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MEMORIA PRÁCTICAS EN EMPRESA: COMPLEJO ASISTENCIAL DE ÁVILA JULIO-AGOSTO 2010 MARINA ARRIBAS BLÁZQUEZ

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MEMORIA PRÁCTICAS EN EMPRESA:

COMPLEJO ASISTENCIAL DE ÁVILA

JULIO-AGOSTO 2010

MARINA ARRIBAS BLÁZQUEZ

Memoria de prácticas en empresa: Complejo Asistencial de Ávila

Marina Arribas Blázquez Página - 1 -

INDICE

Contenido de las prácticas:

Citologías. Estudio microscópico de las muestras

Necropsias clínicas de adultos y recién nacidos

Técnicas del laboratorio: conocimiento y realización del montaje de

bloques de parafina , cortes en micrótomo, tinción de preparaciones

histológicas

Biopsias. Estudio macroscópico de las piezas, y posteriormente estudio

microscópico de las biopsias

Desarrollo de la memoria:

Introducción Citopatología

Procesamiento general del material

Citología del Aparato Genital Femenino

Células normales de la citología Cervicovaginal.

Citología Cervicovaginal

Ciclo menstrual normal

Autopsias

Instrumentos de la Autopsias

Técnicas de Laboratorio

Biopsias

Bibliografía.

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INTRODUCCIÓN CITOPATOLOGÍA

La citopatología es la parte de la anatomía patológica que, mediante diversos

procedimientos, estudia las alteraciones morfológicas de las células desprendidas

libremente de los epitelios de revestimiento o extraídas de distintas zonas del cuerpo

humano.

Los territorios orgánicos que con mayor frecuencia se estudian mediante

citopatología exfoliativa son:

- Aparato genial femenino

- Árbol respiratorio

- Vías urinarias y próstata

PROCESAMIENTO GENERAL DEL MATERIAL

El procesamiento propiamente dicho, o preparación de las muestras para el

examen microscópico, comprende tres fases sucesivas: extensión, fijación y tinción.

La extensión se realiza en el laboratorio de citopatología, el técnico especialista

cuando no ha sido realizada por el clínico.

La fijación consiste en una solución éter/ alcohol al 96 por 100 a partes iguales,

alcohol etílico al 96 por 100, mediante citospray, etc.…

La tinción consiste en aplicar diversas combinaciones de sustancias colorantes a

las extensiones previamente fijadas. El método recomendable y más utilizado en

citología exfoliativa es el de Papanicolaou. Comprende un colorante que pone de

manifiesto la cromatina nuclear y otras sustancias que tiene afinidad tintorial por los

componentes del citoplasma.

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CITOLOGIA DEL APARATO GENITAL FEMENINO

El estudio etológico de las muestras verticales es un método diagnóstico útil,

sencillo, y de bajo costo, que en la actualidad se utiliza de forma rutinaria en clínica

ginecológica, ya que aporta datos de la situación hormonal de la paciente, ayuda de

forma importante en el diagnóstico de las infecciones cervicovaginales y es de capital

importancia en el diagnóstico morfológico de las lesiones preneoplásicas del cérvix.

CÉLULAS NORMALES DE LA CITOLOGÍA CÉRVICO-VAGINAL

El tracto genial femenino esta tapizado, como ya se ha comentado, por un

epitelio escamoso no queratinizado que reviste vulva, vagina y exocérvix, un epitelio

cilíndrico simple endocervical y un epitelio endometrial. Durante el ciclo menstrual, el

epitelio escamoso de la vagina y el epitelio glandular endometrial se verán sometidos a

distintos cambios por influencia de las hormonas esteroideas. Celularidad que podemos

observar en una citología normal:

Células escamosas:

En el epitelio escamoso no queratinizado, las células se agrupan formando

estratos o capas. Por tanto, en los extendidos citológicos procedentes de su exfoliación

se podrán encontrar los distintos representantes celulares que componen el epitelio.

Células superficiales:

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Se originan de la capa superficial del epitelio escamoso no queratinizado, son las

más comunes de la fase preovulatoria y reflejan el mayor grado de madurez. Las células

son grandes, poligonales, de bordes citoplasmáticos bien definidos e irregulares. El

citoplasma es translúcido, homogéneo y preferentemente eosinófilo. El criterio decisivo

para la identificación de la célula superficial es la picnosis, independientemente de la

tinción del citoplasma.

Células intermedias:

Se originan en el estrato medio del epitelio y son las células más frecuentes en la

fase postovulatoria. Representa la célula más constante y numerosa en el frotis vaginal.

Son células grandes aunque algo menos que las superficiales con citoplasma

transparente, poligonal y de bordes plegados. Los núcleos son redondos u ovales,

mayores que los de las células superficiales, de apariencia vesicular y cromatina fina.

Las células intermedias tienden a mostrar histolisis en la fase progestacional por acción

de la flora lactobacilar (bacilos de Doderlein). El glucógeno contenido en las células

intermedias es convertido en ácido láctico por acción de la bacteria vaginal. Este acido

láctico provoca un Ph bajo que servirá de protección contra otras bacterias e

infecciones. Para que este efecto se produzca, las células intermedias son destruidas por

el bacilo provocando un frotis citolítico. Este frotis se caracteriza por la presencia de

abundantes bacilos y células intermedias, muchas de las cuales sufren un grado variable

de disolución de su citoplasma, mostrándose como núcleos desnudos.

Las células naviculares, llamadas así por Papaniculaou por presentar una

característica forma de barca, son variantes de las células intermedias. En un principio

se las consideró exclusivas de la gestación. Debido a su alto contenido en glucógeno,

los citoplasmas pueden adquirir un color amarillento o verde- azulado pálido con

aumento de la densidad. Los núcleos son excéntricos, de aspecto vesicular,

hipercromastismo o picnosis.

Células parabasales:

La descamación de células parabasales originales en el estrato profundo es

infrecuente en la mujer normal y aparecen fisiológicamente en los estados atróficos de

la infancia y menopausia.

Las células son pequeñas, poliédricas o elípticas, con citoplasmas cianófilos y

bordes celulares muy bien definidos. Los núcleos son redondos u ovales

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Células basales:

Las células basales no aparecen en los frotis a menos que exista una hiperplasia

de las mismas. Son las células más pequeñas del epitelio vaginal. El citoplasma es

escaso e intensamente cianófilo con bordes lisos y definidos. El núcleo es central,

redondo, relativamente grande e hipercromático.

Células endocervicales:

En los extendidos, las células del epitelio cilíndrico endocervical pueden

disponerse sueltas o formando hileras, empalizados, grupos acinares o conglomerados.

La morfología depende de la perspectiva desde la que se las observe. Como

consecuencia de su marcada fragilidad citoplasmática, las células endocervicales

aparecen frecuentemente como núcleos desnudos.

Habitualmente expresan una morfología columnar o alargada. Si se observen

desde arriba, muestra una forma poligonal o cúbica, adoptando cuando se agrupan una

característica disposición en “panal de abeja”

Los citoplasmas son claros, microvacuolados o están ocupados por una gran

vacuola secretora

Células endometriales:

Su aparición ocurre durante o inmediatamente después de la menstruación. Es

relativamente frecuente encontrar células endometriales durante los primeros diez días

del ciclo, superados estos días, excepto en los casos de mujeres con dispositivos

intrauterinos, su aparición se relaciona con patología endometrial, frecuentemente

hiperplasias y adenocarcinomas.

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Macrófagos o Histiocitos:

Los histiocitos son huéspedes habituales de los extendidos cervico vaginales.

Acompañan a la fase menstrual y principio de la fase folicular. Comúnmente, los

histiocitos adoptan una forma redondeada u oval con marcadas variaciones en el

tamaño. El citoplasma es microvacuolado y puede contener partículas extrañas,

pigmento hemático y gotículas de grasa.

Leucocitos:

Los leucocitos polimorfonucleares se observan comúnmente en los frotis

cervico-vaginales. El número de leucocitos no siempre se correlaciona con inflamación,

se considera más un reflejo del ciclo menstrual. Un frotis con alto nivel estrogénico

aparece limpio y, tras la ovulación, el frotis suele acompañarse de una variable cantidad

de granulocitos.

CITOLOGIA CERVICOVAGINAL

El aparato genial femenino, al tener una parte importante de sus órganos en

contacto con el medio externo, presenta con frecuencia procesos inflamatorios e

infecciosos. Desde el punto de vista clínico, suelen manifestarse por prurito, leucorrea,

irritación y dolor local.

1.1 Células inflamatorias

1.2 Cambios inflamatorios de las células epiteliales

1.3 Procesos reactivos del epitelio

1.4 Cervicovaginitis específica

1.1 Células inflamatorias:

La presencia de inflamación en las citologías vaginales se observa mediante la

presencia de leucocitos polimorfonucleares fundamentalmente. No obstante, hay que

destacar que la presencia de estos en el moco endocervical es normal, y por lo tanto no

supone la existencia de un proceso inflamatorio. En ocasiones son tan abundantes que

pueden rodear totalmente a las células escamosas, constituyendo lo que se conoce como

las estructuras moruliformes.

Los histiocitos también son elementos inflamatorios, y su presencia es normal

durante los días menstruales y en algunos frotis atróficos de la menopausia

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1.2 Cambios inflamatorios de las células epiteliales:

Hay procesos inflamatorios que, por ulceración de los estratos más superficiales

de epitelio, ponen en contacto directo las células profundas con la superficie, y este

hecho se manifiesta por la existencia en los frotis citológicos de gran cantidad de células

basales y parabasales.

En los procesos inflamatorios, las células escamosas presentan cambios

degenerativos que afectan a su citoplasma y núcleo. En cuanto a su citoplasma va a

adquirir un aspecto eosinófilo. En otras ocasiones la tinción es anfófila, de tal manera

que la misma célula presenta áreas con tinción eosinófila y áreas con tinción cianófila,

además de la existencia de halos perinucleares.

En cuanto al núcleo, puede presentar un aumento del tamaño nuclear con

presencia de nucleolos, aspecto borroso de la cromatina. También pueden aparecer

fenómenos de bi y multinucleación en respuesta a procesos inflamatorios.

1.3 Procesos reactivos del epitelio:

Metaplasia escamosa:

Resultado de fenómenos de irritación persistentes, ya sean o no inflamatorios, el

epitelio endocervical es sustituido por epitelio escamoso. La metaplasia escamosa puede

manifestarse por epitelio escamoso totalmente maduro, sin embargo, entre el epitelio

endocervical normal y el epitelio escamoso maduro se pueden encontrar células

metaplásicas escamosas con diferentes grados de maduración. Su morfología será

redondeada o poligonal, apareciendo bien aisladas o formando grupos celulares en

forma de empedrado con moldeamiento de unas células con otras. Estas células

metaplásicas, con alteraciones nucleares y con fenómenos de queratinización, son

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denominadas por algunos autores como metaplasia escamosa atípica, y pueden presentar

problemas de diagnóstico diferencial con carcinomas epidermoides o lesiones

preneoplásicas

Paraqueratosis:

El epitelio desarrolla en su zona más superficial varias capas de células

escamosas, de pequeño tamaño, queratinizadas, pero que conservan su núcleo. Se

manifiesta por la presencia de células escamosas, de pequeño tamaño de forma

redondeada o alargada, con intensa orangofilia citoplasmática, y bordes bien definidos.

Estas células descaman aisladas o en grupos.

1.4 Cervicovaginitis específicas:

Existe un gran número de microorganismos que pueden producir procesos

infecciosos del aparato genital femenino; sin embargo, nos vamos a referir

exclusivamente a los que son más frecuentes en nuestro medio y se clasificarán en cinco

grandes grupos:

- Infecciones bacterianas: candidas, lactobacilos, cocos, actinomyces

- Infecciones por hongos: candida albicans

- Infecciones parasitarias: tricomonas vaginales

- Infecciones por clamydias:

- Infecciones virales: virus papiloma humano, herpes, citomegalovirus

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1. Muestras estudiadas en las prácticas:

Cándidas:

Es el hongo que con más frecuencia infecta el aparato genital femenino, y es una

de las infecciones cervicovaginales más frecuentes, sobretodo en el caso de las

embarazadas, debido a la disminución de las defensas en estas mujeres. Existen factores

predisponentes, como la diabetes, la gestación, el tratamiento prolongado con

antibióticos, el tratamiento con inmuno supresores y, desde luego, se asocia

extraordinariamente con el síndrome de inmunodeficiencia adquirida. En los Frotis se

pueden presentar en dos formas: esporas y pseudo hifas, que con frecuencia se asocian.

Las esporas son estructuras pequeñas, redondeadas u ovoides, con frecuencia rodeadas

por un halo claro, que se tiñen, de forma variable, desde basófilos a una coloración

rojiza; son frecuentes los fenómenos de gemación. Las pseudo hifas son estructuras

alargadas, delgadas, y tabicadas, que se sitúan aisladas o en agrupamientos, y que

presentan una coloración similar a la descrita para las esporas.

Aunque en muchos casos la respuesta inflamatoria es inespecífica, a veces la

presencia de fragmentación de los leucocitos polimorfos nucleares, la tendencia al

aumento del tamaño de los núcleos de las células escamosas, así como la eosinofilia

citoplasmática, acompaña a este tipo de infección.

Bacilos de Döderlein:

Los bacilos de este tipo constituyen el componente principal de la flora vaginal

normal durante el periodo reproductivo y no están incluidos como una categoría

especifica en la clasificación de Bethesda. Constituyen un grupo heterogéneo de bacilos

gram-positivos, la mayoría de los cuales pertenecen a la especie Lactobacillus

acidophilus, aunque en algunos casos son de tipo Corynebacterium con morfología

difteroide. El lactobacillus muestra comúnmente una morfología bacilar alargada, como

palitos o bastones, aunque pueden observarse formas más cortas o por el contrario my

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alargadas por acoplamiento longitudinal de varios de ellos. Se asociando a un Ph

vaginal ácido, con histolisis de las células intermedias y transformación del glucógeno

citoplásmico en ácido láctico. Las células superficiales se muestran, no obstante,

resistentes a la acción citolítica bacilar. El predominio de células intermedias puede

favorecer una histolisis exagerada, observándose un extendido de núcleos desnudos,

fragmentos citoplásmicos y abundantes bacilos denominado frotis citolítico.

Trichomonas:

La infestación del tracto genital bajo por este tipo de protozoo es frecuente, y

algunos autores consideran que entre el 20-25 por 100 de las mujeres adultas son

portadoras de este parásito. Suele admitirse que el varón es el portador del parásito y

que la transmisión es por vía sexual.

Desde el punto de vista morfológico, el protozoo presenta un diámetro variable,

posee aspecto de pera, con un polo anterior redondeado y un polo posterior afilado. En

el polo anterior, presenta cuatro flagelos y una membrana ondulante, que recorre toda la

longitud del protozoo. Muestra también un núcleo pequeño ovoide y excéntrico. Estos

pueden aparecer de forma aislada, aunque en ocasiones constituyen cúmulos alrededor

de células escamosas. En estas pacientes el componente inflamatorio suele ser muy

llamativo, con leucocitos polimorfonuleares, histiocitos y detritus celulares.

Cocos:

Varios tipos de cocos gram positivos pueden producir vaginitis inespecíficas con

la tinción de Papanicolaou. En citología, se observan extensiones inflamatorias de fondo

sucio y grisáceo por la presencia de “nubes” de bacterias de pequeño tamaño y

morfología redonda u oval, el exudado inflamatorio y alteraciones celulares asociadas

suelen ser intensos.

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VPH

La infección por el VPH se manifiesta por unos cambios característicos en el

epitelio escamoso. Se pueden reconocer tres tipos de lesiones histológicas, y todas ellas

tienen como denominador común la presencia de unas células escamosas peculiares

denominadas coilocitos. Estos se localizan en los estratos superficiales o intermedios, y

se caracterizan por presentar unos núcleos grandes, híper cromáticos, con membranas

nucleares irregulares y unos evidentes halos claros perinucleares.

El coilocito es una célula escamosa madura, caracterizada por una gran cavidad

perinulear, débilmente teñida, translúcida y de bordes muy bien definidos, como

“cortadas a pico”. El citoplasma que rodea la cavidad es denso y puede ser intensamente

eosinófilo, de aspecto hialino, o cianófilo. El núcleo tiene un aspecto variable,

dependiendo del estado de degeneración celular. También se dan fenómenos de

paraqueratosis/ disqueratosis tratándose de una queratinización anómala de las células

escamosas del cérvix. Estas células se disponen predominantemente en grupos

tridimensionales aunque pueden observarse también aisladas.

Adenocarcinoma:

Es una neoplasia maligna invasiva compuesta por células epiteliales de origen

endocervical. Es referido a células glandulares. Su rasgo distintivo es la descamación en

grumos de células, éstas se disponen superpuestas a modo de una distribución glandular

o de papilas.

Referido al citoplasma aparece una vacuolización, y inclusiones secretoras

citoplasmáticas. El núcleo es hipercromático, desplazado hacia la periferia, redondos u

ovoides y de contornos lisos.

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Lesiones escamosas intraepiteriales:

Tanto los del virus de papiloma humano, los asociados con el cáncer y los de

bajo riesgo, pueden causar el crecimiento de células anormales en el cuello del útero,

pero generalmente sólo los tipos de virus de papiloma humano asociados con el cáncer

pueden llevar al desarrollo del cáncer del cuello del útero. Las células cervicales

anormales pueden detectarse cuando se realiza la prueba Pap, o Papanicolaou, durante

un examen ginecológico. Se han utilizado varios términos para describir las células

anormales que pueden verse en las pruebas Pap. En el sistema de Bethesda (el sistema

principal que se utiliza para informar los resultados de las pruebas Pap en los Estados

Unidos), las condiciones precancerosas son divididas en lesiones intraepiteliales

escamosas (SIL, por sus siglas en inglés) de bajo grado y de alto grado. Las células

escamosas son delgadas, planas, y se encuentran en el tejido que forma la superficie de

la piel, en el revestimiento del conducto superior de los tractos respiratorios y

digestivos, y en la vagina y la parte exterior del cuello del útero. Otros términos que a

veces se utilizan para describir estas células anormales son neoplasia intraepitelial

cervical (CIN, por sus siglas en inglés) y displasia. Las lesiones intraepiteliales

escamosas de bajo grado (displasias leves) son una condición común, especialmente en

las mujeres jóvenes. La mayoría de las lesiones intraepiteliales escamosas de bajo grado

vuelven a la normalidad pasado unos meses o unos pocos años. A veces, las lesiones

intraepiteliales escamosas de bajo grado pueden convertirse en lesiones intraepiteliales

escamosas de alto grado. Las lesiones intraepiteliales escamosas de alto grado no son

cáncer, pero eventualmente pueden convertirse en cáncer.

Carcinoma epidermoide:

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Fondo sucio con células escamosas de capas bajas, pseudoeosinofilia y

citoplasmas mal conservados, con monstruosidades nucleares y con formas aberrantes,

marcada hipercromasia y cromatina irregular. Carcinoma epidermoide.

2. Aspectos hormonales, morfológicos y bacteriológicos en la citología del

dispositivo intrauterino (DIU).

El DIU, es el segundo método anticonceptivo más utilizado, pero existen una

serie de alteraciones citológicas como consecuencia de la introducción de un cuerpo

extraño en el interior de la cavidad uterina.

Desde el punto de vista hormonal, las mujeres portadoras de DIU muestran un

predominio de acción estrogénica.

En cuanto a las características bacteriológicas, lo más frecuente es la presencia

de flora mixta cocobacilar, a la que siguen en orden de frecuencia las tricomonas, las

cándidas y los actinomyces

En cuanto a la morfología celular, las células endocervicales como las

endometriales, identificadas en los frotis que poseían rasgos hiperplásicos o atípicos,

representaban una respuesta inespecífica al cuerpo extraño.

Como conclusión, la implantación de DIU conlleva la aparición de una

inflamación aguda endometrial inicial, pasajera y no significativa, y una inflamación

crónica posterior, que suele remitir en el transcurso del tiempo, de forma espontánea, sin

producir sintomatología alguna.

3. Artefactos, contaminantes y cuerpos extraños en la citología vaginal:

Por diferentes causas, tales como una extensión y fijación inadecuada del

material, una exposición del frotis al medio ambiente, errores en la preparación, mal

filtrado de los colorantes o por una manipulación inadecuada de los frotis durante el

proceso de extensión o fijación y tinción, es posible que e produzcan alteraciones en la

morfología normal, así como la deposición de elementos extraños.

En un caso particular observado, la contaminación seminal. En los frotis

vaginales, es posible encontrar dos tipos de elementos seminales, los espermatozoides y

las células de las vesículas seminales, estas últimas menos frecuentes.

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Los espermatozoides aparecen con relativa frecuencia, y sobre todo incluidos en

el moco endocervical. Presenta una morfología característica, con una cabeza ovoide, de

pequeño tamaño, y su correspondiente y largo flagelo. Esto hace que puedan existir

cambios en la morfología de las células escamosas como consecuencia de su presencia

que no debemos tener en cuenta.

CICLO MENSTRUAL NORMAL:

La primera mitad del ciclo, del día 1 al 14, está regida por los estrógenos

producidos por el folículo ovárico maduro. A partir del día 14 el folículo se convierte en

cuerpo lúteo, que produce progesterona, siendo la hormona predominante en la segunda

mitad del ciclo. Cuando el cuerpo lúteo deja de funcionar, aparece la menstruación.

1-6 días: Predominio de células intermedias, agrupadas, con plegaduras

citoplasmáticas. Al final de la fase tienen tendencia a disponerse aisladas con sus

citoplasmas aplanados

.

6-14 días: Frotis preovulatorio, se observan células intermedias y superficiales

con predominio de estas últimas.

14-24 días: Frotis postovulatorio con neto predominio de células intermedias que

se agrupan y presentan plegaduras citoplasmáticas.

24-28 días: Frotis citolítico: Característico de los últimos días del ciclo. Gran

cantidad de bacilos, con células intermedias que en gran parte han perdido su

citoplasma.

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MENOPAUSIA:

En este periodo cesa la actividad cíclica del ovario, y se manifiesta por la

ausencia de la menstruación. Se asocia este proceso con una disminución de actividad

de los estrógenos, siendo estos los encargados de la maduración del epitelio escamoso

de la vagina. Se produce la desaparición de las células superficiales del frotis, y

posteriormente las células intermedias, para que finalmente quede representado por un

frotis constituido por células basales y parabasales prácticamente de forma exclusiva. Se

denomina frotis atrófico. La presencia de este frotis no esta relacionado con la edad de

la paciente, vemos el caso de mujer de 74 años con menopausia y frotis predominante

en células superficiales e intermedias.

EMBARAZO:

La gestación se manifiesta citológicamente por cambios celulares, que son más

significativos en las células escamosas, siendo fundamentalmente a partir del segundo

mes, la presencia en los frotis del predominio de células escamosas de aspecto

intermedio, dispuestas en grupos muy compactos. Estas células presentan una

morfología particular, que se caracteriza por la denominación de células naviculares,

forma ovoide, con bordes citoplasmáticos, condensados. Sin embargo esta morfología

no es exclusiva en frotis de gestantes, pueden aparecer tanto en frotis con ciclos

menstruales normales, así como en frotis intermedios de la menopausia.

Por otra parte si encontramos un frotis atrófico en una paciente gestante es un

hecho de posible aborto.

AUTOPSIAS

La autopsia clínica es el procedimiento postmorten que estudia las alteraciones

morfológicas de los órganos y tejidos como consecuencia de la enfermedad. Las

finalidades de esta autopsia, son entre otras cosas:

Determinar o corroborar la naturaleza de la enfermedad, así como su extensión

Investigar la causa principal o básica de muerte y aquellos procesos

contribuyentes

Estudia los procesos secundarios o asociados y los accesorios

Correlaciona signos y síntomas clínicos de la enfermedad con los hallazgos

morfológicos terminales.

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Comprueba los resultados de la terapéutica medica o quirúrgica

Investiga, en su caso, aquellas enfermedades contagiosas, hereditarias o

transmisibles.

El cadáver se situará en una mesa de disección, la posición del cuerpo se

encuentra en posición de decúbito supino.

Lo primero ha realizar es un examen externo del cadáver, comprendiendo la

inspección detallada del cadáver antes de iniciar la operación anatómica, tomando nota

de todas las particularidades que puedas proporcionar indicios relativos a una cuestión

médico-legal.

Para ello se tomarán datos de signos relativos a la identificación del cadáver

como la raza, edad aparente, sexo, color del cabello, color del iris, malformaciones o

deformidades, marcas de nacimiento, así como el aspecto general.

Posteriormente realizaremos un examen interno del cadáver siguiendo un orden

determinado para no omitir la observación de ninguna parte del organismo, pasaremos a

realizar la técnica de autopsia la cual va a producir la exteriorización de los órganos y

vísceras en las condiciones más naturales posibles originando la mínima alteración en el

cadáver pero ha de ser compatible con una perfecta observación de los mismos y capaz

de permitir la reconstrucción del cuerpo de modo que pueda ser devuelto a sus

familiares sin herir sus sentimientos.

INSTRUMENTOS DE LA AUTOPSIAS

Medición: cinta métrica de metal, regla de acero inoxidable, calibrador

Bisturís: mangos de diferentes formas y tamaños

Tijeras quirúrgicas: Siebold, Resano

Pinzas: Duval, Bonney, Ferris-Smith…

Martillos y Escoplos: Mead, Willinger, Gerzog…

Sierra eléctrica oscilante

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AUTOPSIA DE CRÁNEO:

El cadáver se encuentra en decúbito supino y la cabeza apoyada en un zócalo o

rodillo que presenta una excavación central, se separan los cabellos por donde se va a

hacer la incisión peinándolos hacia delante y hacía atrás, se incide en el cuero cabelludo

siguiendo una línea transversal que se inicia en las apófisis mastoides, pasa por el

vértice del cráneo y termina en la apófisis mastoides del otro lado. Se reclinan los dos

colgajos anterior y posterior seccionando las adherencias conjuntivas entre el periostio y

el cuero cabelludo, al mismo tiempo que se va traccionando, se secciona la aponeurosis

temporal y el correspondiente músculo a ambos lados desprendiendo sus inserciones en

la fosa temporal.

Una vez al descubierto el cráneo éste se sierra horizontalmente siguiendo una

línea circular que pasa por delante, dos dedos por encima de las arcadas orbitarias. El

corte debe hacerse con precaución para evitar escapes de la sierra que podrían herir las

meninges o incluso el cerebro. Cuando el aferramiento se ha completado, se introduce

un escoplo en T y se da un movimiento de giro para desprender las posibles uniones

entre la calota craneana y la base, se introduce un gancho de martillo por la parte frontal

del corte y se realiza una tracción enérgica que desprenda la bóveda craneana. El

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encéfalo una vez extraído se examinara, pesara y se introducirá en un bote con formol

que permitirá su fijación para su posterior análisis microscópico.

AUTOPSIA DE TÓRAX:

La apertura del tórax y del abdomen se hace simultáneamente mediante una

incisión única con forma oval que abarca la pared anterior de ambas cavidades. Se inicia

el corte por la articulación externo-clavicular derecha. Se dirige hacia abajo y hacia

fuera contorneando el pezón del mismo lado y descendiendo verticalmente hasta la

espina ilíaca antero superior, en donde se desvía hacia adentro hasta el pubis

.

Con un bisturí fino, sin penetrar mucho para no lesionar los vasos que están por

debajo, se desarticula la extremidad interna de la clavícula, seccionándose después las

costillas con el condrotomo, siguiendo la línea del corte cutáneo. A continuación se

levanta el colgajo formado por el polo externo costa, se secciona el diafragma y el

ligamento redondo del hígado y por último se completa en profundidad las incisiones

laterales del abdomen evitando lesionar las asas intestinales. Se levanta y se reclina

sobre el cadáver el gran colgajo constituido por la pared torazo-abdominal anterior, con

lo que quedan abiertas ambas cavidades, de modo que se tiene una visión completa de

las relaciones topográficas de todas las vísceras.

Posteriormente se extraen por separado los dos pulmones mediante la disección

del hílelo, que se aborda por detrás para lo que se hace girar hasta exteriorizarlo. Se abre

después el pericardio cortando con unas tijeras hacia arriba y hacia abajo desde un ojal

horizontal. Se extrae el corazón a continuación para lo que se van seccionando los

grandes vasos por el siguiente orden: primero cava inferior, venas pulmonares

izquierdas, arteria pulmonar, aorta, vena cava superior y venas pulmonares derechas.

Posteriormente tras haber comprobado las relaciones topográficas y el estado de la

serosa peritoneal se extrae las demás vísceras siguiendo normalmente el siguiente

orden: bazo, paquete intestinal, hígado, estómago, duodeno y páncreas.

Cada órgano se pesará en una balanza de precisión, se describirá su forma

externa y si tomará una muestra que se introducirá en un bote con formol para su

posterior estudio microscópico.

El intestino se abrirá, palpando la mucosa interna para observar si existe alguna

patología, posteriormente se realizará lo anteriormente indicado.

TÉCNICAS DE LABORATORIO

La fijación de los tejidos u órganos para su posterior procesamiento histológico y

estudio microscópico se consigue gracias al empleo de sustancias químicas que

interaccionan con los componentes moleculares de los propios tejidos. Estas sustancias

químicas reciben el nombre de “fijadores”. En ocasiones se emplean también otras

técnicas de fijación basadas en métodos físicos. Los objetivos que se pretenden alcanzar

realizando una fijación son los siguientes:

1. Preservar el tejido de la putrefacción, autolisis, etc.…

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2. Endurecer el tejido para permitir su manipulación y evitar alteraciones

morfológicas y estructurales que pudieran ocasionarse debido al propio

procesamiento histológico

3. Mantener intacta la citoarquitectura y ultraestructura

4. Preservar las características de las moléculas.

Tras la fijación, las muestras se lavan convenientemente para retirar cualquier

resto de fijador, y seguidamente se deshidratan, se aclaran y se infiltran en parafina. El

objeto de este proceso es embeber las muestras en una sustancia como la parafina, que

tiene una densidad parecida a la de los tejidos y, a temperatura ambiente, es sólida y lo

suficientemente, consistente para confeccionar bloques que pueden ser cortados con un

micrótomo.

La deshidratación se suele realizar con concentraciones crecientes de alcohol, o

acetona, o bien, dioxanos: baños sucesivos de gradación de 70%, 90% y 100%. El

aclarado se realiza usualmente con tolueno, xileno o benceno. Estas sustancias tiene la

particularidad de ser miscibles tanto con el agente deshidratante como con la parafina.

Al ser expuestas al agente aclarante, las muestras suelen transparentarse.

La imbibición en parafina se realiza calentando ésta por encima de su punto de

fusión para que esté en estado líquido y pueda infiltrarse en el interior de la muestra. Al

enfriarse, la parafina se solidifica y el bloque adquiere una dureza adecuada para ser

cortado con el micrótomo de parafina (de deslizamiento o de rotación).

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Estos bloques incluidos en parafina se enfriarán para posteriormente cortarlos

mediante el micrótomo, siendo un aparato mecánico de precisión que consta usualmente

de un soporte para colocar la muestra que hay que cortar y una cuchilla de acero o

vidrio que permite realizar los cortes. Éste realizará cortes delgados, la muestra sujeta a

un brazo móvil se va cortando con ayuda de una manivela rotatoria. Los cortes se

obtienen en tiras que pueden manipularse con pincel o aguja.

Esta tira de tejido se depositará sobre un baño de agua a 40º se sumergirá un

porta para colocar el tejido sobre el porta, posteriormente estas secciones se introducirán

en una estufa para desprender el exceso de parafina.

A continuación para teñir cortes en parafina, debe proceder en primer lugar a

eliminar la parafina puesto que no existe ningún colorante que pueda teñir a través de

ésta. Para ello se recurre al proceso inverso al utilizado durante la elaboración de los

bloques de parafina. Es decir, en primer lugar se procede a una desparafinación

mediante el empleo de un disolvente de la parafina como pueda ser el xilol. A

continuación se procede a una hidratación mediante baños sucesivos de alcohol en

gradación decreciente. Una vez en medio acuoso, se pueden emplear colorantes

hidrosolubles.

Una vez teñidos, para observar adecuadamente estas preparaciones con el

microscopio óptico, se ha de proceder a cubrir las preparaciones mediante un

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cubreobjetos. Para ello se requiere la utilización de una sustancia cementante o medio

de montaje. Si se quiere asegurar la estabilidad de la tinción histológica, se utiliza un

medio de montaje permanente que se ha de elegir en función del tipo de técnica de

tinción empleada. Si durante la técnica de tinción se han empleado colorantes

hidrosolubles, deben utilizarse medios de montaje no-acuoso, es decir hidrofóbicos.

Consecuentemente, los cortes han de volverse a deshidratar y tratarse con un disolvente

del medio de montaje antes de aliar éste.

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BIOPSIAS

Realizar una biopsia consiste en tomar una muestra de tejido en un sujeto vivo,

para realizar estudios hitológicos, histoquímicos, físicos, químicos, cultivos; cuyos fines

son tendientes a realizar un diagnóstico de una determinada patología, en ocasiones

para establecer una terapéutica y en otras ocasiones la biopsia es terapéutica en sí,(

cuando se realiza en el mismo acto de la biopsia, la ablación total de la lesión). O para

establecer una táctica quirúrgica, o con fines pronósticos, determinando la agresividad

de un tumor al valorar la invasión ganglionar o de tejidos circundantes, en el acto

operatorio. Ej. en colon: Dukes A, B, o C.

También se puede utilizar con el fin de establecer pronóstico, la valoración de

euploidía o aneuploidía, estudiando la carga del material nuclear de las celulas

obtenidas por biopsias, mediante la citología de flujo o la citología digital.

Para control de un paciente en cuanto a su evolutividad, el seguimiento se puede

hacer por biopsias seriadas en el tiempo; ej.: punción aspiración periódica de médula en

la cresta ilíaca, utilizada en las leucemias. O mediante la detección de marcadores

tumorales en los tejidos de la biopsia, (PA 53, CA 19, ABH, antígeno de superficie) que

al ser después detectados serológicamente, nos indican recidiva tumoral.

Técnicas:

Incisión: Biopsia de hígado o de cualquier tejido superficial, se saca una parte

del tejido por sección a bisturí

Escisión

Sacabocados: cuello uterino, biopsias endoscópicas

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Raspado o cureteado: en útero y hueso.

Abrasión: Acción o efecto de raer o desgastar por fricción. Ej.: Balón abrasivo.

Superficie lisa sobre superficie lisa.

Cepillado: Biopsias endoscópicas

Punción:

o Tiroides

o Hígado - Agujas de Vim Silverman y de Menghini

o Bazo

o Pleura - Aguja de Cope

o Médula osea, en cresta ilíaca o en esternón

Aspiración:

o A veces punción aspiración (Menghini)

o Tiroides

o Hígado

Escoplado o trepanado: Hueso

Examen directo: Un tejido que se elimina solo. Ej.: mama, exudado que sale

por el pezón.

Muestras observadas en el desarrollo de las prácticas y exposición de

algunas de estas muestras:

Piel

Estomago

Útero

Testículo

Trompa de Falopio

Amígdala

Lipoma

Epiplón

Riñón

Lengua

Vesícula

Placenta

Cordón umbilical

Tibia

Apéndice

Próstata

Pulmón

TIMO:

El timo es un órgano multilobulado rodeado por una cápsula de colágeno laxo de

la cual se radian pequeños septos interlobulillares que contienen los vasos sanguíneos

hacia el interior del órgano. El tejido tímico se divide en dos zonas, una corteza externa

intensamente basófila y una médula interna eosinófila, la distinción entre las dos es más

fácil durante la infancia. La corteza esta llena de linfocitos, la trama epitelial de la

médula es relaticamente densa y voluminosa mientras que la trama epitelial de la

corteza es más delicada y con más ramificaciones que la medular, por lo que a veces se

describe como reticular. En el centro de la médula se observan estructuras lamelares

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eosinofílicas denominadas cuerpos de Hassal que representan células epiteliales

degeneradas.

AMIGDALA PALATINA:

Las amígdalas palatinas son masas grandes no encapsuladas de tejido linfoide

que junto con las amígdalas lingual, faríngea y tubárica conforman el anillo de

Waldeyer. La superficie luminal se reviste por un epitelio escamoso estratificado que

forma invaginaciones profundas hacia la amígdala determinando las criptas tonsilares.

La base de la amígdala se separa del músculo subyacente mediante una hemicápsula

colágena densa. El parénquima de la amígdala contiene múltiples folículos linfoides

dispersos por debajo del epitelio de las criptas que muestran centros germinales

semejantes a los del ganglio linfático.

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APENDICE:

El apéndice es una formación tubular de fondo ciego que se une al ciego y

muestra una estructura general igual a la del intestino grueso. En los niños se caracteriza

por la presencia de grandes acúmulos de tejido linfoide organizado en folículos que

sufren atrofia progresiva en la edad adulta.

BAZO:

El bazo a nivel microscópico se aprecia, la pulpa blanca que esta formada por

acúmulos linfoides y la pulpa roja que constituye la mayor cantidad del órgano siendo

un tejido muy vascularizado. El bazo tiene una cápsula externa delgada, pero de

consistencia fibroelástica, desde la cual se extienden pequeños septos hacia el órgano.

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LENGUA:

La lengua es un órgano muscular revestido por mucosa oral que está

especializada en el manejo de comida, recepción sensitiva general y la función

específica gustativa. Se van a distinguir papilas existiendo de tres tipos: filiformes,

fungiforme y caliciforme. El cuerpo de la lengua se compone de una masa de haces de

fibras musculares esqueléticas entrelazadas que permiten a la lengua realizar un gran

número de movimientos. La membrana mucosa que reviste la lengua está firmemente

unida al músculo subyacente gracias a una lámina propia densa colágena que se

continúa con el epimisio muscular.

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ESTOMAGO:

Se observan distintas capas, la mucosa con prominentes pliegues y está

compuesta por glándulas gástricas que se extienden desde capa muscular de la mucosa

para abrirse hacia la luz del estómago a través de las foveolas gástricas. La capa

muscular propia muestra la capa circunferencial interna y la longitudinal externa,

también existe otra capa oblicua más interna que refuerza a la circunferencial. La

submucosa es laxa y distensible alojando grandes vasos.

Se observan distintas capas, la mucosa con prominentes pliegues y está

compuesta por glándulas gástricas que se extienden desde capa muscular de la mucosa

para abrirse hacia la luz del estómago a través de las foveolas gástricas. La capa

muscular propia muestra la capa circunferencial interna y la longitudinal externa,

también existe otra capa oblicua más interna que refuerza a la circunferencial. La

submucosa es laxa y distensible alojando grandes vasos.

HIGADO:

Las células del parénquima hepático, los hepatocitos, se han descrito

tradicionalmente como dispuestas en lobulillos. Éstos están delimitados por pequeños

tabiques de tejido colágeno de sostén. Los lobulillos hepáticos son de forma toscamente

hexagonal, lo que es reflejo de su forma poliédrica tridimensional. Las ramas

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principales de la arteria hepática y de la vena porta se localizan en los vértices del

contorno del lobulillo.

RIÑON:

Se diferencian corteza y médula en el riñón. La corteza contiene un gran número

de diminutas estructuras esferoideas, los corpúsculos nefrogénicos. La característica

fundamental de la pirámide medular es la de estar constituida por numerosos túbulos

que convergen hacia las papilas renales

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BIBLIOGRAFIA

Libro de citología Bethesda

Libros y revistas facilitadas en el propio hospital

Imágenes propias de las prácticas y encontradas en páginas de la usal