Estudio planta de harina de pescado

7/21/2019 Estudio planta de harina de pescado

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FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

DIVISION DE ESTUDIOS DE FO ST GRADO

PARA OBTENER EL GRADO DE

M A E S T R O m C I E N C I A S B IO L O G IC A

MARZO DE 1994.



1020091366



U N I V E R S I D D U T O N O M D E N U E V O L E O N

C A I - ; I T ú n rv p r - r P K i P ' A C R I H I n n i r A c

F A C U L T A D D E C I E N C IA S B I O L O G I C A S

D I V IS IO N D E E S T U D I O S D E P O S T G R A D O

ESTUDIO

D E A L G U N O S

PARAMETROS DE

C A L I D A D

DE

HARINAS DE PESCADO

U T I L I Z A D A S

EN L A NUT RI C I O N DEL

C A M A R O N B L A N C O

Penaeus vannamei .

iél Maf ia ¡ abel Ábdó De la Parra

PARA OFTEN'EF EL GRADO DE

MAESTRO EN CIENCIA S B IOLOGICAS

CON ESPECIALIDAD EN ECOLOGIA

ACUATICA Y

PESCA.

T

QUE PRESENTA:

M A R I C D i : 1 9 9 4 .



UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

DIVISION DE ESTUDIOS DE POSTGRADO

ESTUDIO DE AL GUNOS PA RAMETROS DE CA LIDAD

DE HARINAS DE PESCADO UTILIZADAS EN

LA NUTRICION DEL CAMARON BLANCO

Penaeus vannamei .

TESIS

QUE PRESENTA

BIOL . MARIA ISABEL ABDO DE LA PARRA

PARA OBTENER EL GRADO DE MAESTRO EN CIENCIAS

BIOLOGICAS CON ESPECIALIDAD EN ECOLOGIA

ACUATICA Y PESCA.

COMISION DE TESIS

VOCAL:

SECRETARIO:

PRESIDENTE:



m

r c p ,

FONDO TESiS

3 3 0 t



U N I V E R S I D A D A U T O N O M A D E N U E V O L E O N

F A C U L T A D D E C I E N C I A S B I O L O G I C A S

D I V I S I O N D E E S T U D I O S D E P O S T G R A D O

ESTUDIO DE ALG UNO S PARAMETROS DE C ALI DAD

DE HARINAS DE PESCADO UTILIZADAS EN

LA NUTRI CI ON DEL CAMARON BLANCO

Penaeus v anname i .

TESIS

QUE PRESENTA

BIOL. MARIA ISABEL ABDO DE LA PARRA.

PARA OBTENER EL GRADO DE MAESTRO EN CI ENCI AS

BI OLOGI CAS CON ESPECI AL I DAD EN ECOLOGI A

ACUATI CA Y / PESCA.

DIRECTOR:

CO-DIRECTOR:

DRA. L ELIZABETH CJUZ SUAREZ.

ASESOR EXTERNO:

DR. IAN H • PIKE.

ASESOR EXTERNO:

M. en C. EMILIO CASTRO CAMPOS.

ASESOR EXTERNO:

DRA. CRISTINA CHAVEZ SANCHEZ.

MONTERREY, N .L MARZO DE 1994.



A DIOS: Por e l don de la v ida y por todas las Bend lcones que he rec ib ido

durante toda mi v ida.

A MIS PADRES: ANTONIO ABDO E ISABEL DE LA PARRA, por ser mi mejor

e jemp lo de superac ión . Por su amor, por impu lsarme s iempre hac ia

adelante, por la l ibertad que me d ieron de e leg i r y recorrer mi propio

camino . Por apoyarme s iempre . Porque aunque f ís icamente le jos

estamos, s iemp re los s ien to jun to a mí . Son los m e jo res p adres que

un h i jo pu ede desear .

A M IS HERMANOS: A NTONIO Y SELINA, porque adem ás de ser mis q uer idos

hermanos, son mis amigos. Grac ias por todo e l apoyo que me han

br indado, por es ta r conmigo s iempre , por los momentos que

compar t imos. Recuerden que s iempre cuen tan conmigo .



AGRADECIMIENTOS.

Son m uchas las person as a las cua les tengo que agrad ecer , ya que d e

una u o t ra fo rm a co laboraron en la rea l izac ión d e este t raba jo , pero qu ie ro

agrad ecer d e m anera muy esp ecia l a la Dra. ELIZAB ETH CRUZ SUAREZ y a l

Dr . DENIS RICQUE, porque g rac ias a su ayuda y es fuerzo co nstan te se logró

la real izac ión d e l p resen te t raba jo . Les agradezco tamb ién , todo e l t iemp o

qu e me ded icaro n , su apoyo m ora l y económico , su in te rés, que no só lo fu e

en e l aspecto p ro fes iona l , s ino tamb ién en e l persona l . Grac ias por su

con f ianza y su am is tad . Sobre todo , g rac ias por ser una par te tan impor tan te

en mi fo rmación p ro fes iona l y por su ejemp lo d e lucha con stan te.

A la Dra . GUADALUPE ALANIS GUZMAN, muchas g rac ias por su apoyo y

or ientación durante la rea l ización del presente t rabajo.

A l Dr . IAN H. PIKE mi más p ro fundo y s incero agradec imien to por haber

acep tado co laborar con nos o t ros ; por

su

co nf ianza, por su inva luable ayuda,

por su senc i l lez y por p roporc ionar las har inas u t i l i zadas en e l p r imer

objet ivo.

A l M. en C. EM IUO CASTRO CAMPOS, mi más s incero agradec im ien to por

tod o su ap oy o, in terés y co laboración, du rante la rea l ización de m i tesis.

Muchas g rac ias por su ayuda para consegu i r apoyo económico .

A la Dra. CRISTINA CHAVEZ SANCHEZ, grac ias por su apoy o, por sus

comentar ios y o r ien tac ión .

A la Ing. CECILIA LARA, le agradezco p ro fund amente todos su s conse jos , su

con f ianza, su in te rés y la o r ien tac ión que me proporc ion ó duran te la

e laborac ión de este t raba jo . Grac ias tamb ién por p rop orc ionar las h ar inas de

pescado de d i fe ren te score , y por su co laborac ión para consegu i r apoyo

económico .

A la L ic. MONICA GALLEGUILLOS por la c lasi f icación de las har inas de

pescado d e d i fe ren te sco re y por su o r ien tac ión .

A l Dr . ROBERTO M ENDOZA m uchas g rac ias por su ayuda y sus c om entar ios

durante la rea l ización de esta invest igación.



Al Dr . RA MON GUAJARDO, g rac ias por su con f ianza y por in te rces ión en la

obtención de la Beca Puente.

A la Dra . JUUA VERDE S. g rac ias por su apoyo para ob tener mi beca de

co leg ia tu ra .

A FUN DACION CHILE por toda su co laborac ión y apoyo .

A PESQUERA 1QUIQUE-GUANAYE por su co laborac ión y apoyo económ ico .

A todos mis compañeros de labora to r io mi p ro fundo agradec imien to , por

toda su ayuda en la e laboración del g lu ten, en la rea l ización del v ideo, e tc.

Por todos los momentos que compar t imos y sobre todo por su amis tad .

A Martha mucha s gracias por su dispon ibi lidad y por ser la mejor colaboradora.

A José Luís muchas gracias por toda la ayuda que me diste en la real ización de los

bioensayos.

A Laura, Oscar y Gerardo, gracias por los camarones que me enviaron.

A Paty, Rosy, Mario, Gab riel y Pablo, gracias po r toda su ayuda dura nte la realización de

mi tesis.

A Arturo por su valiosa ayuda en la realización del video.

A Adriana mi profundo agradecimiento por todo su apoyo y ayuda.

A la B ió l . Si lv ia Cas i l las y M. en C. Ma. de la Luz Delgado " mis h ermani tas" ,

por todos los mom entos que comp ar timos, por esa época ino lv idab le en que

v iv imos jun tas, much ís imas g rac ias . Porque , aunque cada qu ien s iga su

prop io camino , s iempre con ta remos con cada una de noso t ras .

AI CONACYT., por su apoyo econ óm ico en la real izac ión d e este p royecto

(pro yec to clav e 476100-5-1572-A9208).



DEDICATORIA.

A t í MANUEL

Por tu am or y pac ienc ia . Porque sé que fue m uy d i f íc i l pa ra t í no tener

mucho t iempo só lo para noso t ros , pero aún así , me apoyaste y me

impu lsaste a segu i r ade lan te . Grac ias por comp render q ue tan imp or tan te es

para m í todo esto .

TE AMO .



ABSTRACT

Fish meal ava i lab i l i t y and qua l i t y are impor tant l im i tants to get good qua l i t y

aqua t i c f eeds . Howev er , t he s t andards o f f i s h mea l qua l i t y requ i red f o r s h r imp

nu t r i t i on a re no t k nown , s i nc e t he s ens ib i l i t y o f s h r imps t o s ome c hem ic a l

s ubs t an c es t han c an be p rod uc e d i n t he f i s h mea l du r i ng i t s manu f ac t u re , s uc h as

TVN, b i ogen i c am ines , g i s e ros ine , pe rox ides , e t c . , rema in unk own, bu t h i gh l y

s us p ec t ed . The p res en t wo rk was pe r f o rm ed t o de t e rm ine t he e f f ec t o f f res hn es s o f

raw mater ia l used to prepare f i sh meal , on i t s nut r i t iona l va lue for shr imp (Penaeus

varmamei ) and to determine the shr imp sens ib i l i t y to f i sh meals o f d i f fe rent

b i o t ox i c o log i c a l s c o r e and t o t he t ox i c DL-G izz e ros ine . To c a r ry ou t t h i s s t udy , t h ree

ex per imen t a l d i e t s were f o rmu la t ed w i t h f i s h mea l s e l abo ra t ed f rom t he s ame raw

mat e r i a l g rade d f res hn es s : f i s h mea l f rom f res h ra w mat e r i a l (FFM) , f i s h mea l f ro m

modera t e l y f res h raw mat e r i a l (MFFM) and f i s h mea l f rom s t a l e ma t e r i a l (SFM) .

Later , 8 exper imenta l d ie ts were formula ted wi th Chi lean f i sh meals wi th d i f fe rent

b i o t ox i c o log i c a l s c o r e (0 .1 , o . 1 , 1 . 1 and 1 . 4 ): no rm a l t ox i c it y f is h m ea l (NF MJ , no rm a l

tox ic i t y f i sh meal (NFMb) , medium tox ic i t y f i sh meal and wi th h igh h is tamine leve l

(MFMJ and med ium t ox i c i t y f i s h mea l w i t h l ow h i s t am ine l ev e l (MFM^. The

rema in ing 4 d i e t s were e l abo ra t ed w i t h t he no rm a l f i s h mea l (NFNIa ) s upp lem en t ed

w i t h d i f f e ren t c on c en t ra t i ons o f s y n t he t i c DL-G izz e ros ine (1 . 0 , 3 . 0 , 6 . 0 and 9 .0 ppm ) .

F i s h mea l qua l i t y was a l s o ev a lua t ed by c hem ic a l ana l y s i s (TVN, p rox im a l ana l y s i s ,

b i ogen i c am ine s c on t en t and i n v i t ro d i ges t i b i li t y ) . The ex per ime n t a l d i e t s w i t h f i s h

me a l s o f d i f f e ren t f res h nes s were ev a lua ted t h roug h 2 b i oas s ay s w i t h P . v annam e i

(o f 0 .9 and 1 .5g in i t ia l mean weig th) , dur ing 14 and 28 days , respec t ive ly . The

ex per imen t a l d i e t s w i t h f i s h mea l s o f d i f f e ren t b i o t ox i c o log i c a l s c o re and DL-

G iz z e ros ine we re ev a lua t ed t h ro ug h 1 b i oas s ay w i t h P . v ann ame i (o f 0 .066g i n i t i a l

mean we igh t ) , du r i ng 28 day s . A t t he end o f t he b i oas s ay s , g rowt h ra t es , f eed

c onv ers i on ra t es and s u rv i v a l ra t es were de t e rm ina t ed , ANOVA and Sc he f f e t es t

were rea l i z ed t o de t e rm ine s i gn i f i c an t d i f f e renc es be t ween t rea t men t s . Res u l t s

demos t ra t e t he s h r imp s ens ib i l i t y t o t he f res hnes s o f t he raw mat e r i a l : g rowt h and

f eed c ons umpt i on dec reas ed s i gn i f i c an t l y i n t he s h r imps o f 0 . 9g i n i t i a l we ig t h f ed

w i t h t he m odera t e l y f res h an d s t a le fi s h mea l s . The l ac k o f fres h nes s o f raw mat e r i a l

a l s o a f f ec t ed t he f eed s t ab i l i ty i n t he wa t e r . F i s h mea l s b i o t ox i c o log i c a l s c o re h i ghe r

than 1 .0 and the DL-Gizzeros ine decreased s ign i f i cant l y the shr imp surv iva l . I t s

s ugg es t ed t o ev a lua t e t he e f fec t o f t he raw mat e r i a l f res h nes s on s h r im ps l a rge t han

1g w i th d ie ts co in ta in ing a lowe r pro te in leve l . I t i s a ls o rec om me nd ed to rea l i ze

more s t ud ies f o r t he de t e rm ina t i on o f t he pa t h way o f t he G i z z e ros ine on s h r imp .

Qua l i t y pa rame t e rs t ha t we re ev a lua t ed in t he p res en t s t ud y a re no t c ons ide red i n

the Mex ican Of f i c ia l Regula t ion to cer t i f i ca te f i sh meal ; f rom our resu l t s , i t may be

rec ommended t ha t t hes e pa ramet e rs s hou ld be t ak en i n ac c oun t f o r f i s h mea l s t o

be us ed i n s h r imp nu t r i t i on , due t o t he ec onomic impac t t hey may hav e on s h r imp

produc t i on .



INDICE.

RESUMEN i

I.- INTRODUCCION 1

II.- ANTECEDENTES 4

1. Cultivo del Camarón . 4

2. Harinas de Pescado 5

2.1. Historia . 5

2.2. Producción Mundial 6

2.3. Productores 6

2.4. Proceso 7

2.4.1« Cocción 7

2.4.2. Prensado 7

2.4.3. Decantación 8

2.4.4. Centrifugación... 8

2.4.5. Concentración 8

2.4.6. Secado 9

2.4.7

.

Molienda.. 9

2.4.8. Adici ón de antioxidante 9

2.5. Valor nutricional de la harina de pescado 12

2.6. Parámetros de calidad y especificaciones para

la alimentación salmónidos 12

2.6.1. Grado de frescura de la materia prima 12

2.6.2. Amin as biogénicas 14

2.6.3. Calidad biotoxicológica 16

2.6.3.1. Mollero sina * 16

2.7. Norma Oficial Mexicana 20

III.

OBJETIVOS 22

Objetivo General 22

Objetivos Particulares 22

IV.- HIPOTESIS . 22

V.- MATER IAL 7 METO DOS 23

1. Efecto del grado de frescura 23

1.1. Harinas de pescado experimentales 23

1.2. Dietas experimentales 24

1.2.1. Formulación y composición de las dietas

experimentales 24

1.2.2. Preparación de las dietas experimentales 25

1.2.3. Anális is de las dietas experimentales 25

1.3. Bioensayos 26

1.3.1. Descripción de la sala de bioensayos. 26

1.3.2. Características de los camarones 26

1.3.3. Diseño experimental 27

1.4. Evaluación biológica 27

1.5. Análisis estadístico 28

2. Efect o del score biotoxicológico y del tóxico

DL-Mollerosina 29

2.1. Harinas de pescado experimentales 29

2.2. Origen del tóxico DL-Hollerosina 30

2.3. Dietas experimentales 31

2.3.1. Formulación y composición de las dietas

experimentales •.••.31

2.3.2. Preparación de las dietas experimentales 32



2.3.3. Análi sis de las dietas experimentales 32

2.4. Bioensayo s 32

2.4.1 . Carac terís ticas de los camarones 32

2.4.2. Diseño experimental 32

2.5. Evaluac ión biológica 33

2.6. Análisis estadístico 33

VI.

- RESULTADOS 34

1. Efect o del grado de frescura 34

1.1. Harinas de pescad o experiment ales 34

1.2. Anál isis próx ima 1 de las dietas exper iment ales 34


1.4. Parám etros isico-quími cos del agua 37

2. Efecto del score biotoxicológico y del tóxico

DL-Mollerosina 40

2.1. Aná lis is proxi mal de las dietas experi mental es 40


2.3. Parám etros fisico-químic os del agua 42

VIII. DISCUSION 47

1. Efect o del grado de frescura - 47

1.1. Harin as de pescad o experimentales 47

1.2. Aná lis is proxim al de las dietas 49

1.3. Estab ilidad de las dietas experime ntales 50

1.4. Evalu ación biológi ca 46

2. Efecto del score biotoxicológ ico y del tóxico

DL-Mollerosina 46

2.1. Harina s de pesc ado experimentales 46

2.2. Detas experimentales 43

2.2.1. Comp osic ión de las dietas experim entale s..... 48

2«2.2. Análisi s proximal de las dietas experimentales 48


3. Puntos crítico s

de.

control en el proce so 50

3.1. Fresc ura de la mater ia prim a 50

3.2. Proces o de secado 51

3.3. Puntos de control de la generación de mollerosina.... 52

2.4. Almacenamient o 52

VII. CONCLUSI ONES 53

XIX. LITERAT URA CONSULT ADA 54

ANEXO 1 59

ANEXO II 64

Anexo III 77

Anexo IV 82

Anexo V 98

Anexo VI 109

Anexo VII 113



USTA DE TABL AS.

No. TABLA.

1

2

3

4

5

6

7

9

10

1 1

12

DESCRIPCION.

Tipos de Harinas de pescado producidas en

países 7

Composición de las harinas de pescado de

diferente grado de frescura 23

Composición de las dietas experimentales del ...

bioen sayo de frescura 24

Composición de las harinas de pescado de

diferente score biotoxicológico 30

Composición de las dietas experimentales del ...

bioen sayo biotoxicológico 31

Análisis proximal de las dietas del bioensayo...

de frescura. 34

Resultados promedios de la evaluación biológica.

del bioensayo I frescura) 35


del bioensayo II 14 días frescura) 36


del bioensayo II 28 días frescura) 37

Análisis proximal de las dietas del bioensayo...

biotoxicológico 40


del bioensayo II 14 días biotoxicológico) 41

Resultados promedios de la evaluación biológica,

del bioensayo II 28 días biotoxicológico) 42



LISTA DE FIGURAS.

No. FIG.

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

DESCRIPCION

Diagrama de flujo de la fabricación de la

harina de pescado

•

10

Representación grafica de un cocedor 11

Representación gráfica de un secador para

elabora harina de pesca do 11

Estructura de la mollerosina 17

Vista superior de la sala de bioensayos 75

Estructura de los acuarios 75

Sistema de recirculación del agua de la sala....

de bioensayos 76

Tasa de crecimiento de los bioensayos de

frescura .38

Consumo de alimento/camaron frescura) 38

Tasa de conversión alimenticia 39

Tasa de sobrevivencia frescura) 39

Tasa de crecimiento del bioensayo

biotoxicológico 14 días) 43

Consumo de alimento/camaron 14 días ) 43

Tasa de conversión alimenticia 14 días) 44

Tasa de mortalidad 14 diás) 44

Tasa de crecimiento del bioensayo

biotoxicológico 28 días) 45

Consumo de alimento/camaron 28 días) 45

Tasa de conversión alimenticia 28 días ) 46

Tasa de mortalidad 28 diás) 46



I.- INTRODUCCION

E l c u l t i v o de c am arón en Méx i c o , es una ac t i v idad que es t á t oma ndo un aug e

c ons ide rab le , de b ido a la d i s po n ib i l i dad de á reas c on óp t ima s c a rac t e r í s t ic as pa ra

e l cu l t i vo y a l cambio rec iente de la leg is lac ión de pesca, que ha permi t ido la

invers ión de la in ic ia t i va pr ivada en es te rubro . Las es tadís t i cas nac iona les de

produc c ión de c amarón po r ac uac u l t u ra i nd i c an un c rec im ien t o g radua l pe ro

c ons t an t e . En 1989 y 1993 4000 y 9000 t one ladas s de c amarón c u l t i v ado ,

res pec t i v amen t e (Ros enber ry , 1989 y 1993) .

La i ndus t r i a de a l imen t os ba lanc eados pa ra c amarón es uno de l os p i l a res

f undament a les pa ra e l des a r ro l l o de l a ac uac u l t u ra ; deb ido a que e l a l imen t o

rep res en t a de l 50 a l 60% de l c os t o de p roduc c ión , l a de t ec c ión y s o luc i ón de l os

p rob lemas que a f ec t an es t a i ndus t r i a , de t e rm ina rá en g ran med ida e l g rado de

desarro l lo de es ta ac t i v idad acuíco la en Méx ico.

La c a l i dad de l os i ng red ien t es u t i l i z ados en l a e l abo rac ión de a l imen t os

ba lanc eados es l a p r i nc i pa l l im i t an t e en l a p roduc c ión c ons t an t e de a l imen t os

ef ic ien tes (Ak iyama et . a l . , 1990) .

La ha r i na de pes c a do es una f uen t e de p ro t e ína p rác t i c amen t e i nd i s pens a b le

en l a f o rmu lac ión de a l imen t os ba lanc eados pa ra ac uac u l t u ra po r s u v a lo r

nu t r i c i ona í ; s u d i s pon ib i l i dad y s u c a l i dad s on f ac t o res impor t an t es pa ra l a

ob t enc ión de a l imen t os ba lanc eados de buena c a l i dad . En Méx i c o , es t os f ac t o res

no s on c on t ro l ados , y l a v a r i ab i l i dad en l a c a l i dad y d i s pon ib i l i dad de ha r i nas de

pes c ado s e ha de t ec t ado c omo un p rob lema g rav e en l a i ndus t r i a de a l imen t os

ba lanc eados (Com. pe rs . Cruz -Suárez , 1993) .

Es ta l im i tante se ha t ra tado de reduc i r rea l i zando inves t igac iones para

ev a lua r l os requer im ien t os de c ada es pec ie y t ra t ando de enc on t ra r s ubs t i t u t os

p ro t e i c os má s ec on óm ic os . La pas t a de s oy a es e l s ubs t i t u t o pa rc i a l c o n m ay or

éx i t o , y a que s e us a c omo un i ns umo en p roporc i ones i gua les a l a ha r i na de



pes c ado (1 a 1 ) en muc has f o rmu lac iones c omerc ia l es , po r s u c os t o y s u v a lo r

nu t r i c iona l (Co m. pe rs . Cruz -S uárez , 1993) . . En fórm ula s para aves , ce rd os y

rum ian t es l a s oy a ha l og rado remp laz a r t o t a lmen t e a l a ha r i na de pes c ado ,

d i s m inuy e ndo en los ú l t imos años e l c ons u mo en es t os rub ro s (Cháv ez , 1991) . S in

embargo , l a s ubs t i t uc i ón de ha r i na de pes c ado en a l imen t os ac u í c o las es pa rc i a l ,

y en c ier ta medida e l porcenta je de inc lus ión de la soya o de o t ros subs t i tu tos va

depe nder d e l a c a l i dad de i a ha r i na de pes c ado remp laz ada o s ub s t i t u i da y de l n i v e l

p ro t e i c o de l a l imen t o f o rmu lado . Además , l a i nc l us i ón de s oy a en a l t os n i v e les ,

mo d i f i c a a l guna s c a rac t e r í s ti c as de l a l imen t o c om o s u pa la t ab i l idad y s u es t ab i l i dad

en e l agua.

La c a l i dad de i a ha r i na de pes c ado puede v a r i a r amp l i amen t e depend iendo

de 5 fac tores (P ike y Hardy , 1992) :

1 T i p o d e m a t e r ia p ri m a : e s p e c i e , p e s c a d o e n t e r o o s u b p r o d u c t o s .

2 . - Frescura de la mater ia pr ima.

3 . - Tem pera t u ra de s ec ad o y ti em po de pe rman enc ia de l a ma t e r i a en e l s ec a dor .

4 . - Ca l idad de los l íp idos .

5 . - Ca l i dad m ic ro b io l òg i c a .

Por l o t an t o , es nec es ar i o rea l i z a r es t ud ios que i nd iquen l os p rob lemas

nu t r i c i ona les y b i o t ox i c o lóg i c os que podr í an c aus ar l as ha r i nas de pes c ado de

d i f e ren t e c a l i dad en l a p roduc c ión an ima l en genera l , es pec í f i c amen t e en i a

p r o d u c c i ó n d e c a m a r ó n .

La c a l i dad d e ha r i nas de pes c ado requ er i das pa ra o t ras es pec ies , c om o av e s ,

c e rdos y s a lmón idos y a ha s i do de f i n i da ; s i n embargo , pa ra c amarón es t a

i n f o rmac ión aún no ex i s t e .

En e l presente t raba jo se pre tende determinar la ca l idad de las har inas de

pes c ado adec uada pa ra l a nu t r i c i ón de l c amarón b l anc o en c u l t i v o , es t ud iando e l

e f ec t o de d i f e ren t es pa rámet ros de l a c a l i dad nu t r i c i ona l y b i o t ox i c o lóg i c a de

d i f e ren t es ha r i nas de pes c ado c omo: e l g rado de f res c u ra de l a ma t e r i a , e l s c o re



b io t ox i c o lóg i c o de l a ha r i na y e l c on t en ido de mo l l e ros ina s i n t é t i c a .

Co noc iend o l a s ens ib i l i dad de l c am arón a es t os pa rám et ros de c a li dad de l as

har i nas de pes c ad o , s e podrá c on t r i bu i r en e l es t ab lec im ien t o de es pec i f i c ac iones

que debe c ump l i r e l p roduc t o pa ra c ons umo de c amarón y c ons ec uen t emen t e

reduc i r l os c os t os de p roduc c ión y s e podrá o r i en t a r a l os p roduc t o res de ha r i nas

para que me jo ren s us p roc es os y es t ab lez c an un buen c on t ro l de c a l i dad de l

p roduc t o f i na l , es pec ia lmen t e l os d i r i g i dos a l a nu t r i c i ón de l c amarón .



I I . -ANTECEDENTES.

1 . C U L T IV O D E L C A M A R O N .

El cultivo mo derno de camarón se originó en la década de los años 30's en

Japón con Penaeus japonicus (Rosenberry, 1993). En nuestro país, la camaronicuftura se

inició en la Un iversidad de Son ora en 1970 con Penaeus calífomieRsis y P. styllrostris (Orbe

y Arias, 1987).

Actualmente alrededor de 50 países cultivan cama rón. En 1993 se p rodujeron 609,000

tons.; el cont inente Am ericano produjo el 22% (132,000 tons) de la producción mundial, de

las cuales, Ecuador produjo el 68% (90,000 tons, valuadas en 400 millones de dlls.);

Colombia, México y Honduras incrementaron su producción d e 8000 a 9000 tons. La mayoría

de las granjas en Amé rica son se miintensivas, y el 90% de la prod ucción es de fa especie

P. v anname i El 75% del camarón cult ivado en Amé rica es vendido a Estados Un idos, aunque

actualmente España y Francia ya representan un mercado importante (Rosenberry, 1993).

México cuenta con 140 granjas, de las cuales el 20% son de t ipo extensivo, 75%

semiintenslvo y el 5% intensivas. El 80% de la producción es de la especie P. vannamei, el

15% de P. stylirostris y el resto de otras especies (Rosenberry, 1993).

El des arrol lo d e la acuicultura a nivel mundial t iende a real izarse a través de sistem as

de explotación semünteslva e intensiva, por lo cual se requiere de l sum inistro d e cant idades

cons iderab les de ferti l izantes y alimentos. El área de la nutrició n acuícola está

comp rometida co n el sum inistro de nutrientes en dietas para peces o camarones, tanto de

manera indirecta como directa (Tacón, 1989).

El al imento es u no de los principales insum os en la explotación de cualquier especie

animal, ya que l lega a representar de l 50 al 60% del costo de p rodu cción (Almazán, 1991;

Urlarte-Pérez, 1991). Como la proteína es uno de los nutrientes más costosos de cualquier

al imento balanceado (Parsons, 1993), la product iv idad en la camaronicultura estará

íntimam ente ligad a a la dispon ibil idad y al costo de la proteína (Cruz-Suárez, 1991). Esto se

debe, principalmente, al hecho de que el camarón requiere al imentos con elevados

contenidos de proteína, entre 30 y 60% (Tacón, 1989).



La harina de pescado se considera como la principal fuente de proteínas en

al imentos b alanceados para peces y crustáceos, ya que no se han enco ntrado otras fuentes

de proteína que con tengan las característ icas nu tric lonales que puedan sub st i tuir totalmente

a la harina de p escado (Chávez, 1991). El nivel de inclusión de harina de pescado en dietas

com erciales para cam arón es d e 20 a 40% (Aklyama et. al., 1991); por lo tanto, la calidad y

la disponibi l idad de la harina de pescado son una l imitante importante para obtener

al imentos balanceados de buena cal idad para este crustáceo.

2. HARINAS DE PESCADO.

2.1 HISTORIA.

La Industria de harina y aceite de pescado empezó en el Norte de Europa a

principios de l s iglo XIX, con procesamiento d e Arenque. Se producía principalmente aceite

para elaborar jabones, gliceroles y para el curtimiento de pieles; los residuos se usaban

como ferti l izantes. Posteriormente, se procesó para obtener harina de pescado para

al imentación animal. En la década de los 30's la harina de pescado fue considerad a com o

un Importante ingrediente en al imento para pol los, fue reconocida com o un supleme nto de

proteína animal y como una fuente de vitaminas, minerales y factores desconocidos de

crecimiento. En la actual idad se sigue usando por las mismas razones y se conocen con

más precisión su s com ponentes y s u valor nutric ional en la al imentación animal (Satnsby

and Karrick, 1963; Martin and Rlck, 1990).

En México, la producción de harina de pescado se inic ió en 1938, cuand o se instaló

en Pesquerías del Pacífico, S.A. la primera planta reductora de pescado, siendo la materia

prima los desperdicios (visceras y espinas) del proceso del enlatado del atún, sardina y

macarela. Actualmente, se elabora principalmente de anchoveta entera y de desperd icios d el

enlatado de especies marinas. Las*-principales zonas productoras se encuentran en las

costas de Baja California Sur y Norte y en el Edo. de Sonora. Tam bién se encu entran plantas

reductoras en ei Golfo de México, Costa sur del Pacífico y en el Golfo de California. Sin

embargo, la produ cción nacional no ha sido su f iciente para sat isfacer la demanda y se ha

tenido que importar del Perú, Chile, Ecuador y E.U. (Corrales, 1988).

La Industria reductora a n ivel mundial, ha crecido en forma Importante e n los últ imos



años y este desarrollo se ve reflejado en la util ización de herramientas de la bloingenlería,

ingeniería bioquímica, química y electrónica, como consecuencia de las exigencias del

merca do y del mayor conocimiento de los parámetros de cal idad necesarios para diversas

aplicaciones y para el consumo de los productores (Cía. Pesquera San Pedro, 1991).

2.2 PRODUCCION MUNDIAL

La pesca anual asciende alred edo r de 90 millone s de toneladas (M artin y F llck, 1990),

de las cuales aproximadamente un tercio no es ut i lizado para consum o humano directo y

pued e considerarse com o materia prima para subproductos d e pesquería. Alrededor

del

95%

de estos subprod uctos es procesado a harina de pescado, debido a que es un concentrado

estable, de alto contenido proteico, que puede ser transportado alrededor del mundo sin

sufrir d eterioro en circunstancias que el pescado mismo es altamente perecedero (Barlow

y Wlndsor, 1984).

Casi cualquier pescado o m arisco puede ser usado para elaborar harina de pescado.

De la producción mun dial de harina de pescado, el 90% es producida de especies de carne

roja como anchoveta, capel ina y sábalo, menos del 10% se produce a part ir de pescado

blanco como bacalao y merluza. El resto es producida a part ir de bal lenas y mariscos

(Barlow y W lndso r, 1984; Hardy y Masum oto, 1991).

2.3 PRODUCTORES.

Los principales productores de harina de pescado en el mundo son Perú, Chi le,

Norue ga, Estados U nidos, Japó n, Islandia, Dinamarca y Sudá frica (Tabla No. 1). En algunos

países la harina de pesca do es elaborada a partir de pesc ado en tero, mientras que en otros

se elabora con los sub productos de pesquería. Los principales exportadores de harina de

pescado en los últ imos años han sido Chile, Perú y Estados Unidos. £n aquel los países

don de la acuacultura se ha desarrol lado grandemente (como Noruega, Japón y Canadá), se

necesita más harina de pescad o de la que producen , por lo que t ienen que importarla (Hardy

and Masumoto, 1991).

La harina de pescado es clasif icada e n la mayoría de los países de acuerdo a su co ntenido

de proteína, clasif icándolas en seis categorías, cinco de las cuales son util izadas para la

al imentación animal terrestre y acuícola. Cuatro de el las son consideradas harinas de



pescado de calidad especial. (Hardy y Masumoto, 1991).

Tabla No. 1.- Tipos do Harinas cte Foseado Producidas en var ios paisas.

PAIS TIPO DE HARINA OE PESCADO

E.UA.

Sábalo, la mayoría procesada con

flama directa. En el sur se procesa con

vapor /a i re c las i f icada como premium.

Canadá. Arenque , procesada con vapor /a i re.

Perú.

Ancho veta. L l lama d i rec ta y vap or /a i re.

Sudaf r ica. P i lchard.

Noruega e Is landia.

Arenq ue y Capel ina, procesada a

bajas temperaturas (Norseam ink y LT-

94).

Chi le .

Anchove ta y M acarela, l lama d i rec ta y

vapor a i re.

Japón.

Sardina.

2.4. PROCESO.

( Fig. 1)

La Harina de Pescado es produ cida po r cocimiento, prensado, secado, y molienda

dei pescado en maquinarias destinadas para este propósito. Ai procesar pescado blanco ia

etapa de prensado es omitida ya que no contiene aceite para extraer (Barlow y Windsor,

1984; Chávez, 1991).

2.4.1. COCCION. (Fig. 2).

El proceso de cocción se desarrol la en un cocedor, que consiste en un equipo

ci l indrico, con un eje térmico y en forma d e torni l lo, que pe rmite el avance de la carga; y una

camisa térmica, que tiene, además de su función térmica, la de aislamiento. Los objetivos

de la cocción son esteril izar, coagular la proteína y liberar los lípldos retenidos intra e

intermuscularmente en la materia prima.

2.4.2. PRENSADO.

El objet ivo de prensar es obtener una torta con una mínima cant idad de agua y

lípldos, y un l icor de prensa pobre en sól idos solubles e insolubies. Con una cocción

ópt ima, la materia debe poder soportar la presión relat ivamente alta que requiere para



separar eficazmente el aceite.

El pescado cocido es transportado a través de un tubo perforado mientras es

som etido a una presión creciente, mediante un eje cónico, dentro de un transportador de

tomil lo. Una mezcla de aceite y agua, y algunos sól idos, son exprimidos a través de las

perforaciones y e l sól ido remanente, conocido co mo torta de prensa (press cake), sale del

extremo de la prensa.

2.4.3. DECANTACION.

El licor de prensa (l ípidos, agua y un mínimo de sól idos solubles e insolubles) se

procesa en el decantador, que consta de centrífugas horizontales, para separar los sólidos

insolubles. El objet ivo f inal es lograr una torta rica en sól idos insolubles y un mínimo de

agua, aceite y solubles. El l icor obtenido deberá contener una mínima cant idad de

insolubles.

2.4.4. CENTRIFUGACION.

El l icor de decanter, rico en aceite, se procesa en centrífugas verticales, las cuales

separan este producto del agua y de los sól idos insolubles. Así mismo, los sól idos

Insolubles arrastrados de los procesos anteriores, son el iminados en forma pulsante,

mediante procesos programados de vaciado de acumulaciones en el interior de los equ ipos.

De esta etapa se obt iene: aceite, agua de cola (compuesta por agua, sól idos solubles y u n

mínimo de aceite) y por otra parte, iodos de sól idos insolubles acompañado s de agua, aceite

y solubles. El aceite obtenido es puri f icado en centrí fugas especiales y posteriormente

deshidratado.

2.4.5. CONCENTRACION.

El agua de cola debe se r concentrada a f in de el iminar el agua que la acompaña y

recuperar los sól idos , que correspo nden casi en su total idad a proteínas solubles.

La deshidrataclón d el agua de cola se obt iene mediante la evaporación del agua por -

tratamientos térm icos, mediante un evaporador convencional o de película descendente. En

el primero, el l íquido se arresta por los tubos y por ende es sometido a temperaturas más

elevadas. En ei segu nd o, el líquido se arrastra m ediante una película perime tral en los tubo s

y se somete a menores temperaturas. El costo de operación de este evaporador es más

conveniente que el t radicional.



2.4.6. SECADO. (Rg. 3).

Consiste en deshidratar las tortas de prensa, de decanter y los solubles

concentrados, mezclados y homogenlzados previamente. La principal razón de secar es

reduc ir la hume dad d el material no acuoso, para evitar el crecimiento de microorganismos.

' Existen dos tipos básicos de secadores: El directo y el indirecto.

- El secador directo consiste en tambores rotatorios con diversos sistemas de avance de

carga. El calor es transferido por contacto directo entre la masa húmeda y aire caliente. El

vapor líquido es transportado por el aire callente, que puede alcanzar temperaturas hasta

de 500°C. La harina no alcanza la temperatura del aire caliente debido a que, la rápida

evaporación de l agua de la superf ic ie de cada partícula causa un enfriamiento, normalmente

el producto man tiene una temperatura de 80 a 95°C.

- El secador indirecto consiste en un ci l indro con chaqueta de vapor o en un ci l indro que

cont iene discos térmicos con vapor, los cuales también mezclan la harina. En los secado res

indirectos el calor es transferido a la masa húmeda a través de una pared de retención. El

vapor l íquido es removido independientemente del me dio de calentamiento. La proporción

del secado depend e d el contacto de l material húmedo con la fuente cal iente.

2.4.7. MOLIENDA.

El material procedente d e los secadores posee un tamaño de part ícula muy variado,

afectando su composición. Ei objeto de la molienda consiste en producir un polvo

homogéneo, exento de sustancias extrañas, con buen aspecto, que pueda pesarse,

ensacarse y transportarse. El producto usualmente se muele en molinos de mart i l los. La

molturacíón se produce por el choque violento de los mart i l los que ruedan junto con la

harina, que una vez desmenuzada, sale del molino atravesando una placa perforada. El

molino dispone-de placas con perforaciones de varios tamañ os, para producir el tamaño de

partícula que se requiera.

Antes de la molienda, el producto se criba por vibración y se somete a un campo

magnético para eliminar sustancias extrañas como maderas, clavos, anzuelos, etc.

2.4.8. ADICIO N DE ANTIOXIDANTE.

Las grasas de la harina de pescado se estabi l izan mediante la adición de

antioxidante, inmediatamente después de la fabricación. Los antioxidantes típicamente

util izados son BHT y Etoxiqulna. La concentración del antioxidante decrece con el t iempo



de almacenamiento. Dicha disminución, es acelerada al principio y luego paulat ina; su

concentración disminuye casi a la mitad en las primeras 60 hrs.

La descripción del proceso fue tomada de Stansby y Karríck, 1963; Barlow y Windso r,

1984; M artin y Flíck, 1990; Cía. Pesquera San Pedro, 1991.

Figura No. 1. Diagrama de Flujo de la elaboración de la harina de pescado.



Figura No. 2. Esquema d e un coce dor t ípico usado en la fabricación de harina de pescado.

S Q J



2 . 5 . VALOR NUTR I CI ONAL DE LA HARI NA DE PESCADO .

La harina de pe scado e s una fuen te de proteína, energía, ácidos grasos esenciales,

minerales y vitaminas (Barlow y Windsor, 1984) y representa una de las fuentes nutrit ivas

más importantes en la alimentación de aves, cerdos, peces y crustáceos (Castro, 1990).

La proteína en ta harina de pesca do t iene un alto valor biológico, ya que es rica en

aminoácidos esenciales, part icularmente Usina y am inoácidos sulfurados. La com posición

de la grasa en la harina de pescado difiere de la mayoría de los aceites vegetales por

contener altos niveles de ácidos grasos de cadena larga (C20 y mayores) poliinsaturados

que e n su mayoría pertenece n a la fam ilia de los ácidos linolénlcos (W3) (Castro, 1990; Pike

et al. 1990).

Aporta adem ás, selenio, calcio y fósforo, este últ imo se e ncuentra completamente

disponible. Por otro lado, también es una buena fuente de col ina. Ademá s, varios autores

reportan que cont iene factores desconocidos de crecimiento (Barlow y Windsor, 1984;

Castro, 1990; Akiyama et al., 1991; Hardy and Masumoto, 1991).

En general, las harinas de pescado de buena calidad están libres de toxinas tales

comcf ureasas, antitripsina, t ioglucósldos, entre otras, que generalmente se presentan en

fuentes proteicas de origen vegetal (Castro, 1990).

El valor nutricional de las harinas de pescado está determinado por cinco factores

principales con cernientes al t ipo de m ateria prima util izada y a parámetros de procesa miento

(Pike y Hardy, 1992).

2.6. PARAMETROS DE CALIDAD Y ESPECIFICACIONES RECOMENDADAS PARA

SALMONIDOS.

2.6.1. GRADO DE FRESCURA DE LA MATERIA PRIMA

El grado de frescura de la materia prima, juega un papel muy importante en la

cal idad de la harina. Por esta razón, es importante tener presente el grado d e deterioro que

se produ ce en ei pescado durante el período de almacenamiento p revio a su procesamiento.



Este proceso de de terioro se veri f ica a través de 3 meca nismos:

- Acción bacteriana: En este caso el deterioro se pro duce como resultado d e la act ividad

enzimatica de las bacterias presentes y trae como consecuencia la formación de histamina,

cadaverina, putresina, ac. orgánicos, etc.

- Autóllsis: Se gene ra por la acción d e las enzimas propias de l tejido del pescad o. H idrolizan

(as proteínas de alto peso molecular proporcionando los nutrientes necesarios para el

crecimiento bacteriano.

- Oxidación: Se produce en la fracción grasa , generándose peróxidos, hidroperóxidos,

aldehidos, cetonas, etc. (Castro, 1990; Pike, et al, 1990; Zaidivar, 1992).

La velocidad a la cual el pescado se descom pone depende de va rios factores com o

la especie, el t iempo de almacenamiento y temperatura. El pescado se deteriora más

rápidamente a altas temperaturas y cuando el intestino del pez se encuentra lleno al

momento de su captura.

Para determinar e l grado de frescura de la materia prima, se recom ienda m edir el

contenido de nitrógeno volátil total (TVN). Esta prueba determina el contenido de amonio,

mono y trimetil aminas principalmente y trazas de dimetilaminas. El principio de la

determinación es por precipitación de proteina con ácido tríc loro acét ico y determinación

de n itrógeno amon iacal por el método Kjeldahl. Este indicador es usado por los principales

países produ ctore s d e harina de pescad o com o son Chile, Perú, Noruega , etc. (Castro, 1990;

Plke y Hardy, 1 992; Zaidivar, 1992).

En Noruega, es obligatorio medir el TVN de la materia prima en las harinas de

pesca do denom inadas LT-94 y Norseam ink, harinas especiales para la alimen tación acuícola.

Su TVN no deb e superar valores de 5 0 y 90 mg N /100g de mue stra, respe ctivamen te (Castro,

1990; Pike, et al. 1990).

Experimentos real izados p or diversos investigadores

han

demostrado q ue la frescura

de la matèria prima de (a harina de pescado puede afectar la ganacia diaria de peso,

consumo de al imento y ef ic iencia al imentic ia de los cerdos de inic iación y de engorda y

salmó nidos, cun ado los valores de TVN son mayores a 50, 80 y 90 mg N/100g de muestra,

respec tivamen te (Watanabe et. al., 1987; Castro, 1990; Plke, e t al, 1990 ; Hughes, 1991 visto

en Pike y Hardy, 1992).



La pérdida d e frescura de la materia prima, además de disminuir el valor nu tric ional

del producto f inal, repercute sobre el proceso, tornándolo má s dif íc i l y menos ef ic iente:

Para diminuir la pérdida de frescura de la materia prima desde el momento de la

captura hasta su proceso, se deben evitar los t iempos prolongados entre la pesca y la

descarga en la planta. Es recomend able además, mantener el pescado en hielo durante este

período y no mezclar productos frescos con añejos. Los pozos de recepción o de

almacenamiento de la materia prima de las plantas reductores, deben estar l impios,

techados y se debe procurar no almacenar por períodos largos para evitar generar grandes

cant idades de agua de sangre. En caso de que se forme es necesario separarla rápidamente

de la materia prima, ya que puede ser un medio de cultivo para la formación de aminas

biogónicas. (Zaldivar, 1992).

2.6.2.1. AMINAS BIOGENICAS.

Las aminas biogénicas son productos químicos orgánicos provenientes de la

degradación enzimàtica, por la acción de la amino-descarboxllasa que cataliza la

transformación de los aminoácios en aminas biogénicas. Cuando se encuentran en altas

concentraciones pueden tener efectos tóxicos o antinutricionales. (Poole, 1993; Huisman,

et.al . , 1992). Las aminas biogénicas y sus aminoácidos precursores comúnmente

encontradas en la harina de pescado son :

El conten ido d e aminas biogénicas también se incrementa cuand o los solubles so n

incorporados a la harina al momento del procesamiento, al no efectuarse un e stricto co ntrol

de calidad (Veclana, 1990; Pike and Hardy, 1992; Zaldivar, 1992).

Las aminas biogénicas por ser termoestables, son útiles indicadores de la calidad

de la materia prima y de l producto terminado. El contenido de aminas biogénicas refleja el

grado de frescura de la materia prima con la cual fue elaborada la harina y del estado de

AMINOACIDO

AMINA

Putresina y Agmatina.

Hlstamina.

Cadaverina.

Tlramina.

Arginina

Histidina

Usina

Tirosina



f rescura d el concen trado que se Incorporó durante el proceso (Galleguilos, 1993).

Actualmente la determinación de aminas biogénlcas se efectúa med iante técnicas de

cromatografía en columna líquida de alta presión (HPLC).

En los pol los, al consumir histamina en altas concentraciones se deprime el

crecimiento y produce muertes ocasionales. El modo de acción es sobre las glándulas

proventriculares causando un aumento en la secreción gástrica y en la acidez de estas

secre cione s. Lo cual, provoca eros ión generalizada de la mucosa de la molleja (Harry e t a l.,

1975; Poole, 1993). El crecimiento de los salmónidos también es afectado po r el consu mo

de altas concentraciones de histamina (Watanabe et al., 1987). Se recomienda que las

harinas d e pescado ut il izadas para la al imentación de salmónido s no contengan más de 500

pp m de histam ina y no más de 1000 pp m para pollos (Castro, 1990; Pike et. al, 1990).

En cuanto a los efectos tóxicos de otras aminas biogénlcas, se con oce muy poco.

Se sabe qu e la putresina y la cadaverina potenciallzan el efecto de la histamina. La tiramina

estimula la actividad cardíaca, y por lo tanto, aumenta la presión sanguínea, disminuye la

circulación en el t racto intest inal y el consumo voluntario de al imento . Además de los

efectos tóxicos que presentan las aminas, disminuyen por otro lado, el valor biológico de

la proteína, en este caso e n particular de la harina de pe scado (Veciana, 1990; Gaileguíllos,

1993; Poole, 1993).

Para evitar la formación de altas concentraciones de aminas biogénlcas se debe

tener u n control en las siguientes etapas:

- Durante el proceso d e captura y entrega a plantas. Se deb en evitar los tiempos

prolongados entre la captura y la l legada a la planta, ya que el pescado Inicia su proceso

de descomposición al momento de su captura.

- Durante la etapa de almacenamiento de la materia prima en la planta.

- En la manipulación v util ización del agua de sangre, ya que ésta puede ser un Importante

man ipulación v procesamiento



puede formar aminas biogénicas, por lo que se recomienda que los almacenamientos

intermed ios, entre la etapa de prensado y concentración, sean los más cortos posibles, dado

que en estas operaciones se dan las condiciones ideales para la descomposición de las

partes proteica s y iipídicas (Zaldivar, 1992; Galleguillos, 1993).

2.6.3. CAUDAD BIOTOXICOLOGICA.

La tempera tura y el t iemp o d e residencia de la materia prima en el secador, pued en

afectar la calida d nu tricional y biotoxicoiógica de las harinas de pescad o (Osuna, 1984). Este

proceso debe ser cuidadosamen te controlado en la planta con el f in de prevenir las graves

consecuencias que causa el sobrecalentamiento, ya que incidirá en una digest ión

insuficiente, una menor asimilación de Usina, en la destrucción de aminoácidos, vitaminas

y com puestos grasos sensibles al calor y puede ayudar a formar sustancias tóxicas como

la mollerosína (Osuna, 1984; Castro, 1990, Rodríguez, 1990; Chávez, 1991).

2.6.3.1. MOLLEROSINA.

En el año de 1993, Okazaki y cois, identif icaron la mollerosina como el tóxico

presente en harinas de pescado sobrecalentadas, que causa el síndrome de l vómito negro

aviar o erosión de la molleja.

El término mollerosina se deriva de [2-amino-9-(4-imidazol)-7 ácido azanonanoico];

relaciona a la molleja (molí) con erosiones (eros) (Osuna, 1984). Se forma al reaccionar por

sob reca lentam iento la L-histidina o la histamina c on el radical épsilo n amino d e la Usina. La

hi8t idina form a parte de los aminoácidos solubles del pe scado y se puede encontrar en el

extracto acuoso (Osuna, 1989). Por lo tanto, la toxina se produce en harinas de pescado

ricas e n histid lna Ubre y calentadas a temperaturas e levadas por varias h oras (135°C x 3 -

horas ó 160°C x

1

hora). Todo parece indicar que la hist idina e s el p recursor de la síntesis

de la mollerosina al sobrecalentarse la harina de pescado (Okazaki et al., 1983; Osuna,

1984; Go nzález, 1985). (Flg. 4).

No tod os los peces contienen hist idina en su com ponente de aminoácidos so lubles,

solo se encuen tra en los pescados de carne roja, como anchoveta, macarela, jurel, sardina,

etc. Si la harina de pe scado es def ic iente en hist idina, el sobrecalentamiento no p roducirá

efectos tóxicos. (Osuna, 1985; Masumara, et al., 1985; Castro, 1987; Rodríguez, 1990;



Chávez, 1991).

Aún cuan do e l precursor de la mollerosina es soluble en agua, se ha demostrado que

el material tóxico p resente en la harina de pescado es insoluble en agua, una vez formado

el compuesto. (Osuna, 1985).

Según Osuna (1984), existen 3 factores predominantes en la formación de la

molierosina durante el procesamiento de la harina de pescado. Estos son: temperatura de

secado, t iempo de calentamiento y frescura de la materia prima.

COOH

c C CH , CH NH

a

NH N HISTIDINA

C

H

CH

C

CH

a

CH

2

N H j " 1 " N H j ( C H

a

)< CH COOH

NH

N

•

NH,

CH HISTAMINA USINA

CH C CH

a

CH

a

NH (CH J , CH COOH

NH

N

NH,

c

H

MOLLEROSINA

Figura 4. Posible reacción entre la his t idina o la his tamina con la l is ina en la formación de

mol leros ina por ca lentamiento de la har ina de pescado

El síndrome del vómito negro es un problema mundial que afecta a la Industria

avícola. Se han reportado casos de vómito negro en Alemania, Australia, Brasil, Chile,

Colombia, Ecuador, Estados Unidos, Japón, México, Perú, Venezuela, Yugoslavia y Reino

Unido (Pokniak et. al, 1978 citado por Rodríguez, 1990). En México y Perú se conoce el

problema desde 1968 (Morales et al, 1991).



El vómito neg ro aviar se relaciona principalmente co n la presencia de erosiones y

ulceraciones severas del revest imiento de la molleja, también se presenta distención y

acidez del proventrículo y del buche. Esto provoca una disminución en la tasa de

crecimiento, en la efic iencia al imentic ia y puede aum entar considerablemente la mortal idad

de las aves (Osuna , 1984; Castro, 1987; Rodríguez, 1990: Morales e t al., 1991). La erosió n

de la molleja es el resultado del exceso de ácido en el proventrículo. La regurgitación de

bilis de sde el du cto b il iar hacia la molleja tiende a neutralizar el ácido ; por lo tanto, cu alquier

interferencia en la producción de bi l is hacia el Intest ino puede producir erosión de la

molleja. (Osuna, 1989; Rodríguez, 1990; Morales et. al., 1991).

La mollerosina se absorbe en el duodeno y transportada en e l torrente circulatorio

pud iend o detectars e en el plasma y actuando p osteriorme nte en los receptores HistaTníntcos

H

2

, principalmente d el proventrículo causan do así, un aumento de la secreción ácida (I to

et al., 1988).

Masum ara et. al. (1985) añad ieron 6.25 mg de mollerosina sintética/kilo de dieta y

con ellas alimentaron a pollos ad Gbitum durante 7 días, al f inal observaron severas

erosiones en la molleja. Tam bién estudiaron el efecto de diferentes niveles de m ollerosina

e hlstamina sobre e l contenido total de ácido gástrico en los pol los, observando que éste

aumenta con la mollerosina e hlstamina. Sin embargo, observaron qu e la mollerosina es 10

veces más potente para inducir la secreción gástrica en los pollos que la hlstamina y 300

veces más potente para causar erosión en la molleja.

La

toxicida d letal de la mo llerosina po r vía oral, provoc a una mortalidad cre ciente del

20 al 50% cuando se dosif ica directamente e n el buche de pol los de engorda; p or otro lado,

los estudios de toxicidad letal realizados a través de concentraciones crecientes de

mollerosina en la dieta (0.1 a 18ppm) indican que los pol los de engorda no mueren al

consum ir men os de 2 ppm de mollerosina, aunque si se p resentan lesiones en la molleja. Por

lo cual, se insiste q ue la concentración máxima permisible de m ollerosina e n las dietas para

pollos es de 0.3ppm p ara no afectar la prod uctividad . (Masumara e t al., 1985; Osun a, 1989).

El efecto de la mollerosina se disminuye al inyectar Intramuscularmente cimetidina,

un antagonista de los receptores histamínicos H^ La cimetidina también previene la erosión

de la molleja, causada por la mollerosina (Masumara et al., 1985; Ito et al, 1988). El efecto

de la mollerosina no se dism inuye al Inyectar plr i lamlna, u n antagonista de los receptores



H,, Indicando que la moilerosina es un agonista muy fuerte de los receptores hlstamínicos

Kj. Adem ás, la moilerosina muestra más af inidad por la superf ic ie de las células receptoras

de la histamina , que la histamina m isma, lo cual explica, en parte, la potente actividad de la

moilerosina para inducir secreción gástrica y causar erosión en la molleja (Ito et al, 1988).

La moilerosina se puede determinar por cromatografía líquida (HPLC): sin embargo

es un prueba difícil y costosa. Por esta razón, Castro en 1987, desarrolló una prueba

biotoxlcoiógica que identif ica verásmente las harinas causantes de vómito negro aviar. Esta

prueba biotoxicológica consiste en bioensayos con pol l i tos de 1 día de edad que se

al imentan por tres días con una dieta basal s in harina de pescado y posteriormente se

alimentan durante una semana con dietas que incluyen niveles altos (40%) de la harina de

pescado a evaluar. Terminado este período de alimentación, los pollos sobrevivientes, se

sacrif ican y se evalúan las lesiones en la molleja. El grado de severidad de estas lesiones

permite clasif icar la calidad biotoxlcoiógica de las harinas de pescado en 4 grados: normal,

leve, mediana y grave y se les dá un valor o score biotoxicológico:

- Harinas de pe scado de toxicidad normal o nula: Son aquéllas que no causan ningún daño

o lesión en la molleja. Score 0 - 0.5.

- Harinas de pescado de toxicidad leve: Causan lesiones histopatológicas muy leves en la

molleja, caracterizadas por pequeñas úlceras, hemorragias y ne crosis o bien enrojecimiento

de las corrugaciones. El mercado sudafricano considera este nivel d e biotoxicldad como el

límite máximo aceptable para las harinas que importa. Score >0.5 - 1.0.

• Harinas de pescado de toxicidad media: Causan evidentes signos de lesiones

histopatológicas en extensas áreas de la molleja. Score > 1 .0 -1 .5 .

- Harinas de pescado de toxicidad grave: Causan severas y mortales lesiones

histopato lógicas d e la molleja. Pueden Incluso perforar la mo lleja y causar los típicos casos

de vóm ito negro aviar. Su uso no es recomendable en al imentación animal. Score > 1.5.

>

En salmó nidos hay evidencias que la L-Mollerosina puede provocar alteraciones en

la mucosa intest inal y atrof ia de la capa muscular del estómago, reduciendo en

consecuencia e l crecimiento. Y se recomienda un score biotoxicológico <0.8. Se ignora s u

efecto en crustáceos. (Castro, 1987; Chávez, 1991).

Cabe señ alar, que la mo ilerosina no es el único factor, aunq ue sí el más importante,

para causar erosión en la molleja. La erosión de la molleja se ha relacionado co n el



consumo de altos niveles de cobre en la dieta, ácidos grasos pol i insaturados, dietas

def ic ientes en vitamina K y en metionina, (Galleguillos, 1993), altos conten idos de hlstamina

(Harry et al., 1975) y pérdida del grado de frescura de la materia prima (Osuna, 1984).

Para veri f icar s i la harina de pescado fue sobrecalentada s e recomienda determinar:

• D isponibi lidad de Usina ; Esta determinación mide el grado de deterioro térmico sufrido

por las proteínas. La l is ina t iene un grupo amino l ibre y reactivo que debe permanecer com o

tal, pues de lo contrario, aunque puede evaluarse químicamente, no estará biológicamente

disponible. D urante el procesamiento d e la harina de p escado, el grupo amino Ubre de la

Usina puede reaccionar con moléculas no proteicas para formar compuestos, los cuales,

pue den se r tóxicos y adem ás, la Usina ya no estará dispo nible para el anim al (Uriarte, 199T).

La disponibi l idad de la lis ina se puede determinar mediante el método de Carpenter (Castro,

1990; Cía. Pesquera, San, Pedro, 1991).

- Diqestibilídad de la Proteína:

No basta que la proteína de la harina de pesca do se en cuen tre en altos porcen tajes,

sino que debe ser digerible para que pueda ser aprovechada por el organismo que la

consu ma . (Cía. Pesque ra San Pedro, 1991). El método de diqestibilídad In vitro con pepsina

es un buen indicador para evaluar el proceso de secado de la harina de pescado, y

diferenciar entre una harina de m ala calidad y una buena, pero no diferencia un a buena de

una excelente. Actualmente, se usa como indicador, la dlgest lbl l idad in vivo con mink y

truchas y se están tratando de establecer nuevas determinaciones in vt tro que sean más

sens ibles (Pike, 1988 visto en C astro, 1990; Pike and Hardy, 1992; Com . pers. Cruz-Suárez,

1993).

Una digest ibi l idad def ic iente también ocasionará problemas importantes de

contaminación al ser el iminados al medio ambiente excretas con alto contenido d e nitrógeno

y fósforo (Cía. Pesquera San Pedro, 1992).

2.7. NORMA OFICIAL MEXICANA.

La Norma Oficial Mexicana (SEC0F1) NOM-Y-13-1990. Harina de pescado para

consum o anima l, c lasifica las harinas en 4 cal idades

A, B,

C y D principalmente en funció n

de la proteína. Loa únicos parámetros de cal idad que considera son la composición



bromatoiógica, la dlgest ibi l idad in vi t ro con pepsina y la cal idad microbiologica, No

considera el contenido de bases volátiles totales (TVN) de la materia prima, contenido de

histamina en la harina de pescado y e l score biotoxicológico.



I I I . - OBJETIVOS.

O B J E T I V O G E N E R A L

Proponer es tándares de ca l idad con respec to a la f rescura de la mater ia

p r ima , s c o re b i o t ox i c o lóg i c o y c on t en ido de mo l l e ros ina en ha r i nas de

pes c ado rec omendadas pa ra l a nu t r i c i ón de l c amarón b l anc o (Penaeus

v annameí ) .

OBJ ET I VOS PARTI CULARES.

1. - Determ inar e l e fec to de la f rescura de la ma ter ia pr im a sob re la ca l ida d

nu t r i c i ona l de l as ha r i nas de pes c ado u t i l i z adas en a l imen t os ba lanc eados

p a r a c a m a r ó n .

2 . - Ev a lua r l os pos ib l es e f ec t os t ox i c o lóg i c o s de ha r i nas de pes c a do c on

d i f e ren t e c a l i dad b i o t ox i c o lóg i c a (de t e rm inada en po l l os ) .

3 . - Eva luar los po s ib les e fec tos tox ic o ló g ico s de l tóx ico DL -Mol leros ína en

nu t r i c i ón de l c amarón .

IV. - HIPOTESIS.

E l c rec im ien t o de l os c am arone s c u l ti v ados d epen de , en g ran m ed ida , de l a

c a l i dad de l as ha r i nas de pes c ado c on l as que s on a l imen t ados . La f res c u ra de l a

mat e r i a p r ima de l as ha r i nas , e l s c o re b i o t ox i c o lóg i c o y (a mo l l e ros ina pueden

afec tar e l c re c im ien to , la tasa de con vers ión a l imen t ic ia y la sob rev ive nc ia de d icho s

o r g a n i s m o s .



V. - MATE RI AL Y M ETODO S.

1 . - EFECTO DEL GRADO D E FRESC URA.

1.1 . HARINAS DE PESCADO EXPERIMENTALES.

Para determ inar s i la f rescu ra de la mater ia pr ima a fec ta la ca l ida d nut r i c ion a l

de l as ha r i na s de pes c a do , s e ev a lua ron ( e n dos b i oens ay o s ) 3 ha r inas de pe s c ado

prov en ien t es de Sudam ér i c a , e l abo rada s a bas e de anc hov e t a y p roc es ad as a ba ja

t emp era t u ra , v a r i and o ún i c ame n t e e l g rad o de fres c u ra d e la ma t e r i a p r ima en c ada

una de e l las ; mater ia pr ima f resca (HPF) e laborada 12 horas después de la captura ,

f res c u ra med í a (HPFM ) , e l abo rada des pué s de l as 25 ho ra s de c ap t u ra y

des c om pue s t a (HPD) p roc es ad a 36 ho ras des pu és de la c ap t u ra (Tab la No . 2 ) . Las

har inas fueron proporc ionadas y ana l i zadas por e l Dr . lan H. P ike, d i rec tor de

nu t r i c i ón de l a As oc iac i ón I n t e rnac iona l de P roduc t o res de Har i na y Ac e i t e de

Pescado ( IFOMA, por sus s ig las en ing lés ) , Londres , U.K .

Tab la No. 2 . - CO MP OS ICION DE LAS HAR INAS EXPERIMENTA LES.

PARAMETRO

B ase húmeda '

HPF HPMF

HPD

Humedad (%)

7.8 9.3 9.7

Ceni za (%) 11.3 11.4 10.7

Grasa cruda (%)

8.3 7.8 9.8

Proteína cruda (%)

66.9 64.8 63.0

Histam lna (ppm ) 28.0 1850.0 4701.0

Cadaverina (ppm)

51.0 803.0

1599.0

Putresina (ppm)

35.0 446.0

916.0

Tiramina (ppm)

0.0

285.0

657.0

TVN de la MP

14.0 30.0 50.0

(mg N/ lOOg m uestra)

Dlgest lb i l idad

en Mink (%)

91.4

89.7 89.8

HPF: Har ina de pescad o f rasea.

HPFM: Harina de pescado de frescura media.

HPP: Har ina de pescado descompues ta.

TVN: Contenido d e bases volát i les to ta les .

MP: Mater ia pr ima.



L a c o m p o s i c i ó n b r o m a t o i ó g i c a , el conten ido de bases vo lá t i les to ta les y

am inas b i ogén i c as y e i po rc i en t o de d i ges t i b i i i dad en m ink , f ue ron ana l i z adas

m e d i a n t e lo s m é t o d o s p r o p u e s t o s p o r Ja IAFM M (1985 a y b) y la A. O. A. C. (19 90).

1 .2 . DIETAS EXPERIMENTALES.

1.2 .1 . FORMULACION Y COMPOSICION DE LAS DIETAS.

Con es tas har inas se formularon 3 d ie tas exper imenta les (Tab la No. 3) . Las

f o rmu lac iones s e rea l i z a ron po r med io de un p rog rama c ompu t ac iona l M i x i t -2 , en

f unc ió n de l a c om pos i c i ón b rom at o ióg i c a de l as ha r i nas de pes c ado ex per imen t a les

y de l os demás i ng red ien t es , pa ra ob t ener d i e t as i s oenergé t i c as , c ump l i endo c on

los requer im ien t os n u t r i c i ona les pa ra c am arón p ub l i c ad os po r Ak i y am e t . a l . (1991) .

Tabla N o. 3.- CO MPOS ICION DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES

I N G R E D I E N T E ( % )

D F

D M F D D

H.P . F re s c a 3 0 .0

H . P . m o d e r a d a m e n t e f r es c a

—

3 0 .0

H . P . D e s c o m p u e s t a

3 0 .0

H . d e C a m a r ó n 6 . 0

6 .0

6 .0

Pa s t a d e So y a 1 1 .0 , 1 3 .0 4 .0

H . d e T r i g o 3 8 .0 3 6 .0 3 4 .0

G l u t e n d e M a i z

8 .0

8 .0

8 .0

L e c i t i n a d e S o y a

2 .8

2 .8

2 .8

A c e i t e d e P e s c a d o 1 . 7

1 .7

1 .7

M e z c l a v i t a m í n i c a 1 . 0 1 . 0

1 .0

y m i n e r a l

A g l u t i n a n t e

0 .6 0 .6 0 .6

*DF: Dieta a base de H.P. fresca.

DFM: Dieta a base de H.P. frescura media.

DD: D ieta a base de

H.P.

descompues ta.

Mezc la v i tamínica y m inera l : Potas io 250mg; V itamina C 200mg; RIbof lav iba 100mg;CakHo 1 0mg ;Vf tE

lOOmg; Vit . B

1 2

l00 mg ; Z inc 100m g; B iot ina SOmg; Mangane so 0.5mg; C loro 50mg; Sodlo25mg;

Vrt-A 25mg;Tlamina lOOmg; Niacina lOOmg; V/ t D 50mg; Vìt B

t

100mg; Magnesio 10mg; Cobre

25mg; Ac . pantoténìcol OOmg y Selenio 50mg. exc ip iente c .b.p. 12g de carbohidratos .

Las ha r i nas d e pes c a do f ue ro n i nc l u i das a 30% . Se v a r i ó el nivel de inctusión

de la pas ta de soya y la har ina de t r igo para obtener d ie tas i soenergét icas . E l n ive l

de i nc l us i ón de l res t o de l os i ng red ien t es s e man t uv o c ons t an t e en l as 3 d i e t as



ex per imen t a les . E l apo r t e de nu t r i en t es de c ada i ng red ien t e s e p res en t an en e l

anexo I .

1 .2 .2 . PREPARACION DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES.

Todos l os i ng red ien t es s e mo l i e ron f i namen t e u t i l i z ando un mo l i no de c a f é

Mou l i nex . Se pes a ron de ac uerd o a l a f o rmu lac ión y s e mez c la ron en una ba t i do ra

K i t c hen A id de 5 l i t r os . P r imeramen t e s e mez c la ron l a ha r i nas de pes c ado , s oy a ,

t r i go , c ama rón y g l u t en de ma í z . Pos t e r i o rmen t e s e t om ó una po rc i ón de es t a mez c la

para ad ic ionar las v i taminas ; e l res to de la mezc la de har inas se fue añadiendo

lentam ente con e l f in de hom oge nizar la me zc la g lo ba l . E l ace i te de pes cad o y la

lec i t ina de soya se agregaron después de mezc lar las har inas . F ina lmente , se

añad ie ron 275 m i de agua . La mez c la de i ng red ien t es s e pas ó po r un mo l i no de

carne para obtener los pe l le ts (1mm de d iámet ro) , los cua les se secaron en una

es t u fa e l éc t r i c a a 50° C du ran t e 15 ho ra s y s e c ons e rv a ron en re f r i ge rac ión den t ro

de rec i p i en t es he rmét i c os .

1 .2 .3 . ANALISIS DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES.

Cada una de las d ie tas fue ana l i zada en e l Laborator io de A l imentos de la

Fac u l t ad de C ienc ias B io l óg i c as med ian t e e l mé t odo de aná l i s i s p rox ima l des c r i t o

por la A .O.A.C. (1990) , en e l cua l se determinan los s igu ientes parámet ros :

humedad, cen iza, ex t rac to e téreo, f ib ra c ruda, pro te ína c ruda y ex t rac to l ib re de

n i t rógeno .

Se rea l i zaron pruebas da-es tab i l idad de l a l imento en e l agua o de l i x i v iac ión

en c ada una de l as d i e t as med ian t e e l mé t odo Aqu ac op (1978) pa ra de t e rm ina r l a

pérd ida de mater ia seca en agua mar ina a 35%o durante una hora.



1.3 . B IOENSAYOS.

1.3 .1 . DESCRIPCION DE LA SALA DE BIOENSAYOS.

Los b i oens ay os s e l l ev a ron a c abo en l a s a la de b i oens ay os de l p rog rama

ma r icu l tura d e la Facu l tad de Cienc ias B io lóg icas , la cua l cons ta de 48 tanq ue s de

f i b ra d e v i d r i o de 60 x 30 x 35 c m, c on un v o lum en de 60 l i t r os , cada ac ua r i o pos ee

un dob le f on do d e 3 m m de d i ám et ro c ub ie r t o c on t e la de gas a . Los t anque s es t án

equipados con un s is tema de "a i r l í f t " para fomentar (a c i rcu lac ión in terna ent re e l

dob le fondo y e l res to de l acuar io . E l recambio de agua fue de 560 ml /min . en cada

ac uar i o .

La s a la c uen t a t amb ién c o n 3 t anque s de 500 I da c apac ida d pa ra

p reengorda y c on 5 t anques de 1100 I , de l os c ua les , dos s on res e rv ónos que

abas t ec en de agua a l os ac uar i os po r g rav edad y e l res t o rec i ben e l agua de

rec amb io . Cada t anque res e rv o r i o c uen t a c on un c on t ac t o r b i o l óg i c o ro t a t o r i o .

Además , e l s i s t ema es t á equ ipado c on 2 f i l t r os de c a r t uc ho , 2 f i l t r os de c a rbón

ac t i v ado y 2 es pum ado res . Pa ra man t ener l a t empe ra t u ra des ea da s e c uen t a c on un

s i s t ema c e r ra do de agua du l c e e I n te r c amb iador de c a lo r en l os t anque s

res erv or io s . (Ver ane xo I I , f i gs . 5 , 6 y 7) .

D ia r i amen t e s e reg i s t ra la t empera t u ra c o n un t e rmó me t ro , l a s a l i n i dad

med ian t e un s a l i nómet ro y e l pH c on un pHmet ro . Semana lmen t e s e de t e rm ina e l

c on t en ido de amon io , n i t ra t os y n i t r i t os c on es t uc he de d i agnós t i c o ráp ido (Sea

tes t ) . Quincenalmente se prepararan 500 I de agua mar ina s in té t i ca Fr i t z y se

renuev a e l c a rbón ac t i v ado .

1 . 3 .2 . CARACTER I ST ICAS DE LOS CAMA RONE S.

Para rea l i z a r l os b i oens ay os s e u t i l i z a ron pos t l a rv as de Penaeus v anname i

c on un pes o p romed io de 900 mg y 1 . 5g que s e ob t uv ie ron de l Labora t o r i o de



Produc c ión de Pos t l a rv as de l a Un i v e rs i dad Au t ónoma de Tamau l i pas , l as c ua les

f ue ro n t rans por t adas a la s a la de b i oens ay os de la Fac u l tad de C ienc ias B io l óg i c as ,

en bo l s as d e p l ás t i c o c on agua de l t anqu e de c o lec t a y s e c o loc a ron en h i e l e ras c o n

un poc o de h i e l o pa ra ba ja r e l me t abo l i s mo de l os c amarones . Se ac l ima t a ron en

los t anques de p reengorda de l a s a la de b i oens ay os .

1 .3 .3 . DISEÑO EXPERIMENTAL.

Se rea l i z a ron dos b i oens ay os . En e l p r ime ro s e c o loc a ron 15 c am arone s p o r

ac uar i o c on un pes o p rom ed io de 900 mg y s e a l imen t a ron ad l i b i t um 2 v ec es a l dí a

( 1 /3 de la rac ión en ía mañana y e l res to por la tarde) con las 3 d ie tas

ex per imen t a les du ran t e 14 d í as .

En e l s egun do b ioens ay o s e c o loc a ro n 8 c am arone s po r ac uar i o c on un pes o

prom ed io de 1 . 5g y s e a l imen t a ron ad l i b i tum c on l as d i e tas ex per imen t a les du ran t e

28 días.

En ambos b i oens ay os c ada t ra t am ien t o s e c o r r i ó c on 4 rep l i c as .

Diar iam ente se reg is t ró la mo r ta l ida d y res to de a l ime nto . Se s i fon eó e l fond o

de l os ac uar i os pa ra e l im ina r hec e s y res i duo s de a l imen t o .

1 . 4 . EVALUAC I ON B I OLOGI CA .

A l f ina l de ambo s b ioensayos se determinó (a t asa de c rec imiento (TC) , consu mo

de a l ime nto (CA ) , la tasa de con vers ión a l iment ic ia (TCA) y sobre v ivenc ia (S) de los

e jemp la res de c ada t ra t am ien t o , med ian t e l as s i gu ien t es f ó rmu las :

peso f ina l - peso in ic ia l

Tas a de Crec im ien t o (TC )= x 100

peso in ic ia l (g)



A l imen t o c ons um ido

Tas a de Co nv ers i ón A l im en t i c i a = x 100

Pes o ganado

No. f ina l de an imales

Tas a de Sobre v i v enc ia = x 100

No. in ic ia l de an imales

1.5 . ANA LISIS ESTAD ISTICO.

Para determinar s i ex is t ie ron d i ferenc ias s ign i f i ca t i vas ent re los t ra tamientos

de l os pa rám et ros b i o l óg i c os ev a luados s e rea l iz a ron aná l i s is de v a ri anz a (ANOVA)

y p ruebas de c omparac ión de med ias de Sc he f f e , po r med io de c ompu t adora c on

e l p rog rama S t a t g raph i c s .



2.. EFECTO DEL SCORE BIOTOXICOLOGICO Y DEL TOXICO DL-MOLLEROSINA.


Para eva luar la ca l idad de las har inas de pescado de d i ferente score en la

a l imen t ac ión de l c amarón , s e ev a lua ron 4 ha r i nas de pes c ado de d i f e ren t e s c o re

b io t ox i c o lóg i c o ( t ab la No . 4 ) . E l s c o re b i o t o x i c o lóg i c o de l as ha r i nas , f ue ev a luado

por Em i l i o Cas t ro de Fundac ión Ch i l e en San t i ago , Ch i l e , med ian t e un b i oens ay o

b io t ox i c o lóg i c o en po l i os (Cas t ro , 1990) .

Las Har inas fueron c las i f i cadas de la s igu iente manera:

Sc ore 0 . 1 : Norma l o a t óx i c a (HPNJ . Har i na no rma l (a ) . Con t ro l .

S c o r e 0.1 : No rm a l o a t óx i c a (HP N

b

) . Har ina normal (b) .

S c o r e 1.1 : To x ic ida d med ia (HPMg) y con a l to conten ido de h is tam ina.

Sc o re 1 . 4 : Tox i c i da d med ia (HPM ^ y ba jo c on t en ido de h i s t am ina .

Es t as ha r i nas y e l ac e i t e de pes c ado f ue ron p roporc i onadas po r Pes quera

IQUIQUE-GUANAYE, de Sant iago, Ch i le .

La c a l i dad qu í m ic a de l as ha r i nas de pes c ado f ue ev a luada en Fundac ión

Ch i l e med ian t e , aná l i s i s b romat o lóg i c os (A . O . A . C . 1990) , c on t en ido de bas es

vo lá t i les to ta les (TVN) en mater ia pr ima y produc to f ina l , conten ido de aminas

b iogén i c as , c on t en ido de c a l c i o , f ós f o ro , s a l , a rena , ác i dos g ras os l i b res ( I AFMM,

1985 a y b) y porc iento de d iges t ib i l i dad in v i t ro con peps ina (Tor rey modi f i cado) .

Se ev a luó s u c a l i dad m ic rob io l òg i c a de t e rm inando e l c on t en ido de Sa lmone l l a s p ,

« ho ng os y levad uras ( IAFM M, 1985 a y b) .



TABLA N o.4.- COM POSICION DE LAS HARINAS DE PESCADO EXPERIMENTALES.

PARAMETRO

HPN(a)

HPN(b) HPM(a) HPM(b)

Score bloto xlcoló glco 0.1 0.1 1.1 1 A

Morta l idad en pol los %

0.0

0.0 7.0 23.0

Mater ia pr ima Jurel Jure l Anchoa Jure l

T ipo de secad o vap/a i re

vap/a i re

l lama

llama

Solub les [ ] s i s i s i

-

Agua sangre coc ida no no s i

no

TVN. M.P.(mgN/100g)

19.2

14.2

50.0

_

TVN de H.P.(m gN/1 OOg) 162.8

163.5

125.2 157.2

Hls tamina (ppm)

320.0 230.0 4840.0 120.0

Cadave rina (ppm) 720.0 850.0 4040.0 580.0

Putreslna (ppm)

180.0 150.0

1760.0 160.0

Fenilet i lamina (ppm)

10.0

12.0 410.0 10.0

Tiramina (ppm)

n.d. 80.0 240.0 n.d

Humedad (%)

3.1

7 A

9.6 8.8

Ceniza (%) 14.8 17.3 17.3 14.8

Grasa (%) 7.2 7 5

7.1

6.6

Proteína (%) 88.7 87.1 64.0 67.8

Calc io (%) 3.7

4.5

3.7 3.2

Fósforo (%)

3.0 3 3 2.6 2.3

Sal (%)

1.7

2,2

3.8 2.6

Arena (%)

<0.1 <0.1

<0.1 <0.1

Ac idos grasos l ibres (%) 3 A 2.9 9.7 4.0

Dlgest ibi l idad (%)

-

(Pepsina, Tor rey Mod if icado) 97.1 97.7

96.3 96.2

Us ina d isponib le (%) 7 5

1*

7.8 7.2

Salmonel la en 25g Negat ivo Negat ivo Negat ivo

Negat ivo

Hongos y levaduras

10.0 15.0

20.0

5.0

UFC/g

HPN(a) = Harina de Pescado Normal (a) CONTROL.

HPN(b) = Harina de Pescado Normal (b)

HPM(a) - Harina de Pescado de tox ic ida d media (a), atto conte nido de histam lna.

HPM(b) = Har ina de Pescado de Tox ic idad media (b), ba jo contenido de h ls tamina.

TVN = Basas volát i les to ta les .

M.P. = Mater ia pr ima.

H.P. = Harina de pescado.

2 . 2 . ORI GEN D EL TOXICO OL-MOLLEROSI NA .

La DL- mol le ros ina s in té t i ca fue comprada a e l Dr . Lermonth de l CISR

(D iv i s i ón o f Food Sc ienc e and Tec hno logy . Food and Agr i c u l t u ra l Chemic a l s

P rog ramme) en Sudá f r i c a . Fue env iada po r c o r reo en un v i a l de v i d r i o s e l l ada a l

v ac í o . Se rec i b i e ron 25m g s ec ados en ro t ov ap or . Pa ra d i s o l v e r l a s e le añad ió 1m l

de agua (po r i nd i c ac ión de l p rov eedor ) y l a s o luc i ón ob t en ida s e a f o ró a 25 m i .



P os te r i o r m en te s e t om ar on 6 m i de l a s o l uc i ón y s e gua r dó en c onge l ac i ón . Los

19m l r es tan tes s e a fo r a r on a 38m i y pos te r i o r m en te s e t om ar on 2m t ( pa r a p r epar a r

l a d i e ta c on 1 m g de m o l l e r os i na ) ; 6m l ( 3m g) , 12m l ( 6m g) y I 8m l ( 9m g)

2 .3 . D IE TA S E X P E RIM E NTA LE S .

2 .3 .1 . FORM ULA CION Y COM P OS ICION DE LA S D IE TA S .

Con l as ha r i nas de pes c ado ex per i m en ta l es s e f o r m u l a r on 4 d i e tas . La d i e ta

c o n H P N

a

s e us ó c om o c on t r o l ; adem ás c on l a HP N

a

s e p r epa r a r on o t r as 4 d i e tas

a l as c ua l es , s e I es añad i e r on d i fe r en te s c onc e n t r ac i o nes d e l t óx i c o DL- M o l l e r os i na

( 1 , 3 , 6 y 9 m g /k g ) ( Tab la N o . 5 ) . Las f o r m u l ac i on es s e r ea l i z a r on po r m ed i o de u n

p r o g r a m a c o m p u t a c i o n a l M i x i t- 2 + e n f u n c i ó n d e l a c o m p o s i c i ó n b r o m a t o l ó g i c a d e

l as ha r i nas de pes c ado ex per i m en ta l es pa r a ob tene r d i e tas i s oener gé t i c as .

TABLA No 5. COM POSICION DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES.

INGREDIENTE (%) DNa DNb DMa DMb D1ppm D3ppm

DQppm

D9ppm

H. Pescado Normal (a)

3 0 . 0

_

30.0 30.0 30.0

30.0

H. Pescado Normal (b)

. —

30.0

—

—

—

—

. —

H. Pescado Media (a)

—

—

30.0

—

—

—

—

—

H. Pescado Media (b)

.—

— —

30.0

—

—

—

—

Pasta de Soya 2 8.0 8.7 11.9 8.1 8.0 8.0 8.0 8.0

H. de Tr igo 2

47.6

46.9 43.6 47.3 47.6 47.6 47.6

47.6

H. de Cam arón 2 2.0 2.0 2.0 2.0

2.0

2.0 2.0

2.0

Gluten de Tr igo

8.0

8.0 8.0

8.0

8.0

8.0 8.0 8.0

Lecit ina de Soya 2 2.3 2A

2.3

23 2.3 2.3 2.3 23

Acei te de Pescado 2

1.7 1.7

1.7

1.7

1.7

1.7 1.7 1.7

Mezcla Vitamín ica 2 0.2 0.2

0.2 0.2 0.2

0.2

0.2

0.2

Mollerosina (mg)

1.0

3.0 6.0 9.0

DN: Dieta con harina d e pescado de toxicidad no rmal*. Dieta control.

DL: Dieta con harina d e pescado de toxicidad normal

0

.

DM: Dieta con harina de pesca do de tox ic idad mediana*. »

DG: Dieta con harina de pescado de tox ic idad mediana".

D1ppm, D3ppm, D6ppm y D9ppm. D ietas con har inas de pescado

normal, y

con d i ferentes concen t rac iones de

mol leros ina.

Mezcla v itamínicsuV it . A 6*800,00 Ul; Vtt . D3 3*320,00 U l; Vt t E 177,600 Ul; VIt K &8 00g ; Tiamin a 66.400g; Rib of lav ina

44.400g; B „ 0.0440; Ac . Fói ico 2.800g, P ir fdoxina 22.000g; Ac . Pantotén lco 44.400g; N lac ina 13 320 0g; B iot ina

0.444g; Inositol 133.200g, ant iox idante 2.672g , excipiente salvado de tr igo c.b. p. 1 k i lo.

Las Har i nas de pes c ado s e i nc l uy e r on a l 30%. S e v a r i ó e l n i v e l de i nc l us i ón

de l a pas ta d e s oy a y l a ha r ina de t r i g o pa r a ob ten e r d i e ta s i s oener g é t i c as . E l n i v e l

de i nc l us i ón de l r es to de l os i ng r ed i en tes que c om ponen l as d i e tas s e m an tuv o

c o n s t a n t e .



E l apo r t e de nu t r i en t es de c ada i ng red ien t e y de c ada f ó rm u la s e p res en t an

en el anexo I I I .

2 .3 .2 . PREPARACION DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES.

Se s i gu ió e l m i s mo p roc ed im ien t o des c r i t o pa ra e l ob je t i v o de f res c u ra . La

mo l l e ros ina s e ag regó d i s ue l t a en e l agua .

2 .3 .3 . ANALISIS DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES.

Cada una de las d ie tas fue ana l i zada en e i Laborator io de A l imentos de la

Fac u l t ad de C ienc ias B io l óg i c as , med ian t e e l mé t odo de aná l i s i s p rox im a l des c r i t o

po r l a A . Q . A . C . (1990), de t e rm inand o l os pa ráme t ros des c r i t os en e l b i oens ay o de

f res c u ra .

2 .4 . B IOENSAYO.

E i b ioensayo se rea l i zó en la sa la de b íoensayos desc r i ta anter iormente.

2 . 4 . 1 . CARACTERI ST I CAS DE LOS CAMARONES.

Para real izar el b ioe nsay o se ut il izaron post larva s de Pena eus vann am ei co n un

pe s o p rom ed io de 0 . 066g p roc e den t es de la g ran ja "Las Lom i t as " de E s c u inapa ,

S in . Méx i c o . Las l a rv as f ue ron t rans por t adas en bo l s as de p l ás t i c o c on t en iendo

agua de i es t anque de c o lec t a den t ro de h i e l e ras c on un poc o d e h i e l o pa ra ba ja r

e l me t abo l i s mo de l os c amarones . Fueron env iadas po r av i ón . Pos t e r i o rmen t e s e

t ras ladaron a la sa la de b íoensayos de la Facu l tad de Cienc ias B io lóg icas de la

U. A . N . L . y s e ac l ima t a ron en t anques de p reeng orda .

2 .4 .2 . DISEÑO EXPERIMENTAL.

En c ada ac uar i o s e c o loc a ron 15 c amarones de 0 . 055 a 0 . 080g y s e

a l imen t a ron d i a r i amen t e ad l ib r t um du ran t e 28 d ías c on l as 8 d i e t as e x per imen t a les .

Cada t ra t am ien t o s e c o r r i ó c on 4 rep l i c as , ex c ep t o l os ú l t imo s 14 d í as , y a qu e un

rep l i c ado s e s ac r i f i c ó pa ra reemp laz a r l os c amarones muer t os de l m i s mo

t ra ta mie nto y ev i tar as í , tener una in ter ferenc ia en los resu l tado s de c rec imie nto p or



un e f ec t o de dens idad . D ia r i amen t e s e s i f onearon t odos l os ac uar i os , s e reg i s t ró

l a mor t a l i dad y po rc i en t o de res t os de a l imen t o y c ada 15 d í as s e pes a ron l os

c a m a r o n e s .

2 .5 . EVALUACION BIOLOGICA.

A l f ina l de l b ioensayo se determinó la tasa de c rec imiento (TC) , consumo de

a l imento (CA) , la tasa de convers ión a l iment ic ia (TOA) y sobrev ivenc ia (S) de cada

rep l i c ado , med ian t e l as f ó rmu las des c r i t as an t e r i o rmen t e .

2 .6 . ANALISIS ESTADISTICO.

Para dete rmina r s i había d i fe ren c ias s ign i f i ca t i vas ent re los t ra tam iento s de

los parámet ros eva luados , se rea l i zaron aná l i s is de var ianza (ANOVA) y pruebas de

c o m p a r a c i ó n d e m e d i a s d e S c h e f f e , p o r m e d i o d e c o m p u t a d o r a c o n e l p r o g r a m a

S t a t g raph i c s .



VI.- RESULTADOS.

1. EFECTO DEL GRADO DE FRESCURA.


Como se observa en la tab la 2 , e l va lor de bases vo lá t i les to ta les (TVN) de

la ma t e r i a p r ima a l t i empo de s u p roc es am ien t o aum en t ó (de 14 a 50 mg N/ 100g de

mues t ra ) c on f o rm e d i s m inu y ó l a f res c u ra ; t amb ién au men t ó e l c on t en ido de am inas

b igén icas , s iendo la h is tamina la que más se inc rementó de (28 a 4701 ppm); e l

n ive l de pro te ína d isminuyó l igeramente de (67 a 63%). La d iges t ib i l i dad

de t e rm inada en m ink f ue a f ec t ada l i ge ramen t e po r e l g ra do de f res c u ra de l a

mat e r i a p r ima .

1 .2 . ANALISIS PROXIMAL DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES.

E l res u l t ad o d e l aná l i s is p rox im a l en bas e s ec a de l as d i e t as ex per im en t a les

fue s im i lar en las t res d ie tas ( tab la No. 6) , p resentando e l m ismo conten ido

energét ico . En cuanto a la es tab i l idad de las d ie tas en e l agua, se observó que la

DD p res en t ó ma y or pé rd ida de ma t e r i a s ec a (26.1 % ) que l as o t ras do s d i e t as , s i end o

la d i e t a p reparada c on ma t e r i a l moderadament e f res c o l a que p res en t ó me jo r

es tab i l idad en e l agua (17.1% de pérd ida de mater ia seca después de una hora de

inm ers ió n en agu a mar ina a 35 g /1).

TABLA No. 6.- ANALISIS PROXIMAL DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES.

PARAMETRO

*DF

DMF

DD

Proteína Cruda (%) 37.1 38.7 38.7

Grasa Cruda (%)

6.9

6.1 6.0

Ceniza (%)

8.0

8.2 8¿

Fibra (%) 2 A

2 A

2 A

E.L.N. (%) 45.9 44.8 44.8

Energía (Kcal/g) 4.6

4.6

4.6

Estabi l idad

%PMS (1 hora) 18.6 17.1 26.1

*DF: D ieta con m ater ia l f resco.

DMF: D ieta con ma ter ia l moderadamente f resco.

DD: D ieta con m ater ia l en de scompos ic ión.

PMS: Pérdida de mater ia seca.



1.3 . EVAL UAC ION BIOLO GICA (B ioen sayo I y I I ).

Loe res u l t ados p romed ios de l a ev a luac ión b i o l óg i c a de c ada b i oens ay o s e

resumen en las tab las 7 , 8 y 9 respec t ivamente.

En e l p r imer b i oens ay o (15 c amarones / ac uar i o ) l os c amarones que s e

a l imen t a ron c on l a DF p res en t a ron may or pes o p rom ed io f i na l , i nc rem en t o en p es o ,

tasa de c rec imiento (F ig . 8) y consumo de a l imento (F ig . 9) que los camarones

a l imen t ados c on l as o t ras dos d i e t as . La d i f e renc ia de es t os pa rámet ros f ue

es tad ís t i came nte s ign i f i ca t i va (P<0 .05) . (Anexo IV) . S in em ba rgo las tasa s de

convers ión a l iment ic ia (F ig . 10) y la sobrev ivenc ia (F ig . 11) no fueron

s ign i f i ca t i va me nte d i ferentes (P>0 .05) y var iaron de 2 .99 a 3 .56. y de 94 a 89% ,

respec t ivamente. (Tab la No. 7) .

TABLA No.7.- RESULTADOS PROMEDIOS DE LA EVALUACION BIOLOGICA. BIOENSAYO I. (15

camarones/acuar io)

PARAMETRO

*DF DMF DD

Replicados 4X15 4X15

4X15

Peso Inicial

Promedio (g)

0.937 0.935 0.937

D.E.

0.003

0.005 0.005

Peso Final

Prom edio (g) 1.53" 1.44"

1.37"

D.E.

0.069

0.082

0.049

Increme nto (g) 0.59

b

0.50" 0.44"

D. E.

0.07

0.08

0.05

T. Crecimiento (%)

63.04

b

64.01"

46.93"

D.E. 7.7 8.8

5.3

C on su m o (g) 1.75" 1.50" 1.55"

D.E. 0.13

0.11 0.08

T.C.A. 2.99

a

3.02*

3.58

a

D.E. 0.48 0.44 0.38

Sobrevivencia (%) 94.99"

84.99* 89.99"

D.E.

3.33 17.58

3.85

D.E. Desviación e stándar.

*Los valores con letras diferentes determinan las diferencias



significativas.

En e l b i oens ay o 11 (8 camaron es / tanque ) a los 1 4 y 28 d ías ( tab la 8 y 9 ,

respec t ivamente) , no se encont raron d i ferenc ias s ign i f i ca t i vas (Anexo IV) ent re los

t ra t am ien t os en n i nguno de l os pa rámet ros b i o l óg i c os ev a luados (F igs . 8 , 9 , 10 y

11) . La tasa de sobrev ivenc ia super ior e l 84% en todos los tar tamientos . E l repor te

de es t e b i oens ay o s e d i v i d i ó en 2 pa r t es pa ra poder l o c ompara r c on e l p r imer

b ionsayo, e l cua l tuvo una durac ión de 14 d ías .

TABLA No 8. RESULTADOS PROMEDIOS DE LA EVALUACION BIOL OGICA . BIOENSAYO I I . 14 días.

PARAMETRO *DF DMF DD

Replicados 4X8 4X8 4X8

Peso Inicial

Promedio (g)

1.52 1.56

1.52

D.E. 0.03 0.01 0.02

Peso Final

Promedio (g)

2.34

a

2.28

a

2.35*

D.E.

0.016

0.050

0.068

Incremento (g)

0.81 7" 0.735" 0.827"

D. E.

0.017 0.051 0.073

T. Crecimiento (%) 53.64

a

47.45* 54.24*

D.E. 1.59 3.43

5.14

Co nsu mo (g) 2.65* 2.31" 2.54*

D.E.

0.11

0.08 0.17

T.C.A. 3.24*

3.16*

3.09"

D.E 0.13 0.10 0.15

Sobrevivencia (%)

100.00"

90.62

a

93.75*

D.E. 0.0 11.96

,7.21

D.E. Desviación standar.



TABLA No 9. RESULTADOS PROMED IOS DE LA EVALUACION BIOLOGICA. BIOENSAYO I I . 28 DIAS.

PARAMETRO *DF DMF

DD

Replicados

4X8 4X8 4X8

Peso Inicial

Prom edio (g) 1.52 1.56 1.52

D.E.

0.03

0.01

0.02

Peso Final

Prom edio (g) 3.44

a

3.28"

3.39

a

D.E.

0.10 0.32 0.33

Incremento (g)

1.92"

1.73

a

1.86"

D. E.

0.08

0.32 0.33

T. Crecimiento (%)

125.88" 112.15

a

121.06

a

D.E.

4.34 21.21 22.38

Co nsum o (g) 6.48" 5.41"

6.09

a

D.E. 0.62 0.21 0.43

T.C.A.

3.22"

3.12"

3.23

a

D.E.

0.48 0.44 0.38

Sobrevivencia (%)

100.00*

90.62

a

93.75

a

D.E. 0.0 11.96 7.21

D.E. = Desviación estándar.

1 .4 . PARAMETROS FIS ICO-QUIMICOS DEL AGUA.

Duran t e e i t rans c u rs o de am bos b í oens ay o s la t empe ra t u ra s e man t uv o en t re

26 y 30°C; la sa l in idad var ió ent re 33 y 36%. , e l pH se mantuvo cons tante en 8 .1 y

l a c on c en t rac i ón de am on io , n i t r i tos y n i t ra t os f ue de 0 -

0.1

pp m, 0 .2ppm y de 10 a

20ppm res pec t i v amen t e .



TASA DE CRECIMIENTO

15 CAMARON ES/ACUARIO.

8 CA MARON ES/ACU ARIO.

T A S A D E C R E C IM IE N T O (% )

1 4 0

C

B IO E N S A Y O 1 (1 4 D IA S ) B IO E N S A Y O I I (1 4 0 ) B IO E N S A Y O I I (2 8 D )

EÜ lFR ESC A M MODERADAMENTE FRESCA ^ DESCOMPUESTA

PESO PROMEDIO INICIAL 0.93 (fl)(l)

PESO PROMEDIO INICIAL 1-Mo> 0I>

F igu ra No . 8 . Tas a de Crec im ien t o de ambos b i oens ay os .

ALIMENTO CONSUMIDO

( I) 15 CAMARON ES/ACU ARIO

( I I ) CAMARONES/ACUARIO

C O N S U M O ( g )

PESO PROMEDIO INICIAL 0.93 (fl>Q)

PESO PROMEDIO INICIAL l«g> ( I I )

F igu ra No . 9 . Cons umo de a l imen t o po r c amarón de ambos b i oens ay os .



TASA DE CONVERSION ALIMENTICIA

( l ) 15 CAMARONES/ACUARIO

<l l ) 8 CAMARONES/ACUARIO

T A SA D E C O N V E R S I O N A L I M E N T I C I A

4 -

3 -

2 -

t

•

0-

PESO PROMEDIO INICIAL 0.93 (gKt)

PESO PROMEDIO INICIAL 1.5(g> (II)

F igu ra No . 10 . Tas a de Conv ers i ón a l imen t i c ia de am bo s b i oens a y os .

CED FRESCA EE3 MODERADAMENTE FRESCA DESCOMPUESTA

SOBREVIVENCIA

( I ) 15 CAMARONES/ACUARIO

( I I ) 8 CAMARONES/ACUARIO

S O B R E V I V E N C I A ( % )

120 A

B IO E N S A Y O 1 (1 4 D IA S ) B IO E N S A Y O I I (1 4 D ) B IO E N S A Y O I I (2 8 O )

O FRESCA ES3 MODERADAMENTE FRESCA E ^ DESCOMPUESTA

PESO PROMEDIO INICIAL 0.93 <g)0>

PESO PROMEOIO INICIAL 15(g) (II)

F igu ra No . 11 . Sobrev i v enc ia ob t en ida en ambos b i oens ay os .



2. EFECTO DEL SCORE B IOTOXICOLOGICO Y DEL TOXICO MOLLEROSINA.

2.1 . ANALISIS PROXIMAL DE LAS DIETAS.

De ac u erdo a l aná l i s is p rox í ma l ( t a b la No . 10 ) s e pued e de t e rm ina r qu e l a s

8 d ie tas exper imenta les son isoenergét icas . E l conten ido de pro te ína var ío de 38 a

40% , e l c on t e n ido de g ras a , c en i z as y fi b ra f ue hom ogé neo e n l as 8 d i e t as . La DM

a

pres en t ó e l may or c on t en ido de h i s t am ina (3710 ppm) , en l as demás d ie t as e l

c on t en ido de h i s t am ina f ue s im i l a r .

T A B L A N O . 1 0 .- A N A L I S I S P R O X I M A L D E L A S D I E T A S .

PARAMETRO

Basa Húmeda

DNa DNb DMa DMb

DI ppm D3ppm

D6ppm

D9ppm

Hum edad (%) 2.1 3.7

4.1

5.3 4.0 5.0 3.3 2.4

Proteína cruda (%)

4 0 4

39.0 39.4 37.7 38.8 39.0 39.0 40.9

Grasa cruda (%)

7.4 7.0

6.9 7.0

7.2

72

7.3 7.2

Ceniza (%)

6,3 7,3 6.9

5.8

6.3 6.1 M 6.2

Fib ra (%) 1.6 1.5 2.4 2..1 2.7 2.2 25 2.6

E. LN . <%) 42.2 41.5 40.3 42.0 40.9 40.6 41.6 40.7

Histam ina ppm 260.0 310.0 3710.0 440.0 170.0

280.0

270.0

250.0

Energía (kc l/g) 4.69

4.95

4.51

4.49

4.53

4.53 4.53

4.64

22

EVALUACI ON B I OLOGI CA .

Los resu l ta do s prom ed io de la eva lua c ión b io lóg ica a los 14 y 28 d ías se

mu es t ran e n l as t ab la s No . 11 y 12 , res pec t i v ame n t e .

A l os 14 d í as de b i oens ay o no s e enc on t ra ron d i f e renc ias s i gn i f i c a t i v as

(P>0 . 05 ) (Anex o V ) en n i ngun o de l os pa rám et ros b i o l óg i c os ev a luados (Tab la 11 ;

F igs . No . 12 , 13 , 14 y 15 ) .



TABLA NO.11.- RESULTADOS PROMEDIOS DE LA EVALUACION BIOLOGICA. 14 DIAS.

PARAMETR O DN, DN„ DIA, DM„ D1 ppm ' D3ppm D6ppm

D9ppm

REPLICADOS

4X15 4X15 4X15 4X15 4X15

4X15

4X15

4X15

PESO MEDIO

JNICAL (g)

D.E.

o.oee

0.0

0.066

0.0

0.066

0.0

0.066

0.0

0.066

0.0

0.066

0.0

0.066

O.Û

0.066

0.0

PESO MEDIO

FINAL (g)

D.E

0.145

0.003

0.149

0.008

0.140

0.002

0.145

0.003

0.145

0.008

0.142

0.007

0.147

0.O11

0.157

0.008

INCREMENTO (g)

D.E.

0.079

0.006

0.084

0.009

0.074

0.002

0.079

0.005

0.079

0.008

0.076

0.007

0.081

0.011

0.091

0.008

TASA DE CRECI-

MENTO (%)

D . E .

120.07*

9.92

126.13*

13.62

113.25*

3.36

120.45"

8.43

119.69*

12.91

115.52*

10.66

122.72*

18>09

138.63*

1 2 ^ 7

CONSUMO (g)

D.E.

0.130*

0.003

0.135*

0.001

0.137*

0.003

0.140*

0.001

0.126*

0.003

0.136*

0.001

0.134*

0.001

0.134*

0.009

T . C A .

D.E.

1.56*

0.07

1.65*

0.24

1.83»

0.07

1 . 7 *

0.13

1.82*

0.27

1.84"

0.21

1.77*

0.19

1.48T

0.11

S O B R E V I V E N C I A ^ )

D.E.

95.00

6.38

96.74

3.75

96.66

3.85

95.08

3.28

91.66

6.38

96.66

3.85

93.33

5.44

83.66

5.44

MORTAUDAD (%)

D.E.

5.00*

6.38

3.33*

3.75

3.33*

3.85

5.00*

3.28

8.33*

6.38

3.33*

3.85

6.67*

5.44

13.34*

5 4 4

* D.E. Desviación estándar.

A l os 28 d í as de ex per imen t ac ión (Tab la No . 12 ) t ampoc o s e enc on t ra ron

d i f e renc ias s i gn i f i c a t i v as (P>0 . 05 ) (Anex o V ) en c uan t o a pes o p rom ed io f i na l , t as a

de c rec im ien t o (F jg , 16 ) , c ons umo de a l imen t o (F ig . 17 ) y t as a de c onv ers i ón

a l iment ic ia (F ig , 18) . So lo se encont raron d i ferenc ias s ign i f i ca t i vas (P=0.02) (Anexo

IV) en cuanto a l porc iento de sobrev ivenc ia o mor ta l idad (F ig . 19) .



TABLA NO.12.- RESULTADOS PROMEDIOS DE

LA

EVALUACION BIOLOGICA,

A LOS 28

DIAS

PARAMETRO DN, DN

b

DM, DM„ Dippm D3ppm D6ppm D9ppm

REPLICADOS 3X15

3X15 3X15 3X15

3X15 3X15

3X15 3X15

PESO MEDIO

INICAL (g)

D.E.

0.066

0.0

0.066

0.0

0.066

0.0

0.066

0.0

0.066

0.0

0.066

0.0

0.066

0.0

0.066

0.0

PESO MEDIO

FINAL (g)

D.E

0.316

0.032

0.300

0.055

0.303

0.032

0.320

0.036

0.326

0.023

0.296

0.023

0.300

0.030

0.326

0.032

INCREMENTO (g)

D.E.

0.250

0.032

0.237

0.055

0.237

0.032

0.254

0.036

0.260

0.023

0.230

0.023

0.234

0.030

0.260

0.032

CONSUMO (g)

D.E.

0.373

0.016

0.377

0.020

0.392

0.041

0.394

0.010

0.381

0.006

0.388

0.004

0.378

0.023

0.381

0.015

T . C A

D.E

1.50

0.24

1.70

0.42

1.62

0.11

1 3 6

0.19

1 4 6

0.11

1.69

0.16

1.61

0.11

1 4 7

0.20

TASA DE CRECI

MENTO (%)

D . E .

379.79

a

48.70

359.39

83.44

359.59

48.70

384.84*

54.62

394.94*

34.99

34949

34.98

354.54

4545

394.94

48.70

SOBREVIVENCIA^)

D.E.

97.77

3.85

91.10

3.85

84.44

10.18

80.00

0.0

80.80

0.0

93.33

0.0

88.88

10.18

86.66

6.66

MORTAUDAD (%)

D.E.

2.22a

3.85

8.89abc

3. .85

15£6cd

10.18'

20.00d

0.0

20.00d

0.0

6.67ab

0.0

10.17bc

10.18

13.33 bed

6.66

2 .3 . PARAMETROS FISICO-QUIMICOS D E L AGUA.

Durante e l transcurso d e l bioensayo la temperatura varió d e 2 6 a 29°C. La

salinidad varió d e 35 a 37%o. E l pH se mantuvo constante a 8 .1 . La concentración

d e

amonio

fue de 0 a

0.1

p p m , l a

concentración

d e

nitritos

s e

mantuvo constante

a

0.2ppm

y la

concentración

d e

nitratos varió

de 10 a

20ppm.



T AS A D E C R E C I M I E N T O

14 DI S

TA

SX

DE CRECIMIENTO (%)iso -A

»BSQ INICIAL PRO MEDIO.OSS

Fig. 12. Tasa de Crec imiento a los 14 d ías de Exper imentac ión.

A L I M E N T O C O N S U M I D O

14 DIAS

CONSUMO ,

-i)

D N ( a ) D N( b ) D M ( a ) D M ( b) l p p m 3 p p m f ip p m 9 p p m

D I E T A S E X P E R I M E N T A L E S

^ D I E T A S + D . E .

PESO ¡PKQMBDO INICIAL. 0.066«

Rg. 13 . Cons umo de a l imen t o / c amarón a l os 14 d í as de ex per imen t ac ión



T AS A D E C O N V E R S I O N A L I M E N T I C I A

14 DIAS

T C A

2,5 -

2-

1.5

1 •

0.5-

•

DNCa)DN(b) DM(a)DM(b) 1 PPMÎ PPM6 PPM9 PPM


C O N T R O L

PESO PROMEDO INICIXL-Oííl

i DIETAS + D.E.

MOLLEROS) KA

Fig . 14. Tasa de Convers ión A l iment ic ia a los 14 Días .

MORTALIDAD

14 D I AS

M O R T A L ID A D (% )

DIETAS EXPERIMENTALES

D IE T A S * D .E .

Fig . 15. Tasa de Mor ta l idad a los 14 d ías .



T ASA D E C R E C I M I E N T O

28 DIAS

T A SA D E C R B C I M I E NT O ( t t )

5 0 0 Y

P E S O I N I C I AL P R O M BD I O . O 661

Fig . 16. Tasa de Crec imiento a los 28 d ías de Exper imentac ión.

A L I M E N T O C O N S U M I D O

28 DIAS

C O N S U M O

D N ( a ) D N ( b ) D M ( a ) D M ( b) l p p m 3 p p m á p p m 9 p p m


^ D I E T A S D . E .

P E S O P R O M E D I O I N I C I A L . « O í í f

F ig . 17 . Co ns u mo de a l imen t o / c ama rón a Jos 28 d í as d e ex pe r imen t ac ión



TASA . D E C O N V E R S I O N A L I M E N T I C I A

28 DIAS

• T C A

D N ( a ) D N( b ) D M ( a )D M C b) 1 P P U 3 P P M f i P P M 9 P P M


C O N T R O L

P E S O P R O M E D I O I N I C I À L . 0 4 6 *

DIETAS + DJB.

M O L L E R O S I N *

Fig . 18. Tasa de Convers ión A l iment ic ia a los 28 Días .

MORTALIDAD

2 8 D I A S

M O R T A L I D A D ( % )

3 0 - 0

26-

ON(>) 0N(b)

COMTRCW.

0M (i( 0M(b) DHU ] DIPPQ 03pQBlD6ppm D9pp n

DIETAS MOLLERO»«*

F ig . 19 . Tas a de Mo r t a l i dad a l os 28 d í as de ex per im en t ac ión .



1. EFECTO DEL GRADO DE FRESCURA.

1 . 1 . CO MPO SI CI ON DE LAS HARI NAS DE PESCADO EXPERI MENTALES.

Las ha r i nas de pes c ado ex per imen t a les p res en t a ron l as c a rac t e r í s t i c as

adec uada s pa ra ev a lua r ún i c amen t e l a v a r i ab le f res c u ra d e la ma t e r ia p r ima . C om o

s e es perab a , e l c on t en ido de bas es v o lá t il es t o t a l es (TVN) de l pes c a do aume n t ó a

medida que t ranscurr ió e l t iempo ent re la captura de la mater ia pr ima y la

e labo rac ión de la ha r i na de pes c a do ; s i n em barg o , po r l os v a lo res de TVN que

pres e n t a ron es t as ha r i nas de pes c ado ex per imen t a les , se r í an c ons ide radas , t an t o

en Chi le (Cas t ro , 1990) , como en Noruega (P ike e t . a l . , 1990) , como har inas

e laboradas c on pes c ado f res c o . Las ha r i nas de pes c ado Nors eam ink y LT -94 (de

c a l i dad c e r t if i cada) c on t i enen un TVN <9 0 y <5 0 mg N/ 100g de m ues t ra ,

res pec t i v amen t e . S i c omparamos l os v a lo res de TVN de l as ha r i nas de pes c ado

ex per ime n t a les d e es t e t raba jo , s e ap rec ia que l a HD t uv o un TVN de 50 m g N/ 100g

de mue s t ra , po r l o t an t o , las ha r i nas de pes c ad o que s e ev a lua ron , aunqu e v a r ían

en c uan t o a s u c on t en ido de bas e s v o lá t i les t o t a l es , pued en c ons ide ra rs e q ue s e

e labora ron c on ma t e r i a p r ima re l a t i v amen t e f res c a .

Las ha r i nas de pes c ado u t i l i z adas en l a a l imen t ac ión de l c e rdo deben

c on t ener un v a lo r de TVN <80 mg N/ 100g de mues t ra (Cas t ro , 1990) y pa ra

s a lmón idos s e rec om ienda un v a lo r menor a 50 mg N / 100g de mues t ra ó <90 mg

N/100g de mues t ra (Cas t ro , 1990; P ike e t . a t . , 1990) , para que no haya det r imento

en l a p roduc c ión .

Por o t ro l ado , s e obs e rv a que a med ida que aumen t ó e l g rado de

des c ompos i c i ón de l a ma t e r i a p r ima , aumen t ó e l c on t en ido de am inas b i ogén i c as ,

és t o s e debe a que a med ida que e l pes c a do s e v a des c om pon iendo , las p ro t e í nas

s e degradan romp iéndos e en pép t i dos , am inoác idos l i b res y f i na lmen t e en am inas

b iogé n i c as . E l c on t en ido de bas es v o lá t i l es to t a l es (TVN) es un buen i nd i c ado r de l



gra do de fres c u ra de la ma t e r i a p r ima ; s in emb argo , es te pa rám et ro no es ap rop iado

para ev a lua r l a f res c u ra de p roduc t os es t ab i l i z ados c on c a lo r c omo es e l c as o de

la har ina de pescado, por lo que e l va lor de TVN de l produc to f ina l no Ind ica e l

g rado de f res c u ra de l a ma t e r i a p r ima o de l a f rac c ión s o lub le de l pes c ado . Las

am inas b i ogén i c a s s on t é rm ic am en t e es t ab les , pe ro c om o l a may or í a de l as am inas

b iogén i c as s e v an c on l a f as e l í qu ida du ran t e e l p roc es am ien t o de l a ha r i na y é l

l í qu ido es re i nc o rpo ra do a n t es de s ec a r l o , las am inas b i ogén i c as no nec es ar i am en t e

s o n de l m i s m o l o t e de pes c ad o y po r l o tan t o , no re f l e j an c o n ex ac t i t ud e l g rado de

f res c u ra de l a ma t e r i a p r ima , pe ro pueden c ons ide ra rs e ú t i l es i nd i c adores de l a

des c om pos i c i ón d e l a f rac c ión s o lub le de la ha r ina de pes c a do . E l c on t en ido de

am inas b i ogén i c as debe c ons ide ra rs e c om o un pa rám et ro de c a l i dad nec es ar i o pa ra

c e r t i fi c a r ha r i nas de pes c ad o , ya que en a l t as c onc en t rac i ones , s egú n Poo le (1993) ,

pueden s e r t óx i c as pa ra l os an ima les en c u l t i v o .

De l as c ua t ro am inas b i ogé n i c as ana l iz adas en l as ha r i nas e x per ime n t a les ,

l a h i s t am ina t uv o e l may or i nc rem en t o , pas ando de 28 a 4701 ppm . La am ina que

má s s e ha es t ud iado es l a h i s t am ina , y a que ha a f ec t ado g rande me nt e a l a i ndus t r i a

av í c o la a n i v e l mund ia l ( v e r an t ec eden t es ) . En c e rd os y s a lm ón id os s e ha rep o r t ad o

que la h is tam ina a fec ta la gana nc ia d iar ia de peso y la e f i c ienc ia a l ime nt ic ia (C as t ro ,

1990; W atana be e t . a l . , 1987) . Para la nut r i c ión de po l los y ce rdo s se rec om iend a un

c on t en ido de h i s t am ina en l a ha r i na de pes c ado menor a 1000 ppm y pa ra

s a l m ó n i d o s s e r e c o m i e n d a < 5 0 0 p p m .

Aunq ue no s e han rea l i z ado m uc ho s es t ud ios pa ra v e r i f ic a r e l e f ec t o t óx i c o

de o t ras aminas b iogén icas , se sabe que la cadaver ina y la put res ina potenc ia l i zan

e l e f ec t o t óx i c o de l a h i s t am ina . Nos o t ros s uponemos que e l c on jun t o de a l t as

c onc en t rac i ones de l as am inas b i ogén i c as c omúnment e enc on t radas en l a ha r i na

de pes c ado pueden i n t e rac t ua r pa ra a f ec t a r nega t i v amen t e l a p roduc c ión de

c am arón , po r l o que en es t e s en t i do , s e rea l i z a rán es t ud ios c o n d i f e ren t es am inas

b iogé n i c as a d i f e ren t es n iv e les pa ra de t e rm ina r s u e f ec t o s ob re e l c om por t a m ie n t o

p roduc t i v o de l c amarón .



En c uan t o a l aná l i s is p róx ima de l as ha r i nas ex per imen t a les s e obs e rv ó , que

e l g ra do d e f res c u ra de l a ma t e r i a p r ima no a f ec ta s i gn i f i c a t iv ame n t e e l c o n t en ido

de pro te ína, grasa y cen iza, ya que las 3 har inas exper imenta les mos t raron una

c ompos i c i ón p rox ima l s im i l a r . Es t os res u l t ados c o inc i den c on i os repo r t ados po r

P i k e y Co i s . (1990) , qu ienes ev a lua ron en s a lmón idos ha r i nas de pes c ado c on un

TVN de 30 y 140 mg N/1 OOg de mues t ra y repo r t a ro n que ambas ha r i nas p res en t a ron

aná l i s i s p rox ima les s im i l a res .

Por o t ro lad o, u ti l izar e l va lor de d iges t ib i l i da d com o parám et ro de ca l ida d en

es te caso en par t i cu lar , no es recomendable o de u t i l i dad, deb ido a que las

p ro t e í nas de m a t e r ia de s c om pues t a , s egú n s e v i ó en an t ec eden t es , s e h i d ro l i z an y

deb ido a és t o s e pued en ob t ener v a lo res a l t os de d i ges t i b i l i dad , y a s ea en m ink o

c on l os mé t odos us ua les de d i ges t i b i l i dad in v r t ro , pero no re f le jar ía rea lmente la

abs orc i ó n . S in emba rgo , los res u l t ados de d i ges t i b i l i dad en m ink que s e ob t uv ie ro n

en l as ha r i nas de pes c ad o ex per imen t a les c o inc i den c o n l os repo r t ado s po r P i k e e t .

a l . (1990) , qu iene s menc ion aron q ue e l g rado de f res c u ra de l a ma t e r i a p r ima t uv o

un pequeño e f ec t o s ob re l a d i ges t i b i l i dad v e rdadera en m ink .

1 .2 . ANALISIS PROXIMAL DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES.

E l resu l tado de l aná l i s is prox imal fue s im i lar en las t res d ie tas

ex per im en t a les . E l c on t en ido de p ro t e í na de la d ie t a c on ma t e r i a p r ima f res c a (DF)

(37 .1% ) es men or en 1 .6% en c om para c ión c o n l as o t ras do s d i e t as , pe ro a l m i s mo

t iempo, e l conten ido de grasa de es ta d ie ta fue 0 .8% mayor , de ta l manera que la

energía bru ta teór ica de las d ie tas es igua l en las 3 , por lo que es ta pequeña

d i f e renc ia en e l c on t en ido de nu t r i en t es no debe a f ec ta r l os res u l t ado s ; és t o aun ado

a l c oe f i c i en t e de v a r i ac i ón de 10% enc on t rado en l os res u l t ados de l aná l i s i s

p rox ima l .

Las d i e t as c ump l i e ron c on l os requer im ien t os nu t r i c i ona les repo r t ados pa ra

c am arón p o r Ak i y ama e t . a l . (1991), qu ienes rec o m ien dan un c on t e n ido d e p ro t e í na

y grasa de 30% y 6 a 7%, respec t ivamente.



1.3 . ESTABILIDAD DE LAS DIETAS EXPERIMENTALES.

/

La es t ab i l i dad en e l agua de los a l imen t os ba lanc e ados pa ra c amaró n , es un

parámet ro de g ran impor t anc ia deb ido a l os háb i t os a l imen t i c i os de l c amarón . La

d ie t a p reparada c on ha r i na de pes c ado de ma t e r i a p r ima des c ompues t a (DD)

p res en t ó menor es t ab i l i dad en e l agua en e l t rans c u rs o de 1 ho ra , pe rd ió más

mater ia seca que la d ie ta f resca. Es to puede a t r ibu i rse a su a l to conten ido de

am inas b i ogé n i c as y a o t ro s c om pue s t os n i t rogen ado s ( t a b la No . 2 ) , (as c ua les

s o n mo léc u las m uy s o lub les en agua , p rop i c i and o po r l o t an t o , que l a d i e t a p e rd ie ra

más mater ia seca en e l agua.

1 . 4 . EVALUACI ON B I OLOGI CA .

En e l b ioensayo l (15 camarones /acuar io) , la sobrev ivenc ia y la tasa de

c onv e rs i ón a l imen t i c ia no f ue ro n a f ec t adas s i gn i f i c a t iv am en t e po r . e l g ra do de

f res c u ra d e la ma t e r ia p r ima . S in em barg o , s e a f ec t ó e l c on s um o de a l ime n t o y e l

c rec im ien t o , es t e ú l t imo s e reduc e d es de un 15% has t a un 25% (c o n v a lo res de TVN

de 30 y 50 m g N / 100 g) , c o n res pec t o a l c on t ro l . Es t os res u l t ados s o n s im i l a res a l os

repor tados para cerdos (Cas t ro , 1990) y sa lmónidos (Watanabe e t . a l . , 1987; P ike,

e t . a l . , 1990) , en los cua les , un conten ido mayor a 80 y 90 mg N/ 100g a fec ta e l

c rec imiento y la e f i c ienc ia a l iment ic ia en es tas espec ies .

E l e f ec t o nu t r i c i ona l s ec undar i o de l c ons umo reduc ido y de l a menor

es t ab i l i dad de l a l imen t o en e l agua , pod r í an ex p l i c a r l a d i s m inuc ión de l c rec im ien t o .

En e l b i oens ay o I I (8 c amarones / ac uar i o ) no s e enc on t ra ron d i f e renc ias

s ign i f i c a t i v as en l os pa rámet ros b i o l óg i c os ev a luados .

Los res u l t ados ob t en idos en ambos b i oens ay os nos hac en s uponer que l os

c a m a r o n e s m e n o r e s d e 1 g s on más s uc e p t i b l es a l g rad o de f res c u ra de l a ma t e r i a

p r ima c o n l a qu e s e e l abo ra n l as ha r i nas de pes c ado , que l os c ama rone s de may or

ta l la .



Esta d i ferenc ia en la sen s ib i l idad a l grado de f rescura d e la mater ia pr im a de

camarones de d i ferente ta l la se podr ía exp l icar por sus d i ferentes requer imientos

nut r ic iona les (Tacón, 1989; Ak iyama et . a l . , 1991) . O porque los camarones en

cond ic iones más l im i tan tes , de mayor dens idad , son m ás sucep t ib les a es te fac to r .

Pos ib leme nte, la DD cubr ió los requer im ientos en form a limi tante perm i t iendo

encont rar d i fe renc ias s ign i f ica t ivas ent re los t ra tamientos; por o t ro lado, la misma

die ta cubr ió en exceso los requer imientos nut r ic iona les de los camarones de 1 .5g

provocando un enmascaramiento de l e fecto de la ca l idad de la pro te ína. Por lo

tanto , se recomienda que e l e fecto de la f rescura sea estud iado más a fondo,

e laborando d ie tas con porcenta jes menores de pro te ína y con un d iseño

exper imen ta l más robus to .

Es in teresante resa l tar que en e l b ioensayo I I , los rep l icados de los

t ra tam iento s de la DFM y DD no fue ron hom ogé neos ; en am bos caso s, uno de los

rep l i cados d ió me jo res resu l tados hac iendo que e l p rom ed io se me jo ra ra ,

aum entan do la desv iac ión estánd ar , lo cua l pu do provo car que las d i ferenc ias no

fueran s ign i f ica t ivas. Como no se detectó n inguna var iab le externa causante de l

com por tam ien to de es tos dos rep l i cados p rob lem arep l i cado p rob lem a, se tuv ie ron

que cons iderar en e l aná l is is de los resu l tados.

E l co nsu m o de a l imen to fue m ayor en la DF en los 2 b ioensayo s, a l cont ra r io

de lo que se hub iera esperado, ya que es conoc ido e l e fecto a t ractante de a lgunas

mo lécu las so lub les en agua como aminoác idos , t r ime t i l am ina y pos ib lemen te

aminas b iogén icas (Cruz-Suárez, 1987) .

F ina lmente, la sobrev ivenc ia que se presentó en ambos b ioensayos fue muy

buen a, sup er ior a 84%, por lo que se pued e conc lu i r que los n ive les de TVN y bas es

b iogénicas estud iados no presentan un e fecto tóx ico que a fecte la sobrev ivenc ia .

Los ind icadores de f rescura de la mater ia pr ima como e l conten ido de bases

vo lá t i les to ta les (TVN) y la concent rac ión de aminas b iogén icas no deben

1020091366



c ons ide ra rs e c omo l os ún i c os c r i t e r i os de c a l i dad ; deben t omars e en c uen t a as í

m is m o, e l p roc es o ( t ipo de s ec ad o , temp era t u ra y t i emp o de s ec ado) , l a es pec ie y

l a p res enc ia de l os p roduc t os de ox idac ión .

2. EFECTO DEL SCORE BIOTOXICOLOGICO Y DEL TOXICO MOLLEROSINA.

2 . 1 . CO MP OS I CI ON DE LAS HARI NAS DE PESCADO EXPER I MENTALES. (Tab la No .

4)

Las ha r i nas de pes c ado ex per imen t a les f ue ron c l as i f i c adas po r e l M . en C .

Emi l i o Cas t ro y Món i c a Ga l l egu i l l os de Fundac ión Ch i l e de ac uerdo a l s c o re

b io t ox i c o lóg i c o de t e rm inado en po l l os . Las HPN

a

y HPN

b

p res en t a ron un v a lo r

b i o t ox i c o lóg i c o d e 0 .1 po r l o qu e de ac uerdo a l a c l as i f i c ac ión p rop ues t a po r Cas t ro

en 1990 s e c ons ide ran no rma les o a t óx i c as . Las HPM

a

y HPM

b

t uv i e ron un v a lo r

b i o t ox i c o lóg i c o de 1 . 1 y 1 . 4 res pec t i v amen t e c l as i f i c ándos e c omo ha r i nas de

t ox i c i dad med ia ( v e r des c r i pc i ón de l a p rueba b io t ox i c o lóg i c a en an t ec eden t es ) .

E l TVN de l a ma t e r i a p r ima de l as ha r i nas no rma les demues t ra que e l

pes c ado e ra muy f res c o a l t i empo de s u p roc es am ien t o . Po r e l c on t ra r i o , e l

c on t en ido de TVN de l a HM

a

(50 mg N /100g de mu es t ra ) , ind ica que la mater ia

p r ima s e enc on t raba en un es t ado i n i c i a l de des c ompos i c i ón a l t i empo de s u

p roc e s am ien t o . Es t a pé rd ida de f res c u ra s e re f le j a tam b ién en e l a l t o c on t en ido de

amina s b i ogén í c a s en l a ha r i na . E l c on t en ido d e h i s t am ina s e enc uen t ra po r enc ima

d e l o s v a l o r e s r e c o m e n d a d o s p a r a p o l l o s , c e r d o s y s a l m ó n i d o s .

Des a f o r t unadam ent e n o s e c on t ó c on e l v a l o r de TVN de l a HM

b

, pe ro e l c on t en ido

de aminas b iogénícas es ba jo , por lo que se puede in fer i r que fue e laborada cor*

ma t e r i a p r ima y f rac c ión s o lub le f res c as .

E l v a lo r d e TVN de l p ro du c t o f i na l , c om o y a s e d i s c u t i ó en e l b i oens ay o de

f res c u ra , no rep res en t a e l g rado de f res c u ra de l a ma t e r i a p r ima c on l a que f ue

e laborada la har ina, n i la f rescura de l produc to f ina l . En la tab la No. 4 se puede

aprec ia r p e r f ec t am en t e c o mo no e x i s te una c o r re l ac i ón p os i t i v a en t re e l TVN de l a



mater ia pr ima y e l TVN de la har inas de pescado, o ent re e l n ive l de aminas

b iogén i c as .

Las ha r i nas de pes c ado c on t i enen n i v e les de p ro t e í na s im i l a res (a l rededor

de 67.5%) excepto la HPM

a

deb ido p robab lemen t e a que f ue e l abo rada a pa r t i r de

Anc ho v e t a y l as o t ras 3 f ue ro n e l abo rada s c on J u re l . La c om pos i c i ón de l as ha r i nas

de pes c ado pue de v a r ia r depen d iendo de l as es pe c ies a pa r t i r de las c ua les f ue ron

e laboradas (S tansby y Karr i ck , 1963; Ur iar te-Pérez , 1991; P ike e t . a l . , 1992) . En

cuanto a l conten ido de ex t rac to e téreo las 4 har inas cont ienen n ive les s im i lares ya

que t an t o e l j u re l c om o l a anc hov e t a s o n es pec ies de c a rne ro j a c on a l t o c on t en ido

de ac e i t e ( v e r an t ec ede n t es ) . E l c on t en ido de c en i z a es may or en l a HPN

b

y HPM

a

,

p r o b a b l e m e n t e f u e r o n e l a b a b o r a d a s c o n a l g o d e s u b p r o d u c t o s , y a q u e s e g ú n H a r d y

and Mas umot o (1991) c uando l a ha r i na de pes c ado es e l abo rada c on s ubproduc t os

aumenta e l conten ido de cen iza. Por la misma razón podr ía exp l i carse e l a l to

c on t en ido de Ca l c i o en l a HPN

b

. E l a l to conten ido de sa l en la HPM

a

se exp l i ca

po rqu e a es t a s e le añad ió e l agua de s angre du ran t e s u p roc e s am ien t o .

La d i ges t i b i l i dad de t e rm inada med ian t e e l mé t odo de To r rey mod i f i c ado es

s im i l a r en l as 4 ha r i nas ex per imen t a les , aunque s e podr í a es pera r que l as HPM

a

y

H P M

b

t uv i e ran menor d i ges t i b i l i dad , y a que f ue ron s ec adas c on l l ama d i rec t a y l a

c a l i dad de l a p ro t e í na puede dañars e c on may or f ac i l i dad a l s ec a rs e en

des h id ra t adores d i rec t os ( v e r des c r i pc i ón y p rob lemas en an t ec eden t es )

dep end iendo de l a t empe ra t u ra y e l t i emp o de pe rmanen c ia en e l s ec ado r (Winds or

y Bar low, 1984; Corra les , 1988; Osuna, 1987; Cas t ro , 1990) . Es to demues t ra que e l

mé t odo de d i ges t i b i l i dad i n v i t ro c on peps ina no es mu y s ens ib l e , aún reduc iend o

la c onc en t rac i ón de f a enz ima , c ua ndo s e us a pa ra de t e rm ina r l a c a l i dad de ha r i nas

que no p res en t an d i f e renc ias muy marc adas .

Se ha dem os t ra do qu e no ex i s t e una buena c o r re l ac i ón en t re la d i ges t i b i l i dad

in v i t ro c on peps ina c on l a d i ges t i b i l i dad i n v i v o en s a lmón idos . En e l c as o de

c rus t á c eo s ex i s t e e l p rob lem a ad i c i ona l de que és t os no ti enen una d i ges t i ón ác ida

co n pe ps in a y la pr in c ipa l enz im a es la t r ips ina . En es te sent id o, ac tua lme nte en la



Fac u l t ad de C ienc ias B io l óg i c as , s e es t án des a r ro l l ando p rue bas de d i ges t i b i l i dad

in v i v o en c a ma rone s e ¡n v i t ro c on t r i ps i na .

Por o t ro l ado , t amb ién e ra de es pera rs e que e l v a l o r de l i s i na d i s pon ib l e

/

f ue ra me nor en l as ha r i nas de t ox i c i dad me d ia , y a que e l s ob re c a len t am ien t o reduc e

la b i od i s po n ib i l i da d am inoác id i c a . La l is i na pued e reac c iona r c o n o t ros c om pue s t os

para f o rma r l a mo l l e ros ina y po r l o tan t o no est a d i s p on ib l e po r enc o n t ra rs e un ida

a o t ras s us t an c ias . S in emba rgo , l as 4 ha r inas p res e n t a ron v a lo res s im i l a res , l o que

ind ica que es te parámet ro no re f le ja la ca l idad de la pro te ína.

La HPM

a

c on t i ene un a l t o n i v e l de ác idos g ras os l i b res . E l c on t en ido de

ác idos g ras os l i b res en una ha r i na de pes c ado es un i nd i c ador de ox idac ión en e l

p roduc t o . Hardy y Mas umot o (1991) , menc ionaron que l as ha r i nas de pes c ado no

deb en c on t en er m ás de 4 .5% de ác idos g ras o s l i b res . En bas e a es t e pa rám et ro , l a

ca l idad de l ace i te res idua l de es ta har ina ser ía repor tado de mala ca l idad (Cruz -

Suárez et . a l . , 1992).

Las 4 har inas es tuv ieron l ib res de Sa lmonel la . Para cer t i f i car una har ina de

pes c ad o s e requ ie re que es t é l ib re de Sa lm one l l a (W inds or y Ba r l ow, 1984 ; Co r ra l es ,

1988; Cas t ro , 1990) .

2 .2 . DIETAS EXPERIMENTALES.

2.2 .1 . ANALISIS PROXIMAL DE LAS DIETAS.

En bas e a l os res u l t ados o b t en id os en e l aná l is i s p rox im a l de l as 8 d i e t as s e

c ons ide ra qu e t oda s l as d i e t as s on i s op ro t e i c as e i s o l ip í d i c as , y a que e l c on t en ido

de p ro t e í na v a r i ó ap rox imadament e en 1% y e l c on t en ido de g ras a v a r i ó s o lo en

0.5%. /

Las d i e t as c ump l i e ron c on l os requer im ien t os nu t r i c i ona les p ropues t os po r

Ak iyama et . a l . (1991) para camarón P . vannamef .



La DM

a

p re sen tó e l va lo r má s a l to de h is tam ina (3710) , ta l y co m o se

es peraba , y a que es t uv o c ompues t a de l a ha r i na de pes c ado c on e l más a l t o

c on t en ido de h i s t am lna .

2 . 3 . EVALUACI ON B I OLOGI CA .

A l os 14 d í as de ex per imen t ac ión no s e enc on t ra ron d i f e renc ias s i gn i f i c a t iv as

(P>0 . 0 5 ) en t re l os t ra t am ien t os , en n i nguno de l os pa rám et ros b i o l óg i c os ev a luados .

A l os 28 d í as , t ampoc o s e enc on t ra ron d i f e renc ias s i gn i f i c a t i v as (P>0 . 05 )

en t re l os t ra t am ien t os en c uan t o a c rec im ien t o , c ons umo de a l imen t o y t as a de

c onv ers i ón a l imen t i c i a ; s i n embargo , s e enc on t ra ron d i f e renc ias s i gn i f i c a t i v as

( P = 0 . 0 2 ) e n m o r t a l i d a d .

Ta l y c omo s e es peraba c on res pec t o a l s c o re b i o t ox i c o lóg i c o , l a may or

mo r t a l i da d s e enc o n t ró c on la DM

b

, que conten ía la har ina con e l sco re má s e levad o

y l a may or mo r t a l i dad en po l l os , aú n c uando (a HPM

B

p res en t ó un v a lo r má s a l t o de

h i s t am ina y un po rc en t a j e má s e l ev ado de ác idos g ras o s l i b res , l o c ua l hac e

s up one r que e l e f ec t o de l s c o re b i o t ox i c o lóg i c o e s dom inan t e s ob re e l e f ec t o de l a

f resc ura d e la mater ia pr ima (TVN e h is tam ina) y de la ca l ida d de los l íp idos (ác ido s

g ra s os l i b res ) , po r l o meno s a es t e t i em po de ex per imen t ac ión .

Como s e ap rec ia en l as f i gu ras 8 y 12 , l a mor t a l i dad en l os c amarones

a l imen t ados c on l a D9ppm f ue may or en l os p r imeros 14 d í as de ex per imen t ac ión

y d i s m inuy ó o f ue nu la c on e l t rans c u rs o de l t i emp o . Est a res pues t a c on c uerd a c on

lo obs e rv ado en po l l os (Com. pe rs . Ga l l egu i i l os , 1993) . Es t ud ios rea l i z ados han

d e m o s t r a d o q u e p o l i o s a l i m e n t a d o s c o n h a r i n a s d e p e s c a d o c o n t e n i e n d o

mo l l e ros ina mueren en g ran po rc en t an je l os p r imeros 7 ó 10 d í as de

ex pe r imen t ac ión ; des pués de l os 10 d í as d is m inuy e s i gn i fi c a t iv ame n t e l a m or t a l i dad

y l os po l l os que s ob rev i v en pueden i nc l us o regenera r l as l es i ones que c aus ó l a

mo l l e ros ina en s us mo l l e j as .



Por o t ro lado, ios resu l tados de mor ta l idad (20%) que se obtuv ieron con la

D1ppm, equ iva lentes a los de la har ina con e l score más a l to , son d i f í c i les de

ex p l i c a r ; una h i pó t es i s pod r í a s e r que l a c onc en t rac i ón f ue t an ba ja que

probab lemen t e no s e pud ie ron a l c anz ar n i v e les s u f i c i en t es pa ra es t imu la r a l gún

mec an i s mo de de t ox i f i c ac ión .

Ana l i z ando l os res u l t ados ob t en idos c on las ha r i nas de pes c a do de d i f e ren t e

s c o re , s e obs e rv ó m ay or mo r t a l i dad en las d i e t as M

a

y M

b

que co n las d ie tas co n las

d ie tas D6ppm y D9ppm. Por un lado, hay que resa l tar que la DL-Mol leros ina es 50%

menos ac t i va que la L-Mol leros ina presente en las har inas de pescado y por e l o t ro

l ado , no s e c uan t i f i c ó l a c onc e n t rac i ón de mo l l e ros ina en l as ha r i nas de pes c ad o y

p robab lemen t e t en í an c onc en t rac i ones i gua les o aún may ores a l as que s e

aña d ie ro n en s u f o rma s i n t é ti c a a l as d ie t as ; adem ás , c on l as ha r i nas de d i f e ren t e

score se es tá eva luando e l e fec to de la suma de d i ferentes fac tores que no se

c o n s i d e r a r o n d e t a l l a d a m e n t e .

En i nv es t i gac iones rea l i z adas po r d i v e rs os au t o res s e ha demos t rado que

aún c ua ndo e l p rec u rs o r de l a mo l l e ros ina es s o lub le en agua , una v ez f o rm ado e l

c om pue s t o en l a ha r i na de pes c ado , és te es i ns o lub le . En bas e a es t e a n t ec eden t e ,

s e p regun t ó a l p rov eedor de l a DL-Mo l l e ros ina s i s e han rea l i z ado p ruebas de

es tab i l idad en su produc to y su respues ta fue negat iva . Por lo que se hace

necesar io rea l i zar pruebas de es tab i l idad en la mol le ros ina s in té t i ca , para as í poder

ob t ener c onc lus i ones más c on t unden t es s ob re l os res u l t ados que s e ob t uv ie ron en

e l p res en t e t raba jo .

S in embargo , en bas e a l os res u l t ados ob t en idos , s e puede i n f e r i r que l a

c a l i dad b i o t ox i c o lóg i c a de l as ha r i nas de pes c ado y e l t óx i c o DL-Mo l l e ros ina , no

afec tan e l va lor nut r i c iona l de las har inas de pescado para e l camarón, pero s i

t i enen un e f ec t o t óx i c o , aumen t ándo l a mor t a l i dad en un 20% de és t e c rus t ác eo ;

repe rc u t i endo po r l o t an t o , en l a p roduc c ión .

En l os po l l os l a mo l l e ros ina ac t úa s ob re l os rec ep t o res h i s t amí n i c os H

2



aumentando la sec rec ión gás t r i ca (Masumara e t . a l , 1985; I to , e t . a i , 1987)

reduc iendo en c ons ec uenc ia e l c rec im ien t o , e ros ionando l a mo l l e j a y aumen t ando

la mor t a l i dad ; en s a lmón idos c aus a a t ro f i a de l a c apa mus c u la r de l es t ómago y

nec ros i s (Cháv ez , 1991) ; s i n embargo , l os c amarones a l c on t ra r i o de l os po l l os y

s a lmón idos no t i enen un es t ómago v e rdadero y no c uen t an c on c é lu l as s ec re t o ras

de ác ido , po r l o que c a rec en de d i ges t i ón ác ida y pos ib l em en t e e l mod o de a c c ión

de la mol le ros ina sea d i ferente en és tos c rus táceos , de ta l manera, que no a fec ta

e l c rec imiento y la e f i c ienc ia a l iment ic ia como en los po l los y so lo a fec ta la

sobrev ivenc ia . Por lo que se neces i tan rea l i zar inves t igac iones para determinar e l

modo de ac c ión de l a mo l l e ros ina en l os c amarones .

Para s a lm ón id os s e rec om iend a que las ha r i nas de pes c a do t engan un s c o re

b io t ox i c o lóg i c o menor a 0 . 8 (Cas t ro , 1990) y s e rec om ienda que l as d i e t as pa ra

po l l os no c on t engan más de 0 . 3ppm de mo l l e ros ina (Os una , 1989) . En bas e a i

p res en t e t raba jo , t amb ién s e podr í a rec omendar que l as ha r i nas de pes c ado

u t i l i z adas en l a a l imen t ac ión de l c amarón t engan un s c o re b i o t ox i c o lóg i c o <1 . 1

pero , s e r ía p rem at u ro c o nc lu i r s ob r e e l n iv e l m í n imo de t ox i c i dad de l a mo l l e ros ina ,

aunque s e ha demos t rado s u t ox i c i dad .

Ev a luand o en c on jun t o l os res u l t ados ob t en idos s ob re e l e f ec t o de l g ra do de

f rescura de la mater ia pr ima, la ca l idad b io tox ico lóg ica de las har inas de pescado

y l a c onc e n t rac i ón d e DL-Mo l l e ros ina , s e puede dedu c i r que s e ob t endrán me jo res

rend im ien t o s en e l c u l t i v o de c am arón c u ando , la ha r i na de pes c ado u t il i z ada en l a

e labo rac ión de a l imen t os ba lanc eados pa ra es t e o rgan i s mo, hay a s i do e l abo rada

c on mat e r i a p r ima f res c a , es d e c i r , c on un TVN menor a 30 mg N / 100g de mue s t ra

y un c on t en id o de h is t am ina meno r a 1850 p p m , y p roc es ada a ba jas tem pera t u ras , »

con un score b io tox ico lóg ico menor a 1 .0 a l inc lu i rse a un n ive l de 30% en e l

a l imento . S in de jar de cons iderar la pos ib i l i dad de que los o t ros ingred ientes de la

f o rmu lac ión t amb ién hay an apor t ado bas es v o lá t i l es , am inas b i ogén i c as y

mo l l e ros ina (no c uan t i f ic ados ) , depen d iend o de l p roc e s o de f ab r i c ac ión y la c a l i dad

de l os m is mos .

No s e pudo demos t ra r e l e f ec t o ac umu la t i v o de l a f res c u ra y de l s c o re



b io t ox i c o lóg i c o , po rqu e de haber s i do as í, la DMa se r ía l a que hub ie ra c aus ad o un

menor c rec im ien t o , aunado a a l t a mor t a l i dad .



La f rescura de la mater ia pr ima determinada por TVN de l pescado o por e l

c on t en ido d e h i s t am ina en la ha r ina es un pa ráme t ro que debe c on s ide ra rs e e n l as

har i nas de p es c a do u t i l iz adas en la nu t r i c ión de l c am arón .

Har i nas de pes c ado c on v a lo res s uper i o res a 30 mg N/1 OOg de mu es t ra en

la mater ia pr ima y va lores de h is tamina super iores a 1850 ppm en la har ina de

pes c ado , p roduc en d i s m inuc ión en e l c rec im ien t o , des de un 15 has t a un 20% y

d i s m inuy en e l c ons umo de a l imen t o en c amarones menores a 1 g . , en c ond i c i ones

de c u l t i v o i n t ens i v o . Es t e e f ec t o debe c on f i rmars e en c amarones de -may or t a l l a y

en c ond i c i ones de c u l t i v o s em i - i n t ens i v o .

La des c om pos i c i ó n de l a ma t e r i a p r ima de l as ha r i nas de pes c ado , puede

a f ec t a r l as p rop iedad es f í s ic as de l a limen t o ba lanc ead o ; y a que genera c om pue s t os

mu y s o lub le s que reduc en l a es t ab i l i dad de l a limen t o . (Cuando l a ha r i na de p es c ad o

se inc luye a un 30%).

Se c omprobó que l as t ox i nas p roduc idas en l as ha r i nas de pes c ado que

c aus an e ros ión de mo l l e j as en po l l os , a f ec t an l a s ob rev i v enc ia de l os c amarones ,

p roduc iendo mar t a l i dades has t a de un 20% . Ba jo l as c ond i c i ones de l p res en t e

t raba jo , l as ha r i nas de pes c ado u t i l i z adas pa ra l a nu t r i c i ón de l c amarón , i nc l u i das

a 30% en e l a l imen t o , deben t ene r un s c o re b i o t ox i c o lóg i c o men or a 1 . 1 .

La DL - Mol le ros ina d isminuye la sobrev ivenc ia de los camarones , s in a fec tar

e l c rec imiento y la e f i c ienc ia a l iment ic ia .

Se nec es i t an más es t ud ios pa ra c omprender e l modo de ac c ión de l a

mo l l e ros ina en c amarones , as í c omo, l a pos ib l e f o rmac ión de mo l l e ros ina du ran t e

e l p roc es am ien t o de o t ras f uen t es de p ro t e í na que s i gan un p roc es o de

c a len t am ien t o s eme jan t e a l de l a ha r i na de pes c ado .



Se c on f i rma que e l c on t ro l de c a l i dad de ha r i nas de pes c ado ,

es pec í f i c amen t e en l os pa rámet ros ev a luados , es nec es ar i o pa ra ob t ener un

c ons t an t e y me jo r rend im ien t o de p roduc c ión de c amarón .



Se rec om ienda a l os p roduc t o res de ha r i na de pes c ado que m idan e l

c on t e n ido d e ba s es v o lá t il es t o t a l es de la ma t e ri a p r ima y que es t ab lez c an un buen

c on t ro l de c a l i dad ; s ob re t od o , en l os pun t os c r í ti c os que s e men c ionan e l e l anex o

VI.

A l os us uar i os s e l es rec om ienda que t ra t en de c onoc er e l p roc es o de l a

ha r i na de pes c ado que c ompran , y a s ea de p roduc c ión nac iona l o impor t ada , que

so l i c i ten además e l va lor de "TVN de la mater ia pr ima y e l score b io tox ico lóg ico

d e t e r m i n a d o e n p o l l o s .



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4 3 - 4 7



ANEXO I.

APORTE DE NUTRIENTES DEL BIOENSAYO FRESCURA.



NUTRIENTES

*D.F.

D.M.F.

D.D

BASE HUMEDA

D.D

Proteina.

(%)

35.0

35.0

35.0

E. Etéreo.

(%)

7.0 7.0 7.0

Fibra.

(%)

1.9

1.9

1.9

Ceniza.

<%)

6.6

6.8

6.7

E.LN.

<%)

41.8

41.1

41.1

Humedad.

(%)

4.3

4.9

5.1

Arginina.

(%)

1.8

1.9

1.9

Glicina.

<%)

1.6

1.6

1.6

Histidina. (%)

1.6

1.6

1.6

Isoleucina

(%)

1.6

1.6

1.6

LeucJna.

(%)

2.9

2.9

2.9

Usina.

(%)

2.1

2.1

2.1

Metionina.

(%)

0.8

0.8

0.8

Cisterna.

(%)

1.2

1.3

1.4

Fenilala. {%) 3.6 3.5 3.4

Tirosina.

(%)

1.1

1.1

1.1

Senna.

(%)

1.3

1.3

1.3

Treonina. (%) 1.3

1.3

1.3

Trlptofano

(%) 0.3

0.3

0.3

Vallna.

(%)

3.4

3.3

3.2

Calcio.

(%)

1.7

1.7

1.7

Fósforo.

(%)

1.3

1.4

1.4

Potasio.

(%) 0.5 0.6

0.6

Cloro.

(%)

0.4

0.4

0.4

Magnesio.

(%)

0.1 0.1

0.1

Sodio.

(%)

0.3 0.3

0.3

Azufre.

(%) 0.3

0.3 0.3

Cobre. (mg/Kg) 7.9 8.4

8.7

Hierro.

(mg/Kg)

118.1

120.3

122.2

Manganeso. (mg/Kg) 10.1 10.6

11.1

Selenio. (mg/Kg) 0.5

0.5

0.5

Zinc.

(mg/Kg)

54.2

55.0

55.6

Biotina. (mg/Kg)

0.1

0.1

0.1

Colina. (mg/Kg) 2058 2093

2123

Ac.

Fólico.

(mg/Kg)

0.4 0.4

0.4

Niacina. (mg/Kg)

32.4 32.7 33.0

Ac. Pantoténico. 8.0

8.2 8.3

Vit. B6

(mg/Kg)

3.0 3.1

3.2

Riboflavina.

(mg/Kg)

3.1 3.1

3.2

Tiamina. (mg/Kg) 1.4 1.5 1.6

Vi t B12

(mg/Kg)

64.2

64.2 64.2

Vit E.

(mg/Kg) 5.4 5.4

5.4

Inositol.

(%)

0.06

0.06

0.06

*D.F.= Dieta con harina d e pescado fresca.

D.M.F. = Dieta c o n harina d e pescado Moderadamente fresca.

D.D. = Dieta c o n harina d e pescado Descompuesta



NUTRIENTES

*H . P. H. P. H. P

BASE HUMEDA

FRESCA

M.F.

DESCOMPUESTA

Proteina.

<%)

66.9 64.8

63.0

E. Etéreo. 7.3 8.9 9.8

Fibra.

<%) 1.0

1.0

1.0

Ceniza.

(%)

11.3 11.4 10.7

E.LN.

(%)

6.7

4.8

5.8

Humedad. (%)

7.8

9.3

9.7

Arginina.

(%)

3.8

3.7

3.6

Glicina.

(%) 3.7 3.6 3.5

Histidina.

(%)

1.6 1.5

1.5

Isoleucina

(%)

3.1 3.0

2.9

Leucina.

(%) 5.0 4.9

4.8

Usina. (%)

5.1 4.9

4.8

Metionina.

(%)

2.0 1.9

1.9

Cisterna.

(%) 0.6 0.5 0.5

Fenilala.

(%)

2.8 2.7 2.6

Tfroslna.

(%)

2.3 2.2

2.1

Serina.

(%) 2.4 2.3

2.3

Treonlna. (%) 2.8 2.7

2.6

Triptofano

(%)

0.7 0.7

0.7

Valina.

(%) 3.5 3.4

3.3

Calcio. (%) 3.7 3.7

3.7

Fósforo. (%)

2.4 2.4

2.4

Potasio.

(%) 0.7

0.7

0.7

Cloro. (%)

1.0

1.0

1.0

Magnesio. <%)

0.2

0.2

0.2

Sodio.

(%)

0.9

0.9

0.9

Azufre.

<%)

0.7 0.7

0.7

Cobre.

(mg/Kg)

9.0 9.0 9.0

Hierro.

(mg/Kg)

218

218

218

Manganeso.

(mg/Kg) 11.0 11.0

11.0

Selenio.

(mg/Kg)

1.3 1.3

1.3

Zinc. (mg/Kg)

105

105

105

Biotlna.

(mg/Kg) 0.2

0.2

0.2

Colina.

(mg/Kg)

3709 3709

3709

Ac.

Fólico. (mg/Kg)

0.2

0.2

0.2

Niaclna. (mg/Kg)

82.0

82.0

82.0

Ac. Pantoténlco.

10.0 10.0

10.0

Vi t B6

(mg/Kg)

4.6 4.6

4.6

Riboflavina. (mg/Kg)

7.5

7.5

7.5

Tiamlna. (mg/Kg) 0.5 0.5 0.5

Vit B12

(mg/Kg)

214

214

214

Vit E. (mg/Kg) 5.0 5.0

5.0

Inositol

(mg/Kg) 0.0 0.0

0.0

* H.P. = Harina de pescado.

** M.F. = Harina d e pescado medianamente fresca.

Los datos se tomaron de l NR C. 1983. National Academy Press. FAO and UNEP



Las har inas de pescado con d i ferente grado de f rscura fueron proporc ionadas por e l Dr . lan H. P ike D i rec tor de

Nutr ic ión de la Asoc iac ión Internac ional de Produ c tores de Har ina y Acei te de Pescado ( IFOMA) en U.K.

EJ resto de Jos ingre dien tes fue pro porc iona do p or Nu tr ientes del Pacíf ico (NUTRIPAC), Cul iacan , Sin.

APORTE TEOR ICO DE NUTRIENTES DE CADA INGREDIENTE.

NUTRIENTES

*H. SOYA

H. CAMARON.

GLUTEN MAIZ

TRIGO

BASE HUMEDA

1

1

1

Protelna.

(%)

43.7

32.7

44.7

11.4

E. Etéreo. (%)

2.2

7.7

2.2

1.0

Fibra. (%)

2.4

5.7

3.0

2.0

Ceniza.

(%)

7.2

27.2

27.2

0.5

E.LN. (%)

37.0

22.9

38.7

79.3

Humedad.

( )

7.2

3.5

3.2

1.7

Arginina.

(%)

2.9

2.0

1.4

0.4

Glicina.

( )

1.7

0.0

1.5

0.4

Hlstidina.

(%)

1.0

0.7

1.0

2.4

Isoleucina

(%)

1.9 1.3 2.3 0.4

Leucina.

(%)

3.1

2.0

7.5

0.8

Usina. (%)

2.6

1.7

0.8

0.2

Metionina.

(%)

0.5

0.6

1.0

0.1

Cisteína. (%)

7.3

0.4

0.7

0.3

Fenilala.

(%)

2.0

1.3

2.9

5.8

Tirosina. (%)

1.2

1.0

1.0

0.3

Serina. (%)

2.0

0.0

1.8

0.5

Treonina.

<%)

1.6

1.1

1.4 0.3

Triptofano

(%)

0.6

0.2

0.2

0.1

Valina. (%)

1.9

1.5

2.2

4.8

Calcio.

(%) 0.3

9.7

0.15

0.03

Fósforo.

(%)

3.0

1.8

0.4

0.2

Potasio.

<%)

1.9 0.8 0.03 0.1

Cloro.

(%)

0.04 1.0

0.6

0.1

Magnesio.

(%)

0.2 0.5

0.06

0.05

Sodio.

(%)

0.04 1.5

0.09

0.01

Azufre.

(%)

0.4

0.0 0.3 0.2

Cobre. (mg/Kg)

23.0

0.0 28.0 1.0

Hierro.

(mg/Kg)

119. 105 386

5.0

Manganeso.

(mg/Kg) 29.0

30.0 8.0 3.0

Setenio. (mg/Kg) 0.3

0.0

1.0

0.1

Zinc. (mg/Kg) 43.0

28.0 174 6.0

Biotina. (mg/Kg)

0.3 0.0

0.1

0.0

Colina.

(mg/Kg) 2614

5498 3.5

829

Ac. Folleo. (mg/Kg)

0.7 0.0

3.0 0.1

Niacina. (mg/Kg) 28.0 0.0 0.51 12.0

Ac. Pan toténico. 16.3

0.0 10.2 6.1

V it B6 (mg/Kg) 6.0

0.0 8.0 0.9

Riboflavina.

(mg/Kg)

2.9 4.0 1.6 0.5

Tiamina.

(mg/Kg) 5.6 0.0

0.2 1.8

V it B12 (mg/Kg)

0.0 0.0

0.0 0.0

V it E. (mg/Kg) 3.0 0.0

31.0 3.0



NUTRIENTES

BASE HUMEDA

Proteina.

<%)

E. Etéreo.

<%)

Fibra.

(%)

Ceniza.

( * )

E.LN.

(%)

Humedad.

( * )

Arginína.

(%)

Glicina.

(%)

Histidina.

(%)

Isoleucina

(%)

LeucJna.

(%)

Usina.

<%)

Metionina. (%)

Cisteína.

(%)

Fenilala.

(%)

Tirosina.

(%)

Serina.

(%)

Treonina.

(%)

Triptofano

(%)

Valina.

(%)

Calcio.

(%)

Fósforo.

(%)

Potasio.

(%)

Cloro.

(%)

Magnesio.

(%)

Sodio.

(%)

Azufre.

(%)

Cobre. (mg/Kg)

Hierro.

(mg/Kg)

Manganeso.

(mg/Kg)

Selenlo.

(mg/Kg)

Zinc.

(mg/Kg)

Biotlna.

(mg/Kg)

Colína.

(mg/Kg)

Ac. Folleo.

(mg/Kg)

Niacina. (mg/Kg)

Ac. PantOténico.

Vit B6

(mg/Kg)

Riboflavina.

(mg/Kg)

Tiamina. (mg/Kg)

Vit B12

(mg/Kg)

Vi t E

(mg/Kg)

Inositol

(mg/Kg)

LECITINA. ACEITE.

SOYA 1 PESCADO 1

0.0

0.0

97.0 100

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

3.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0 0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.07

0.0

3.0

0.1

1.2

0.0

0.0

0.0

0.1

0.0

0.03

0.0

0.0

0.07

0.0 3.0

0.0 5.0

0.0

0.0

0.0 0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

3.6

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0

0.0 0.0

0.0

0.0

0.0 0.0

2.2 0.0



ANEXO II.

DESCRIPCION GRAFICA DE LA SALA DE BIOENSAYOS.



T an q u e

reservor io

\ • • • • • • • • • • • •

-Tubería de aire T a nq u es d e Pr eeng o r d a

• • • • • • • • • • • •

T a nq ues d e ex per imenta c ió n

Figura No. 5. Vista supe rior de la sala de bieonsayo.

T ubo d e 4

SO ctn

Figura No. 6. Estructura de los acuarios de experimentación de a sala de bloensayos.



Figura No. 7. Sistema de la recirculación del agua de la sala de bloensayos.



ANEXO III.

APORTE DE NUTRIENTES DEL BIOENSAYO BIOTOXICOLOGICO.



NUTRIENTES *DN

a

DN

b

.

DM,

DM

b

BASE HUMEDA

DN

b

.

w

Proteina.

(%)

35.0

35.0

35.0

35.0

E„ Etéreo.

(%) 7.0

7.0

7.0

7.0

Fibra.

(%)

2.3 2.3 2.5 2.3

Ceniza.

(%) 6.0

6.9

7.1

6.1

E.LN.

(%) 44.2

44.0

42.9

44.3

Humedad.

(%)

7.6

7.4

7.9 7.8

Arginina.

(%)

1.8

1.8

1.8

1.8

Glicina.

(%)

1.6

1.6

1.6

1.6

Histidina.

{ )

1.7

1.7

1.7 1.7

Isoleucina

(%)

1.5

1.5

1.5

1.5

Leucina.

(%)

2.6

2.6

2.6

2.6

Usina.

(%) 2.0 2.0

2.0

2.0

Metionina.

(%)

0.8 0.8

0.8

0.8

Cisterna.

(%)

0.5 0.5

0.5

0.5

Fenilala.

(%) 3.9 3.8

3.7 3.9

Tirosina.

(%)

1-1. 1.1 1.1 1.1

Serina.

(%)

1.4

1.4

1.4

1.4

Treonina.

(%)

1.3 1.3

1.2 1.3

Triptofano (%) 0.3

0.3

0.3 0.3

Valina.

<%) 3.6 3.6

3.4 3.6

Calcio.

(%) 1.3 1.6

1.4

1.2

Fósforo.

(%)

1.4 1.5

1.4

1.2

Potasio.

(%)

0.6 0.6

0.7

0.6

Cloro.

( )

0.3 0.3

0.3

0.3

Magnesio.

( ) 0.1

0.1 0.1

0.1

Sodio.

( ) 0.3 0.3

0.3 0.3

Azufre.

(%)

0.3

0.3

0.3

0.3

Cobre. (mg/Kg)

6.1 6.2 6.9

6.1Hierro. (mg/Kg) 88.9 89.8 93.4

89.1

Mang aneso. (mg/Kg) 8.2 8.4 9.3

8.3

Selenio. (mg/Kg) 0.5 0.5 0.5

0.5

Zinc. (mg/Kg)

45.8

46.0

47.2 45.8

Biotina. (mg/Kg) 0.09 0.09

0.1 0.09

Colina.

(mg/Kg)

1893

1907 1964

1894

Ac. Folleo. (mg/Kg) 0.1 0.1

0.2 0.1

Nlacina. (mg/Kg)

33.5

33.6 -

34.1 33.5

Ac. Pantotónico.

7.7 7.7 8.1

7.7

Vit. B6 (mg/Kg)

2.3 * 2.4 2.5

2.3

Riboflavina.

(mg/Kg)

2.8

2.8 2.9

2.8

Tiamina.

(mg/Kg)

1.6 1.6 1.7 1.6

V it B12 (mg/Kg) 64.2 64.2 64.2 64.2

V it E. (mg/Kg)

3.4 3.4 3.4

3.4

Inositol.

(%)

0.05 0.05 0.05

0.05

* DN, = Dieta con

harina de | escado normal (a).

DN„ = D ieta con har ina de pescado normal (b) .

DM , s D ieta con ha r ina de pescado de tox ic idad media (a) .

DM„ = D ieta con har ina de pescado d e tox ic idad media (b) .



NUTRIENTES

*H. P.

H . P .

H. P

H.P.

BASE HUMEDA

NORMAL(a)

NORMAL(b)

MEDIANA (a) MEDIANA (b)

Proteina.

(%)

68.7

67.10

64.0

67.8

E. Etéreo.

(%)

7.2 7.5 7.1 6.6

Fibra.

(%)

1.0

1.0

1.0

1.0

Ceniza.

(%)

14.6

11.4

10.7

14.8

E.LN.

(%)

0.0

0.30

1.0

1.0

Humedad.

(%)

8.1

7.4

9.6

8.8

Arginina.

(%)

3.9

3.8

3.6

3.8

Glicina.

(%)

3.8

3.7

3.5

3.8

HIstidina.

(%)

1.6

1.6

1.5

1.6

Isoieucina

(%)

3.2

3.1

3.0

3.1

Leucina.

{%)

5.1

5.0

4.8

5.1

Usina.

(%)

5.2

5.1

4.8

5.1

Metionina.

(%)

2.0

2.0

1.9

2.0

Cisterna. (%)

0.6

0.6

0.5

0.6

Fenilala.

(%)

2.9 2.8 2.6 2.8

Tlrosina.

(%)

2.3

2.2

2.1

2.3

Serina.

(%)

2.5

2.4

2.3

2.4

Treonlna.

(%)

2.8

2.8

2.6

2.8

Triptofano

(%)

0.7

0.7

0.7

0.5

Valina.

(%)

3.6

3.5

3.3

3.6

Calcio. (%)

3.7

4.5

3.7

3.2

Fósforo.

(%)

3.0

3.3

2.6

2.3

Potasio.

(%)

0.7

0.7

0.7

0.7

Cloro.

(%)

1.0

1.0

1.0

1.0

Magnesio.

(%)

0.2

0.2

0.2

0.2

Sodio.

( ) '

0.9

0.9

0.9

0.9

Azufre. (%)

0.7

0.7

0.7

0.7

Co bre. (mg/Kg) 9.0 9.0 9.0 9.0

Hierro. (mg/Kg) 218 218

218

218

Manganeso. (mg/Kg)

11.0 11.0

11.0

11.0

Setenio. (mg/Kg)

1.3 1.3

1.3 1.3

Zinc. (mg/Kg) 105

105

105

105

Biotina. (mg/Kg)

0.2 0.2

.0.2

0.2

Co lina. (mg/Kg) 3709

3709

3709

3709

Ac. Folleo .(mg/Kg)

0.2

0.2

0.2 0.2

Niacina. (mg/Kg)

82.0 82.0

82.0

82.0

Ac . Pan toténico. 1Ò.0

10.0 10.0

10.0

V it B6 (mg/Kg) 4.6 4.6

4.6 4.6

Riboflavina. (mg/Kg)

7.5

7.5 7.5 7.5

Tiamina. (mg/Kg) 0.5 0.5 0.5 0.5

Vit. B12 (mg/Kg) 214 214

214 214

Vit. E. (mg/Kg) 5.0 5.0 5.0 5.0

Ino sitol (%) 0.0 0.0 0.0 0.0

* H.P. = Harina de pescado



NUTRIENTES

*H . SOYA

H.

CAMARON

H.

TRIGO

.

GLUTEN

BASE HUMEDA

2

2 2

TRIGO

Proteina.

(%)

39.9

43.4

10.6

68.5

E.

Etéreo.

(%) 0.5 4.2 1.3 0.6

Fibra. (%)

7.0

12.2

2.0

3.0

Ceniza.

(%)

7.5

27.3

0.9

0.9

E.L.N.

(%)

39.6

6.0

79.3

38.7

Humedad.

(%)

5.2

6.7

8.5

6.1

Arginina.

(%)

2.6

2.7

0.3

2.5

Glicina.

(%)

1.6

0.0

0.3

2.5

Histidina. (%)

0.9

1.0

2.2

1.4

Isoleucina

(%)

1.8

1.8 0.4

2.7

Leucina.

(%)

2.9

2.9 0.7

5.1

Usina.

(%)

2.3

2.3

0.2

1.4

Metionlna.

(%)

0.4

0.9

0.1

1.0

Cisteína.

(%)

0.6

0.6

0.2

1.7

Fenllala.

(%)

1.8 1.7 5.4 3.5

Tirosina.

(%)

1.1

1.4

0.3 1.9

Serina.

(%)

1.8

0.0

0.5

3.4

Treonína.

(%)

1.4

1.5

0.3

1.9

Triptofano

(%)

0.5

0.3

0.1

0.7

Vaiina.

(%)

1.7

1.9

4.5

2.9

Calcio.

(%)

0.3

9.7

0.03

0.5

Fósforo.

(%)

3.0

1.8

0.2

1.5

Potasio.

(%)

1.9

0.8

0.1

1.9

Cloro.

(%)

0.04

1.0

0.1

0.02

Magnesio. {%)

0.2

0.5

0.05

0.1

Sodio.

(%)

0.04

1.5

0.01

0.04

Azufre.

(%)

0.4

0.0

0.2

0.5Cobre. (mg/Kg) 23.0 0.0 1.0

13.0

Hierro. (mg/Kg)

119

105

5.0

118

Manganeso. (mg/Kg)

29.0

30.0

3.0

8.0

Selenlo.

(mg/Kg) 0.3

0.0

0.1

1.0

Zinc.

(mg/Kg)

43.0 28.0

6.0

93.0

Biotina. (mg/Kg)

0.3

0.0

0.0

0.0

Colina.

(mg/Kg)

2614

5498

829

829

Ac. Fóiico.

(mg/Kg)

0.7 0.0

0.1

0.1

Nlacina.

(mg/Kg)

28.0

0.0 12.0

12.0

Ac. Pantoténico.

16.3

0.0

6.1

6.0

Vi t B6

(mg/Kg)

6.0

0.0

0.9

0.9

Riboflavina.

(mg/Kg)

2.9 4.0 0.5 0.5

Tiamina. (mg/Kg) 5.6 0.0 1.8 1.8

Vi t B12 (mg/Kg)

0.0

0.0 0.0 0.0

Vit E.

(mg/Kg)

3.0 0.0

3.0

3.0

Inositol (%)

0.0 0.0 0.0

0.0



ANEXO IV.

ANA LISIS ESTADISTICOS DEL BIOENSAYO FRESCURA.



ANALISIS DEL BIOENSAYO I.

15 CAMARONES/ ACUARI O.



Dat a: FRESCURA I . TASA CRECI M1ENTQ

L e v el c o d e s : F R ES CUR A I . DI ETf i

L a be l s :

Ra ng e t e s t : S c hs - f e Co nf i d en c e l e ve l : 9 5

An al y s i s of v ar i a nc e

S ou r c e o f v a r i a t i o n

S u m o f S q ua r e s d . f . Me a n s q u a r e

F - r a t i o

Si g. l evel

Be t ween g r oups

5 1 7 . 8 0 3 05 2 2 5 8 . 9 0 1 53

4 . 3 4 9

. 0 47 7

Ui t h i n g r o u p s 5 3 5. 7 4 35 8

9

5 9 . 5 2 7 6 2

T ot a l ( c o r r e c t e d ) 1 05 3. 5 51 6 11

0 m s s i n g v a l u e( s ) h a ve t e en ex c l u de d.

T a bl e o f me a ns f o r E X PE RI Mi , T CRE CI M by E X P E R I M. DI E T A 2 .

S t n d . E r r o r

S t n d. E r r o r 9 5 P er c e nt S c he f f e

L e ve l

Count A ver age

( i n t e r na l )

( p oo l e d 5 )

i n t e r v a l s f o r me a n

1 4 6 3 . 5 2 7 50 0 4 . 1 6 02 4 3 Í 3 . 8 5 7 70 7 2 5 5 . 5 6 8 54 3 7 1 . 4 3 6 45 7

2

4

54. 33ÔOOÔ 4. 3676176

3 . 8 5 7 7 07 2

4 6 . 3 7 1 0 43 6 2 . 2 8 8 9 57

3 4

4 7 . 4 9 5 0 00 2 . 8 7 4 37 0 9

3 . 8 5 7 7 07 2 3 9 . 5 3 6 04 3

5 5 . 4 5 3 95 7

T ot a l

12

5 5 . 1 1 7 50 0 2 . 2 2 7 24 3 3 2 . 2 2 7 24 8 3

5 0 . 5 2 2 39 4

59 . 712606

Mu l t i p l e r a n g e a n al y s i s f o r EXP E RI K 1. T CRE C1 M by E X PE RI M1 . DI E T A2

Me t h o d :

9 5 P e r c e n t Sc h e f f e

L e ve l

Count Aver age Homogeneo us Gr oups

*

3 4 47 . 495000

*

2 4

5 4 . 3 3 0 0 00

1 4 6 3 . 5 2 7 50 0



Dat a: FRESCURA I . CONSUMO

L e v e l c o d e s : F R ES CUR A I . DI E T A

l abe l s :

S an ge t e s t S c he f f e

Co n i i d e nc e l e ve l •*

95

An al y s i s

of v ar i a nc e

S o u r c e oí v ar i a t i o n S u m oi S q ua r e s

d.i.

Mean square F - r a t i o

Si g. l evel

Be t ween g r oups . 1350500 2 , 0 6 75 2 5 0 5 . 5 0 2 . 0 27 5

W t hi n gr o up s

. 1104500

9

. 0 1 22 7 22

T ot a l ( c o r r e c t e d ) . 2 45 50 00 • 11

0 m s s i n g v a l u e ( s ) h av e b ee n ex c l u de d.

Tab l e ' o í , - neans f o r EXPSS I Hi . CONSUMO by Ï XP ERI M1 , DI ETA S

S t n d . E r r o r

St n d. E r r o r 9 5 P er c e nt S c he f f e

L e ve l

Co un t Av er a ge ( i n t e r n al ) ( p oo l e d s) i n t e r v a l s f or me an

1

4 1 . 7 5 2 50 0 0 . 0 6 5 49 4 3 . 0 5 5 39 0 0 1 . 6 3 8 22 3 1 1 . 8 6 6 77 6 9

2 4 1 . 5075000 . 0563286 . 0553900 1 . 3932231 1 . 6217769

3 4 1 . 5 5 5 00 0 0 . 0 4 17 3 33 . 0 5 53 9 00 i . 4 4 0 72 3 1 1 . 6 6 92 7 6 9

Tot al - 12

1 . 6 0 5 00 0 0 . 0 3 19 7 94

. 0319794

1 . 5 3 9 0 22 2 1 . 6 7 09 7 7 8

Mu l t i p l e r a n g e a n al y s i s f o r E XP E RI Mi . CONS UMO b y E XP E RI Mi . DI E T A2

Me t h o d :

3 5 P e r c e n t

S ch ef f e

Leve l C ount A ver age Homogeneous Gr oups

2 4 1 . 5075000

*

3 4

1 . 5 5 5 00 0 0

*

1 4 Í . 7 5 2 50 0 0

*



Dat a: FBXSCUSf i 1 . TCA

L e v e l c o d e s : F R ES CURA I . DI E T A

l a be l s :

Ra ng e t e s t : S c he f f e Co nf i d en c e

l ev el : 95


S ou r c e of v ar i a t i o n Sum of S qu ar e s d. f . Me an s q ua r e F - r a t i o Si g. l evel

Be t ween g r oups

. 7054167

2 . 3527083

1 . 7 5 0

. 2 28 0

Ui t h i n gr o up s

1 . 8 1 3 87 5 0

9 . 2015417

T ot a l ( c o r r e c t e d ) 2 . 5 19 29 17 1 1

0 m s s i n g v a l u e( s ) h a ve be en ex c l u de d.

T a b l e o f me a n s f o r EX P EB l Mi . T CA b y E X P ER I M1 . DI E T A2

L e ve l

C ount A ver age

S t n d . E r r o r

( i n t e r na l )

S t n d . E r r o r

( p oo l e d s )

9 5 P e r c e n t

i nt e r v al s

S c he f f e

f or mean

1 4 2 . 9600000 . 2398263 . 2244670

2 . 4 9 6 89 5 1

3 . 4 2 3 10 4 9

2

4

3.

0100000

. 2214723 . 2244670

2 . 5468951

3 . 4 7 3 10 4 9

3

4

3 . 4975000 . 2111625 . 2244670

3 . 0343951

3 . 9606049

To t a l 12 3 . 1558333 . 1295961 . 1295961

2 . 8 8 8 4 59 6

3 . 4232071



Dat ai FRESCURA I . MORTALI DAD

L e v el c o d e s : F R ES CUR A I . DI E T A

L abel s . '


l evel :

95


S ou r c e of v ar i a t i o n

S um of S qu ar e s d. f .

Me an s q ua r e F - r a t i o Si g. l e vel

Be t ween g r oups

2 0 0 . 0 0 0 0 2 1 0 0 . 0 0 0 0Ì . 9 00 . 4 40 2

W t h i n g r o u ps 1 ÖÖ0 . Ö0 0 1

9

1 1 1 . 1 1 1 1 2

T ot a l ( c o r r e c t e d) 1 20 0. 0 00 1 11

0 m s s i n g v a l u e( s ) h a ve b ee n e xc l u de d.

Tab l e o f means f o r EXP ERI Ml . MORTAL DA D by EXP ERI M1 . DI ETA 2

S t n d. E r r o r St nd. E r r o r 9 5 P er c e nt S c he f f e

L e ve l Co u nt

A ver age

( i nt e r n al ) ( p oo l e d s ) i n t e r v a l s f or me an

A

X

4

5 . 0 0 2 50 0

1 . 6 6 7 50 0 0 5 , 2 7 0 46 2 9 - 5 . 8 7 1 15 8 2 1 5 . 8 7 6 15 8

2

4

1 5 . 0 0 2 50 0 S . 7 6 6 14 9 3

5 . 2704629

4.

1288418

2 5 . 8 7 6 15 8

3

4

10 . 005000 1 . 9254631 5 . 2704629

- ,

8686532 20 . 878658

T o t a l 1 2 1 0 . 0 0 3 33 3 3 . 0 4 2 90 3 2 3 . 0 4 2 90 3 2 3. 7 2 5 42 3 9 1 6 . 2 8 1 24 3



ANALISIS DEL B10ENSAYO II.


14 DIAS.



Da t a : F R ES CUR A I I ( 1 4 BI AS ) . T . CR ECI MI E NT O

L e v el c o d e s : DI E T A

L a be l s :

Ra n ge t e s t : S c h e f f e Co n f i d e nc e 1 ev e 1: 9 5


S ou r c e of v ar i a t i o n Sum of Sq ua r e s d. f . Me an s q ua r e F - r a t i o Si g. l ev el

Be t ween g r oups 113 . 11487 2 56 . 557433

1 . 0 3 9

. 3 92 6

W t h i n g r o up s

4 8 9 . 7 7 7 5 0

9

5 4 . 4 1 9 7 22

T ot a l ( c o r r e c t e d) 6 02 . 8 92 37 11

0 m s s i n g v a l u e( s ) h a v e b ee n e xc l u de d.

Tab l e o f means f o r FRESC215 . TA 3AC SE by FSESC 215 . DI ETA 2

S t n d. E r r o r St nd . E r r o r 95 P er c e nt

S c he f f e

L e ve l

Co un t Av e r a g e ( i n t e r n al ) ( p o ol e d s ) i n t e r v a l s f or me an

1

4 5 3 . 6 4 5 00 0 1 . 5 9 2 04 5 3 3 . 6 8 8 48 6 2 4 6 . 0 3 5 1 6 8

61 . 254832

2 4 47 . 450000 3 . 4351152

3 . 6 8 8 48 6 2 3 9. 8 4 0 16 8

5 5 . 0 5 9 83 2

3

4 54 . 240000 5 . 1458883

3 . 6 8 8 48 6 2

4 6 . 6 3 0 1 6 8 6 1 . 8 4 9 83 2

T ot a l 1 2 5 1 . 7 7 8 33 3 2 . 1 2 9 54 8 5 2 . 1 2 9 54 8 5 4 7 . 3 8 4 7 95 5 6 . 1 7 1 37 2



Dat a FRESC URA I I ( 14 DI A S ) . T . C RECI MI ENTO

L e ve l c o d es : DI E T A

L abe l s :

Ra ng e t e s t : S c he f f e Co nf i d en c e l e ve l : 9 5



S um of S qu ar e s d. f . Me an s q u ar e F - r a t i o Si g . l ev el

Be t ween g r oups . 2362500 2 . 1181250 1 . 754

. 2 2 73

Ui t h i n g r o u p s . 6 05 97 50 9 . 0 67 33 06

T ot a l ( c o r r e c t e d) . 3 42 22 50 1 1

0 m s s i n g v a l u e Cs ) h a v e b ee n e x c l u de d.

Tabl e o f means f or FRESC215. CONSUMO by FRESC215. DI ETA2

L e ve l

C ount A ver age

S t n d , E r r o r

( i n t e r na l )

S t n d . E r r o r

( p oo l e d s )

9 5 P e r c e n t

i nt e r v al s

S c he f f e

f or mean

1 4 2. 6525000 . 1105573 . 1297407 2 .

3S48280 2 . 9201720

2 4 3150000 . 0883648 . 1297407 2. 0473280 2 . 5826720

n

O

4 2 . 5400000 . 1745470 . 1297407 2. 2723280 2 . 8 0 7 67 2 0

T ot a l 1 2

5

5025000 . 0749058 . 0749058

3479595 2 . 6570405



Dat a FRESCURA I I ( 14 DI A S ) TCA

L e ve l c o d e s DI E T A.

L abe l s :

Ra ng e t e s t : S c he f f e Co nf i d en c e l e ve l : 95



S um o f S qu a r e s d. t. Me an s q ua r e F - r a t i o

Si g. l evel

Be t ween g r oups

. 0450167

2 . 0 2 25 0 83 . 3 1 0

. 7 4 08

Ui t h i n g r o u p s . 6 53 0 75 0 9 . 0 72 56 3 9

T ot a l ( c o r r e c t e d) . 6 98 09 17 11


T a b l e o f ' ¡ nea ns f o r F R E SC2 1 5. T CA by F R E S C2 1 5 . DI E T A2

L ev el

C ount

A ver age

S t n d . E r r o r

( i nt e r na l )

S t n d . E r r o r

( p oo l e d s )

9 5 P e r c e n t

i nt e r v al s

S c he f f e

f or mean

i 4

3. 2400000 . 1 3 5 1 5 4 2

.1346884 2 . 9621201 3 . 5178799

2 4 3 . 1 6 7 5 00 0 . 1 0 62 5 2 5 . 1 3 46 8 84 2 .

3896201 3. 4453799

3

4

3 . 0 9 00 0 0 0 . 1 5 76 9 17 . 1 3 46 8 84 2.

8121201 3 . 3678799

T ot a l 1 2 3 . 1 6 5 83 3 3 . 0 7 77 6 24 . 0 7 77 6 24 3 . 0 0 5 3 9 93 3 . 3 2 6 26 7 4



Dat a: FRESCURA 2 ( 14 DI AS) MORTALI DAD

L e v el c o d e s : DI E T A

L abe l s :



S ou r c e of v ar i a t i o n Sum of S qu ar e s d. i . Me an s q ua r e F - r a t i o Si g. l evel

Be t ween gr oups

182 . 29167 2 91 . 145833

1 . 4 0 0 . 2 3 55

W t h i n g r o u p s 5 85 . 9 37 50 9

6 5 . 1 0 4 16 7

T ot a l ( c o r r e c t e d ) 7 68 . 2 29 1? 1 1


Tabl e of means f or I NCREMEN. MORTALI DAD by I NCREMEN. DI ETA

S t n d . E r r o r

St n d. E r r o r 95 P er c e nt S c he f f e

L e v e l Co u n t Av e r a g e

( i n t e r n al ) ( p oo l e d s ) i n t e r v al s f or me an

1 4 . 0000000 . 0000000

4 . 0 3 4 3 57 7

- 8 . 3 2 34 1 05 8 . 3 2 34 1 0

2 4 9 . 3 7 5 00 0 0 5 . 9 8 3 91 9 4 • 4 . 0 3 4 35 7 7 . 1 . 0 5 1 58 9 5 1 7 . 6 9 8 41 0

3 4 6 . 2 5 0 00 0 0 3 . 6 0 8 43 9 2 4 . 0 3 4 3 5 77 - 2 . 0 7 3 4 1 05 1 4 . 5 7 3 41 0

T ot a l 1 2

5 . 2 0 83 3 3 3

2 . 3 2 9 23 7 5 2 . 3 2 9 23 7 5 . 4 0 28 1 01 1 0 . 0 1 3 85 7



ANALISIS DEL BIOENSAYO II.


28 DIAS.



Da t a : F E E SCUK A I I ( 2 8 DI A S) T . CS E CI MI E NT O

L e v el c o d e s : DI E TA

L abe l s :

E an ge t e s t : S c he f f e

Co nf i d en c e l e ve l : 9 5


S ou r c e of v ar i a t i o n Sum of S qu ar e s

d. f .

Me an s q u ar e F - r a t i o

Si g. l evel

Be t ween g r oups 389 . 3543 2 194 . 67716 . 640 . 5495

Ui t h i n g r o u p s 2 7 35 . 6 11 2 9 3 0 3. 9 5 68 0

T ot a l ( c o r r e c t e d) 3 12 4. 9 65 5 11


Tabl e o f means f or I NCSEMEN. TASACEEC by I NCEEMEH. DI ETA

St n d. E r r o r St nd. Er r o r

9 5 P e r c e n t

S c he f f e

L e ve l Co un t Av e r a ge ( i n t e r n al ) ( p oo l e d s ) i n t e r v a l s f o r me an

1 4 125 . 62000 2 . 063795

8 . 7 1 7 17 8 4

1 0 7. 6 3 53 1 1 4 3 . 6 0 46 9

£

4

1 1 2 . 1 5 2 50 1 0 . 6 0 64 5 1

8 . 7 1 7 17 8 4

9 4 . 1 6 7 81

130 . 13719

3 4 122 . 04500 10 . 545688 8 . 7171784

1 0 4. 0 6 03 1

140 . 02969

T ot al

12 119 . 93917

5 . 032865 5 . 0328653 109 . 55570 130•32283



ANALISIS DEL BIOENSAYO II.


28 DIAS.



Dat a: FRESCURA 11 ( 28 DI AS) CONSUMO

Leve l codes : . D1ETA

L abe l s :



S ou r c e of v a r i a t i o n S um of S qu ar e s d. f . Me an s q u ar e

F - r a t i o

Si g. l evel

Be t ween g roups

2 . 3 1 1 01 6 7

2 1 . 15550SS

1 . 3 8 3 . 2 99 3

W t h i n g r o u ps 7 . 5 16 8 75 0 9 . 8 35 20 83

T ot a l ( c o r r e c t e d) 9 . 8 27 39 17 11

0 m s s i n g v a l u e ( s ) h av e b ee n ex c l u de d.

Tabl e o f means f or I NCREMEN. CONSUMQ by I NCREMEN. DI ETA

L e ve l

C ount A ver age

S t n d . E r r o r

( i n t e r na l )

S t n d . E r r o r

( p oo l e d s )

9 5 P e r c e n t

i

nt e r v al s

Sehe He

f or mean

1 4

6 . 4 8 0 00 0 0

. 3140329 . 4569487

c

•Jt

5372548 7. 4227452

2 4 5 . 4175000 . 1066439 . 4569487 4 . 4747548 6 . 3602452

3 4 6 . 0900000

. 7 1 86 2 14

. 4 5 69 4 87

5.

1472548 7 . 0327452

T o t a l 1 2 5 . 9 9 5 83 3 3 . 2 6 38 1 94 . 2 6 38 1 94 5 . 4 5 1 53 9 1 6 . 5 4 0 12 7 5



Da t a : F R ES CUR A I I ( 2 8 DI A S) T CA.

L e ve l c o d es : DI E TA

L abe l s :

E an ge t es t ' . S c h ef f e Co nf i d en c e l e ve l : 9 5

An al y s i s o f v ar i a nc e


S um of S qu ar e s d , f . Me an s q ua r e F - r a t i o

Si g. l evel

Be t ween g r oups . 0288167

£

. 0144083

. 0 98 . 9 07 4

W t hi n gr o up s

1 . 3 1 9 87 5 0

9 . 1466528

T ot a l ( c o r r e c t e d ) 1 . 3 48 69 17 11

0 m s s i n g v a l u e ( s ) h av e b ee n e xc l u de d.

Tabl e o f means f or I NCREMEN. TCA by I NCREMEN. DI ETA

L e ve l Co u n t A v er a g e

S t n d . E r r o r

( i n t e r na l )

S t n d . E r r o r

( p oo l e d s )

9 5 P e r c e n t

i nt e r v al s

S c he f f e

f or mean

4 3. 2250000 . 1483521

. 1 9 14 7 64 ' 2 . 8 2 99 5 9 1

3 . 6200409

«

4 3. 1250000 . 2135611 . 1914764 2 . 7299591

3 . 5200409

3

4 3 .

2325000

. 2058468 . 1914764 2 . 8374591 3 . 6275409

T ot a l 1 2 3 . 1 9 4 16 6 7 . 1 1 05 4 89 . 1 1 05 4 89 2 . 9 6 6 0 89 7 3 . 4 2 22 4 3 6



Dat a : FRESCURA I I . ( 23 DI A S) MORTAL I DA D

L e v el c o d e s : 5 1E T A

L abe l s :




S um of S q ua r e s

d. f . Me an s q u ar e F - r a t i o

Si g. l evel

Be t ween g r oups 182 . 29167 2 91 . 145833 1 . 400 . 2955

W t h i n g r o ups

5 8 5 . 9 3 7 50

9

6 5 . 1 0 4 16 7

T ot a l ( c o r r e c t e d) 7 68 . 2 29 17 11

0 m s s i n g v a l u s ( s ) h av e b ee n e xc l u de d.

Tabl e o f means f or I NCREMEN. MORTAL DAD by I NCREMEN. DI ETA

St n d. E r r o r St nd. E r r o r

9 5 P e r c e n t

S c he f f e

L e ve l

Co un t Av e r a ge ( i n t e r n al ) ( p oo l e d s ) i n t e r v al s f or me an

1

4 . 0000000 . 0000000 4 . 0343577

- 3 . 3 2 34 1 05 8 . 3 2 34 1 0

2 4 9 . 3750000

5 . 9 8 3 9 19 4

4 . 0 3 4 3 5 77 1 . 0 5 1 58 9 5 1 7 . 6 9 8 41 0

3

4

6 . 2 5 00 0 00 3 . 6 0 8 4 39 2 4 . 0 3 4 3 5 77 - 2 . 0 7 3 4 10 5 1 4 . 5 7 3 41 0

T ot a l

12 5 . 2083333 2 . 3292375 2 . 3292375 . 4028101 10 . 013857



ANEXO V.

ANALISIS ESTADISTICOS DEL BIOENSAYO BIOTOX1COLOGICO.



A NA L ISIS ESTADISTICOS A LOS 14 DIAS DE EXPERIMENTA CION.



Dat a : B I 0T0X I C QLQG1CQ ( 14DI A S) T . C RECI MI ENTO

L e ve l c o d e s : DI E TA.

L ab el s :

Ra ng e t e s t : S c he f f e

Co n f i d e nc e l e ve l 95

Ana l y s i s o f v a r i a nc e

S ou r c e of v a r i a t i o n S um of S qu ar e s d. f .

Mean squar e

F - r a t i o S i g. l ev el

Be t ween g r oups

1696 . 1363

7 2 4 2 . 3 0 5 18 1 . 7 2 2 . 1 5 12

W t h i n g r o up s 3 37 6. 2 91 3

24

. 1 4 0. 6 7 88 0

T ot a l ( c o r r e c t e d) 5 07 2. 4 27 6 31

0 m s s i n g v a l u e ( s ) h av e b ee n e x cl u de d.

Tab l e o f means f o r M0LL ER01. 7A SAC REC by M0LL ER01. DI ETA 2

S t n d . E r r o r

S t n d . E r r o r

9 5 P e r c e n t S c he f f e

L ev el Co un t Av e r a g e ( i n t e r n a l ) ( p oo l e d s ) i n t e r v al s f or me an

1

4 1 2 0 . 0 7 0 0 0 4 , 9 6 2 5 39 7

5 . 9304048

1 0 2 . 8 0 1 21

137 . 33879

2 4 126 . 13250 6 . 8136449 5 , 9304048

1 0 8 . 8 6 3 71

143 . 40129

n

o

4

1 1 3 . 2 5 5 0 0 1 . 6 8 0 30 5 0 5. 9 3 04 0 48

95 . 98621

130 . 52379

4

4 120 . 45000

4 . 2 1 6 8 3 33 5 . 9 3 0 40 4 8

103 . 18121 137 . 71879

5

4 119 . 69250

6 . 4 5 7 68 0 7 5 . 9 3 0 40 4 8

102 . 42371 136 . 96129

6 4

1 1 5 . 5 2 7 5 0

5 . 3 3 3 64 3 8

5 . 9304048

98 . 25871 132 . 73629

7 4 122 . 72500

9 . 0 4 7 81 8 8

5 . 9304048

105 . 45621 139 . 99379

S

4

1 3 8 . 6 3 2 5 0

6 . 1390164 5. 9304048

1 2 1 . 3 6 3 71 1 5 5 . 9 0 1 29

T ot a l 3 2 1 2 2 . 0 6 06 3 2 . 0 9 6 71 4 7 2 . 0 9 6 71 4 7 1 1 5. 9 5 51 9

128 . 16606

One- - Wa y A n a l y s i s o f V a r i a n c e

Da t a : MQL L E RQl . S ÛB RE VI V



Dat a : 3 I ÖTCXI C O L O G ICO, 14 SI AS, CONSUMO

Level cades

: SíZThS

L ab el s :

Ra ng e t e s t ? S c he í i e

i i r , : i def ) Ci l evel :

SS

Ana l y s i s q: v ar i a r a s

3cur ee

o : v a r i a t i o n S um of S qu ar e s d . i . ¡•l ean s q ua r e

F- r at i - 3

i l s . l evel

Bet ween g r ey?s 8 . 45SS75- C05 7 1 . 209522- 005 , ?64 =4352

v i

t hi n gr o up s

2 , 006672- 004 15

i . 2 54 17 2- 0 05

Total

<

c o r r e c t e d ? 2 . 853332- 004 23

0 m s s i n g val ueí ' s ; ha ve be en e xc l u de d.

Tabl e j ? means f or M0LLSS. Ö1. CONSUMO by MOLL ERO . DÍ 27A3

S t n d. E r r o r St

n d . S r r o r

¿5 Per cent Schei " i s

L e ve l Co un t Av e r a g e ( i n t e r n al ) » P G C l i â S )

i nt e r v al s

f o r me i n

1 3 . 1320000 , 0011547 , 0020445

.1¿J?¿4b

, 1332354

. 1350000

,

00057 74 . •0020446

. 1237646

. 1412354

,i2ziii~ .

CC05ÔS? . 0020446 . 1294313

. 1419021

-z

3 , 1330010 , 0010000 . 0020446 . 1317646 . 1442354

•Z

. 1323333 . 0023333 . 0020446 . 1260979

. 1335537

3 , 1363333 . 0003313 . 0020446 . 1300975 . 1425537

i

3

. 1340000 . 0000000 . 0020446

. 1277646 . 1402354

S

, 1333333 . 0043103

, 0020446

. 1290979

. 1415687

T ot a l

24

. 1348333 . 0007229

. 0007229

. 1326288

. 1370379



One- i day An a l y s i s o í Va r i a nc e

Dat a; BIGTÜXIÍQiMICÍ). H

î

:AS= TC

h

L e v el c o d es : DI S T AS

L abe l s ¡

Âa ng e t e s t : S c he f f e Co nf i d en c e l e ve l : 9 5

An al y s i s 0 / v a r i a nc e

S ou r c e : - ï v a r i a t i o n S us ot S qu ar e s d. f . Me an s q ua r e F - r a i i o Si g. L s vel

Bet ween gr oups


. 3671625 ?

. 5251333 16

T ot a l ( c o r r e c t e d) . 8 56 235 8 2 3

C m s s i n g v a l u e d ha ve t e en e xc l ude d.

. 0524513 1 . 53c . 2Í 0C

' , 0330708

On e- Wa y An a l y s i s o f Va r i a n c e

Tabl a of means f or MOLLERO . TCf i by MOLL ERO . DI ETAS

3t r ¡ á. Zr r o r 3 t n d. E r r o r 95 P er c e nt S c he f f e

Leve l Count

Aver age

( i nt e r na l ) ( p oo l ed sí i nt e r v al s

f or mean

1

3

i . 556666?

. 0536449 . 1049334

1 . 2364753

1 . 3763575

2

3

i ,65êSÔ6?

. 1431005 . 1049934

1 . 3364753 1 , 9763575

3 3 1. 8300000

. 0435850 . 1049934

1 . 5098092

2. 1501908

4

3 1, 7600000 . 0750535

. 1049334

1 . 4398C92 2 . 0801908

5

3

1 , S233S33

. 1604503 . 1049934 í . 3031425

1, 5435242

i

-5

1 . 8433333

. 1238727

. 1049934 1 . 5231425

2 . 1635242

7

3

i . 7 73 33 33

. 1058589

. 1049934

1. 4531425 2. 0335242-

3

í . 4 30 00 00

. 0642910

. 1049934

i . 1 59 80 92

í . 3 00 13 03

Tot a l

24 1. 6904167 , 0371208

. 0371208

1 . 5772121 1 . 3036212



Dat a : B I OTQX I GOLOS I CO ( 14 DI A S ) SOBREV I V ENC I A

L e v el c o d e s : D I E T AS

L abe l s :


An al y s i s o f v a r i a nc e


Su m of S qu ar e s d. f .

Mean squar e

F - r at i o Si g. l evei

Be t ween g r oups 332 . 13059 7

4 7 . 4 4 7 2 2 7

1 . 9 3 2

.

1083

W t h i n g r o u ps 5 89 . 3 44 60 24 2 4 . 5 5 6 02 5

T ot a l ( c o r r e c t e d) 9 21 . 4 75 19 31


Tab l e o f means f o r M0LL EE01 . SOEEEY I V by MOLL ERO . DI ETA 2

S t n d . E r r o r

St nd . E r r o r 95 P er c e nt

S c he f f e

L e ve l

Co un t Av e r a g e ( i n t e r n a l ) ( p o ol e d s ) i n t e r v a l s f or me an

1

4 9 4 . 9 9 75 0 0 3 . 1 9 3 01 9 4 2 . 4 7 7 70 Í 8 8 7 . 7 8 2 6 62 1 0 2 . 2 1 2 34

2

4 96 . 665000 1 . 9254631 2 . 4777018 89 . 450162 103 . 87984

3 4 9 6 . 6 6 5 00 0 Í . 9 2 54 6 31 2 . 4 7 77 0 18

8 9 . 4 5 0 1 62

1 0 3 . S 7 9 34

4

4

9 4 . 9 9 7 50 0 1. 6 6 7 50 0 0 2 . 4 7 7 70 1 8 8 7 . 7 8 2 6 62

1 0 2 . 2 1 2 34

j

4 9 1 . 6 6 25 0 0 3 . 1 9 3 0 19 4 2 . 4 7 7 70 1 8 8 4 . 4 4 7 6 62 9 8 . 8 7 7 3 4

6

4

9 6 . 6 6 5 00 0 1. 9 2 54 6 31 2 . 4 7 7 70 1 8 8 9. 4 5 0 1 62

1 0 3 . 8 7 9 84

7 4 93 . 330000 2 . 7230161

2 . 4 7 7 70 1 8

8 6 . 1 1 5 1 62 1 00 . 5 4 4 84

8

4

8 6 . 6 6 2 50 0 2 . 7 2 0 9 75 2 2 . 4 7 7 70 1 8 7 9 . 4 4 7 6 62 9 3 . 8 7 7 34

T ot a l 3 2

9 3 . 9 5 56 2 5

*

. 8759999

. 8759999 91 . 404794 96 . 50646



ANALISIS ESTADISTICOS A LOS 28 DIAS DE EXPERIMETACION.



Dat a : B I OTOX Í C OLQGI C O. 28 DI A S. TC RECI MI ENTO

L e ve l c o d es : DI E T AS

L ab el s :


l ev el ;

95



S um of S q ua r e s

d.

f . Me an s q ua r e F - r a t i o Si g. l evel

Be t ween g r oups 9862 . 151

n

1 4 0 3. 8 7 88 . 4 86 . 3 31 0


4 6 3 7 3 . 4 4 4

16

2 8 9 8. 3 4 0 2

T ot a l ( c o r r e c t e d) 5 62 35 . 5 95 2 3

0 m s s i n g v a l u e ( s ) h av e be- n̂ e x c l u de d .

Tab l e o f means f o r H0LL ES02 . TC KEC I HI E by M0LLERQ2. DI ETA

S t n d. E r r o r S t n d. E r r o r 9 5 P er c e nt S c he f f è

L ev el Co un t Av e r a g e ( i n t e r n a l ) ( p oo l e d s ) i n t e r v al s f or me an

1

3 3 7 9 . 7 9 6 67 2 8 . 1 2 0 50 3 3 1 . 0 8 2 36 5

2 8 5 . 0 0 7 0 0 4 7 4 . 5 8 6 3 4

SJ

3 359 . 59000

4 8 . 1 7 9 6 95 3 1 . 0 8 23 6 5 26 4 . 8 0 03 3 4 5 4 . 3 7 9 6 7

3

3 359 . 59333 28 . 120503 31 . 082365

• 264 . 80366

4 5 4 . 3 8 3 0 0

4 3

3 8 4 . 8 4 6 67

3 1 . 5 4 0 44 2 ' 3 1 . 0 8 2 36 5 2 9 0 . 0 5 7 00 4 7 9 . 6 3 6 3 4

5 3

4 1 0 . 0 9 6 6 7 30 . 7 2 0 96 5 3 1. 0 8 23 6 5 3 1 5 . 3 0 7 00

504 . 88634

6 3 349 . 45000 20 . 200000 31 . 082365

2 5 4 . 7 0 0 33

4 4 4 . 2 7 9 67

7 3

3 5 4 . 5 4 3 33 2 6 . 2 4 3 45 7 3 1. 0 8 2 36 5

2 5 9 . 7 5 3 66

4 4 9 . 3 3 3 0 0

8 3

3 9 4 . 9 4 6 67

2 8 . 1 2 0 50 3

3 1 . 0 8 2 36 5

3 0 0 . 1 5 7 0 0 4 8 9 . 7 3 6 3 4

T ot a l 2 4 3 7 4 . 1 1 2 92 1 0 . 9 8 92 7 6 1 0 . 9 8 92 7 6 3 4 0. 5 9 97 1 4 0 7 . 6 2 6 13



Dat a : B I OTOXI COLOGI CO

23 DI AS. CONSUMO

L e ve l c o d es : DI E T AS

L abe l s :



S ou r c e of v a r i a t i o n Susi of S qu ar e s d. f . Me an s q ua r e F - r a t i o Si g. l ev el

Bet ween gr oups . 0009460

7 1 . 35137E - 004

. 453 . 3505

Ui t h i n g r o u ps . 0 04 72 07 1 6 2 . 9 50 4 2E - 0 04

T ot a l

<

c o r r e c t e d ) , 0 05 66 66 23

0 m s s i n g v a l u e ( s ) h av e b ee n e xc l u de d.

•Tabl e of means f or MGLL ES02. C0NSUM0 by MQLL ER02. DI ETA

S t n d . E r r o r

S t n d . E r r o r

9 5 P e r c e n t

S c he f f e

L ev el Co unt Av er a ge ( i n t e r n al ) ( p oo l e d s ) i n t e r v al s f or me an

i

3

. 3733333

. 0096839

. 0039170 . 3430901 . 4035766

. 3 77 0000

. 0115902

. 009, 9170 . 3467568 . 4072432

3

^

- . 3 83 33 33

. 0154308

. 0099170 . 3530901 . 4135766

4

• 3

. 3946667 •

. 0063333 . 0099170

. 3644234

. 4249099

5

3

. 3816667 . 0038442 . 0099170

. 3514234

. 4119099

Ö

3

. 3880000 . 0023094 . 0099170

. 3577568

. 4182432

ry

1

3 . 3780000 . 0135769 . 0099170

. 3477568 . 4082432

8

3

. 3810000 . 0087178 . 0099170 . 3507568 • . 4112432

T ot a l 24 . 3821250 . 0035062 . 0035062 . 3714324 . 3928176



Da t a : B I 0 T 0 XI C0 L 0 GI C 0. 2 3 DI AS . TCf l

L e ve l c o d e s : DI E T AS

Label s ' -

E an ge t e s t : S c he f f e Co nf i d en c e l e ve l : 95


S ou r c e of v ar i a t i o n S um of S qu ar e s

d . f . Me a n s q u a r e

F - r a t i o

Si g. l evel

Be t ween g r oups . 2202667

7 . 0 3 1 46 6 7 . . 630 . 7 2 47

wi t h i n g r o u s s . 7 99 13 33 1 6

. 0 4 99 4 58

T ot a l ( c o r r e c t e d) 1 . 0 19 40 00

0 m s s i n g v a l u e ( s ) h a v e b ee n e xc l u de d.

Tabl e o f means f or M0LL ERQ2. TCA by M0LL ERÖ2. DI ETA

Leve l Count A verage

S t n d . E r r o r

< i n t e r n al )

S t n d . E r r o r

( p oo l e d s )

9 5 P e r c e n t

i nt e r v a l s

Co n f i d e nc e

f or mean

1

3

1 . 5 0 6 66 6 7

. 1424001 . 1290295 1 . 2330685 1 . 7S02648

2 3 1. 7066667

. 2444268 . 1290295 1 . 4330685

1 . 9 8 0 26 4 8

3 3 1 . 6200000 . 0635085

, 1 2 90 2 95 1 . 3 4 6 40 1 8

1 . 8 9 3 59 8 2

4 3

1 . 5666667 . 1105039 . 1290295

1. 29306. 85

1 . 8402648

5

*

1 . 4200000 . 1011599 . 1290295 1 . 1 4 6 40 1 8 1 . 6 9 3 59 8 2

6 3

1 . 6900000 . 0950438

. 1 2 90 2 95 1 . 4 1 6 40 1 8 1 . 9 6 3 59 8 2

n

i 3 1 . 6166667 . 0635959 , 1290295 1 . 3430685 1 . 8902648

8 3

1 . 4733333 . 1166667

. 1290295 1 . 1997352 1 . 7469315

T ot a l 2 4

1 . 5750000 . 0456138 . 0456188 1 . 4782684 1 . 6717316



Dat a : B I ÛTOX I C QLOGI C O. 28 DI AS . M08TAL I DA D

L e ve l c o d es : DI E TAS .

L abe l s :

S an ge t e s t : Co nf . I nt . Co nf i d en ce l ev el : 95


S ou r c e of v a r i a t i o n S um of S qu ar e s

d. f . Me an s q ua r e F - r a t i o Si g. l evel

Be t ween g r oups

829 . 45933 7

1 1 3 . 4 9 4 19 3 . 3 6 8 . 0 2 10


562 . 99267 16

3 5 . 1 8 7 0 4

T ot a l ( c o r r e c t e d) 1 39 2. 4 52 0 2 3

0 m s s i n g v a l u e( s ) h a ve be en e xc l u de d.

Tab l e o f means f o r M0LLZ802 . MQSTA L I DA D by MQLL ES02 . DI STA

St n d. E r r o r St nd . E r r o r 95 P er c e nt Co nf i d en c e

L ev el Co un t Av e r a g e ( i n t e r n al ) ( p oo l e d s ) i n t e r v a l s f or me an

<

2 . 2 2 3 33 3

2 . 2 2 3 33 3 3 3 . 4 2 4 76 4 8 - 5 . 0 3 8 6 4 5 9 . 4 8 53 1 1

2 S. 8 9 3 33 3 2 . 2 2 3 33 3 3 3 . 4 2 4 76 4 8 1 . 6 3 1 3 5 5

16 . 155311

3

•3

j

1 5 . 5 6 0 00 0 5 . 8 7 9 23 7 5 3 . 4 2 4 76 4 8 8 . 2 9 8 02 2

2 2 . 8 2 1 97 8

4 2 0 . 0 0 0 00 0 . 0 0 00 0 00 3 . 4 2 4 76 4 8 1 2 . 7 3 8 0 22

2 7 . 2 6 1 97 8

c

•J 3 20 . 000000 . 0000000 3 . 4247648

1 2 . 7 3 8 0 22 2 7 . 2 6 1 97 8

6 6 . 670000 . 0000000

3 . 4 2 4 76 4 8 - . 5 9 1 9 7 8 1 3 . 9 3 1 97 8

n

3 11 . 113333

5. 8798677 3. 4247648- 3 . 851355 18. 375311

8 3 1 3 . 3 3 6 66 7 3 . 8480399

3 .

4247648 6 . 074689 20 . 598645

T ot a l 2 4 1 2. 2 2 4 58 3 1 . 2 1 0 83 7 2 1 . 2 1 0 83 7 2 9 . 6 5 7 08 6 1 4 . 7 9 2 08 0

Mu l t i p l e r a n g e a n a l y s i s f o r M0 L L E 8 O2 . M0 8 T AL I DA D b y MÛL L E S Û2 . DI E T A

Me t h od : 9 5 P e r c e n t C on f i d en c e I n t e r v a l s

Level Count Aver age Homogeneo us Gr oups

3 2 . 223333

*

3 6 . 670000

* *

3 8 . 893333

* * *

3

1 1 . 1 1 3 33 3

3

1 3 . 3 3 6 6 67

* * *

3 15 . 560000

* *

3 20. 000000

*

3

2 0 . 0 0 0 00 0

4c



ANEXO VI.

PUNTOS CRITICOS DE CONTROL EN EL PROCESO.



PUNTOS CRITICOS DE CONTROL EN EL PROCESO.

FRESCURA DE LA MATERIA PRIMA.

El proceso de degradación del material orgánico conten ido en el s istema digest ivo,

como del material orgánico del propio cuerpo del pescado, se inic ia al momento de su

captura. La descomposición genera cambios físicos y químicos. En el aspecto físico se

produce n rupturas , ablandamiento, pérdidas de l íquido, cambios de coloración , etc. Desde

el punto de vista químico, el deterioro de fa fracción proteica se produce por la acción

microbiana o enzimátlca hidroi izando a las proteínas, aumentando el contenido de bases

volátiles y aminas b iogénica s; la fracción grasa comienza a oxidarse produciendo peróxidos,

hidroperóxldos, etc. (Cía. Pesquera San Pedro, 1991; Plke, et. al, 1900).

Para evitar la pérdida de frescura de la materia prima desde el momento de la

captura hasta su proceso, se deben evitar los t iempos prolongados entre la pesca y la

descarga en la planta. Es recomendable además, mantener el pescado en hielo durante éste

período y no mezclar productos frescos con añejos. Los pozos de recepción o de

almacenamiento de la materia prima de las plantas reductoras, deben estar l impios,

techa dos y procu rar no almacenar' por períodos largos para evitar gene rar gran des

cant idades de agua de sangre. En caso de que se forme es necesario separarla rápidamente

de la materia prima, ya que puede ser un medio de cult ivo para la formación de aminas

biogénicas. (Zaidivar, 1992).

La pérdida de frescura de ia materia prima, además de disminuir el valor nutric ional

del produ cto f inal, repercute sobre el proceso, tomá ndolo más dif íc i l y menos ef ic iente:

- Cocción: Como ya se mencionó, uno de los objet ivos de cocer la materia prima, es

coagular las proteínas, que depende principalmente del pH de la materia. Al aumentar o

disminuir e l pH, la coagulación se aleja de lo ideal, formand o geles y consecuentemen te se

tendrán problemas en las etapas posteriores de la elaboración de la harina de pescado. El

pH varía según la especie y la frescura.

- Prensado: En las proteínas del pescado descom puesto se rom pen los enlaces pe ptídlcos

(Pike, et. al, 1990) y las cadenas proteicas resultantes son más cortas, t ienen menos

capacidad de entrelazarse y de formar una masa f irme durante la coagulación (Cía.



Pesqu era, San Ped ro, 1991); así mism o, el deb ilitam iento o ruptura de los tejido s

conjunt ivos orgina un producto más blando y la operación de prensado es def ic iente.

• Decantación: Depende de las etapas anteriores, ya que la eficiencia de la operación

dependerá del tamaño de las part ículas sól idas, lo que a su vez depende de la condición

histológica de la materia prima.

- Conce ntración: La capacidad de concentración de los equipos, depende principalmente

de la viscos idad del f luido, lo cual está relacionado con la especie y la frescur a de la ma teria

(Cía. Pesquera San Pedro, 1991). El agua de los solubles concentrados son altamente

peligrosos en ta formación de aminas biogénicas (Zaidivar, 1992; Galleguillos, 1993) y se

recom ienda que los alma cenam ientos Intermed ios en tre la etapa ~de prensa do y de

concen tración sean lo más cortos posibles, ya que en estas operaciones s e pue den dar las

cond iciones ideales para la descom posición de las fraciones proteicas y grasas.

La degradación de la materia prima es exponencial, en el caso de los solubles

concentrados la degradación es un proceso muy acelerado (Cía. Pesquera, San pEdro,

1991).

PROCESO DE SECADO.

La operación de secado es fundame ntal en la cal idad d e la harina de pe scado. C omo

ya se mencionó, el objet ivo de esta etapa es reducir ia humedad a niveles que el agua

remanente n o permita el crecimiento microbiano (Barlow

and

Wíndsro , 1984). Este nivel debe

también ser lo suf ic ientemente bajo para detener las reacciones quím icas que pued an tener

lugar, degradando el producto (Martin, and Flick, 1990). Por otro lado, la deshidratación

excesiva causa grandes consecuencias desde-el punto de vista nutric ional y biotoxicológico,

ya que reduc e la biodisponibiUda d am inoacídica y la dlge stibil idad de la proteína, dism inuye

el valor nutric ional de vitaminas y compuestos grasos sensibles al calor y puede formar

mollerosina y otros compuestos tóxicos (Osuna, 1984; Castro, 1990).

Dado lo anterior, la temperatura y t iempo de secado son dos parámetros

fundamentales de controlar.

PUNTOS DE CONTROL DE LA GENERACION DE MOLLEROSINA.



ANEXO Vi l

RESUMENES PUBLICADOS EN CONGRESOS INTERNACIONALES.



Esta tesis fue presentada en partes en la Reunión Anual de World

Aq uacu l ture Society c e lebrado en Torremo l inos, Esp aña, en Mayo d e 1993.

En New Orléans, Luo is iana, E.U.S. ce lebrado en Enero de 1994.

Tam bién fu e presentada en la reunón anual de la As ociación Mexicana

de Espec ia l i s tas en Nut r ic ión An ima l (AMENA), ce lebrado en Acapu lco , Gro .

en Octubre de1993.

A con t inuac ión se mu est ran los resúmenes p ub l icados en cada una de

las reuniones.



FRO M DISCOVERY TO

COMMERCIALIZATION

Abstr acts o f contr ibut ions presented at the Internat ional Con fere nce

W O R L D A Q U A C U L T U R E '9 3

T o r r c m o li n o s, S p a in , M a y 2 6 - 2 8 , 1 9 9 3

Co m p i l e d b y

M ; C a r r i l l o

L . D a h l e

J . M o r a l e s

P . So r g e l o o s

N . Sv e n n e v i g

J . W y b a n

L ayo u t an d p r o ce s s i n g :

L . Van dercoi lden, L . A spc s iag h, and H . Jonc h œ re



C R U S T A C E A N S • P os te rs

1 0 4

E F F E C T O F F R E SH N E S S O F R A W M A T E R I A L O N N U T R I T I O N A L V A L U E O F

D I F F E R E N T F I S H M E A L U S ED IN S H R I M P N U T R I T I O N .

I . Abdo (1), E. Cruz (1), D. Ricque (I ), I . Pike (2), and G. Alanfs (1).

(1) Univers idad Autó nom a de Nuevo León. Facul tad de Ciencias B io lóg icas. C iudad

Univers i tar ia . Apartad o Posta l F-16. San Nico lás de los Garza Nuevo León.

( 2 ) I A F M M

. Hoval House, Muton Lane, Pot ters Bar, Hert fordshire* EN6

3 A R .

Fish m eal qual i t y requi red for shr imp nut r i t ion is unknown up to now, such as wel l as the

sensibi l i ty to some substances that are produced during f ish meal manufacture as biogenic

amines (histamine, outrescine, cadaverine, etc). The present experiment was perforned to

determine the ef fect of f reshness of raw material used to prepare f ish meal , on i ts nutri t ional

va lue for juveni le shr imp Penaeus v annamei .

Three south amer ican f i sh meals produced f rom anchovy processed through a new low

temperature fac i li t y were evaluated nu t r i t ional l y . The same anchovy f ish m eal was produced

f rom absolute ly f resh m ater ia l (F M ) o r a f ter tw o per iods of s torage to g ive moderate ly f resh

(M F M ) and stale mater ial (SM ). Processing was ident ical , only the f reshness of the raw

mater ia l var ied- Three exper imenta l d ie ts were for mulated (each equated for prote in and

l ipids) wi th this f ish meals, keeping the other ingredients constants. Fish meal qual i ty was

evaluated by chemical (total volát i l ni t rogen, proximal , histamine content , peroxide value, etc)

and biological assay.

Two shr imps b ioassays were carr ied out a t the U A N L Mar icu l tur e Programm e b icassay fac i l it y ,

that consist of 48 double bot tom f iber glass tank (60x30x35cm, 60L capaci ty), suppl ied by

synthet ic sea water by a closed recirc ulat ing system. The f i rst bioassay was condu cted wi t h 15

shrimps/ taak during 15 days and the second one wi th 8 shrimps/ tank during 28 days. Shrimps

were fed tw ice a day ad l ib i t um w i th the exper imenta l d ie ts . Both b ioassays were run by

cuat r ip l i cate. Gro wth rate, feed conversion rate and surv iva l ra te were determ inated at the end

of the b ioassays . An A N O V A was rea l i zed in order to determine s ign i fi cant d i f ferences

between the t reatments.

The shr imps fed w i th the F M diet showed h igher weight in both b ioassays (P < 0.05) (0.59 and

1.92g respect ive ly) in compar ison wi th the shr imps fed M F M diet and SN f d ie t (0 .50 and 1.73g,

0.44 and 1.86g respect ively). Feed conversion rates were not clearly af fected and ranged f rom

3.00 to 3.49. Survival rate was af fected by the t reatments only in the f i rst t r ial (high densi ty)

obta in ing the h igher surv iva l w i th the F M diet .



ih A

Croi

J

WORLD AQUACULTURE SOCIETY

NEW ORLEANS MARRIOTT

NEW ORLEA NS, LOUISIA NA USA

JANUARY 14 - 18, 1994



MEN

a O \ 0 o



E F E C T O D E L A F R E S C U R A D E L A M A T E R I A P R I M A S O B R E

E L V A L O R N U T R I C I O N A L D E D I F E R E N T E S H A R I N A S D E

P E S C A D O U T I L IZ A D A S E N D I E T A S B A L A N C E A D A S P A R A

C A M A R O N B L A N CO (Penaaus vannam ei).

I . Abdo de la P(1). , E. Cruz S.(1), D. Ricque(1) and i . P i le (2.

(1 ) Un i ve rs i dad A u tónoma de Nuevo León , F .C .B . Cd . Un i ve rs i t a r i a . A p .

P os ta l F -16 . S an N i co l ás de l os Garza , N . L Méx i c o .

(2 ) IF OMA . 2 Co l l ege Y a rd , Lower Dagna l l S t S t . A l bans , He r t f o rds h i re A 13

4P E Un i t ed K i ngd om . UK .

La ca l idad d e tas har inas de pescado requer idas para l? nu t r i c ión de l

cam aró n y (a sensib fl ¡dad de l camarón a a lgunas sus tanc ias com o a las amin as

bfogénlcas (histamina. putraescina, cadaverina, etc) formadas por la

desco mp os ic ió n de l pez . no se conocen aún. En e l p resente t raba jo se

determinó e l e fec to de l grado de f rescura de la mater ia pr ima sobre e l va lor

nut r i c io na l de d i fe rentes har inas de p escado u sadas en a l imento ba lancead o

para camar ón b lanco (Penaeus vannamei) . Se prepararon 3 d ie tas i sopro te icas

e tso l lp íd icas con har ina de pescado e laborada con mater ia pom a f resca (DF) .

f rescura med ia (DFM) y put refac ta (DP) . proc esadas a ba ja temp eratura . Se

determ inó la ca l idad de es tas d ietas por var ios m étodos d e evaluac ión quím ica y

nutr fc lonal . Poster iorm ente, se corr ieron 2 bioensayos con 2 di ferentes

dens id ades (15 y 8 camarones/acuar io) en la sata de zootecn ia de la Facu l tad

de C ien c ias B io ló g icas ; ' cad a t ratamiento se cor r ió por cuadru p l i cado,

a l imentando a tas pos t larvas con d ichas d ietas ad i ib itum du rar te 15 y 28 d ías

respec t i vamente. A i té rmino de los mismos se pesó a los organ ismo s y se

determinó la tasa de crecimiento, la tasa de crecimiento relat iva, la tasa de

conv ers ión a l iment ic ia y la sobrev ivenc ia . Los datos fueron ana l i zados med iante

aná li s i s d e var ianza y p ruebas de 28 comparac iones múl t ip les d e m edias de

Schef fe . En am bo s b ioensayos . los camarones qu e se a l imentaron co n la d ie ta

DF most raron mayor inc remento en peso y mejores tasas d e c rec imiento en

com parac ió n con las o t ras dos d ie tas s iendo la d i fe renc ia s ign if i cat i va a P < 0.05.

Las tasas de convers ión a l iment i c ia de cada t ra tamiento , no fueron

signi f icat ivamente di ferentes en amb os bioensayos. La sob revivencia en el

pr imer b ioensayo (15 org /acuar io) s i se v ió a fec tada por los d i fe rentes

t ra tamientos , obten iéndose mayor sobrev ivenc ia (96.57%) en los organ ismos

al imentados con la d ie ta DF . en los o t ros 2 t ra tamientos se obtuvo una

sobrev ivenc ia de 84.82% (DFM) y 89.57% (DP). En e l segun do b ioensayo ta

sobrev ivenc ia no fue a fec tada por e l t ra tamiento , lo cua l ind ica que hub o e fec to

de d ens idad aunado a l e fec to de l tra tamiento en e i p r imer b ioensayo.

Estudio planta de harina de pescado

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