Filogeografía del  águila de la cola blanca, un generalista, con gran capacidad de dispersión.

RESUMENObjetivo cambios glaciales del Pleistoceno Tardío tuvo un gran impacto en muchas boreales y taxones templados,  el impacto de esto aún se puede detectar en la actualestructura filogeográfica de estos taxones. Sin embargo, sólo efectos menores que se esperaen especies con requerimientos de hábitat  generalista de alta capacidad de dispersión. Una especies como el águila de cola blanca, Haliaeetus albicilla, y por lo tanto hemos probado que para la estructura de la población se espera débil a nivel continental  esta especie.Esto también nos ha permitido describir los patrones filogeográficos, y deducir la Edad de Hielorefugios y los patrones de recolonización postglacial de Eurasia.

Lugar de cría de la población más oriental Neártica (Groenlandia) yen todo el Paleártico (Islandia, Europa continental, Asia central y oriental, yJapón).Métodos de secuenciación de un fragmento de 500 pares de bases del ADNmitocondrialcontrol de la región en 237 muestras de todo el rango de distribución.

Resultados.El análisis reveló pronunciada estructura filogeográfica. En general,variabilidad genética baja se observó en toda la gama. Haplotipos agrupadosen dos haplogrupos diferentes con una distribución predominantemente oriental u occidental,y amplia superposición en Europa. Estos dos linajes se separaron durante la mayorPleistoceno tardío. El haplogrupo oriental mostró un patrón de  expansión rápido de la población y colonización de Eurasia a finales del Pleistoceno. Elhaplogrupo occidental tuvo una menor diversidad y estuvo ausente de las poblaciones deeste de Asia. Estos resultados sugieren que la supervivencia durante la última glaciación fue en dosrefugios, probablemente situado en el centro y el oeste de Eurasia, seguido porpostglacialpoblación expansión y mezcla. Relativamente alta diversidad genética seobservaron en las regiones del norte que fueron cubiertas de hielo durante la última glaciaciónmáxima. Esta relación, y filogenéticas entre los haplotipos encontradosen el norte, indica expansión sustancial de la población en las latitudes altas. Áreas deescurrimiento de agua de deshielo glacial y lagos proglacial podría haber proporcionado un hábitat adecuado para el crecimiento de población.

Las principales conclusiones de este estudio muestra que las fluctuaciones del clima glacial tuvo unimpacto sustancial en las águilas de cola blanca, tanto en términos de distribución ydemografía. Estos resultados sugieren que incluso las especies con gran dispersióncapacidades y requerimientos de hábitat relativamente amplio se vio fuertemente afectada por los cambios climáticos del Pleistoceno.

Palabras clave: Región de control, Eurasia, Falconiformes, Haliaeetus albicilla, ADN mitocondrial, la población en expansión, la colonización postglacial.

INTRODUCCIÓNLos múltiples avances y retrocesos glaciales que se produjerondurante el Pleistoceno, no sólo alteró el paisajetopográfico del hemisferio norte, pero también tuvo unainfluencia dramática en la abundancia y distribución delas formas vivas. La mayoría de las especies se sometieron a una reducción drástica en cantidad y variedad (que se resumen en Hewitt, 2000), y muchoslinajes se extinguieron (por ejemplo, Shapiro et al., 2004). Para muchosanimales templados, las especies de plantas de Europa, penínsulasen la costa mediterránea actuado como refugio glacial (Taberletet al, 1998; Hewitt, 2000). Por el contrario, algunas especies del Árticoparecen haber reaccionado de manera opuesta a losCambios climáticos del Pleistoceno, con la contracción en el norte derefugios durante los períodos cálidos y grandes expansiones de poblacióndurante los períodos fríos (Flagstad y Roed, 2003; Dale'net al., 2005).Taxones con baja movilidad y  requisitos de hábitat  estrechos seespera que sean los más fuertemente afectados por los drásticoscambios en el hábitat que acompañan los ciclos glaciales, mientras que laestructura genética de las especies con mayor capacidad de dispersión queexplotan un nicho ecológico más amplio puede haber sido menosinfluenciado por los cambios climáticos. Por ejemplo, el lobo gris(Canis lupus, Linnaeus, 1758) muestra muy poco filogeográficosla estructura del ADN mitocondrial (ADNmt) en un continentenivel (Vila »et al, 1999;. pero véase Sharma et al, 2004.).Otro grupo de especies con potencial de dispersión más altoasí como hábitat amplio y dietética es el deáguilas Haliaeetus en el género. Las tres especies más grandes eneste género se producen en el hemisferio norte, incluido elalbicilla águila de cola blanca H. (Linnaeus, 1758), su NorteEspecies americanas de la hermana del águila calva, H. leucocephalus,Linnaeus, 1766, y el águila del sudeste de Asia marino de Steller,H. pelagicus, Pallas, 1811 (Wink et al., 1996).Entre estos tres, el águila de cola blanca tiene la más ampliaDistribución: Se extiende desde Groenlandia e Islandia en el oeste,en toda Europa, norte y centro de Asia, el Pacíficocosta y Japón en el este. Hábitat de cría son en su mayoría enregiones costeras y de agua dulce desde el Ártico hasta elsubtrópicos. Presa de intervenciones en estas regiones son el pescado y las aves acuáticas,pero en las zonas más secas mamíferos de tamaño medio son los alimentos comuneselementos (Katzner, 2002). Águilas de cola blanca también se alimentan de carroña,sobre todo en invierno. Los nidos se construyen en los árboles, así como en los acantiladoso en el suelo. Salvo en algunas poblaciones del norte,Estudió parejas territoriales son principalmente sedentarias (Glutz vonBlotzheim et al, 1971;. Helander y Stjernberg, 2003). Más jóveneslas aves son vagabundos: el comportamiento errante de larga distancia ha sidoregistrada para los menores, por ejemplo del norte de Europahasta Bulgaria (Glutz von Blotzheim et al., 1971). A pesar de

estos datos, señales de Europa sugieren filopatría fuerte, conlas personas suelen establecerse para criar cerca de su área natal(Helander, 2003), un patrón de conformidad con la variación enADN mitocondrial (ADNmt) y microsatélites autosómicosmarcadores en las poblaciones del norte de Europa (Hailer et al., 2006).No obstante, durante mucho tiempo las de águilas de cola blanca Se ha demostrado que es capaz de dispersión a larga distancia y la colonización, según lo documentado por la colonización de Islandia,Groenlandia, y Hawai (hoy extinguida población; Fleischeret al., 2000). Por otra parte, el registro fósil indica que laáguila de cola blanca colonizados latitudes del norte muy pronto después deretroceso de los glaciares (Ericson y Tyrberg, 2004), compatible comoser un generalista de hábitat y que indica la dispersión de altapotencial.Teniendo en cuenta esta flexibilidad en la elección del hábitat y la alimentación, la cola blancaáguila ofrece una buena oportunidad para probar la esperadébil estructura de la población a nivel continental en un generalistaespecies con alto potencial de dispersión. Por lo tanto, utilizarmarcadores genéticos para deducir el efecto de cambios en las condiciones climáticas del Pleistoceno en esta especie. Elegimos ADN mitocondrial como marcador, ya que es especialmente adecuado para la detección de estructura filogeográficos dentro de las especies animales (Avise, 2000).

MATERIAL Y MÉTODOSEstudio de las poblaciones, el muestreo y la extracción de ADNUn total de 237 individuos de águila de cola blanca de 11 reproductorespoblaciones de todo el rango de las especies se analizaron(Lugares de muestreo se indica en la figura 1;. Tamaños de muestra paracada población se muestran en las Tablas 1 y 2). Por 228 dellas personas que tomaron muestras de sangre de los polluelos (n = 209) orecogidos plumas muda (n = 19) de adultos reproductores enmuy cerca de sus nidos. Esto aseguró que no se mezclabancriadores locales con vagabundos o animales que dispersan en elanálisis, lo cual es importante cuando se estudia una especie en la queindividuos invernantes se pueden encontrar varios centenares demiles de kilómetros de sus áreas de reproducción originalpoblación (Helander y Stjernberg, 2003). Tomamos muestras de sólouna crías por pareja reproductora, para evitar la inclusión de cercafamiliares, al menos en lo que respecta a la generación actual.Además, con el fin de la encuesta de haplotipos adicionales quemuestra nueve personas cuya natal origen no pudo serseguridad asignada a cualquiera de las 11 regiones: un adulto que se encuentranheridos en el sur de Suecia durante la temporada de invierno, dospollos de la isla báltica de Gotland (situado entreSuecia y los Estados bálticos, dos regiones bien en la muestra), unplumas que se encuentran en el noreste de Polonia a finales del invierno,un individuo adulto encontrado muerto en Kazajstán duranteverano, y cuatro personas presuntamente relacionadas de unazoológico en Kazajstán. Estas muestras no fueron incluidas en elnivel de la población-análisis.Las muestras de sangre fueron almacenadas en EDTA / tampón SSC y se mantienecongelados hasta que el tratamiento en el laboratorio, las muestras de plumas

se mantuvieron a temperatura ambiente en seco y oscurocondiciones. ADN de la sangre fue extraída mediante una normaprocedimiento de fenol-cloroformo después de la digestión con proteinasaK (Sambrook et al., 1989). Para plumas pluma se utilizó elDNeasy tejido Kit (Qiagen, Hilden, Alemania) y seguidoel protocolo de Horva'th et al. (2005). ADN de las plumasde Kazajstán fue extraído por medio de un acetato de amonioprotocolo de la precipitación, como se describe en Rudnick et al.(2005).

Figura 1 Lugares y frecuencias de haplotipos de la población estudiada águila de cola blanca.  Colores corresponden a los Haplotipos de la figura. 2,y las posiciones de los nombres de la población indican aproximada lugares de muestreo. Sitio códigos se explican en la Tabla 1. Por el norteEuropa, los límites de las capas de hielo durante el último máximo glacial (LGM) reconstruido por Svendsen et al. (2004) se han superpuesto ael mapa (línea blanca, los márgenes de hielo en otras regiones no se muestran). Dentrodel límite glacial, más jóvenes (alrededor de 14.000 años AP) lagos represados de hielo enla depresión del Mar Báltico y los alrededores del lago Onega se muestran en azul claro (después de Mangerud et al. 2004).

Cadena de la polimerasa (PCR), amplificación ySecuenciación del ADNCon el fin de encontrar un marcador adecuado para el presente estudioinicialmente amplificaron y secuenciaron 400 pares de bases (pb) de la

ADN mitocondrial citocromo b (Cyt-B) de genes en un total de 32 individuos(21 de Suecia, cuatro de Groenlandia, cuatro de Alemaniay tres desde el este de Rusia). Este recuperó cuatro variablessitios de la definición de cuatro haplotipos (datos no presentados). Teniendo en cuenta estacantidad restringida de variación de la secuencia, que posteriormentese centró en la región de control no codificante en su lugar.La región completa de control del mtDNA (> 1500 pb, incluyendodos repeticiones en tándem de 11 pb heteroplásmico cada uno que obstaculizaronestimación de la longitud exacta) se amplificó en unos pocospersonas de diferentes orígenes geográficos como se describe enHailer et al. (2006). A continuación, una región de 544 pb que abarca ámbitos quey II, que contenía la mayor parte de la variabilidad de control-regiónobjetivo utilizando los cebadores Hal-HVR1F (5 ¢, CCCCCCCTATGTATTATTGT-3 ¢) y Hal-HVR1R (5 ¢, TCTCAGTGAAGAGCGagaga-3 ¢), ambas situadas en la región de control. PCRLas reacciones se llevaron a cabo en los volúmenes 10-LL que contieneaproximadamente 15 ng de DNA genómico, 0,3 ml de cada iniciador,0,2 mm de cada dNTP, 0,25 unidades de ADN HotStarTaqpolimerasa (Qiagen) en 1 · HotStarTaq (Qiagen) reaccióntampón con Tris-Cl, KCl, (NH4) 2SO4 y 1,5 mm de MgCl2.PCR se realizó en un PTC-225 (MJ Research,Watertown, EE.UU.) con el siguiente perfil térmico: 15 mina 95 º C antes de las 36 ciclos de 30 s a 56 º C, 30 s a 72 º C y 30 sa 95 C;? seguido de un paso final de 1 min a 56 C y una?extensión de paso de 10 min a 72 º C. Los productos PCR fueron limpiadosutilizando el kit de la enzima ExoSAP (Amersham Biosciences,secuenciación de Uppsala, Suecia), y el ADN de ambas cadenas sea cabo utilizando los cebadores de PCR original y la DYEnamicET kit de Terminator (Amersham Biosciences). SecuenciaciónLas reacciones han sido limpiados con placas AutoSeq (AmershamBiosciences) y se ejecutan en un MegaBACE 1000 (AmershamBiosciences) instrumento capilar de acuerdo con el fabricanterecomendaciones. Electroferogramas se reunieron,comprobar manualmente, y se alinea con Sequencher 4.1.4 (GeneCodes, Ann Arbor, MI, EE.UU.). Después de la eliminación de la cartillasecuencias y algunas bases más cerca de los cebadores, estadio un fragmento de 500 pb para el análisis.Varias líneas de evidencia indican que no teníamos una secuenciacopia nuclear de la región de control mitocondrial (un numt).En primer lugar, se encontraron solamente tres individuos, con picos dobles (es decir,posibles posiciones de heterocigotos, confirmada por resecuenciación denuevo producto de PCR) entre todos los electroferogramas analizados. Todos lostres casos fueron de muestras de sangre. Dada la generalla diversidad de haplotipos de alta (H ¼ 0.746), y suponiendo que de Hardy-Weinberg, esperaríamos que 177 (0.746 ° 237)heterocigotos entre los 237 individuos analizados, si nuestrasecuencias fueron a la energía nuclear autosómico inserta. Por lo tanto, heteroplasmiaes una explicación mucho más probable que lo observadopicos dobles. En segundo lugar, se obtuvieron secuencias idénticas dela misma persona utilizando una variedad de PCR. En tercer lugar, todos loshaplotipos obtenidos a partir de muestras de plumas, también se registraron en muestras de sangre, compatible con un origen genómico idénticos.Plumas plumas han endurecido anterior ha sugerido quesobre todo una buena fuente de secuencias de ADN mitocondrial

(Sorenson y Quinn, 1998). En cuarto lugar, la observación de unrelación de transición-transversión en torno al 7 (ver Tabla 1 y Fig. 2.)es típico de las mitocondrias en lugar de ADN nuclear (Nei yKumar, 2000). En quinto lugar, secuencias idénticas fueron obtenidos enamplificar fragmentos de tamaños entre 416 y 1990 pb. Desdeinserciones nucleares del mtDNA tienden a ser de bastante restringidalongitud (Sorenson y Quinn, 1998), esto también sugiere que losfragmentos analizado es mitocondrial.

Tabla 1 sitios variables y frecuencias absolutas de los haplotipos de ADNmt región decontrol en las 11 poblaciones de estudio.

Gr.: Groenlandia, Hielo: Islandia, tampoco: Noruega, Alemania: Alemania, Suecia:costa sueca, la vuelta: Laponia sueca, Est: Estonia, Kola: la península de Kola, al noroesteRusia, Kaz: Kazajstán, Amur: río Amur, en el este de Rusia, Jap: Japón.* Los datos de un individuo encontrado muerto en Kazajstán (no certificadas para serun criador local) se incluyen entre paréntesis, pero no incluidos en el conteo.

Cuadro 2 Estimaciones de la variabilidad dentro de la población de secuencias parciales región de control-de ADNmt águila de cola blanca. Tamaño de la muestra (n), el número de haplotiposúnicos (NH), la diversidad de haplotipos (H), la diversidad de nucleótidos (p), y lafrecuencia de haplotipos del grupo A se informó.

Figura 2 sin enraizar red parsimonia estadística de Eurasia de cola blanca águilahaplotipos de ADNmt región de control. Círculo área es proporcionala las frecuencias de haplotipos. Los guiones indican inferirse pasos mutacionales, y los números se refieren a los lugares correspondientes en la alineación.Pequeños círculos negro denotan inferirse haplotipos intermedios. Haplotipo colores corresponden a los de la figura. 1.

Analiza los datosDNASP 4.10 (Rozas et al., 2003) se utilizó para determinar TajimaD (Tajima, 1989), calculado en función del número total demutaciones en la alineación. Para medir la variabilidad dentro de la población, arlequin3.0 (Excoffier et al., 2005) y DNASPse utilizaron para calcular la diversidad de haplotipos (H) y de nucleótidos

diversidad (p, p corregida sobre la base de las distancias genéticas).Para comprobar que nuestras comparaciones de la población de la variabilidadgenética(P y H) no fueron afectados por tamaño de la muestra, se empleó unremuestreo bootstrap procedimiento que utiliza una macro de MicrosoftExcel: ocho o diez secuencias (correspondiente a la muestratamaño de Groenlandia, Japón y la península de Kola) semuestreo con reemplazo de cada uno de los más ampliamentepoblaciones muestreadas 1000 veces, y P y H se calcularonpara cada muestreo. Desde que se calcularon la media a través deresamplings y los intervalos de confianza del 95% (IC) (percentilmétodo) de P y H.Una red de parsimonia estadística (Templeton et al., 1992), delas secuencias de nucleótidos se construyó utilizando el programatcs 1.21 (Clemente et al., 2000) con la configuración predeterminada de 95%parsimonia límite de conexiones. En comparación con los árboles se bifurcan,redes son más adecuados para la intraespecífica generalmente poco profundasfilogenias en el que la divergencia es baja y ancestralhaplotipos todavía pueden existir en la población (Posada yCrandall, 2001).Se utilizó el software modeltest 3.7 (Posada y Crandall,1998) para identificar el modelo de evolución de secuencias que mejor se adaptelos datos. El modelo propuesto era más compleja que cualquiera delos modelos disponibles en el software utilizado para su posteriorcálculos. Sin embargo, Nei y Kumar (2000) muestran que, porsecuencia tan pequeños como los observados en este estudio las divergencias,modelos complejos de la evolución de la secuencia no modificar en gran medidaestimaciones de distancia. Para estimar el tiempo de divergencia entreprincipales clados filogenéticos, se aplicó la Tamura y Nei(1993), corrección de la distancia en el cálculo del promedio netodistancias entre los grupos "mega con 3 (Kumar et al., 2004).Los errores estándar se calcularon con 1.000 repeticiones de arranqueen todos los sitios. El valor obtenido divergencia, que se corrige a la diversidad dentro del clado de imitar polimorfismo ancestral(Nei, 1987), se dividió por el índice de divergencia (dos vecesl la tasa de mutación). A nuestro entender, de forma independienteestimaciones de calibrado de la divergencia del ADNmt de control-regióntasa no se han publicado para las aves rapaces. Por lo tanto, utilizó ladivergencia de tasas de las regiones hipervariables combinado I y IIdel 14,8% al sitio por millones de años estimados por Wenink et al.(1996) para Calidris alpina. También se consideraron una serie de otrostasas posibles (5-20%, ver Brito, 2005) ya que la tasa que se conocevariar entre las especies (García-Moreno, 2004) y entrediferentes partes de la región control del ADNmt (Ingman yGyllensten, 2001). Las comparaciones de la secuencia de divergencia entre loságuilas de cola blanca secuenciado para Cyt-B y el control de laregión indicó que la región de control desarrollado por lo menos 3-4veces más rápido (datos no presentados). Por lo tanto, no consideramos unaEstimar la tasa de 2% en nuestros análisis.Para investigar la estructura filogeográfica en el conjunto de datos,dividido la cantidad de variación genética en los componentesdentro y entre las regiones mediante la realización de un análisis devarianza molecular (AMOVA; Excoffier et al, 1992.) tal como se aplicade arlequín. Para este análisis usamos Tamura-Neicorrecteddistancias entre las secuencias. Importancia de la

componentes de covarianza se evaluó mediante una permutaciónprocedimiento, evitando así la dependencia de la normalidad de los datos(Excoffier et al., 1992). También se calculó KXY, la divergenciaentre los grupos de secuencias, medida por el sin corregirnúmero medio de sustituciones de nucleótidos por sitio entrepoblaciones (Nei, 1987), utilizando DNASP. Los pares obtenidosdistancias entre las poblaciones fueron utilizadas para un neighbourjoining(NJ) el análisis en tres mega. El árbol resultante esinfluenciado por los factores de población muchas genéticos, incluyendomutación, la deriva y la migración. Por lo tanto, representa a nuestro momento actualsimilitud general de las poblaciones, pero no necesariamentereflejar las relaciones ascendencia.La presencia de flujo limitado de genes puede ser indicado por unpatrón de aislamiento por distancia entre las regiones. Se determinólas coordenadas geográficas de la distribución aproximadapuntos medios de cada una de las poblaciones muestreadas. El geodprograma (Servicio Geológico de EE.UU.) se utilizó para calculardistancias suponiendo una superficie de la Tierra esférica. Después de Rousset(1997), que trazan UST / (1) UST) contra el registro de ladistancias geográficas con el software ibdws (Jensen et al.2005). El mismo programa se utilizó para investigar estadísticasignificado mediante pruebas de Mantel con 10.000 randomizations.Para investigar la historia demográfica de águila de cola blancapoblaciones, que hemos probado para las señales de la población súbitaexpansión mediante el enfoque de distribución no coincide plenamentea cabo en arlequín. La distribución desajuste esgeneral multimodal en muestras de poblaciones que se encuentran enequilibrio demográfico, y unimodal cuando se dibuja a partir de unapoblación que ha experimentado una expansión demográfica reciente(Slatkin y Hudson, 1991; Rogers y Harpending, 1992).Los parámetros demográficos Q0, Q1 y s [Q = 2 U Ne, f,donde Ne, f es el tamaño de la hembra antes de efectivo de la población (Q0)y después (Q1) una expansión sola instantánea, y u es lahaplotipo tasa de mutación; s = 2 ut, donde t es el tiempo transcurrido desde] La expansión de la población fueron estimados con un generalizado no linealmínimos cuadrados enfoque. La desviación de la supuestamodelo fue probado por bootstrap paramétrico (Schneider &Excoffier, 1999) utilizando un algoritmo modificado de coalescentesHudson (1990). El 95% de los intervalos de confianza de la situación demográficaparámetros se estimaron con 5000 repeticiones de laprocedimiento de bootstrapping mismo.Se utilizó arlequin y DNASP para calcular (1997) Fu pruebaFS y estadística (1993) * D Fu y Li y F * para cada haplogrupoy para los datos de toda la unidad completa. Estas pruebas demuestrandiferentes grados de sensibilidad a la desviación de la neutralidadorigen en la demografía o la selección. crecimiento de la población (oautostop genética, que puede producir una señal similar) puede serdetectados en los patrones de significación de estas pruebas: dado unexpansión de la población, FS se espera que se apartan significativamentede la expectativa nula, mientras que * D * y F son menos sensibles a lacrecimiento de la población y por lo general no muestran significativasdesviación. Los valores no significativos de * D y F * justificar la exclusiónde selección de antecedentes (Ramos-Onsins y Rozas, 2002). EnAdemás, se utilizó el de máxima verosimilitud basado en coalescentesenfoque aplicado en lamarc 2.0.2 (Kuhner et al., 1998)

para estimar g, un parámetro de crecimiento de la población.A raíz romana y Palumbi (2003) y la fórmula para Qdado lo anterior, se utilizó p (el valor esperado de Q; Nei y Kumar,2000) para determinar el tamaño actual de la genética poblacional efectivode las mujeres. Para este cálculo, se utilizó la estimación de l porWenink et al. (1996) y multiplicado por el tiempo de generaciónde las águilas de cola blanca (alrededor de 14,5 años; cálculos de los autoressobre la base de datos de Struwe-Juhl, 2003).

RESULTADOSEn las secuencias de 500 pb analizados en el 237 águila de cola blancaLas muestras se descubrieron 12 sitios variables que definen 13 haplotipos diferentesde ADNmt (Tabla 1). Las secuencias han sidodepositados en la base de datos del EMBL (números de accesoAM156933 a AM156945). Tajima D para los datos de todo el conjuntofue 1,389 (P> 0.10), compatible con la evolución neutral de laSecuencias de ADN. Relaciones haplotipo podría deducirsecon la excepción de un bucle, como se muestra en la estadísticared de parsimonia (Fig. 2). No hay inserciones o deleciones seobservó. Dos de las 16 sustituciones se infiere transversiones,y hubo por lo menos tres sitios con múltiplesmutaciones.Todas las secuencias, salvo haplotipo C01 agrupados en uno dedos haplogrupos, conocidos como A y B (Fig. 2). HaplotiposA01 y B01 ocuparon el lugar central en cada uno de los doshaplogrupos y fueron los haplotipos más frecuentes en elconjunto total de datos, en total se producen en casi el 70% de laindividuos estudiados. En la mayoría de la población, uno de estos dosfue el haplotipo predominante (Fig. 1 y Tabla 1). Entrelos haplotipos encontrados en las frecuencias más bajas, tres (B02, B04,B06) fueron distribuidos en grandes áreas geográficas, que se producen entanto de la región del Mar Báltico y el centro o el este de Asia.Haplogrupos A y B se encontraron mezclados en grandesáreas geográficas (Fig. 1, Tabla 1). Los dos haplogruposmostró una clina de este a oeste en sus respectivas frecuencias(Cuadro 2). Las secuencias del haplogrupo B tenía una incidencia del 100%en las dos poblaciones más oriental (Amur y Japón),baja a las frecuencias intermedias en Kazajstán y en todo elDel Mar Báltico, y fueron en gran medida ausente de las poblacionesadyacente al Océano Atlántico (Groenlandia, Islandia yNoruega). Por el contrario, el haplogrupo A fue de 100% de frecuenciaen Groenlandia e Islandia, a través de diferentes frecuenciasen todo el Báltico, a ser poco frecuentes (12%) en Kazajstán yausente de las dos poblaciones más oriental.

Dentro de la variabilidad de la poblaciónEl número de haplotipos por población osciló entre dos enGroenlandia, Islandia, Noruega y Japón a siete en el Kolapenínsula (Cuadro 2). La variabilidad genética (haplotipos y nucleótidosdiversidad) fue baja en los extremos de la distribuciónrango (Groenlandia y Japón), y fue mayor en el Báltico

región. En general, la diversidad de haplotipos y nucleótidos mostraronpatrones similares. La diversidad de nucleótidos fue el más bajo en Groenlandia,Islandia, Noruega, Amur y Japón, el más alto y en Estonia,Suecia y Laponia. La diversidad de nucleótidos fue fuertementeafectada por el grado de mezcla entre los subtipos A y B,como lo demuestra el haplotipo grande, pero relativamente menorla diversidad de nucleótidos en Kola. Remuestreo 1000 veces de ochoindividuos por población (tamaño de la muestra de Groenlandia yJapón) reveló que la diversidad de nucleótidos baja observada enGroenlandia y el Japón estaba fuera de la IC del 95% de todos los europeospoblaciones con excepción de Alemania y Noruega. Remuestreo 1000tiempos de diez personas (tamaño de la muestra de la península de Kola)de las otras ocho poblaciones con tamaños de muestra más grande(Cuadro 2) reveló que la diversidad de haplotipos de alta observadaen Kola estaba fuera de la IC del 95% de todas las demás y,por lo tanto, no es probable que sea un artefacto del tamaño de la muestra restringida.La distancia promedio neto entre los grupos A y B0,0098 ± 0,0039 (± DE). Suponiendo una tasa de divergencia de un 14,8%por sitio por cada millón de años (Wenink et al., 1996), la divergenciade los dos clados se estima que se han producidoHace 66.200 ± 26.400 años. La divergencia entre las tasas de 5 y20% produjo estimaciones promedio de entre 49.000 yHace 196.000 años. La suposición de que las tasas de sustituciónpuede ser más alto en más corto que en escalas de tiempo más largo (ver Ho yLarson, 2006) apoyaría una fecha más reciente para eldivergencia. El origen de los linajes A y B fue así con confianzacolocado en el Pleistoceno tardío.

Estructura de la poblaciónEn general, la población de águilas de cola blanca mostraron una diferencia claraen su composición genética. UST en todas las poblacionesfue 0,512 (P <0,001). Parejas UST valores entre las poblacionesfueron significativamente mayores que cero en la mayoría de los casos(Tabla 3).El árbol vecino a participar (Fig. 3), basado en la medianúmero de pares de nucleótidos diferencias entre las poblaciones(KXY) más o menos refleja la ubicación geográfica de lapoblaciones. las poblaciones del Atlántico agrupado en estrecha colaboración, comohizo las poblaciones de Asia. El centro y norte de Europapoblaciones se encuentra entre estos grupos. Sin embargo,distancias genéticas entre las poblaciones europeas fueron en algunoscasos muy pequeña y en otros casos importantes, lo que indicacomplejos patrones de diferenciación en una escala espacial más pequeña. Porejemplo, el ejemplo de Alemania parecía genéticamentesimilares a las del Atlántico, y parecía la población Kolasimilar a las poblaciones asiáticas.resultados AMOVA (Cuadro 4), se confirmó la presencia de filogeográficosestructura de nuestros datos. Agrupación águila de cola blancalas poblaciones de acuerdo a las regiones geográficas de gran escala (Atlánticoislas, Europa, Asia, grupo 5) produjo una alta yUCT valor significativo, indicando una fuerte diferenciación geográfica.Por el contrario, que separa Groenlandia de las poblaciones restantes (grupo 2), lo que refleja las actuales taxonómicala segregación en dos subespecies reconocidas, albicilla H.groenlandicus y H. a. albicilla, no explicó gran parte de la

varianza y no fue significativa. Agrupaciones de 3 y 4 se indicaque Groenlandia e Islandia fueron menos diferenciada de lapoblaciones remanentes de Japón y Amur eran de todos losotros. La mejor agrupación exploramos fue el número 7. Esto,sin embargo, fue una agrupación a posteriori sobre la base de los resultados de lavecino a participar del árbol de la población (Fig. 3).Una parcela de diferenciación genética en relación con geográficadistancia (Fig. 4) indica una correlación débil pero significativa(Z ¼ 1.726,40, r = 0,424, de un solo lado P <0,001). Esta correlaciónera en gran parte el resultado de la fuerte diferenciación entre lasgeográficamente a las poblaciones más distantes, a saber, Groenlandiae Islandia, en comparación con el Amur y Japón. La exclusión de losGroenlandia, Islandia, Amur y Japón (pero incluyendoKazajstán) arrojó una correlación no significativa (Z ¼ 142.41,r = 0,248, de un solo lado P> 0,15).Las personas que habíamos dejado sin asignar a todo tipo de crucepoblaciones generalmente se lleva a haplotipos encontrados en los individuosde las poblaciones vecinas. Curiosamente, sin embargo, eladultos que se encuentran muertos en Kazajstán llevado haplotipo B06,de otro modo presentes en Laponia y la península de Kola, perono previamente detectado en la muestra de Kazajstán.

Figura 3 vecino a participar en árbol de las poblaciones de la Eurasiaáguila de cola blanca, con base en las distancias entre pares KXYhaplotipos región de control.

Tabla 3 de diferenciación genética entre las poblaciones de águila de cola blanca.Parejas UST valores basados en distancias Tamura-Nei se muestrandebajo de la diagonal. Correspondientes importancia según la evaluación de 2024permutaciones se indica mediante un signo más (P <0.05) o menos (no significativo)encima de la diagonal. Más conservadora, para dar cuenta de múltiples pruebas, los

valores en negrita indican significación a un nivel de 0.05 después secuencialCorrección de Bonferroni.

Tabla 4 Análisis de la varianza molecular (AMOVA) que describe la partición de la variación de haplotipos mitocondriales de ADN a través de una serie deconcebible de la población (pop) grupos.

 Euro denota el norte y centro de las poblaciones europeas [Tampoco, Suecia, Vuelta,Kola, Este y Alemania], tratan cada una por separado dentro del grupo.nsP> 0,05, * p <0.05, ** p <0.01, según la evaluación de 10.100 permutaciones.

Figura 4 parcelas de aislamiento por distancia de águila de cola blanca de Eurasiapoblaciones, con la distancia genética registrarse en el registro de la geográficadistancias. Los símbolos en negro corresponden a las comparacionesentre las poblaciones más distantes geográficamente (Groenlandiao Islandia vs Amur o Japón).

DemografíaEl análisis filogenético (Fig. 2) reveló la presencia de dosclados distintos (A y B) y, por tanto sugiere la evolución pasadade las águilas de cola blanca en dos grupos. Por lo tanto, investigadola historia no la población sobre la base de la actualpoblación geográficamente definidos, sino sobre la basede la subdivisión pasado y divergencia evolutiva de lamayoría de los linajes filogenéticos (como en Flagstad y Roed, 2003;Godoy et al., 2004). Haplogrupo B mostraron una frecuenciahaplotipo central junto con varios haplotipos derivados estrechamente relacionados a frecuencias más bajas. Este patrón en forma de estrellaes una característica común de los linajes a raíz de una demográficosexpansión (Slatkin y Hudson, 1991). El haplogrupo ATambién muestra un haplotipo central predominante. Sin embargo, sólodos haplotipos derivados de otros se encontraron dentro de esteclado.(1997) Fu estadística FS fue significativa para el B clado () 5.54,P <0,001), pero no para un clado (0.80, P> 0,10), mientras que Fu y(1993) de Li * * F y D no fueron significativas (P> 0.05) paratanto B (F * ¼ 0,38, D * ¼ 1,26) y A-F (* ¼ 0,71,D * ¼ 0,001). Resultados consistentes con esta se obtuvieron con

la lamarc programa, que dio un parámetro de crecimiento deg ¼ 2,830 (IC 95%: 669 a 9.062) de subtipo B, pero un valor deUn clado (g ¼ de 1172), cuyo 95% IC incluye valores negativos(95% IC) 12-8793), no excluyendo por tanto disminución de la poblacióno la inmovilización de A. En resumen, estas pruebas indican una poblaciónexpansión en el haplogrupo B, pero da resultados concluyentes parahaplogrupo A.El análisis de distribución de desajuste producido un bimodalmodelo para el conjunto total de datos (resultados no mostrados). Porhaplogrupo A, el procedimiento de mínimos cuadrados en arlequin seno convergen al ajustar el modelo a los datos observados.Por linaje B, la desviación del modelo de expansión súbitano fue significativa (Q0 ¼ 0.000, Q1 ¼ 483.1, P> 0.05). Lapico de la distribución correspondiente fue desajuste ens = 0.689 (IC 95%: 0,335 a 0,951). Usando la fórmula T s = /(L 2 l), donde L y L representa la longitud de la secuencia y elsustitución de la tasa por años el hotel millones, y el uso de ladivergencia de calibración de la tasa por Wenink et al. (1996), de 14,8%por años y millones de pares de bases, se estimó que la expansión dehaplogrupo B tuvo lugar 9311 años AP (95% IC: 4,527 a12851). Uso de las tasas de divergencia entre el 5% y 20% (véaseBrito, 2005) dieron valores promedio para el tiempo transcurrido desdeexpansión de pb año entre 6890 y 27560 - tanto en torno ala transición Pleistoceno-Holoceno en una amplia gama deparámetros.Los valores de la diversidad de nucleótidos (p) para la zona oriental (B) yoeste (A) clado fueron 0,00120 y 0,00098, que corresponde aun tamaño efectivo de la población genética de las hembras (Ne, f), de alrededor de560 y 460 mujeres, respectivamente.

DISCUSIÓNA nivel de especies la diversidadNuestro estudio reveló haplotipos son relativamente pocos y de poca profundidad undentro de la divergencia de especies entre el águila de cola blancahaplogrupos. Más de una amplia gama de mutación concebiblelas tasas, la divergencia de los linajes principales en laespecie se remonta de 50.000 a 200.000 años, que apunta a unentre especies división linaje durante el Pleistoceno tardío. Estepatrón ha sido observado en varios otros países del hemisferio Norte,especialmente boreales, las especies de aves (Lovette, 2005).Cambios climáticos del Pleistoceno son una explicación probable para ladivisión en un grupo oriental y occidental y la recientela diversificación de cada haplogrupo.Otra rapaz relacionados grande con una amplia cobertura geográficadistribución es el quebrantahuesos (Gypaetus barbatus,Linnaeus, 1758). Los puertos águila de cola blanca en general menosla diversidad de nucleótidos que el quebrantahuesos (alrededor de 0,7%, comoen comparación con el 2,9% en el quebrantahuesos;. Godoy et al,2004). El quebrantahuesos tanto, parece que ha conservadomayor tamaño efectivo de la población que el águila de cola blancatiene. Esto puede indicar una mayor sensibilidad de las águilas de cola blancaa las fluctuaciones climáticas, y / o estar relacionado con el más ampliorango de distribución del quebrantahuesos, que se extiende ael sur de África. Además, el importe de la diversidad del ADNmt

en el águila de cola blanca es similar a la descrita para controlregionsecuencias de otra ave de rapiña, el milano real (Milvus milvus,Linnaeus, 1758; Roques y Negro, 2005), a pesar de la distribuciónde este último se limita en gran medida a Europa.

Filogeografía estructura y contracción del áreadurante los períodos fríosADNmt región de control-secuencias del águila de cola blancaagrupados en dos haplogrupos principales distinta con un este-clina oeste a través de Eurasia (Fig. 1, Tabla 2). Este patrón haha observado en muchos otros taxones de Eurasia y América del Norte(Hewitt, 2000; Ruokonen et al, 2004;. Lovette, 2005) yprobablemente refleja la contracción del área en dos refugios alopátrica,seguido por postglacial re-expansión. El hallazgo del haplotipoC01 en el conjunto de datos puede resultar de conserva ancestralespolimorfismo, o indicar la presencia de un refugio de terceros.Para las especies como el águila de cola blanca no está claro si unrefugio glacial se pueden prever de una manera similar a larefugios tradicionales de las especies de bosque templado. De cola blancaáguilas tienen una gran capacidad de dispersión y los individuos errantespuede cubrir grandes áreas. Poblaciones viven en las densidades más bajas,y es posible que grandes áreas fueron necesarias para mantener viablespoblaciones durante el máximo glacial. Un refugio glacial para laáguila de cola blanca por lo tanto puede haber atravesado grandes áreas yvariada espacio-temporal, junto con climáticas y otros problemas ambientalescambios.El número limitado de haplotipos específicos de la región impidenos de establecer lugares precisos para el refugio.Sin embargo, nuestros datos sugieren que el águila de cola blanca sobrevivido la última glaciación en al menos dos regiones de Eurasia,ninguno de los cuales probablemente han estado en la costa del Pacífico.Las poblaciones en el este de Rusia y Japón muestran una bajahaplotipo y la diversidad de nucleótidos y compartir todos sus haplotiposcon las poblaciones europeas. Este patrón de genéticala diversidad es una característica de las poblaciones postglacially fundada.La única población de cría existentes de mar de Steller, águilas(Haliaeetus pelagicus) está situado en la costa del Pacífico de Asia. Enáreas de simpatría con el águila de cola blanca, la competenciaventaja con respecto a los dos sitios de anidación y la presa ha sidodocumentado para águila marina de Steller (Masterov, 1992). Ya sea queo no de exclusión competitiva por las águilas marinas de Steller tenía unaimpacto en la supervivencia y la distribución de la cola blancaáguila durante la época glacial no se conoce.El refugio occidental podría haber sido localizado en el oeste deEuropa, posiblemente a lo largo de la costa atlántica. Un refugio glacialen algún lugar de esa región se ha postulado para muchosespecies, por ejemplo las aves costeras (gaviotas y patos eider;Tiedemann et al, 2004;. Liebers et al, 2004), varios peces.(Por ejemplo, Volckaert et al., 2002) y un alga (Provan et al.,2005). Compatible con esto, el águila de cola blanca se hainformó que el ave rapaz diurna más abundante en elRegistro fósil del Pleistoceno de la Península Ibérica (Sa'nchez-Marco, de 2004; Sa'nchez-Marco Antonio, comunicación personal).Un refugio glacial en Iberia se ha postulado para la

águila imperial española (Aquila adalberti, CL Brehm, 1861Ferrer y Negro, 2004).La ubicación del refugio oriental podría ser la regiónen todo el Aralo y el Mar Caspio y la cuenca del Mar Negro. Los niveles del agua deel Caspio y el Mar Negro durante el último máximo glacial(LGM) fueron considerablemente mayores que en la actualidad(Grosswald & Hughes, 2002), lo que implica una mayor superficie ycosta por lo tanto más tiempo. La región tiene un alto grado deendemismo (Dumont, 1998) y se ha propuesto como glaciaresrefugio para muchas otras especies vinculadas a los hábitats acuáticos, porpeces ejemplo (Bernatchez, 2001; Kotlik et al, 2004.), crustáceos(Audzijonyte et al., 2005) y gaviotas (Liebers et al.2004).Las funciones del sistema fluvial del Danubio y el Mediterráneocosta como refugios glaciales posible que el águila de cola blancasiguen sin estar claros. Estas alternativas son difíciles de evaluardebido a que muchas poblaciones históricas se han extinguido en España,Italia y Francia, o recientemente ha sufrido una disminución dramáticaen Grecia, Albania, Serbia, Croacia y Rumanía (Helander yStjernberg, 2003).La supervivencia de las águilas de cola blanca en estos refugios es muysimilar al escenario propuesto por Liebers et al. (2004) para elarenque complejo gaviota, un grupo taxonómico se asemeja a laáguila de cola blanca en muchas características ecológicas en cuanto a sula elección del hábitat predominante y los requisitos de forrajeo. Tambiénpara el complejo de gaviota argéntea, el ADNmt indica la supervivencia Edad de Hieloen Europa occidental y un refugio de Eurasia central(Liebers et al., 2004). Esta congruencia de filogeográficospatrones entre las diferentes especies con necesidades similaresapoya la importancia de los factores ecológicos en la conformación devariación de ADNmt actual.Demografía: población a cabo la ampliación de larefugiosEl registro fósil indica que el águila de cola blanca es unacolonizador temprano postglacial de las regiones del norte. Restos óseos(9000 14C años AP) se han recuperado desde el sur de Suecia(Ericson y Tyrberg, 2004) y de cerca de Stavanger, Noruega(7000-8000 años AP; Mangerud J, de la Universidad de Bergen, Noruega,comunicación personal). De acuerdo con esto, los resultadosa partir del análisis de distribución de desajuste para el clado oriental(B) indica una expansión repentina de la población de la región orientalrefugio en o después de las últimas etapas del Pleistoceno(<30.000 años AP; estimación media con la calibración de la tasa porWenink et al, 1996:. 9.311 años AP). Este crecimiento demográficopuede haber sido provocada por retroceso de los glaciares y el climael calentamiento después de la UGM (pb año 20-15,000;. Svendsen et al,2004). Después de la UGM, el calentamiento climático provocado un aumentodisponibilidad de los paisajes costeros. Amplia nueva propiciohábitats apareció en agua de deshielo de los glaciares en retrocesoríos acumulada, y una abundancia de lagos represados de hielo,y otros sistemas de agua existió desde el Mar Caspio haciala región del Báltico (Mangerud et al, 2004;. véase también la Fig. 1.).La demografía del clado occidental águila de cola blanca es unadifícil deducir de nuestros datos. Si bien es posible que estagrupo no se expandió tan acentuada como la del grupo oriental B, o

que se expandió más tarde, una tercera opción también es concebible.Durante los últimos 150 años, las águilas de cola blanca han desaparecidode vastas zonas de su área de distribución histórica en el sury Europa occidental (Helander y Stjernberg, 2003). Especialmentesi estas regiones albergaban poblaciones refugial, la pérdida dediversidad durante los últimos siglos puede haber influido en nuestraresultados (véase Leonard et al., 2005). De este modo puede subestimarel clado original A la diversidad y perder las señales de un postglacialpoblación de expansión.Nuestros resultados indican que Islandia y Groenlandiacolonizados por las águilas de cola blanca del norte o del oesteEuropa, posiblemente a través de las islas Feroe. Dos haplotipos sese encuentran en Islandia y Groenlandia, a saber, A01 y A03(Tabla 1). A01 es el presunto haplotipo refugial occidental,mientras que A03 es una forma derivada limita actualmente a Islandia yGroenlandia y que probablemente surgió durante gama postglacialexpansión. Una historia de colonización similar ha sido documentadopara muchos taxones otro animal ya está presente en Groenlandia y /o Islandia (Sadler, 1999; Tiedemann et al, 2004;. Mun ~ oz-Fuentes et al., 2006), es decir, un lugar predominante paleárticade origen neártico.Las respuestas al cambio climático demográficos anterioresha propuesto a variar en el tiempo y la intensidad en los diferenteslatitudes (Hewitt, 2000; Lessa et al, 2003.). En el vientre blancoáguila de mar (Haliaeetus leucogaster, Gmelin, 1788), que esdistribuyen principalmente en las regiones tropicales y subtropicales (Indiapor el sudeste de Asia a Australia), una población importanteexpansión fue de fecha que se ha producido alrededor de 160.000 pares de basesaños(Shepard et al, 2005;. analizando también el control del ADNmtregión). Los autores relacionados con esta expansión a un período debajó el nivel del mar, permitiendo la colonización de nuevos hábitats.

la diversidad actual de la población a nivelPor varias poblaciones europeas de águila de cola blanca,los niveles de la diversidad del ADNmt son relativamente altos, lo que refleja lamezcla de secuencias de clados divergentes. Sin embargo, elconstatación de la variación de ADN mitocondrial de alta en las poblaciones del norte queregiones habitadas cubierta por glaciares durante el LGM esdigno de mención. Confirmado por todas las medidas de la diversidad, la más altavariabilidad fue encontrada en las poblaciones que rodean el Mar BálticoMar (Cuadro 2), y no en las regiones que fueron sin glaciación durantela UGM. Varios factores pueden explicar este patrón de altala diversidad genética en las poblaciones del norte. En primer lugar, un programa de erradicaciónde la diversidad en el sur podría haber ocurrido. Sin embargo, elespecie tiene un tiempo de generación largo y se ha demostrado que serelativamente resistentes contra la pérdida de diversidad genética, por lo menosdentro de la perspectiva de tiempo de unas pocas décadas (Hailer et al.2006). En segundo lugar, la expansión de la población podría haber ocurridoprincipalmente en el norte. La mayoría de los haplotipos son separados de cualquierA01 o B01 por pasos sólo una o dos mutaciones. Nuestra data dela expansión de la población de B clado indica que la edad deestos haplotipos derivados es posterior a la UGM y por lo tanto los puntos

hacia un origen en las poblaciones postglacially expansión.Después de retroceso de los glaciares, las masas de agua que surgen en granproglacial regiones del norte de Europa (véase más arriba) podría haberconstituido hábitats altamente productivos que permitan la colonización tempranay la expansión de la población se pronuncia. En resumen,se propone un escenario de supervivencia Edad de hielo en las regiones sur,seguido de una rápida colonización postglacial de los hábitats del norte,expansión de la población mayor, y la generación de un granproporción de la reserva genética actual ADN mitocondrial de las especies.A escala regional, a pesar de claras general filogeográficosestructuración de la diversidad del ADNmt (Fig. 3, Tabla 4), algunospatrones observados se desvían de la imagen a gran escala. Comparandolas poblaciones vecinas de Noruega y Kolapenínsula, patrones muy diferentes de la diversidad genética sonobservó. Mientras que la población noruega es en gran medida fijado parahaplotipo A01, una variedad de diferentes haplotipos fueron encontrados enKola (Tabla 1). Esta diferencia entre las poblaciones vecinases un indicador del flujo de genes de baja y destaca laimportancia de la historia de la población local para la genética actualvariabilidad. Debido a que la población noruega ha sido lamás grande en Europa durante el siglo pasado, este patrón no es elresultado de una reciente disminución (Hailer et al., 2006).

Conservación de las consecuenciasADNmt águila de cola blanca sugiere la ausencia de las poblacionesque debe ser definido como unidades evolutivas significativas (UES;ver Moritz, 1994). Los dos linajes principales (A y B) tienen unamplia zona de mezcla y por lo tanto en gran medida simpátricas hoy,al menos en Europa. Sin embargo, el rango de distribución actual yla historia reciente de algunas poblaciones indican que deben serconsiderarse en gran medida aislada unidades reproductoras.Para Groenlandia, algunos autores han propuesto una por separadosubespecies (groenlandicus H. albicilla, ver Glutz von Blotzheimet al., 1971). El registro fósil indica que el águila de cola blanca colonizó Groenlandia durante el Holoceno. Salomonsen(1979) sugirió que esto podría haber sido durante elintervalo de hypsithermal, entre 6000 y 4000 años AP. Teniendo en cuentala ausencia de los haplotipos bien diferenciado de Groenlandia,y el probable origen postglacial de haplotipo A03, nuestros datos soncompatible con esta colonización reciente. Sin embargo, dada lafalta de monofilia recíproca, nuestros datos no se prestan fuerteapoyo a la distinción subespecies. ADNmt estructuración ydistinciones subespecies normalmente no coinciden para la gripe aviartaxones (Zink, 2004), lo que sugiere que las funciones ecológicas y / o morfológicasdistinción puede ser alcanzado más rápidamente que el ADNmtclasificación de linaje (Bulgin et al., 2003). Como se destaca porCrandall et al. (2000), UDE también debe definirse en elbase de las características ecológicas. Una serie de morfológicamediciones (longitud por ejemplo, factura, la longitud del ala y el tamaño del huevo) sonsabe para variar a lo largo de una clina de noroeste a surestea lo largo de Eurasia, lo que llevó Glutz von Blotzheim et al.(1971) para refutar el estado de las águilas de cola blanca de

Sin embargo, como Salomonsen (1979) señala, las mediciones del esqueleto

de H. a. groenlandicus y H. a. albicilla nosuperponen, posiblemente apoyar la distinción subespecies. Labaja diversidad del ADNmt en Groenlandia e Islandia, y elcaso único de haplotipo A03 sugieren que estospoblaciones han sido aislados de los demás de cola blancalas poblaciones de águila, y es posible que hoy también estar aislado deentre sí. Estas poblaciones pequeñas y aisladas merecen especialla atención y la alta prioridad de conservación.

AGRADECIMIENTOSToma de muestras de sangre fue coordinado por la Sociedad Sueca para laConservación de la Naturaleza / Eagle Proyecto del Mar. Damos las gracias a ToddKatzner, Evgeny Bragin, Marten Andreas y Sascha SNER Ro ¨para contribuir muestras, y Kurt Elmqvist, Robert Franze'n,Stefansson Robert, Johannsson Finnur, Gunnarsson Hallgrimury Menja von Schmalensee de asistencia con latoma de muestras de sangre. Martin Jakobsson hizo el mapa, yJ. Andrew DeWoody amablemente nos permitió utilizar su laboratoriopara algunos análisis. Estamos muy agradecidos con Jennifer Leonard, ØysteinFlagstad, Mangerud Jan, Violeta Mun ~ oz, Katzner Todd, U · loVa · lí, Dale'n Amor y Seddon Jennifer para el debate profundoy / o comentarios sobre el manuscrito. Hans Ellegren se agradecepara los debates y el apoyo logístico y económico. Este trabajofue apoyado financieramente por la Fundación de Alvin, el Sven yLilli Lawski fundación y el Knut y Alice Wallenbergbase (a F.H.). AGRADECIMIENTOSToma de muestras de sangre fue coordinado por la Sociedad Sueca para laConservación de la Naturaleza / Eagle Proyecto del Mar. Damos las gracias a ToddKatzner, Evgeny Bragin, Marten Andreas y Sascha SNER Ro ¨para contribuir muestras, y Kurt Elmqvist, Robert Franze'n,Stefansson Robert, Johannsson Finnur, Gunnarsson Hallgrimury Menja von Schmalensee de asistencia con latoma de muestras de sangre. Martin Jakobsson hizo el mapa, yJ. Andrew DeWoody amablemente nos permitió utilizar su laboratoriopara algunos análisis. Estamos muy agradecidos con Jennifer Leonard, ØysteinFlagstad, Mangerud Jan, Violeta Mun ~ oz, Katzner Todd, U · loVa · lí, Dale'n Amor y Seddon Jennifer para el debate profundoy / o comentarios sobre el manuscrito. Hans Ellegren se agradecepara los debates y el apoyo logístico y económico. Este trabajofue apoyado financieramente por la Fundación de Alvin, el Sven yLilli Lawski fundación y el Knut y Alice Wallenbergbase (a F.H.).