Perfil Cardiaco Diapositivas Grupal

8/13/2019 Perfil Cardiaco Diapositivas Grupal

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INTRODUCCION

Las enzimas cardacas son estructuras proteicas quese encuentran dentro de las clulas musculares decorazn, denominados cardiocitos. En una situacindonde el corazn est sufriendo un dao, como porejemplo un infarto agudo de miocardio (IAM), dondelos cardiocitos mueren por la falta de oxgeno , las

enzimas cardacas aumentan en sangre y se laspuede dosar en un anlisis sanguneo.

Los exmenes de sangre permiten medir los niveles deconcentracin de muchos enzimas como:

Creatina Kinasa (CPK) Lactato Deshidrogenasa (LDH) Transaminasa Glutmico Oxalactico (TGOAST)


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CREATINA KINASA (CK - CKP)

Tambin conocida como la creatina fosfoquinasa o fosfo-creatinaquinasa.

Es una enzima que se encuentra en pequeas cantidades en todoslos tejidos musculares y que interviene en la produccin deenerga en los msculos.

Se encarga de degradar al compuesto creatina (fosfocreatina)con lo cual se obtiene de forma inmediata y efectiva molculas deATP necesarias para mantener la contraccin muscular (tanto

esqueltico como miocrdico), logrando una eficacia de cortaaccin -15 segundos-, pero intensa.

Hay tres tipos de creatina cinasa o isoenzimas en el cuerpo:

CK-BB.- se produce principalmente por el cerebro y el msculo liso CK-MB.- es principalmente producida por el msculo cardaco CK-MM.- es producida por el msculo esqueltico.


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FUNCION

Acelera una reaccin bioqumica.

Su principal funcin en las clulas es aadir un grupode fosfato a la creatina para convertirla en unamolcula de fosfocreatina. El organismo emplea lafosfocreatina para proporcionarles energa a lasclulas.

SIGNIFICACIN CLNICA

En el caso del infarto agudo de miocardio (IAM), laactividad srica de CK comienza a aumentar entre 2 y 6horas despus de producido el episodio y alcanza un

mximo despus de 18 a 24 horas. Los picos alcanzadospueden llegar a ser 20 veces el lmite superior normal,razn por la cual es quizs la prueba ms sensible para eldiagnstico de IAM.


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FUNDAMENTO DEL MTODO

La creatina quinasa (CK) cataliza la fosforilacin del ADP por elfosfato de creatina, obtenindose creatina y ATP. Laconcentracin cataltica se determina, empleando lasreacciones acopladas de la hexoquinasa y glucosa-6-fosfatodeshidrogenasa, a partir de la velocidad de formacin delNADPH.

CKcreatina fosfato + ADP --------------- > creatina + ATP

HKATP + D-glucosa ---------------------- > ADP + D-glucosa-6-fosfato

G-6-PDH

D-glucosa-6-fosfato + NADP+ --------------------> 6-fosfo-D- Gluconolactona + NADPH+ H

6- PGL6-fosfo-D-gluconolactona + H2O --------------- > 6-fosfo-D-gluconato

6-PGDH6-fosfo-D-gluconato + NADP+ ------------------ > D-ribulosa-5-fosfato + CO2 + NADPH


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MUESTRA Suero. Plasma (heparina o EDTA

como aditivo).

REACTIVOS:Reactivo B: solucion de buffer imidazol pH 6,7.Reactivo A: frasco con sustrato desecado conteniendo cantidadessuficientes para las siguientes concentraciones finales:

Imidazol 100 mmol/l; pH 6,7

Creatina fosfato 30 mmol/lADP 2 mmol/lGlucosa 20 mmol/lNADP 2 mmol/lHexoquinasa 2500 U/lGlucosa-6-fosfato deshidrogenasa 2000 U/lAcetato de magnesio 10 mmol/lAMP 5 mmol/lDi-(adenosina-5') pentafosfato 10 umol/lN-acetilcisteina 20 mmol/l

Reactivo de Trabajo:Mezclar 5 partes de Reactivo A, con una parte del Reactivo B


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PROCEDIMIENTO

Llevar el aparato a cero con agua destilada.

A 30 . 37C: En un tubo colocar 1ml de reactivo de trabajo. Preincubar por 34 minutos. Luego agregar 40 ul de muestra. Mezclar inmediatamente y esperar 3 minutos.

Registrar la absorbancia luego de 1, 2 y 3 minutos de laprimera lectura. Determinar la diferencia promedio de absorbancia / minuto,

restando cada lectura de la anterior y promediando losvalores.

A 25C: Seguir el procedimiento indicado anteriormente Pero empleando 80 ul de muestra Esperar 4 minutos luego del agregado de la muestra.


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CLCULO DE LOS RESULTADOS

CK (U/I) = A/min x factor

En cada caso deber emplearse elfactor de clculo correspondiente,como se indica en la siguiente tabla:

30 37C 25C

340 nm 4.127 2.142334 nm 4.207 2.183366nm 7.429 3.856

VALORES DE REFERENCIA

Temperatura 25C 30C 37CVarones 80 U/l 130U/l 195U/lMujeres 70U/l 110U/l 170U/l


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SIGNIFICACIN CLNICA

La determinacin de la actividad lactato deshidrogenasa (LDH) tiene unagran variedad de aplicaciones clnicas. Por ser una enzima intracelular, suelevacin es ndice de dao tisular con la consecuente liberacin de staa la circulacin.

En el infarto agudo de miocardio, la actividad de LDH total (junto con lasCK y AST), constituye un elemento importante de diagnstico.

La misma comienza a elevarse 12-24 horas despus de producido elinfarto; alcanza un pico entre las 48-72 horas y permanece elevada hastael sptimo o dcimo da.

Normalmente, el nivel de LDH-2 es mayor que el de LDH-1; sin embargo,despus de un ataque cardaco, el nivel de LDH-1 es generalmente mayorque el de LDH-2, lo que se denomina patrn de LDH "descontrolado".


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FUNDAMENTOS DEL MTODO

La lactato deshidrogenasa (LDH/LD) cataliza lareduccin de piruvato a lactato (P-L) en presenciade nicotinamido adenin dinuclucetido reducido(NADH) a pH 7,5.


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MUESTRA

Suero libre de hemlisis separado de las clulas a la mayor brevedadtras la extraccin.

El empleo de heparina y citrato como anticoagulantes elevafalsamente la actividad de LDH. La congelacin se traduce en una prdida de actividad de la enzima

REACTIVOS

Reactivo A: viales conteniendo NADH.

Reactivo B: solucin de buffer Tris, pH 7,2conteniendo piruvato y cloruro de sodio.

Tris 80 mM, pH 7,2Piruvato 1,6 mmol/l

NADH 0,2 mmol/lClNa 200 mmol/l

Reactivo de Trabajo:

Mezclar 4 parte de Buffer con 1 parte de Sustrato


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PROCEDIMIENTOA 3037C: En un tubo colocar 1 ml de reactivo de trabajo. Preincubar por unos minutos. Luego agregar 20 ul de muestra. Mezclar inmediatamente y esperar 30 segundos. Registrar la absorbancia luego de 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura. Determinar la diferencia promedio de absorbancia / minuto, restando cada lectura

de la anterior y promediando los valores.

A 25C: Seguir el procedimiento indicado anteriormente Pero empleando 100 ul de muestra y 3 ml de reactivo de trabajo.

CLCULO DE LOS RESULTADOS:

LDH (U/I) = A/min x factor

En cada caso deber emplearse el factor de clculocorrespondiente, como se indica en la siguiente tabla

30 37C 25C

340 nm 8.095 4.921334 nm 8.253 5.016366nm 15.00 9.118

VALORES DE REFERENCIATemperatura 25C 30C 37CValores (U/l) 120 - 140 160-320 230-460

TRANSAMINASA GLUTMICO


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TRANSAMINASA GLUTMICOOXALACTICO

Tambin llamada aspartato transaminasa (AST),es una enzimaaminotransferasa que se encuentra en varios tejidos del organismo de losmamferos, especialmente en el corazn, el hgado y el tejido muscular.

La TGO se halla en el citoplasma y las mitocondrias, por eso se dice que esuna enzima bilocular. En lesiones celulares ligeras, la mayor parte de TGOliberada proviene del citoplasma y una parte pequea de lasmitocondrias. En caso de daos graves, se liberan enzimas ligadas en lasmitocondrias.

FUNCIN

Aspartato transaminasa cataliza la interconversin de aspartato yun-cetoglutarato en oxaloacetato y glutamato.


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SIGNIFICACIN CLNICA

La aspartato aminotransferasa es una enzima bilocular(citoplasmtica y mitocondrial) ampliamentedifundida.

Se encuentra en mayor concentracin en hgado ycorazn. Cualquier alteracin de estos tejidos produceun aumento en los nivelesde AST circulante.

FUNDAMENTO DEL MTODO

Esta enzima cataliza la reaccin de transferencia de un grupo amino desdeel L-aspartato al 2-oxoglutarato formndose L-glutamato y oxaloacetato.Esta enzima utiliza el piridoxal 5'-fosfato como cofactor.

L-aspartato + 2-oxoglutarato oxaloacetato + L-glutamato


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MUESTRA

Suero.

Plasma (heparina o EDTA como aditivo).REACTIVOS:Reactivo A: viales conteniendo 2-oxoglutarato, nicotinamida adeninadinucletido reducido (NADH), malato deshidrogenasa (MDH) y lactatodeshidrogenasa (LDH).Reactivo B: solucin de buffer TRIS pH 7,8 (a 30oC) con Laspartato.

Concentraciones finales (segn IFCC y SSCC)

TRIS 80 mmol/l; pH 7,8 (a 30oC)L-aspartato 240 mmol/lNADH 0,18 mmol/lMDH 420 U/lLDH 600 U/l2-oxoglutarato 12 mmol/l


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PROCEDIMIENTO

A 3037C: En un tubo colocar 1 ml de reactivo de trabajo.

Preincubar por unos minutos. Luego agregar 100 ul de muestra. Mezclar inmediatamente y esperar 1 minuto. Registrar la absorbancia luego de 1, 2 y 3 minutos de la

primera lectura. Determinar la diferencia promedio de absorbancia / minuto,

restando cada lectura de la anterior y promediando losvalores.A 25C: Seguir el procedimiento indicado anteriormente Pero empleando 500 ul de muestra. Luego de 3 minutos registrar la absorbancia inicial.


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CLCULO DE LOS RESULTADOS

GOT (U/I) = A/min x factor

En cada caso deber emplearse elfactor de clculo correspondiente,como se indica en la siguiente tabla

3037C 25C340 nm 1.740 791334 nm 1.780 809366nm 3.207 1.453

VALORES DE REFERENCIA

Temperatura 25C 30C 37CVarones 18 U/l 25 U/l 38 U/lMujeres 15 U/l 21 U/l 32 U/l


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