CETis 62Practica 2

Cromatografía en papel

Bioquímica

Laboratorio clínico

Grado 6 grupo E

Integrantes

Gutiérrez Prieto Natali

López Villafaña Vanesa Michel

Macias Moreno Ana Isabel

Zavala Laguna Andrea

Zavala Quiroz Guadalupe Roberto

INTRODUCCION

Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con deferentes colores: clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde), carotenos (amarillo) y xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones.

Los colores que presentan los vegetales son debidos a unos compuestos químicos llamados pigmentos. El color que presenta un determinado órgano vegetal depende generalmente del predominio de uno u otro pigmento o la combinación de ellos. Además, algunos de los pigmentos que condicionan el color están estrechamente ligados a las actividades fisiológicas del propio vegetal.

Estos pigmentos se encuentran en el interior de las células vegetales específicamente en una organela llamada cloroplasto.

Los cloroplastos son simplemente plástidos que contienen pigmentos clorofílicos. Los compuestos clorofílicos están ligados químicamente con las estructuras internas del cloroplasto (membrana tilacoides) y se hallan retenidos en estado coloidal.

FUNDAMENTO

Todas estas sustancias presentan un grado diferente de solubilidad es disolventes apolares, lo que permite su separación cuando una solución de las mismas asciende por capilaridad a través de una tira de papel poroso (papel de cromatografía o de filtro) dispuesta verticalmente sobre una película de un disolvente orgánico (etanol), ya que las mas solubles se desplazaran a mayor velocidad, pues acompañaran fácilmente al disolvente a medida que este asciende.

Las menos solubles avanzaran menos en la tira de papel de filtro. Aparecerán, por tanto, varias bandas de diferentes colores (hasta siete o más, dependiendo dela material utilizado) que estarán más o menos alejados de la disolución alcohólica según la mayor o menor solubilidad de los pigmentos.

Estas bandas poseerán diferente grosor dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolución.

MATERIALES

Mortero Éter etílico

Tijeras Alcohol metílico puro

Espinacas u hojas verdes Capsula de Petri o vaso de precipitados

Embudo con papel de filtro Capilar o micropipeta

Tira de papel cromatografico WathmAn

TECNICA1. Colocar en un mortero trozos de hojas de espinacas lavadas, quitando las

nervaduras más gruesas, junto con 10 o 15 cc de éter etílico.

Espinacas

Betabel

2. Triturar sin golpear hasta que el líquido adquiera una coloración verde intensa (utilizar campana de gases a lo largo de toda la práctica).

3. Filtrar en un embudo con papel de filtro y recoger en un tubo de ensayo (es suficiente con 2 o3 cc. de solución de pigmentos).

4. Colocar en la tapadera de una caja de Petri metanol absoluto hasta una altura de 0.5 a 1cm.

5. Cortar una tira de papel de filtro de unos 8 cm de anchura y unos 10 a 15 cm de altura.

6. Poner con el capilar en el papel de cromatografía entre 5 y 10 gotas de solución de pigmentos, espaciadas en el tiempo con el fin de que vaya secándose el éter etílico y aumente la cantidad de pigmentos. Las gotas se

pondrán siempre en el mismo punto (se puede marcar con un lápiz), situado a unos 2 cm por encima del borde inferior del papel.

7. Doblar el papel cromatográfico a lo largo y colocarlo en la placa de petri con la mancha de pigmento a 1 cm de la superficie del eluyente. Podemos sustituir la placa petri por un vaso de precipitados y fijar el papel cromatográfico con una pinza a un soporte horizontal colocado en el borde del vaso (por ejemplo, una varilla de vidrio).

8. Espera unos 30 minutos y observar.

9. Repite el mismo procedimiento con otro vegetal.

RESULTADOSLa espinaca presenta los siguientes pigmentos :

Clorofila B

Clorofila A

Xantofilas

Caroteno

El betabel presenta el pigmento:

Betanina

Observaciones

En esta práctica pudimos observar que fue más fácil obtener liquido de las espinacas que del betabel ya que al betabel para obtener más liquido necesitamos ponerle aún más de éter etílico pata poder obtener liquido de este y así poder observar los pigmentos que poseían ambos vegetales.

Tuvimos que tomar en cuenta mucho la colocación de nuestros puntos de la solución de pigmentos ya que teníamos que ponerlos debidamente para lograr observar que tipo de pigmentos contenía cada vegetal.

Otro punto muy importante que tuvimos mucho en cuenta fue que nuestro papel cromatografía no estuviese tocando ninguna de las paredes del vaso de precipitado para que este no alterara nuestros resultados.

También pudimos observar que ninguno de los dos vegetales poseía cloroplastos iguales por lo tanto ni pigmentos iguales.

Las espinacas poseía cloroplastos mezcla de pigmentos clorofila-b porque observamos que al terminar tenía un color verde y el betabel poseía cloroplastos mezcla de pigmentos xantofilas porque este tenía un color amarillo anaranjado.

Conclusiones.

Nuestra conclusión al terminar la práctica fue que obtuvimos unos resultados correctamente ya que no hubo percances para terminar nuestro trabajo.

Llegando a la conclusión de que las gotas que habíamos puesto en el papel cromatografía de los vegetales diluidos con el éter etílico se fueron expandiendo debido a que el metanol alcanzo las gotas y fue este el que hizo que se expandieran, esto era necesario de que pasara para así poder obtener los resultados de los vegetales observando los cloroplastos y el color de los pigmentos que cada uno poseía. Tomando en cuenta que:

Los cloroplastos son orgánulos que solo las células verdes las poseen y estas solo están presentes en los vegetales.

CUESTIONARIO1. La solubilidad en alcohol de los pigmentos es, de mayor a menor:

carotenos, clorofila a, clorofila b y xantofila. Indicar que pigmento corresponde a cada banda.

Carotenos: amarillo

Clorofila a: verde intenso

Clorofila b: verde

Xantofila: amarillo anaranjado

2. ¿Por qué empleamos éter etílico para extraer la clorofila?

Porque la clorofila no es soluble en agua y si en solventes orgánicos por lo tanto se utiliza el éter porque es un solvente económico y que no interactúa con la clorofila.

3. ¿Qué pigmentos son los más abundantes?

Caroteno y xantofila

4. Por encima de las clorofilas aparece más de una banda ¿Qué significado tiene?

CATOTENO: Generalmente se conoce como caroteno al compuesto químico llamado más específicamente β-caroteno (leáse beta-caroteno). Este es el carotenoide más abundante en la naturaleza y el más importante para la dieta humana, por lo que da su nombre a todo un grupo de compuestos bioquímicos.XANTOFILAS: Se conoce como xantófilas (del griego xantos(ξανθος) = rubio y filos(φυλλο) = hoja) (anteriormente "filoxantinas"). Estos pigmentos, más resistentes a la oxidación que las clorofilas, proporcionan sus tonos amarillentos y parduzcos a las hojas secas.

5. Explica el proceso de separación por cromatografía en papel.

Es la técnica para separar componentes de una mezcla, y su posterior análisis, basadas en que las distintas sustancias que forman los componentes de una mezcla se dejan arrastrar a diferentes velocidades sobre un soporte.

6. Explica que es el beta-caroteno. Cuáles son los beneficios de su consumo.

El betacaroteno es la principal fuente de vitamina A segura, esencial para el crecimiento y desarrollo normales, el funcionamiento de sistema inmunitario y la vista. El betacaroteno tiene propiedades antioxidantes que pueden ayudar a neutralizar los radicales libres, moléculas reactivas del oxígeno que pueden dañar los lípidos de las membranas celulares y el material genético, lo cual puede conducir al desarrollo de enfermedades cardiovasculares y cáncer

Bibliografías

Separacióndepigmentonaturalesporcromatografiasobrepapelhttp://ies.mariasarmiento.climantica.org/files/2011/12/imaxen7.pdf 26 febrero de 2016

separaciondepigmentonaturalesporcromatografiasobrepapelhttp://arcosyoly-imaginacionsinlimites.blogspot.mx/ 26 febrero de 2016

cromatografiahttp://www.areaciencias.com/quimica/cromatografia.html 26 febrero 2016

betacartenohttp://www.nutri-facts.org/esp/carotenoides/betacaroteno/funciones-para-la-salud/ 26 febrero 2016