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    Tendencias de Investigacin enBiotecnologa y Ciencias Agropecuarias

    Dr. Alejandro Hernndez Morales

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    Tendencias de Investigacin enBiotecnologa y Ciencias Agropecuarias

    Dr. Alejandro Hernndez MoralesCoordinador y Editor

    Mxico 2015

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    DIRECTORIO

    Arq. Manuel Fermn Villar RubioRector de la Universidad Autnoma de San Luis Potos

    L.E. David Vega Nio

    Secretario General de la UASLP

    Mtro. Roberto Llamas LamasDirector de la Unidad Acadmica Multidisciplinaria Zona Huasteca

    Mtro. Pablo Martnez GonzlezSecretario General de la Unidad Acadmica Multidisciplinaria Zona Huasteca

    Dr. Alejandro Hernndez MoralesCoordinador y Editor

    Tendencias de Investigacin en Biotecnologa y Ciencias Agropecuarias

    Todos los derechos reservados a

    Universidad Autnoma de San Luis Potos, Agosto 2015.

    Prohibida la reproduccin total o parcial de esta obra, por cualquier medio o mtodo sin la autorizacinpor escrito del editor.

    ISBN 978-607-9453-08-4

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    Todos los captulos de este libro fueron sometidos a un proceso de revisin ciega por un comitconstituido por acadmicos e investigadores de diferentes instituciones de Educacin Superior.

    COMIT EVALUADOR

    Dra. Jackeline Lizzeta Arvizu GmezSNI CandidatoSecretaria de Investigacin y PosgradoUniversidad Autnoma de Nayarit

    Dra. Roco Velzquez RobledoSNI CandidatoSinQumica S.A. de C.V.

    Dr. Angel Josabad Alonso CastroSNI IFacultad de QumicaUniversidad de Guanajuato

    Dr. Ren Loredo PortalesFacultad de QumicaUniversidad de Guanajuato

    Dr. Juan Ramiro Pacheco AguilarSNI IFacultad de QumicaUniversidad Autnoma de Quertaro

    Dr. Christian Michel CuelloSNI CandidatoUnidad Acadmica Multidisciplinaria Zona MediaUniversidad Autnoma de San Luis Potos

    Dr. Enrique Maldonado CervantesUnidad Acadmica Multidisciplinaria Zona MediaUniversidad Autnoma de San Luis Potos

    Dra. Candy Carranza lvarezSNI IUnidad Acadmica Multidisciplinaria Zona HuastecaUniversidad Autnoma de San Luis Potos

    Dr. Alejandro Hernndez MoralesSNI CandidatoUnidad Acadmica Multidisciplinaria Zona HuastecaUniversidad Autnoma de San Luis Potos

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    IV

    TENDENCIAS DE INVESTIGACIN EBIOTECNOLOGA Y CIENCIAS

    AGROPECUARIAS

    PREFACIOEn los ltimos aos, ha incrementado el nmero de investigadores en el rea de Biotecnologa,

    quienes buscan soluciones para resolver los principales problemas que afectan el desarrollo del

    pas. La investigacin biotecnolgica busca comprender los aspectos fundamentales de lossistemas biolgicos, las aplicaciones y beneficios para el desarrollo de la sociedad. Los estudios

    se enfocan, entre otros, a disminuir los efectos deletreos de las actividades antropognicas en

    el ambiente, mediante estrategias de vanguardia para disminuir la presencia de xenobiticos,

    para la restauracin de suelos contaminados y la conservacin de especies. Se realizan

    esfuerzos para una agricultura sustentable, aportando herramientas biolgicas en el control de

    enfermedades y plagas, as como incrementar la produccin agrcola. En el rea alimentaria

    contribuye al desarrollo de tecnologas y de procesos alimentarios para la obtencin de

    alimentos funcionales con miras a mejorar la calidad de vida de la poblacin.

    En esta obra se presentan trabajos realizados por estudiantes e Investigadores

    pertenecientes a diversas Instituciones de Educacin Superior y Centros de Investigacin. Cada

    trabajo fue sometido a revisin ciega por pares acadmicos, expertos reconocidos en diversas

    reas de la Biotecnologa. La obra consta de 21 captulos donde se muestran las Tendencias

    de Investigacin en Biotecnologa y Ciencias Agropecuarias.

    Reyes-Mungua et al., utilizaron biopolmeros para encapsular la pulpa de mamey(Mammea americanaL.), de las cuales evaluaron la estabilidad y la capacidad antioxidante.

    Alonso-Santoset al.,evaluaron el crecimiento de Fischerellasp. en ausencia de nitrgeno y

    carbonatos. Castillo-Olvera et al., estudiaron las propiedades antimicrobianas de plantas

    medicinales de la Huasteca Potosina. Castillo-Prezet al., realizaron la micropropagacin de

    Laelia ancepssubsp. anceps., una orqudea en riesgo de extincin en la Huasteca Potosina.

    Cesa-Lunaet al., obtuvieron un extracto crudo de Sphingomonassp. DS-204 el cual muestra

    efecto inhibitorio contra Streptococcus hemoliticos. Delgado-Virgen et al., aislaron y

    caracterizaron a nivel bioqumico y molecular, bacterias de la caa de azcar Saccharumspp.

    cultivada en el trpico seco de Mxico. Galvn-Lpezet al., realizaron la microencapsulacin

    de compuestos activos de cscara y semilla de mamey (M. americana L.). Gmez-Lunaet al.,

    determinaron el efecto antagnico de rizobacterias aisladas de huertos de Guayaba. Gutirrez-

    Torreset al., elaboraron un alimento funcional utilizando extractos de plantas con potencial

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    V

    TENDENCIAS DE INVESTIGACIN EBIOTECNOLOGA Y CIENCIAS

    AGROPECUARIAS

    antioxidante. Guzmn-Ceferino et al., obtuvieron un complejo proteico con capacidad

    antioxidante y antimicrobiana a partir de las hojas de Solanum marginatum. Meza-Jimnezet

    al., evaluaron una tecnologa no trmica en la actividad enzimtica de la papana. Lpez-Pablos

    et al., realizaron un estudio de aplicacin tecnolgica para la deshidratacin de sistemas ricos

    en azcares. Lucas-Gmezet al., realizaron el estudio docking de metabolitos bioactivos de

    MatricariachamomillaL. Maldonado-Cervanteset al., presentaron el anlisis fosfoprotenico

    de semillas de amaranto. Martnez-Castillo et al., utilizaron el muclago de nopal para

    encapsular un extracto de Rhoeo discolor. Martnez-Romero et al., evaluaron el efecto

    antagnico de Trichoderma sp. contra hongos fitopatgenos. Martnez-Negrete et al.,

    determinaron la influencia de la cinetina y el cido nafalenactico sobre el crecimiento y

    produccin de fenoles en Padina durvillaei. Mata-Garca y Vzquez-Briones reportan la

    caracterizacin fisicoqumica y evaluacin sensorial de yogur preparado con tres variedades demango. Nieto-Chaires et al., presentan las caractersticas fsicas, culinarias y actividad

    antiradical de tres variedades de frijol de la Huasteca Potosina. Sols-Medinaet al., aislaron y

    caracterizaron rizobacterias de Saccharum officinarumcultivada en la Huasteca Potosina. Soto-

    Guerreroet al., realizaron la caracterizacin de la inulina con diferente grado de polimerizacin.

    Todos los trabajos descritos reflejan la investigacin de vanguardia realizada por investigadores

    comprometidas con la formacin de recursos humanos de calidad.

    Finamente, quiero expresar mi agradecimiento a los revisores por las sugerencias quepermitieron incrementar la calidad de los trabajos aqu presentados; a los autores por la

    disposicin para mejorar sus contribuciones y a todos los colegas que contribuyeron en la

    edicin de cada captulo. Mi gratitud a la Universidad Autnoma de San Luis Potos por el apoyo

    otorgado para publicar esta obra.

    Dr. Alejandro Hernndez-MoralesProfesor-Investigador

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    AGROPECUARIAS

    NDICE

    PREFACIO ............................................................................................................................... IV

    Caracterizacin y microencapsulacin de compuestos activos presentes en pulpa de

    mamey (Mammea americana L.) mediante secado por aspersin ...................................... 1Abigail Reyes-MunguaYolanda Karina Acosta-OlveraDiana Jaqueline Pimentel-Gonzlez

    Crecimiento de Fischerella sp. (Stigonematales: Cyanobacteria) en ausencia de nitrgenoy carbonatos ............................................................................................................................ 8Esmeralda Alonso-Santos

    Ma. Nieves Trujillo-Tapia

    Eustacio Ramrez-Fuentes

    Actividad Antimicrobiana de Plantas Medicinales ............................................................. 18Guillermo Castillo-Olvera

    Mara Luisa Carrillo-Inungaray

    Diana Zavala-Cuevas

    Micropropagacin de Laelia ancepssubsp. anceps Lindl. (Orchidaceae) ....................... 24Luis Jess Castillo-PrezCandy Carranza-lvarezAlejandro Hernndez-MoralesDiego Manuel Hernndez-Benavides

    Evaluacin de una Sustancia Inhibitoria presente en un extracto obtenido a partir deSphingomonas sp. DS-204 frente a cepas de Streptococcus -hemolticos ................... 31Catherine Cesa-Luna

    Alberto Aguayo-Acosta

    Ivonne Hernndez-Luna

    Araceli Ramrez-Valverde

    Celia Aragn-Hernndez

    Jhyovani Zaird Lpez-Villa

    Roco Prez-y-Terrn

    Jess Muoz-Rojas

    Caracterizacin bioqumica y molecular de bacterias aisladas de caa de azcar(Saccharum spp.) del trpico seco de Mxico .................................................................... 37Francisco Javier Delgado-Virgen

    Irving Ivn Rodrguez-Rodrguez

    Manuel de Jess Bermdez-Guzmn

    Mario Orozco-Santos

    Jos Joaqun Velzquez-Monreal

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    Evaluacin de una Sustancia Inhibitoria presente en unextracto obtenido a partir de Sphingomonas sp. DS-204

    frente a cepas de Streptococcus -hemolticos

    Catherine Cesa-Lunaa, Alberto Aguayo-Acostaa, Ivonne Hernndez-Lunaa, Araceli Ramrez-Valverdec,Celia Aragn-Hernndezc, Jhyovani Zaird Lpez-Villad, Roco Prez-y-Terrne, Jess Muoz-Rojasa.

    a Centro de Investigaciones en Ciencias Microbiolgicas (CICM), Benemrita Universidad Autnoma de Puebla.b Facultad de Ciencias Qumicas, Benemrita Universidad Autnoma de Puebla.

    c Laboratorio de Anlisis Clnicos del ISSSTEP, Av. Venustiano Carranza 810 Col. San Baltazar Campeche72550, Puebla, Pue.

    d BioCare Centro Mdico Integral, S.C. Xalapa, Ver.e Escuela de Biologa, Benemrita Universidad Autnoma de Puebla.

    Resumen

    En la actualidad solo se conoce el 1% de la diversidad bacteriana del planeta, cuya distribucin depende tantode las condiciones ambientales, como de la interaccin con otros microorganismos, con los cuales se establecenrelaciones de cooperacin o competencia. Se ha observado que esas formas de competencia ocurren gracias ala produccin de algunos compuestos que inhiben el crecimiento de otros microorganismos del mismo hbitat.El estudio de estos compuestos es de gran importancia debido a que podran ser una alternativa paracontrarrestar elcrecimiento y propagacin de bacterias patgenas, incluso de aquellas multirresistentes aantibiticos convencionales.En este trabajo se evalu el efecto inhibitorio de un extracto crudo de Sphingomonas sp. DS-204contra aisladosclnicos multirresistentes de Streptococcus -hemolticos.Los resultados obtenidos muestran que el extractocrudo de Sphingomonas sp. DS-204 inhibe el crecimiento de Streptococcus -hemolticos, sugiriendo queSphingomonas sp. DS-204 produce una sustancia inhibitoria que podra ser una alternativa como antimicrobiano.

    Abstract

    Currently we know only 1% of the bacterial diversity of the planet, whose distribution depends on environmentalconditions, such as interaction with other organisms, including relationships of cooperation or competition. It hasbeen observed that such forms of competition are occurring through the production of some chemical compoundsthat inhibit the growth of other microorganisms in the same habitat. The study of these compounds is of greatimportance because they could be an alternative to counteract the growth and spread of pathogenic bacteria,including those multi-resistant to conventional antibiotics.At the present work, the inhibitory effect of a crude extract of Sphingomonassp. DS-204 was evaluated againstmulti-resistant clinical isolates of -hemolytic Streptococcus. The results show that crude extract ofSphingomonassp. DS-204 inhibits the growth of -hemolytic Streptococcus, suggesting that Sphingomonassp.DS-204 produces an inhibitory substance that could be an alternative as an antimicrobial.

    Palabras clave: antimicrobiano, sustanciainhibitoria,-hemoltico, multirresistente.

    Keywords: antimicrobial, inhibitory substance, -hemolytic, multi-resistant.

    CorrespondenciaDr. JessMuoz RojasLaboratorio de Ecologa Molecular MicrobianaCICM-IC-BUAP. Edif. 103J, C.U., San Manuel,Puebla, Pue. C.P. 72570e-mail:[email protected]

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    AGROPECUARIAS

    Introduccin

    Sphingomonas sp. DS-204 es una bacteria

    Gram-negativa, aerobia estricta, con

    caractersticas quimiohetertrofas, capaz de

    crecer en presencia de txicos orgnicos de tipo

    aromtico y policlorados, por ejemplo el lindano.

    Esta bacteriana sido ampliamente estudiada

    para propsitos de biorremediacin [1], se

    encuentra ampliamente distribuida tanto en

    hbitats terrestres como en acuticos y no se

    considera patgena para el humano.

    Sphingomonas sp. DS-204 coloniza maz siendo

    altamente competitiva debido a la produccin de

    una sustancia inhibitoria [2] que antagoniza a

    diversos microorganismos; como bacterias y

    hongos fitopatgenos [3]. Los primeros estudios

    de antagonismo revelaron su capacidad para

    inhibir a 120 cepas bacterianas de 18 gneros

    [4]; y de manera independiente se ha

    demostrado que inhibe cepas patgenas de

    humanos como Staphylococcus aureus,incluyendo cepas multirresistentes;

    Staphylococcus epidermidis, Proteus vulgarisy

    Enterococcus faecalis[2].

    Recientemente se logr obtener un extracto

    crudo de la sustancia inhibitoria producida por

    Sphingomonas sp. DS-204, mediante la

    metodologa de lixiviacin en fro (Muoz-Rojas,

    comunicacin personal).Hasta el momento no se han reportado

    sustancias inhibitorias producidas por

    Sphingomonas sp. DS-204 por lo que resulta

    novedoso su estudio; adems se ha observado

    que los compuestos antimicrobianos producidos

    por cepas no patgenas, no presentan toxicidad

    para el humano.

    En lo que respecta a las cepas de Streptococcus

    -hemolticos, se ha considerado su estudio porser patgenos de humanos; ejemplo de ellos

    son: S. pyogenes, principal causante de

    faringoamigdalitis y S. agalactiae, causante de

    neumona y meningitis en neonatos.

    En este trabajo se observ que la mayora de las

    cepas de Streptococcus -hemolticos

    exploradas fueron multirresistentes en las

    pruebas de susceptibilidad antimicrobiana ytodas las cepas fueron sometidas a la actividad

    inhibitoria que ejerce un extracto crudo de

    Sphingomonas sp.DS-204.

    Metodologa

    Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana.

    Se inocularon 5 ml de medio LB suave (agar

    8g/L) con 50 l de un pre-inculo deStreptococcus -hemoltico a analizar, y fueron

    vertidos en placas de medio LB slido. Una vez

    inoculadas las placas se colocaron multidiscos

    combinados con 12 antimicrobianos (Figura 1).

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    Figura 1. Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana.

    Despus de 15 minutos de haber colocado los

    multidiscos se invirtieron las placas y se

    incubaron durante 18 horas a 30 C para medir

    los halos de inhibicin con ayuda de un vernier

    (datos no mostrados).

    Obtencin del extracto crudo de los

    metabolitos producidos por Sphingomonas

    sp. DS-204.

    ste mtodo se desarroll en dos fases, en la

    primera se dej crecer a la bacteria productora

    en membranas de nitrocelulosa estriles de

    0.22m que a su vez estuvieron colocadas sobre

    cajas Petri con 10ml de medio LB slido, cada

    una. Despus de 60 horas de incubacin la

    membrana se retir y el agar donde se deposit

    la sustancia inhibitoria se coloc en tubos Falcon

    con 10ml de etanol absoluto estril fro. Se dej

    reposar durante 48 horas a 4 C para lograr la

    extraccin y posteriormente se centrifug

    durante 12 minutos a 5000 rpm, para separar el

    sobrenadante en un tubo nuevo (Figura 2).

    Figura 2. Metodologa de Lixiviacin en Fro.

    Asimismo se obtuvieron extractos controles,

    donde no hubo crecimiento de Sphingomonas

    sp. DS-204.Los extractos separados fueron

    concentrados con ayuda de un rotavapor y

    esterilizados con filtros millex de 0.22 m; para

    evaluar la presencia o ausencia de la sustancia

    inhibitoria, se colocaronen placas de medio LB

    slido y se agreg una segunda capa de agar

    gelificado suave (8 g/L) inoculado con una cepa

    control sensible (4Mepi7); se dej incubar y se

    observ la presencia o ausencia de un halo de

    inhibicin (Figura 3).

    A B

    Figura 3. A) Control positivo del extracto con lasustancia inhibitoria, obtenido por el mtodo delixiviacin. B) Control negativo.

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    Evaluacin del extracto crudo frente a cepas

    de Streptococcus-hemolticos.

    Se dejaron crecer 14 cepas de Streptococcus-

    hemolticos en medio LB lquido durante 24

    horas a 30 C. Una vez transcurrido ese tiempo,se depositaron 50 l de los extractos obtenidos

    por el mtodo de lixiviacin en fro (control y

    extracto con sustancia inhibitoria) en placas de

    medio LB slido.

    Se dejaron secar las placas y posteriormente se

    vertieron 2 ml de medio LB suave (agar 8g/L)

    inoculado con 50 l de la cepa a analizar comoposible sensible. Las placas se incubaron

    durante 24 horas a 30 C para evaluar la

    presencia o ausencia de halos de inhibicin.

    Resultados

    De acuerdo con las pruebas de susceptibilidad

    antimicrobiana, 8 de 14cepas de Streptococcus

    -hemolticos utilizadas en este trabajo fueronmultirresistentes (Tabla 1).Una vez corroborado

    que el extracto crudo contena a la sustancia

    inhibitoria producida por Sphingomonas sp. DS-

    204, con la ayuda de una cepa control, se

    procedi a evaluar el extracto contra cepas de

    Streptococcus-hemolticos.

    Tabla1.Comparacin de la resistencia antimicrobianade cepas de Streptococcus -hemolticos, con susensibilidad a un extracto crudo de Sphingomonassp. DS-204.

    E: eritromicina; AM: ampicilina; PE: penicilina; DC:

    dicloxacilina; AK:amikacina; GE:gentamicina; ENX:

    enoxacilina; MDR: multidrogorresistente.

    A las 24 horas de incubacin, se observ que la

    mayora de las placas ya presentaban halos de

    inhibicin (Figura 4), por lo que se procedi a

    medir su dimetro.

    Cepa Resistencia Inhibicin delextracto

    crudo (mm)

    Observaciones

    S. agalactiae 31 E, AM,PE, DC 20.33 0.58

    MDR y sensibleal extractocrudo

    S. agalactiae 29 PE, DC,AK,GE

    11.33 0.58 MDR y sensibleal extractocrudo

    S. agalactiae 20 ENX, PE,DC, AK, GE

    7 0.00 MDR y sensibleal extractocrudo

    S. agalactiae 21 ENX, PE,DC, AK, GE

    11.67 0.58 MDR y sensibleal extractocrudo

    S. agalactiae 34 ENX, PE,DC, AK, GE

    7 0.00 MDR y sensibleal extractocrudo

    S. agalactiae 33 ENX, PE,DC

    6.67 1.15 MDR y sensibleal extractocrudo

    S. agalactiae 14 ENX, PE,DC

    8.33 1.15 MDR y sensibleal extractocrudo

    S. agalactiae 32 AM, PE, DC,AK, GE

    7 0.00 MDR y sensibleal extractocrudo

    S. agalactiae 25 AM, PE, DC 0 0.00 No MDR yresistente aextracto crudo

    S. agalactiae 27 AM, PE, DC 0 0.00 No MDR yresistente aextracto crudo

    S. pyogenes 10 PE, DC 10 1.73 No MDR ysensible aextracto crudo

    S. pyogenes 9 PE, DC 0 0.00 No MDR yresistente aextracto crudo

    S. pyogenes 17 AM, PE, DC 0 0.00 No MDR yresistente aextracto crudo

    S. pyogenes 14 AM, PE, DC 0 0.00 No MDR yresistente aextracto crudo

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    AGROPECUARIAS

    Figura 4. Halos de inhibicin obtenidos al evaluar elextracto frente a cepas de Streptococcus -hemolticos.

    De las 14 cepas de Streptococcus-hemolticos

    analizadas, 9fueron sensibles a la actividad del

    extracto crudo obtenido de Sphingomonas sp.

    DS-204 (Tabla 1, Grfica 1).

    Grfica 1. Dimetro de los halos de inhibicin

    obtenidos al evaluar el extracto crudo frente a cepasde Streptococcus -hemolticos.

    Discusin

    En la actualidad algunos patgenos se han ido

    tornando multirresistentes a los antimicrobianos

    convencionales, como es el caso de

    Staphylococcus aureus meticilino resistente(SAMR), uno de los principales patgenos

    causante de infecciones nosocomiales [5]. El

    surgimiento y diseminacin de cepas cada vez

    ms virulentas y multirresistentes hace

    necesaria la bsqueda de alternativas para

    contrarrestarlas, como puede ser el uso de

    bacterias productoras de sustancias inhibitorias.

    De acuerdo con estudios anteriores, se hademostrado que algunas bacterias son capaces

    de producir sustancias que inhiben el desarrollo

    de patgenos; ejemplo de ellas es Lactococcus

    lactis, la cual produce una bacteriocina que

    inhibe a una gran variedad de organismos,

    incluyendo gneros como Clostridium, Bacillus,

    Enterococcus, Gardnerella, Listeria,

    Streptococcus y Staphylococcus [6]. En estesentido nuestros resultados confirman que el

    extracto crudo obtenido por el mtodo de

    lixiviacin en fro, contiene una sustancia

    inhibitoria producida por Sphingomonas sp. DS-

    204, que resulta muy efectiva para antagonizar

    cepas de Streptococcus-hemolticos.

    ConclusionesLa mayora de las cepas de Streptococcus -

    hemolticos analizadas en este trabajo fueron

    multirresistentes a las pruebas de

    susceptibilidad antimicrobiana; adems se

    0.00

    5.00

    10.00

    15.00

    20.00

    25.00

    MILMETR

    OS

    CEPAS EXPLORADAS

    Halos de inhibicin

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    AGROPECUARIAS

    observ que las 8 cepas multirresistentes fueron

    sensibles a la actividad del extracto crudo,

    desde 50 l de extracto utilizado. Por otra parte,

    de los 14 aislados evaluados 5 fueron

    resistentes al extracto crudo y no mostraronmultirresistencia en las pruebas de

    susceptibilidad antimicrobiana.

    Por lo que se propone que la sustancia

    inhibitoria producida por Sphingomonas sp. DS-

    204 podra ser una alternativa de antimicrobiano

    en el futuro para combatir a cepas

    multirresistentes del gnero Streptococcus.

    Debido a que no se conoce la composicin de lasustancia inhibitoria producida por

    Sphingomonas sp. DS-204, resulta novedoso

    seguir con los estudios para su caracterizacin.

    Agradecimientos

    A los organismos de financiamiento CONACYT

    (000000000156576), DITCo2014-09 y VIEP

    NAT14-I, por el apoyo otorgado para realizar lainvestigacin.

    Referencias

    1. Bltner D, Godoy P, Muoz-Rojas J,

    Duque E, Moreno-Morillas S, Snchez L,

    Ramos JL. Rhizoremediation of lindane

    by root-colinizing Sphingomonas.

    Microbial Biotechnology 1:1: 87-93,2008.

    2. Aguilera-Mndez N. Bsqueda de

    sustancias inhibitorias en Sphingomonas

    sp. Laboratorio de Microbiologa del

    Suelo, Centro de Investigaciones en

    Ciencias Microbiolgicas-IC-BUAP.

    Puebla, Pue. 45-49, 2009.

    3. Vera-Gaona R, Alatorre-Cruz JM,

    Aguayo-Acosta A, Rodrguez-AndradeO, Netzahuatl-Muoz AR, Jurez-

    Hernndez D, Prez-y-Terrn R, Muoz-

    Rojas J. Bacterias antagonistas como

    alternativa de control biolgico de

    patgenos en plantas de inters agrcola.

    Centro de Investigaciones en Ciencias

    Microbiolgicas-IC-BUAP. 1-5, 2012.

    4. Morales-Garca YE, Aguilera-Mndez N,Ramrez-Valverde A, Fuentes-Ramrez

    LE, Ramos JL, Muoz-Rojas

    J.InhibitorysubstancesproducedbySphin

    gomonas sp.As strategy of competition,

    Book of Abstracts BIOTEC2008, 4th

    International meeting on biotechnology,

    towards a sustainable bioeconomy.

    Granada, Espaa. 177, 2008.5. Velazquez-Meza ME. Surgimiento y

    diseminacin de Staphylococcus aureus

    meticilinor resistente. Salud Pblica Mex.

    47:381-387, 2005.

    6. Riley MA, Wertz JE. Bacteriocins:

    Evolution, Ecology and Application.

    Annu. Rev. Microbiol. 56:117-37, 2002.

  • 7/26/2019 Evaluacin de una sustancia inhibitoria presente en un extracto obtenido a partir de Sphingomonas sp. DS-204 fre

    14/14

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    ISBN 978-607-9453-08-4

    TENDENCIAS DE INVESTIGACI N ENBIOTECNOLOGA Y CIENCIAS

    AGROPECUARIAS

    Caracterizacin bioqumica y molecular de bacteriasaisladas de caa de azcar (Saccharum spp.) del trpico

    seco de Mxico

    Francisco Javier Delgado-Virgena, Irving Ivn Rodrguez-Rodrgueza, Manuel de Jess Bermdez-Guzmnb, Mario Orozco-Santosby Jos Joaqun Velzquez-Monrealb.

    aDepartamento de Ingeniera Qumica y Bioqumica. Instituto Tecnolgico de Colima.bInstituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrcolas y Pecuarias. Campo Experimental Tecomn.

    ResumenEl cultivo de caa de azcar (Saccharum spp. hbridos) es afectado por enfermedades de naturaleza sistmicaasociadas a bacterias y virus, adems de hongos. Dentro de las enfermedades bacterianas ms importantes seencuentra la escaldadura de la hoja (Xanthomonas albilineans) y el raquitismo de los retoos (Leifsonia xyli

    subsp. xyli). El objetivo del trabajo consisti en aislar y caracterizar bioqumica y molecularmente bacteriasprovenientes de los haces vasculares de plantas de caa de azcar, para obtener cepas puras de las bacteriasmencionadas anteriormente e identificar otras bacterias fitopatgenas que la afectan. Se recolectaron un totalde 25 muestras de tallos de plantas de caa de azcar sintomticas provenientes de los estados de Jalisco yColima.A la fecha, se han obtenido 15 aislados con caractersticas morfolgicas y bioqumicas similares a lasbacterias de los gneros Xanthomonas y Corynebacterium, los cuales se identificarn a nivel molecularamplificando regiones de los genes del ADN ribosomal 16S.

    AbstractSugarcane (Saccharum spp. hybrids) is affected by systemic diseases associated to bacteria, virus and molds.Among the most important bacterial diseases is the leaf scald disease (Xanthomonas albilineans) and ratoonstunting (Leifsoniaxyli subsp. xyli). The aim of this work was to isolate and characterize bacteria, bothbiochemically and at the molecular level, from the vascular bundles of symptomatic sugarcane plants, to verifythe presence of these two important phytopathogenic bacteria, as well as other microorganisms in this tissue. Atotal of 25 samples from the states of Jalisco and Colima were analyzed. To this date, 15 isolates withmorphological and biochemical similitudes to Xanthomonas and Corynebacterium have been obtained, and willbe identified at the molecular level by amplifying regions of their 16S rDNA genes.

    Palabras clave: Bacterias, caa de azcar,fitopatgenos vasculares.

    Keywords: Bacteria, sugarcane, vascularphytopathogens.

    CorrespondenciaMC. Manuel de Jess Bermdez GuzmnCampo Experimental Tecomn, Instituto Nacional deInvestigaciones Forestales, Agrcolas y Pecuarias. Km.35 carretera Colima-Manzanillo, CP 79060. Tecomn,Colima, [email protected]