Introducción a la Biotecnología: Fundamentos de la Biotecnología Industrial
Biotecnología · 2018. 1. 10. · ECORFAN® Revista de Ingeniería Biomédica y Número 1...
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Revista de Ingeniería
Biomédica y Biotecnología
Volumen
1, Nú
mero
1 – Julio –
Sep
tiembre - 20
17
ISSN 2523-6857
ECORFAN-Taiwán
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Julio a Septiembre 2017, es una revista
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Ciencia. El contenido de los artículos y opiniones que aparecen en cada número son de los autores y no
necesariamente la opinión de la Editora en Jefe.
Como primer artículo está Cuantificación de la radiación ultravioleta solar observada en la
Universidad Politécnica de Pachuca durante los años 2011 a 2016 por AHUMADA-MEDINA, Albino,
SÁNCHEZ-BARRERA, Eréndira, VÁZQUEZ-CHACÓN, Verónica, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María,
CORTÉS-MÁRQUEZ, Sandra, y SUBERVIER-ORTÍZ, Laura, como siguiente articulo esta Detección
y prevención de fotoenvejecimiento en universitarios por exposición nociva a rayos ultravioleta por
VAZQUEZ-CHACÓN, Verónica, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María, SÁNCHEZ-BARRERA-Eréndira,
AHUMADA-MEDINA, Albino, CORTES-MÁRQUEZ, Sandra y SUBERVIER-ORTÍZ, Laura, como
siguiente articulo está Efecto del ácido acrílico en las propiedades térmicas de polihidroxialcanoatos
obtenidos con hidrolizados de cera de abeja por QUINTANAR-GÓMEZ, Samuel, GRACIDA-
RODRÍGUEZ, Jorge, ABREU-CORON, Arturo y TÉLLEZ-JURADO, Alejandro, como siguiente
articulo esta Influencia del método de obtención del extracto de perfolla de maíz en la biosíntesis de
nanoestructuras de AgCl/Ag y fitotoxicidad en plántulas de Latuca sativa L. var. longifolia por YAÑEZ-
CRUZ, Maria Guadalupe, VILLANUEVA-IBÁÑEZ, Maricela, ÁLVAREZ-GARCÍA, Rocío, FLORES-
GONZÁLEZ, Marco Antonio, TOVAR-JIMÉNEZ, Xochitl, CADENA-RAMÍREZ, Arturo y
HERNÁNDEZ-PÉREZ, María de los Ángeles, además el articulo Obtención de extractos celulolíticos a
partir de Pleurotus ostreatus empleando como sustrato lirio acuático por TOVAR-JIMÉNEZ, Xochitl,
TELLEZ-JURADO, Alejandro, LÓPEZ-MEDINA, Emma Nallely, FAVELA-TORRES, Ernesto y
HERNÁNDEZ-ALDANA, Ithzmalzin.
Contenido
Artículo
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Cuantificación de la radiación ultravioleta solar observada en la Universidad
Politécnica de Pachuca durante los años 2011 a 2016
AHUMADA-MEDINA, Albino, SÁNCHEZ-BARRERA, Eréndira, VÁZQUEZ-
CHACÓN, Verónica, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María, CORTÉS-MÁRQUEZ, Sandra, y
SUBERVIER-ORTÍZ, Laura
1-5
Detección y prevención de fotoenvejecimiento en universitarios por exposición
nociva a rayos ultravioleta
VAZQUEZ-CHACÓN, Verónica, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María, SÁNCHEZ-
BARRERA-Eréndira, AHUMADA-MEDINA, Albino, CORTES-MÁRQUEZ, Sandra
y SUBERVIER-ORTÍZ, Laura
6-11
Efecto del ácido acrílico en las propiedades térmicas de polihidroxialcanoatos
obtenidos con hidrolizados de cera de abeja
QUINTANAR-GÓMEZ, Samuel, GRACIDA-RODRÍGUEZ, Jorge, ABREU-CORON,
Arturo y TÉLLEZ-JURADO, Alejandro
12-19
Influencia del método de obtención del extracto de perfolla de maíz en la biosíntesis
de nanoestructuras de AgCl/Ag y fitotoxicidad en plántulas de Latuca sativa L. var.
longifolia
YAÑEZ-CRUZ, Maria Guadalupe, VILLANUEVA-IBÁÑEZ, Maricela, ÁLVAREZ-
GARCÍA, Rocío, FLORES-GONZÁLEZ, Marco Antonio, TOVAR-JIMÉNEZ,
Xochitl, CADENA-RAMÍREZ, Arturo y HERNÁNDEZ-PÉREZ, María de los Ángeles
20-25
Obtención de extractos celulolíticos a partir de Pleurotus ostreatus empleando
como sustrato lirio acuático
TOVAR-JIMÉNEZ, Xochitl, TELLEZ-JURADO, Alejandro, LÓPEZ-MEDINA,
Emma Nallely, FAVELA-TORRES, Ernesto y HERNÁNDEZ-ALDANA, Ithzmalzin
26-34
Instrucciones para Autores
Formato de Originalidad
Formato de Autorización
1
Artículo Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología Septiembre 2017 Vol.1 No.1 1-5
Cuantificación de la radiación ultravioleta solar observada en la Universidad
Politécnica de Pachuca durante los años 2011 a 2016
AHUMADA-MEDINA, Albino*, SÁNCHEZ-BARRERA, Eréndira, VÁZQUEZ-CHACÓN, Verónica
†, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María, CORTÉS-MÁRQUEZ, Sandra, y SUBERVIER-ORTÍZ, Laura
Recibido 18 de Julio, 2017; Aceptado 14 de Septiembre, 2017
___________________________________________________________________________________________________
Resumen
Objetivos: Cuantificar la Radiación Ultravioleta
Solar en la Universidad Politécnica de Pachuca de los
años 2011 al 2016.
Metodología: Descriptiva, longitudinal según la
recopilación de los datos, y comparativa de acuerdo
a los criterios establecidos por la Organización
Mundial de la la Salud entre otros.
Contribución: Los resultados muestran las
intensidades de radiación ultravioleta que se
observan en la Universidad Politécnica de Pachuca
sobrepasen valores de 9 del IUV con una frecuencia
de 94.2 días.
Radiación ultravioleta
Abstract
Objectives: To quantify Solar Ultraviolet Radiation
at the Polytechnic University of Pachuca from 2011
to 2016.
Methodology: Descriptive, longitudinal according to
the data collection, and comparative according to the
criteria established by the World Health
Organization among others.
Contribution: The results show the ultraviolet
radiation intensities observed at the Polytechnic
University of Pachuca exceed values of 9 of the IUV
with a frequency of 94.2 days.
Ultraviolet radiation
___________________________________________________________________________________________________
Citación: AHUMADA-MEDINA, Albino*, SÁNCHEZ-BARRERA, Eréndira, VÁZQUEZ-CHACÓN, Verónica †, CHÍO-
AUSTRIA, Rosa María, CORTÉS-MÁRQUEZ, Sandra, & SUBERVIER-ORTÍZ, Laura. Cuantificación de la radiación
ultravioleta solar observada en la Universidad Politécnica de Pachuca durante los años 2011 a 2016. Revista de Ingeniería
Biomédica y Biotecnología 2017, 1-1: 1-5
___________________________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________________________* Correspondencia al autor (email: [email protected] )
† Investigador contribuyendo como primer autor.
© ECORFAN-Taiwan www.ecorfan.org/taiwan
2
Artículo Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología Septiembre 2017 Vol.1 No.1 1-5
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AHUMADA-MEDINA, Albino, SÁNCHEZ-BARRERA, Eréndira,
VÁZQUEZ-CHACÓN, Verónica, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María,
CORTÉS-MÁRQUEZ, Sandra, y SUBERVIER-ORTÍZ, Laura. Cuantificación de la radiación ultravioleta solar observada en la
Universidad Politécnica de Pachuca durante los años 2011 a 2016.
Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología 2017
Introducción
La radiación ultravioleta (UV) forma parte del
espectro electromagnético que llega a la tierra
procedente del sol; algunos animales la detectan
como luz visible, no así los humanos. Dentro del
espectro visible se localiza por debajo de las
longitudes de los colores azul y violeta. En
relación a otras radiaciones del espectro visible
las longitudes de onda UV, aun cuando tienen
menor penetrancia que la luz visible, son
capaces por el encuadre de su longitud de onda
de causar daños a nivel de dermis y epidermis.
[1]. En cuanto a sus longitudes de onda se
encuentran entre los 400 nanómetros (nm)
(4x10−7) y los 15 nm (1,5x10−8 m); no obstante
son los rangos que van de los 100 nm a los 400
los directamente relacionados con el presente
estudio. A estos que se les clasifica en tres
diferentes bandas: UVA (315–400 nm), UVB
(280–315 nm) y UVC (100–280 nm). Estas tres
bandas llegan a la atmósfera terrestre, pero
gracias a la acción protectora del ozono
localizado en la delicada capa de la ozonosfera,
se absorben las longitudes que pudieran ser
biológicamente más peligrosas como la UVB y
la UVC, alcanzando la superficie terrestre
principalmente la UVA y una porción menor de
UVB. Ver “tabla 1”.
Particularmente es importante considerar
que la radiación UV es capaz de ser absorbida
intensamente [2] por los dobles enlaces
conjugados de piridinas y piridiminas,
ocasionando que las biomoléculas se vuelvan
reactivas o ionizándolas, al grado que a la piel
humana puede ocasionarle quemaduras o
provocarle cáncer.
La radiación solar UV ocurre con mayor
intensidad en nuestras latitudes durante la
primavera, verano y otoño entre las 11:00 y las
15:00 horas, siendo particularmente alta en
verano, si bien disminuye su intensidad en días
nublados, mientras que por otra parte la
inclinación con que llega la luz del sol durante
los meses invernales logra que disminuyan sus
efectos-: efecto escaso o sin efecto; +: efecto
leve; ++ efecto moderado; +++: efecto severo
Tip
o l
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Lo
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ida
d
UVC 200-
290
0 Epidermis - +++ +++
UVB 290-
320
1.7 Epidermis-
dermis
papilar
- ++ ++
UVA 320-
400
6.3 Dermis
papilar-
reticular
+ + +
Visible 400-
800
92 Dermis
reticular
subcutanea
+ - -
Tabla 1. Características de la radiación ultravioleta y luz
visible
Considerando que a mayor altura sobre la
línea costera, la atmósfera es más delgada, la
OMS reporta que por cada 1000 m debe
considerarse un incremento de la intensidad de
la UV entre un diez y doce por ciento, por lo
que en una altura que oscila sobre 2,300 metros
como es la observada Valles Altos de Hidalgo,
la intensidad alcanzara entre el 23 y 27 % más
alta respecto al nivel del mar.
3
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AHUMADA-MEDINA, Albino, SÁNCHEZ-BARRERA, Eréndira,
VÁZQUEZ-CHACÓN, Verónica, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María, CORTÉS-MÁRQUEZ, Sandra, y SUBERVIER-ORTÍZ, Laura.
Cuantificación de la radiación ultravioleta solar observada en la
Universidad Politécnica de Pachuca durante los años 2011 a 2016.
Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología 2017
La Universidad Politécnica de Pachuca se
localiza en los Valles Altos de Hidalgo a una
altura de 2330 msnm, su clima es templado seco,
lo que origina escasa vegetación, motivo por el
cual la radiación solar de por sí intensa por su
latitud tropical y altura, se magnifica por la
reflexión de suelos desnudos y los materiales
paredes y banquetas [3]. Actualmente se está
conformando un grupo de investigación que
tiene como objetivo el detectar y cuantificar los
posibles daños dermatológicos que se presenten
en alumnos y personal de la Institución. Como
una primera etapa de estas investigaciones se
reporta en este trabajo la cuantificación mensual
de radiación ultravioleta desde el año 2011 a la
fecha.
Dentro de la República Mexicana, existen
antecedentes de estudios semejantes, como los
realizados por el Departamento de
Dermatología en el estado de San Luis Potosí en
2003 [4], en donde se reportaron las dosis de
radiación ultravioleta en escolares mexicanos.
Metodología
Se realizó una recopilación de los datos
aportados por el sensor de luz ultravioleta
inalámbrica instalado en la estación
meteorológica Davis Vantage 2 que se
encuentra instalada en el Área de Tecnologías
Intermedias de la Universidad Politécnica de
Pachuca desde el año 2011.
Los datos obtenidos se agruparon de
acuerdo a los criterios establecidos por la
Organización Mundial de la la Salud en
colaboración con el Programa de las Naciones
Unidas para el Medio Ambiente, La
Organización Meteorológica Mundial, La
Comisión Internacional sobre Protección contra
la Radiación no Ionizante, y la Oficina Federal
Alemana para la Protección Contra la
Radiación [3]. Esta publicación responde
a los criterios reportados por Eva Rehfuess y se
basan en el el consenso alcanzado en la reunión
Internacional de Munich y está destinada a ser
usada por las autoridades nacionales y locales
y las organizaciones no gubernamentales que
realizan actividades de prevención del cáncer
de piel, así como por los centros de
meteorología y los medios de comunicación
que informan sobre el IUV. Los valores del
IUV recomendados a observar son los
siguientes
Categoría de Exposición Intervalo de Valores del
IUV
Baja <2
Moderada 3 a 5
Alta 6 a 7
Muy Alta 8 a 10
Extremadamente alta 11 o mas
Tabla 2. Indices de Radiación Ultravioleta
Índice de Radiación
Ultravioleta
Protección requerida
1-2 No necesita protección
3-4,5,6 y 7
Se necesita protección.
Mantenerse a la sombra
durante las horas centrales del
día. Usar camisa, crema de
protección solar y sombrero
8,9,10,11 o más
Se debe evitar salir durante las
horas centrales del día,
mantenerse a la sombra. Es
imprescindible usar camisa,
crema de protección solar y
sombrero.
Tabla 3. Recomendaciones por exposición
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AHUMADA-MEDINA, Albino, SÁNCHEZ-BARRERA, Eréndira,
VÁZQUEZ-CHACÓN, Verónica, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María, CORTÉS-MÁRQUEZ, Sandra, y SUBERVIER-ORTÍZ, Laura.
Cuantificación de la radiación ultravioleta solar observada en la
Universidad Politécnica de Pachuca durante los años 2011 a 2016.
Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología 2017
Resultados
Tabla 4. Promedio Marzo-Octubre 2011-2016.
De acuerdo al monitoreo que se realizó
durante los años 2011 al 2017 se observó que los
meses en donde se manifiestan los índices de
radiación superiores a 8 que se considera alta,
hasta 11 considerada extremadamente alta,
ocurren entre los meses de marzo a octubre,
mientras que durante los meses que corren de
noviembre febrero, la radiación no muestra
condiciones que se consideren potencialmente
perjudiciales para la piel de las personas. En la
“tabla 4”, se pueden observar los resultados
medios mensuales, cabe mencionarse que en
algunos casos por fallas en los equipos
detectores, fue necesario obtener datos
promedio. Los valores se redondearon a 9 (8-
10), 11 (10-12) y 13 (12-14).
Mes 8-10 10-12 12-14
Total
Mensual
Marzo (31) 15.1 6.1 1.6 22.8
Abril (30) 11 14.6 2.5 28.1
Mayo (31) 3.3 16.6 10.3 30.2
Junio (30) 2.8 10.5 13.8 27.1
Julio (31) 6.3 11 10.5 27.8
Agosto (31) 4.6 13.6 6.0 24.2
Septiembre
(30)
8.1 10.5 4.5 23.1
Octubre (31) 12.3 11.3 0.8 24.4
Total anual 63.5 94.2 50.0 207.7
Tabla 5. Promedio Marzo-Octubre 2011
Es importante señalar que en algunos años,
como ocurrió en 2011, durante los meses de julio
y agosto, alcanzaron valores por encima de 14,
lo que indica situaciones extremas. “Tabla 5”.
Discusión
Los resultados muestran las intensidades de
radiación ultravioleta que se observan en los
Valles Altos de Hidalgo, particularmente en la
Universidad Politécnica de Pachuca que se
localiza dentro del municipio de Zempoala,
Hidalgo. Resalta principalmente el hecho de que
durante los meses de marzo a octubre se
sobrepasen valores de 9 del IUV durante 207.7
días, siendo el valor de 9 el que se alcanza con
más frecuencia con 94.2 días.
Debe observarse que los meses de mayo,
son los que presentan una mayor cantidad de días
con radiaciones por arriba de 9, seguramente por
no presentarse nublados importantes en este mes
y el transito prácticamente cenital del sol a la
línea del trópico de cáncer (23° 27’). Mientras
que el mes de junio aun cuando tiene tres días
menos por debajo de la línea de IUV, su
intensidad suele ser la más alta del año y
coincide con el acercamiento y llegada solar a su
cenit en la línea tropical.
Mes 8-
10
10-
12
12-
14
14-
16
Total
Mensual
Marzo 10 9 0 29
Abril (30) 5 12 13 30
Mayo (31) 2 17 12 31
Junio (30) 3 10 14 27
Julio (31) 3 7 13 6 29
Agosto (31) 2 8 19 1 30
Septiembre
(30)
1 15 12 28
Octubre
(31)
12 11 1 24
5
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AHUMADA-MEDINA, Albino, SÁNCHEZ-BARRERA, Eréndira, VÁZQUEZ-CHACÓN, Verónica, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María,
CORTÉS-MÁRQUEZ, Sandra, & SUBERVIER-ORTÍZ, Laura.
Cuantificación de la radiación ultravioleta solar observada en la Universidad Politécnica de Pachuca durante los años 2011 a 2016.
Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología 2017
Frecuentemente, se suelen confundir las
consecuencias de los efectos de la radiación UV
como derivados de la afectación atmosférica de
la capa de ozono como ocurre en las regiones del
extremo sur del planeta, no obstante lo
observado en el presente trabajo, son fenómenos
locales derivados de la latitud y altura. Cabe
mencionarse que no obstante la cercanía de la
Ciudad de México con sus graves problemas de
contaminación, no manifiesta la intensidad aquí
reportdadebido a la protección que le generan los
nublados frecuentes durante los veranos [5]. Por
otra parte, debe señalarse que la población de los
Valles Altos de Hidalgo deberá sujetarse a las
debidas precauciones para evitar tanto las
quemaduras como posibles casos de cáncer. Por
ello consideramos importante que el monitoreo,
así como la divulgación de las lecturas diarias
sean divulgadas como un proceso preventivo.
Finalmente los estudios que se han iniciado por
parte de académicos de la Licenciatura en
Terapia Física, habrán de señalarnos en qué
medida la población se encuentra afectada.
Reconocimiento
Dr. Marco Antonio Flores González. Rector de
la Universidad Politécnica de Pachuca.
Referencias
[1]. X.Fajre et al. Exposición Solar y
fotointerpretación. Revista Chilena de Medicina
Familiar. 3(3): 113-118. 2002.
[2]. Mathews C. K. Bioquímica. Pearson.
Madrid. 2013.
[3]. Organización Mundial de la Salud. Índice
UV solar mundial: guía práctica. 2003.
[4]. Castanedo-Cázares et al. Dosis de radiación
ultravioleta en escolares mexicanos. Salud
pública.Méx vol.45 no.6 Cuernavaca nov. 2003
[5]. CIMAT-CDMX. Informes anuales de la
calidad del aire. 2000-2015
6
Artículo Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología Septiembre 2017 Vol.1 No.1 6-11
Detección y prevención de fotoenvejecimiento en universitarios por exposición
nociva a rayos ultravioleta VAZQUEZ-CHACÓN, Verónica*†, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María, SÁNCHEZ-BARRERA-Eréndira,
AHUMADA-MEDINA, Albino, CORTES-MÁRQUEZ, Sandra y SUBERVIER-ORTÍZ-Laura Recibido 14 de Julio, 2017; Aceptado 4 de Septiembre, 2017
___________________________________________________________________________________________________
Resumen
Objetivos: Detectar, por medio de cuestionario virtual el
fotoenvejecimiento en universitarios por exposición
nociva a rayos ultravioleta, prevención por medio de
fotoprevención. Metodología: Se realizó una investigación
de tipo prospectiva, descriptiva y longitudinal, se aplica un
cuestionario de tipo electrónico en alumnos del Programa
Educativo de la Licenciatura en Terapia Física, incluyendo
el fototipo (clasificación de Fitzpatrick),
fotoenvejecimiento, rango de frecuencia de uso de
medidas de protección solar y conductas de prevención de
medio ambiente. Se pretende realizar prevención mediante
la impartición de una ponencia de efectos nocivos de la
Radiación Ultravioleta. Contribución: Se realizó una
plataforma para prevención y detección de los efectos del
Fotenvejecimiento en Universitarios. Integrando los
siguientes aspectos: fototipo, Fotoenvejecimiento,
cuidados del medio ambiente, día internacional del medio
ambiente y día internacional de prevención de cáncer de
piel, así como: rango de frecuencia del uso de medidas de
protección solar en la última semana. Se realizó una
ponencia del Tema: Efectos nocivos de la Radiación
Ultravioleta, en el Auditorio de la Universidad Politécnica
de Pachuca, dirigido a alumnos del Programa Educativo
de la Licenciatura en Terapia Física, con afluencia de 150
asistentes.
Rayos uv, Fotoeducación, Medioambiente, Prevención
cáncer de piel
Abstract
Objectives: To detect, through a virtual questionnaire,
photo-aging in university students due to exposure to
ultraviolet rays, prevention by means of photoprevention.
Methodology: A prospective, descriptive and longitudinal
research was carried out, an electronic questionnaire was
applied to students of the Educational Program of the
Licentiate in Physical Therapy, including the phototype
(Fitzpatrick classification), photoaging, frequency range
of use Measures of solar protection and conducts of
prevention of environment. It is intended to carry out
prevention by imparting a presentation of harmful effects
of Ultraviolet Radiation. Contribution: A platform was
developed for prevention and detection of the effects of
Photenvejecimiento in University students. Integrating the
following aspects: phototype, Photoaging, environmental
care, international day of the environment and
international day of prevention of skin cancer, as well as:
frequency range of the use of sun protection measures in
the last week.A lecture on the theme: Harmful Effects of
Ultraviolet Radiation was conducted at the Auditorium of
the Polytechnic University of Pachuca, aimed at students
of the Educational Program of the Degree in Physical
Therapy, with an attendance of 150 attendees.
Uv rays, Photo-education, Environment, Prevention of
skin cancer
___________________________________________________________________________________________________
Citación: VAZQUEZ-CHACÓN, Verónica*†, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María, SÁNCHEZ-BARRERA-Eréndira,
AHUMADA-MEDINA, Albino, CORTES-MÁRQUEZ, Sandra y SUBERVIER-ORTÍZ-Laura. Detección y prevención de
fotoenvejecimiento en universitarios por exposición nociva a rayos ultravioleta. Revista de Ingeniería Biomédica y
Biotecnología 2017, 1-1: 6 -11
___________________________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________________________* Correspondencia al autor (email: [email protected])
† Investigador contribuyendo como primer autor
© ECORFAN-Taiwan www.ecorfan.org/taiwan
7
Artículo Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología Septiembre 2017 Vol.1 No.1 6-11
ISSN: 2523-6857
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VAZQUEZ-CHACÓN, Verónica, CHÍO-AUSTRIA, Rosa María,
SÁNCHEZ-BARRERA-Eréndira, AHUMADA-MEDINA, Albino, CORTES-MÁRQUEZ, Sandra y SUBERVIER-ORTÍZ-Laura.
Detección y prevención de fotoenvejecimiento en universitarios por
exposición nociva a rayos ultravioleta. Revista de Ingeniería
Biomédica y Biotecnología 2017
Introducción
La forma más conocida de energía
electromagnética es la luz del sol. La frecuencia
de la luz solar (luz visible) es la línea divisoria
entre la radiación ionizante (rayos x, rayos
cósmicos), más potente y de frecuencias más
altas, y la radiación no ionizante, más benigna y
de frecuencias más bajas.1]
La luz solar se subdivide en: luz visible, su
campo de acción varía de los 400 nm (violeta) a
los 700 nm (roja); infrarroja mayor de 700 nm,
también llamada calor; y radiación ultravioleta
(rUV) < 400 nm. La rUV se subdivide a su vez
en UVA (320-400 nm), también llamada luz
negra (invisible); UVB (290-320 nm) que es más
penetrante en la piel y UVC (< 290 nm).2]
Hay un espectro de radiación no ionizante.
La radiación no ionizante (RNI) engloba toda la
radiación y los campos del espectro
electromagnético que no tienen suficiente
energía para ionizar la materia. Es decir, la RNI
es incapaz de impartir suficiente energía a una
molécula o un átomo para alterar su estructura
quitándole uno o más electrones. La división
entre la RNI y la radiación ionizante suele
establecerse en una longitud de onda de 100
nanómetros aproximadamente. Al igual que
cualquier forma de energía, la energía RNI tiene
el potencial necesario para interactuar con los
sistemas biológicos, y las consecuencias pueden
ser irrelevantes, perjudiciales en diferentes
grados o beneficiosas.
El término radiación significa
simplemente energía transmitida por ondas. Las
ondas electromagnéticas son ondas de fuerzas
eléctricas y magnéticas, cuyo movimiento
ondulatorio se define como propagación de
perturbaciones en un sistema físico.
Cuando las ondas electromagnéticas
encuentran un objeto, una parte de la energía
incidente se refleja, otra parte es absorbida y el
resto se transmite.
La luz UV cuando incide en la piel humana
puede seguir uno de estos tres cursos: puede
sufrir una absorción, reflexión o dispersión.
La luz ultravioleta (UV) es una de las
radiaciones no ionizantes del espectro
electromagnético y se sitúa en el rango de 100
nm longitud de onda (el cual corresponde a un
fotón de energía de aproximadamente 12 eV) a
400 nm, está limitada a la región de longitud de
onda corta y casi siempre situada como límite
entre el espectro de radiación ionizante (menos
de 100 nm longitud de onda) y el no ionizante.
Puede estar clasificada en tipo A (315-400 nm),
tipo B (280-315 nm) y C (100-280 nm); existen
además otras bandas de longitudes de onda
utilizadas.
La energía de la radiación solar está muy
atenuada por la capa de ozono de la Tierra, que
limita la RUV terrestre a longitudes de onda
superiores a 290-295 nm. La energía de los rayos
de corta longitud de onda (UVB), más
peligrosos, de la luz solar depende
considerablemente de su trayectoria oblicua en
la atmósfera, y varía con la estación y la hora del
día (Sliney 1986 y 1987; OMS 1994).
Eritema El eritema, o “quemadura solar”,
es un enrojecimiento de la piel que normalmente
aparece de cuatro a ocho horas después de la
exposición a la RUV y desaparece gradualmente
al cabo de unos días. Las quemaduras solares
intensas provocan formación de ampollas y
desprendimiento de la piel.
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Detección y prevención de fotoenvejecimiento en universitarios por
exposición nociva a rayos ultravioleta. Revista de Ingeniería
Biomédica y Biotecnología 2017
La UVB y la UVC son unas 1.000 veces
más eficaces que la UVA como agentes
causantes de eritema (Parrish, Jaenicke y
Anderson 1982), pero el eritema producido por
la UVB, de mayor longitud de onda (295 a 315
nm) es más intenso y persiste durante más
tiempo (Hausser 1928). Esta mayor intensidad y
duración se deben a que la penetración de esta
radiación de mayor longitud de onda en la
epidermis es más profunda. La piel parece
presentar la máxima sensibilidad a 295 nm.
La dosis eritémica mínima (DEM) para 295 nm
notificada en estudios más recientes para piel sin
broncear, ligeramente pigmentada, varía entre 6
y 30 mJ/cm2.
La exposición crónica a la luz solar —en
especial, al componente UVB— acelera el
envejecimiento de la piel e incrementa el riesgo
de cáncer de piel.
La irradiación ambiental de dicho agente,
de allí que esté aumentado el factor de riesgo
para el daño fotooxidativo, con efectos negativos
a largo plazo para el envejecimiento,
consecuente disminución en la calidad de vida
de los pacientes y aparición precoz de cáncer
cutáneo por el daño irreparable en el DNA
inducido por la luz ultravioleta.
La reflexión no solamente ocurre en la
superficie del estrato córneo, por ello en todas
las interfases puede ocurrir un índice de
refracción. La dispersión ocurre debido a todos
los elementos estructurales que se encuentran en
la piel, como son los folículos pilosos, las
glándulas sebáceas y los componentes celulares,
así como las mitocondrias y los ribosomas. El
remanente de luz UV puede, por tanto, penetrar
dentro de las capas más profundas de la piel. La
penetración de la luz UV dentro de la dermis
expone a una variedad de células y estructuras,
la que depende en parte del grosor del estrato
córneo de la epidermis.
La profundidad de la penetración depende
del tamaño de la longitud de onda.
Una misma exposición incidente de
radiación de UVA ó UVB resultante de una alta
exposición puede penetrar con profundidad.
La distribución y el tamaño de las partículas de
melanina pueden jugar un papel importante en la
protección de las células epidérmicas. Las
partículas de melanina se distribuyen en el
estrato córneo en dependencia del tipo de piel, se
consideran por ello seis fototipos de piel según
la clasificación de Fitzpatrick: Tipo I:
Quemadura solar frecuente y muy fácil.
Pigmentación nula o casi nula. Tipo II:
Quemadura solar frecuente y fácil.
Pigmentación discreta a veces. Tipo III:
Quemadura solar presente. Pigmentación
ligera. Tipo IV: Quemadura solar rarísima o
ausente. Pigmentación constante o intensa.
Tipo V: Piel moderadamente pigmentada. Tipo
VI: Piel negra.
La capacidad de la piel humana de regenerarse
disminuye con el paso del tiempo y con la
exposición a la luz UV, por ello se produce un
aumento en la fragilidad de la misma, con una
reducción de las células cutáneas y del tejido
conectivo colágeno.
El daño inducido al DNA por la radiación UVB
es el principal factor que permite la inducción de
mutaciones y el inicio del proceso
carcinogénico.
El envejecimiento cutáneo extrínseco comienza
alrededor de los 35 años de edad, el sol es el
responsable del 90 % de las lesiones estéticas,
atribuidas sin ningún motivo al envejecimiento
fisiológico.
El envejecimiento cutáneo es un fenómeno
biológico complejo que afecta a los diferentes
componentes de la piel. Existen efectos
intrínsecos y extrínsecos en el proceso de
envejecimiento.
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Detección y prevención de fotoenvejecimiento en universitarios por
exposición nociva a rayos ultravioleta. Revista de Ingeniería
Biomédica y Biotecnología 2017
En la piel existen cambios a nivel de la
epidermis como declinación de los melanocitos
en aproximadamente un 15% por década,
duplicando su densidad en áreas fotoexpuestas,
hay además una disminución de las células de
Langerhans, disminuyendo la sensibilidad e
inmunidad. En la dermis hay disminución del
colágeno (1% anual) y disminución de
fibroblastos con una disminución progresiva del
tejido elástico en la dermis papilar. La
exposición a la radiación ultravioleta produce
inicialmente una infiltración de neutrófilos en la
dermis, esta infiltración es la llave que activa la
liberación de enzimas como la elastasa y la
matrix metaloproteinasa. También hay una
reducción en la capacidad de regeneración del
ADN. Además, existe una reducción en la
microvasculatura cutánea; la radiación
ultravioleta, los rayos infrarrojos y el calor
inducen la angiogénesis.
Los efectos clínicos sobre la piel producida por
las radiaciones ultravioleta en forma crónica se
llaman fotoenvejecimiento, es decir el daño
producido por el sol acelerando el
envejecimiento de la piel. Tabla 1. Este
fenómeno es independiente del envejecimiento
real de la piel, por ello puede ser evitable, y, por
lo tanto, en esta investigación se considera el
conocimiento acerca de la prevención utilizando
el rango de frecuencia de uso de medidas de
protección solar en la última semana, como
sigue: (1 =nunca, 2= rara vez, 3 = menos de la
mitad de las veces, 4 = más de la mitad de las
veces, 5 = casi todo el tiempo y 6 =siempre).
Tabla 1. Clasificación de Fotoenvejecimiento.
Correlación entre las prácticas de exposición solar y el
grado de fotodaño. Panamá. Mayo, 2009. by Jose Manuel
Rios Yuil is licensed under a Creative Commons
Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Unported
License. Permissions beyond the scope of this license may
be available at www.revistamedicocientifica.org.
Hay que tener presente que algunas veces
el fotoenvejecimiento va acompañado de otro
efecto de las RUV que es la fotocarcinogénesis
o la aparición de lesiones premalignas:
queratosis actínica, cuerno cutáneo, queilitis
actínica, enfermedad de Bowen; o lesiones
malignas: carcinoma basocelular, carcinoma
epidermoide, melanoma maligno sobre la piel.
Figura 1. Plataforma de encuesta de Fotoenvejecimiento. https://docs.google.com/forms/d/e/1FAIpQLSfvY0t8h3V
2jjrsx9kyyK32FwpomIQZFqBtSYJe4oUUZwit2w/viewf
orm
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exposición nociva a rayos ultravioleta. Revista de Ingeniería
Biomédica y Biotecnología 2017
Metodología
Se realiza una investigación de tipo prospectiva,
descriptiva y longitudinal, se aplica un
cuestionario de tipo electrónico en alumnos del
Programa Educativo de la Licenciatura en
Terapia Física, para determinar el fototipo de
piel según la clasificación de Fitzpatrick,
fotoenvejecimiento, rango de frecuencia de uso
de medidas de protección solar en la última
semana y conductas de prevención de medio
ambiente (siembra y cuidado de un árbol), así
como: conocimiento del día internacional contra
el cáncer de Piel y día internacional del medio
ambiente. De tal manera que al obtener estos
datos identifiquemos la relación entre tipos de
piel y efectos nocivos de los Rayos ultravioletas
en Universitarios. Se pretende hacer prevención
mediante la impartición de una ponencia de
efectos nocivos de la Radiación Ultravioleta.
Resultados
Se realizó una plataforma para contestar la
encuesta de Fotenvejecimiento en
Universitarios, que estuvo en acceso a partir del
día: 23 de junio del presente año. Integrando los
siguientes aspectos: Clasificación de fototipo o
de Fitzpatrick, Clasificación de los efectos
nocivos de la radiación ultravioleta, mediante la
Clasificación de Fotoenvejecimiento, así como
preguntas acerca de: cuidados del medio
ambiente, día internacional del medio ambiente
y día internacional de prevención de cáncer de
piel, así como: rango de frecuencia del uso de
medidas de protección solar en la última semana.
Se realizó una ponencia abordando el
Tema: Efectos nocivos de la Radiación
Ultravioleta, impartida el día 05 de junio en el
Auditorio de la Universidad Politécnica de
Pachuca, dirigido a alumnos del Programa
Educativo de la Licenciatura en Terapia Física,
con una afluencia de 150 asistentes.
Agradecimientos
A la Directora del Programa Educativo de la
Licenciatura en Terapia Física de la Universidad
Politécnica de Pachuca: Dra. Rosa María Chío
Austria por el apoyo para la realización de la
presente investigación, al Dr. Albino Ahumada
Medina por compartir conocimientos e ideas.
Conclusiones
Los efectos nocivos de las radiaciones
ultravioleta se pueden minimizar y limitar por
medio del cuidado al medio ambiente y
fotoeducación, que involucren medidas de
protección solar, y concientización de cuidados
del medio ambiente, se tienen que tomar en
cuenta todas las edades, incluyendo personas
con nivel académico superior.
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Efecto del ácido acrílico en las propiedades térmicas de polihidroxialcanoatos
obtenidos con hidrolizados de cera de abeja
QUINTANAR-GÓMEZ, Samuel*†, GRACIDA-RODRÍGUEZ, Jorge, ABREU-CORON, Arturo y
TÉLLEZ-JURADO, Alejandro Recibido 14 de Julio, 2017; Aceptado 4 de Septiembre, 2017
___________________________________________________________________________________________________
Resumen
Se realizó la caracterización térmica de
polihidroxialcanoatos de cadena corta y media (scl-
mcl-PHA) sintetizados con Cupriavidus necator a
partir de hidrolizados de cera de abeja (Hw) y ácido
acrílico; para evaluar la influencia de un inhibidor de
la -oxidación en las propiedades térmicas del
biopolímero resultante. Se observó, que el ácido
acrílico favoreció la incorporaron de monómeros de
cadena media (mcm), además de promover un
aumento del % mol de 3-hidroxioctanoato (3HO), 3-
hidroxidecanoato (3HD) y 3-hidroxidodecanoato
(3HDD). Estos resultados fueron confirmados
mediante cromatografía de gases (GC) de scl-mcl-
PHA metanolizados. Las propiedades térmicas de
dichos materiales se vieron afectadas como
consecuencia de la incorporación de los mcm, lo cual
redujo su cristalinidad, dando como resultado un
elastómero con apariencia similar a un hule, además
de disminuir los valores de la temperatura de fusión
(Tm) en más de 100 °C con respecto al PHB y
modificando su temperatura de transición vítrea (Tg).
Cupriavidus necator, Cera de abeja, -oxidación,
DSC, PHA
Abstract
The thermal characterization of short and medium
chain polyhydroxyalkanoates (scl-mcl-PHA)
synthesized with Cupriavidus necator using beeswax
hydrolysates (Hw) and acrylic acid; was performed
to evaluate the influence of an -oxidation inhibitor
in the thermal properties of the biopolymer. It was
observed that acrylic acid favours the incorporation
of medium chain monomers (mcm), in addition to
promoting an increase mol % of 3-hydroxyoctanoate
(3HO), 3-hydroxydecanoate (3HD) and 3-
hydroxydodecanoate (3HDD). These results were
confirmed by gas chromatography (GC) of
methanolized scl-mcl-PHA. The thermal properties
of these materials were affected as a consequence of
the incorporation of mcm, which reduced their
crystallinity, resulting in an elastomer with a similar
appearance to a rubber, in addition to lowering the
values of the melting temperature (Tm) by more than
100 °C with respect to PHB and modifying its glass
transition temperature (Tg).
Cupriavidus necator, Beeswax, -oxidation, DSC,
PHA
___________________________________________________________________________________________________
Citación: QUINTANAR-GÓMEZ, Samuel*†, GRACIDA-RODRÍGUEZ, Jorge, ABREU-CORON, Arturo & TÉLLEZ-
JURADO, Alejandro. Efecto del ácido acrílico en las propiedades térmicas de polihidroxialcanoatos obtenidos con
hidrolizados de cera de abeja. Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología. 2017, 1-1: 12-19.
___________________________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________________________ * Correspondencia al autor (email: [email protected])
† Investigador contribuyendo como primer autor
© ECORFAN-Taiwan www.ecorfan.org/taiwan
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obtenidos con hidrolizados de cera de abeja. Revista de Ingeniería
Biomédica y Biotecnología. 2017
1. Introducción
Diversos trabajos reportan que Cupriavidus
necator (antes Wautersia eutropha > Ralstonia
eutropha > Alcaligenes eutrophus) tiene la
capacidad de producir mcl-PHA a partir del
desarrollo de estrategias de alimentación con
glucosa o fructosa, en combinación con ácidos
grasos (Budde et al, 2011, López-Cuellar et al,
2011, Insomphun et al, 2013, Rathinasabapathy
et al, 2013). López-Cuellar et al, (2011)
sintetizaron un mcl-PHA con monómeros de 3-
hidroxioctanoato (3HO) y 3-hidroxidodecanoato
(3HDD) a partir de C. necator, cultivada con
aceite de canola en una fermentación por lote
alimentado de 3 etapas. Rathinasabapathy et al,
(2013) reportaron la síntesis de un scl-mcl-PHA
con monómeros de 3-hidroxivalerato (3HV), 3-
hidroxihexanoato (3HHx) y 3-hidroxioctanoato
(3HO), enlazados a 3-hidroxibutirato (3HB), a
partir del mismo método de síntesis. Debido a la
naturaleza hidrofóbica de estos sustratos,
algunos estudios han implementado estrategias
de cultivo usando agentes emulsificantes para
incrementar la superficie de contacto y su
biodisponibilidad. Budde et al, (2011)
describieron un método para el desarrollo de R.
eutropha cultivada en aceite de palma a
concentración del 1% en presencia de Tritón X-
100 (concentración de 0.05 %) como agente
emulsificante. Otra estrategia potencial consiste
en inhibir las reacciones de -oxidación de
ácidos grasos para obtener una producción más
efectiva de mcl-PHA (Jiang, 2010).
Insomphun et al, (2013) estudiaron los
efectos de la interrupción de las enzimas (S)-2-
enoil-CoA hidratasa / (S)-3-hidroxiacil-CoA
deshidrogenasa en R. eutropha para obtener
información con respecto al mecanismo de -
oxidación y regular la composición de P(3HB-
co-3HHx) sintetizado a partir de aceite de soja
como fuente de carbono, observando una
disminución en la fracción molar de 3HB (55.8
mmol/L a 32.1 mmol/L) acompañada de un
incremento de la fracción monomérica de 3HHx
(1.1 a 4.3 mmol/L). Jiang, (2010) sintetizó un
mcl-PHA con monómeros de 3-
hidroxinonanoato (3HN) y 3-hidroxiheptanoato
(3HHp) a partir de una cepa de Pseudomonas
putida KT2440 alimentada con ácido nocanóico
como única fuente de carbono. Este estudio
reportó que al adicionar ácido acrílico (0.02 g/L)
como inhibidor de la -oxidación al medio de
cultivo, el copolímero obtenido presentó un
incremento significativo de la fracción de 3HN
(de 68 mol % a 88 mol %) en conjunto a la
concentración de mcl-PHA intracelular.
La -oxidación de ácidos grasos es la ruta
principal para la conversión de los ácidos grasos,
y compuestos estructuralmente relacionados a
precursores de mcl-PHA (Jiang, 2010). Muchos
ésteres de ácidos grasos, además de compuestos
céreos homólogos de diferente longitud de
cadena carbonada se encuentran en la cera de
abeja (Maia y Nunes, 2013). Estos sustratos
pueden ser liberados mediante hidrólisis alcalina
y utilizados como fuente de carbono para la
síntesis de scl-mcl-PHA. En este estudio, se
analizó el efecto del ácido acrílico (Sigma-
Aldrich) como inhibidor de la -oxidación de
ácidos grasos, durante la incorporación de
monómeros de cadena media (mcm) y su
influencia al caracterizar química y
térmicamente los scl-mcl-PHA sintetizados con
una cepa de C. necator alimentada con
fracciones de hidrolizados de cera de abeja
(Hw).
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obtenidos con hidrolizados de cera de abeja. Revista de Ingeniería
Biomédica y Biotecnología. 2017
2. Metodología a desarrollar
Microorganismo y medio de cultivo. C.
necator ATCC 17699 fue propagado en caldo
Luria Bertani (LB) e incubado a 30 °C. El
inóculo para todos los ensayos fue preparado por
transferencia de 100 mL del matraz semilla con
medio LB, incubado por 36 h a 150 rpm y 30 °C
en un agitador rotatorio (Excella E24, New
Brunswick Scientific). El medio de fermentación
de la etapa 1 (cultivo en lote), primer lote
alimentado en etapa 2 (producción de biomasa)
y segundo lote alimentado en etapa 3 (síntesis de
fracciones de mcl-PHA); son descritas en la
Tabla 1. La solución de elementos traza fue
definida por Shang et al, (2004).
Fermentación. Los cultivos fueron realizados
por triplicado, en una unidad de fermentación de
5 L (FA-5000, VICHI). El contenido del matraz
semilla (10% v/v) fue trasferido al medio de
fermentación bajo las mismas condiciones
descritas en la sección previa, el pH 7.0 fue
controlado con NaOH 2M y HCl 0.47M. Las
muestras fueron tomadas cada 3 h para
cuantificar glucosa, sulfato de amonio, biomasa
y PHA. La fermentación fue realizada acorde al
método propuesto por López-Cuellar et al,
(2011). La solución de glucosa de 30 g/L fue
alimentada a 50 mL/h (Chakraborty et al, 2012)
(MasterFlex L/S Model 77200-62) para alcanzar
alta densidad celular. Durante la etapa 3 (síntesis
de fracciones de mcl-PHA bajo limitación de
nitrógeno), se utilizaron las fracciones de Hw
(AG SA: ácido graso en ausencia de ácido
acrílico, AG CA: ácido graso en presencia de
ácido acrílico, OH SA: alcohol céreo en ausencia
de ácido acrílico y OH CA: alcohol céreo en
presencia de ácido acrílico) por separado como
co-sustratos (en conjunto a la glucosa remanente
de las etapas previas) a una concentración de 5
g/L, en presencia de 0.43 g/L Tritón X-100
(Sigma-Aldrich); 3 veces su CMC (Budde et al,
2011) adicionado a 0.33 L/h.
Las fracciones de Hw en ausencia de
ácido acrílico fueron consideradas como
controles negativos. En relación a los
experimentos en presencia de ácido acrílico
(Sigma-Aldrich) se consideró adicionar una
concentración de 3 mM (Jiang, 2010).
Técnicas analíticas. La determinación de peso
seco (X) se realizó por gravimetría; la biomasa
residual (rX) fue definida como la concentración
de X sin PHA (Budde et al, 2011). La
concentración de glucosa fue determinada por el
método de DNS (Barbosa et al, 2005). La
cuantificación de sulfato de amonio fue llevada
a cabo por el método de Weatherburn (López-
Cuellar et al, 2011). La cantidad de hidrolizado
de cera de abeja residual (rHw) fue definido
como la concentración de Hw recuperado por
centrifugado de la muestra; determinada por la
ecuación 1 modificada, descrita por Budde et al,
(2011):
rHw = masa recuperada (V org
V transferido) (
1
V muestra) (1)
Donde, V org es el volumen de la fase
orgánica antes de la extracción. Debido a que la
mezcla de disolventes incluye metanol, no todo
el disolvente permanece en la fase orgánica
después del contacto con el medio acuoso. Se
midió el V org a 15 mL cuando se utilizó
cloroformo/metanol 10:5. El V transferido fue
de 5 mL y el V muestra de 10 mL (volumen
tomado del medio de cultivo).
Purificación de scl-mcl-PHA. Los scl-mcl-
PHA fueron purificados a partir de reflujo con
cloroformo durante 10 minutos y precipitados
con hexano frio (Nurbas y Kutsal, 2004). El
procedimiento fue llevado a cabo tres veces para
obtener un polímero purificado y evitar la
presencia de residuos celulares además de
posibles metabolitos residuales presentes en la
cera de abeja. El solvente excedente fue
removido por evaporación (R-210, BUCHI).
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ABREU-CORON, Arturo y TÉLLEZ-JURADO, Alejandro. Efecto del ácido acrílico en las propiedades térmicas de polihidroxialcanoatos
obtenidos con hidrolizados de cera de abeja. Revista de Ingeniería
Biomédica y Biotecnología. 2017
Caracterización química de scl-mcl-PHA. Se
utilizó un sistema de CG Thermo scientific
modelo Trace 1310, equipado con un detector de
ionización de llama y una columna capilar
Thermo scientific (30 m × 0.32 mm, un espesor
de película de 1.0 m). El gas acarreador fue He
(flujo de 1 mL / min). Las rampas de temperatura
fueron realizadas conforme al método de
Rathinasabapathy et al, (2013). Las muestras de
mcl-PHA fueron metanolizadas previamente
para metilar los monómeros de ácidos grasos
(Impallomeni et al, 2013). Los ésteres metílicos
resultantes fueron identificados por comparación
de sus tiempos de retención con estándares de 3-
hidroxialcanoatos.
Caracterización térmica de scl-mcl-PHA. Los
experimentos de DSC fueron desarrollados
usando un calorímetro de barrido diferencial
(Mettler-Toledo DSC822e). Las muestras (8 mg)
fueron encapsuladas en charolas de aluminio y
calentadas en un rango de temperatura de -80 a
220 °C usando una rampa de calentamiento de
10 °C/min y tomando la segunda corrida como
válida para determinar la temperatura de
transición vítrea (Tg) y de fusión (Tm) (Nurbas
y Kutsal, 2004).
3. Resultados
Caracterización química de scl-mcl-PHA
sintetizados con fracciones de Hw.
En la Tabla 2 se muestran los tiempos de
retención establecidos por CG, para los
estándares de ácidos grasos y los monómeros
hidrolizados de scl-mcl-PHA. La determinación
de las fracciones monoméricas del scl-mcl-PHA
sintetizado con la fracción de alcoholes céreos
de Hw sin ácido acrílico (OH SA), obtuvo una
incorporación de mcm de 1.7 % mol en relación
a la fracción de 3HB (% mol de 98.3.
Al cuantificar los monómeros del scl-mcl-
PHA, sintetizados con la fracción de alcoholes
céreos de Hw y ácido acrílico (OH CA), se
observó una incorporación del 2.55 % mol
correspondiente a 3HV, 0.70 % mol de 3HO y
0.34 % mol de 3HD en relación al 3HB (96.34
% mol). Estos resultados sugieren que la -
oxidación de las fracciones céreas de Hw se lleva
a cabo de manera selectiva, favoreciendo la
asimilación mayoritaria de componentes céreos
de menor tamaño.
El bajo % mol de mcm fue atribuido a la
acumulación previa de PHB, la cual desacelera
la asimilación de la fracción de alcoholes céreos
de Hw suministrada en el medio de cultivo,
acumulando lentamente en forma de scl-mcl-
PHA (Lee et al, 2008). Este efecto fue reportado
por Khanna y Sirvastava, (2007), quienes
observaron que al añadir ácido valérico a un
medio de cultivo fresco, durante la síntesis de
P(HB-co-HV) con glucosa, una gran cantidad
intracelular de PHB acumulado, produjo un
efecto de desaceleración metabólica,
determinado por la mala asimilación del ácido
valérico y bajo % mol de 3HV en el copolímero.
Al comparar el % mol de mcm, a partir de
las fracciones de alcoholes céreos de Hw
asimiladas por C. necator, se puede deducir que
el ácido acrílico interrumpe la actividad de las
enzimas enoil-CoA hidratasa y 3-hidroxiacil-
CoA deshidrogenasa, impidiendo a su vez el
catabolismo de precursores hasta acetil-CoA.
Riedel et al, (2014), mencionaron que la
inhibición química de la β-oxidación en una cepa
de R. eutropha H16 por adición de ácido acrílico
produjo co-polímeros de poli(hidroxibutirato-
co-hidroxihexanoato) [P(HB-co-HHx)] al usar
octanoato de sodio como única fuente de
carbono. Dicho fenómeno fue observado en el
experimento en el scl-mcl-PHA obtenido a partir
de la fracción de alcoholes céreos de Hw en
presencia de ácido acrílico (Tabla 2).
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obtenidos con hidrolizados de cera de abeja. Revista de Ingeniería
Biomédica y Biotecnología. 2017
Los scl-mcl-PHA sintetizados a partir de la
fracción de ácidos grasos de Hw sin ácido
acrílico (AG SA), presentaron una composición
porcentual de 97 % mol de 3HB en conjunto con
un 3 % mol de 3HD.
La determinación de los monómeros del
scl-mcl-PHA sintetizado con ácidos grasos de
Hw y ácido acrílico (AG CA) mostró la
presencia de 3HB (95.9 % mol), 3HO (3.0 %
mol) y 3HD (1.1 % mol). La concentración de
mcm fue similar a la reportada por
Rathinasabapathy et al, (2013); quienes
sintetizaron un scl-mcl-PHA a partir de C.
necator alimentada con fructosa y aceite de
canola en una fermentación por lote alimentado
de 3 etapas, obteniendo una composición
monomérica del 99.81 % mol correspondiente a
3HB, 0.06 % mol de 3HV, 0.09 % mol de 3HHx,
0.04 % mol de 3HO.El scl-mcl-PHA sintetizado
a partir de la fracción de AG SA presentó un 3.0
% correspondiente a 3HDD (superior al obtenido
en el polímero sintetizado a partir de la misma
fuente de carbono en presencia de ácido
acrílico).
Este resultado confirmó que la ausencia de
ácido acrílico favorece la asimilación
intracelular de precursores de mcm; sin
embargo, su presencia en el medio de cultivo,
inhibe la -oxidación ácidos grasos de Hw,
generando una baja incorporación del % mol de
fracciones de mcm en el scl-mcl-PHA resultante.
Dicho comportamiento fue descrito por Guzik et
al, (2014), quienes al comparar la composición
monomérica de mcl-PHA obtenidos a partir de
una cepa de P. putida KT2440 (nativa), y cuatro
cepas de P. putida KT2440 con inserción
inactiva de las enzimas acil-CoA
deshidrogenasas (insPP_1893, nsPP_2039,
nsPP_2039 y insPP_2437), observaron que la
composición monomérica de los polímeros
producidos por las cuatro cepas mutantes, difirió
en menos del 5 % con respecto al mcl-PHA
sintetizado por la cepa nativa de P. putida
KT2440, además de presentar un patrón de
reducción de crecimiento y consecuente
acumulación de PHA cuando se alimentaban
ácidos grasos con longitud de cadena carbonada
de 10 a 14 C.
Impallomeni et al, (2013), reportaron al
sintetizar un mcl-PHA (con 32 % mol de 3HD)
a partir de Pseudomonas aeruginosa alimentada
con aceite de Brassica carinata como fuente de
carbono, (la cual contenía como componente
mayoritario ácido cis-13-docosenoico,
C22H42O2), que el % mol de mcm incorporados
en un mcl-PHA puede ser atribuido a la
complejidad de la fuente de carbono utilizada. Al
comparar los cuatro tratamientos de síntesis de
scl-mcl-PHA a partir de las fracciones de Hw, se
pudo apreciar que el ácido acrílico favorece la
incorporaron de mcm en conjunto a 3HB (Tabla
2), promoviendo un aumento del % mol de 3HO,
3HD y 3HDD, reportados en diferentes trabajos
de síntesis de mcl-PHA a partir de aceites
(López-Cuellar et al, 2011; Impallomeni et al,
2013; Rathinasabapathy et al, 2013).
Este comportamiento sugiere además que
las fracciones céreas de Hw en presencia de
ácido acrílico conforman un mayor % mol de
monómeros de mcl-PHA intracelular antes de
ser degradados a acetil-CoA por efecto de la -
oxidación (Jiang et al, 2010).
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obtenidos con hidrolizados de cera de abeja. Revista de Ingeniería
Biomédica y Biotecnología. 2017
El ácido acrílico es un inhibidor de la
enzima β-cetotiolasa, lo cual genera desviación
de intermediarios en la β-oxidación a PHA
(Riedel et al, 2014). Esto conforma que C.
necator, al ser incapaz de catabolizar las
fracciones de Hw por inhibición de la -
oxidación, acumuló los ácidos grasos de menor
tamaño de las fracciones de Hw como mcm en el
scl-mcl-PHA.
Caracterización térmica de scl-mcl-PHA
sintetizados con fracciones de Hw.
En el Gráfico 1 se muestra el DSC de los scl-
mcl-PHA sintetizados a partir fracciones de Hw
en presencia y ausencia de ácido acrílico, usando
como referencia PHB (Tm de 173.38 °C). El
termograma correspondiente a OH SA presentó
dos valores de Tm (70.19 y 77.35 °C). El
resultado de Tg obtenido en este experimento
(Tabla 3), es reportado para mcl-PHA con
propiedades elastoméricas (Impallomeni et al,
2013). Los valores de Tm y Hm (Tabla 3),
fueron similares a los obtenidos por López-
Cuellar et al, (2011) para un mcl-PHA con
monómeros de 3HV, 3HO y 3HDD. La Tm
sugirió la reducción de recristalización de
monómeros de PHB dispersos debido a la
incorporación del 4.6 % mol de 3HDD (López-
Cuellar et al, 2011).
El termograma del scl-mcl-PHA
sintetizado a partir de OH CA, nuevamente
presentó una señal doble de Tm (Gráfico 1),
atribuida a la recristalización de fracciones
microcristalinas de PHB (López-Cuellar et al,
2011). La Tg y Hm, fueron similares a las
reportadas por Impallomeni et al, (2011) (Tabla
3); para un mcl-PHA como monómeros de
3HHx, 3HO, 3HD, 3HDD y 3-
hidroxitetradecanoato (3HTD) sintetizado a
partir de P. putida alimentada con ácido erúcico
(ácido cis-13-docosenoico, C22H42O2) y
nervónico (ácido cis-15-tetracosenoico,
C24H46O2).
La incorporación de monómeros de 3HB,
3HHx, 3HO y 3HD (en una composición de
47.12 % mol, 3.62 % mol, 21.11 % mol, y 28.14
%, respectivamente), disminuyó la Tm del scl-
mcl-PHA sintetizado con OH CA con respecto
al PHB (Khanna y Srivastava, 2007).
Los valores de Hc en ambos scl-mcl-
PHA sintetizados con OH SA y OH CA fueron
diferentes, relacionándose al aumento del % mol
de mcm incorporados en la estructura del scl-
mcl-PHA (asistido con ácido acrílico) y la
interacción de sus enlaces intermoleculares
(Impallomeni et al, 2011). Los resultados de Tm
scl-mcl-PHA sintetizado con AG SA, se
muestran en la Tabla 3. La disminución de
dichos valores con respecto a otros estudios
sugiere la presencia de un mayor porcentaje de
mcm. Al realizar el enfriamiento del scl-mcl-
PHA, ocurrió una secuencia de transición
exotérmica a 126.17 °C con una Hc de 6.14 J
g-1. Este comportamiento fue descrito por
Impallomeni et al, (2011) quienes lo relacionan
con la capacidad de algunos polímeros para
recristalizar en función al % mol de mcm y los
grupos funcionales presentes en las cadenas
laterales, de mcl-PHA. Los valores de Tm (74.92
y 80.92 °C) y Hm (12.36 J g-1) obtenidos
durante la caracterización térmica del scl-mcl-
PHA sintetizado con AG CA (Tabla 3),
confirmaron la presencia de mcm, debido a que
los mcm influyen directamente en la
disminución de la Tm de mcl-PHA
(Impallomeni et al, 2011). Un ejemplo de este
fenómeno fue descrito por Liu et al, (2011);
quienes alimentaron un cultivo con ácido
decanóico, dodecanóico y tetradecanóico para la
obtención de un mcl-PHA con monómeros de
PHD a partir de P. KTQQ20 con inhibición de la
-oxidación.
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El polímero resultante presentó una
composición de P(16 % mol 3HD-co-84 % mol
3HDD) con una Tm de 78 °C y un Hm de 41 J
g-1, atribuidos a la presencia de monómeros de
3HD y 3HDD.
4. Agradecimientos
Este proyecto se realizó gracias al
financiamiento con clave 373182 CONACYT.
5. Conclusiones
La caracterización térmica de las muestras de
scl-mcl-PHA sintetizados a partir de las
fracciones de Hw, mostró evidencia de
incorporación de mcm en la estructura química
de los scl-mcl-PHA, dando como resultado una
disminución en los valores de Tm y Tg obtenidos
durante el barrido térmico de las muestras con
respecto al PHB. Al comparar las Tc obtenidas
por los scl-mcl-PHA sintetizados en presencia de
ácido acrílico, se confirmó la incorporación de
una mayor cantidad de mcm durante el proceso
de síntesis de scl-mcl-PHA. Estos resultados
sugirieron que el ácido acrílico, favoreció la
asimilación de los componentes céreos de Hw,
con lo cual C. necator aumentó el % mol de mcm
-
oxidación.
6. Referencias
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Artículo Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología Septiembre 2017 Vol.1 No.1 20-25
Influencia del método de obtención del extracto de perfolla de maíz en la biosíntesis
de nanoestructuras de AgCl/Ag y fitotoxicidad en plántulas de Latuca sativa L. var.
longifolia YAÑEZ-CRUZ, Maria Guadalupe†, VILLANUEVA-IBÁÑEZ, Maricela*, ÁLVAREZ-GARCÍA,
Rocío, FLORES-GONZÁLEZ, Marco Antonio, TOVAR-JIMÉNEZ, Xochitl, CADENA-RAMÍREZ,
Arturo y HERNÁNDEZ-PÉREZ, María de los Ángeles Recibido 30 de Julio, 2017; Aceptado 29 de Agosto, 2017
___________________________________________________________________________________________________
Resumen
En la obtención de nanopartículas (NPs) por métodos
verdes, los extractos de plantas han demostrado tener
la capacidad de fungir como agentes reductores de
varios iones debido a los metabolitos presentes en
ellas. Las NPs a base de plata tienen mayores
aplicaciones en la industria dadas sus propiedades
antimicrobianas, lo que ha propiciado una rápida
proliferación de éstas en el ambiente siendo
necesario evaluar su impacto ya que las
características fisicoquímicas de las NPs, dictadas en
parte por su método de obtención, tienen estrecha
relación con su actividad biológica y
comportamiento en el medio. En este trabajo se
estudió la influencia del método de obtención del
extracto y el volumen del mismo, en la obtención de
NPs de AgCl/Ag estables y dispersas, así como la
evaluación de su toxicidad en L. sativa. Los
resultados dieron a conocer que la manera en la que
se extraen los metabolitos influye directamente en la
capacidad de estabilización de las NPs. La adición
de las mismas inhibió la germinación de semillas y
completa formación de estructuras esenciales que les
permitirá crecer y desarrollarse, tal efecto se atribuyó
a la absorción y distribución de partículas en
diferentes tejidos de la plántula.
Biosíntesis, Nanopartículas, Lactuca sativa,
Ensayos in vitro
Abstract
In obtaining nanoparticles (NPs) by green methods,
plant extracts have been shown to have the ability to
function as reducing agents of various ions due to the
metabolites present in them. The silver based NPs
have greater applications in the industry due to their
antimicrobial properties, which has led to a rapid
proliferation of these in the environment, being
necessary to evaluate their impact since the
physicochemical characteristics of NPs, dictated in
part by their method of obtaining, are closely related
to their biological activity and behavior in the
environment. In this work the influence of the
extraction method and the volume of the extract was
studied, in the production of stable and dispersed
AgCl/Ag NPs, as well as the evaluation of its toxicity
in L. sativa. The results showed that the way in which
the metabolites are extracted directly influences the
stabilization capacity of NPs. The addition of the
same inhibited the germination of seeds and
complete formation of essential structures that will
allow them to grow and develop, such effect was
attributed to the absorption and distribution of
particles in different tissues of the seedling.
Biosynthesis, Extract, nanoparticles, Lactuca
sativa, In vitro assays
___________________________________________________________________________________________________
Citación: YAÑEZ-CRUZ, Maria Guadalupe†, VILLANUEVA-IBÁÑEZ, Maricela*, ÁLVAREZ-GARCÍA, Rocío, FLORES-
GONZÁLEZ, Marco Antonio, TOVAR-JIMÉNEZ, Xochitl, CADENA-RAMÍREZ, Arturo y HERNÁNDEZ-PÉREZ, María de los
Ángeles. Influencia del método de obtención del extracto de perfolla de maíz en la biosíntesis de nanoestructuras de AgCl/Ag y fitotoxicidad
en plántulas de Latuca sativa L. var. longifolia. Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología. 2017, 1-1: 20-25
___________________________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________________________ * Correspondencia al autor (email: [email protected])
† Investigador contribuyendo como primer autor
© ECORFAN-Taiwan www.ecorfan.org/taiwan
21
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YAÑEZ-CRUZ, Maria Guadalupe, VILLANUEVA-IBÁÑEZ, Maricela,
ÁLVAREZ-GARCÍA, Rocío, FLORES-GONZÁLEZ, Marco Antonio, TOVAR-
JIMÉNEZ, Xochitl, CADENA-RAMÍREZ, Arturo & HERNÁNDEZ-PÉREZ,
María de los Ángeles. Influencia del método de obtención del extracto de perfolla
de maíz en la biosíntesis de nanoestructuras de AgCl/Ag y fitotoxicidad en
plántulas de Latuca sativa L. var. longifolia. Revista de Ingeniería Biomédica y
Biotecnología. 2017
Introducción
Las nanopartículas (NPs) a base de plata (Ag)
son ampliamente requeridas debido a sus
propiedades antimicrobianas (Silambarasan &
Abraham, 2013), y sus métodos de obtención
van desde los físicos hasta los químicos. En la
agricultura se está investigando su uso en la
conservación de frutos y para el control de
plagas de insectos o como fungicida (Sekhon,
2014), dando lugar al contacto con cultivos de
importancia, por lo que es vital estudiar su efecto
sobre éstos. Un método alternativo de obtención
de este tipo de partículas es la biosíntesis, donde
el uso de extractos de plantas puede ser
ventajoso sobre otros procesos biológicos que
involucran el mantenimiento de cultivos
celulares; no obstante, debido a la naturaleza
compleja y vasta de los metabolitos presentes, es
difícil identificar un único compuesto
responsable de la formación de NPs. La
interacción de biomoléculas tales como
terpenos, ácidos orgánicos, quinonas,
flavonoides, polisacáridos, proteínas y
alcaloides da lugar al proceso de reducción de
iones metálicos y estabilización de las NPs,
donde se ha reportado que la disponibilidad de
éstas es uno de los factores que interviene en la
forma y tamaño de NPs obtenidas (Gan & Li,
2012). En este contexto, en el presente trabajo se
estudió la formación de NPs mediante extractos
de perfolla de maíz obtenidos por tres diferentes
vías: infusión, decocción y molienda. Se eligió
aquel que diera lugar a estructuras de tamaños
nanométricos con las que se realizaron ensayos
sobre su efecto en L. sativa, cultivo de
importancia para la alimentación humana.
Metodología a desarrollar
Preparación de los extractos empleados en la
biosíntesis de NPs
Para la obtención de los extractos se usaron hojas
frescas (perfolla) de Zea mays que fueron
adquridas en un mercado local. Además del
extracto crudo preparado como se indica en
(Villanueva et al., 2015), se prepararon extractos
por infusión y decocción de las hojas donde el
tiempo de reposo y cocción para ambos fue de
10 minutos. Todos los extractos obtenidos
fueron filtrados con membrana de 0.45 µm y se
almacenaron hasta su uso a 4°C.
Biosíntesis de AgCl/Ag NPs
Se partió del protocolo establecido por
Villanueva et al. (2015), donde la sal precursora
utilizada fue nitrato de plata (AgNO3) adquirida
de Sigma-Aldrich y como disolvente se utilizó
agua desionizada. La síntesis se efectuó al poner
en contacto un volumen determinado de una
solución de AgNO3 con 5 mL de cada uno de los
extractos preparados en 3 diferentes viales; el
volumen final se ajustó con agua desionizada
hasta obtener una concentración final de 2 mM
de AgNO3 en el medio. Los viales se
mantuvieron bajo agitación constante a 25 °C,
tomando muestras en intervalos de media hora
durante 4h para dar seguimiento a la formación
de NPs. Luego de realizar la caracterización de
las NPs obtenidas se eligió el extracto que dio
lugar a estructuras de menor tamaño, seguido del
estudio del efecto de la variación de su volumen
en la obtención de las NPs, empleando 1, 3, 5, 8
y 12 mL. Concluidas 4h de síntesis se
recuperaron las partículas centrifugando a 8000
rpm durante 15 min y con lavados por triplicado
al precipitado. Los precipitados se redispersaron
en agua desionizada al volumen inicial para los
posteriores experimentos.
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JIMÉNEZ, Xochitl, CADENA-RAMÍREZ, Arturo y HERNÁNDEZ-PÉREZ,
María de los Ángeles. Influencia del método de obtención del extracto de perfolla
de maíz en la biosíntesis de nanoestructuras de AgCl/Ag y fitotoxicidad en
plántulas de Latuca sativa L. var. longifolia. Revista de Ingeniería Biomédica y
Biotecnología. 2017
Caracterización de los extractos y las AgCl/Ag
NPs biosintetizadas.
Los extractos se caracterizaron cualitativamente
mediante marcha fotoquímica para conocer el
tipo de metabolitos presentes. La banda de
absorción UV-Vis característica de las NPs de
interés se identificó mediante la adquisición de
los espectros correspondientes durante el
transcurso de la síntesis en un espectrofotómetro
Cole Parmer 2800. Se analizaron los tres
diferentes extractos mediante espectroscopia
FT-IR antes y después de realizada la síntesis
con un espectrofotómetro Perkin Elmer, modelo
System 2000, para la identificación de grupos
funcionales presentes. El tamaño de partícula en
suspensión se determinó empleando un
analizador Nanotrac Wave. La morfología y la
composición elemental de las partículas se
observó mediante un microscopio marca JEOL
JSM6701F equipado con un Espectrómetro de
Energías Dispersivas de rayos X. La naturaleza
cristalina del material se corroboró mediante un
difractómetro Bruker-D8 (CuKα=1.5406 Å).
Finalmente, la determinación de la
concentración de Ag se realizó en un equipo de
absorción atómica modelo Agilent 240FS AA.
Evaluación in vitro del efecto de las NPs
biosintetizadas sobre la germinación de L.
sativa.
Se emplearon semillas de L. sativa
adquiridas con Hydro Enviroment, con un
porcentaje de germinación conocido. Los
ensayos se llevaron a cabo mediante los
protocolos establecidos en las normas ISTA
(2010), empleando soluciones stock de las NPs
preparadas mediante el extracto crudo y por
infusión, con las que se realizaron diluciones
logarítmicas para establecer los efectos sobre la
germinación de las semillas. Los resultados
fueron analizados mediante la prueba de Tukey,
empleando el programa NCSS (Windows Vista,
Versión 0.7.1.17, Kaysvillve, Utah), reportando
diferencias estadísticamente significativas
respecto al control cuando p < 0.001.
Resultados
En la Figura 1 (a), se muestran los espectros FT-
IR de los extractos analizados. Los picos de
absorción alrededor de 3382, 3368, 3337, 1384
y 1256 cm-1 corresponden a vibraciones de
estiramiento de alcoholes, las bandas a 2978,
2939, 2930 y 2888 cm-1 pertenecen a vibraciones
de estiramiento de alcanos, las bandas a 1635 y
1632 cm-1 son características de vibraciones de
estiramiento de alquenos, las vibraciones de
estiramiento de alcoholes primarios se
presentaron a 1056, 1053 y 1050 cm-1, mientras
que los picos a 923, 921, 871, 866, 818 y 777
cm1 pertenecen a las vibraciones de flexión de
alcanos. Estas bandas características presentes
en los tres extractos hacen suponer
principalmente la presencia de carbohidratos.
Las pruebas fitoquímicas dieron resultados
positivos solamente para carbohidratos y
azúcares reductores, lo que coincide con lo
observado por espectroscopia FT-IR y lo
reportado en la literatura acerca de la
composición química del extracto, que consiste
en celulosa, hemicelulosa y lignina (Gan & Li,
2012), los cuales pueden actuar en la reducción
de los iones Ag y estabilización de las NPs.
23
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ISSN: 2523-6857
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de maíz en la biosíntesis de nanoestructuras de AgCl/Ag y fitotoxicidad en
plántulas de Latuca sativa L. var. longifolia. Revista de Ingeniería Biomédica y
Biotecnología. 2017
Los resultados de la síntesis de NPs con los
diferentes extractos se presentan en la figura 1
(b). Las bandas de absorción características de
las NPs se observan a 354 nm para Ag, 468 y 506
nm que corresponden a AgCl, tal como se
reporta en la literatura (Seungwook et al., 2010;
Karuppiah & Rajmohan, 2013). El máximo de
absorción para el extracto crudo mostró un
desplazamiento hacia longitudes de onda
mayores, lo cual se puede deber a una
aglomeración de las partículas (Karuppiah &
Rajmohan, 2013), este efecto se corroboró con
los análisis por granulometría, donde se obtuvo
una sola distribución y menor tamaño de
partícula (204 nm) en el extracto por infusión, en
comparación con el extracto crudo (687 nm) y el
obtenido por decocción (bimodal) 72 y 486 nm;
a partir de estos resultados se eligió el extracto
obtenido por infusión para las posteriores
pruebas en L. sativa.
Los espectros UV-Vis presentados en la
figura 2 (a) corresponden a la variación del
volumen de extracto añadido en la síntesis. El
máximo de absorción, característico a la
resonancia del plasmón superficial de las Ag y
AgCl NPs a 354 y 443 nm respectivamente, se
desplaza hacia longitudes de onda mayores (480
nm) conforme aumenta el volumen de extracto.
La literatura reporta que este efecto se atribuye
al aumento y coexistencia de ambas partículas
(Sahayaraj et al., 2012) así como a un probable
incremento en la viscosidad del sistema o baja
concentración de metabolitos encargados de la
estabilización, ya que por debajo o sobre los 3
mL de extracto, la moda obtenida es de 486 nm.
Fig. 1. (a) Espectros FT-IR de los extractos acuosos
de la perfolla de Zea mays obtenidos por infusión,
decocción y molienda. (b) Espectros UV-Vis de la
síntesis de AgCl/Ag NPs a partir de cada uno de los
extractos.
Fig. 2. (a) Espectros UV-Vis de la síntesis de NPs de
AgCl/Ag a partir de 1-10 mL del extracto obtenido por
infusión. (b) Difracción de rayos X, que corrobora la
composición y estructura cristalina de las NPs
sintetizadas.
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plántulas de Latuca sativa L. var. longifolia. Revista de Ingeniería Biomédica y
Biotecnología. 2017
Mediante el análisis de difracción de rayos
X se corroboró la coexistencia y cristalinidad de
ambas partículas (figura 2b).
Las micrografías (figuras 3a y 3b),
muestran aglomerados de NPs de morfología
semi-esférica, con tamaños de 144 nm,
conformados por partículas más pequeñas de
alrededor de 30-50 nm. El análisis estadístico
realizado para observar efecto en plántulas de L.
sativa (figura 3b) a 7 días de germinación,
mostró que a partir de 1.3 mg/L de NPs
adicionadas se tiene un efecto adverso sobre sus
características fisiológicas, en comparación con
el control, impidiendo su posterior desarrollo y
crecimiento.
Conclusiones
El método por infusión para la extracción de
metabolitos de la perfolla de Zea mays, permitió
obtener partículas estables y dispersas, donde los
carbohidratos y azúcares reductores son los
principales reponsables de dicho proceso. A
partir de 3 mL del extracto, fue posible sintetizar
AgCl/Ag NPs con tamaños de partícula de 30-50
nm, siendo 1.3 mg/L la concentración que
ocasiona un decremento significativo en la
elongación de radícula, hipocótilo y contenido
de biomasa respecto al control.
Agradecimiento
Los autores agradecen a CONACYT por la beca
de MGYC (No. 332012) para realizar estudios
de posgrado, al M.M. Roel González Montes de
Oca (LaNBA-UPP) por las observaciones
realizadas en MEB.
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Figura 3. a) y b) Micrografías de NPs a partir
de 3 mL del extracto por infusión, c) Plántulas
de L. sativa a los 7 días de germinación (Las
plántulas de la izquierda en la caja Petri: 0 mg/L,
a la derecha las plántulas por separado: 130
mg/L).
a)
b)
c)
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Artículo Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología Septiembre 2017 Vol.1 No.1 26-34
Obtención de extractos celulolíticos a partir de Pleurotus ostreatus empleando como
sustrato lirio acuático
TOVAR-JIMÉNEZ, Xochitl*†, TELLEZ-JURADO, Alejandro, LÓPEZ-MEDINA, Emma Nallely,
FAVELA-TORRES, Ernesto y HERNÁNDEZ-ALDANA, Ithzmalzin Recibido 3 de Julio, 2017; Aceptado 19 de Agosto, 2017
___________________________________________________________________________________________________
Resumen
El lirio acuático se considera una plaga ya que reduce
la cantidad de oxígeno disuelto e impide el paso de
luz evitando el crecimiento de la flora y fauna
acuática, sirve como nicho para la reproducción de
mosquitos los cuales son vectores de enfermedades.
Las alterativas de solución ha dichos problemas van
desde la erradicación hasta el control y manejo, sin
embargo, los altos costos ocasionan que no se aplique
de forma permanente. Una opción es el
aprovechamiento de la biomasa del lirio cuya
composición química incluye lignina (3%), celulosa
(18%) y hemicelulosa (40-55%), la cual pueden ser
utilizada para obtener productos de valor agregado
como las enzimas, en este sentido, las enzimas
celulolíticas de los hongos como Pleurotus ostreatus
son las más importantes desde el punto de vista
industrial, debido a que su actividad es mayor que la
de las obtenidas de levaduras y bacterias. Por lo antes
mencionado, el objetivo del trabajo fue obtener un
extracto celulolítico a partir de P. ostreatus
empleando como sustrato lirio acuático (hoja y
bulbo) por medio de fermentación en medio sólido.
Se encontró que la mayor actividad celulolítica para
hoja y bulbo se presenta al cabo de 12 h de
incubación.
Lirio acuático, Pleurotus ostreatus, actividad
celulolítica
Abstract
The water hyacinth is considered a pest species
because it reduces the amount of dissolved oxygen
and prevents the passage of light avoiding the growth
of aquatic flora and fauna, serves as a niche for the
reproduction of mosquitoes, which are vectors of
diseases. Alternative solutions to such problems
range from eradication to control and management;
however, high costs do not apply permanently. One
option, is the use of water hyacinth biomass whose
chemical composition includes lignin (3%), cellulose
(18%) and hemicellulose (40-55%), which can be
used to obtain value added products such as enzymes,
In this sense, the cellulolytic enzymes of fungi like
Pleurotus ostreatus are the most important from the
industrial point of view, because their activity is
greater than that obtained from yeasts and bacteria.
The aim of the work was to obtain a cellulolytic
extract from P. ostreatus using as substrate water
hyacinth (leaf and bulb) by solid-state fermentation.
It was found that the highest cellulolytic activity with
leaf and bulb like substrate occurs after incubation
for 12 h.
Water hyacinth, Pleurotus ostreatus, cellulolytic
activity
___________________________________________________________________________________________________
Citación: TOVAR-JIMÉNEZ, Xochitl*†, TELLEZ-JURADO, Alejandro, LÓPEZ-MEDINA, Emma Nallely, FAVELA-
TORRES, Ernesto & HERNÁNDEZ-ALDANA, Ithzmalzin. Obtención de extractos celulolíticos a partir de Pleurotus
ostreatus empleando como sustrato lirio acuático. Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología. 2017, 1-1: 26-34
___________________________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________________________* Correspondencia al autor (email: [email protected])
† Investigador contribuyendo como primer autor
© ECORFAN-Taiwan www.ecorfan.org/taiwan
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celulolíticos a partir de Pleurotus ostreatus empleando como sustrato
lirio acuático. Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología. 2017
Introducción
El lirio acuático (Eichhornia crassipes) es una
planta libre flotadora perteneciente a la familia
de las Pontederiaceae, proveniente de Brasil, a
finales de 1800 fue introducida a América del
Norte como una planta ornamental, en África a
principios de 1900 y en Europa en 1930, ahora
está naturalizada en más de 50 países de América
Central, Asia, Australia y Nueva Zelanda. La
presencia de lirio acuático se debe
principalmente a las combinaciones de
características biológicas únicas de la planta, al
calentamiento global por el efecto invernadero y
a los procesos acelerados de eutrofización (Yan,
Song & Guo, 2017).
El lirio puede medir hasta 1 m de altura,
está formada por hojas dispuestas en una roseta
basal, pecíolos cortos/globosos cuando se trata
de plantas jóvenes o largos/cilíndricos en el caso
de plantas maduras; tiene raíces fibrosas y un
tallo horizontal llamado rizoma o estolón que
conecta varios individuos entre si (Figura 1). Su
productividad anual promedio es de 50 kg/m2
(peso seco); un grupo de plantas de tamaño
mediano puede contener hasta dos millones de
individuos por ha, con un peso aproximado de
270 a 400 t. Por su abundancia en cuerpos de
agua, además de su incontrolable y rápido
crecimiento, el lirio ocasiona daños hacia
actividades recreativas e industriales, así mismo
genera problemas de salud humana y a los
ecosistemas. Entre los efectos negativos más
importantes pueden citarse la pérdida de agua de
cuerpos de agua por transevaporación, la
disminución de oxígeno disuelto, la alteración
irreversible de ecosistemas, además de ser
nichos para la reproducción de mosquitos
vectores de enfermedades (Rezania, Ponraj, Din,
Songip, Sairan & Chelliapan, 2015).
Se estima que en México existe alrededor
de 40,000 ha con presencia de lirio, cubriendo
desde 10 hasta 100 % del espejo de agua. El
manejo de la planta representa problemas
debido, a su alto contenido de humedad (~95 %),
lo que encarece su transporte y disposición
(Martínez & Gómez, 2007).
Existen tres estrategias para el manejo de
la planta: 1) extracción mecánica la cual permite
mantener limpios los cuerpos de agua, sin
embargo, la extracción, transporte y disposición
final encarecen el proceso por lo que esta
estrategia no se aplica de forma permanente. En
este sentido, dependiendo del interés socio-
económico de cada cuerpo de agua, hay
programas permanentes de extracción mecánica,
un ejemplo de ello son los canales y presas
destinadas a actividades recreativas, como
Xochimilco o la Presa San Antonio de Huasca de
Ocampo, Hgo., en donde la presencia de lirio
representa un riesgo para los motores; 2) El
control biológico con hongos filamentosos
(Cercospora piaropi y Acremonium zonatum) y
artrópodos (Neochetina bruchi y N. eichhorniae)
ha dado buenos resultados en México y otros
países; sin embargo, tanto por los costos del
tratamiento como por el impacto de las
condiciones climáticas (temperatura, lluvia,
corrientes de agua y luminosidad) sobre la
efectividad del tratamiento, esté método no se
aplica de forma permanente como método de
control. 3) El uso de herbicidas como diquat,
glifosato y ácido 2,4-dicloro fenoxiacético para
el control de malezas; no obstante, su aplicación
implica diversos grados de toxicidad para
especies endémicas de peces y plantas, así como,
para hortalizas y cultivos agrícolas. Aunque los
herbicidas se utilizan en el mundo para el control
de malezas, su uso es cada vez más restringido
(Rezania et al., 2015; Martínez & Gómez, 2007).
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celulolíticos a partir de Pleurotus ostreatus empleando como sustrato
lirio acuático. Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología. 2017
A pesar de las numerosas propuestas para
la erradicación y manejo del lirio, la excesiva
presencia de la planta sigue afectando
numerosos cuerpos de agua, canales y sistemas
de drenaje, provocando problemas ecológicos,
económicos y de salud. Por su naturaleza fibrosa
y su alto contenido de agua, energía y proteína ,
el lirio puede usarse en una variedad de
aplicaciones (Jongmeesuk,
Sanguanchaipaiwong & Ochaikul, 2014).
Se ha determinado que la biomasa del lirio
acuático es capaz de generar bio-productos, es
decir, abono orgánico, bioles y biogás, mediante
la implementación de biodigestores. También en
algunos estudios se propone al lirio acuático
como fitorremediador, captando metales
pesados presentes en el agua, sin embargo,
depende del grado de contaminación, la
disponibilidad del metal para su absorción y la
interacción de la planta con su hábitat (Rai,
2009).
En algunos lugares lo utilizan como
alimento para animales y fertilizante orgánico
(Tham, 2012). Por otra parte, la biomasa del lirio
acuático puede ser empleada para obtener
productos de valor agregado como por ejemplo
enzimas a partir de microorganismos que
utilizan como sustrato la celulosa, hemicelulosa
y lignina, aprovechando la composición química
de la pared celular del lirio (Jongmeesuk,
Sanguanchaipaiwong & Ochaikul, 2014).
Partícularmente, las celulasas como su
nombre lo indica, son capaces de hidrolizar la
celulosa, homopolímero compuesto por
unidades de glucosa unidas mediante un enlace
glicosídico β-1,4. Estas enzimas están
clasificadas de acuerdo con su sitio de acción en
el sustrato celulósico y se dividen en tres grandes
grupos:
Endoglucanasas (EnG), exoglucanasas o
también conocidas como celobiohidrolasas
(ExG) y las β-glucosidasas (BG) que hidrolizan
celobiosa y oligosacáridos solubles, siendo la
glucosa el resultado final de la acción
degradativa del complejo celulolítico sobre el
polímero de celulosa (Gurgel, Marabezi, Ramos
& Curvelo, 2012).
Por otra parte, los hongos son los
principales microorganismos degradadores de
los residuos lignocelulósicos, siendo los más
rápidos y eficientes para esto, los basidiomicetos
ya que tienen sistemas ligninolíticos, los cuales
se dividen en tres grupos, con base en la
pudrición que generan en la madera: hongos de
podredumbre blanda, parda y blanca (Hatakka &
Hammel, 2011; Elisashvili, Kachlishvili,
Tsiklauri, Metreveli, Khadziani & Agatos,
2011).
En este sentido, Pleurotus ostreatus es un
hongo saprofito o parásito débil que pertenece al
grupo de podredumbre blanca, ya que degrada
preferentemente a la lignina de las plantas,
usando enzimas oxidativas extracelulares para
romper este biopolímero altamente recalcitrante.
P. ostreatus es capaz de producir un complejo
enzimático hidrolítico en distintos residuos
lignocelulósicos y bajo diferentes estrategias de
cultivo. El micelio de este basidiomiceto puede
crecer en una temperatura entre 0 y 35 °C, con
un óptimo de 30 °C, y en un intervalo de pH
entre 5.5 y 6.5. Se ha observado que después de
cosechar los cuerpos fructíferos de P. ostreatus,
en los materiales usados como sustratos las
cantidades finales de hemicelulosa, celulosa y
lignina se han reducido en un 80 % sugiriendo
que todos los materiales que contienen estos
compuestos, pobres en nitrógeno pueden ser
usados como como fuente de alimento para el
hongo (Vaca, Izurieta & Espín, 2014; Sánchez,
2009).
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celulolíticos a partir de Pleurotus ostreatus empleando como sustrato
lirio acuático. Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología. 2017
Metodología a desarrollar
Aislamiento y crecimiento de P. ostreatus
P. ostreatus se aisló a partir del cuerpo fructífero
de una seta, en placas petri con agar papa
dextrosa (PDA y gentamicina (20 mg/2 mL) 50
µL de antibiótico /20 mL de medio de cultivo)
para evitar el crecimiento de bacterias, se incubó
por 7 días a 26 °C ± 1 °C. Al cabo de este tiempo
se observó microscópicamente.
Cinética de producción de actividad
celulolítica de P. ostreatus
Se realizó una cinética de producción de
actividad celulolítica de P. ostreatus a 26 ± 1°C
en medio líquido el cual estaba conformado de:
glucosa (10.5 g/L), extracto de levadura (5.0
g/L), (NH4)2SO4 (2.0 g/L), Na2HPO4 (0.5 g/L),
MgSO4 (0.5 g/L), Ca3(PO4)2 (0.3 g/L), FeSO4
(0.02 g/L), ZnSO4 (0.02 g/L), MnSO4 (0.02 g/L),
CuSO4 (0.25 g/L) y gentamicina (125 µL). El
cultivo se agitó a 150 r.p.m. y cada 12 h se tomó
muestra para determinar la actividad celulolítica,
esto con la finalidad de determinar el tiempo de
incubación en el cual se presenta mayor
actividad celulolítica.
Obtención del extracto crudo enzimático
El extracto crudo enzimático (ECE) se obtuvo a
partir de un cultivo de P. ostreatus de 12 h,
tomando en cuenta las condiciones establecidas
en la cinética de producción de actividad
celulolítica de dicho hongo, el cultivo líquido se
centrifugo a 4000 rpm por 10 min y el
sobrenadante se consideró como ECE-12h.
Fermentación en medio sólido de P. ostreatus
empleando como sustrato lirio acuático
Para llevar a cabo la fermentación en medio
sólido (FMS), se pesaron 0.2 g de lirio acuático
(hoja o bulbo) en tubos de ensaye y se ajustó el
contenido de humedad al 70 %, para
posteriormente esterilizar a 120 ºC por 30 min y
adicionar 0.5 mL de una solución de sales
minerales [NaNO3 (80 mg/L), MgSO4 (0.02
g/L), K2HPO4 (0.5 g/L,) y KCl (10 mg/L)]. Con
la finalidad de determinar que tipo de sustrato e
inoculación permitia obtener mayor actividad
celulolítica se inocularon con 1.2 mL del ECE-
12 h 45 tubos de ensaye que contenían hoja y 45
tubos de ensaye que tenian bulbo. De igual
forma, a 45 tubos de ensaye con hoja y 45 tubos
de ensaye con bulbo, se les adicionó un
fragmento de 1 cm2 de micelio-agar de P.
ostreatus de 7 días de crecimiento. Todos los
tubos se incubaron a una temperatura de 26 °C ±
1 °C por 15 días, cada 24 h se tomó una muestra
para determinar la actividad celulolítica y
proteína extracelular. Cabe mencionar que todos
los experimentos se realizaron por triplicado.
Determinación de la actividad celulolítica por
el método del ácido 3-5, dinitrosalicílico
Se colocó en un tubo de ensayo 450 μL de
carboximetilcelulosa (CMC) al 0.2 % como
sustrato, previamente disuelto en buffer de
acetatos (100 mM, pH 5.3), se adicionó 50 μL
del ECE-12h e incubó a 40 °C por 20 min.
Transcurrido el tiempo, se añadió 750 μL de
DNS y llevó a ebullición durante 10 min en baño
María, seguido de un enfriamiento en baño de
hielo, hasta leer su absorbancia a una longitud de
onda de 640 nm. Se calculó la actividad
enzimática restando el valor de la absorbancia
obtenida de los azúcares reductores generados.
Como blanco de la reacción se utilizó agua
destilada que sustituye la CMC 0.2 % y se trató
bajo las mismas condiciones.
30
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celulolíticos a partir de Pleurotus ostreatus empleando como sustrato
lirio acuático. Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología. 2017
A partir de una curva estandar utilizando
glucosa como patrón, se determinó la cantidad
de enzima requerida para liberar 1 μmol de
celulosa por minuto bajo las condiciones de
reacción y se expresaron los resultados en
unidades de actividad (UA), (Dhillon, Kaur,
Brar &Verma, 2012).
Determinación del contenido de proteína
extracelular
A 300 μL de la muestra (ECE-12 o extracto
micelio-agar) se adicionó 1 mL del reactivo C
preparado al instante (A (NaOH 0.4 %;
KNaC4H4O6·4H2O 0.16 %; Na2CO3 2 %; SDS 1
%) y B (CuSO4 5 H2O 4 %); [100:1 v/v]), se
incubó 15 min a 25 °C para después adicionar
100 μL de Fenol Folin-Ciocalteu con agua (1:1
v/v), se incubó 30 min a 37 °C, y leyó la
absorbancia a 660 nm, la concentración de
proteína se calculó a partir de una curva patrón
preparada con albúmina bovina sérica (BSA) en
concentraciones de 0 a 120 μg/mL (Lowry,
Rosengrough, Farr & Randall, 1951; Peterson,
1977)
Resultados
Aislamiento y crecimiento de P. ostreatus
En la Figura 2 se muestran las imagenes de
Pleurotus ostreatus luego de 7 días de cultivo a
25°C. Macroscópicamente el cultivo presentó
esporas y desarrollo de micelio blanco
algodonoso con abundante micelio aéreo y con
formación de anillos desde el centro de la caja
hacia su periferia. Así mismo,
microscópicamente se observaron
basidiosporas.
Cinética de producción de actividad
celulolítica de P. ostreatus
En la Gráfico 1 se muestran los resultados de la
cinética de producción de enzimas celulolíticas
de P. ostreatus, donde se observa que a las 12 h
el extracto enzimático presenta mayor actividad
enzimática, por lo cual para la FMS se empleó
un cultivo de 12 h de P. ostreatus.
Fermentación en medio sólido de P. ostreatus
empleando como sustrato lirio acuático
En la Gráfico 2 se muestran los resultados de la
actividad celulolítica y de proteína extracelular
del extracto enzimático obtenido a partir del
cultivo de 12 h de P. ostreatus, donde se observa
que la mayor producción de celulasas se obtiene
a las 24 h (12.83 UA/gms para hoja (Gráfico 2a)
y 9.92 UA/gms para bulbo (Gráfico 2b), así
mismo, el máximo contenido de proteína
extracelular se presenta en este tiempo.
En la Gráfico 3 se muestran los resultados
de la actividad celulolítica y de proteína
extracelular del extracto enzimático obtenido
con micelio-agar de P. ostreatus. Donde se
observa el mismo comportamiento que cuando
se empleo un ECE-12 h de P. ostreatus, la mayor
producción de enzimas fue a las 24 h, en hoja se
obtuvo 9.15 UA/gms (Gráfico 3a) y 6.56
UA/gms en bulbo (Gráfico 3b). En cuanto al
contenido de proteína extracelular, se obtiene la
mayor cantidad al tiempo de 24 h de incubación.
En general, las enzimas xilanolíticas y
celulolíticas se expresan simultáneamente
durante la fermentación en fase sólida en
sustratos agrícolas (Membrillo, Sánchez,
Meneses, Favela & Loera, 2011), esto se debe a
que el hongo causa modificaciones en la
estructura de la lignocelulosa, lo cual estimula la
liberación secuencial de enzimas extracelulares.
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celulolíticos a partir de Pleurotus ostreatus empleando como sustrato
lirio acuático. Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología. 2017
La degradación de la celulosa por hongos
requiere de un complejo celulolítico de al menos
tres enzimas que actúan en forma sinérgica: β-
1,4 endoglucanasa, β-1,4 exoglucanasa y β-
glucosidasa (Hatakka & Hammel, 2010;
Elisashvili et al., 2011; Sánchez, 2009). P.
ostreatus es un hongo que degrada
eficientemente la lignina y celulosa, ya que
produce durante su crecimiento enzimas
lignocelulolíticas. por lo que, P. ostreatus es
capaz de ocasionar cambios en la composición
química del lirio acuático, reduciendo las
fracciones fibra detergente neutro, fibra
detergente ácido, celulosa y hemicelulosa (Sun,
Zhang & Zhang, 2004; Castro, De Aguiar-Paiva,
Souza-Días & Dos-Santos, 2004; Fazaeli, Azizi,
Jelan & Mirhadi, 2003; Villa-Cruz, Huerta-
Palacios & Sánchez-Vázquez, 1999). Así
mismo, la producción de enzimas celulolíticas
puede variar dependiendo del microorganismo,
el sustrato de crecimiento y de las condiciones
de cultivo, así como del tiempo de incubación
(Park, Kang, Lee, Hong & Kim, 2002; Nsereko,
Morgavi, Rode, Beauchemin & McAllister,
2000). De igual forma, Benitez Moreno, Rincón
& Codón (2006) mencionan que la expresión de
los genes de enzimas hidrolíticas está controlada
por la fuente de carbono, de modo que la
transcripción se reprime en presencia de fuentes
fácilmente asimilables. Además, Deshpande
Nair & Khedkar (2000), indican que las
condiciones del pretratamiento, pH,
concentración y tipo de sustrato, tipo de
inoculación y temperatura de incubación afectan
la producción de enzimas celulolíticas, todo lo
anterior coincide con los resultados obtenidos en
este estudio, ya que se observó que la mayor
actividad celulolítica producida por P. ostreatus
se presenta al hidrolizar la hoja de lirio acuático
con los dos tipos de inoculación evaluados, sin
embargo, al emplear el cultivo de 12 h, permitió
obtener mayor actividad enzimática en
comparación a la inoculación con micelio-agar.
Deshpande, Bhotmange, Chakrabarti &
Shastri (2008) concluyen que el lirio acuático
debido a su biomasa lignocelulosica es un
sustrato potencial para la producción de enzimas
sacarificantes (celulolíticas y xilanolíticas) e
indican que la máxima actividad celulolítica
producida por Trichoderma reesei (QM 9414
mutant), al emplear como sustrato lirio acuático
es de 1.2 UI/gms al cabo de 10 días de
incubación. Por otra parte, el alto contenido de
proteína extracelular indica la posibilidad de
que el microorganismo no presentó problemas
para asimilar los sustratos empleados, además
refleja principalmente la concentración de
enzima extracelular producida en el periodo, ya
que es la proteína soluble presente después de la
extracción, y no la proteína de la célula fúngica
(Dhillon et al., 2012).
Agradecimiento
Los autores agradecen al Consejo Nacional de
Ciencia y Tecnología por el apoyo otrogado para
desarrollar el proyecto denominado “Manejo
sustentable de lirio acuático para el saneamiento
y protección de cuerpos de agua” através de la
Convocatoria de Proyectos de Desarrollo
Científico para atender Problemas Nacionales
2014.
Conclusiones
La cinética de crecimiento de P. ostreatus,
mostró que el extracto enzimático producido a
las 12 h presenta mayor actividad celulolítica. Y
al emplear el cultivo de 12 h de P. ostreatus es
posible obtener mayor actividad enzimática en
comparación a la inoculación con micelio-agar.
Así mismo, se obtiene mayor actividad
enzimática al emplear como sustrato hoja de lirio
acuático.
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celulolíticos a partir de Pleurotus ostreatus empleando como sustrato
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celulolíticos a partir de Pleurotus ostreatus empleando como sustrato
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Yan, SH., Song, W., Guo JY. (2017) Advances
in management and utilization of invasive water
hyacinth (Eichhornia crassipes) in aquatic
ecosystems–a review. Critical reviews in
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Instrucciones para autores
[Título en Times New Roman y Negritas No.14]
Apellidos en Mayúsculas -1er Nombre de Autor †, Apellidos en Mayúsculas -2do Nombre de Autor Correo institucional en Times New Roman No.10 y Cursiva
(Indicar Fecha de Envio: Mes, Dia, Año); Aceptado (Indicar Fecha de Aceptación: Uso Exclusivo de ECORFAN)
Resumen
Titulo
Objetivos, metodología
Contribución
(150-200 palabras)
Indicar (3-5) palabras clave en Times New Roman
y Negritas No.11
Abstract
Title
Objectives, methodology
Contribution
(150-200 words)
Keywords
Cita: Apellidos en Mayúsculas -1er Nombre de Autor †, Apellidos en Mayúsculas -2do Nombre de Autor. Título del Artículo.
Título de la Revista. 2017, 1-1: 1-11 – [Todo en Times New Roman No.10]
† Investigador contribuyendo como primer autor.
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Instrucciones para autores
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Mayúsculas -2do Nombre de Autor. Título del Artículo. Título de
la Revista. 2017- [Redactado en Times New Roman No.9]
Introducción
Texto redactado en Times New Roman No.12,
espacio sencillo.
Explicación del tema en general y explicar
porque es importante.
¿Cuál es su valor agregado respecto de las demás
técnicas?
Enfocar claramente cada una de sus
características
Explicar con claridad el problema a solucionar y
la hipótesis central.
Explicación de las secciones del artículo
Desarrollo de Secciones y Apartados del
Artículo con numeración subsecuente
[Título en Times New Roman No.12, espacio
sencillo y Negrita]
Desarrollo de Artículos en Times New Roman
No.12, espacio sencillo.
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Editables
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permitan modificar tamaño, tipo y número de
letra, a efectos de edición, estas deberán estar en
alta calidad, no pixeladas y deben ser notables
aun reduciendo la imagen a escala.
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Grafico 1 Titulo y Fuente (en cursiva).
No deberán ser imágenes- todo debe ser editable.
Figura 1 Titulo y Fuente (en cursiva).
No deberán ser imágenes- todo debe ser editable.
Tabla 1 Titulo y Fuente (en cursiva).
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Cada artículo deberá presentar de manera
separada en 3 Carpetas: a) Figuras, b) Gráficos
y c) Tablas en formato .JPG, indicando el
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la Revista. 2017- [Redactado en Times New Roman No.9]
Para el uso de Ecuaciones, señalar de la
siguiente forma:
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en el extremo derecho.
Metodología a desarrollar
Dar el significado de las variables en redacción
lineal y es importante la comparación de los
criterios usados
Resultados
Los resultados deberán ser por sección del
artículo.
Anexos
Tablas y fuentes adecuadas.
Agradecimiento
Indicar si fueron financiados por alguna
Institución, Universidad o Empresa.
Conclusiones
Explicar con claridad los resultados obtenidos y
las posiblidades de mejora.
Referencias
Utilizar sistema APA. No deben estar
numerados, tampoco con viñetas, sin embargo
en caso necesario de numerar será porque se
hace referencia o mención en alguna parte del
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Abstract
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5. Agradecimiento
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7. Referencias
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Revista de Ingeniería Biomédica y Biotecnología
Formato de Originalidad
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Entiendo y acepto que los resultados de la dictaminación son inapelables por lo que deberán firmar los
autores antes de iniciar el proceso de revisión por pares con la reivindicación de ORIGINALIDAD de la
siguiente Obra.
Artículo (Article):
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Entiendo y acepto que los resultados de la dictaminación son inapelables. En caso de ser aceptado para
su publicación, autorizo a ECORFAN- Taiwan a difundir mi trabajo en las redes electrónicas,
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“Obtención de extractos celulolíticos a partir de Pleurotus ostreatus empleando
como sustrato lirio acuático”
TOVAR-JIMÉNEZ, Xochitl, TELLEZ-JURADO, Alejandro, LÓPEZ-MEDINA,
Emma Nallely, FAVELA-TORRES, Ernesto y HERNÁNDEZ-ALDANA, Ithzmalzin
“Influencia del método de obtención del extracto de perfolla de maíz en la
biosíntesis de nanoestructuras de AgCl/Ag y fitotoxicidad en plántulas de Latuca
sativa L. var. Longifolia”
YAÑEZ-CRUZ, María Guadalupe, VILLANUEVA-IBÁÑEZ, Maricela, ÁLVAREZ-
GARCÍA, Rocío, FLORES-GONZÁLEZ, Marco Antonio, TOVAR-JIMÉNEZ,
Xochitl, CADENA-RAMÍREZ, Arturo y HERNÁNDEZ-PÉREZ, María de los
Ángeles
“Efecto del ácido acrílico en las propiedades térmicas de polihidroxialcanoatos
obtenidos con hidrolizados de cera de abeja”
QUINTANAR-GÓMEZ Samuel, GRACIDA-RODRÍGUEZ Jorge, ABREU-
CORONA Arturo y TÉLLEZ-JURADO Alejandro
“Detección y prevención de fotoenvejecimiento en universitarios por exposición
nociva a rayos Ultravioleta”
VAZQUEZ CHACÓN -Verónica, CHÍO AUSTRIA- Rosa María, SÁNCHEZ
BARRERA-Eréndira, GONZÁLEZ MOSQUEDA-Mayra, AHUMADA MEDINA-
Albino
“Cuantificación de la Radiación Ultravioleta Solar Observada en la Universidad
Politécnica de Pachuca durante los Años 2011 a 2016”
VÁZQUEZ CHACÓN-Verónica, AHUMADA-MEDINA-Albino, SÁNCHEZ
BARRERA-Eréndira, CHÍO AUSTRIA-Rosa María, CORTÉS MÁRQUEZ-Sandra,
SUBERVIER ORTIZ-Laura
ISSN 2523-6857