UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD – CARRERA PROFESIONAL DE ODONTOLOGIA

CURSO: LABORATORIO CLINICO

ESTUDIO DE LAS CELULAS SANGUINEAS Y EL HEMOGRAMA

Blgo MSc Ángel César Medina Colque

Extracción de sangre para la realización del hemograma

En algunos centros la extracción está centralizada en el laboratorio. La muestra utilizada para la realización del hemograma es sangre total anticogulada.

Es muy importante mezclar rápidamente la sangre con el anticoagulante para evitar la formación de coágulos o microcoágulos que alterarían considerablemente los resultados.

El anticoagulante de elección es el EDTA Tripotásico (anticoagulante sólido) por varias razones:No produce dilución de la sangre.No altera la morfología eritrocitaria y leucocitaria.Asegura la conservación de las células durante 24 horas.Inhibe la agregación de las plaquetas, facilitando el recuento de las mismas

El Hemograma es uno de los exámenes más comunes, el cual examina las células de la sangre. Traduce los equilibrios anátomo-fisiopatológicos de la producción y destrucción de los elementos figurados sanguíneos.

El hemograma incluye el recuento celular y la morfología al microscopio. Algunos centros consideran dentro de los elementos examinados los glóbulos rojos, leucocitos y plaquetas, mientras que otros solamente los primeros dos.

EL HEMOGRAMA es una de las pruebas más solicitadas a los laboratorios de hematología.

El hemograma es utilizado como un procedimiento de screening, obteniéndose una visión general del estado de salud del paciente:

1. Ayuda para el diagnóstico de ciertas infecciones.2. Refleja la capacidad del organismo para reaccionar frente a la enfermedad.3. Sirve de indicador de los progresos del paciente en algunos estados patológicos como la infección y la anemia.

El Hemograma contiene los siguientes examenes:

1. Determinación de la hemoglobina y el hematocrito

2. Recuento de glóbulos blancos

3. Recuento de glóbulos rojos

4. Estudio del frotis de sangre, debidamente coloreada.

DETERMINACION DE LA HEMOGLOBINA

La hemoglobina es el componente más importante de los glóbulos rojos y está compuesto de una parte proteica: la globina y otra no proteica llamada hemo, que fija el oxígeno, y la globina para ser intercambiado en los pulmones por dióxido de carbono.

Las anomalías del valor de la hemoglobina en un individuo pueden indicar defectos en el equilibrio de los glóbulos rojos.

Tipos de hemoglobina

Hemoglobina A o HbA es llamada también hemoglobina del adulto o hemoglobina normal, representa aproximadamente el 97% de la hemoglobina sintetizada en el adulto, formada por dos globinas alfa y dos globinas beta. Hemoglobina A2: representa menos del 2,5% de la hemoglobina después del nacimiento, formada por dos globinas alfa y dos globinas delta, que aumenta de forma importante en la beta-talasemia, al no poder sintetizar globinas beta. Hemoglobina s Hemoglobina t Hemoglobina f

Hemoglobina s Es una alteración de la estructura de la globina. Esto es debido a la alteración de un gen. De las cuatro cadenas polipetidicas que forman la hemoglobina (dos alfa y dos beta), las alfa van a permanecer igual, pero va a haber una alteración en las cadenas beta. El resto aminoacido seis, en vez de llevar ácido glutámico (GAA, GAG), lleva valina (GUC, GUA). Esto da lugar a una enfermedad muy grave, la anemia drepanocitica --> los eritrocitos tienen forma de hoz o media luna (drepanocitos).

Hemoglobina t La hemoglobina puede existir en dos estados diferentes, T y R. El estado T corresponde a la desoxihemoglobina, y el estado R a la oxihemoglobina. Esta última está cargada con oxígeno molecular (O2).

Hemoglobina f Es la Hemoglobina normal del feto que en su mayor parte se degrada en los primeros días de vida del niño siendo sustituida por la hemoglobina A. Durante toda su vida el sujeto normal produce pequeñas cantidades de hemoglobina F.

Valores de referencia: (*)

Niños al nacer: 13.6 – 19.6 g/dl

Niños de 1 año: 11.3 – 13.0 g/dl

Niños de 10 a 12 años 11.5 – 14.8 g/dl

Mujeres: 11.5 – 16.5 g/dl

Hombres: 14.0 – 18.0 g/dl

(*)Fuente: Norma técnica Nº 40 del Instituto Nacional de Salud, en el “Manual de procedimientos de laboratorio en técnicas básicas de hematología”. 2005

Incremento de la hemoglobina (Hb) y hematocrito (Hto) según la altitud (**)

Altitud Factor de Factor de(msnm) corrección Hb corrección Hto

2000 0,8 2,52500 1,3 4,03000 1,9 6,03500 2,7 8,54000 3,5 11.04500 4,5 14,0

(**) Fuente: Instituto Nacional de Salud. Manual de procedimientos de laboratorio 1997.

EL HEMATOCRITO

El hematocrito es el porcentaje del volumen de la sangre que ocupa la fracción de los glóbulos rojos. Las cifras normales de hematocrito en humanos varían dependiendo de diversos factores fisiológicos, como la edad, el sexo y la altitud en que se habita, y generalmente se expresa en porcentaje (%).

Valores de referencia:

Hombres: 40 – 54 %

Mujeres: 38 – 48 %

Fuente: Norma técnica Nº 40 del Instituto Nacional de Salud, en el “Manual de procedimientos de laboratorio en técnicas básicas de hematología”. 2005

RECUENTO DE CELULAS SANGUINEAS

1. LEUCOCITOS

La sangre anticoagulada se deposita en un líquido que permite evidenciar los leucocitos, manteniéndolos visibles, mientras que los eritrocitos son hemolizados. El recuento del número de leucocitos o glóbulos blancos se expresa por mm3 (milímetro cúbico).

Para realizar el recuento se requiere de un hemocitómetro o Cámara de Neubauer.

CÁMARA DE NEUBAUER

La cámara de Neubauer o hemocitómetro, tiene dos cámaras de contaje

Detalle de la cámara de contaje, con cuatro áreas de 1 mm2, donde se realiza el recuento de leucocitos (los cuadrados de las esquinas marcadas con L)

Detalle de una de las áreas de contaje, tal como se ve con el microscopio óptico compuesto. El área recuadrada en rojo es un cuadrado de 1 mm de lado.

En la imagen se han representado células vivas como puntos blancos y células muertas (teñidas de azul) como puntos azules. Corresponde a una de las áreas de contaje de la cámara de Neubauer (1 mm2). El número de puntos blancos en la zona de contaje es de 35 y el de azules de 16. Fíjate que aquellas células que se han rodeado de un círculo rojo no se han contado a pesar de estar dentro del área y los que se han rodeado de un círculo verde sí se han incluido.

VALORES DE REFERENCIA: (*)

Leucocitos 5 000 – 10 000 /mm3

Hematíes (milones de células/mm3)

Hombres 4 500 000 – 5 500 000

Mujeres 4 000 000 – 5 000 000

Recién nacidos 5 000 000 – 6 000 000

(*) Fuente: Norma técnica Nº 40 del Instituto Nacional de Salud, en el “Manual de procedimientos de laboratorio en técnicas básicas de hematología”. 2005

Tubos capilares y de wintrobe empleados para la determinación del hematocrito

Pipetas de Thoma, para diluir la sangre y realizar el recuento de glóbulos rojos y blancos

ESTUDIO DE LAS CELULAS EN EL FROTIS SANGUINEO

El estudio de las células en el frotis sanguíneo coloreado, es obtener la fórmula leucocitaria que determine los porcentajes de las distintas clases de leucocitos normales y anormales en la sangre.

VALORES DE REFERENCIA (*)

LEUCOCITOS VALORES RELATIVOS (%)Neutrófilos segmentados 55 – 65Neutrófilos abastonados 03 – 05Eosinófilos 0.5 – 04Basófilos 00 – 0,5Monocitos 04 – 08Linfocitos 25 – 35

(*) Fuente: Norma técnica Nº 40 del Instituto Nacional de Salud, en el “Manual de procedimientos de laboratorio en técnicas básicas de hematología”. 2005

CELULAS SANGUINEAS BLANCAS: Se observa un neutrofilo segmentado, con un corpusculo de Baar o cromatina sexual, ademàs de un linfocito y algunas plaquetas

Neutrófilos segmentados en medio de hematíes, también se observa un linfocito

Se incrementa en las infecciones, en los trastornos metabólicos, en las enfermedades inflamatorias, como la artritis reumatoide, la gota.

Neutrófilos abastonados o denominados también neutrófilos en cayado.

Se incrementan en las infecciones e intoxicaciones.

Eosinófilo, se observa las granulaciones de color naranja en el citoplasma y el núcleo bilobulado.

Existe aumento en las infecciones parasitarias, en las reacciones alérgicas, enfermedades cutáneas y neoplasias.

Basófilo, caracterizado por la presencia de granulaciones de color azul o violeta de mayor tamaño en el citoplasma que inclusive tapan el núcleo segmentado.

Su número se incrementa en la leucemia por basófilos, en la policitemia vera, anemias hemolíticas crónicas.

Linfocito, es un glóbulo blanco agranulocito, se caracteriza por presentar un núcleo excéntrico que ocupa casi todo el citoplasma de la célula, quedando un pequeño espacio citoplasmático.

Los linfocitos se elevan en la hepatitis viral, en las enfermedades autoinmunes. En las infecciones como la tuberculosis, la hepatitis, sífilis, tos ferina, infección por citomegalovirus.

Monocito, cuya característica es la presencia deun núcleo en forma arriñonada y citoplasma de coloración opaca, además se observa dos linfocitos cuyos citoplasmas son escasos.

Los monocitos se elevan en la tuberculosis, endocarditis bacteriana, enfermedades virales (sarampión, rubéola, etc) y neoplasias.

Plaquetas, son corpúsculos pequeños en relación a los hematíes, se presentan en grupos o solos.

Valores de referencia:

150 000 – 450 000/mm3

La trombocitosis puede ser secundaria a un estímulo medular.

La trombocitopenia puede estar asociada a leucopenia y anemia.

ALTERACIONES LEUCOCITARIAS DE LOS NEUTROFILOS

1. Granulaciones y vacuolas tóxicas: Son gránulos basófilos más oscuros que lo normal y se observan durante el transcurso de infecciones severas y estadíos tóxicos.

2. Cuerpos de Dohle

Son áreas teñidas de azul en el citoplasma de los polimorfonucleares neutrófilos y se encuentran en infecciones, especialmente en neumonías.

3. Corpúculo de Barr o Palillo de tambor.

Es un pequeño apéndice (cromatina sexual) que permite conocer el sexo del individuo mediante una simple observación en un frotis de sangre periférica en los neutrófilos. Se presenta en las mujeres.

4. Neutrófilo hipersegmentado

Son neutrófilos con 5 o más lobulaciones. Se observa en las anemias por deficiencia de vitamina B 12 y ácido fólico, en el Síndrome de down y otras anomalías.

DESVIACIÓN A LA IZQUIERDA

Significa el aumento de las formas inmaduras (en banda o cayado o abastonados y juveniles) dentro de los neutrófilos. Constituye un importante valor diagnóstico y pronóstico. Puede observarse en: infecciones e intoxicaciones.

ALTERACIONES ERITROCITARIAS

Aquí se encuentran incluidas las células progenitoras de la serie roja que normalmente se encuentran en la médula ósea, pero cuando éstas pasan a la sangre periférica antes de su maduración pueden indicar alguna patología como leucemia, anemia u otras alteraciones celulares.

NORMOBLASTO Células de forma redondeada, de 8 a 12 um de diámetro. La proporción N/C es de 1:4 a 1:2.

Se presentan en la eritroleucemia, leucemia eritroide, en la enfermedad hemolítica del recién nacido, en la leucemia mieloide crónica, en la talasemia y en la leucemia falciforme

RETICULOCITOS

Son células que aún presentan en su citoplasma restos de ARN y protoporfirinas resultado de la conversión del normoblasto ortocromático a reticulocito y solo se puede observar con coloraciones especiales.

NORMOCITOS O HEMATIES

Son discos bicóncavo, que aparecen con ligera palidez central, al no captar el colorante en esa zona. Miden aproximadamente 7 micras de diámetro. Entre las alteraciones mas frecuentes de los eritrocitos tenemos:

• Alteraciones en tamaño

• Alteraciones en su forma

• Alteraciones de color

• Inclusiones anormales.

ALTERACIONES EN EL TAMAÑO

Macrocitos y microcitos

Los macrocitos son hematíes que presentan un tamaño superior al normal (mas de 9 um), aparecen en la anemia megaloblástica debida a déficit de vitamina B12 o ácidod fólico

Microcitos, son los hematíes que presentan un tamaño inferior al normal (menos de 6 um) y se encuentran en pacientes con anemia ferropénica y talasemias

Anemia microcítica e hipocrómica

ALTERACION EN LA FORMA

Se denomina también poiquilocitosis, entre éstas tenemos:

1. Esferocitos: Son esféricos como pelotas, producen taponamiento de los vasos sanguíneos.

2. Codocitos o dianocitos: en la región central presentan un área con mayor contenido hemoglobínico, se encuentran en hemoglobinopatías, anemia ferropénica y en algunas hepatopatías.

3. Drepanocitos: son hematíes cuya membrana se altera y se hace falciforme (forma de hoz o media luna), se presenta en la anemia falciforme.

4. Eliptocito: Los hematíes son alargados ovalados. Su presencia se debe a una alteración congénita de la membrana del hematíe, también en caso de una anemia megaloblástica, ferropénica.

5. Crenocito: presentan membrana ondulante e irregular, se encuentran en anemias hemolíticas

6. Acantocito: también llamado equinocito, las prominencias de la membrana son aguzadas y distribuidas irregularmente se presenta por la ausencia de lipoproteínas plasmáticas

7. Dacriocitos: son hematíes en forma de lágrima, se encuentran en la anemia ferropénica, anemia megaloblástca y talasemia

8. Esquistocitos: son fragmentos hemáticos, se encuentran en anemias hemolíticas, quemaduras.

ALTERACION EN EL COLOR

Aquí observamos las diferentes tonalidades de color de los hematíes dependiendo del contenido hemoglobínico.

Hipocromía Policromatofilia

Gracias por su atención