar a
septicemia e infección focal dependiendo del tipo y la especie Salmonella spp. causando incluso
la muerte (Organización Panamericana de la Salud, 2015).
Los dos principales modos de transmisión de Salmonella spp. según la OMS son el consumo
de alimentos contaminados con materia fecal como causa principal y el contacto directo con los
animales, destacándose en especies comestibles como: porcinos, vacunos y aves, en mascotas
como: perros, reptiles (tortugas), gatos y pájaros. La bacteria tiene la capacidad de atravesar
toda la cadena alimentaria enlazada por la contaminación fecal de los animales a los productos
de alimentación y bebida, donde interviene la ausencia de sanidad pública, el modo de
preparación de los alimentos y la presencia y supervivencia del patógeno en el agua y las
vertientes (Organización Mundial de la Salud, 2018).
6
Para el desarrollo de la investigación se analizaron 100 muestras de materia fecal canina y
100 muestras de paloma doméstica, realizando un estudio microbiológico que comprende fases
de pre-enriquecimiento no selectivo, enriquecimiento selectivo, aislamiento en medios sólidos
selectivos y diferenciales, confirmación por pruebas bioquímicas y el respectivo procedimiento
para la crioconservación de las cepas que mostraron ser Salmonella spp. y que serán utilizadas
en posteriores investigaciones. Es importante dar conocer que todo este procedimiento tarda
entre una y dos semanas por cada muestra y solo se pueden procesar alrededor de veinte
muestras por cada período, lo que implica el empleo de varias horas de trabajo e investigación
diarias. Además, la comparación de los resultados obtenidos entre perros y palomas en el
análisis de sus muestras fecales, con respecto al nivel de contaminación de los alimentos y el
agua del Parque “La Carolina” es relevante en el estudio. Por todos estos motivos fue necesaria
la participación de dos investigadoras para lograr mejores resultados y contribuir de manera
más eficaz a la prevención de enfermedades zoonóticas como “Salmonelosis”, colaborando al
área de la salud con datos estadísticos y epidemiológicos que ayudarán a tomar medidas para
disminuir las tasas de prevalencia, mortalidad y morbilidad.
7
Capítulo II
Marco Teórico
2.1. Antecedentes
En el trabajo de investigación “Detección de Salmonella, Shigella y Escherichia en muestras
de origen humano y animal de las comunidades rurales del Estado de Guanajuato” realizado en
la Universidad de Guanajuato luego de analizar muestras de hisopos rectales de origen humano,
de cerdos, aves y perros se aisló Salmonella spp. en los siguientes porcentajes: de 50 muestras
el 45%, de 18 muestras el 37,5%, de 24 muestras el 7,5% y de 17 muestras el 2,8%
respectivamente en cada población, por lo tanto se establece como un riesgo potencial para la
salud humana la presencia de estos agentes patógenos debido a la existencia de zoonosis que
provoca infecciones y genera un gran impacto en la salud (J. Gonzáles et al., 2013).
En la investigación realizada por el Departamento de Microbiología de la Facultad de
Veterinaria y Medicina Interna de la Universidad de Estambul denominada “Fecal shedding of
Salmonella ssp. in dogs” realizó 100 hisopados rectales de perros domésticos y callejeros
cautivos en perreras, donde se logró aislar 4 cepas de Salmonella enteritidis y 2 de Salmonella
typhimurium, de las cuales una era resistente a la estreptomicina y neomicina (Bagcigil et al.,
2007).
En el estudio “Prevalence and characterization of Escherichia coli and Salmonella strains
isolated from stray dog and coyote feces in a major leafy greens production region at the United
States-Mexico border” realizado en base al brote multiestatal causado por Escherichia coli
O145:H28 que contaminó lechugas del sur de Arizona, se identificaron a los perros domésticos
y callejeros como un problema de salud debido a la zoonosis que ocasionan, por lo que se
analizaron 461 muestras fecales (358 de perros domésticos y 103 de perros callejeros) donde se
aislaron 47 cepas de diferentes serotipos de Salmonella spp. en perros callejeros y 19 cepas en
perros domésticos, sumando un total de 66 cepas aisladas de Salmonella spp. de las cuales 4
eran resistentes a dos o más clases de antibióticos (Jay, Hake, Bengson, Thiptara, & Nguyen,
2014b).
Laboratories of Veterinary Public Health and Veterinary Microbiology de Japón realizaron
la investigación “Bacteriological survey of feces from feral pigeons” examinando muestras de
heces de palomas donde se aisló Salmonella typhimurium y Salmonella cerro en 17 muestras
(3,9%) de 436, así también se aislaron otras especies como Mycobacterium spp., Chlamydia
psittaci y Escherichia coli O157:H7 con lo que concluyeron que las heces de palomas son
fuente de varios agentes zoonóticos tanto para animales como seres humanos (Tanaka et al.,
2005).
La Universidad de Sao Paulo de Brasil publicó en el 2017 el estudio “Free-ranging
synanthropic birds (Ardea alba and Columba livia domestic) as carriers of Salmonella spp. and
diarrheagenic Escherichia coli in the vicinity of an urban zoo” donde se evaluó el grado de
contaminación zoonótica en 156 hisopos rectales de aves de los cuales el 11% fue positivo para
8
Salmonella enterica por lo que las aves se consideran reservorios peligrosos que pueden ayudar
al desarrollo de brotes locales ya que esto involucra el riesgo de la presencia del patógeno en
los humanos que están expuestos su materia fecal (Oliveira et al., 2017).
2.2. Fundamento teórico
2.2.1. Zoonosis
2.2.1.1. Definición
El término zoonosis (de las palabras griegas zoon: animal y nosos: enfermedad) fue
determinado por Virchow en el siglo XIX, donde etimológicamente se refiere a “la enfermedad
de los animales", este término se aplica a aquellas enfermedades que padece el hombre por el
contacto cercano con los animales. La OMS en 1959 definió a la zoonosis por primera vez
como: “el conjunto de enfermedades e infecciones que se transmiten naturalmente de los
animales vertebrados al hombre y viceversa" (Organización Mundial de la Salud, 2015b). A
pesar de los adelantos alcanzados en el control de enfermedades y la extensión de la cobertura
de los servicios de salud, la incidencia de las zoonosis sigue siendo alta tanto en los países en
vías de desarrollo como en los desarrollados. Por lo tanto, la zoonosis es el conjunto de
enfermedades que los animales transmiten a los humanos por diversos mecanismos y existen
más de 200 zoonosis registradas que son causa de morbilidad y mortalidad en grupos
demográficos vulnerables (Álvarez, 2014).
Las enfermedades zoonóticas se analizan por medio de la triada epidemiológica porque su
nivel de transmisión es elevado entre humanos y animales, muchos de los padecimientos causan
manifestaciones clínicas graves e incluso la muerte. La triada epidemiológica es el modelo de
una infección transmisible, donde intervienen los huéspedes que pueden ser humanos o
animales, los agentes microbiológicos: parásitos, bacterias, virus y hongos sean o no infecciosos
y finalmente su interacción en un medio ambiente favorable para el crecimiento y reproducción
de los microorganismos (Organización Panamericana de la Salud, 2012).
2.2.1.2. Epidemiología
El desarrollo de enfermedades zoonóticas implica un desafío para todas las áreas
relacionadas con la salud pública y la veterinaria, incluyendo propósitos como la erradicación
de las patologías más prevalentes en cada región. En los países desarrollados y en vías de
desarrollo, las enfermedades que causan mayores problemas son la tuberculosis y brucelosis
bovina, pero entre otras con mayores porcentajes de incidencia se ubica a la salmonelosis
causada por más de los 2 000 serovares de Salmonella entérica que tiene una distribución a
nivel mundial y su transmisión zoonótica sucede cuando los principales animales que actúan
como reservorio (aves, ganado bovino, mamíferos salvajes, cerdos, crustáceos, anfibios, gatos,
caballos y perros) contaminan alimentos y causan infecciones frecuentes a ancianos, lactantes,
embarazadas y personas inmunodeprimidas que se muestran con manifestaciones clínicas que
van desde la enteritis hasta la septicemia (Merck, 2007).
9
Los microorganismos zoonóticos son culpables de diversos tipos de infecciones que
presentan diferentes manifestaciones clínicas dependiendo del órgano o lugar anatómico
afectado, las enfermedades más prevalentes son las respiratorias (traqueobronquitis,
conjuntivitis, amigdalitis y otitis), seguida de las cutáneas (sarna y dermatitis), digestivas
(diarrea y dipilidiasis) y otras enfermedades sistémicas. Si no se toman medidas adecuadas es
posible que algunas enfermedades resurjan o aparezcan nuevas, también que se desarrollen
coinfecciones y reinfecciones (Centro para el Control y la Prevención de Enfermedades, 2016).
Según un estudio realizado por el Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas
y Pecuarias del Departamento Federal de México, se identifican zoonosis persistentes como
ántrax (causada por Bacillus anthracis y presente de forma cutánea en el 60% de los países en
vías de desarrollo), rabia (aproximadamente 55 mil personas mueren cada año), tuberculosis (el
agente Mycobacterium bovis causa tuberculosis bovina y del 1 al 5% tuberculosis humana con
una prevalencia de 0,35 por 100 000 personas), brucelosis (prevalencia de 10 por 100 000
personas) y cisticercosis (afecta anualmente a 50 millones de personas). Por otro lado, la
zoonosis que requiere mayor atención es la leptospirosis (el agente Leptospira interrogans
causa más de 300 000 casos nuevos por año a nivel mundial con un intervalo de mortalidad del
5 al 20%) y finalmente, todas las zoonosis de origen alimentario que ocasionan la muerte de
aproximadamente 2,2 millones de personas cada año, de los cuales 1,9 millones son niños e
inmunodeprimidos y los principales agentes causantes son Salmonella y Campylobacter
(Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, 2012).
La campilobacteriosis ocasionada por Campylobacter jejuni es la enfermedad con mayor
número de casos registrados por la Unión Europea. La segunda zoonosis con elevada
prevalencia es la salmonelosis, entre los años 1980 y 1990 la prevalencia aumentó 20 veces y
en la actualidad se registra que en países desarrollados causa la hospitalización de 18 000
personas y 500 defunciones, el número de casos aumenta en los países en vías de desarrollo
(Flores, 2010).
2.2.1.3. Modos de transmisión de las enfermedades zoonóticas
Los modos, tipos o mecanismos de transmisión de enfermedades zoonóticas permiten a
diversos patógenos contaminar a una gran población de personas o animales a través de fuentes
infecciosas. En condiciones normales, las bacterias colonizan de manera equilibrada al
hospedador generando una convivencia armónica. Sin embargo, cuando esta relación es
alterada se desarrollan infecciones por microorganismos de la flora normal (personas con
inmunodeficiencia u otro tipo de vulnerabilidad) (London School Hygiene and Tropical
Medicine, 2018).
Los causantes de infecciones en mayor proporción son los microorganismos patógenos que
causan infecciones al hombre de dos maneras: zoonosis primaria que en la mayoría de las veces
se da por el consumo directo de animales infectados luego de su sacrificio (mal manejo de
higiene alimentaria, procesos de contaminación ambiental y putrefacción) o por el contacto
directo con el animal; zoonosis secundaria que se desarrolla por alimentos infectados con
10
microorganismo y transmitidos por varias vías al humano, donde predomina la falta de higiene
en las ventas ambulantes y la contaminación de vectores como las moscas y otros animales,
también la materia inanimada como aire, suelo, tierra y agua (Organización Mundial de la
Salud, 2015b).
Transmisión fecal-oral
Según los reportes de la OMS, el 70% de casos de enfermedades diarreicas agudas se
desarrollan después del consumo de agua o alimentos contaminados, a estas se las denomina
Enfermedades Transmitidas por Alimentos (ETA) que en los últimos años han aumentado las
tasas de morbilidad y mortalidad; además, han causado pérdidas económicas a los países tercer
mundistas. Las ETAs se definen como el grupo de enfermedades causadas por la ingestión de
alimentos contaminados con algún agente infeccioso por la falta de inocuidad y la posterior
producción de toxinas en el alimento. Un brote de estas enfermedades se desarrolla cuando dos
o más personas padecen los mismos signos y síntomas (cólicos abdominales, diarreas, náuseas,
vómitos, fiebre, dolor de cabeza, problemas renales y neurológicos) después de ingerir el mismo
alimento (Cecchini & González, 2014).
La transmisión por mecanismo indirecto más frecuente es mediante el agua y los alimentos
debido a que las condiciones ambientales permiten que varios patógenos sobrevivan en estas
fuentes de infección. En el caso del agua los agentes llegan por los restos orgánicos y excretas
de los animales y de los humanos (vía fecal) e ingresan en el nuevo huésped por vía oral, al
igual que sucede con los alimentos que pudieron haber contraído el patógeno por infección del
animal o por el ambiente. La cantidad del microorganismo debe superar 105 UFC/g de alimento
para causar una intoxicación (Cecchini & González, 2014).
Después que la materia fecal de los animales contamina los alimentos o el agua, los convierte
en un vehículo de agentes causales de ETAs. Con mayor frecuencia, el microorganismo se aloja
en las carnes, lácteos y derivados, huevos, arroz, legumbres y algunas frutas que en la mayor
parte de casos pueden desarrollar manifestaciones gastrointestinales. Los que producen mayor
riesgo son aquellos que no necesitan de cocción para ser ingeridos como los que poseen alto
contenido proteico y de agua, no son ácidos y se conservan a temperaturas no muy variables
(Jawetz, Melnick, & Adelberg, 2010).
Los alimentos se contaminan con mayor frecuencia por enterobacterias (Klebsiella,
Citrobacter, Escherichia coli, Enterobacter, Shigella, Campylobacter, Serratia, Erwinia,
Salmonella, Proteus, Erdwardisinella, Hafnia y Yersinia enterocolítica). Esto se debe a que los
alimentos se convierten en un buen medio de cultivo donde estos patógenos sobreviven y se
reproducen. Su clasificación se basa en la gravedad de la enfermedad, así: las de alta gravedad
causan problemas de salud importantes e incluso la muerte, las de moderada gravedad se deben
a patógenos menores donde los signos y síntomas se pueden revertir con asistencia médica y
las de baja gravedad solo desarrollan en cuadro clínico cuando los alimentos contienen una alta
cantidad del patógeno (Oscar et al., 2012).
11
Los microorganismos contaminantes de alimentos deben tener ciertas características que
incrementen su tiempo de supervivencia como: soportar los factores intrínsecos y extrínsecos
de los alimentos, sobrevivir a cambios drásticos de pH, mantener una capacidad elevada de
adhesión a las células intestinales del humano o de otro animal, conservar una alta competencia
para sobrevivir al antagonismo de la flora intestinal, penetrar en los tejidos sin dificultad y
producir toxinas (exotoxinas o endotoxinas) (Jawetz et al., 2010).
Así también, el grado de alcance de la infección va a depender de las características del
hospedador (humano o animal) como: su edad, motilidad gástrica, integridad y defensa de las
mucosas, exclusión competitiva por parte de la flora intestinal con los patógenos externos,
número de exposiciones al patógeno, dieta, nivel de estrés e inmunosupresión. Los signos y
síntomas de las ETAs son muy variables y dependen del patógeno, sus toxinas y de la cantidad
de microorganismos en el alimento consumido (Cecchini & González, 2014).
Los principales factores de riesgo son las malas prácticas en la producción primaria, la falta
de limpieza, el hacinamiento de animales, la ausencia de medidas de bioseguridad, la ausencia
de detección de los casos positivos y su aislamiento. Durante el procesado de los alimentos es
importante realizar adecuados tratamientos térmicos que impidan la multiplicación y el
crecimiento de la bacteria (Jiménez, 2016). En los últimos años se han implementado nuevas
técnicas para un mejor diagnóstico de las ETAs debido a que la diseminación de estas
enfermedades se da con gran rapidez, por lo que es importante que todo el personal de salud se
maneje con un equipo técnico adecuado para una rápida detección de brotes de ETAs (Jawetz
et al., 2010).
Transmisión por el aire
Este modo de transmisión es adecuado para los microorganismos que son resistentes a las
condiciones del aire debido a que sobreviven al bajo contenido de nutrición, a los rayos
ultravioletas y a la fuerza gravitatoria; pero estos patógenos necesitan que la proximidad entre
la fuente de infección y el receptor sea la menor posible para poder infectar al humano a través
de varias vías de ingreso como: la mucosa, fosas nasales, boca y piel lacerada o lastimada
(Organización Mundial de la Salud, 2015)
Transmisión por materia inanimada
La transmisión por materia inanimada o fómites es un tipo de mecanismo indirecto y se basa
en la existencia de vehículos sin movilidad que se encuentran contaminados como por ejemplo
teléfonos, computadoras, toallas, manijas, barandas, tubos, vajillas, material de uso clínico y el
suelo que es el más relevante, donde existen patógenos que se cubren con el polvo y pueden
ingresar por la vía respiratoria, oral o dérmica (I. Hernández et al., 2011).
12
2.2.1.4. Zoonosis causada por Salmonella spp.
Salmonella spp. es una bacteria con gran resistencia al ambiente exterior por su fácil
adaptación y porque necesita de pocos recursos nutritivos para sobrevivir, también puede
infectar a varios reservorios y causa desde enteritis hasta la muerte. Por lo que es importante
estudiar a este microorganismo de manera individual y con mayor profundidad que otras
bacterias.
Taxonomía
Las especies de Salmonella spp. pertenecen a la familia Enterobacteriaceae que está
integrada por microorganismos anaerobios facultativos que son bacilos gramnegativos, el
género Salmonella se divide en dos especies importantes S. enterica y S. bongori. A la vez S.
enterica se divide en seis subespecies que se identifican por numeración romana: I enterica, II
salamae, III arizonae, IIIb diarizonae, IV hautenae y VI indica. Salmonella enterica incluye a
las bacterias de mayor interés para la salud que son: Salmonella typhi, Salmonella paratyphi
(A,B y C) y Salmonella enterica antes denominada Salmonella enteritidis o no tifoidea (ver
Gráfico 1) (Delgado, 2015).
Gráfico 1. Esquema de clasificación taxonómica del género Salmonella (Barrow & Methner,
2013)
Epidemiología
La primera vez que se aisló Salmonella spp. fue por Smith y Salmon en 1885 en cerdos
que fallecieron por peste, ellos denominaron al microorganismo como Bacillus cholerae suis
13
porque pensaron que el patógeno fue responsable de la muerte de varios animales. Años
después, Schweinitz y Dorset demostraron que la enfermedad de la peste era causada por
Yersinia pestis. Por lo tanto, se indicó que Salmonella spp. es un patógeno secundario que
ocasiona gastroenteritis cuando se consumen alimentos infectados y su nombre cambió en
1900 por Ligniéres en honor al jefe David Elmer Salmon del Bereau de la Industria Animal
de los EEUU (Merck, 2007).
La incidencia mundial exacta de salmonelosis es desconocida, pero varía por cada país
debido a la disponibilidad de agua potable, modo de preparación de alimentos,
contaminación ambiental, recolección y almacenamiento de los residuos, etc. En Japón y
Europa la prevalencia de Salmonella enterica es alta, pero en los países en vías de desarrollo
como Ecuador, su prevalencia puede llegar a ser incluso 10 veces mayor a comparación de
los países desarrollados. Salmonella typhi indica una incidencia de 10 a 500 casos por cada
100 000 habitantes (Romero, 2011).
La edad de los pacientes también interfiere en el desarrollo de la infección así, en los
países tercermundistas, Salmonella typhi aumenta su incidencia entre los 5 y 25 años;
mientras que, en los países desarrollados, son los adolescentes mayores de 19 años quienes
presenta salmonelosis, la causa principal es por realizar viajes al exterior. Por otro lado,
Salmonella no tifoidea se presenta en cualquier edad, aunque las mayores incidencias fueron
encontradas en niños menores de 5 años y en ancianos mayores a 70 años (Ryan & Ray,
2014).
Las épocas del año con mayor frecuencia para salmonelosis son los meses de verano y
otoño por la calidez del clima. El Center Diseases Control (CDC) registra que de 400 a 600
brotes gastroentéricos provocados por alimentos contaminados en estas épocas del año, el
50% son por Salmonella enterica. Otro punto importante que aumenta el riesgo de
salmonelosis es el uso de antibióticos sin receta médica (automedicación) que se ha vuelto
muy usual en los últimos años a nivel mundial. Estudios indican que las cepas de Salmonella
han desarrollado resistencias múltiples a antibióticos tanto para el humano como para varios
animales (Romero, 2011).
Salmonella spp. es un microorganismo que se transmite a través de diversos mecanismos
como: animales infectados (aves y pollos), fuentes intestinales de múridos, agua
contaminada bebida directamente, incorrecto lavado de verduras y por el consumo de
productos del mar. La contaminación puede darse de humano a humano por vía fecal-oral,
por contacto con material médico contaminado (instrumentos de fibra óptica, aparatos de
succión nasogástrica o termómetros), medicamentos contaminados, colorantes usados en los
alimentos y consumo de drogas. También por zoonosis secundaria, a través de reservorios
“sanos” según la especie y subespecie (ver Tabla 1) que por sus heces eliminan a los
patógenos y estos pasan del suelo a las manos y finalmente a la boca del humano donde se
cierra el ciclo de la vía fecal-oral (ver Gráfico 2) (I. Hernández et al., 2011).
14
Tabla 1. Especies y subespecies de Salmonella spp. y sus reservorios más frecuentes
(Cecchini & González, 2014; Oscar et al., 2012; Quinn, Markey, Carter, Donnelly, &
Leonard, 2012)
Especies y subespecie de
Salmonella Reservorio Consecuencia de la infección
S. entérica
subespecie
entérica
Pollos Portadores asintomáticos
Mamíferos Enfermedad clínica
Humanos Intoxicación alimentaria
salamae Reptiles (cocodrilos,
tortugas, serpientes) Portadores asintomáticos
arizonae Pavos Arizonosis
Dublin Humanos, perros, bovinos,
ovejas y caballos
Distintas enfermedades (enterocolitis,
septicemia) y portadores asintomáticos
typhimurium Variedad especies y
humanos Enterocolitis y septicemia
gallinarum Aves adultas Tifosis aviar
choleraesuis Humanos, cerdos, vacunos,
perros, aves y zorras
Enterocolitis, septicemia y portadores
asintomáticos
S. bongori (V) Animales de sangre fría y
humanos
Portadores asintomáticos y enfermedad
clínica
Además de su fácil transmisión, es importante recalcar la supervivencia del patógeno ya
que no muere al encontrarse expuesto al frío o desecación y necesita obtener mínimos
nutrientes para crecer y multiplicarse en el agua, tierra y hielo. Por este motivo, casi todos
los reservorios son viables y pueden transmitir la enfermedad a través de sus excretas por un
tiempo prolongado (I. Hernández et al., 2011).
Gráfico 2. Transmisión de Salmonella spp. (I. Hernández et al., 2011)
15
La especie Salmonella spp. es muy resistente al pH ácido del estómago, a las sales biliares
y al peristaltismo, todas estas condiciones facilitan su invasión en el intestino delgado.
Adicionalmente, su temperatura óptima de crecimiento es de 35 a 37°C, pero puede soportar
desde los 5 hasta los 46°C por periodos prolongados. Esta bacteria también es capaz de
multiplicarse a grandes velocidades en los alimentos para lo que solo requieren de 15 a 20
minutos a temperaturas superiores a 20°C. Sobrevive en el agua y por mayor tiempo en la
materia fecal de animales y personas infectadas, ya que contienen un gran número de UFC que
pueden ser excretadas hasta 3 meses posteriores a la infección (Fundación Vasca para la
Seguridad Agroalimentaria, 2013).
Por lo tanto, la intoxicación es ocasionada por alimentos que normalmente están expuestos
a ambientes con falta de higiene y salubridad, como en el caso de las ventas ambulantes que
están a disposición de los clientes durante todo el día y aumentan el riesgo de contraer enteritis
(ver Tabla 2) donde la bacteria más frecuente en cualquier situación es Salmonella spp.
También es un foco de infección la comida que no se almacena adecuadamente, ya que la falta
de refrigeración y la exposición al sol del día (temperatura casi parecida a la fisiológica) ayuda
a que las bacterias se multipliquen sin generar cambios visibles en el alimento que indiquen que
ya no es comestible. Víveres y aderezos, huevos, mariscos, ensaladas, leche sin pasteurizar y
cárnicos son el vehículo que con mayor facilidad transportan Salmonella spp. para infectar al
ser humano (Jawetz et al., 2010).
Tabla 2. Principales agentes bacterianos causantes de enteritis (Romero, 2011)
Situaciones Bacterias
Población general
Frecuentes Salmonella entérica
Campylobacter jejuni
Infrecuentes
Shigella
Yersinia enterocolítica
E. coli enterohemorrágica
Pacientes hospitalizados (>72 horas del ingreso) Clostridium difficile
Pacientes con sida (CD4 <100/µl)
Frecuentes Campylobacter jejuni
Salmonella entérica
Infrecuentes Shigella
Yersinia enterocolítica
Viajeros
E. coli enteropatógena
E. coli enterotoxigénica
E. coli enteroagregativa
Shigella
E. coli enteroinvasiva
Vibrio cholerae O1, O139
Brotes de toxiinfección alimentaria
Frecuentes
Salmonella entérica
Staphylococcus aureus
Clostridium difficile
Infrecuentes
Campylobacter jejuni
Shigella
Bacillus cereustox
E. coli enterohemorrágica
16
Una persona con su sistema inmunitario reforzado puede ser asintomática a la infección;
pero las personas más vulnerables desarrollan salmonelosis, por ejemplo: los niños menores de
5 años, ya que 1/3 parte de todas las toxiinfecciones son producidas en guarderías; jóvenes de
20-30 años inmunodeprimidos, embarazadas y ancianos mayores de 70 años. Así también,
cuando una persona padece la infección, un miembro de su familia tiene el 60% de probabilidad
de infectarse. Todas las epidemias o brotes deben ser reportados a las autoridades de salud
competentes, porque si un 0,5% de personas infectadas no son tratadas correctamente ponen en
riesgo al resto de población (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2017).
Reservorio o huésped zoonótico de Salmonella spp.
Un huésped zoonótico es aquel que posee las condiciones adecuadas para que un
microorganismo se desarrolle. Existen muchos agentes que por su complejo ciclo vital infectan
a varios organismos que se convertirán en reservorios de estos patógenos. Por lo tanto, un
reservorio o huésped zoonótico es un organismo que proporciona un hábitat natural para que
un patógeno viva y se multiplique, pueden ser pasajeros o permanentes, humanos o animales
que se encuentran en dos situaciones de infección distintas: como enfermos cuando presentan
signos y sintomatología mientas el microorganismo pasa por sus estados de incubación y de
convalecencia; y como portador que es aquel reservorio que está infectado pero que no
manifiesta la enfermedad, también conocido como portador sano, se adapta al huésped y puede
ocasionar infección en otro reservorio distinto por lo que son transmisores de zoonosis a través
de las heces, orina, saliva, pelos, sangre y mediante cualquier contacto directo de tipo físico
(Organización Mundial de la Salud, 2015b).
Análisis estadísticos indican que alrededor del 60% de patógenos humanos pueden infectar
a varios animales y que el 80% de patógenos animales pueden causar enfermedades en el
hombre, estos porcentajes incrementan porque a medida que la población humana se multiplica,
los animales también lo hacen y cada vez tienen mayor interacción. En la actualidad, la
medicina veterinaria ha evolucionado brindando métodos de identificación y diagnóstico de
patógenos que infectan a los animales, pero se ha registrado que el 64% de países reportan
resistencias a antibióticos tanto en la población humana como animal para infecciones
ocasionadas por: Salmonella, Campylobacter, E. coli, Staphylococcus y Mycobacterium
tuberculosis (Asociación Empresarial Española de la Industria de Sanidad y Nutrición Animal,
2015).
El 70% de hogares poseen mínimo una mascota, de estos el 55% tiene un perro y en menores
porcentajes gatos o aves que conviven a diario con los humanos, incluyendo personas
vulnerables en su sistema inmunológico como lactantes, niños, ancianos, inmunodeprimidos y
embarazadas. Cada año, a nivel mundial aparecen 5 nuevas enfermedades, 3 de estas son de
origen animal y al menos una en zoonótica (Organización Mundial de Sanidad Animal, 2015).
La susceptibilidad del huésped es un factor primordial para que la infección avance o sea
autolimitada. Sin embargo, existen grupos que son predisponentes a desarrollar salmonelosis
invasiva o asintomática, por ejemplo los recién nacidos o lactantes que tiene un mayor riesgo
17
de contraer Salmonella en forma asintomática con invasión y diseminación por su sistema
inmune poco desarrollado (los anticuerpos se comienzan a producir a partir de los 6 meses de
edad porque el lactante deja de utilizar los que fueron adquiridos de la madre a través del cordón
umbilical) (Ghasemzadeh & Namazi, 2015).
Los niños que padecen alguna enfermedad del sistema gastrointestinal, anemia hemolítica
de células falciformes, trasplante de órganos o cáncer, forman parte de los pacientes
inmunodeprimidos y por la administración de corticoides tienen un alto riesgo de contraer
salmonelosis asintomática con complicaciones por osteomielitis (Gizzi et al., 2014). En otros
grupos de pacientes existen diversas patologías que predisponen a la infección por Salmonella
spp. como la malaria y bartonelosis por hemólisis aguda; personas con esquistosomiasis
desarrollan defectos en las células reticuloendoteliales que son las encargadas de destruir al
patógeno y pacientes con VIH (Ghasemzadeh & Namazi, 2015).
Los perros y las paloma doméstica constituyen los mayores reservorios de Salmonella spp.
debido a la cercanía que mantienen con el ser humano y que sus desechos poseen las
características adecuadas para que este microorganismo sobreviva durante un tiempo
prolongado.
Perro como reservorio zoonótico de Salmonella spp.
Los perros están presentes desde hace 25 millones de años y se derivan del lobo (Canis
lupus). El perro doméstico también conocido como Canis lupus familiaris mide
aproximadamente de 36 cm a 1,45 m de alto y pesa entre 1 a 79 kg, su cola es cilíndrica, patas
alargadas y peludas. Se reproduce máximo dos veces al año con un número de crías que varía
de 3 a 10, es muy sociable por eso es considerado como mascota y su alimentación es variada,
aunque en la actualidad los perros son parte de la familia y mantienen dietas especiales
controladas con nutrientes, vitaminas y grasas adecuadas según la edad (Martín, 2014).
La relación casi familiar que existe entre perros y humanos en la actualidad demuestra
efectos positivos como mejoría en la salud mental, emocional, física, social, comunitaria y
económica, esta última recalca que de los pacientes que tiene mascotas solo el 10% visitan al
médico, además ayudan a prevenir enfermedades y a la recuperación de situaciones
catastróficas familiares (International Federation on Ageing, 2015).
La relación humano-animal en los últimos años ha aumentado considerablemente, aunque
no existe un registro exacto del total de animales de compañía en cada país, se estima que en el
mundo hay alrededor de 704 millones de animales de los cuales 432 millones son perros
(Paredes, 2017). Un estudio realizado en el sur de Quito contabilizó 1 939 perros callejeros, en
el centro de la ciudad, 972 perros capturados y 94 recapturados, finalmente entre 5 566 a 6 350
perros que deambulan libremente en las calles de todo el Distrito Metropolitano de Quito
(Barba, 2017; International Federation on Ageing, 2015).
18
La transmisión de diferentes agentes infecciosos desde los perros a los seres humanos se da
por poseer vectores como garrapatas y también por el contacto con su pelo, moco, saliva, orina
y materia fecal que pueden contaminar cualquier superficie y diversos alimentos. Por lo tanto,
la presencia de excrementos de perros en los distintos espacios públicos aumenta los problemas
de salud y sanidad. Esta situación se presenta de forma global y sucede desde hace varios años
debido al aumento de la domesticación de estos animales, lo que ha provocado enfermedades
infecciosas que afectan al humano y a otras especies de animales domésticas y silvestres.
Muchas bacterias patógenas como Salmonella spp, Campylobacter jejuni, Cryptosporidium
parvum, Giardia spp, Shigella spp, Bordetella bronchiseptica y Brucella canis que se
encuentran en las heces podrían ser multirresistentes a varios antibióticos (Pacheco, 2003).
Los modos de transmisión de Salmonella spp. pueden darse por coprofagia (comer
excrementos propios del animal, de otros referentes de su entorno y del ser humano), por
alimentos contaminados por vía fecal-oral y por fómites contaminados como suelos, alimentos,
agua, juguetes, plantas, camas entre otros. Los perros pueden transportar el patógeno de forma
asintomática o sintomática, pero con desprendimiento intermitente, incluso algunos serovares
de Salmonella spp. pueden adaptarse genómicamente para sobrevivir en esta especie
hospedadora (Barrow & Methner, 2013).
Paloma doméstica (Columba livia) como reservorio zoonótico de
Salmonella spp.
En la familia Columbidae existen aproximadamente 3 000 especies de aves y una de ellas es
Columba livia. Esta especie es parte de la fauna urbana porque las aves han adaptado su modo
de vida y sus necesidades dentro de parques, iglesias y plazas públicas donde pueden
reproducirse con facilidad. Por lo general, pueden sobrevolar hasta 5 kilómetros dentro de la
ciudad en busca de semillas, alimentos, frutas e insectos (omnívoras). Se pueden reproducir en
lugares que consideren idóneos llegando a tener hasta 5 nidadas al año, cada una con 2 a 4
pichones después del proceso de eclosión que dura de 16 a 21 días de incubación. La cantidad
de heces que pueden eliminar anualmente es de aproximadamente 12 kg y en la mayoría de
veces derraman la materia fecal en el aire provocando que las partículas aerolizadas lleguen a
cualquier lugar como: monumentos, tejados, estatuas, calles, plantas, aceras, juegos infantiles,
carros, personas y animales, etc. (Méndez, 2016).
Se puede clasificar en varios géneros (ver Gráfico 3) que comparten características físicas,
por ejemplo: cuando son pichones el pico es negro con toques grises y ojos marrones, sin
embargo, cuando son adultos tienen patas rojizas o rosadas, pico negro con un toque blanco en
su base y ojos color ámbar. En general la cabeza es gris negruzca, el cuello tiene iridiscencia
verde-púrpura y su cuerpo es gris, rabadilla blanca, con una franja negra en la cola y dos en la
parte final de las alas, miden entre 30 a 35 cm, pesan de 120 a 360 g y pueden vivir hasta 6 años
(Quiguango, 2015).
Existen muchos estudios sobre la relación de las palomas con la comunidad, pero solo
mencionan la problemática que tienen con el ambiente por la sobrepoblación, la cantidad de
19
enfermedades zoonóticas que transmiten y que ensucian la ciudad con excrementos (Marenzoni
et al., 2016).
Gráfico 3. Clasificación de las subespecies de Columba livia (Quiguango, 2015)
La distribución de la especie Columba livia es a nivel mundial porque adapta su modo de
vida con facilidad (ver Gráfico 4). En el centro histórico de Quito se han contabilizado
aproximadamente 2 000 palomas que viven en constante movimiento (Mondocorre, Pérez, &
Zeballos, 2014; Quiguango, 2015).
Gráfico 4. Distribución del ave Columbia livia a nivel mundial (Allende, 2017)
La paloma doméstica es portadora de muchas enfermedades zoonóticas debido a que se
encuentran en casi todos los países del mundo y su materia fecal se dispersa con facilidad en el
ambiente contaminando alimentos y agua. Estos animales pueden transmitir hasta 60 patógenos
entre ellos 5 virus, 9 bacterias, 45 hongos y 1 protozoo que causan aproximadamente 176
enfermedades en los seres humanos y una de las más importantes es salmonelosis. Sin embargo,
se cree que los porcentajes de enfermedades ocasionadas son mayores y que las prevalencias e
incidencias se subestiman por la falta de estudios en el reservorio sobre su flora intestinal
normal y el grado de invasión en los enterocitos humanos (Gargiulo et al., 2014; D. Gonzáles
et al., 2007)
20
La transmisión puede darse verticalmente a sus crías y horizontalmente hacia otros
reservorios como animales o al ser humano por medio de heces que están expuestas el medio
ambiente y en alimentos (harina de huesos, carnes y pescados) que sirven como vehículos, cabe
recalcar que esta especie es asintomática en la mayoría de los casos y que elimina el patógeno
de forma intermitente (Gong et al., 2014).
Serovares zoonóticos de Salmonella spp.
Existen muchos serovares compartidos entre animales y seres humanos debido a que
Salmonella spp. tiene una compleja composición de antígenos. Además, se diferencian entre
los que pueden ocasionar fiebre tifoidea y los que desarrollan enteritis. Pero su clasificación se
establece dependiendo de los huéspedes:
Grupo 1: se encuentra todos los serovares de Salmonella spp. que no están relacionados con
un solo huésped en particular, por ello pueden infectar tanto a los animales como a los seres
humanos; incluye todas las serovariedades de S. entérica.
Grupo 2: engloba a los serovares de Salmonella spp. que afectan únicamente al ser humano
ya que, aunque se transmiten de manera fecal-oral, sucede por un huésped humano o animal
asintomático agudo o crónico, incluye a S. typhi, S. paratyphi A y C.
Grupo 3: son los serovares de Salmonella spp. que afectan únicamente a ciertos animales.
Incluye a S. gallinarum (pollos) y S. abortusovis (ovino) (Murray et al., 2017).
Además, los serovares que causan las mayores prevalencias de zoonosis son:
Salmonella paratyphi: no produce toxinas, pero es muy patogénico para los seres humanos,
cerdos, cobayos, conejos y ratones a los que ocasiona fiebre paratifoidea. Puede ser
prevenida con la vacuna triple (Salmonella schottmuelleri, Salmonella paratyphi y
Salmonella typhosa) con el fin de evitar la zoonosis y reinfecciones (Cecchini & González,
2014).
Salmonella schottmuelleri: descubierta en 1900 por Schottmüller. Al igual que la anterior no
produce toxinas, pero es responsable de la fiebre paratífica en el ser humano y en los
animales (palomas y bovinos) no se reportan casos de enteritis ya que la mayoría son
asintomáticos (Quinn et al., 2012).
Salmonella typhimurium: se encuentra presente en muchas especies de animales mamíferos
y aves que pueden transmitir el patógeno a su descendencia porque el microorganismo se
almacena en los ovarios de las hembras maduras sexualmente. También afecta a casi todas
las variedades de vertebrados de sangre caliente, la gran mayoría son asintomáticos pero
algunos ocasionan inflamación del intestino delgado (Oscar et al., 2012). Es la primera
especie que causó diversos brotes epidémicos como el de California donde afectó a 18 000
21
personas por intoxicación con agua contaminada. Afecta principalmente a la mucosa
intestinal, ganglios linfáticos mesentéricos y bazo, pero también se reportan casos de
osteomielitis, apendicitis, forunculosis, salpingitis y meningitis. A diferencia de la fiebre
tifoidea no se visualizan lesiones de necrosis en el tejido. Las infecciones se dan de manera
esporádica porque no existe una inmunización en aves y otros animales de vida libre que
actúan como reservorios, pero en los animales domésticos la prevalencia es menor porque
en algunos países desarrollados existe inmunización por medio de la vacunación (Cecchini
& González, 2014).
Salmonella choleraesuis: se distribuye mundialmente a través de alimentos y agua
contaminada con heces de animales vacunos, perros, aves y zorros. En el ser humano se
produce fiebre entérica por intoxicación alimentaria, también se desarrolla neumonía con
hemocultivos positivos pero con ausencia de trastornos entéricos (Quinn et al., 2012).
Salmonella enterica: fue aislada por Garner en un caso de mortalidad por intoxicación
humana en 1888, produce una enfermedad denominada enteritis. Está presente en diversos
mamíferos de sangre caliente y humanos. Existen diversos serovares, por ejemplo:
Salmonella enteritidis dublin que infecta a caballos, gallinas, perros, palomas, ratones y
conejos. Se reporta el mayor número de casos de toxiinfecciones alimentarias ocasionadas
por esta especie al ser humano. La gastroenteritis es producida por una endotoxina muy
potente parecida a la estafilocócica que no es antigénica pero si termorresistente (Oscar et
al., 2012).
Los serovares se adaptan incluso genéticamente para sobrevivir en sus hospedadores y se
diferencian entre selectivos y no selectivos, pero en ambos casos el potencial para causar una
propagación zoonótica es elevado.
Algunos serovares de Salmonella identificados en perros son: S. poona, S. rubislaw, S.
javiana, S. virchow, S. jaminara, S. rubislaw, S. montevideo, S. typhimurium, S. saintpaul, S.
dublin, S. gafsa, S. rubislaw, S. carrau, S. houtenae, S. neport, S. arechavaleta, S. heidelberg,
S. corvallis, S. typhimurium, S. weltevreden, S. duesseldorf, S. kentucky, S. brandenburg, entre
otros (Barrow & Methner, 2013). Los serovares con mayor prevalencia de Salmonella
identificados en paloma doméstica son: S. pullorum, S. gallinarum, S. enterica, S. typhimurium,
S. heidelberg, S. arizonae, entre otras (Barrow & Methner, 2013).
Genes relacionados con la capacidad zoonótica de Salmonella spp.
En varias investigaciones realizadas a nivel genético y molecular se concluye que la
presencia del gen sod-1 interviene en la triada epidemiológica facilitando la transmisión del
patógeno desde el reservorio zoonótico hasta el ser humano. La presencia del gen sod-1
contribuye con los mecanismos de defensa del patógeno frente a los radicales superóxidos
produciendo cobre periplásmico y superóxido de zinc dismutasa que evitan la fagocitosis en el
huésped, esta acción incrementa la patogenicidad y supervivencia en los casos extraintestinales
22
(bacteriemia) y la propagación mundial de Salmonella spp. por diversos organismos vivos tanto
en animales como seres humanos (Abdeen, Elmoin, Suelam, & Mousa, 2016).
Patogenia de Salmonella spp. en seres humanos
Salmonella spp. es un bacilo gramnegativo, flagelado, perítrico, móvil, con fimbrias, no
esporulado, no encapsulado en la mayoría de los casos, aunque algunos géneros contienen una
microcápsula; además, es anaerobio facultativo, mide entre 0,7 - 1,5 µm de ancho por 2 - 5 µm
de largo y tiene un pili que es similar al de E. coli el cual se une a la D-manosa de las células
eucariotas en el momento de la infección. Forma parte de la familia Enterobactericiae pero no
de la microflora normal del ser humano, por esto es denominado como patógeno gastrointestinal
(Jawetz et al., 2010).
La infección por Salmonella spp. se produce por un inóculo de 103 a 109 microorganismos
porque cuando existe una baja dosis del inóculo la tasa de ataque es solo del 4%. La generación
de signos y síntomas depende también de la inmunidad del huésped y se presenta luego del
período de incubación que dura de 12 a 21 días. Cuando el patógeno ingresa al sistema
gastrointestinal existen diversos mecanismos que protegen al humano como por ejemplo, en el
estómago el patógeno es inactivado por el jugo gástrico y en el intestino delgado aumenta el
peristaltismo para que el microorganismo no se pueda fijar en la mucosa, se produce IgA
secretora para la generación de más anticuerpos, hay células que pueden fagocitar al patógeno
y la acción de la microflora normal que impide que aumente el número de bacterias para que
no exista escasez de alimentos. Sin embargo, al encontrarse dentro de los alimentos y por el
consumo de medicamentos antiácidos (pH alcalino) beneficia a la supervivencia del patógeno
(Romero, 2011).
Cuando Salmonella ingresa por vía oral, tiene como finalidad colonizar la luz intestinal, en
espacial las células M, mediante diversos mecanismos moleculares que permiten la interacción
entre la célula hospedadora y el patógeno, ocasionando una respuesta inflamatoria y la
diseminación sistémica (Ryan & Ray, 2014).
El mecanismo más relevante es el sistema de secreción de tipo 3 (SST3) del islote de
patogenicidad (PAI) que está dividido en dos dominios: SPI-1 ayuda al ingreso de los
efectores a través de la membrana cuando está en contacto con la célula eucariota provocando
inflamación intestinal y diarrea, por la expresión de mediadores de la respuesta inflamatoria y
SPI-2 transporta las proteínas a través de la membrana de la vacuola para encontrarse
persistentemente dentro de los macrófagos y producir infección sistémica. Estos están
codificados en dos islas de patogenicidad diferentes donde deben trabajar conjuntamente. La
función principal es transportar 20 proteínas conocidas como “complejo de aguja” que están
encargadas de la virulencia, donde en el citoplasma de las células hospedadoras cambian
algunas funciones internas como su citoesqueleto, la expresión de citoquinas y la traducción de
señales (Figueroa & Verdugo, 2015).
Solo cinco proteínas efectoras proporcionan la entrada del patógeno a la célula en el dominio
SPI-1 (SopE, SopE2, SopB, SipA y SipC) insertando efectores al citoplasma. Los efectores
23
SopE, SopE2 y SopB reordenan el citoesqueleto (ayudado por SipA y SipC para la entrada de
la bacteria), inducen la vía MAP kinasa (MAPK) que activan los AP-1 y NK- ĸβ induciendo la
expresión de IL-8 que atrae a los polimorfonucleares (PMN) e ingresan por la desestabilización
de la unión entre enterocitos a través de la region basolateral del epitelio apical produciendo la
pérdida del líquido y la entrada del patógeno a la lámina apical. Finalmente, el SipB activa la
Caspasa-1 en los macrófagos y libera de IL-1β e IL-18 como apoyo a la respuesta inflamatoria.
Cuando el citoesqueleto de actina se recupera de la lesión y el MAPK se inactiva por la SptP
produce el silenciamiento de la inflamación que ayuda al SspH1 y AvrA a través de la inhibición
del NF-ĸβ (ver Gráfico 5) (Laura Betancor & Yim, 2017).
Gráfico 5. Cambios inducidos en la célula hospedadora por la acción del SST3 SPI-1
(efectores representados por las esferas amarillas) (Laura Betancor & Yim, 2017)
La respuesta inflamatoria transitoria de los enterocitos esta mediada solo por el sistema de
secreción tipo III dominio SPI-2 para inhibir la proinflamación y permitir la colonización
intestinal por un tiempo prolongado en una infección crónica asintomática que permite la
diseminación a otros reservorios zoonóticos con mayor facilidad y una infección invasiva (ver
Gráfico 6). Sin embargo, todas estas respuestas dependen del estado inmunológico del
hospedador y del grado de patogenicidad de la bacteria. La forma leve de la enfermedad surge
cuando existe una interacción con una respuesta inflamatoria aguda en el intestino, pero también
24
puede ocurrir la diseminación hacia otras regiones extraintestinales que se da por la invasión
hacia los macrófagos en el sistema retículo endotelial (Laura Betancor & Yim, 2017; Figueroa
& Verdugo, 2015).
Gráfico 6. Inflamación transitoria de los enterocitos (Figueroa & Verdugo, 2015)
Salmonella spp. se encuentra dentro de una vacuola conocida como “Salmonella containing
vacuole” (SCV) que puede fusionarse con el lisosoma para proporcionar resistencia al estrés
oxidativo, pH ácido del lisosoma y a los péptidos antimicrobianos; además, ayuda a que resista
las condiciones intracelulares mediante la modificación del contenido de carbohidratos,
proteínas y componentes de membrana como sucede en el LPS (modificación completa de la
composición), también se reprime la expresión del flagelo o del SST3 que son estructuras
bacterianas que puede ser reconocidas por el sistema inmune del hospedador. El último
mecanismo es la expresión de diversas enzimas que le permiten sobrevivir al estrés oxidativo
y péptidos antimicrobianos, los principales en colaborar con estas regulaciones son PhoP/PhoQ,
OmpR/EnvZ, RpoS/RpoE, Cya/Cyp, PmrA/PmrC, entre otros (Figueroa & Verdugo, 2015).
Una vez que Salmonella entra al enterocito mediante la vacuola que contienen pliegues de
membrana adquiridos en la internalización, se fusiona con el lisosoma (pH básico) y se une a
marcadores endrocíticos lisosomales (LAMP-1). Dentro de la SCV se ensambla y expresa el
SST3 del dominio SPI-2 que transloca proteínas para provocar la virulencia en el citoplasma.
Los efectores SifA y PipB2 forman filamentos dispuestos en microtúbulos denominados Sifs
25
(Salmonella induced filaments) que median la acumulación de proteínas motoras, aunque no
tienen un significado biológico, pero se relaciona con la supervivencia y replicación de
Salmonella spp. en el medio intracelular (Figueroa & Verdugo, 2015). Por otro lado, SsJ se
conoce como una deacilasa que funciona en la activación de la membrana de la vacuola, así
como los SseF y SseG que agrupan los microtúbulos cercanos a la SCV y regulan el paso de
las vesículas del aparato de Golgi hacia la SCV. Finalmente, la actina se acumula alrededor de
la SCV (proceso dependiente del dominio SPI-2) y sus efectores SspH2, SpvB y SseI. No se
conoce con exactitud cuales efectores producen virulencia sobre la célula hospedadora
directamente, pero un requisito es que deben actuar conjuntamente todos los efectores
producidos por el dominio SPI-2 (ver Gráfico 7). El paso más importante para la replicación
del patógeno de manera intracelular es la modificación del citoesqueleto que condensa la actina
alrededor del SCV (Laura Betancor & Yim, 2017).
Gráfico 7. Formación de la SCV e inducción del SST3 SPI-2 en el interior de la célula
hospedadora (LAMP-1 representados de color púrpura, proteínas por esferas amarillas, Sifs
de color verde) (Laura Betancor & Yim, 2017)
La causa de recaídas en los pacientes se debe a infiltraciones del patógeno en las células y
las complicaciones post-infección son reguladas por el gen phoP/phoQ que controlan los
niveles de adenilatociclasa y síntesis de aminoácidos aromáticos y purinas, pero cuando se
infiltran en los vasos sanguíneos todo este proceso continúa constantemente. Cuando el
microorganismo llega al tejido linfático se produce inflamación en la mucosa y edemas, pero si
la infección persiste y fue causada por Salmonella typhi, la mucosa se destruye formando
úlceras, estas lesiones generan post-infecciones cuando no existe tratamiento con antibióticos
ya que la infiltración seguida por necrosis y ulceración puede repararse, pero cuando los
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microorganismos mueren en los ganglios mesentéricos liberan una endotoxina que ocasiona
lesiones intestinales, acción neurovegetativa (hipoxia, alteraciones circulatorias,
hiperreactividad vascular a las catecolaminas) y leucopenia. Cuando Salmonella spp. ocasiona
septicemia y llega al hígado es eliminada por la bilis donde pasa nuevamente por el intestino
provocando una fase alérgica-inmunitaria. Se considera portador crónico cuando el paciente
elimina hasta 1011 UFC/g de heces u orina por un año (ver Gráfico 8) (Cecchini & González,
2014; Jawetz et al., 2010).
Gráfico 8. Fisiopatogenia de Salmonella spp. y las complicaciones post-infección (Cecchini
& González, 2014)
Signos y síntomas de la infección por Salmonella spp.
La enfermedad de Salmonella spp. es conocida como salmonelosis y su desenlace depende
del sistema inmunológico del huésped, el inóculo ingerido, la vía de ingreso y la virulencia del
agente zoonótico. En los humanos se generan síntomas gastrointestinales como: fiebre, diarrea,
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vómitos, cólico abdominal, malestar general y escalofríos. Sin embargo, también se desarrollan
bacteriemias sin foco aparente, bacteriemias con un lugar específico de supuración, portadores
crónicos sin sintomatología clínica y cuadros de fiebre tifoidea Las personas con un sistema
inmunológico inmunodeprimido, embarazadas, niños y ancianos tienes mayores probabilidades
de padecer algún síndrome clínico (Jawetz et al., 2010; Murray et al., 2017).
Las formas clínicas en el humano causadas por Salmonella enterica se describen a
continuación:
Infección asintomática aguda: ocurre cuando el inóculo ingerido es muy pequeño y no llega
al umbral para ocasionar alguna patología clínica; no obstante, los patógenos son excretados
por la materia fecal durante varios días y esto los convierte en un foco de infección.
Mayormente, sucede en los lactantes y niños pequeños de hasta 8 años, su detección se da
gracias a los controles rutinarios a partir de coprocultivos donde se aíslan especies como: S.
enterica con serogrupos typhimurium, hydenberg y adelai. También pueden generarse en la
población juvenil y adulta por factores estresantes (Ghasemzadeh & Namazi, 2015).
Gastroenteritis: el período de incubación es de 6 a 48 horas y los signos clínicos comienzan
entre las 24 a 48 horas con cólicos de diversas intensidades, flatulencias, diarrea constante,
náuseas y vómitos, en la mayoría de los casos no existe fiebre. En el estado crónico,
Salmonella enterica se dispersa por varios órganos, pero solamente se adhiere al intestino
delgado donde lesiona la mucosa provocando heces de color obscuro por la sangre de las
úlceras, además los nutrientes no se absorben correctamente por lo que son excretados
acompañados de grandes cantidades de agua (heces líquidas y semilíquidas, espumosas y
con olor repugnante). Cuando el paciente tiene antecedentes de aclorhidria o enfermedad
inflamatoria intestinal (EII), las heces son sanguinolentas y hay presencia de fiebre y
malestar general (Haesendonck et al., 2016). Sin tratamiento con antibióticos los síntomas
duran entre 2 a 6 días, el problema se soluciona con rehidratación e ingestión de electrolitos,
es recomendable no propiciar antibióticos para evitar generar resistencias que provoquen
cuadros prolongados y graves en los siguientes períodos de infección (Romero, 2011).
Bacteriemia con o sin supuración local: es provocada cuando la bacteria invade otros tejidos
fuera del intestino por la diseminación a través de la sangre. Los síntomas más comunes son:
mialgias, escalofríos, fiebre, anorexia y pérdida de peso y perduran por días o semanas. El
factor de riesgo más predominante para desarrollar bacteriemia es la corta edad (lactantes,
recién nacidos o niños pequeños) por la mayor susceptibilidad y el sistema inmunológico
poco desarrollado. La bacteriemia puede ser localizada en cualquier tejido donde las
condiciones supurativas como encefalitis, osteomielitis, neumonía y meningitis son las más
comunes. La meningitis se observa en neonatos y lactantes (número elevado de muertes por
año), la osteomielitis se desarrolla en pacientes con fracturas antiguas, infartados con
hemoglobinopatía y huesos isquémicos (Vasco, Graham, & Trueba, 2016).
Las formas clínicas en el humano causadas por Salmonella typhi y paratyphi se describen a
continuación:
28
Estado del portador crónico sintomático: el período de incubación varía entre 7 a 14 días y
los microorganismos implicados son S. tyhpi, paratyphi A, B y C. En la primera semana se
manifiesta malestar general, cefalea, anorexia, dolor abdominal y fiebre que inicia a manera
de febrícula, pero llega a los 40,5°C, en niños es frecuente observar síntomas gripales como
constipación y tos seca además de diarreas. También se genera hepatomegalia, dolor
abdominal, linfadenopatía general, esplenomegalia, inyección conjuntiva, bradicardia pese
a la presencia de fiebre, letargia y piel seca. En la segunda semana, se mantienen y empeoran
los síntomas respiratorios, las manchas rosadas pápulo-eritematosas (2-4 mm) denominada
roséola tifoídica, manchas blancas luego equimóticas aparece en el 50% de pacientes en la
zona lumbar, de estas lesiones es posible aislar Salmonella typhi. En las siguientes semanas
la fiebre no cesa si la enfermedad no es tratada (Murray et al., 2017).
Una persona con fiebre tifoidea puede desarrollar complicaciones digestivas (enterorragia
y perforación intestinal), respiratorias (neumonías, abscesos y pleuritis), nerviosas (neuritis,
encefalopatía, ataxia y meningoencefalitis), osteoarticulares (artritis y osteomielitis),
urinarias (glomerulonefritis, pielonefritis y cistitis aguda), cardiovasculares (miocarditis),
hemopoyéticas y abortos. Durante el ciclo patogénico de Salmonella typhi, los flagelos y el
LPS estimulan a las citoquinas proinflamatorias produciendo diseminación linfática y
colonizan el ventrículo derecho del corazón. La septicemia ocasionada afecta a diversos
órganos como el riñón (túbulos contorneados proximales), y se genera una hematopoyesis
inmadura predominando formas jóvenes de eritrocitos (Romero, 2011). La muerte se
produce en 1 al 3% de personas que no tiene un tratamiento adecuado y rápido (Ryan & Ray,
2005).
Estado del portador crónico asintomático: presente en pacientes que continúan secretando
Salmonella spp. a través de las heces y orina por más de un año, después de la
administración de un tratamiento incorrecto en episodios de gastroenteritis (1%) o fiebre
tifoidea (1-4%). Uno de los órganos que se mantiene infectado es la vesícula biliar, debido
a que la bilis es un factor primordial rico en nutrientes para mantener al patógeno viable que
será secretado al duodeno y reinfectará el sistema gastrointestinal. Las personas más
propensas para ser portadoras crónicas asintomáticas son: niños menores de 5 años, mujeres
embarazadas, pacientes con enfermedades del tracto biliar y personas de la tercera edad. En
la orina hay menor frecuencia de eliminación del patógeno porque se presenta solo en
pacientes que hayan padecido de tuberculosis con afección al tracto urinario, infección por
Schistosoma hematobium, cálculos renales o hidronefrosis antes de ser infectado con
Salmonella typhi (I. Hernández et al., 2011).
Signos y síntomas en perros
La mayoría de las infecciones son asintomáticas por lo que la gastroenteritis por Salmonella
spp. es infrecuente en perros, pero cuando se desarrolla causa diarrea hemorrágica (menos del
3% de casos), dolor abdominal, pirexia, anorexia y vómito. También puede existir una infección
sistémica (septicemia y endotoxemia) que genera neumonía, orquitis, colangiohepatitis,
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osteomielitis, conjuntivitis, pielonefritis, meningitis e insuficiencia reproductiva. El animal
puede mejorar sin tratamiento en días o semanas pero continuará eliminando el microorganismo
a través de su materia fecal (Barrow & Methner, 2013).
Signos y síntomas en palomas
La salmonelosis en aves se caracteriza por ocasionar retraso en el crecimiento, cojera, cuello
torcido e incluso ceguera. Cuando las palomas son jóvenes la sintomatología incluye diarrea
blanca, anorexia, somnolencia, depresión, adipia, plumas erizadas y deshidratación. Pero en la
mayoría de los casos el animal es únicamente portador del patógeno (Barrow & Methner, 2013).
Análisis microbiológico para el aislamiento de Salmonella spp. en materia
fecal de perros y palomas
Salmonella spp. requiere de medios de cultivo biliados con pH 8 para su crecimiento
eficiente. En las pruebas bioquímicas se puede evidenciar la fermentación de maltosa, manitol
y glucosa, pero no de sacarosa y lactosa, es catalasa positivo y oxidasa negativo, produce ácido
sulfhídrico y citrato, resiste al verde brillante, desoxicolato y tetrationato de sodio. Las colonias
que se evidencian son pequeñas (2-4 mm), lisas, incoloras y con un centro negro del precipitado
por la presencia de ácido sulfhídrico (Jawetz et al., 2010).
Para el aislamiento y diferenciación de Salmonella spp. en materia fecal de perros y paloma
doméstica según el “Manual para la Vigilancia, Prevención y Control Sanitario de Agentes
Zoonóticos y Zoonosis relacionada a la Paloma Doméstica” del Ministerio de Salud de Perú y
el “Instructivo Técnico para la Detección de Salmonella spp” según la norma ISO 6579:2002
son necesarios los siguientes medios de cultivo:
Medio de pre-enriquecimiento: Agua Peptonada Tamponada
Este medio ayuda a mejorar la recuperación de Salmonella spp. ya que en la materia fecal
existe un número muy grande de bacterias coliformes, aunque este medio mantiene un pH
básico en todo momento para evitar que las bacterias sufran un mayor daño y crezcan de manera
más efectiva, no discrimina entre la flora normal del tracto gastrointestinal y el patógeno, por
lo que ayuda a que Salmonella aumente en número. La peptona es la principal fuente de
carbono, nitrógeno y minerales como el cloruro de sodio (equilibrio osmótico), fosfatos
(regulación del pH) y vitaminas (Laboratorio Britania, 2015).
Medio de enriquecimiento selectivo: Rappaport Vassiliadis Broth
Este medio de enriquecimiento facilita el crecimiento de algunas bacterias. Dentro de la
familia Enterobacteriaceae, los géneros de Salmonella y Shigella requieren un enriquecimiento
para su aislamiento debido a que suelen estar en una cantidad menor a 200/g de heces; por el
contrario, Escherichia coli se encuentra en aproximadamente en 109/g heces por lo que estos
medios de cultivo suelen llevar aditivos para su inhibición (Winn et al., 2004).
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Medio de aislamiento y diferenciación: Agar Xilosa Lisina Desoxicolato
El medio de cultivo XLDA contiene inhibidores para el crecimiento de bacilos coliformes y
detecta la presencia de Salmonella spp. y Shigella spp. Las sales biliares privan el crecimiento
de todas las bacterias grampositivas y gramnegativas con condiciones exigentes, los hidratos
de carbono como lactosa, sacarosa y xilosa ayudan a la acidificación del medio y su presencia
es revelada por el indicador de pH rojo fenol, el tiosulfato de sodio es el compuesto que indica
la presencia del gas sulfhídrico a través de la coloración negra en la parte central de la colonia
que corresponde a la formación del citrato férrico de amonio como sucede con Salmonella spp.
(ver Tabla 3) (Winn et al., 2004).
Tabla 3. Características de las colonias de varias especies en el medio selectivo XLDA (Prats,
2011; Winn et al., 2004)
Características de las colonias Fondo
del
medio
Observaciones Especie Forma Borde Superficie Color
Diámetro
(mm)
Enterobacter
aerogenes
Circular o
puntiforme Liso Convexa Crema 1 - 2 Amarillo
Escherichia
coli
Circular o
puntiforme Liso Convexa Amarillo 1 - 2 Amarillo
Klebsiella
pneumoniae Circular Liso Convexa Crema 2- 3 Amarillo
Colonias
mucoides
Shigella spp. Circular o
puntiforme Liso Convexa Rojo 1 - 2 Rojo
Salmonella
spp.
Circular o
puntiforme Liso Convexa Incolora 1 - 3 Rojo
Centro de la
colonia negro
Serratia
marcences Circular Liso Convexa Amarilla 1 - 2 Amarillo
Proteus spp. Circular o
puntiforme Liso Convexa Incolora 1 - 3 Rojo
Centro de la
colonia negro
Medio de nutrición: Tripticasa Soya Agar
Este medio de cultivo contiene peptona de soya y tripteína que contribuyen con diversos
nutrientes como aminoácidos libres, péptidos, vitaminas, minerales, bases de purinas y
pirimidinas y cloruro de sodio que ayuda al balance osmótico. Todos estos componentes
colaboran en el crecimiento de todos los microorganismos, se usa en el aislamiento de cepas
puras para la identificación a través de pruebas bioquímicas y su posterior conservación
(Laboratorios Britania, 2016).
31
Pruebas bioquímicas
Las bacterias aisladas son sembradas en medios que poseen características específicas que
permitirán diferenciar entre una gran variedad de microorganismos (ver Tabla 4).
Tabla 4. Identificación de las cepas más frecuentes de enterobacterias (Prats, 2011)
Pruebas Bioquímicas
En
tero
bact
er
aer
ogen
es
Esc
her
ich
ia
coli
Kle
bsi
ella
pn
eum
on
iae
Sh
igel
la
spp.
Salm
on
ella
spp.
Ser
rati
a
marc
ence
s
Pro
teu
s
spp.
TS
I
Fermenta
Glucosa + + + - + V +
Lactosa + V + - - - -
Sacarosa + V + - - - -
Gas + + + - + V +
H2S - - - - + - +
LIA
LDC (lisina
descarboxilasa) + V + - + + -
Gas + + + - + V +
H2S - - - - + - +
Urea - - + - - V +
Simmons Citrato + - + - + + V
Fenilalanina desaminasa - - - - - - +
MIO
Movilidad + + - - + + +
Indol - + - V - - -
ODC (ornitina
descarboxilasa) + V - - + + +
V: variable
2.2.1.5. Zoonosis causada por otras bacterias
Además de Salmonella spp. existen otras bacterias zoonóticas de fácil transmisión y que
causan distintos cuadros clínicos en los reservorios (humanos y animales). Estos
microorganismos pueden ser endógenos (propios del humano) pero al penetrar en sitios
estériles, ocasionan distintas infecciones. También, pueden ser exógenos (patógenos estrictos)
que infectan al humano cuando ingiere agua o alimentos contaminados. El cuadro clínico que
se desarrolle dependerá de los genes de virulencia y toxinas que tenga cada microorganismo,
pero con mayor frecuencia se provocan infecciones entéricas (ver Tabla 5 y Anexo C) (Bailey
& Scott, 2009; Murray et al., 2017).
32
Tabla 5. Agentes zoonóticos bacterianos más comunes en infecciones entéricas (I. Hernández
et al., 2011)
Microorganismo
Fuentes comunes o
cuadros
predisponentes
Distribución Presentación
clínica
Mecanismo
patogénico
predominante
Leucocitos
fecales
Bacillus cereus Carnes, arroz y
verduras
Mundial
Intoxicación:
vómitos o
diarrea acuosa
Ingestión de toxina
preformada
(intoxicación
alimentaria) -
Staphylococcus aureus Carnes, ensaladas,
derivado de la leche
Intoxicación:
vómitos
Clostridium perfringens Carnes, aves de
corral Diarrea acuosa
Ingestión de
patógeno seguida por
la producción de
toxina
Clostridium difficile Tratamiento
antimicrobiano Disentería
Enterotoxina y
citotoxina +/-
Especies de
Campylobacter
Agua, aves de corral
y leche Invasión y citotoxina +
E. coli Enteropatógena Alimentos, agua Diarrea acuosa
Invasión sin
multiplicación -
E. coli Enterotoxigénica Alimentos, agua Enterotoxina
E. coli Enteroinvasora Alimentos Disentería Invasión,
enterotoxina +
E. coli
Enterohemorrágica Carnes
Diarrea acuosa,
a menudo
sanguinolenta
Citotoxina -/+
Especies de Salmonella
(no tifoidea)
Alimentos, agua
Disentería Invasión +
Salmonella thypi
Países en vías de
desarrollo: zonas
tropicales
Fiebre entérica Penetración + (PMN)
Especies de Shigella Mundial
Disentería
Invasión
+ Shigella dysenteriae Agua
Países en vías de
desarrollo Invasión, citotoxina
Vibrio cholerae Agua, mariscos
Asia, África,
América del Sur y
Norte (zona
costera)
Diarrea acuosa Citotoxina y
enterotoxina -/+
Yersinia enterocolítica Leche, carne de
cerdo Mundial
Diarrea acuosa,
fiebre entérica
o ambas
Invasión y
penetración -
Cryptosporidium parvum Animales, agua Diarrea acuosa Adherencia -
2.2.1.6. Medidas preventivas de enfermedades zoonóticas
Para tomar medidas preventivas contra la zoonosis es necesario analizar tres puntos
epidemiológicos importantes:
La fuente infecciosa:
a. Portador humano sano: si tuvo contacto con algún patógeno en áreas endémicas
de infección, manejó animales o estuvo con personas expuestas a dicho
patógeno. Es necesario realizar exámenes correspondientes y administrarle
33
antibióticos, aunque no presente sintomatología porque es un factor de riesgo
para la transmisión de la enfermedad.
b. Humano enfermo: realizar un diagnóstico certero, aplicarle medicamentos
antimicrobianos, realizar una ficha epidemiológica para que quede constancia
del brote, comunicarse con las autoridades de salud correspondientes para vigilar
con quienes o con qué tuvo contacto para adquirir la infección; por último, en
caso de fallecimiento realizar de igual manera la investigación.
c. Animales domésticos enfermos: llevarlos a instituciones veterinarias que se
harán cargo de dar un diagnóstico y un control epidemiológico sobre que pudo
contagiar al animal, así como un tratamiento adecuado.
Mecanismo de transmisión:
a. Beber solo agua potabilizada.
b. Consumir alimentos lavados, elaborados por personas con higiene adecuada y
una cocción suficiente para matar a los patógenos posibles.
c. Desinsectación.
d. Desratización.
e. Tratamiento adecuado de desechos biológicos y basura en general.
f. Manejo adecuado de los fómites (desinfección y esterilización).
g. Usar equipos de protección personal como vestimenta adecuada, guantes, gorro.
etc. en hospitales y en la manipulación de alimentos de distribución pública.
Huéspedes:
a. Barreras mecánicas para evitar el contagio.
b. Quimioprofilaxis antimicrobiana de ser necesario.
c. Inmunización activa (vacunación) y pasiva (inmunoprofilaxis).
d. Medidas que eviten la diseminación del patógeno (Merck, 2007).
La exposición a animales de compañía ha aumentado en los últimos años al igual que el
contacto con animales de granja, exponiendo principalmente a los niños a varios patógenos
zoonóticos que pueden causar una gran cantidad de enfermedades como enteritis, rabia,
implicaciones nefróticas y neumónicas que son las más letales, por lo que es necesario
establecer inspecciones y normas que regulen la exposición a diversos patógenos. Los
programas de control que se inicien para tomar medidas deben tener en cuenta que la
superpoblación existente en varios países hace que aumente el porcentaje de personas sin acceso
a agua potable y con desnutrición y además disminuyan las medidas de higiene y saneamiento;
por lo tanto, se debe priorizar proteger y preservar la salud humana y de los animales (Quinn et
al., 2012).
Sugerencias que se puedes aplicar a nivel mundial para prevenir enfermedades ocasionadas
por la transmisión fecal-oral es la higiene personal y alimentaria, sanidad en el país y
potabilización del agua como pilares fundamentales. Para los animales es aconsejable controlar
34
su alimentación y consumo de agua, si ocasiona un brote es importante aislarlo con rapidez para
evitar nuevos casos. Luego de identificar al patógeno, se realiza controles seriados hasta que el
resultado sea negativo. Es necesario evitar que se acerquen a alimentos o agua que consumirán
los dueños así como llevarlos a parques o sitios donde adquieran fácil la infección en el caso de
animales domésticos y tener una higiene apropiada en caso de interactuar con animales
callejeros o salvajes (Quinn et al., 2012).
En el caso de que exista un brote por Salmonelosis spp. es necesario controlarlo con rapidez,
por lo que se evalúan puntos como:
Descubrir porque comenzó la infección y erradicarla.
Poner en cuaresma a todos los animales que tengan alguna sintomatología.
Todas las personas que tengan contacto con los animales deben utilizar medidas
higiénicas como lavado de manos y cuidado en el manejo de desechos biológicos.
Desinfectar todo utensilio donde se coloque la comida y el agua del resto de animales y
del propio animal infectado, así como su lugar de descanso y cosas que hayan podido
tener contacto con las heces del animal enfermo.
Toda persona que haya tenido contacto y que presente algún síntoma clínico debe ser
tratado inmediatamente (Merck, 2007).
2.3. Marco legal
El respaldo legal para este trabajo de investigación se basa en varios artículos de documentos
detallados a continuación:
Derechos Humanos - Pacto Internacional de Derechos Económicos, Sociales y
Culturales
Artículo 12:
1. “Los Estados Parte en el presente Pacto reconocen el derecho de toda persona al disfrute
del más alto nivel posible de salud física y mental”.
2. “Entre las medidas que deberán adoptar los Estados Parte en el Pacto a fin de asegurar la
plena efectividad de este derecho, figurarán las necesarias para:
a) La reducción de la mortinatalidad y de la mortalidad infantil, y el sano desarrollo de los
niños
b) El mejoramiento en todos sus aspectos de la higiene del trabajo y del medio ambiente
c) La prevención y el tratamiento de las enfermedades epidémicas, endémicas, profesionales
y de otra índole, y la lucha contra ellas
d) La creación de condiciones que aseguren a todos asistencia médica y servicios médicos
en caso de enfermedad” (Naciones Unidas, 1948).
Constitución de la República del Ecuador 2008
35
Artículo 14: “Se reconoce el derecho de la población a vivir en un ambiente sano y
ecológicamente equilibrado, que garantice la sostenibilidad y el Buen Vivir, Sumak Kawsay.
Se declara de interés público la preservación del ambiente, la conservación de los ecosistemas,
la biodiversidad y la integridad del patrimonio genético del país, la prevención del daño
ambiental y la recuperación de los espacios naturales degradados”.
Artículo 32: “La salud es un derecho que garantiza el Estado, cuya realización se vincula al
ejercicio de otros derechos, entre ellos el derecho al agua, la alimentación, la educación, la
cultura física, el trabajo, la seguridad social, los ambientes sanos y otros que sustentan el buen
vivir. El Estado garantizará este derecho mediante políticas económicas, sociales, culturales,
educativas y ambientales; y el acceso permanente, oportuno y sin exclusión a programas,
acciones y servicios de promoción y atención integral de salud, salud sexual y salud
reproductiva. La prestación de los servicios de salud se regirá por los principios de equidad,
universalidad, solidaridad, interculturalidad, calidad, eficiencia, eficacia, precaución y bioética,
con enfoque de género y generacional”.
Artículo 264, numeral 4: “Los Gobiernos Municipales tendrán las siguientes competencias
exclusivas sin perjuicio de otras que determine la ley: prestar los servicios públicos de agua
potable, alcantarillado, depuración de aguas residuales, manejo de desechos sólidos, actividades
de saneamiento ambiental y aquellos que establezca la ley”.
Artículo 281, numeral 13: “Prevenir y proteger a la población del consumo de alimentos
contaminados o que pongan en riesgo su salud o que la ciencia tenga incertidumbre sobre sus
efectos”.
Artículo 415: “El Estado Central y los Gobiernos Autónomos Descentralizados adoptarán
políticas integrales y participativas de ordenamiento territorial urbano y de uso del suelo, que
permitan regular el crecimiento urbano, el manejo de la fauna urbana e incentiven el
establecimiento de zonas verdes. Los Gobiernos Autónomos Descentralizados desarrollarán
programas de uso racional del agua, y de reducción reciclaje y tratamiento adecuado de
desechos sólidos y líquidos. Se incentivará y facilitará el transporte terrestre no motorizado, en
especial mediante el establecimiento de ciclo vías” (Asamblea Constituyente de la República
de Ecuador, 2008).
Resolución del Consejo de Administración Legislativa CAL-2015-2017-139
Artículo 83.- Soberanía alimentaria, numeral 1: “La soberanía alimentaria constituye un
objetivo estratégico y una obligación del Estado, para garantizar que las personas, comunidades,
pueblos y nacionalidades alcancen la autosuficiencia de alimentos sanos y culturalmente
apropiados de forma permanente, constituyéndose, así como un elemento fundamental de la
salud pública. Para tales efectos: A la Agencia de Regulación y Control del Agua, en
coordinación con la Autoridad Sanitaria Nacional y la Autoridad Agraria Nacional, le
36
corresponde la vigilancia de la calidad del agua para garantizar la producción de alimentos
sanos, en reconocimiento del vínculo entre el agua, la alimentación y la salud pública”.
Artículo 88.- Competencia de la Autoridad Sanitaria Nacional en materia de salud
ambiental: “A la Autoridad Sanitaria Nacional le corresponde ejercer la rectoría, regulación,
control y vigilancia de la salud ambiental entendida como la afectación a la salud humana por
los factores del entorno ambiental, para lo cual coordinará con otras entidades competentes e
informará a la población sobre problemas ambientales que tengan impacto en la salud humana.
Será responsabilidad de la Autoridad Sanitaria Nacional la identificación, control, reporte, y
vigilancia de los daños causados a la salud humana por los pasivos ambientales reportados por
la Autoridad Ambiental Nacional. La Autoridad Sanitaría Nacional, impulsará el desarrollo de
políticas y programas dirigidos a proteger la salud de la población frente a la contaminación
producida por agentes ambientales químicos, físicos, biológicos y otros que pongan en
riesgo la salud humana”.
Artículo 108.- Vigilancia y control de desechos sanitarios: “La Autoridad Sanitaria Nacional
y la Autoridad Ambiental Nacional en el ámbito de sus competencias y de manera coordinada
vigilarán y controlarán la gestión y disposición final adecuada de los desechos sanitarios, a fin
de propiciar ambientes limpios y saludables, y precautelar la salud de la población. De igual
forma, las entidades mencionadas vigilarán que los establecimientos de salud dispongan de
manera segura los desechos sanitarios cumpliendo con la normativa vigente, a fin de prevenir
riesgos a la salud humana y al ambiente”.
Articulo 118.- Regulación: “La Autoridad Agraria Nacional y la Autoridad Sanitaria
Nacional, en coordinación con las entidades competentes, establecerán la normativa sobre el
control de la proliferación de vectores y otros animales que presenten riesgo para la salud
humana y colectiva. La Autoridad Sanitaria Nacional en coordinación con las instancias
pertinentes deberá garantizar que existan los debidos mecanismos para atender la zoonosis y
epizootias, incluyendo el acceso a tratamientos oportunos. La autoridad competente en materia
de sanidad animal elaborará la normativa para el ingreso de animales al país, observando
lineamientos sanitarios elaborados por la Autoridad Sanitaria Nacional”.
Artículo 109.- Vigilancia y control de la fauna urbana: “Serán atribuciones de los Gobiernos
Autónomos Descentralizados, siguiendo los lineamientos de la Autoridad Sanitaria Nacional y
otras autoridades competentes: Vigilar y controlar las condiciones de manejo adecuadas, de
animales domésticos y de compañía, para preservar la salud individual y colectiva y Controlar
la proliferación de animales callejeros” (Asamblea Nacional de la República del Ecuador,
2017).
Ley Orgánica de Salud
Art. 123.- “Es obligación de los propietarios de animales domésticos vacunarlos contra la
rabia y otras enfermedades que la autoridad sanitaria nacional declare susceptibles de causar
epidemias, así como mantenerlos en condiciones que no constituyan riesgo para la salud
37
humana y la higiene del entorno. El control y manejo de los animales callejeros es
responsabilidad de los municipios, en coordinación con las autoridades de salud” (Asamblea
Constituyente de la República de Ecuador, 2017).
Ley Orgánica de Régimen Municipal
Art. 149.- “En materia de higiene y asistencia social, la administración municipal coordinará
su acción con la autoridad de salud, de acuerdo con lo dispuesto en el Título XIV del Código
de la materia; y, al efecto, le compete: i) Determinar las condiciones en que se han de mantener
los animales domésticos e impedir su vagancia en las calles y demás lugares públicos”
(Congreso Nacional, 2010).
Ordenanza Municipal N°048: Tenencia, protección y control de la fauna urbana
Artículo 59.- Infracciones: “Se consideran infracciones los actos u omisiones que
contravengan las normas contenidas en las Ordenanza que regula la tenencia, protección y
control de la fauna urbana:
Leves:
a) Pasear a sus perros por las vías y espacios públicos, sin collar y sujetos sin traílla (correa).
b) Mantener un número mayor de animales de compañía al que le permita cumplir
satisfactoriamente con las normas de bienestar animal.
c) No cumplir con el calendario de vacunación determinado por la autoridad sanitaria
correspondiente.
m) No mantener animales de compañía dentro de su domicilio sin las debidas seguridades,
o dejarlos transitar por espacios públicos o comunitarios, sin la compañía de una persona
responsable del animal, a fin de evitar situaciones de peligro tanto para las personas como
para el animal.
n) No esterilizar al animal de acuerdo con lo estipulado en la Ordenanza y Reglamento.
o) Comercializar animales de compañía de manera ambulatoria, en la vía y espacios públicos
o en aquellos lugares destinados al expendio de alimentos de consumo humano.
q) Mantener animales de compañía en instalaciones indebidas desde el punto de visto
higiénico-sanitario, sin cuidado ni alimentación, de acuerdo con los parámetros generales
del Bienestar Animales establecidos en la Legislación Internacional”.
Artículo 60: Infracciones Leves: “Serán sancionados con una multa que va del 10% al 21%
de una remuneración básica unificada y las Infracciones Graves: “Serán sancionadas con una
multa que va del 45% al 90% de una Remuneración Básica Unificada” (Consejo Metropolitano
de Quito, 2011).
Ordenanza Metropolitana N°146: Desechos y Medio Ambiente
Artículo II.347 literal e: “De las responsabilidades de los propietarios de animales:
38
1. Mantener la atención necesaria para que el animal doméstico que circule en la vía pública
no la ensucie.
2. De producirse este hecho, el propietario o quien conduzca el animal limpiará el desecho
producido por su mascota.
3. Conducir mascotas y animales domésticos por la vía pública sujetos con una correa y
bozal” (Consejo Metropolitano de Quito, 2005).
2.4. Hipótesis
2.4.1. Hipótesis de trabajo
La materia fecal de perros y paloma doméstica que se encuentra en el Parque “La Carolina”
presenta contaminación microbiana con Salmonella spp.
2.4.2. Hipótesis nula
La materia fecal de perros y paloma doméstica que se encuentra en el Parque “La Carolina”
no presenta contaminación microbiana con Salmonella spp.
2.5. Sistema de variables
Variable 1:
Reservorio animal: especie animal que actúa en la triada epidemiológica como huésped de
algún agente microbiológico que puede infectar al humano y a otros animales.
Variable 2:
Características macroscópicas de las muestras fecales: una muestra fecal es un desecho
biológico que podría contener microorganismos patógenos y en su análisis macroscópico se
identifican características como tipo de muestra, color, aspecto y consistencia que pueden ser
factores de riesgo que indiquen la presencia de bacterias zoonóticas en muestras fecales de
perros y de paloma doméstica.
Variable 3:
Lugar de recolección de la muestra: ubicación geográfica de las muestras recolectadas.
Variable 4:
Agentes zoonóticos: bacterias que colonizan a huéspedes animales y son causantes de
enfermedades zoonóticas a humanos susceptibles.
39
Capítulo III
Marco Metodológico
3.1. Diseño de la investigación
La investigación se basó en el paradigma cuantitativo ya que según Creswell, este se encarga
de la descripción sistemática y objetiva, además permite establecer y medir estadísticamente un
fenómeno, por lo que, esto ayudó a determinar la prevalencia de Salmonella spp. en materia
fecal de perros como de paloma doméstica. Dentro de este paradigma el estudio es de tipo no
experimental con enfoque correlacional, porque permite medir la relación entre dos o más
variables haciendo uso de la estadística para obtener un análisis de datos cuantificados
(Creswell, 2014).
El nivel de la investigación corresponde al tipo descriptivo, ya que se pretende “describir,
registrar, analizar e interpretar un determinado hecho, población o área de interés”. Además, se
emplean técnicas estadísticas descriptivas para “observar, organizar, concentrar, visualizar,
comparar y presentar datos obtenidos de la investigación” y mediante esta estadística se
permitió establecer la prevalencia de la bacteria de interés (Ramírez, Arcila, Buriticá, &
Castrillón, 2004).
Los tipos de investigación que se utilizaron son no experimental y transversal. Debido a que
no existe una forma intencional que haga que cambie alguna de las variables para ver su efecto,
es un estudio no experimental, esto permitirá observar el fenómeno en su forma natural. Dentro
de este tipo la investigación es transversal o transeccional ya que las muestras de materia fecal
tanto de perros como de paloma doméstica fueron recolectadas en un tiempo único, por lo que
se analizó la prevalencia de Salmonella spp. en las muestras en un momento determinado y no
los cambios que pueden suceder a través del tiempo (R. Hernández, Fernández, & Baptista,
2010).
3.2. Población y muestra
Lugar del muestreo
San Francisco de Quito es la capital de la República del Ecuador, su población en el año
2018 fue de 2 644 145 según el Instituto Nacional de Estadística y Censos (INEC) colocándola
como la segunda ciudad más poblada de Ecuador. Se ubica geográficamente en la región centro-
norte del país a 2 850 msnm, el clima varía entre 9 a 19°C y en pocas ocasiones la temperatura
baja de los 7°C o aumenta por encima de los 21°C. Por la descripción realizada del lugar y la
elevada población que puede verse afectada por brotes epidemiológicos de enfermedades
zoonóticas se considera un lugar adecuado para realizar el estudio (Gobierno de la Provincia de
Pichincha, 2018).
40
El Parque “La Carolina” es parte de la Administración Zonal Eugenio Espejo y es
considerado uno de los parques más grandes de América del Sur, en el transcurren
aproximadamente 50 000 personas cada fin de semana, su área consta de 64 000 m2. Está
conformado por 7 zonas recreativas, lugares para practicar deportes como: canchas de
baloncesto, fútbol, tenis y voleibol, áreas para ejercitación que incluye un trayecto atlético,
pistas de patinaje y para acrobacias en bicicleta, centro de exposiciones, restaurantes, zona de
parqueo, etc. (ver Gráfico 10) (Merino, 2017).
Gráfico 9. Distribución geográfica del Parque “La Carolina” del Distrito Metropolitano de
Quito (Mejía, 2016)
Tamaño de muestra
La población del estudio se conformó por la materia fecal de perros callejeros y domésticos
que pasean en el Parque “La Carolina” y también por la materia fecal de la especie Columbia
livia mejor conocida como “paloma doméstica” que ha hecho de este parque su hábitat natural.
Debido a que no existen registros o bases de datos que indiquen una población exacta de las
muestras fecales de estas especies, este estudio no posee un marco muestral, por lo que para el
cálculo del tamaño de muestra se utiliza una fórmula que considera a la población como infinita
o desconocida:
𝑛 =𝑍2𝑥 𝑝 𝑥 𝑞
𝑒2
Jardín Botánico Pista Atlética Juegos Infantiles
Zona Canina Pista de Ciclismo Canchas Laguna “El Quinde”
41
Donde:
𝑛 = tamaño de muestra
𝑍 = valor de estandarización que indica el nivel de confianza (constante 1,96 para el
95% de representatividad)
𝑒 = límite error muestral (10% = 0,1)
𝑝 = probabilidad a favor (0,5)
𝑞 = probabilidad en contra (0,5)
𝑛 =(1,96)2𝑥 (0,5) 𝑥 (0,5)
(0,1)2= 96,04
En este estudio se recolectó un total de 100 muestras de heces caninas y 100 muestras de
heces de paloma doméstica aleatoriamente tanto frescas como secas considerando criterios de
inclusión y exclusión. La recolección de muestras se realizó cada domingo desde el 29 de Julio
hasta el 2 Septiembre del año 2018 (durante seis domingos), recogiendo aproximadamente 20
muestras por semana de cada especie animal hasta completar un total de 200 muestras, que
fueron analizadas por técnicas de microbiología para obtener un reporte de resultados que es
representativo en el 95% a la población total.
El tipo de muestreo empleado fue probabilístico ya que las muestras se seleccionaron al azar
y cada una tuvo la misma probabilidad de ser seleccionada, lo que garantizó la representatividad
de la muestra.
Criterios de inclusión
Muestras fecales frescas o secas de perros y paloma doméstica.
Muestras fecales de perros y paloma doméstica de cualquier edad, raza y sexo.
Criterios de exclusión
Muestras fecales de otras especies animales.
Muestras fecales mezcladas con otras sustancias como agua, arena, etc.
Muestras fecales difíciles de recolectar.
Codificación de muestras
Para analizar las muestras y reportar los resultados se estableció una codificación específica
para cada colonia aislada, cada código contiene:
Animal del que proviene: muestra fecal canina (CN) y muestra fecal de paloma
doméstica (PD).
Zona de muestreo: Jardín Botánico (JB), Pista Atlética (PA), Juegos Infantiles (JI), Zona
Canina (ZC), Laguna “El Quinde” (LQ), Pista de Ciclismo (PC) y Canchas (CH).
42
Número de muestra: desde 001 hasta 100
Número de colonia
Ejemplo: CNCH001_1 (Muestra canina, zona de Canchas, muestra N°1, colonia N°1),
PDJI010_2 (Muestra de paloma doméstica, zona Juegos Infantiles, muestra N°10, colonia N°2).
3.3. Materiales y métodos
3.3.1. Materiales
Equipos
Materiales de laboratorio
Frasco estéril para muestras de heces Frasco estéril para muestras de heces
Bolsas friopack Bolsas friopack
Cooler Cooler
Guantes de látex Guantes de látex
Mascarillas Mascarillas
Bolsas rojas para desechos biológicos Bolsas rojas para desechos biológicos
Frasco para cortopuzantes Frasco para cortopuzantes
Erlenmeyer 500 ml Erlenmeyer 500 ml
Erlenmeyer 250 ml Erlenmeyer 250 ml
Medios de cultivo
Agua Peptonada Tamponada
CONDA
Agua Peptonada Tamponada
CONDA
Caldo Rappaport Vassiliadis Broth
CONDA
Caldo Rappaport Vassiliadis Broth
CONDA
Agar XLD DIFCO Agar XLD DIFCO
Agar TSA HIMEDIA Agar TSA HIMEDIA
Agar TSI HIMEDIA Agar TSI HIMEDIA
Agar LIA CONDA Agar LIA CONDA
Balanza analítica UNI BLOC Balanza analítica UNI BLOC
Autoclave LISTED UL Autoclave LISTED UL
Cocineta HACEB Cocineta HACEB
Incubadora 1 MEMMERT Incubadora 1 MEMMERT
43
3.3.2. Métodos
Toma de muestras
Se recolectó aproximadamente 1 g de heces de diferentes lugares del Parque “La Carolina”
en frascos estériles los domingos de 7:00 am a 13:00 pm.
Transporte de las muestras
Se colocó las muestras en un cooler con bolsas friopack y se trasladó al laboratorio en un
período no mayor a 24 horas.
Procedimiento microbiológico para determinar bacterias zoonóticas
Se pesó 1 gramo de la muestra de heces
Se colocó en un tubo con tapa rosca estéril que contiene 9 ml de medio de pre-
enriquecimiento Agua de Peptona Tamponada
Se incubó a 37°C por aproximadamente 24 horas
Se tomó 1 mL del caldo y se trasladó al medio de enriquecimiento selectivo Rappaport-
Vassiliadis
Se incubó a 41.5°C por un período entre 18 y 24 horas
Se sembró en agar Xilosa Lisina Desoxicolato (XLD)
Se incubó por 24 a 48 horas a 37°C
Se observó las colonias sospechosas de Salmonella spp. (centros de color negro y
colonias transparentes)
Se sembró en el medio de enriquecimiento no selectivo Tripticasa Soya Agar (TSA)
Se incubó por 24 horas a 37°C
Identificación de bacterias aisladas
Se realizó un panel de pruebas bioquímicas compuesto por:
LIA que ayuda a evaluar la descarboxilación de la lisina. Salmonella spp. es lisina
positivo, descarboxilación positiva y desaminación negativa, con producción de sulfuro
de hidrógeno.
TSI permite evaluar la fermentación de sacarosa, glucosa, lactosa y producción de
sulfuro de hidrógeno. Salmonella spp. no fermenta lactosa, fermenta glucosa con
producción de gas y sulfuro de hidrógeno.
Simmons Citrato indica la capacidad de usar el citrato como única fuente de energía y
carbono. Salmonella spp. es positivo.
MIO determina la descarboxilación de la ornitina, producción de indol y movilidad
bacteriana. Salmonella spp. es ornitina negativa, indol negativo y tiene movilidad.
Urea permite evaluar si la bacteria posee la enzima ureasa. Salmonela spp. es negativa.
44
Fenilalanina descarboxilasa ayuda a evaluar la capacidad de la bacteria para desaminar
el aminoácido fenilalanina. Salmonella spp. es negativa.
Las lecturas para las muestras se hicieron a las 24 horas y las pruebas negativas se dejaron
hasta 48 horas, en el caso del citrato cuando fue negativo se dejó hasta 72 horas para su lectura.
Criocongelación de cepas de Salmonella spp. para futuras investigaciones
Las colonias que se identificaron como Salmonella spp. se sembraron en Tripticasa Soya
Agar (TSA) y se incubaron por 24 horas a 37°C. A continuación, todo el proceso se realizó en
una cámara de flujo laminar:
En tubos eppendorf correctamente etiquetados se colocó 700 µL de caldo BHI y 300 µL
de glicerol
Con palillos estériles se tomó la mayor cantidad de colonias a partir del TSA
Se mezcló en el vórtex
Se criocongeló a -80°C
3.4. Operacionalización de las variables
Tabla 6. Operacionalización de las variables
Variables Dimensiones Indicadores
Reservorio animal
Perros y paloma doméstica
como reservorios de
bacterias zoonóticas
Porcentaje de cepas de Salmonella
spp. aisladas tanto en materias fecal
de perros y de paloma doméstica
Características
macroscópicas de
muestras fecales
Tipo de muestra
Color de la muestra
Aspecto de la muestra
Consistencia de la muestra
Porcentaje de muestras secas y
frescas positivas para Salmonella
spp.
Porcentajes de muestras blancas,
verdes, negras, amarillas, marrones,
rojas y grises positivas para
Salmonella spp.
Porcentaje de muestras homogéneas
y heterogéneas positivas para
Salmonella spp.
Porcentaje de muestras firmes y
blandas positivas para Salmonella
spp.
45
Tabla 6. Operacionalización de las variables (continuación)
Lugar de Recolección
de la Muestra
7 divisiones geográficas del
Parque “La Carolina”
Muestras cercanas a
alimentos y agua
Porcentaje de muestras positivas
para Salmonella spp. recolectadas
en cada lugar
Porcentaje de muestras positivas
para Salmonella spp. recolectadas
cerca de alimentos y agua
Agentes zoonóticos
Identificación de Salmonella
spp. presente en las muestras
de materia fecal
Identificación de otras
bacterias presentes en las
muestras de materia fecal
Porcentaje de Salmonella spp. en las
muestras
Porcentaje de otras bacterias en las
muestras
Realizado por: Cangui S. & Delgado K.
3.5. Técnicas e instrumentos de recolección de datos
Para la recolección de los datos de la investigación se utilizó la “Técnica de observación” y
el instrumento fue una “Guía de observación” realizada para describir el procesamiento de cada
muestra en la recolección y análisis (ver Anexo D).
En la validación de la guía de observación se acudió al juicio de tres expertos a los que se
entregó el cuadro de operacionalización de variables, el instrumento de recolección de datos y
una matriz de validación (ver Anexo E), estos expertos fueron seleccionados por poseer el
conocimiento suficiente en investigación y en el campo microbiológico. Se recibieron
sugerencias y comentarios del instrumento de recolección de datos y se realizaron las
correspondientes modificaciones para su aplicación.
3.6. Técnicas de procesamiento y análisis de datos
Para realizar el análisis estadístico, todos los datos de la guía de observación fueron
trasladados a una base de datos en Microsoft Office Excel 2016 y se transfirieron al programa
informático Software SPSS versión 2.0, también se utilizó el programa bioinformático WinEpi
Working in Epidemiology de la Universidad de Zaragoza de la Facultad de Veterinaria
(www.winepi.net). Todos estos programas ayudaron al análisis descriptivo de los resultados
para finalmente establecer la prevalencia de Salmonella spp. en las muestras de materia fecal
canina y de paloma doméstica, haciendo uso de cálculos estadísticos como: porcentajes,
frecuencias, rangos de prevalencia real, Chi2 de Pearson, Chi2 con corrección de Yates, test
exacto de Fisher, Odds Ratios (OR) e intervalos de confianza.
46
Capítulo IV
Análisis y Discusión de Resultados
4.1. Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma doméstica y su
comparación
Se determinó una prevalencia del 3% (3/100 muestras) para Salmonella spp. en heces
caninas y una prevalencia del 5% (5/100 muestras) en heces de paloma doméstica. El análisis
estadístico mediante el programa bioinformático WinEpi Working in Epidemiology de la
Universidad de Zaragoza de la Facultad de Veterinaria (www.winepi.net) indica que estos
valores pueden encontrarse en un rango de prevalencia real para los perros entre 0 – 6% y para
las palomas entre 1 – 9%, tomando en cuenta que el tamaño de la población es desconocido y
el nivel de confianza de este estudio es del 95% (ver Tabla 7).
Tabla 7. Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y paloma doméstica
PERROS PALOMAS
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
Prevalencia
Real (%)
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
Prevalencia
Real (%)
Muestras
positivas para
Salmonella spp.
3/100 0,03 3 0 – 6 5/100 0,05 5 1 – 9
Muestras
negativas para
Salmonella spp.
97/100 0,97 97 - 95/100 0,95 95 -
Total 100/100 1 100 - 100/100 1 100 -
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
El análisis estadístico comparativo entre los dos grupos investigados; es decir, perros y
paloma doméstica y la variable de prevalencia indican que el 3% encontrada en las heces
caninas tiene una estimación de riesgo OR = 0,59 (IC del 95%: 0,14 – 2,52) mientras que para
la prevalencia del 5% encontrada en las palomas el OR = 1,70 (IC del 95%: 0,40 – 7,32); por
lo tanto, es 1,70 veces más probable que se encuentre Salmonella spp. en heces de paloma
doméstica que en heces de perros. Aunque según las pruebas estadísticas de Chi2 de Pearson,
Chi2 con corrección de Yates y el test exacto de Fisher, indican que estos datos no son
estadísticamente significativos por la baja prevalencia encontrada y la pequeña diferencia entre
los dos reservorios zoonóticos, lo que sugiere que tanto perros como paloma doméstica pueden
contener Salmonella spp. en sus heces y ser un foco de infección para la población humana y
otros animales, al igual que pueden contaminar alimentos y agua. Un estudio similar que tuvo
como objetivo establecer la contaminación fecal de heces caninas y de aves en la ciudad de
Bari, Italia entre el 15 de abril y 15 noviembre del 2010, denominado “Environmental
monitoring and analysis of faecal contamination in an urban setting in the city of Bari: health
and hygiene implications” donde examinaron un total de 152 muestras fecales caninas y 66
muestras fecales de paloma doméstica, no se logró aislar la especie Salmonella spp. en ninguno
de los reservorios, por lo que los investigadores argumentaron que podía deberse al pequeño
47
número de muestras obtenidas. Estos resultados son diferentes a la prevalencia encontrada en
nuestra investigación porque la metodología aplicada, el tamaño de muestra, el sitio de
muestreo (país en vías de desarrollo) y el tiempo son distintos (Tarsitano et al., 2010).
La prevalencia obtenida en la materia fecal de los perros fue del 3% y es menor a la
prevalencia reportada en el estudio “Serovars and antimicrobial resistance of non-typhoidal
Salmonella isolated from non-diarrhoeic dogs in Grenada, West Indies” que analizaron 144
muestras de heces caninas no diarreicas y se aisló el 5,6% en seis parroquias de la isla de
Granada entre los meses de Agosto y Octubre del 2016 (Amadi et al., 2018). Otro estudio que
reporta una prevalencia mayor se titula “Detection of zoonotic Enteropathogens in children and
domestic animals in a semirural community in Ecuador” reporta la detección de 5/40 muestras
para Salmonella spp. dando una prevalencia del 12,5% entre los meses de Junio y Agosto del
2014 en un análisis de muestras de perros domésticos de 62 hogares en Otón de Vélez – Yaruquí
(Vasco et al., 2016). El artículo “Prevalence of Salmonella infection in dogs in Maiduguri,
northeastern Nigeria” donde se identificó como portadores de Salmonella spp. a 52/119 perros
examinados (43,7%) indicando que los resultados son superiores a los obtenidos en otros partes
de Nigeria y del mundo, igualmente indican una notoria diferencia a la prevalencia encontrada
en nuestro estudio (Jajere et al., 2014). Por lo tanto, la diferencia entre las prevalencias
existentes puede verse afectada por las distintas áreas geográficas, tipos de muestras, tamaños
de muestra, método de aislamiento y el período de estudio.
El aislamiento del 5% en la materia fecal de paloma doméstica (Columbia livia) concuerda
con el estudio realizado en Sorocaba, Brasil en el período de Noviembre 2014 a Marzo 2015,
titulado “Free-ranging synanthropic birds (Ardea alba and Columba livia) as carriers of
Salmonella spp. and diarrheagenic Escherichia coli in the vicinity of and urban zoo” donde se
reportó una prevalencia del 4,23% de un total de 118 muestras (Oliveira et al., 2017). Otro
estudio “Prevalence and fimbrial genotype distribution of poultry Salmonella isolates in China
(2006 to 2012)” que describe una prevalencia similar de positividad de 4,1% en 417 muestras
totales realizado entre Noviembre 2006 y Octubre del 2012 (Gong et al., 2014). Por otro lado,
en la investigación “Salmonella enterica isolated from pigeon (Columba livia) in Egypt” se
reportó una prevalencia del 13,3% (6/45) durante un período de 12 meses entre 2010 – 2011,
con el análisis de hisopos rectales de muestras frescas (Osman, Mehrez, Erfan, & Nayerah,
2013). También se reportan análisis en los que no se logró aislar el microorganismo como en el
“Microbiological and parasitological survey of zoonotic agents in apparently healthy feral
pigeons” que luego de analizar 200 muestras de hisopos rectales concluyeron que la ausencia
del microorganismo puede justificarse debido a que las muestras fueron recolectadas de
palomas que no presentaban ningún signo clínico de alteración, es decir, eran aparentemente
sanas (Marenzoni et al., 2016), al igual que en el estudio “Epidemiological survey of zoonotic
pathogens in feral pigeons (Columba livia) and sympatric zoo species in Southern Spain” donde
se analizó 152 muestras fecales recolectadas en un zoológico entre Noviembre de 2013 - Mayo
2014 y concluyen que la ausencia de Salmonella spp. sugiere un papel limitado de la
transmisión del enteropatógeno en el área de estudio y argumentan que sus resultados se deben
a que los principales reservorios de la bacteria son los reptiles (Cano et al., 2015). En
comparación a otro estudio realizado en Latinoamérica titulado “Detección de algunos agentes
48
zoonóticos en la paloma doméstica (Columba livia) en la ciudad de Chillán, Chile” indica una
prevalencia similar a este estudio con un reporte del 4% de salmonelosis luego de analizar 100
palomas capturadas en verano (D. Gonzáles et al., 2007). Igualmente se atribuye las diferencias
de prevalencias a la geografía, muestras usadas, metodología de aislamiento, períodos y los
distintos tamaños de muestras.
Esta investigación se desarrolló entre los meses de Junio y Septiembre del 2018 que
corresponden a la temporada seca en el Ecuador y varios estudios afirman que por la influencia
del clima cálido existe un aumento del crecimiento bacteriano tanto en perros como en palomas,
por ejemplo en “Prevalence and characterization of Escherichia coli and Salmonella strains
isolated from stray dog and coyote feces in a major leafy greens production region at the United
States-Mexico border” que realizaron su muestreo desde el 3 Noviembre 2010 hasta el 5 Mayo
2011 y reportan que en Noviembre se observó una mayor prevalencia estacional de Salmonella
spp. en los refugios de California y México en comparación con las muestras que se
recolectaron a fines de invierno o en los meses de primavera y justifican este incremento de
prevalencia ya que al ser una temporada seca, los perros se ven obligados a buscar fuentes
nutricionales frescas y podridas entre la basura, porque en esta estación los recursos de agua
son muy limitados principalmente, para los perros callejeros (Jay et al., 2014b). Así también se
afirma en “Small animal disease surveillance: GI disease and salmonelosis” donde reportan una
mayor prevalencia de Salmonella spp. en perros en las estaciones de otoño y verano que
llegaron al 0,98% en comparación del invierno que fue de 0,75% luego de evaluar 160 427
perros (Arsevska et al., 2017).
Igualmente, en los estudios con la paloma doméstica hacen diferenciaciones de prevalencias
con respecto a las estaciones como “Occurrence of enteropathogenic bacteria in urban pigeons
(Columba livia) in Italy” donde dividen el muestreo en un período cálido (primavera-verano) y
un período frío (otoño-invierno) y capturan 900 palomas durante cada período, mostraron una
diferencia altamente significativa indicando que en el período cálido la prevalencia fue del 1,8%
y en período frío fue del 0% (Gargiulo et al., 2014). Otro estudio “Epidemiological
investigations on the possible risk of distribution of zoonotic bacteria through apparently
healthy homing pigeons” igualmente indica que existen variaciones estacionales porque la
prevalencia en verano fue de 0,9% y en invierno 1,9% (Teske et al., 2013).
4.2. Porcentaje de muestras de heces caninas y de palomas recolectadas cerca de
alimentos o agua que fueron positivas para Salmonella spp.
En los criterios de inclusión no se estableció que las muestras debían estar cerca de alimentos
o agua debido a que se creía que iba a ser difícil que todas las muestras cumplan con esta
condición, pero no existió dicha dificultad por lo que se priorizó recolectar únicamente muestras
de heces de ambos reservorios zoonóticos que se encontraban cercanas a alimentos o agua. El
100% de muestras tanto de perros como de palomas de las que fueron positivas para Salmonella
spp. estaban cercanas a alimentos y agua del lugar (ver Tabla 8).
49
Tabla 8. Muestras de perros y palomas recolectadas cerca de alimentos o agua que fueron
positivas para Salmonella spp.
PERROS PALOMAS
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
Muestras
cercanas a
alimentos o agua
3/100 0,03 3 5/100 0,05 5
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
El estudio “Multilaboratory survey to evaluate Salmonella prevalence in diarrheic and
nondiarrheic dogs and cats in the United States between 2012 and 2014” realiza una asociación
estadística sobre la prevalencia de Salmonella spp. de perros que viven con otros animales
incluyendo el ganado y la exposición a aguas superficiales como estanques y arroyos donde se
ha encontrado el microorganismo y se indica que la prevalencia puede deberse a la alimentación
con carnes crudas a los animales (Reimschu et al., 2017). Otro estudio denominado “Prevalence
and characterization of Escherichia coli and Salmonella strains isolated from stray dog and
coyote feces in a major leafy greens production region at the United States-Mexico border”
indica que los excrementos de los perros se reconocen cada vez con mayor énfasis como
factores de riesgo para contraer infecciones ocasionadas por Salmonella spp. debido a la
contaminación de alimentos antes de la cosecha en los campos de producción agrícola,
principalmente de lechuga comercial y también la contaminación de canales de riego y otras
fuentes de agua, por lo que se han reportado varios brotes de la infección en los sectores donde
los productores agrícolas avistaron perros deambulando (Jay et al., 2014b). En el estudio
“Detection of Zoonotic Enteropathogens in Children and Domestic Animals in a Semirural
Community in Ecuador” se indica que la difusión de patógenos zoonóticos entéricos puede
relacionarse con el uso de la materia fecal de los animales para fertilizar los suelos y se justifica
la presencia de Salmonella spp. en animales domésticos y niños de la comunidad debido a la
existencia de cuatro grandes instalaciones avícolas y la producción agrícola (Vasco et al., 2016).
La especie Columbia livia es considerada de gran importancia en la contaminación de
alimentos y agua por varios patógenos entéricos entre estos Salmonella spp. debido a que en el
“Microbiological and parasitological survey of zoonotic agents in apparently healthy feral
pigeons” se menciona que es un reservorio y vector potencial ya que coloniza plazas, parque
públicos y otras áreas y por su capacidad de volar puede contaminar fácilmente lugares y
comida que luego es ingerida por los humanos, por lo que se considera que la exposición de
materia fecal de la paloma doméstica cercanas a alimentos, fuentes de agua y al contacto
humano es una amenaza para la salud pública (Marenzoni et al., 2016).
4.3. Porcentaje de muestras secas y frescas de heces caninas y de palomas que fueron
positivas para Salmonella spp.
El análisis estadístico de las características macroscópicas de las muestras ayuda a evaluar
los posibles factores de riesgo que indiquen que un perro o una paloma doméstica tengan
50
salmonelosis. Por esto se detallan todos los datos obtenidos de las muestras fecales que fueron
positivas para Salmonella spp. incluyendo el análisis macroscópico de las muestras (ver Tabla
9).
Tabla 9. Datos de las muestras fecales donde se aisló Salmonella spp.
PERROS PALOMAS
Código colonia CNCH014_1 CNJI067_1 CNPA073_1 PDPA025_1 PDLQ036_1 PDPC042_1 PDJI056_1 PDLQ072_1
Lugar de
recolección Canchas
Juegos
infantiles
Pista
Atlética
Pista
Atlética
Laguna "El
Quinde"
Pista de
Ciclismo
Juegos
infantiles
Laguna "El
Quinde"
Coordenadas -0,180182, -
78,482853
-0,179570, -
78,484226
-0,182437, -
78,483722
-0,182448, -
78,483714
-0,187979, -
78,484330
-0,182943, -
78,482795
-0,179299, -
78,485264
-0,186819, -
78,484764
Muestras
cercanas a
alimentos o agua
Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí Sí
Color muestra Negro Marrón Marrón Marrón Amarillo Verde Amarillo Negro
Consistencia
muestra Firme Firme Firme Firme Blanda Firme Firme Blanda
Aspecto muestra He Ho Ho Ho Ho Ho Ho Ho
Estado muestra Fresca Seca Fresca Seca Fresca Seca Fresca Fresca
Ho: Homogénea; He: Heterogénea
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
En esta investigación se hizo una distinción estadística entre materia fecal fresca y seca para
conocer si el microorganismo se encontraba aún presente en las heces secas o envejecidas. Los
resultados obtenidos indican que se aisló Salmonella spp. de los dos tipos de muestra,
considerando que puede ser un gran factor de riesgo la larga supervivencia del patógeno en la
materia fecal seca para la transmisión de enfermedades y determinando el estado del portador
del microrganismo tanto en perros como de paloma doméstica por un tiempo bastante
prolongado (ver Tabla 10).
Tabla 10. Muestras secas y frescas de perros y palomas en las que se aisló Salmonella spp.
PERROS PALOMAS
Tipo de
muestra
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
Muestras
secas 1/47 0,021 2,12 2/41 0,049 4,88
Muestras
frescas 2/53 0,038 3,77 3/59 0,051 5,08
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
En la materia fecal seca canina se cuantificó 1/47 (2,12%) con un OR = 0,47 (IC del 95%:
0,04 – 5,36) de muestras positivas para Salmonella spp. Mientras que en las muestras frescas la
prevalencia fue 2/53 (3,77%) con un OR = 2,13 (IC del 95%: 0,19 – 24,25). Lo que significa
51
que es 2,13 veces más probable que se aisle Salmonella spp. en muestras fecales frescas que
secas; pero estadísticamente esta comparación no es significativa, ya que el Chi2 de Pearson
con corrección de Yates es igual a 0,386 y con un IC = 95% el valor debería ser mayor a 3,842
para que sea estadísticamente significativo, además el valor del test exacto de Fisher es de 𝑝 =
0,614 y para ser significativo debería ser menor a 0,05. Esto denota que la diferenciación
estadística entre la prevalencia y la variable tipo de muestra no es importante, por lo que ambas
formas de contaminación ambiental (heces secas y frescas) son potencialmente infecciosas y
pueden causar zoonosis. En la bibliografía se encontró un estudio que también analiza el tipo
de muestra titulado “Environmental contamination by dog’s faeces: a public health problem?”
que se realizó entre los meses de febrero a septiembre del 2010 donde se obtuvieron 418
muestras fecales de perros, 44% muestras frescas y 56% muestras envejecidas recolectadas de
aceras y calles principales de la ciudad de Bari, el resultado de prevalencia fue del 0% y puede
deberse a que se tenía un control de la dieta de los animales estudiados excluyendo el consumo
de carne cruda que es el principal factor de salmonelosis para los perros (Cinquepalmi et al.,
2012). Otro estudio denominado “Prevalence of Salmonella in juvenile dogs affected with
parvoviral enteritis” realizado en Sudáfrica entre los meses de octubre 2015 a marzo 2017 se
recolectaron muestras únicamente frescas y se reportó una prevalencia de 13/42 (31%) e indican
que se usaron solo este tipo de muestras ya que la prevalencia sería más cercana a la realidad
(Botha, Schoeman, Marks, Whitehead & Annandale, 2018). Una de las formas más empleadas
de la toma de muestra a parte de la recolección de la materia fecal, es el hisopado rectal como
se reporta en “Salmonella serotypes and their antimicrobial susceptibility in apparently healthy
dogs in Addis Ababa, Ethiopia” realizado entre los meses de enero a octubre del 2015 analizó
un total de 360 hisopados rectales y fueron positivos el 11,67% correspondiente a 42 muestras,
pero se indica que la toma de muestra podría haber subestimado la verdadera prevalencia debido
a que el volumen de materia fecal total es inferior con el hisopo rectal en comparación a la
recolección normal (Kiflu, Alemayehu, Abdurahaman, Negash, & Eguale, 2017).
Las muestras de heces secas de paloma doméstica indicaron una prevalencia de 2/41 (4,88%)
con un OR = 0,44 (IC del 95%: 0,07 – 2,78) y en las heces frescas se obtuvo una prevalencia
del 3/59 (5,08%) un OR= 2,25 (IC del 95%: 0,36 – 14,11). Lo que significa que es 2,25 veces
más probable encontrar Salmonella spp. en heces frescas que secas, aunque los valores son
estadísticamente no significativos debido a que el Chi2 de Pearson con corrección de Yates es
de 0,785 y para que sea significativo necesita ser mayor a 3,842, igualmente el valor del test
estadístico de Fisher es de 𝑝= 0,398 y debería ser menor a 0,05 para ser significativo. La
interpretación de estos resultados indica que existe la misma probabilidad de contaminación
por Salmonella spp. entre las muestras frescas y secas y debido a que la paloma doméstica
convierte a esta zoonosis como la más difundida en el mundo su importancia incrementa si el
microorganismo sobrevive incluso en la materia fecal seca. Solo se encontró un estudio donde
se recolectaron muestras fecales secas y frescas denominado “Prevalence of Salmonella spp.
Antibodies to Toxoplasma gondii, and Newcastle Disease Virus in feral pigeons (Columba
livia) in the City of Jaboticabal, Brazil” que reportan una prevalencia total de 7,94% de 126
palomas e indican que ambos tipos de muestras son de alto riesgo de contaminación para los
humanos en especial para personas inmunodeprimidas, ancianos, niños y mujeres embarazadas
(Sousa et al., 2010). El estudio “Epidemiological survey of zoonotic pathogens in feral pigeons
52
(Columba livia) and sympatric zoo species in Southern Spain” usó 152 muestras fecales frescas
donde no se aisló Salmonella spp. La mayoría de las investigaciones usan al hisopado cloacal
como principal muestra para el análisis como en el estudio “Zoonotic agents in feral pigeons
(Columba livia) from Costa Rica: possible pmprovements to diminish contagion risks” reportó
el aislamiento de 34/147 muestras de hisopado cloacal y lavado cloacal con fosfato e indican
que la alta prevalencia se debe a la capacidad que tiene el microorganismo para sobrevivir
dentro del huésped y en el medio ambiente y a las altas prevalencias del patógeno en otros
animales y humanos del lugar (Torres et al., 2017).
4.4. Porcentaje del color de las muestras de heces caninas y de palomas que fueron
positivas para Salmonella spp.
Se incluyó en el análisis la variable “color de muestra” para conocer si se puede considerar
como un factor de riesgo para la presencia de Salmonella spp. en las muestras de heces y se
obtuvieron los siguientes resultados (ver Tabla 11): en la materia fecal de perros el color marrón
2/32 (6,25%) con un OR= 4,69 (IC del 95%: 0,41 – 53,79) y negro 1/21 (4,76%) con un OR=
1,81 (IC del 95%: 0,16 – 20,94), lo que quiere decir que es 4,69 veces más probable que se aisle
el microorganismo de heces de color marrón que de cualquiera de los otros colores. Pero luego
del análisis bioestadístico se determina que estos valores no son significativos ya que el valor
del Chi2 de Pearson es de 2,903 y se requiere que sea mayor a 12,592. En la materia fecal de la
paloma doméstica el color blanco 2/6 (33,33%) con un OR= 9,89 (IC del 95%: 1,38 – 70,98),
marrón 1/18 (5,55%) con un OR= 1,15 (IC del 95%: 0,12 – 10,92), negro 1/7 (14,29%) con un
OR= 4,50 (IC del 95%: 0,42 – 48,10) y verde 1/58 (1,72%) con un OR= 0,17 (IC del 95%: 0,02
– 1,55), lo que quiere decir que es 9,89 veces más probable que se aisle el microorganismo de
heces de color blanco que de cualquiera de los otros colores.
Tabla 11. Color de las muestras de perros y palomas de las que se aisló Salmonella spp.
PERROS PALOMAS
Color de
la
muestra
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
Amarillo 0/30 0 0 0/10 0 0
Blanco 0/3 0 0 2/6 0,333 33,33
Marrón 2/32 0,063 6,25 1/18 0,055 5,55
Negro 1/21 0,048 4,76 1/7 0,142 14,29
Rojo 0/1 0 0 0/1 0 0
Verde 0/12 0 0 1/58 0,017 1,72
Gris 0/1 0 0 0/0 0 0
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
Pero luego del análisis bioestadístico se determina que estos valores no son significativos ya
que el valor del Chi2 de Pearson es de 8,199 y se requiere que sea mayor a 11,071. Por lo tanto
la comparación entre el color de la muestra y la prevalencia de Salmonella spp. no es relevante
53
porque no es un factor de riesgo que pueda determinar la presencia o ausencia del
microorganismo.
El único estudio que analiza el color de las heces de la paloma doméstica y la prevalencia
de Salmonela entérica se titula “Antibiogram and genetic diversity of Salmonella enterica with
zoonotic potential isolated from morbid native chickens and pigeons in Egypt” donde
analizaron 30 hisopos cloacales priorizando las palomas que tenían deposiciones diarreicas
blanquecinas y se aíslan 6 cepas que corresponden al 20% y reportan que la selección de este
color se debe a que las palomas presentan signos clínicos de enfermedad gastrointestinal
(Abdeen et al., 2016).
4.5. Porcentaje de la consistencia de las muestras de heces caninas y de palomas que
fueron positivas para Salmonella spp.
En los seres humanos uno de los principales signos clínicos en la presencia de enteritis
causada por Salmonella spp. son las heces diarreicas, por lo que en este estudio se pretende
establecer si existe el mismo factor de riesgo que indique la existencia del patógeno en la
materia fecal tanto de perros como de paloma doméstica para lo que se realizó un análisis
estadístico (ver Tabla 12).
Tabla 12. Consistencia de las muestras de perros y palomas donde se aisló Salmonella spp.
PERROS PALOMAS
Consistencia de
la muestra
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
Consistencia
firme 3/62 0,048 4,83 3/68 0,044 4,41
Consistencia
blanda 0/31 0 0 2/26 0,077 7,69
Consistencia
líquida 0/7 0 0 0/6 0 0
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
La consistencia de la materia fecal canina que contenía Salmonella spp. fue únicamente
firme 3/62 (4,83%) y en ninguna de las 31 muestras blandas y 7 muestras líquidas se aisló la
bacteria de interés, entonces es más probable que se aisle Salmonella spp. en materia fecal firme
que en cualquier otra consistencia, pero el análisis bioestadístico muestra que los resultados no
son estadísticamente significativos debido a que el valor de la prueba de Chi2 de Pearson es de
1,896 y para que haya significancia con un IC = 95% debería ser mayor a 5,992; por lo tanto se
establece que el microorganismo puede aislarse en la materia fecal canina de cualquier
consistencia con la misma probabilidad y que esta variable no es un factor de riesgo que indique
la presencia del patógeno y tampoco es un signo clínico que muestre la presencia de
salmonelosis en los perros, por lo que es importante recalcar que pueden existir animales
enfermos asintomáticos que eliminen Salmonella spp. en sus heces en un período que puede
durar hasta seis semanas y es necesario tener precaución con el contacto fecal canino
54
independientemente de su consistencia. Los resultados obtenidos tienen concordancia con las
prevalencias establecidas en “Chronic diarrhea in dogs: what do we actually know about it?”
que afirma que los perros sanos tienen una prevalencia de 0 a 2%, los perros diarreicos de 0 a
1% y que esta se incrementa a aproximadamente el 30% si los animales son alimentados con
una dieta inapropiada de alimentos crudos, además indica que aún no existen estudios
publicados que muestren fisiológicamente como Salmonella spp. causaría signos de diarrea
crónica en perros (Westermarck, 2016). Por otro lado, estudios como “Evaluation of faecal
Salmonella shedding among dogs at seven animal shelters across Texas” reportan que la
prevalencia del patógeno fue significaticamente mayor en muestras fecales acuosas 4/27
(14,8%) en comparación con consistencias normales 14/361 (3,9%) y semiformadas 4/108
(3,7%) y recomiendan determinar las razones fisiológicas y mecanismos de acción del
microorgasmo en el sistema gastrointestinal de los perros (Leahy, Cummings, Rodriguez,
Rankin, & Hamer, 2016). En “Multilaboratory survey to evaluate Salmonella prevalence in
diarrheic and nondiarrheic dogs and cats in the United States between 2012 and 2014” donde
analizaron 2 422 muestras fecales y hubo una prevalencia de 3,8% en perros diarreicos y 1,8%
en perros no diarreicos indicando que los perros diarreicos tenían una probabilidad de más del
doble de ser positivos para Salmonella spp. a pesar de esto también indican que los perros
negativos que tenían diarrea corresponden al 55%, entonces el derramamiento del
microorganismo puede darse también en perros no diarreicos por períodos prolongados
(Reimschu et al., 2017).
Los resultados en la consistencia de la materia fecal de la paloma doméstica muestra que se
aisló Salmonella spp. en heces firmes 3/68 (4,41%) con una estimación de riesgo OR = 0,69
(IC del 95%: 0,11 – 4,36), y en heces blandas 2/26 (7,69%) con un OR = 1,97 (IC del 95%:
0,31 – 12,52), entonces es 1,97 veces más probable que se aisle el patógeno en materia fecal
con consistencia blanda o semiformada que en heces firmes o líquidas; pero los resultados no
son estadísticamente significativos porque el valor del Chi2 de Pearson es de 0,762 y para que
haya significancia con un IC = 95% debería ser mayor a 5,992; por lo tanto se determina que
Salmonella spp. puede ser aislada con la misma frecuencia en heces firmes, blandas o líquidas
y al ser un foco de contaminación peligroso es importante tener cuidado con el contacto directo
o indirecto con la materia fecal de cualquier consistencia, además se recalca que la presencia
de diarrea no es un signo clínico que indique que el animal padece de enteritis causada por
salmonellosis y que las palomas pueden ser portadoras asintomáticos que padecen la
enfermedad gastrointestinal y son potenciales difusoras que eliminan la bacteria en su materia
fecal por un tiempo prolongado.
La mayoría de los estudios usaron hisopados cloacales por lo que no diferenciaron la
consistencia de la materia fecal, aun así la investigación “Epidemiological investigations on the
possible risk of distribution of zoonotic bacteria through apparently healthy homing pigeons”
donde aplicaron un cuestionario a los aficionados de palomas que incluía la evaluación del
estado de salud de los animales para conocer si existía algún signo de infección gastrointestinal
como la presencia de diarrea, al que todas las aves indicaban estar aparentemente sanas, es decir
presentaban heces firmes y luego de analizar 172 palomares la prevalencia obtenida fue de 0,9
a 3,7% (Teske et al., 2013). Otro estudio “Salmonella enterica isolated from pigeon (Columba
55
livia) in Egypt” que recolectaron muestras fecales frescas y sólidas durante un período de 12
meses entre 2010 y 2011 reportaron una prevalencia de 13,3% (6/45) lo que indica que el
agente zoonótico se encuentra en la materia fecal firme y que no se ha establecido que la
presencia de diarrea se asocie al desarrollo de enteritis en palomas (Osman et al., 2013).
4.6. Porcentaje del aspecto de las muestras de heces caninas y de palomas que fueron
positivas para Salmonella spp.
Otro de los signos clínicos que puede evidenciar la presencia de enfermedades
gastrointestinales es el aspecto heterogéneo caracterizado por la presencia de alimentos,
parásitos o sangre en las heces, aunque no exista una relación bien establecida con esta variable
y la presencia de Salmonella spp. en humanos ni en animales, en este estudio se decidió buscar
una asociación estadística para conocer la importancia del reporte de heces heterogéneas y la
prevalencia de Salmonella spp. (ver Tabla 13).
Tabla 13. Aspecto de las muestras de perros y palomas que fueron Salmonella spp. positivas
PERROS PALOMAS
Aspecto de la
muestra
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
Muestras
homogéneas 2/90 0,022 2,22 5/99 0,050 5,05
Muestras
heterogéneas 1/10 0,010 10 0/1 0 0
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
El aspecto de las heces caninas donde se aisló Salmonella spp. fue de 2/90 (2,22%) para
muestras homogéneas con un OR = 0,20 (IC del 95%: 0,02 – 2,48) y 1/10 (10%) para muestras
heterogéneas con un OR = 4,89 (IC del 95%: 0,40 – 59,35). Esto indica que es 4,89 veces más
probable que se aisle el patógeno en muestras heterogéneas que en muestras homogéneas y la
base de datos del muestreo y procesamiento de las muestras indica que las únicas heces
hterogéneas de las que se aisló Salmonella spp. contenían sangre y restos de alimentos, pero la
asociación no es estadísticamente significativa porque en la prueba de Chi2 de Pearson el valor:
resultante es de 1,871 y para que haya significancia con un IC = 95% debería ser mayor a 3,842;
además el valor del test exacto de Fisher es 𝑝 = 0,273 y para que exista significancia debería
ser menor a 0,05. Por lo tanto, se interpreta que se puede aislar Salmonella spp. de muestras
homogéneas y heterogéneas con la misma frecuencia y el aspecto no es un factor de riesgo ni
un signo clínico de la presencia de salmonelosis en perros. Existe un único estudio que reporta
el aspecto de las muestras denominado “Multilaboratory survey to evaluate Salmonella
prevalence in diarrheic and nondiarrheic dogs and cats in the United States between 2012 and
2014” donde indican que el 45% de perros presentaron diarrea hemorrágica y del total de perros
diarreicos la prevalencia de Salmonella spp. fue de 3,8% y asocian la presencia del patógeno
con factores dietéticos como el consumo de alimentos crudos que podrían contener
enterobacterias que produzcan la hemorragia (Reimschu et al., 2017).
56
En la materia fecal de las palomas con presencia de Salmonella spp. la consistencia fue
únicamente homogénea 5/99 (5,05%) lo que significa que es más probable que se encuentre
Salmonella spp. en muestras homogéneas en comparación de las heterogéneas. Pero la
interpretación bioestadística indica que los valores no son estadísticamente significativos
porque en la prueba de Chi2 de Pearson el valor es de 0,053 y para que haya significancia con
un IC = 95% debería ser mayor a 3,842; además el valor del test exacto de Fisher es 𝑝 = 1,000
y para que exista significancia debería ser menor a 0,05. Por lo tanto la materia fecal de paloma
doméstica con aspecto homogéneo y heterogéneo pueden contener Salmonella spp. con la
misma frecuencia, entonces la presencia de sangre, alimentos o parásitos en las heces no son
indicativo de enteritis por Salmonella spp. en las palomas pero bibliográficamente no existen
artículos que corroboren o contradigan este resultado.
4.7. Porcentajes de muestras positivas para Salmonella spp. en cada lugar de
recolección del Parque “La Carolina”
El lugar del muestreo fue dividido en ocho zonas para poder identificar en cuales había
mayor prevalencia del microorganismo en estudio y relacionar la ubicación con la principal
población humana en riesgo (ver Tabla 14).
Tabla 14. Sitios del Parque “La Carolina” donde se recolectó muestras fecales positivas para
Salmonella spp.
PERROS PALOMAS
Lugar de recolección N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
Canchas 1/21 0,048 4,76 0/18 0 0
Jardín Botánico 0/9 0 0 0/11 0 0
Juegos Infantiles 1/30 0,033 3,33 1/16 0,063 6,25
Laguna "El Quinde" 0/10 0 0 2/27 0,074 7,40
Pista Atlética 1/13 0,078 7,69 1/18 0,056 5,56
Pista de Ciclismo 0/10 0 0 1/9 0,111 11,11
Zona Canina 0/7 0 0 0/1 0 0
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
En el caso de las heces caninas que fueron positivas para Salmonella spp. las muestras fueron
recolectadas en las Canchas 1/21 (4,76%) con un OR = 1,92 (IC del 95%: 0,17 – 22,31), Juegos
Infantiles 1/30 (3,33%) con un OR = 1,17 (IC del 95%: 0,10 – 13,45) y Pista Atlética 1/13
(7,69%) con un OR = 3,54 (IC del 95%: 0,30 – 42,10). Por lo tanto, es 3,54 veces más probable
que se encuentre una muestra de heces positiva para Salmonella spp. en la Pista Atlética del
Parque “La Carolina” que en cualquiera de las otras ocho zonas, aunque los datos no son
estadísticamente significativos porque en la prueba de Chi2 de Pearson el valor es de 2,332 y
con un IC = 95% el valor debería ser mayor a 12,592 para ser estadísticamente significativo,
entonces se establece que cualquiera de las ocho zonas del Parque “La Carolina” pueden
contener muestras fecales positivas para Salmonella spp. Sin embargo, es importante recalcar
que en este estudio, entre los lugares que son positivos para el microorganismo se destacan los
57
Juegos Infantiles en donde la población infantil vulnerable es la más afectada. Varias
investigaciones radican la importancia de diferenciar los porcentajes de aislamiento en cada
lugar, por ejemplo “Multilaboratory Survey To Evaluate Salmonella Prevalence in Diarrheic
and Nondiarrheic Dogs and Cats in the United States between 2012 and 2014” donde se
analizaron 2 422 muestras fecales de perros entre enero 2012 y abril 2014, se aislaron 60 cepas
de Salmonella spp. (2,5%) y especificaron los porcentajes de aislamiento para la región de
Texas 10%, Georgia 8% y de otros estados que oscilaron entre el 1 – 4%, justifican los
porcentajes más altos debido a la estimación existente de mayor prevalencia en el sur de Estados
Unidos en otras especies incluyendo al humano y se dice que la temperatura puede ser el
principal factor (Reimschu et al., 2017). Otro estudio “Prevalence and characterization of
Escherichia coli and Salmonella strains isolated from stray dog and coyote feces in a major
leafy greens production region at the United States-Mexico border” que incluyó en su muestreo
3 refugios entre el 3 noviembre 2010 hasta el 5 mayo 2015, analizaron 358 muestras fecales de
perros domésticos y realizaron una diferenciación significativa con el número de muestras
fecales positivas para Salmonella spp. por ubicación de cada refugio indicando las siguientes
prevalencias: Arizona 3,2%, California 9% y México 14,9% (Jay, Hake, Bengson, Thiptara, &
Nguyen, 2014a). Aunque las diferenciaciones geográficas en estos estudios se establecen por
ciudades, indican la importancia de diferenciar estadísticamente cada zona y justificar las
razones que las pueden causar por lo que se realizó lo mismo en esta investigación.
En el estudio no se registró ningún tipo de datos de los perros de los que provenían las
muestras fecales, por lo que no se conoce el número de muestras pertenecientes a perros
domésticos o mascotas y perros callejeros, pero se asume que la Zona Canina es visitada en su
mayoría por mascotas con sus dueños ya que el acceso es restringido. No se aisló Salmonella
spp. en este lugar y aunque el número de muestras obtenidas en esta zona es pequeño, se podría
decir que la ausencia del patógeno zoonótico se debe a varios factores que cuidan la salud y la
higiene de las mascotas, lo que no sucede con los perros callejeros. Estudios como “Evaluation
of Faecal Salmonella Shedding Among Dogs at Seven Animal Shelters across Texas”
confirman que el porcentaje de aislamiento es mayor en perros callejeros 20/300 (6,7%) en
comparación de perros domésticos 2/82 (2,4%) (Leahy et al., 2016). Al contrario, en
“Investigating the prevalence of Salmonella in dogs within the Midlands region of the United
Kingdom” luego de analizar 436 muestras fecales, solo se aisló una cepa de Salmonella spp. de
un total de 126 mascotas, mientras que no se aisló el microorganismo en el centro de rescate,
perreras de embarque, galgos retirados e instalaciones de nutrición para mascotas; esto
contradice a otros estudios que determinan que los perros callejeros tienen tasas
significativamente más altas que los perros domésticos y puede deberse a que recibieron
únicamente dietas comerciales (Lowden, Wallis, Gee, & Hilton, 2015). Otra diferenciación que
se puede realizar con el lugar es entre perros domésticos que son estrictamente interiores y
perros domésticos que son exteriores/interiores donde en el estudio “Serovars and antimicrobial
resistance of non-typhoidal Salmonella isolated from non-diarrhoeic dogs in Grenada, West
Indies” se indica que la prevalencia es de 7/140 en perros exteriores/interiores y 1/4 en perros
estrictamente interiores, lo que determina un mayor aislamiento en los perros que se exponen
al ambiente contaminado y por el consumo de basura y residuos (Amadi et al., 2018).
58
En las heces de paloma doméstica donde se aisló Salmonella spp. las muestras fueron
recolectadas en los Juegos Infantiles 1/16 (6,25%) con un OR = 1,33 (IC del 95%: 0,14 – 12,77),
Laguna “El Quinde” 2/27 (7,40%) con un OR = 1,87 (IC del 95%: 0,30 – 11,83), Pista Atlética
1/18 (5,56%) con un OR = 1,14 (IC del 95%: 0,12 – 10,92) y Pista de Ciclismo 1/9 (11,11%)
con un OR = 2,72 (IC del 95%: 0,27 – 27,33). Por lo tanto, es 2,72 veces más probable que se
encuentre una muestra de heces positiva para Salmonella spp. en la Pista de Ciclismo que en
cualquier otra zona del Parque “La Carolina”, aunque esto puede deberse al bajo número de
muestras recolectadas en este lugar y además los datos no son estadísticamente significativos
porque en la prueba de Chi2 de Pearson el valor es de 2,680 y con un IC = 95% el valor debería
ser mayor a 12,592 para ser estadísticamente significativo, entonces se establece que cualquiera
de las ocho zonas del Parque “La Carolina” pueden contener muestras fecales positivas para
Salmonella spp. En algunos estudios se recalca la importancia de la diferenciación estadística
de los distintos lugares investigados, por ejemplo “Zoonotic Agents in Feral Pigeons (Columba
livia) from Costa Rica: Possible Improvements to Diminish Contagion Risks” donde analizan
140 muestras fecales de palomas recolectadas en cuatro parque urbanos y 34 muestras
recolectadas en el Parque Guadalupe son positivas para Salmonella entérica y en el resto de los
Parque no se aisló el microorganismo, esto se asocia a las altas tasas de intoxicación alimentaria
y fiebre entérica en el lugar (Torres et al., 2017). También en la investigación “Prevalence and
fimbrial genotype distribution of poultry Salmonella isolates in China (2006 to 2012)” indican
que existió una variación considerable en la prevalencia en las distintas regiones: Jiangsu 6/122
(5%), Anhui 4/50 (8%), Hebei 3/55 (6%), Henan 2/73 (3%) y Gungdong 1/63 (2%), esta
variedad concuerda con otros estudios realizados en la región pero aún se desconoce los motivos
(Gong et al., 2014). Otro estudio titulado “Prevalence and risk factors for Campylobacter spp.,
Salmonella spp., Coxiella burnetii, and Newcastle disease virus in feral pigeons (Columba livia)
in public areas of Montreal, Canada” reporta que en 187 muestras de palomas analizadas se
encontraron prevalencias que variaron del 5% al 24% en 7 de los 10 sitios muestreados, además
recalcan que el tamaño de muestra fue de 20 palomas por sitio seleccionados observando
previamente que albergaran 10 palomas en el momento de la visita y que se encontrara al menos
1 km de distancia entre los sitios muestreados (Gabriele et al., 2016). A pesar de que este estudio
se desarrolló en un solo lugar del Distrito Metropolitano de Quito, la importancia de sus
resultados radica en el número de visitas diarias al Parque y la cantidad de excrementos de
palomas encontrados, adicionalmente Quito se ha mantenido por varios años amenazado por la
basura y residuos existentes que también son fuente de contaminación, como se recalca en el
estudio “Occurrence of Enteropathogenic Bacteria in Urban Pigeons (Columba livia) in Italy”
donde luego de analizar muestras de hisopado cloacal de 1 800 palomas de zonas urbanas entre
diciembre 2007 y mayo 2010, se determina que en los municipios sin emergencia de residuos
la prevalencia es de 0,3% (3/1 110) para Salmonella spp., mientras que en los municipios con
emergencia de residuos la prevalencia asciende a 1,9% (13/690), por lo que los desperdicios y
basura de la ciudad son una importante causa del aumento de las palomas y varios patógenos
(Gargiulo et al., 2014).
Así pues, cualquiera de las zonas del Parque que contenga materia fecal de perros y palomas
son fuentes potenciales de infección para toda la población debido a que es un lugar de
entretenimiento y diversión al que acude gran porcentaje de la población que habita en la ciudad
59
de Quito. Por consiguiente, haciendo uso de la bioestadística y del programa bioinformático
WinEpi Working in Epidemiology de la Universidad de Zaragoza de la Facultad de Veterinaria
(www.winepi.net) se determinó la prevalencia máxima posible con un nivel de confianza del
95% de todos los lugares donde los resultados fueron negativos (ver Tabla 15).
Tabla 15. Prevalencia máxima posible de muestras caninas y de paloma doméstica de los
sitios donde los resultados fueron negativos para Salmonella spp.
Reservorio
zoonótico Lugar de recolección N° de muestras
Frecuencia
relativa
Porcentaje
(%)
PERROS
Jardín Botánico 2,5/9 0,278 27,78
Laguna "El Quinde" 2,5/10 0,250 25,00
Pista de Ciclismo 2,5/10 0,250 25,00
Zona Canina 2,4/7 0,343 34,29
PALOMAS
Canchas 2,7/18 0,150 15,00
Jardín Botánico 2,5/11 0,227 22,73
Zona Canina 0,9/1 0,900 90,00
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
4.8. Porcentaje de aislamiento de otras bacterias zoonóticas y no zoonóticas
identificadas por pruebas bioquímicas
En total se recolectaron 200 muestras de ambos reservorios zoonóticos que cumplieron con
los criterios de inclusión establecidos y las prevalencias de Salmonella spp. y de otros
microorganismos se reportaron mediante la identificación con pruebas bioquímicas en las cepas
aisladas del 92% de las muestras de heces de perros y 98% de las muestras de heces de palomas
porque también existieron muestras en las que no hubo crecimiento microbiológico (ver Tabla
16).
Tabla 16. Crecimiento bacteriano de las muestras fecales de perros y palomas
PERROS PALOMAS
Crecimiento
bacteriano
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
Muestras con
crecimiento 92 0,92 92 98 0,98 98
Muestras sin
crecimiento 8 0,08 8 2 0,02 2
TOTAL 100 1 100 100 1 100
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
Aunque en este estudio el objetivo principal era aislar Salmonella spp. en las muestras
fecales de perros y paloma doméstica, también se identificaron otras bacterias zoonóticas y no
60
zoonóticas de las muestras con crecimiento microbiológico a través de las pruebas bioquímicas
(ver Tabla 17).
Tabla 17. Otras bacterias aisladas de las muestras de perros y palomas
PERROS PALOMAS
Bacterias N° cepas
aisladas
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
N° cepas
aisladas
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
Enterobacter
aerogenes 43 0,430 43 48 0,480 48
Escherichia coli 35 0,350 35 40 0,400 40
Klebsiella
pneumoniae 6 0,060 6 4 0,040 4
Shigella spp. 5 0,050 5 5 0,050 5
Serratia
marcences 1 0,010 1 0 0 0
Proteus spp. 12 0,120 12 1 0,010 1
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
Con mayor frecuencia se encontró Enterobacter aerogenes del que se aislaron 43 cepas en
las muestras caninas con un OR = 0,82 (IC del 95%: 0,47 – 1,43) y 48 cepas de las muestras de
paloma doméstica con un OR = 1,24 (IC del 95%: 0,70 – 2,20), estos resultados indican que es
1,24 veces más probable aislar Enterobacter aerogenes en palomas que en perros. Del bacilo
gramnegativo Escherichia coli se aislaron 35 cepas en las muestras caninas con un OR = 0,81
(IC del 95%: 0,45 – 1,43) y 40 cepas de las muestras de paloma doméstica con un OR = 1,22
(IC del 95%: 0,70 – 2,13) estadísticamente se interpreta que es 1,22 veces más probable aislar
Escherichia coli en heces de palomas que en las de perros. De la bacteria Klebsiella
pneumoniae se aislaron 6 cepas en las muestras caninas con un OR = 1,53 (IC del 95%: 0,42 –
5,57) y 4 cepas de las muestras de paloma doméstica con un OR = 0,65 (IC del 95%: 0,18 –
2,38) lo que significa que es 1,53 veces más probable aislar Klebsiella pneumoniae en la materia
fecal de perros que de palomas. Para Shigella spp. tanto en las muestras de perros como de
paloma doméstica se aislaron 5 cepas con un OR = 1,00 (IC del 95%: 0,28 – 3,57) lo que indica
que es igual de probable aislar Shigella spp en las heces de perros que en las de palomas.
Serratia marcences se aisló solo 1 cepa en las muestras caninas lo que se interpreta que es más
probable aislar Serratia marcences en muestras fecales de perros que en las de palomas.
Finalmente, Proteus spp. se aislaron 11 cepas en las muestras caninas con un OR = 13,50 (IC
del 95%: 1,72 – 15,93) y 1 cepa de las muestras de paloma doméstica con un OR = 0,07 (IC del
95%: 0,009 – 0,58) estadísticamente se interpreta que es 13,50 veces más probable aislar
Proteus spp. en perros que en palomas. Pero todas estas frecuencias y estimaciones de riesgo
no son estadísticamente significativas según la prueba de Chi2 de Pearson con corrección de
Yates y mediante el test exacto de Fisher, por lo que se indica que los datos son al azar y que
existe la misma probabilidad de encontrar cualquiera de las bacterias antes mencionadas en las
heces de perros y de paloma doméstica.
61
En las muestras recolectadas existieron coinfecciones, es decir el aislamiento de dos y tes
cepas de bacterias zoonóticas y no zoonóticas en la misma muestra (ver Tabla 18). Empleando
una metodología exclusiva para el aislamiento de Salmonella spp. estadísticamente es 2,34
veces más probable que se aísle una sola bacteria en las muestras de palomas que de perros; es
2,11 veces más probable que se aíslen dos bacterias en las muestras de perros que de palomas
y es 11,11 veces más probable que se aíslen tres bacterias en las muestras de perros que de
palomas. Aunque ninguno de estos análisis bioestadísticos es significativo mediante la prueba
de Chi2 de Pearson, prueba de Chi2 de Pearson con corrección de Yates y test exacto de Fisher,
esto se debe a que las muestras fueron seleccionadas al azar, mediante aleatoriedad e indican
que en las muestras fecales tanto de perros como de palomas pueden existir uno o más
microorganismos zoonóticos y no zoonóticos, patógenos o no patógenos para los animales y el
humano.
Tabla 18. Muestras de perros y palomas con una, dos o tres cepas aisladas
PERROS PALOMAS
Muestras con
una, dos o tres
cepas
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
N° de
muestras
Frecuencia
Relativa
Porcentaje
(%)
Una cepa 89 0,89 89 95 0,95 95
Dos cepas 10 0,1 10 5 0,05 5
Tres cepas 1 0,01 1 0 0 0
TOTAL 100 1 100 100 1 100
Realizado por Cangui S. & Delgado K.
Como en esta investigación, muchas otras reportan coinfecciones pero adaptan varias
metodologías de aislamiento para cada bacteria e incluso emplean pruebas de serotipificación
y análisis de biología molecular, además reportan resultados de prevalencias de virus y parásitos
como por ejemplo “Presence of infectious agents and co-infections in diarrheic dogs determined
with a real-time polymerase chain reaction-based panel” que luego de analizar 104 muestras
diarreicas el 68,3% contenían enteropatógenos, 39/71 (54,9%) indicaron infecciones únicas y
32/71 (45,1%) reportaron confecciones, además de reportar la presencia de Salmonella spp. 1%
indicaron prevalencias del Virus del moquillo canino 8,7%, Parvovirus canino tipo II 34,6%,
Cryptosporidium spp. 8%, Giardia spp. 14%, Coronavirus canino 12% y el Gen de la toxina
alfa de C. perfringens 38,5% (Gizzi et al., 2014). Otro estudio “Enteropathogen infections in
canine puppies: (Co-)occurrence, clinical relevance and risk factors” detectaron uno o más
agentes patógenos en el 86,5% de cachorros diarreicos y 77,8% de cachorros asintomáticos, los
animales estuvieron infectados con 1, 2, 3 y 4 patógenos (29,2%, 27,1%, 16,7% y 10,4%
respectivamente) entre estos se reportó Salmonella spp, Clostridium perfringens, Clostridium
difficile, Escherichia coli 𝛽-hemolítica, Campylobacter spp., Coronavirus canino, Parvovirus
canino, Giardia spp., Cyniclomyces guttulatus, Cystoisospora spp., y Toxocara spp.
(Duijvestijn et al., 2016). En la investigación “Enteropathogens identified in dogs entering a
Florida animal shelter with normal feces or diarrhea” evalúan la materia fecal de 100 perros, 50
con heces diarreicas y 50 con heces normales e idetifican 13 patógenos entre estos Salmonella
spp. 2% y 6%, Clostridium perfringens 64% y 40%, Anquilostomas 58% y 48%, Giardia spp.
62
22% y 16%, Coronavirus entérico canino 2 y 18%, Clostridium spp. 12% y 2%, Cystoisosporas
spp. 2% y 4%, Virus del moquillo canino 8% y 0%, Dipylidium caninum 2% y 2%, Parvovirus
canino 2% y 2% y Rotavirus 2% y 0%, en heces diarreicas y heces normales respectivamente
(Tupler et al., 2012).
En el caso de la paloma doméstica también hay estudios que indican la existencia de
coinfecciones como “Zoonotic agents in feral pigeons (Columba livia) from Costa Rica:
possible improvements to diminish contagion risks” que además de la prevalencia de
Salmonella entérica de 24,1% también indicaron la presencia de Chlamydophila psittaci 9,2%,
Escherichia coli enteropatógena 6,4% y Campylobacter jejuni 1,4% (Torres et al., 2017). Otra
investigación denominada “Occurrence of enteropathogenic bacteria in urban pigeons
(Columba livia) in Italy” analizaron las muestras de hisopos cloacales de 1 800 palomas urbanas
de la zona costera de Campania y empleando métodos de cultivo, PCR y serotipado indicaron
la prevalencia de Campylobacter jejuni 48% (870/1800), Escherichia coli O157 7,8%
(141/1800) y Salmonella typhimurium 0,9% (16/1800) (Gargiulo et al., 2014). Finalmente, en
el “Estudio microbiológico y parasitológico de agentes zoonóticos en palomas salvajes
aparentemente sanas” se reporta el aislamiento de Campylobacter jejuni 13% y Campylobacter
coli 4%, Toxoplasma gondii 8% y 33% de levaduras (Marenzoni et al., 2016).
En las investigaciones publicadas sobre las bacterias aisladas en perros y paloma doméstica
corresponden a las que reportan algún tipo de resistencia antimicrobiana por su importancia
epidemiológica, en este estudio no se reportan resistencias antimicrobianas; sin embargo, es
importante destacar su aislamiento en las especies analizadas. Para los perros se observan
diversos estudios como “Beta-lactamase antimicrobial resistance in Klebsiella and
Enterobacter species isolated from healthy and diarrheic dogs in Andhra Pradesh, India” donde
se reporta que en el 2017 se recolectaron 136 muestras rectales (92 perros saludables y 44 perros
diarreicos), se aisló 33 cepas de Klebsiella ssp. (66,6% en perros sanos y 66,6% en perros
diarreicos) y 29 cepas de Enterobacter spp. (25% en perros sanos y el 60% en perros diarreicos)
(Mohammad, Sreedevi, Chaitanya, & Sreenivasulu, 2017). Otra investigación denominada
“Virulence factors, antibiotic resistance genes and genetic relatedness of commensal
Escherichia coli isolates from dogs and their owners” se reportó que de 149 aislamientos de
E.coli obtenidos en marzo del 2018 en Shiraz-Irán, 41,61% correspondían a perros
(Derakhshandeh et al., 2018). En el estudio denominado “Prevalence and mechanisms of
extended-spectrum cephalosporin resistance in clinical and fecal Enterobacteriaceae isolates
from dogs in Ontario, Canada” se identificó una cepa de Proteus spp. con genes de resistencia
a la ESC de 506 muestras en enero 2018 (Zhang et al., 2018). Para la comparacón con Shigella
spp. solo se encontró un estudio reciente de agosto 2018 denominado “Bacterial diversity in the
feces of dogs with CPV infection” que de 6 cachorros se aisló la bacteria de todos los
participantes (Zheng et al., 2018) y finalmente no se encontraron estudios donde se demuestre
el aislamiento de Serratia marcences en heces caninas.
Por otro lado en estudios correspondientes a las paloma doméstica como “Fecal carriage of
extended-spectrum β-lactamases in healthy humans, poultry, and wild birds in León,
Nicaragua-a shared pool of blaCTX-M genes and possible interspecies clonal spread of
63
extended-spectrum β-lactamases-producing Escherichia coli” reporta que de 100 muestras
examinadas en el 2017 en Nicaragua se obtuvo una prevalencia del 8% de E.coli y 8% de
Klebsiella pneumoniae productoras de BLEE (Haesendonck et al., 2016) y no se encontró
ningún estudio reciente que reporte el aislamiento de Enterobacter spp. Shigella spp. y Proteus
spp. en esta especie animal.
64
Capítulo V
Conclusiones y Recomendaciones
5.1. Conclusiones
La prevalencia de Salmonella spp. determinada en este estudio fue del 3% en heces caninas
y del 5% en heces de paloma doméstica, donde el rango de prevalencia real calculado
mediante el programa bioinformático WinEpi Working in Epidemiology de la Universidad
de Zaragoza de la Facultad de Veterinaria (www.winepi.net) tomando en cuenta un tamaño
de población desconocido y el nivel de confianza del 95% fue hasta el 6% para los perros y
desde el 1% hasta el 9% en el caso de las palomas. Estos resultados se obtuvieron mediante
el análisis microbiológico establecido en el “Manual para la Vigilancia, Prevención y
Control Sanitario de Agentes Zoonóticos y Zoonosis relacionada a la Paloma Doméstica”
del Ministerio de Salud de Perú y el “Instructivo Técnico para la Detección de Salmonella
spp” según la norma ISO 6579:2002. En definitiva, estos porcentajes indican la existencia
del microorganismo en la materia fecal de ambos reservorios zoonóticos y representan un
problema de salud pública porque pueden eliminar la bacteria y distribuirla incluso siendo
reservorios asintomáticos. La paloma doméstica tiene una prevalencia mayor que los perros,
lo que es alarmante porque son animales que recorren grandes distancias por su capacidad
de volar.
El rango de porcentaje de aislamiento de Salmonella spp. es similar al obtenido en la
temporada seca del año ya que las condiciones climáticas son favorables para el crecimiento
y la supervivencia de las bacterias. Pero las diferencias significativas con otras prevalencias
se dan principalmente por el modo de muestreo, la cantidad de muestras, métodos de
aislamiento e identificación del microorganismo y el lugar de la toma de muestra. Además,
el cultivo microbiológico selectivo no tiene una sensibilidad alta para detectar la presencia
de Salmonella spp. y los agentes zoonóticos liberan el patógeno en sus heces a intervalos,
por ello en una única toma de muestra el reservorio puede o no presentar el microorganismo
y es necesario tomar muestras seriadas para disminuir la subestimación de la prevalencia y
los falsos negativos.
Existen diversos factores que complementan la triada epidemiológica para ocasionar
infecciones en los seres humanos y otros animales contribuyendo a la zoonosis y la
propagación no solo de Salmonella spp. sino también de otras bacterias zoonóticas. Todas
las muestras recolectadas se encontraron cercanas a alimentos o fuentes de agua, lo que
significa que existe una mayor probabilidad de contaminación de alimentos y agua por la
cercanía con la materia fecal.
Otro aspecto analizado en esta investigación fue el tipo de muestra, cuantificando 2,12% de
prevalencia de Salmonella en la materia fecal canina de tipo seco y 3,77% del tipo fresco;
en el caso de las heces de la paloma doméstica las muestras positivas secas fueron de 4,88%
y frescas de 5,08%. Aunque estos valores tienen una dispersión muy baja, se concluye que
la bacteria se encuentra presente en la misma proporción en ambos tipos de muestra y es
65
importante recalcar que en la materia fecal seca el microorganismo aún se encuentra
presente; por lo tanto, las muestras fecales son un foco de infección y propagación de
patógenos por un tiempo prolongado.
Los resultados de este estudio mostraron que el color tanto en las heces de perros como de
paloma doméstica no es un factor de riesgo que indique la presencia de Salmonella spp. Sin
embargo, en las muestras caninas donde más se aisló el microorganismo fue en las heces de
color marrón (6,25%) y en el caso de la paloma doméstica en las de color blanco (33,33%).
Por lo tanto, según los resultados obtenidos conocer el color de la materia fecal de los
reservorios zoonóticos no es de gran relevancia, ya que bibliográficamente no existe ninguna
relación entre el impacto fisiológico causado por una enteritis por Salmonella spp. y el
cambio de coloración de las heces en los animales.
Uno de los principales signos clínicos de la existencia de enteritis causada por Salmonella
spp. es la diarrea, por ello se designó como variable de estudio la consistencia de la materia
fecal y se obtuvieron resultados que indicaron el aislamiento de la bacteria en heces blandas
y firmes. En los perros la prevalencia del 4,83% fue únicamente en muestras firmes y en la
paloma doméstica se aisló el patógeno en un 4,41% en heces firmes y un 7,69% en heces
blandas. Pero estadísticamente se concluye que los valores no son significativos y no se
establece a la consistencia como un factor de riesgo. Sin embargo, se recalca que existen
reservorios asintomáticos donde la consistencia de las heces es normal, en el caso de los
perros el agente zoonótico se almacena en los ganglios linfáticos y en las palomas se aloja
en su aparato reproductor, concluyendo que no todos los animales desarrollan sintomatología
clínica a pesar de que el microorganismo pertenezca a serotipos que ocasionen enteritis en
el ser humano.
El proceso de diarrea causado por la enteritis de cualquier microorganismo indica un elevado
avance del daño ocasionado en el sistema digestivo, esto no permite la absorción adecuada
de los alimentos y por ello se observa la presencia de restos alimenticios y otros componentes
en la muestra fecal que le proporciona un aspecto heterogéneo. Uno de los objetivos de esta
investigación fue establecer si el aspecto de la materia fecal es un factor de riesgo que indique
la presencia de Salmonella spp. En las muestras de paloma doméstica solo se aisló
Salmonella spp. en heces homogéneas y en muestras heterogéneas caninas se reportó el
aislamiento en un 10%. En conclusión, el aspecto no es un factor de riesgo y hasta la
actualidad no existe información bibliográfica que indique la relación de esta variable con
el desarrollo de salmonelosis.
El estudio dividió al Parque “La Carolina” en siete zonas recreativas, donde la más alta
prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas se encontró en la “Pista Atlética” (7,69%)
y en las heces de paloma doméstica la “Pista de Ciclismo” (11,11%). Sin embargo, el agente
zoonótico se aisló en todos los lugares muestreados en bajas prevalencias, por lo que se
concluye que existe una distribución de Salmonella spp. por todo el parque y los reservorios
zoonóticos son un foco de infección para todos los visitantes, sobre todo causando un mayor
daño en la salud de niños, ancianos, embarazadas y personas inmunodeprimidas.
66
La morfología y color de las colonias que crecieron en el agar selectivo - diferencial y las
pruebas bioquímicas realizadas para la identificación de las bacterias, coincidieron con otras
especies distintas a Salmonella spp. obteniendo las siguientes prevalencias en heces caninas:
43% Enterobacter aerogenes, 35% Escherichia coli, 12% Proteus spp., 6% Klebsiella
pneumoniae, 5% Shigella spp. y 1% Serratia marcences. En heces de paloma doméstica las
prevalencias fueron: 48% Enterobacter aerogenes, 40% Escherichia coli, 4% Klebsiella
pneumoniae, 5% Shigella spp. y 1% Proteus spp. En consecuencia, se puede afirmar el
aislamiento de varios agentes zoonóticos y no zoonóticos en la materia fecal de estos dos
reservorios, considerándose como focos de infección y causantes de posibles brotes
epidemiológicos de distintos tipos de enfermedades en los seres humanos.
5.2. Recomendaciones
Las cepas de Salmonella spp. fueron crioconservadas en glicerol a -80°C, por lo que se
recomienda que un estudio posterior desarrolle un análisis de su resistencia antimicrobiana
y biología molecular para determinar los serovares a los que pertenecen cada una de las
cepas, con el fin de comparar los resultados obtenidos con las especies que se identificaron
en el estudio donde se aisló Salmonella spp. en alimentos en el mismo sitio de muestreo.
Este análisis se desarrolló en los meses de julio, agosto y septiembre del 2018 pertenecientes
a la temporada seca de Ecuador, pero se sugiere establecer una prevalencia en la temporada
lluviosas para hacer una comparación estadística que indique el mayor aislamiento del
agente infeccioso según el clima del sector, ya que en otros estudios hay aislamiento en
épocas lluviosas aunque las condiciones ambientales no son las óptimas para el crecimiento
de la bacteria.
Se sugiere realizar estudios sobre la recurrencia de salmonelosis en los reservorios
zoonóticos mediante el análisis de muestras fecales para conocer el tiempo de duración de
la infección, la posible existencia de complicaciones y el análisis de coinfecciones; es decir,
la existencia de algún agente ya sea virus, hongo, parásito u otra bacteria que incremente la
probabilidad para que el animal desarrolle infección por Salmonella spp.
En cuanto a los perros como reservorios zoonóticos, se recomienda realizar una comparación
estadística entre la materia fecal de perros domésticos (mascotas) y perros callejeros, para
conocer el nivel de transmisión de enfermedades infecciosas a los seres humanos
determinado por la cercanía con el animal. Sería de gran importancia que un estudio posterior
logre controlar varias variables como: el tipo de alimentación, lugar donde viven y las
actividades que realizan los animales con el fin de establecer normas de saneamiento y de
convivencia adecuada.
Podrían realizarse estudios que identifiquen factores de riesgo que influyan en la incidencia
de Salmonella spp. en los dos reservorios zoonóticos como: edad, sexo, raza, aspectos
relevantes de la presentación clínica e historial de alimentación.
67
Para aumentar la exactitud de los resultados reportados se recomienda realizar análisis
seriados de la materia fecal de cada reservorio, ya que Salmonella spp. es una bacteria
zoonótica que al producir una infección en el organismo se excreta en poca cantidad los
primeros días y por ello es recomendable un coprocultivo seriado para su detección.
Es necesaria la implementación de medidas de saneamiento para evitar que la zoonosis
provocada por los reservorios se mantenga o aumente. Se debería incluir un control adecuado
y monitoreo cuidadoso de los agentes zoonóticos, principalmente si el foco de infección se
da en áreas como parques, hospitales y escuelas donde la mayoría de población se encuentra
altamente expuesta a desarrollar varias infecciones.
La vigilancia de patógenos zoonóticos no se encuentra incluida en los planes regionales de
Ecuador o de la provincia de Pichincha, por lo que es importante tomar medidas de higiene
para disminuir el riesgo de transmisión de microorganismos de animales a humanos. Por ello
el municipio de la ciudad de Quito podría organizar campañas de educación y medidas que
mejoren la bioseguridad.
Los reservorios zoonóticos con mayor importancia son los perros y la paloma doméstica
debido a su alta superpoblación y malas condiciones en su calidad de vida. Se recomienda
que se establezcan medidas de control adoptadas de países desarrollados como la
esterilización química mediante alimentos (maíz para palomas y croquetas para perros) y
evitar la acumulación de basura principalmente, en lugares recreativos y bastante
concurridos por la población para impedir la infestación de reservorios zoonóticos; también,
es necesario reformar algunos artículos del ámbito legal para incrementar multas a la
población que no controle la sanidad de sus mascotas y no limpie y recoja sus excrementos.
Estas y otras medidas de prevención de enfermedades zoonóticas deberían ser analizadas
por organizaciones como el Ministerio de Salud Pública y el Distrito Metropolitano de Quito
para evaluar la eficacia de su aplicación, como se realizó en España y Chile conjuntamente
con organizaciones como la Asociación Andaluza para la Defensa de los Animales y la
Organización Mundial de Sanidad Animal (Gilpérez, 2017; Organizacion Mundial de
Sanidad Animal (OIE), 2017; Valencia, 2012).
Las mascotas que conviven con seres humanos no deberían ser alimentados con comida
cruda o poco cocida, porque existe mayor probabilidad de contaminación con algún
patógeno. Además, debe existir un correcto aseo de los juguetes y un adecuado lavado de
manos después de cualquier contacto directo con los animales y más cuando sea con sus
desechos biológicos incluyendo sus fluidos.
Las personas que venden alimentos en el parque “La Carolina” deberían priorizar el correcto
lavado de manos, aseo de su puesto de trabajo y saneamiento de los productos que ponen a
disposición de la clientela; así también, deberían considerar cubrir con algún material
adecuado los alimentos evitando su exposición directa con el ambiente, además las mesas y
68
áreas destinadas a la alimentación. Por último, deberían asegurarse de que no existan
excrementos de los animales cerca de sus productos de venta.
69
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76
ANEXOS
A. Conceptualización de variables
Realizado por Cangui S. & Delgado K
77
B. Número de atenciones con diagnósticos de fiebre tifoidea, paratifoidea y otras
infecciones debidas a Salmonela spp. en el Distrito Metropolitano de Quito (Dirección
Nacional de Estadística y Análisis de Información de Salud, 2019)
NÚMERO DE DIAGNÓSTICOS
DESCRIPCIÓN 2013 2014 2015 2016 2017 2018
Fiebre tifoidea 81 67 40 50 34 32
Fiebre paratifoidea A 7 5 4 1 0 4
Fiebre paratifoidea B 2 2 0 1 0 1
Fiebre paratifoidea C 0 1 0 0 0 1
Fiebre paratifoidea no especificada 42 15 8 11 7 6
Enteritis debida a Salmonella 42 23 20 7 11 32
Septicemia debida a Salmonella 1 2 2 0 5 1
Infecciones localizadas debidas a Salmonella 4 3 5 3 2 3
Otras infecciones especificadas como debidas
a Salmonella 12 9 3 3 1 2
Infección debida a Salmonella no
especificada 40 26 5 9 9 7
TOTAL 231 153 87 85 69 89
78
C. Características generales y enfermedades causadas por enterobacterias zoonóticas (Ryan & Ray, 2014)
Esp
ecie
Factores de Virulencia
Superficie
An
tíg
eno
s
Dia
gn
óst
ico
s
Pil
osi
da
des
Ad
hes
ina
o
Cá
psu
la
Ex
oto
xin
a
Les
ion
es
pa
tóg
ena
s
Pro
teín
as
secre
tad
as
Gen
étic
a
Tra
nsm
isió
n
En
ferm
eda
d
Escherichia Coli: O, H, K
Común >150 tipos Tipo 1b Polisacárido
K, I Hemolisina α Inflamación - - Flora adyacente Oportunista
Uropática (UPEC) - Tipo 1b, P
(Gal-Gal) - Hemolisina α Inflamación - -
Flora fecal,
ascendente Vías urinarias
Enterotoxigénica
(ETEC) - CF - LT, ST Hipersecreción -
Plásmidos (CF,
LT, ST) Fecal-oral
Diarrea acuosa
(viajeros)
Enteropatógena
(EPEC) - Bfp Intimina - A/E, intestino delgado Esps PAI Fecal-oral Diarrea acuosa
Enteroinvasora
(EIEC) - - Ipas -
Invasión, inflamación,
úlceras Ipas
Plásmidos
granes, PAI Fecal-oral Disentería
Enterohemorrágica
(EHEC) O157:H7 Lpf, Sfp Intimina Stx A/E, colon, hemorragia Esps PAI
Fecal-oral directa,
dosis bajas
D. sanguinolenta,
HUS
Enteroagregativa
(EAEC) - AAF - - Biopelícula adherente - - - Diarrea acuosa
Shigella: Serogrupos O
S. dysenteriae A (10
tipos) - Ipas
Stx (AI
potente)
Invasión, inflamación,
úlceras colónicas Ipas
Plásmidos
grandes, PAI
Fecal-oral, directa,
dosis bajas
Disentería (grave),
HUS
S. flexnei B (seis
tipos) - Ipas Stx (variable)
Invasión, inflamación,
úlceras colónicas Ipas
Plásmidos
grandes, PAI
Fecal-oral, directa,
dosis bajas Disentería, HUS
S. boydii C (15
tipos) - Ipas Stx (variable)
Invasión, inflamación,
úlceras colónicas Ipas
Plásmidos
grandes, PAI
Fecal-oral, directa,
dosis bajas Disentería, HUS
79
Características generales y enfermedades causadas por enterobacterias zoonóticas (Ryan & Ray, 2014) (continuación)
S. sonnei D - Ipas Stx (variable) Invasión, inflamación,
úlceras colónicas Ipas
Plásmidos
grandes, PAI
Fecal-oral, directa,
dosis bajas Disentería, HUS
Salmonella entérica: O, H1, H2, K
Serotipos >2000 sero-
variedades Tipo 1b - -
Fruncimiento de la
membrana, invasión,
inflamación
Inv, Spa,
otros PAI
Fecal-oral,
animales y
humanos
Gastroenteritis y
septisemia
Typhy O grupo D Tipo 1b
Polisacárido
Vi
-
Supervivencia en
macrófagos,
crecimiento en el SRE
Como en
serotiposc PAI
Fecal-oral, dosis
modearada, sólo
humanos
Fiebre tifoidea
Yersinia: O, H
Y. pestis - - Invasina Proteasa
fibrinolisina
Creciemiento en SER,
bacteriemia, neumonía Yops PAI
Ratas, aerosoles,
humanos Peste
Y.
pseudotuberculosis 10 tipos - Invasina -
Creciemiento en SER,
bacteriemia, neumonía Yops PAI Fecal-oral, animal
Adenitis
mesentérica
Y. enterocolítica >50 tipos - Invasina - Creciemiento en SER,
bacteriemia, neumonía Yops PAI Fecal-oral, animal
Adenitis
mesentérica, fiebre
tifoidea
Klebsiella 70 tipos
capsulares Pilosidades Polisacárido - - - - Flora adyacente
Oportunista,
neumonía
Enterobacter - - - - - - - Flora adyacente Oportunista
Serratia - - - - - - - Flora adyacente Oportunista
Citrobacter - - - - - - - Flora adyacente Oportunista
Proteus - - - - - - - Flora adyacente Oportunista
A/E, lesiones por fijación y desprendimiento; Bfp, pilosidades formadoras de haces; CF, antígenos de factor de colonización; Esps,
proteínas secretadas por E. coli; HUS, síndrome hemolítico-urémico; Ipas, antígenos de proteínas de invasión; LT, toxina lábil; PAI,
isla de patogenicidad; SRE, sistema reticuloendotelial; ST, toxina estable; Yops, proteínas de membrana externa de Yersinia. b Unido a manosa c No existen modelos en animales, se supone que similar a los serotipos de S. entérica
80
D. Instrumento de recolección de datos
Universidad Central del Ecuador
Facultad de Ciencias Químicas
Bioquímica Clínica
Guía de observación - Instrumento de recolección de datos
Prevalencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma doméstica en el
Parque “La Carolina”
Objetivo: Determinar la presencia de Salmonella spp. en heces caninas y de paloma
doméstica muestreadas en el Parque la Carolina del Distrito Metropolitano de
Quito en el período Julio-Septiembre 2018.
Investigadoras: Sandra Pamela Cangui Panchi y Karol Mishel Delgado Juca
Hora de recolección: Fecha recolección:
Código muestra: Muestra cerca alimentos: SI ( ) NO ( )
SITIO DE RECOLECCIÓN
Laguna del Quinde Pista atlética Parque canino
Pista bicicletas Canchas Ubicación GPS:
Juegos infantiles Jardín botánico
ANÁLISIS MACROSCÓPICO
COLOR CONSISTENCIA
Verde Marrón Firme Blanda
Amarillo Otro: ……………. Líquida
ASPECTO TIPO
Homogéneo Heterogéneo Seca Fresca
Medio de pre-enriquecimiento: AGUA PEPTONADA TAMPONADA
Tiempo incubación: Temperatura:
Color antes incubación: Color después incubación:
Medio de enriquecimiento selectivo: RAPPAPORT VASSILIADIS BROTH
Tiempo incubación: Temperatura:
Color antes incubación: Color después incubación:
Medio de aislamiento selectivo y diferencial: XLD AGAR
Fecha siembra: Fecha análisis:
Código colonia: Temperatura:
COLOR FORMA
Transparente Roja Puntiforme Irregular
Amarilla Negra Circular Rizoide
Otro: ……………………………………… Filamentosa Fusiforme
SUPERFICIE BORDE
Plana Acuminada Redondeada Espiculada
Planoconvexa Umbilicada Ondulada Filamentosa
Convexa Papilada Lobulada Rizoide
Observaciones adicionales: ………………………………………………………………
Código colonia: Temperatura promedio:
COLOR FORMA
Transparente Roja Puntiforme Irregular
81
Amarilla Negra Circular Rizoide
Otro: ……………………………………… Filamentosa Fusiforme
SUPERFICIE BORDE
Plana Acuminada Redondeada Espiculada
Planoconvexa Umbilicada Ondulada Filamentosa
Convexa Papilada Lobulada Rizoide
Observaciones adicionales: ………………………………………………………………
OTROS MEDIOS DE CULTIVO
Nombre del medio: Temperatura promedio:
Fecha siembra: Fecha análisis:
Código colonia 1: Código colonia 2:
Descripción colonia 1: …………………………………………………………………...
……………………………………………………………………………………………..
Descripción colonia 2: …………………………………………………………………...
…………………………………………………………………………………………….
ANÁLISIS PRUEBAS BIOQUÍMICAS
Fecha siembra: Fecha análisis:
Código colonia: Temperatura promedio:
TSI LIA
Pico de
flauta
H2S
Pico de
flauta
H2S
Fondo Gas Fondo Gas
SIMMONS CITRATO UREA
Positivo Negativo Positivo Negativo
FENILALANINA DESAMINASA MIO
Positivo Negativo M I O
Código colonia: Temperatura promedio:
TSI LIA
Pico de
flauta
H2S
Pico de
flauta
H2S
Fondo Gas Fondo Gas
SIMMONS CITRATO UREA
Positivo Negativo Positivo Negativo
FENILALANINA DESAMINASA MIO
Positivo Negativo M I O
OTRAS PRUEBAS REALIZADAS
Nombre prueba: Fecha realizada:
Observaciones: ……………………………………………………………………………
RESULTADOS
……………………………………………………………………………………………
82
E. Matriz de validación del instrumento de investigación
83
84
85
F. Fotografías de la investigación
Fotografía 1. Abundante paloma doméstica en el Parque “La Carolina”
Fotografía 2. Presencia de perros callejeros en el Parque “La Carolina”
86
Fotografía 3. Superficies transitadas por visitantes del Parque “La Carolina” contaminadas
con materia fecal de perros
Fotografía 4. Superficies cercanas a alimentos contaminadas con materia fecal de paloma
doméstica
87
Fotografía 5. Exceso de ventas ambulantes en el parque
Fotografía 6. Muestras de heces de paloma doméstica y perros recolectadas en recipientes
estériles
88
Fotografía 7. Muestras en el medio de pre-enriquecimiento: Agua Peptonada Tamponada
Fotografía 8. Muestras en el medio de enriquecimiento: Rappaport Vassiliadis Borth
89
Fotografía 9. Asilamiento de Salmonella spp. en Agar Xilosa Lisina Desoxicolato (XLDA)
Fotografía 10. Aislamiento de Salmonella spp. en Tripticasa Soya Agar (TSA)
90
Fotografía 11. Pruebas bioquímicas de una muestra positiva para Salmonella spp. (desde la
izquierda MIO, Simons Citrato, Urea, Fenilalanina Desaminasa, LIA y TSI)
Fotografía 12. Pruebas bioquímicas de cepas ATCC Escherichia coli (desde la izquierda
MIO, Urea, Fenilalanina Desaminasa, Simons Citrato, LIA y TSI)
91
Fotografía 13. Pruebas bioquímicas de cepas ATCC Proteus spp. (desde la izquierda MIO,
Urea, Fenilalanina Desaminasa, Simons Citrato, LIA y TSI)
Fotografía 14. Cámara de flujo laminar utilizada para preparar las cepas Salmonella spp.
antes de la crioconservación
92
Fotografía 15. Cepas de Salmonella spp. crioconservadas para futuras investigaciones
