Métodos Básicos en Métodos Básicos en el Laboratorio de Micologíael Laboratorio de Micología

Identificación de Hongos FilamentososIdentificación de Hongos Filamentosos

Dra. Gloria M. González G.Dra. Gloria M. González G.Dpto. MicrobiologíaDpto. MicrobiologíaFacFac. Medicina, UANL.. Medicina, UANL.

ESPECIMENESESPECIMENESCLINICOSCLINICOS

Secreción heridasSecreción heridasBiopsiasBiopsias

OrinaOrina

CutáneasCutáneas(pelo, piel, uñas)(pelo, piel, uñas)Exudado mucosasExudado mucosas

Médula óseaMédula ósea

SangreSangre

SecreciónSecreciónvías vías respresp. bajas. bajas

Diagnóstico Diagnóstico MicológicoMicológico

Toma de muestrasToma de muestras(adecuada y abundante)(adecuada y abundante)

Recursos del laboratorioRecursos del laboratorio(reactivos, medios de cultivo, equipo)(reactivos, medios de cultivo, equipo)

Personal con experienciaPersonal con experiencia

Toma de Muestras/TiñasToma de Muestras/Tiñas

Toma de Muestras/TiñasToma de Muestras/Tiñas

Toma de Muestras/Pitiriasis Toma de Muestras/Pitiriasis VersicolorVersicolor

Examen DirectoExamen Directo

KOH (10KOH (10--40%)40%)

KOHKOH--DMSODMSO

KOHKOH--calcofluorcalcofluor

Solución salinaSolución salina

Hidróxido de potasio:Hidróxido de potasio:

Hidróxido de potasio..........20 Hidróxido de potasio..........20 grgrGlicerol..............................20 mlGlicerol..............................20 mlAgua destilada...................60 mlAgua destilada...................60 ml

Examen DirectoExamen Directo

Hidróxido de potasioHidróxido de potasio--dimetilsulfóxidodimetilsulfóxido::

Hidróxido de potasio.........10 Hidróxido de potasio.........10 grgrDimetilsulfóxidoDimetilsulfóxido...............40 ml...............40 mlAgua destilada...................50 mlAgua destilada...................50 ml

Examen DirectoExamen Directo

Solución salina:Solución salina:

Cloruro de sodio.......... 0.85 Cloruro de sodio.......... 0.85 grgrAgua destilada............. 100 mlAgua destilada............. 100 ml

Examen DirectoExamen Directo

Examen DirectoExamen Directo

Examen DirectoExamen Directo

Examen Directo/CabelloExamen Directo/Cabello

Examen Directo/CabelloExamen Directo/Cabello

Examen Directo/LimitacionesExamen Directo/Limitaciones

Sitio anatómico afectadoSitio anatómico afectado

Cantidad de muestra examinadaCantidad de muestra examinada

Número de microorganismosNúmero de microorganismos

Tipo de pacienteTipo de paciente

Calidad del personal del laboratorioCalidad del personal del laboratorio

Examen Directo/ArtefactosExamen Directo/Artefactos

Cultivo de la MuestraCultivo de la Muestra

Medios de cultivoMedios de cultivo

Tipo de contenedoresTipo de contenedores

Tiempo de incubaciónTiempo de incubación

Temperatura de incubaciónTemperatura de incubación

Medios de CultivoMedios de Cultivo

Agar SabouraudAgar Sabouraud

Agar Agar MicoselMicosel o o MicobióticoMicobiótico

Agar papa dextrosaAgar papa dextrosa

BHI + antibióticosBHI + antibióticos

BHIBHI

Medios de CultivoMedios de Cultivo

Refrigeración (2Refrigeración (2--8 8 °°CC))

Bolsas de plásticoBolsas de plástico

* 2 meses* 2 meses

Tipo de ContenedoresTipo de Contenedores

Medios de Cultivo/Técnica de SembradoMedios de Cultivo/Técnica de Sembrado

Tiempo de IncubaciónTiempo de Incubación

Levaduras 24Levaduras 24--48 horas48 horas

Hongos filamentosos 2Hongos filamentosos 2--4 días4 días(no patógenos)(no patógenos)

Hongos filamentosos 6Hongos filamentosos 6--15 días15 días(patógenos)(patógenos)

* Revisiones diarias * Revisiones diarias

Temperatura de IncubaciónTemperatura de Incubación

2525--30 30 °°CC

37 37 °°CC

Características de la coloniaCaracterísticas de la colonia

Estructuras asexualesEstructuras asexuales

Características fisiológicasCaracterísticas fisiológicas

Estudios microbiológicosEstudios microbiológicos

MorfologíaMorfologíamicroscópicamicroscópica

MorfologíaMorfologíamacroscópicamacroscópica

Identificación de hongos filamentososIdentificación de hongos filamentosos

Características de las coloniasCaracterísticas de las colonias

ColorColorTopografíaTopografíaTexturaTexturaTasa crecimientoTasa crecimiento

Identificación de hongos filamentososIdentificación de hongos filamentosos

Textura Textura (altura de hifas aéreas):(altura de hifas aéreas):

AlgodonosaAlgodonosa

AterciopeladaAterciopelada

Granular o polvorientaGranular o polvorienta

GlabrosaGlabrosa

Examen de un CultivoExamen de un Cultivo

TopografíaTopografía (colinas y valles):(colinas y valles):

RugosaRugosa

UmbonadaUmbonada

VerrucosaVerrucosa

AplanadaAplanada

Examen de un CultivoExamen de un Cultivo

ColorColor

Examen de un CultivoExamen de un Cultivo

Examen de un CultivoExamen de un Cultivo

Técnica de Técnica de cardajecardaje

Técnica de cinta adhesivaTécnica de cinta adhesiva

MicrocultivoMicrocultivo

Examen de un CultivoExamen de un Cultivo

Azul de algodón y Azul de algodón y lactofenollactofenol::

Fenol, concentrado...........20 mlFenol, concentrado...........20 mlAcido láctico....................20 mlAcido láctico....................20 mlGlicerol............................40 mlGlicerol............................40 mlAzul de algodón...............0.50 Azul de algodón...............0.50 grgrAgua destilada.................20 mlAgua destilada.................20 ml

Examen de un Cultivo/Técnica de Examen de un Cultivo/Técnica de CardajeCardaje

Examen de un Cultivo/Técnica Cinta AdhesivaExamen de un Cultivo/Técnica Cinta Adhesiva

Examen de un Cultivo/Examen de un Cultivo/MicrocultivoMicrocultivo

1

2

3

4

Examen de un Cultivo/Examen de un Cultivo/MicrocultivoMicrocultivo

5

6

7

8

Examen de un CultivoExamen de un Cultivo

HifasHifas

ConidiasConidias

Célula Célula conidiógenaconidiógena

Estructura de sosténEstructura de sostén

Cuerpos fructíferosCuerpos fructíferos

OtrosOtros

TrichophytonTrichophyton rubrumrubrum

TrichophytonTrichophyton tonsuranstonsurans

TrichophytonTrichophyton mentagrophytesmentagrophytes

MicrosporumMicrosporum caniscanis

EpidermophytonEpidermophyton floccosumfloccosum

Pitiriasis Pitiriasis VersicolorVersicolor

Fase tisular 37 Fase tisular 37 °°CC Fase Fase micelialmicelial 2525--30 30 °°CC

CoccidioidesCoccidioides immitisimmitis

AspergillusAspergillus sppspp..

Morfología colonialMorfología colonial

Medios de cultivoMedios de cultivo

-- Agar de SabouraudAgar de Sabouraud

-- Agar papa dextrosaAgar papa dextrosa

-- Agar extracto de maltaAgar extracto de malta

-- Agar Agar CzapekCzapek--DoxDox

hifas hifas conidóforoconidóforovesículavesículamétulamétulacabeza cabeza conidialconidialfiálidesfiálidesconidiasconidiasesclerotiaesclerotiacélulas de células de HülleHüllecleistotecioscleistoteciosascaascaascosporasascosporas

Cont.

Morfología microscópicaMorfología microscópica

EstructurasEstructuras