1° CONGRESO ARGENTINO Y LATINOAMERICANO DE

CIRUGÍA HEPATO-PANCREATO-BILIAR

“PREACONDICIONAMIENTO ISQUEMICO HEPATICO PARA LA PREVENCION DEL DAÑO POR LESION ISQUEMIA REPERFUSION Y COMPARACION DE

MODELOS DE CLAMPLEO EN RATAS.”Estudio prospectivo, aleatorizado y pareado.

Dr. Juan Manuel Sanguinetti, Dr. Diego Muguruza, Br. Ma.Eugenia Rodriguez, Br. Diego Maianti,

Dr.Juan D. Fernandez.

Departamento Básico de CirugíaProf. Dr. Gonzalo Fernández Naone.

Facultad de MedicinaUniversidad de la República

Montevideo - Uruguay

INTRODUCCION

LESION POR ISQUEMIA REPERFUSION (LIR) Se produce cuando existe cese del flujo sanguíneo a un tejido

u órgano y luego la reperfusión del mismo.

En la isquemia se produce un estado proinflamatorio y sustancias potencialmente citotóxicas.

Durante la reperfusión se liberan sustancias y citotóxicas y citolíticas a nivel local y sistémico.

En diversos procedimientos el hígado es expuesto a la LIR.

INTRODUCCION

Estrategias para disminuir la LIR:

• Quirúrgicas. • Inmunomoduladores.

• Fármacos. • Terapias génicas.• Terapias basadas en el “Shock térmico”.

INTRODUCCION• PREACONDICIONAMIENTO ISQUEMICO (PI).

• Proceso en el cual se realiza la aplicación de episodios de Proceso en el cual se realiza la aplicación de episodios de isquemia reperfusión breves y repetitivos isquemia reperfusión breves y repetitivos antesantes de una de una

isquemia prolongada. isquemia prolongada.

• Diferentes órganos :• Corazón , Músculo estriado, Cerebro, Intestino, Pulmones,Riñones, Hígado. Hígado.

INTRODUCCION

Son escasos trabajos que analicen las primeras alteraciones en la LIR y no encontramos trabajos que tomen en cuenta la arteria

hepática accesoria en el PIH

• Beneficio PIH.• Comparamos dos modelos diferentes de PIH.

• Proponemos un modelo de clampeo hepático tomando en cuenta la arteria hepática accesoria.

OBJETIVO

Valorar la eficacia del preacondicionamiento isquémico en la Valorar la eficacia del preacondicionamiento isquémico en la disminución de la lesión hepatocítica luego de una LIR, disminución de la lesión hepatocítica luego de una LIR, provocada en ratas al clampear el pedículo hepático y provocada en ratas al clampear el pedículo hepático y

reperfundirlo por veinticuatro horas . reperfundirlo por veinticuatro horas .

Comparar dos modelos de clampleo hepático diferentesComparar dos modelos de clampleo hepático diferentes..

MATERIAL Y MÉTODOMATERIAL Y MÉTODO• Estudio experimental prospectivo, aleatorizado y pareado.Estudio experimental prospectivo, aleatorizado y pareado.• 12 ratas machos, de la cepa Wistar, de la misma edad y

peso (entre 300 y 350 gr).• Por protocolo marcado, se dividió a los animales en dos

grupos: A y B de acuerdo a la modalidad de clampeo.

MATERIAL Y MÉTODOMATERIAL Y MÉTODO

• Grupo A :• 5 minutos de isquemia y 5 minutos de reperfusión de los

lóbulos izquierdos superiores (los que poseen una arteria hepática accesoria) • 90 minutos de isquemia total del hígado.• Sobrevida de 24 hs.• Hepatectomía .

• Grupo B :• Se les realizó el mismo procedimiento pero en el lóbulo

lateral superior derecho.

MATERIAL Y MÉTODOMATERIAL Y MÉTODO

MATERIAL Y MÉTODOMATERIAL Y MÉTODO

Grupo A

Grupo B

MATERIAL Y MÉTODOMATERIAL Y MÉTODO• Se seleccionaron los lóbulos medio izquierdo y lateral superior

derecho para hacer los estudios histológicos, tanto en los grupos A como B.

• Seleccionamos siempre el mismo cuadrante dentro de la lámina.• Reper: vena centrolobulillar. • Número de hepatocitos alterados.

MATERIAL Y MÉTODOMATERIAL Y MÉTODO

• Se midieron tres variables de lesión del hepatocito: Alteración nuclear. Alteraciones citoplasmáticas. Alteraciones de la histoarquitectura.

0 Ausencia de Lesiones

1 Cambios Histológicos Leves Área de LESION < 30%, área total en campo visual (aumento X10)

2 Cambios Histológicos Moderados Área de LESION 30 – 70% área total en campo visual (aumento X10)

3 Cambios Histológicos Severos Área de LESION > 70%, área total en campo visual (aumento X10)

MATERIAL Y MÉTODOMATERIAL Y MÉTODOCambios valorados Cambios valorados

• Núcleo: Núcleo: • Morfología alterada. • Bordes irregulares y festoneados.• Aumento del tamaño. • Cromatina desorganizada.

• Citoplasma:Citoplasma:• Vacuolización. • Hiperclaridad.• Balonamiento.

• Histoarquitectura:Histoarquitectura: • Desorganización peri vena centrolobulillar.

RESULTADOS

GRUPO A

• 12 animales sobrevivieron al procedimiento:

PREACOND HISTOARQ NUCLEO CITOPLAS. SUMATORIA

SIN LESION 2 1 1 4

LEVE 4 3 1 8

MOD. 0 2 3 5

SEVERO 0 0 1 1

CONTROL HISTOARQ NUCLEO CITOPLAS. SUMATORIA

SIN LESION 1 0 0 1LEVE 3 0 1 4

MOD. 2 6 2 10

SEVERO 0 0 3 3

RESULTADOS

CONTROL HISTOARQ NUCLEO CITOPLAS. SUMATORIA

SIN LESION 0 0 0 0LEVE 3 2 1 6MOD. 2 2 2 6SEVERO 1 2 3 6

GRUPO BPREACOND HISTOARQ NUCLEO CITOPLAS. SUMATORIA

SIN LESION 2 0 0 2LEVE 3 3 2 8MOD. 1 3 2 6SEVERO 0 0 2 2

RESULTADOS• Promedio de lesiones:

• Grupo A:• Lóbulo preacondicionado

• Lóbulo no preacondicionado :

• Grupo B:

• Lóbulo preacondicionado :

• Lóbulo no preacondicionado :

LEVELEVE

MODERADAMODERADA

LEVELEVE

MODERADAMODERADA

GRUPO A

Preacondicionado

Sin Preacondicionar

GRUPO B

Preacondicionado

Sin Preacondicionar

RESULTADOSANALISIS ESTADISTICOANALISIS ESTADISTICO

• Grupo A Menor lesión a nivel de la suma de las lesiones para los

lóbulos preacondicionados. p igual a 0,031.(Wilcoxon).

• Grupo B Menor lesión a nivel de la suma de las lesiones para los

lóbulos preacondicionados. p igual a 0,016.(Wilcoxon).

• Comparamos los lóbulos preacondicionadoslóbulos preacondicionados de cada grupo: No presentaron diferencia significativa para ninguno de los tipos

de lesión.(Mann Whitney)

DISCUSIONDISCUSION

• Modificación en el modelo de clampeo hepático.

• Arteria hepática accesoria ?Arteria hepática accesoria ?

• Nos aseguramos el clampeo total del lóbulo lateral superior derecho hepático, donde no existe circulación accesoria.

• Comparamos dos modelos de Campleo hepático diferentes.• Implementamos un modelo pareado.

DISCUSIONDISCUSION

• Ya demostramos el beneficio del PI en la fase de isquemia sin reperfundir.

“VALOR DEL PREACONDICIONAMIENTO ISQUEMICO HEPATICO EN LA PREVENCION DEL DAÑO POR ISQUEMIA EN

RATAS.”

Dr. Juan Manuel Sanguinetti, Dr. Manuel Sanguinetti, Dr. Juan Cossa,Br. Juan D. Fernández, Br. Diego Muguruza.

DISCUSIONDISCUSION

• Analizamos las primeras alteraciones histológicas de la LIR.

• No existe consenso en el número de ciclos ni en el tiempo de duración de los mismos para lograr una óptima protección del hepatocito.

• En base a la bibliografía analizada decidimos realizar un preacondicionamiento de 5 minutos de isquemia y 5 minutos de reperfusión.

CONCLUSIONES

Una serie de preacondicionamiento isquémico de 5 minutos de Una serie de preacondicionamiento isquémico de 5 minutos de isquemia, con 5 minutos de reperfusión, disminuye las lesiones isquemia, con 5 minutos de reperfusión, disminuye las lesiones

hepatocíticas luego de una isquemia hepática total de 90 hepatocíticas luego de una isquemia hepática total de 90 minutos, con posterior reperfusión de 24 hs en la rata. minutos, con posterior reperfusión de 24 hs en la rata.

No se presentaron diferencias significativas entre los dos No se presentaron diferencias significativas entre los dos modelos de clampeo planteados.modelos de clampeo planteados.

La presencia de la arteria hepática accesoria La presencia de la arteria hepática accesoria no demostró no demostró

importancia funcionalimportancia funcional en el modelo de isquemia planteado en el modelo de isquemia planteado..

MUCHAS GRACIAS

1° CONGRESO ARGENTINO Y LATINOAMERICANO DE CIRUGÍA

HEPATO-PANCREATO-BILIAR2012