PRACTICA N6Aislamiento de Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa de aguas de piscinas.I. INTRODUCCIONLas piscinas han incrementado su popularidad desde la dcada de los aos 60. Sus mltiples beneficios, los cuales estn relacionados con la relajacin muscular y el nivel de estrs, as como el bienestar fsico y psicolgico han sido las causas de este auge. Sin embargo, las piscinas constituyen uno de los establecimientos pblicos en los que ms atencin debe poner los servicios de salud pblica, ya que los elementos que se conjugan suponen un riesgo para la salud cada da ms acentuado por su uso multitudinario.Una gran variedad de enfermedades han sido reportadas como resultado del mantenimiento y uso inapropiado de las piscinas. Los casos registrados han incrementado en los ltimos aos y son atribuidos al incremento en la popularidad de las piscinas, ya que la calidad microbiolgica se relaciona directamente a la contaminacin transferida por los usuarios. Indudablemente, el aspecto ms importante a controlar dentro de la vigilancia epidemiolgica de estas zonas recreativas, es la calidad microbiolgica de sus aguas, estas deben cumplir con la pureza bacteriolgica, esto es, estar exenta de microorganismos patgenos capaces de alterar la salud de los baistas. Asimismo, han de controlarse aquellos parmetros fisicoqumicos que puedan dar lugar a cualquier tipo de trastorno o molestia.Si tenemos en cuenta que su uso est sometido a una demanda incesante y creciente por parte de la poblacin, no solo como lugar de esparcimiento, sino tambin para la prctica del deporte e incluso para la recuperacin de ciertas patologas, est suficientemente justificada la necesidad de llevar a cabo un control riguroso de la calidad de sus aguas. Adems, dicho control debe ser el adecuado para realizar una evaluacin correcta del estado del agua y de los mtodos de tratamiento a los que es sometida.

II. OBJETIVOS:

Determinar la pureza microbiologa del agua de la Piscina Juan Pissani Montenegro (Piscina Municipal) - Lambayeque.

Determinar la presencia de Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa en la muestra de agua colectada. III. METODOLOGIA MATERIALES: Muestra. Pipetas de 1 y 10 ml. 2 Placas con Agar Baird Packer. 3 Tubos con Caldo GSP doble concentrado. 6 tubos con Caldo GSP concentracin simple. Centrfuga. PROCEDIMIENTO:1. Preparar la muestra y todo el material a utilizar: rotular los tubos y anotar las caractersticas fsicas de la muestra (aspecto, turbidez, sedimento, partculas en suspensin y pH). Caractersticas fsicas de la muestra:Color cristalinoTurbidez noSin olor caractersticoSin partculas en suspensin.Sin sedimento.

pH: 7

Tipo de agua: Agua de piscina.Hora: 9:00 amFecha: 03/07/2015Muestreador: Jorge Delgado S.Lugar: Piscina Municipal - Lambayeque

2. Agitar, mezclar adecuadamente la muestra.Para Staphylococcus aureus. Medir 10ml de la muestra y centrifugar por 15 a 20 minutos. Eliminar el sobrenadante y sembrar del sedimento, en placas por duplicado.

Luego incubar en anaerobiosis. Lectura: Colonias negras, convexas, brillantes, y observar precipitado por produccin de lecitinasa. Hacer recuento de las colonias caractersticas. Luego confirmar con: Tincin de Gram. Prueba de coagulasa. Informar resultados.Para Pseudomonas aeruginosa. Se desarroll el Mtodo del Numero ms Probable (NMP) Serie 3. Inocular los tubos: 10ml - - - - - Serie 1 1ml - - - - - - Serie 2 0.1ml - - - - Serie 3

Luego incubar los tubos a 35 C por 48-72 horas. Lectura: Observar pigmento hidrosoluble.

Sembrar en una placa con Agar Cetrimide, de los tubos sospechosos de crecimiento por Pseudomonas aeruginosa (pigmento fucsia).

Incubar a 35 C por 24 horas. Lectura: Observacin de pigmento hidrosoluble verde azulado. Olor caracterstico de Pseudomonas aeruginosa (olor a mote). Confirmar: Tincin de Gram. Crecimiento al 6,5 % de NaCl. Reportar los resultados.

IV. RESULTADOS:Para Staphylococcus aureus. No hubo crecimiento para Staphylococcus en ambas placas.

Medio de Cultivo: Agar Baird Packer.

Para Pseudomonas aeruginosa.

Tincin Gram

Se observ bacilos Gram (-)Agar Cetrimide

Lectura: No se observ el pigmento hidrosoluble caracterstico de Pseudomonas aeruginosa, ni el olor caracterstico.

Las colonias no presentan las caractersticas culturales pertenecientes a Pseudomonas aeruginosa.

Por lo tanto se descarta el crecimiento de Pseudomonas aeruginosa en la Placa con Agar Cetrimide.LECTURAPseudomonas aeruginosa

Prueba presuntiva(+)

Prueba confirmativa(-)

CONCLUSION: La muestra analizada no presenta crecimiento de bacterias contaminantes como Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa. V. INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS: La calidad del agua en piscinas, debe cumplir con los requisitos del agua potable. Al establecer esta condicin se define una calidad de aptitud recreacional igual a la de consumo humano, cuando en la realidad el uso es diferente. Realizado el anlisis microbiolgico de la muestra de agua, permite determinar la ausencia de bacterias contaminantes, como Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa, pero la presencia de otras bacterias hetertrofas contaminantes; por lo tanto el agua procedente de la piscina Juan Pissani Montenegro de Lambayeque, no cumple con las condiciones sanitarias adecuadas para el mantenimiento de aguas de piscina, por lo tanto no es apta para recibir a los usuarios. VI. RECOMENDACIONES

Medir el pH del agua, al menos una vez por semana. El agua debe presentar un pH adecuado, ya que la alteracin de este puede provocar irritacin de piel y ojos si el pH es alto o si es bajo.

El cloro desinfecta el agua y evita que se enturbie y que aparezcan algas. Un floculante ayudar a que el filtro clarifique el agua y la mantenga cristalina. Cuidar bien el filtro permitir que el tratamiento qumico sea ms eficaz.

VII. BIBLIOGRAFIA

http://www.agualatinoamerica.com/docs/pdf/nivel%20basico%20mar03.pdf

http://www.ingenieroambiental.com/4014/salazar.pdf

http://www.20minutos.es/noticia/2167361/0/mantenimiento/piscina/verano/

http://www.20minutos.es/noticia/2167361/0/mantenimiento/piscina/verano/

[Nombre del autor]

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MICROBIOLOGA ACUTICA

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS