Seminario Extracción ADN Membranas sílice; QUIAGEN kit

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Johann Shocker Restrepo Rubio Juan David Sandoval Forigua

716760 716821

Fuente: http://www.cultek.com/aplicaciones.asp?p=Aplicacion_AN_Purificacion&opc=tecnicas&idap=36

Tipo de sales desestabilizan la estructura de las molculas de

agua, es decir, la capa hidratante que recubre a las biomolculas, y debido a ello, desnaturaliza las protenas, incrementa la solubilidad de sustancias apolares y destruye las interacciones hidrofbicas.Serie de Hofmeister

Fuente: http://www.cultek.com/aplicaciones.asp?p=Aplicacion_AN_Purificacion&opc=tecnicas&idap=36

QIAamp spin columns

Tubos de coleccin de 2 mL Buffer ATL (Buffer de lisis) Buffer AL (Sal caotrpica)

Buffer AW (Buffer de lavado) Buffer AE (Buffer de elucin) Proteinasa K

Compuestos activosBuffer ATL: SDS (dodecil sulfato de sodio y EDTA (cido edtico)

Buffer AL: cloruro de guanidinio

El mtodo QIAgen fue el ms eficaz en la extraccin de

ADN, pero en comparacin a los dems mtodos requiere ms trabajo. La resina Chelex obtuvo la menor cantidad de ADN extrado, y el que se logr extraer contena altos contenidos de agentes contaminantes. El uso de tarjetas FTA resulta conveniente por su manejo y transporte en comparacin con los dems protocolos.

Se obtuvo diferencias significativas entre los mtodos

QIAgen manual y automatizados respecto a la cantidad de ADN extrado. En muestras sanguneas la resina Chelex no se recomienda debido que no permite la eliminacin de todos los agentes contaminantes.