¿QUÉ SON LOS ANTICUERPOS ANTI MITOCONDRIALES? IMPORTANCIA CLÍNICA. MÉTODOS DE ESTUDIO

Vidal Lucero Geraldine Paola

Los Anticuerpos antimicondriales (AMA) son anticuerpos (inmunoglobulinas) que se unen a antígenos proteicos que se encuentran en los complejos multienzimáticos (paquetes de enzimas) presentes en la membrana interna y externa de las mitocondrias

AMA específicamente reaccionar en contra de un

componente de este complejo multienzimático llamado E2.

Se ha postulado que entre las causas de la producción de AMA está la modificación a nivel del sistema xenobiótico y la cadena respiratoria a nivel mitocondrial, lo que conduciría a la producción de la pérdida de tolerancia y la producción de los autoanticuerpos .  

IMPORTANCIA CLINICA

La presencia de AMA en la sangre o en el suero de una persona orienta a graves desórdenes autoinmunes, como la cirrosis biliar primaria (CBP), patología que afecta principalmente los conductos biliares, afectando el drenaje biliar del hígado. Está presente en un 95% de los casos, siendo una prueba de diagnóstico muy útil en conjunto al cuadro clínico.

En las fallas hepáticas agudas, los AMA específicamente reaccionar en contra de un componente de este complejo multienzimático llamado E2. En PBC, AMA preferentemente reaccionar con el componente E2 de uno de los multienzymes que se llama el complejo de la piruvato deshidrogenasa (PDC).

Se han identificado 9 subtipos de AMA nombrados de M1 a M9 con diferente significancia clínica.

El subtipo mas frecuentemente encontrado es el M2, un anticuerpo que se encuentra dirigido específicamente contra la subunidad E2 del complejo enzimático piruvato deshidrogenasa. 

ANTIMITOCONDRIAL M1

: dirigidos contras la cardiolipina (componente principal de la membrana interna de las mitocondrias) y compuesto por dos grupos de fosfodiesteres. Se encuentran en sífilis secundaria

ANTIMITOCONDRIAL M7

Detectados exclusivamente en pacientes con miocarditis aguda o cardiomiopatias de origen desconocido con la técnica de Western Blot se reconocen dos determinantes antigénicos de 90 y 40 kd.

Antimitocondrial M5: dirigidos contra fosfolipidos. Se observan en algunas colagenopatias no bien caracterizadas y en algunos pacientes con lupuseritematoso.

Antimitocondrial M3: se observa en pacientes con pseudo lupus inducido por fenopirazona.

Antimitocondrial M6: se observa en hepatitis producida por iproniazida (antidepresivo).

- Antimitocondrial M2: Cuyo objetivo es el epitope inmunodominante E2

del complejo de la pìruvato dehidrogenasa o la 2-oxodehidrogenasa ácida de las mitocondrias.

Diagnóstico: es el método de mayor valor diagnóstico de cirrosis biliar primaria. Aparecen en el 95% de los pacientes con esta patología. Tienen una especificidad del 97 % y una sensibilidad del 98%(cuando se presenta la imagen correspondiente a M2 con títulos mayor de 1:80).

Antimitocondriales M8: dirigidos contra la membrana externas de las mitocondrias asociado con M4 y M2 son indicativos de formas progresivas de la cirrosis biliar primaria.

Antimitocondrial M9: particularmente si es IgM ocurre en las formas precoces y benignas de la cirrosis biliar primaria.

METODOS DE ESTUDIOS:

Método: inmunofluorescencia indirecta (IFI), ELISA; Western BlotImagen en IFI: sustrato: riñón /estomago. Teñido citoplasmático de células parietales y túbulos renales.

INMUNOFLORESCENCIA INDIRECTA Los anticuerpos anti-mitocondriales (AMA)

del suero se unen a sus correspondientes antígenos

presentes en las secciones de riñón de rata. Una vez unidos, los anticuerpos se ponen de manifiesto mediante la incubación con un anticuerpo contra las inmunoglobulinas humanas

conjugado con fluoresceína y se visualizan por microscopía de fluorescencia.

Utiliza el FITC/Evans (R): Anticuerpos de cabra anti-inmunoglobulinas humanas conjugados con isotiocianato de fluoresceína (FITC) y adsorbidos con suero de rata, Azul de Evans 0,01g/L, azida de sodio 0,95 g/L.

Mounting Medium. Medio de Montaje: Glicerol 78%, fosfato de sodio 6 mmol/L, fosfato de potasio 1,6 mmol/L, cloruro de sodio 60 mmol/L, azida de sodio 0,95 g/L

El sustrato de elección es riñónde rata. Se Puede observar la fluorescencia en el citoplasma de las células de los túbulos renales que es un tejido rico en mitocondrias. En células Hep-2 podemos observar un pattern defluorescencia positivo sugerentede anticuerpos anti-mitocondriales.

LECTURA Examinar el portaobjetos con un microscopio

de fluorescencia (250-400x).

Los sueros que presentan una fluorescencia granular de las mitocondrias en el citoplasma de las células tubulares renales a las diluciones recomendadas deben considerarse positivos.

Cuando no se observa ninguno de los marcajes específicos, el resultado es negativo para los autoanticuerpos indicados.