8/15/2019 Practica de Aceites Esenciales (CCD)

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ENSAYO DE ANÁLISIS POR CROMATROFRAFÍA DE CAPA DELGADA DE UN

EXTRACTO

I. INTRODUCCIÓNLa cromatografía en capa delgada es un método simple y eficiente que

sirve para identificar y cuantificar metabolitos secundarios en las vegetales,

sus extractos, tinturas e igualmente para que en una formulación

farmacéutica sea posible identificar la presencia de un metabolito

secundario de interés farmacológico.La mayoría de monoterpenos y sesquiterpenos se encuentran presentes en

los aceites esenciales de diversas plantas. A partir de dichos extractos es

posible realizar su aislamiento mediante la utilización de uno o variosmétodos cromatogrficos tales como la cromatografía en columna, en capa

fina y !"L#. "ara las cromatografías en columna y en capa fina se utiliza

ampliamente la sílica gel como fase estacionaria. #omo fase móvil se

emplea solventes apolares puros o mezclados. $in embargo actualmente

se utilizan técnicas de separación ms eficientes y rpidas como la

cromatografía líquida de alta eficiencia !"L#, y la cromatografía de gases

%', así como también combinaciones (online) !"L#**+$.

II. OBJETIVOS Anlisis cromatogrfico %##' del extracto de a-o sacha para identificar sus

componentes principales.

III. REVISION BIBLIOGRAFICAxisten dos procedimientos, uno sobre papel y otro sobre placa de silicagel./anto al papel como a la placa de silica gel se les denomina fase

estacionaria.n ambos se deposita el material a ensayar con una micropipeta de

laboratorio o instrumental seme-ante %una -eringuilla de muestreo', sobre

una línea de referencia o de partida. La placa de silica gel con la muestra

depositada se coloca dentro de una cmara con una mezcla de solventes

orgnicos que son específicos para cada ensayo a la cual se le denomina

fase móvil. Al cabo de cierto tiempo especificado se determina el corrimiento que ha

tenido la mezcla de solventes los cuales se desplazaron sobre la fase fi-a

en el papel o placa de silica gel y se determina la distancia desde el punto

en donde se colocó la muestra hasta el borde extremo del corrimiento de la

fase móvil.

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n la medida que la muestra se desplaza sobre la fase fi-a va de-ando un

rastro de sustancias orgnicas que deben ser reveladas por medio de un

reactivo químico o exponiendo la fase móvil ba-o los rayos de la luz

ultravioleta.

$e determina la distancia que se encuentra la mancha o manchasdetectadas desde su posición al punto de partida de la muestra. La razón

entre la distancia a que se encuentra la mancha analizada y el total del

corrimiento de la fase móvil se le llama razón de fraccionamiento 0f.#uando los principios activos de una droga no son conocidos, la

identificación del extracto puede ser realizada a través de la determinación

de sustancias características de la planta en cuestión, aunque no tengan

actividad farmacológica %perfil cromatogrfico' contra un extracto preparado

ba-o las mismas condiciones de la muestra, pero con un material vegetal dereferencia.stas sustancias denominadas marcadores %o marcadores positivos', son

seleccionadas entre los diferentes compuestos característicos de la planta

medicinal. l uso de ellas debe limitarse solamente a la identificación del

material vegetal, de los extractos y de las tinturas. Los marcadores pueden

servir, igualmente, para identificar la presencia del extracto en un

fitofrmaco.#uando los marcadores no son las sustancias responsables de la acción

farmacológica del extracto, no deben ser utilizados para las

determinaciones cuantitativas. La presencia de manchas o bandas coloreadas con el mismo valor de

razón de fraccionamiento %0f' de las sustancias de referencia en el

cromatograma de la muestra, no es suficiente para identificar el material

vegetal.La existencia de otras manchas o bandas coloreadas debe ser anotada, así

como su posición en relación a la posición de las sustancias de referencia

utilizada. l uso de sustancias de referencia que no son constituyentes dela planta es de utilidad para determinar la ocurrencia de falsificaciones,

estas sustancias reciben la denominación de marcadores negativos.ebe especificarse las condiciones cromatogrficas de la fase estacionaria,

la fase móvil y el revelado.IV. MATERIALES Y MÉTODOS

+A/01AL$ +uestra2 extracto de material vegetal %a-o sacha'. $olvente de extracción2 puede ser et3!, +e3, #!4#l4, hexano. #mara oscura en 5ltra 6ioleta.

"robeta. #apilar.

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6ial. #mara cromatografía. "lacas cromatografías. "apel de filtro. +atraz.

+7/33$ 893 "03#1+1:/3;. $e pesa el extracto

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@. Anotar los resultados del recorrido de las manchas segFn ecuación.

=. espués de terminado la primer experimento, se procede a hacer otroexperimento ms pero esta vez usando una disolución del extracto en ;

ml. en la relación de ?2E.; cm.

Para calcular el Rf se aplica la siguiente expresión:

 Rf = Distancia recorrida de la substancia

 Distanciarecorrida por el disolvente ; o

h1

 D ,

hn

 D

ónde2 h; G sustancia uno %;'

 hn G sustancia n

RF CON UN SISTEMA DE TOLUENO: ACETATO DE ETILO 1:9

$e preparó ? ml de solvente, /olueno B Acetato de etilo en relación %4.E ml

de tolueno y

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substanci 

a

Recorrido

(substanci 

a)

Rf 

 A ;.> .=>

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$e puede demostrar la presencia de metabolitos secundarios en el

experimento. 

:os indica la mayor separación de los metabolitos en los solventes.  $e llega a la conclusión de que la separación se da por migración diferencial,

puesto que la fase móvil, arrastra a las substancias menos polares y aquellasmenos polares quedan retenidas.

VII. ANEXOS

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+omento de preparación del sistema tolueno*acetato de etilo2 

#mara cromatografía lista para el experimento2

 

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+uestra de las placas cromatografías después del experimento y en la cmara ultra

violeta2

 

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VIII. BIBLIOGRAFIA

http299JJJ.plantas*medicinal  farmacognosia.com9temas9m

K#?KA=todos*de*anK#?KA;lisis*de*droga9cromatograf 

K#?KAa*en*capa*delgada9 http299JJJ.monografias.com9traba-os@>9analisis*fitoquimica*

metabolitos*secundarios9analisis*fitoquimica*metabolitos*

secundarios.shtml http299old.iupac.org9publications9cd9medicinalchemistry9"ractica*61*

C.pdf 

http://www.plantas-medicinal/http://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.monografias.com/trabajos85/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios/analisis-fitoquimica-metabolitos-secundarios.shtmlhttp://www.plantas-medicinal/