Epidemiología Molecular de la Fibrosis Quística Grupo de Investigación Fibrosis Quística y otras...

Epidemiología Epidemiología Molecular de la Molecular de la

Fibrosis QuísticaFibrosis Quística

Grupo de Investigación Fibrosis Quística y Grupo de Investigación Fibrosis Quística y otras formas de Mucoviscidosisotras formas de Mucoviscidosis

Epidemiología de la Epidemiología de la FQFQ

Enfermedad Autosómica Recesiva mas común Enfermedad Autosómica Recesiva mas común en caucásicos.en caucásicos.

Afecta 1 de cada 2.500 niños.Afecta 1 de cada 2.500 niños.

Obstrucción pulmonar crónicaObstrucción pulmonar crónica

Colonización bacteriana de las vías aéreasColonización bacteriana de las vías aéreas

Insuficiencia pancreática por bloqueo de los Insuficiencia pancreática por bloqueo de los conductos secretoriosconductos secretorios

Electrolitos en sudor elevadosElectrolitos en sudor elevados

•Introducción

•Introducción

Portadores en la población 1:20 a Portadores en la población 1:20 a 1:601:60

Matrimonios en Riesgo de 1:400 a Matrimonios en Riesgo de 1:400 a 1:3.6001:3.600


•Cuadro Clínico

Sistema Respiratorio – ClínicaSistema Respiratorio – Clínica

Polipos nasales, sinusitis, infecciones recurrentes, Polipos nasales, sinusitis, infecciones recurrentes, bronquiolitis, bronquitis crónica, bronquiectasias.bronquiolitis, bronquitis crónica, bronquiectasias.

Bacterias que colonizan: Bacterias que colonizan: Pseudomona aeruginosa Pseudomona aeruginosa (90%), Staphilococo aureus, Haemophilus (90%), Staphilococo aureus, Haemophilus influenzae.influenzae.


•Cuadro Clínico

Sistema Digestivo – ClínicaSistema Digestivo – Clínica

Insuficiencia pancreática (90%), mal Insuficiencia pancreática (90%), mal absorción de grasas y proteinas, absorción de grasas y proteinas, esteatorrea, deficiencia de vitaminas, zinc y esteatorrea, deficiencia de vitaminas, zinc y calorías, íleo meconial, pancreatitis y calorías, íleo meconial, pancreatitis y Diabetes Mellitus.Diabetes Mellitus.


•Cuadro Clínico

Hígado y Vías Biliares – ClínicaHígado y Vías Biliares – Clínica

Colestasis crónica, inflamación, fibrosis, Colestasis crónica, inflamación, fibrosis, cirrosis e HTPcirrosis e HTP

Sistema Genitourinario – ClínicaSistema Genitourinario – Clínica

Hombres: Azoospermia y disminución del Hombres: Azoospermia y disminución del volumen del eyaculado (98%). Ausencia o volumen del eyaculado (98%). Ausencia o atrofia de la estructura de los vasos atrofia de la estructura de los vasos deferentes.deferentes.

Mujeres: Moco cervical anormal, fecundidad Mujeres: Moco cervical anormal, fecundidad afectada, mayor mortalidad materna.afectada, mayor mortalidad materna.


•Exámenes de Laboratorio

Glándulas sudoríparas – ClínicaGlándulas sudoríparas – Clínica

Altas concentraciones de NaAltas concentraciones de Na++ y CL y CL- - en el sudoren el sudor

Escarcha de SalEscarcha de Sal

>> 60 mEq/L Na 60 mEq/L Na++


•Patología

Páncreas – Patogenia (85-90%)Páncreas – Patogenia (85-90%)

•Falla de la producción de Agua y Falla de la producción de Agua y BicarbonatoBicarbonato

•Aumento de la viscosidadAumento de la viscosidad

•Bloqueo ductalBloqueo ductal

•Dilatación, ruptura y derrame enzimático Dilatación, ruptura y derrame enzimático acinaracinar

•Mal absorción con esteatorreaMal absorción con esteatorrea


•Patología

Pulmón – PatogeniaPulmón – Patogenia

•Susceptibilidad a infeccionesSusceptibilidad a infecciones

•Alteración del moco, pobre drenaje Alteración del moco, pobre drenaje pulmonarpulmonar

•Sobrevida (de acuerdo a infecciones)Sobrevida (de acuerdo a infecciones)


•Genética

Herencia Autosómica RecesivaHerencia Autosómica Recesiva

Enfermedad multisistémica y progresivaEnfermedad multisistémica y progresiva

Mutación: Efecto protector contra EDAMutación: Efecto protector contra EDA

Sobrevida: 28 años (5 años más en el Sobrevida: 28 años (5 años más en el Hombre)Hombre)


NH2 COOH

GEN CFTR

CFTR Dominios TM NBF R Dominio TM NBF

0 50 100 150 200 250kb

1 2 3 4 5 7 9 10 11 13 14b 16 18 19 20 21 22 6a 8 12 14a 15 17a 23

6b 17b 24


NORMAL NO SÍNTESIS

G542X

394 del TT

BLOQUEO

PROCESAMIENTO

F508

N1303K

Consecuencias de las Mutaciones


Consecuencias de las Mutaciones

BLOQUEO

REGULACIÓN

G551D

G12495

CONDUCTANCIA

R117H

R347P

SÍNTESIS

REDUCIDA

A456E


Reacción de PCR Mutación F508

95pb

98pb


P C R

R177H DF508 R553X W1282X N1303K

exon 4 exon 10 exon 11 exon 20 exon 21

A T T C T A G C T A T G

T A A G A T C G A T A C

A T T C T A G C T

T A A G A T C G A


PACIENTES

W1282X/N1303K

F508/F508

R117H/G542X

Normal

Mutante

R11

7H

DF

508

R55

3X

W12

82X

N13

03K

G54

2X

Normal

Mutante

Normal

Mutante


SONDA

DOT BLOT COMPARACIÓN


Mutación (%) Población con la prevalencia

más alta F508 (66.0) Europa (78%) Colombia (39%)

G542X (2.4) Españoles G551D (1.6) I ngleses N1303K (1.3) I talianos W1282X (1.2) J udios-Askhenazi R553X (0.7) Alemanes

621+1G->T (0.7) Franco-Canadienses 1717-1G->A (0.6) I talianos

R117H (0.3) R1162X (0.3) I talianos R347P (0.2)

1811+1,6KbA->G (6.0) Colombia


RESTREPO, C.M. et al. CFTR mutations in three latin American countries. Am. J. Med. Genet. 91(4): 277-9, 2000

F508 39.6%

No F508 8.3%

Desconocidas 53.1%

Chile 27.8%

Brasil 47%

Argentina 60.2


KEYEUX, G. , GARAVITO, P., SANCHEZ, D. et al , Estudios moleculares en pacientes colombianos con Fibrosis quística. Acta Médica Colombiana, 22 (4), 167-173, 1997.

Santander 66.6%

Caldas 64,3%

Antioquia 57.7%

Valle 45.5%

Bogotá 45 %

Bolívar 25%

F508


MUTACION BOGOTA ANTIOQUIA BOLIVAR VALLE SANTANDER CALDAS OTROSN=38 N=17 N=10 N=12 N=2 N=5 N=8

% % % % % % %

DF508 40,8 47,1 25 41,7 50 60 431811+1.6KbA->G 10,5 0 10 4,2 0 0 6,3G542X 5,3 0 0 8,3 0 0 6,3S549R 3,9 2,9 0 0 0 0 0W1282X 1,3 0 0 4,2 0 0 0R1162X 0 0 10 0 0 0 0A559T 0 2,9 0 0 0 0 0Y1092X 0 0 5 0 0 0 0R334W 0 0 0 4,2 0 0 01215delG 1,3 0 0 0 0 0 02185insC 0 0 0 0 0 0 6,32789+5G->A 0 0 0 4,2 0 0 03120+1G->A 0 0 5 0 0 0 03849+1G->A 1,3 0 0 0 0 0 0R1066C 1,3 0 0 0 0 0 0N1303K 0 2,9 0 0 0 0 03500-2A->G * 0 2,9 0 0 0 0 01323insC * 0 0 5 0 0 0 0H609R 0 0 0 0 0 0 6,3No identificada 34,2 41,2 40 33,3 50 40 37,5

Keyeux et al (2000) , CF mutations in patients from Colombia: Implications of the mutational spectrum for localand regional molecular diagnosis programs.Human Mutation (submitted)


Gradiente europeo para la mutación Gradiente europeo para la mutación F508F508


Gradiente europeo para la mutación Gradiente europeo para la mutación F508 y G551DF508 y G551D


38 Mutaciones en Colombia (n=116 pacientes)38 Mutaciones en Colombia (n=116 pacientes)H. Mateus y cols. (2.004) Identificación de mutaciones desconocidas y correlación Genotipo-Fenotipo en Fibrosis H. Mateus y cols. (2.004) Identificación de mutaciones desconocidas y correlación Genotipo-Fenotipo en Fibrosis

Quística (Datos No Publicados).Quística (Datos No Publicados).

Mutación Cromosomas PorcentajeF508 68 29,3

621+1G>T 11 4,7G542X

1811+1,6 A>G124

5,21,7

R334W 2 0,9N1303K 2 0,9W1282X 2 0,9R1162X 2

0,40,4

Desconocida 126 54,3Total 232 100

S549NS549R

11

0,93120+1G>A 1 0,4


621+1G621+1G>>TT


Incidencia de la Fibrosis Quística en el Incidencia de la Fibrosis Quística en el MundoMundoWHO (2.002) The Molecular Genetic Epidemiology of Cystic WHO (2.002) The Molecular Genetic Epidemiology of Cystic

Fibrosis.Fibrosis.


Tasa de detección de mutaciones del gen Tasa de detección de mutaciones del gen CFTRCFTRWHO (2.002) The Molecular Genetic Epidemiology of Cystic Fibrosis.WHO (2.002) The Molecular Genetic Epidemiology of Cystic Fibrosis.


Fibrosis QuísticaFibrosis Quística– Frecuencia de portadores de la mutación Frecuencia de portadores de la mutación

F508F508Jay, Manuela y cols. (2.004). Validación de la técnica de Jay, Manuela y cols. (2.004). Validación de la técnica de

identificación de portadores de la mutación identificación de portadores de la mutación F508 (datos no F508 (datos no publicados)publicados)


Fibrosis QuísticaFibrosis Quística– Frecuencia de portadores de la mutación Frecuencia de portadores de la mutación

F508F508Jay, Manuela y cols. (2.004). Validación de la técnica de Jay, Manuela y cols. (2.004). Validación de la técnica de

identificación de portadores de la mutación identificación de portadores de la mutación F508 (datos no F508 (datos no publicados)publicados)


DEPARTAMENTO REGION n%

POBLACIÓNFRECUENCIA

ACUMULADA PORTADORES

FRECUENCIA DE PORTADORES POR REGIÓN

Antioquia, Caldas, QuindíoCentro - Occidente

81 17,02% 3,89% 3 3,70%

Bogotá, Cundinamarca, Boyacá, Tolima y Santander

Centro - Oriente

179 37,61% 54,62% 2 1,12%

Bolívar, Atlántico y Magdalena

Costa norte 64 13,45% 68,07% 1 1,56%

Valle, Cauca y NariñoSur - Occidente

51 10,71% 78,78% 0 0,00%

Meta, Casanare y Guaviare

Sur - Oriente 101 21,22% 100,00% 0 0,00%

TOTAL 476 100,00% 100,00% 6 0,84%

ConclusionesConclusiones– El 29% de los afectados con Fibrosis Quística El 29% de los afectados con Fibrosis Quística

presentan la mutación presentan la mutación F508 en la población F508 en la población colombiana.colombiana.

– El análisis de 38 mutaciones permite El análisis de 38 mutaciones permite identificar solo el 45% de los afectados identificar solo el 45% de los afectados

– El El 54% de las mutaciones causantes de 54% de las mutaciones causantes de Fibrosis Quística son desconocidasFibrosis Quística son desconocidas


ConclusionesConclusiones– 621+1G>T es la tercera en frecuencia entre 621+1G>T es la tercera en frecuencia entre

los afectados y posiblemente se debe a un los afectados y posiblemente se debe a un efecto fundadorefecto fundador..

– Es factible el Tamizaje Masivo de la mutación Es factible el Tamizaje Masivo de la mutación F508 mediante el análisis de grupos de 10 F508 mediante el análisis de grupos de 10 personas por PCR.personas por PCR.

– Los portadores de la mutación Los portadores de la mutación F508 son F508 son más frecuentes en Antioquia y el Eje más frecuentes en Antioquia y el Eje Cafetero (resultados preliminares n=476)Cafetero (resultados preliminares n=476)


– Genoveva KeyeuxGenoveva Keyeux– Heidi Eliana MateusHeidi Eliana Mateus– Manuela JayManuela Jay– Angela Myers (Roche Molecular Systems)Angela Myers (Roche Molecular Systems)– Mayuli RosalesMayuli Rosales– Carlos M. Restrepo (Carlos M. Restrepo ([email protected]@cable.net.co))


Epidemiología Molecular de la Fibrosis Quística Grupo de Investigación Fibrosis Quística y otras...

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