Ventajas y desventajas de la PCR como método

de clonación

Principales ventajas de la reacción

Rapidez y sencillez de uso.

Sensibilidad.

Resistencia.

Principales desventajas de la reacción.

Necesidad de disponer información sobre la secuencia del ADN diana

Tamaño corto de los productos de la PCR

Infidelidad en la replicación del ADN

Peligro de contaminación

APLICACIONES DE LA REACCIÓN EN CADENA

DE LA POLIMERASA “PCR”

Construcción de bibliotecas de ADNc

Secuenciación del ADN y obtención de sondas para

hibridaciones

Investigaciones forenses

Marcadores polimórficos: Técnica del oligonucleótido

alelo-específico (ASO)

Sistema Amplitype para la detección de

alelos DQ alfa

CASO PRÁCTICO:

Tira de Nylon con los halotipos HLA -DQ

alfa

Sangre de la víctima: 1.1, 3

Pelo encontrado en la víctima: 1.3, 4

Sangre del sospechoso I: 1.2, 4

Sangre del sospechoso II: 1.3, 4

Huella del ADN

Análisis de ADN en dos casos de agresión sexual

a) Exclusión del sospechoso

b) Identificación del sospechoso

Sondas Unilocus

Análisis de la movilidad de los fragmentos de restricción originados en una región unilocus para identificar los alelos paternos (P) y maternos (M) de los cuatro hijos de un matrimonio.

Determinación de la paternidad entre dos posibles padres, P1 y P2

P1 P2

M

Diagnóstico Médico por PCR