Origen fetal de la disfunción placentaria: el caso de la RCIU
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Origen fetal de la disfunción placentaria:
el caso de la RCIU
Paola Casanello MSc, PhD
División de Obstetricia y Ginecología
Escuela de Medicina
Pontificia Universidad Católica de Chile
Curso DOHaD
Facultad de Medicina
Universidad de Antioquia
Medellín, Colombia
Restricción del Crecimiento Intrauterino (RCIU)
• Incidencia de RCIU en Chile es 3-10% (MINSAL 2009)
• Representa 20 - 25% de las muertes intrauterinas
• Mayor riesgo de morbilidad y mortalidad perinatal
Lin & Santolaya-Forgas, Obstet Gynecol. 1998
Juez et al., Rev Med Chil. 1989
Biometría por ultrasonido es el “gold standard” para controlar el crecimiento fetal.
Doppler de las arterias umbilicales se usa para evaluar el bienestar fetal.
Diagnóstico y seguimiento de fetos con RCIU
PO2 in the UV = 26 - 32 mmHg
%O2 in UV = 4.5 - 5.5 %
Pardi et al. NEJM.1993
Evidencia clínica de hipoxia en RCIU
Howard 1987
Relación entre peso fetal / peso de la placenta
y Doppler de arterias umbilicales
Pardi et al. Placenta 2002
VASOCONSTRICTORES
PROCOAGULANTES
PROLIFERACION
VASODILATADORES
ANTICOAGULANTES
APOPTOSIS
Cines et al., Blood, 1998Ray & Shah, Clinical Science, 2005
Función endotelial
2.0%
Set
5% CO2
95% N2
+
37.0 05.0 85Tº %CO2 %H
PROOX
+ Sensor O2
Conexión sensor O2 a Proox
Suministro de mezcla 5% CO2/balance N2
Eliminación de gases de desecho desde cámara
Manómetros de presión (PSI)
2.0%
Set
5% CO2
95% N2
++
37.0 05.0 85Tº %CO2 %H
PROOX
+ Sensor O2
Conexión sensor O2 a Proox
Suministro de mezcla 5% CO2/balance N2
Eliminación de gases de desecho desde cámara
Manómetros de presión (PSI)
RCIU
Normal
RCIU
Normal
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
3.0
Normal RCIU
Tra
nsport
e d
e L
-arg
inin
a
pm
ol/
g p
rote
ína/m
in)
*
Efecto de hipoxia sobre la captación de L-arginina en HUVEC
Normoxia
Hipoxia
Casanello et al., 2009
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
Normal RCIU
5 2 5 2
Oxígeno (%)
Form
aci
ón d
e L
-[3H
]citru
lina
pm
ol/
g p
rote
ína/3
0 m
in)
Efecto de hipoxia sobre la actividad de NOS en HUVEC
Casanello et al., 2009
HUVEC-Control
HUVEC-RCIU
Control > RCIU
RCIU > Control
N.S.
Background
cDNA MicroarrayAtlas cDNA Expression Array, Clontech
Genes „housekeeping‟Genes
posicionamiento
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
Normal RCIU Normal RCIU
Pro
teín
a P
KC
/-a
ctin
a(u
nid
ades
arb
itra
rias)
P~
PK
C
/ P
KC
(unid
ades
arb
itra
rias)
Oxígeno (%) 5 2 5 2 5 2 5 2
Calfostina C – – – – + + + +
PKCα
P~PKCα
β-Actina
Oxígeno (%) 5 2 5 2 5 2 5 2
Calfostina C – – – – + + + +
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
1.4
1.6
1.8
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
Normal RCIU Normal RCIU
Pro
teín
a e
NO
S /-a
ctin
a(u
nid
ades
arb
itra
rias)
P~
eN
OS
/ e
NO
S(u
nid
ades
arb
itra
rias)
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
1.4
1.6
1.8
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
Normal RCIU Normal RCIU
Pro
teín
a e
NO
S /-a
ctin
a(u
nid
ades
arb
itra
rias)
P~
eN
OS
/ e
NO
S(u
nid
ades
arb
itra
rias)
PKC es activada por hipoxia en HUVEC normales
*
** *
* * * *
Casanello et al., 2009
L-Arginine
hCAT-1 mRNA
L-Arginine
Hypoxia
IUGR
hCAT1
p~PKC
NO
p~p42/44mapk
eNOS mRNA
eNOS
p~eNOS
L-Citrulline
+
NO
Ca2+
hCAT-1 ?
IUGR
Función vascular: Participación de Arginasa-2 en
la regulación del tono vascular placentario
www.annegeddes.com
Participación de las arginasas en la vasodilatación dependiente de
NO en vasos umbilicales de embarazos normales
Krause et al., unpublished
Control BEC0
20
40
60
80Normal
IUGR
*
*
* #
Maxim
al
insu
lin
-in
du
ced
rela
xati
on
(% K
+m
ax
)
Krause et al., unpublished
Papel de Arginasa en la reactividad vascular de la vena y arteria
umbilical de embarazos normales y con RCIU
Control BEC0
10
20
30
40
50Normal
IUGR
*
*
#
Maxim
al
insu
lin
-in
du
ced
rela
xati
on
(% K
+m
ax
)
Vena Umbilical
Arteria Umbilical
Normal RCIU
-50
0
50
100
150Control
BEC
L-NA
BEC/LNA
*
* ***
*
#
Ma
x r
ela
xa
tio
n t
o C
GR
P
p < 0.05 ANOVA,
* vs control, # vs Normal control
Krause et al., unpublished
Papel de Arginasa en la reactividad vascular de arterias coriónicas de
embarazos con RCIU
-471 -465 -4340
10
20
30
40
50N-PLAEC
IUGR-PLAEC
*
*
CpG Arg 2 promoter
% M
eth
yla
tio
n
* p < 0.05 T-test
Cambios en el patrón de metilación en islas CpG del promotor de Arg-2
-361 -3520
10
20
30
40N-PLAEC
IUGR-PLAEC
CpG eNOS promoter
% M
eth
yla
tio
n
-361 -3520
5
10
15
20N-HUVEC
IUGR-HUVEC
CpG eNOS promoter
% M
eth
yla
tio
n*
#
* p < 0.05 T-test; # p = 0.11
Cambios en el patrón de metilación en islas CpG del promotor de Arg-2
Homogenizados de HUVEC (100 µg de proteínas) expuestos a normoxia (5% O2) e hipoxia
(2% O2) fueron separados en geles 2D, teñidos con Sypro Ruby y escaneado con
Phosphoimager FX
Avance de resultados con geles 2D
Caniuguir et al., unpublished
DOHaD 2011
7th World Congress on
Developmental Origins of Health and Disease
September 18-21, 2011PORTLAND, OREGON USAMarriott, Downtown Waterfront
OHSU Heart Research CenterGreater Oregon March of Dimes
www.dohad2011.org
División de Obstetricia y Ginecología, Facultad de Medicina, PUC
Jorge Carvajal Fernando Abarzúa Juan Pedro Kusanovic Cristián Belmar
Laboratorio de Investigación en Perinatología Laboratorio de Fisiología Celular y Molecular
Catalina Prieto Luis Sobrevia Enrique Guzmán
Bernardo Krause Andrea Leiva Carlos Salomón
Ernesto Muñoz Fabián Pardo Pablo Arroyo
Andrés Caniuguir Carlos Puebla Alejandra Acevedo
Freddy Navarro Francisco Westermeier Ninoska Muñoz
Colaboradores Nacionales
Rodrigo Iturriaga Andrea Miyasaka Francisco Mardones
Colaboradores Internacionales Financiamiento
Mark Hanson (Southampton University, UK) FONDECYT 1080543, 1110977
Leslie Myatt (UTHSA, USA) Anillo ACT 73 (PIA-CONICYT)
Gregory Rice (U Queensland, Australia) VRI-PUC
CONICYT- Becas Chile