Expocion sobre el Manitol

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    Determinacin demalatin residual enalimentos de origenvegetal

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    Objetivo:Determinar la concentracin de malatin residual en la

    superficie de frutas y vegetales con un mtodo colorimtrico,para que el alumno relacione la cantidad encontrada con elriesgo toxicolgico mediante el LOAEL para este insecticida yel consumo de dichos alimentos a largo plazo.

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    Cuestionario

    1.- Seala la diferencia entre plaguicida e insecticida.

    Se define como plaguicida a toda sustancia qumica inorgnicau orgnica que se emplea para combatir animales o plantas

    perjudiciales para el hombre, animales domsticos o plantastiles. Mientras que los insecticidas tienen mayor especificidadpara eliminar insectos.

    2.- Qu tipo de insecticida es el malatin y qu ventajaspresenta su uso con respecto a los insecticidas organoclorados?

    El malatin es un tipo de insecticida organofosforado de mayorefectividad y menor persistencia frente a los organoclorados.Presenta una permanencia dbil en el medio y son degradadosrpidamente por el organismo. NO bioacumulable.

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    3.- Cules son las enzimas utilizadas en mamferos e insectos para labiotransformacin del malation? Qu productos genera cada una?

    Las enzimas tanto en los mamferos como en los propios insectos son:carboxiesterasas, oxidasas y fosfatasas. El malatin es detoxificado en

    mamferos por hidrlisis a cargo de carboxilesterasas hasta el monocidode malatin que no es txico, pero que es muy efectivo en insectos. Losmamferos lo hidrolizan, con lo cual no es fcil que niveles txicos deorganofosforados lleguen al sistema nervioso. La toxicidad selectiva delmalatin para aves e insectos, radica en que las esterasas no son tanabundantes en estas especies. No obstante, en ciertas cepas de insectosque son resistentes al malatin, el mecanismo se asocia con un alto nivelde arilesterasa, con la que pueden desintoxicarse por hidrlisis

    del insectida.4.- Cul es el mecanismo de accin del malatin?

    Los organofosforados entran al organismo por va cutnea, respiratoria ydigestiva. Los compuestos organofosforados actan por inhibicin de laacetilcolinesterasa, que lleva acabo la hidrolisis de acetilcolina en colina ycido actico. Los compuestos organofosforados impiden esta hidrolisis por

    lo que la acetilcolina se acumula causando efectos en el sistema nerviososcentral.

    6.- Indica el valor del lmite mximo residual (LMR) de malatin para frutasctricas y vegetales de acuerdo a la legislacin vigente.

    LMR frutas citricas: 7mg/Kg y vegetales: 1mg/Kg

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    Reaccin

    PH3CO

    H3COS

    S

    CH

    CH2

    C

    O

    O C2H5

    C

    O

    O C2H5

    PH3CO

    H3COS

    O

    CH

    CH2

    C

    O

    O C2H5

    C

    O

    O C2H5

    PH3CO

    H3COS

    O

    CH

    CH2

    C

    O

    OH

    C

    O

    O C2H5

    PH3CO

    H3COOH

    O

    PH3CO

    H3COSH

    S

    PH3CO

    H3COOH

    S

    PH3CO

    H3COS

    S

    CH

    CH2

    C

    O

    O C2H5

    C

    O

    OH

    PH3CO

    H3COS

    S

    CH

    CH2

    C

    O

    OH

    C

    O

    OH

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    ProcedimientoPesar 250 g

    de muestra

    Colocarmuestra en

    un frascode vidrio

    Aadir 60mL de

    diclorometano

    Tapar yagitar

    vigorosamente por 5minutos.

    Filtrar el

    extracto

    Medir el

    volumendel filtrado

    Tomar dosalcuotas

    de 10.0 mLcon pipetavolumtrica

    Colocarcada

    alcuota enun embudo

    deseparacin.

    Adicionar5.0 mL de

    etanol y 0.2mL de

    disulfuro decarbono

    0.5%(disolucin

    II).

    Agitarsuavement

    e los

    embudos.

    Adicionar15 mL dedisolucincida desulfato de

    sodio(disolucinIV).

    Agitarsuavement

    e por 1

    minuto.

    Recolectarla fase

    orgnicaen un vaso

    de

    precipitado.

    Transferircada faseorgnica

    en el mismoembudo de

    separacindel cualproviene.

    Aadir 5 mLde etanol,

    agitar yaadir 0.2 mLde NaOH 6 N

    (disolucinV).

    Agitandonuevament

    e por 5minutos,

    dejar

    reposar 1minuto.

    Adicionar15 mL de ladisolucinde sulfatode sodio

    (disolucinIII).

    Agitar ydescartar la

    faseorgnica.

    A la faseacuosa

    aadir 5 mLde

    diclorometano y unagota de

    indicadorde

    fenolftalena al 1%.

    Ajustar elpH a 5

    agregandogota a gota

    HCl 6 N

    (disolucinVI).

    Agitar elembudo y

    comprobarcon el vire

    delindicador.

    Aadir 0.2mL de la

    disolucinde cloruro

    frrico(disolucinVII), agitar ydesechar la

    faseorgnica.

    Al blancode

    muestra,aadir 5mL de

    diclorometano

    y 0.3 mL deagua

    destilada.

    A la otrafase acuosaaadir 5 mL

    dediclorometano y 0.3 mL

    dedisolucinde sulfato

    cprico(disolucin

    VIII).

    Agitarsuavement

    e losembudos

    por 1minuto y

    colectar las

    fasesorgnicas;

    Ajustar acero el

    espectrofotmetro condiclorometa

    no.

    Leer elporcentaje

    detransmitanc

    ia de

    lasmuestras a

    420 nm.

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    Resultados

    Punto de la curva % TransmitanciaBLANCO 100

    1 81.852 65.953 53.7

    Tubo Volumen dedisolucin

    patrn (mL)

    Concentracin de malatin Transmitancia en (%)( =420 nm) Absorbancia(=420nm)(-log T)

    0 0 0.00 100 0.001 1.0 0.008 81.85 0.0902 2.5 0.02 65.95 0.1813 5.0 0.04 53.7 0.270

    y = 6.5452x + 0.024R = 0.9583

    0

    0.05

    0.1

    0.15

    0.2

    0.25

    0.3

    0.35

    0 0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 0.04 0.045

    A

    bsorbancia

    (=420nm)

    Concentracin mg/mL

    Curva patrn malatin

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    ClculosPara la absorbancia empleamos:

    Absorbancia = 2 - log (% transmitancia), sta se da porque las

    unidades de absorbancia son de 0 a 2.La absorbancia se relaciona con la transmitancia de lasiguiente forma:

    Absorbancia = log (1/T)

    Absorbancia = - log (% transmitancia/100)

    Absorbancia = 2 - log (% transmitancia)

    Ejemplo de clculo para calcular la absorbancia:

    Abs = 2 - log (81.15) = 0.0907

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    Para calcular la concentracin de malatin (mg/mL):

    50

    100 1

    0.1 1

    100 2

    8 2

    100

    1000

    1

    =.

    Ejemplo para calcular concentracin:

    0.04

    2.5 5.0

    = .

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    Equipo /muestra Peso muestra (g) Volumenextracto (mL) % Transmitancia Absorbancia

    Equipo 1 Blanco 97.370.0116

    Chile poblano 106.1 50 Muestra 92.730.0328

    Equipo 2 Blanco 90.53 0.0432Naranja 350.0 25 Muestra 89.75

    0.0470Equipo 3 Blanco 95.06

    0.0220Toronja 315.7 22 Muestra 90.23

    0.0446Equipo 4 Blanco 96.29

    0.0164Mango 296.5 28 Muestra 73.19

    0.1355Equipo 5 Blanco 90.53 0.0432Tomate 209 94 Muestra 93.92

    0.0272Equipo 6 Blanco 94.45

    0.0248Limn 305 23 Muestra 89.84

    0.0465Equipo 7 Blanco 94.20

    0.0259Ejotes 250 29 Muestra 94.94

    0.0226Equipo 8 Blanco 97.88 0.0093Chilacas 286.8 46 Muestra 89.12

    0.0500Equipo 9 Blanco 94.23

    0.0258Elote 362.6 32 Muestra 96.23

    0.0167Equipo 10 Blanco 87.06

    0.0602Cilantro 86.6 39 Muestra 83.09

    0.0805

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    Con la ecuacin obtenida de la curva patrn

    X= (y-0.024 / 6.5452)

    Para calcular el valor de Y, al valorde absorbancia de la muestra se resta el

    valor del blanco de muestra, el resultado de Y ser mg de malatin/mL.Con ste valor se realiza un anlisis para conocer los mg de malatin /Kgtomando en cuenta las diluciones realizadas.

    =. .39

    .= 0.0025 mg de malatin / mL

    0.0025

    5.0

    10

    46

    286.8

    1000

    1

    = .

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    Muestra Pesomuestra (g) Volumenextracto

    (mL)Absmuestra -Absblanco

    Concentracin demalatin

    (mg malatin/mL)PPM(mg

    malatin/kg)

    Chile poblano 106.1 50 0.0212 -- 0Naranja 350.0 25 0.0038 -- 0

    Toronja 315.7 22 0.0226 -- 0

    Mango 296.5

    28

    0.1191

    0.01454

    1.166

    Tomate 209 94 - 0.0160 .. 0

    Limn 305 23 0.0217 .. 0

    Ejotes 250

    29

    -0.0034

    ..

    0

    Chilacas 286.8 46 0.0407 0.0025 0.200Elote 362.6 32 -0.0091 -- 0

    Cilantro 86.6 39 0.0203 -- 0

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    -0.6

    -0.4

    -0.2

    0

    0.2

    0.4

    0.6

    0.8

    1

    1.2

    1.4

    1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

    c

    o

    n

    c

    e

    n

    t

    r

    a

    c

    i

    n

    (

    p

    p

    m)

    alimentos

    Malatin en alimentos

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    Problema

    Determinar el contenido de malatin residual en la muestra vegetal. Calcular la cantidadnecesaria de vegetal que deber consumir un adulto (60kg peso corporal) para presentarefectos adversos. Para ello hay que considerara que el LOAEL en ratas macho paramalatin es de 100mg/kg corporal por da.

    =

    =

    .

    60 (0.1 )

    1 = 6

    6 mg de malatin en humanos de 60 kg para presentar efectos adversos a la salud.

    Como en 1kg de chilaca de nuestra muestra encontraremos 0.2004 mg de malatin, por lotanto se debe consumir 20.04 kg de chilaca de nuestra muestra analizada para que unhumano de 60 kg pueda presentar daos adversos

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    Anlisis y conclusiones

    De forma experimental obtuvimos resultados de Transmitancia,los cuales nos sirven para poder obtener la Absorbancia:

    Absorbancia= 2-log(% transmitancia).

    Para nuestra muestra, la cantidad de malatin es 0.2004 ppmlo cual nos indica que est dentro de la norma establecida,pues la cantidad mxima de residuos de malatin permitidapor la FDA y la EPA en cosechas de alimentos es 8 ppm.

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    Analizando los valores grupales se pueden observar valoresnegativos de concentracin (mg malatin/mL), la resta resulta

    negativa porque los valores de absorbancia medidos sonmenores a los de la ordenada al origen obtenida en la curvapatrn.

    Por lo tanto, los resultados para reportar PPM tambin resultannegativos, esto se puede deber a un procedimiento mal

    realizado , o bien porque el alimento analizado no contieneresiduos de malatin pues no fue utilizado durante su cosecha.

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    Bibliografa

    Valle Vega, P. TOXICOLOGIA DE ALIMENTOS.Departamentos de alimentos y biotecnologa. Facultad de

    qumica. Universidad nacional Autnoma de Mxico.Paginas 18-28

    http://www.redsalud.gov.cl/archivos/alimentosynutricion/inocuidad/resol20581residuosplaguicidas.pdf. consultarealizada el 26 de febrero de 2013 a las 10:00 horas.

    AOAC. 2005. Official Methods of Analysis. Guidelines forCollaborative study. Procedures to Validate Characteristicsof a Method of Analysis. Appendix D. United States, p: 112