AVANCES EN EL DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO DE SEPSIS Dr. Marcelo Grijalva, M.D., Ph.D. 2013 2012...
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AVANCES EN EL DIAGNOSTICO
MICROBIOLOGICO DE SEPSIS
Dr. Marcelo Grijalva, M.D., Ph.D.
20132012
_______________________________________________________INSTITUTO ECUATORIANO DE SEGURIDAD SOCIAL
HOSPITAL “CARLOS ANDRADE MARIN” SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO
LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR
MORBILIDAD Y MORTALIDAD
En EEUU hospitalizaciones por sepsis/septicemia (por 100.000 habitantes): 221 (2001), 377 (2008)
Riesgo de mortalidad a 5 años mayor al doble que controles en hospitalización
Mortalidad por sepsis severa (sepsis + disfunción orgánica) aprox. 30%
Ecuador (2011), 1375 reportes, mortalidad 35.4%
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Overview
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Microbiology
www.biosciences.bham.ac.uk
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www.biografix.de
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ESTRATEGIAS DIAGNOSTICAS
MARCADORES BIOLOGICOS
• PCT, CRP, IL-1β, IL-6, LPS-LBP, TREM-1
TECNICAS MICROBIOLOGICAS
• HEMOCULTIVO GOLD STANDARD• LIMITACIONES
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MARCADORES BIOLOGICOS
• PCT: Varios años en uso, aprobado por FDA para riesgo en admisión en UCI, perfil cinético favorable.
• CRP: De uso común para screening de sepsis neonatal , baja especificidad para sepsis en adultos.
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Metaanálisis HC vs multiplex PCR (23 estudios hasta el año 2013)
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DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - HCAM
• PCR en Tiempo Real multiplex multisonda + análisis Tm, capacidad cuantitativa para discriminación de posibles contaminantes.
• 25 patógenos en panel, cobertura 90% de patógenos causantes de bacteremia/fungemia.
• Laboratorio BSL -2• Norma de bioseguridad WHO 2010• Cabinas de bioseguridad Clase II, extracción robotizada
de ácidos nucleicos_______________________________________________________
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SERVICIO DE LABORATORIO CLINICO LABORATORIO DE DIAGNOSTICO MOLECULAR
• SeptiFast MGRADE (Roche) en pacientes con sospecha de sepsis (2012-2013)
• 424 pacientes, procedencia cuidados intensivos• Positividad global: SF 38%, HC: 20%• Positividad GS compuesto: 45%• Concordancia (+/- y especie): 70.4%
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DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - HCAM
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DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - HCAM
• Aumento de sensibilidad analítica de ensayos moleculares – DNA genómico humano? CXXC finger protein 1 en cromatografía.
• Significado biológico de DNAemia• Cinética de DNAemia• Marcadores moleculares de resistencia
antimicrobiana?
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DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - PERSPECTIVAS
.
•“Omics”: PCR+ LC-MS, “transcriptomic profiling”.•Paneles de marcadores moleculares•Identificación de patógenos y evaluación de respuesta del huésped
DIAGNOSTICO MOLECULAR DE SEPSIS - PERSPECTIVAS
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HOSPITAL CARLOS ANDRADE MARIN
• UCI • UCI Neonatal• UCI Pediatría
• Servicio de Infectología• Laboratorio de Bacteriología
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ROCHE APPLIED SCIENCELABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA MEDICA –
ESPEAREA DE MATEMATICAS - UCE
2013
2010
GRACIAS
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