AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS DEL AMBIENTE Y SUPERFICIES DEL TRANSPORTE

PÚBLICO EN HORAS DE MAYOR MOVILIZACION POR USUARIOS LIMA-PERU.

Enver Ortiz; Segovia, Alfredo; Valdez, Elisa & Velezvilla, Giancarlo

INTRODUCCION:

Las condiciones de los lugares cerrados favorecen la propagación de bacterias entre miles de millones de viajeros en todo el mundo.

Los brotes de infecciones y de enfermedades en la población en general pueden amplificarse por una transferencia rápida impulsada por las condiciones ideales que se dan en el transporte público, llevando al absentismo laboral y a la disminución en el número de pasajeros. (Kramer et al. 2006).

Los típicos pasamanos de los vagones de metro y de los autobuses de transporte público, parecen limpios, pero los organismos nocivos pueden sobrevivir en el acero inoxidable durante meses (Kramer et al. 2006).

La falta de ventilación al mantener las ventanas cerradas, además de la poca higiene en los microbuses de transporte público, puede condicionar el contagio de las Infecciones, según datos de la OMS cada día mueren en el mundo unas 6,000 personas a causa de enfermedades gastrointestinales (Organización Mundial de la Salud. 2005).

Éstas son causadas por microorganismos como bacterias (Escherichia coli, Campilobacter jejuni y Salmonella typhi, Yersenia enterocolitica, Vibrio cholerae, Schigella spp, Salmonella spp, Legionella spp, Micobacterium no tuberculosa, Burkholderia pseudonallei), Todos ellos representan un verdadero problema de salud pública (Geo F Brooks ,2004.).

En un estudio luego de tomar muestras microbiológicas dentro de los vagones del Sistema Colectivo Metro de la Ciudad de México para determinar los tipos de bacterias nocivas que podrían encontrarse en este sistema de transporte, el cual usan alrededor de 1500 millones de personas por año.

Como parte de sus resultados, hallaron que entre las cepas presentes de los tipos de bacterias más abundantes se encontraron los estafilococos, con un 100% de respuesta; seguido por la Escherichia coli con un 60%, y luego las salmonelas y enterobacterias con un 25%, respectivamente. (Reyes, 2013).

Una falta de ventilación y reducida higiene induce al contagio de bacterias patógenas presentes dentro del transporte. (Muñoz, 2010).

OBJETIVO

la importancia de aislar microorganismos del ambiente y superficies del transporte público en horas de mayor movilización usuarios Lima-Perú. Como objetivo principal de este trabajo.

MATERIALES Y METODOS: 1.- Fase de laboratorio :

Reactivos y preparación de medios de cultivo

El estudio se realizo en el laboratorio de microbiología de la Universidad Nacional Federico Villarreal; donde primeramente se prepararon los agares nutritivos (Mac Conkey, manitol sal y TSA).

• Mac conkey 25g/500ml H2O 13 placas.• Manitol sal 55.5 g/500ml H2O 13 placas•TSA 20g/500ml H2O 13placas

En 12 tubos de ensayo se agregaron suero fisiológicos para el hisopado.

En la realización de la prueba bioquímica se emplearon los medios TSI, Lía, citrato y Urea; para lo cual se diluyó respectivamente 2.32 g; 1.98 g; 1.45 g y 3.9 g de cada compuesto en 60 ml de agua destilada, luego se agito y calentó tornándose los medios de color naranja, morado, verde y naranja claro según el orden de compuestos mencionados.

Se distribuyo 3 ml de solución en cada tubo de ensayo obteniéndose por cada medios 20 tubos, que en total seria 80; se dejó solidificar a temperatura ambiente inclinando a 45° excepto el de urea que no se solidifico ni se inclino.

MATERIALES Y METODOS:

2.- Fase de campo :

MuestreoMétodo 1: Plaqueo al ambiente e hisopados de la baranda de los carros, donde 3 placas que contenía agar Mc Conkey, manitol sal y TSA fueron expuesto al ambiente te durante 5 minutos.

Método 2. también se procedió el hisopado de las barandas de este transporte, donde fueron colocadas en el tubo de ensayo que contenía suero fisiológico; este plaqueo e hisopado se realizó en dos turnos (mañana y tarde) por 3 días, obteniendo 18 placas y 6 hisopados que se encontraba en suero fisiológico.

• Siembra de los hisopados

• Tinción GRAM

RESULTADOS• Del total de 6 placas (3 placas

al aire libre y 3 placas hisopadas) utilizadas en el primer muestreo de turno mañana del primer día (11/20/2013).

• En el caso de las placas de Agar Mc Conkey, no se aisló ningún tipo de colonia, pasadas las 48 hrs. Después de la siembra, en ninguno de las metodologías.

• En manitol sal se aislaron al aire libre (sedimentación) e hisopado un solo tipo de colonias de color amarillo, bordes regulares y de pequeño tamaño. Al realizarse la tinción Gram, se observó la presencia de microorganismos del tipo coco de coloración azul – morada (Gram Positivo).

• En TSA se aislaron con la metodología del hisopado se aisló una colonia de gran tamaño más del 40% del área de la placa, de color crema, de bordes irregulares, y otras pequeñas colonias de formas reculares de color crema y en el caso de plaqueo ambiental (aire libre), se aisló colonias típicas de color crema, bordes regulares y de pequeño y otras de gran tamaño. En ambos se pudieron observar bacterias Gram negativos (bacilos [1] y cocos [2]) y Gram Positivas (Estreptococos) [3].

Sobre las pruebas bioquímicas:La Confirmación

• Del método de sedimentación (muestra en Manitol Sal), los repiques en medio TSI, viraron de color naranja a amarillo, positivo a Escherichia coli.

• De los métodos de hisopado y sedimentación (muestra común en ambas en medio TSA), los repiques en Caldo Urea, viraron de color naranja a violeta, positivo a Proteus spp , en medio TSI, viraron de naranja a rojo; positivo a Pseudomonas spp. y en medio citrato de verde oscuro a azul marino dando positivo a Enterobacteriaceas ( Salmonella spp, Klebsiella spp. Y Citrobacter spp.).

• Del método de sedimentación (plaqueo al aire libre), los repiques en medio TSI, de color naranja a amarillo; positivo a E. coli. Citrato, viraron de color verde oscuro a azul marino, positivo a Enterobacteriaceas ( Salmonella spp, Klebsiella spp. Y Citrobacter spp.)

• Primer muestreo de turno tarde del primer día (11/20/2013) se aislaron: En Mc Conkey al aire libre una colonia de bacilo gran negativo (y en hisopado 3 colonias de cándidas de levadura.

DISCUSION

• Es sabido que la transmisión aérea ocurre cuando los núcleos goticulares (gotas suspendidas) <5 micras de tamaño, son diseminadas por el aire y respiradas. Estos núcleos goticulares pueden permanecer suspendidos en el aire por algún tiempo. Los núcleos goticulares son los residuos de las gotas evaporadas. Se ha observado durante la tapa de muestreo la ocurrencia de este fenómeno, no solo por parte de los usuarios sino también de los vendedores ambulantes.

• Esta forma de diseminación incluye enfermedades como la tuberculosis pulmonar activa (TB), sarampión, varicela, peste neumónica, y fiebres hemorrágicas con neumonía. La transmisión por gotas ocurre cuando gotas más grandes (> 5 micras), contactan con la mucosa nasal, oral o conjuntival de un individuo susceptible.

• Las gotas normalmente se generan cuando el individuo infectado tose, se suena o habla. Las enfermedades que se transmiten de esta forma incluyen difteria, gripe, meningitis, parotiditis, tos ferina .

• Sin embargo nuestros resultados también muestra la importancia del contacto directo con alguna superficie como medio de infección sobre todo para bacterias entéricas que se encuentran siendo una de las principales causa de muerte en menores de cinco años (Organización Mundial de la Salud [OMS] 2005.).

• Adicional a las diferentes bacterias patógenas no debemos olvidar las partículas ultrafinas, productos de la combustión de hidrocarburos, las cuales son de menos de 1 μm de diámetro que permanecen suspendidas en el aire por períodos prolongados, los que en épocas de inviernos suelen acentuarse por falta de ventilación.

• Y que no suelen ser degradables por vías físicas o químicas, haciendo prolongada su permanencia dentro de las unidades de transporte público por lo que son fácilmente inhaladas por los pasajeros. Y también se consideran particularmente tóxicas; lo cual puede agravar los cuadros infecciosos o mejorar los medios para nuevas infecciones en nuevos hospederos (Muñoz, G. 2010.)

REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA:

• Geo F Brooks, et.al. , 2004. Microbiología Médica. 18a edición traducción de la 23 Ed. en Ingles de Medical Microbiology Jawetz, Melnick and Delberggs Manual Moderno.

• Kramer et.al. 2006. How long do nosocomial pathogens persist on inanimate surfaces? A systematic review. BioMed Central. Infect. Dis.6: 130.

• Organización Mundial de la Salud (OMS) 2005. Reglamento Sanitario Internacional: Áreas de trabajo para su aplicación, sección cuatro.

• Muñoz, G. 2010. Transferencia de bacterias del transporte público a las manos. Universidad Autónoma Metropolitana – Xochimilco. In press.

• Reyes, M. 2013. ¿Cuántas bacterias acumulamos en un día? . Salud 180. Centro Universitario mexico, In press.