Apuntes de Ramirez Segundo Parcial

7/14/2019 Apuntes de Ramirez Segundo Parcial

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SUBMODULO2: UTILIZA TECNICAS DE SEPARACION Y PURIFICACIÓN CON BASE A PROCEDIMIENTOS ESTANDARIZADOS. ALUMNA: M. Angelica Rodriguez Zapata. GRUPO: “F” COMPETENCIAS DICIPLINAR Interpreta su realidad social a partir de los procesos históricos locales nacionales e internacionales que la han configurado. 2.- Analiza de manera reflexiva y aplicando normas de seguridad COMPETENCIA GENERICAS: Sigue Instrucciones, y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo como cada uno de

sus pasos contribuye al alcance de mi objetivo. 2.- Estructura ideas y argumentos de manera clara coherente y sintética





INTEGRANTES_

AIME NATALIA GARCIA JIMENEZMARTHA ANGELICA RODRIGUEZ ZAPATAELIZABETH PASOS ROMEROMAGHER AMARO ROSAS

FRANCISCA LOPEZ ALARCONERIKA YARETZI ALARCON ALEMÁNADRIAN VISCENCIO CARBALLO





2 CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA:Técnicas analítica y preparativaCromatografía en capa fina (CCF)Usos

Para comprobar la purezaPruebas preliminares antes de la separaciónComparación cualitativa con sustancias conocidasLlevar el control en reacciones

Procedimiento

Corte algunas placas de vidrio comercial (20 x 20 cm) con un cortador de vidrio.Elija la fase estacionaria: alúmina o gel de sílice, aproximadamente .2 de gruesoAplicación de la sustanciaDesarrollo de cromatograma

Identificación: manchas de color, inmediatamente visibles; las incoloras pueden revelarsemediante:Luz UVIntroducción en la placa en vapores de yodoEl roció con una solución de agua H2SO4 a una Conc. 1:1Rociarlas con activos colorantes convenientes.

RegistroMarque la cromatografía usando papel carbón. Señale las manchas, posición de inicio y frente deldisolvente. Indique el tipo de placa, eluyente y la técnica de desarrollo.Corrimientos múltiplesAlgunas veces es útil volver a correr una placa, después que se ha secado, hasta que el frente del

disolvente alcance la misma posición del frente del disolvente en el corrimiento anterior.CCF PREPARATIVA (CROMATOGRAFIA EN CAPA GRUESA)Usos: es la separación preparativa de mezclas.ProcedimientoEl sistema de separación se optimiza por medio de la CCFAplique una solución concentrada de la mezcla a la placa, formando una banda lo mas angostaposible por medio de una pipeta de punta muy finaEluya de la misma manera que para CCF





Si es necesario, se utiliza una lámpara de rayos ultravioleta, se localiza las bandas individuales y seseñalan con un lápiz.Separe raspando las bandas en forma individualEluya la sustancia con un disolvente más polar que el eluyenteEvapora el disolvente. Se cristaliza o se destila el producto y se identifica

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINAEluya de la misma manera que paraCCF.Si es necesario se utiliza una lámparade rayos ultravioleta (UV), se localizanlas bandas individuales y se señalan conun lápiz. (Métodos alternativos: secubre la placa cuidadosamente conpapel aluminio, dejando expuesta una

franja de 0.5 cm en el centro y sedesarrolla en vapores de yodo, despuéssupone que las bandas están enposición recta.Separe raspando las bandas de formaindividual.El gel de sílice es un poco soluble en etanol o metanol.Evapore el disolvente. Se cristaliza o se destila el producto y se identifica.NOTA: para el trabajo a pequeña escala, estas debe limpiarse corriendo primerouna mezcla de cloroformo y metanol y después se dejan secar completamenteantes de aplicar la mezcla. Es indispensable que se utilicen disolventes puros y

redestinados.CROMATOGRAFÍA EN COLUMNAPor medio de la CCF se optimizasistema (adsorbente eluyente).Dimensiones de la columna: eladsorbente se debe empacar en esta enuna proporción de altura diámetro de10:1; para estimar la cantidad de





adsorbente en relación con el diámetro de la columnaLa cromatografía en capa fina es una técnica para determinar el número deComponentes de una mezcla y como una prueba preliminar para realizar unaCromatografía en columna, entre otros. El proceso de cromatografía en columnase controla por cromatografía en capa fina, de tal manera que se puede separarcada componente de la mezcla. La cromatografía en columna se usa para separargrandes cantidades de material: >100 mg. El proceso de cromatografía consta deuna fase móvil (eluyente) y una fase estacionaria (adsorbente), los cualesdependen de las sustancias que se deseen separa. Se le proporcionará una mezclasólida de ácido benzoico contaminado con azul de metileno, los cuales se separanpor cromatografía en columna. Para empacar la columna sujétela en el soporte

con las pinzas. Si la llave es de vidrio, engrásela ligeramente y mantenga laposición de cerrado. Introduzca hasta el fondo un pequeño pedazo de algodónayudándose con la varilla de vidrio, agregue 8 mL de eluyente (acetato de etilo)y presione suavemente el algodón para que quede bienColocado y sin burbujas (Nota 1). Prepare una suspensión de.l0 g de el de sílicepara columna en 40 mL de eluyente y agite por 5 min. Para eliminar las burbujasde aire. A través del embudo de vidrio vierta la suspensión en la columnagolpeando ligeramente con los dedos para que elEmpacado sea uniforme. Abra la llave para eliminar el exceso de disolventeteniendo cuidado de no dejar la gel de sílice sin disolvente (Nota 2).En un vaso de precipitado de 100 mL L disuelva 0.4 q de la mezcla problema con

la mínima cantidad de eluyente (4 o 5 mL), ayudándose con el agitador, viértalacon cuidado para que quede distribuida uniformemente encima de la superficie dela gel de sílice. Abra la llave para colectar el disolvente y que se adsorba lamuestra aplicada (cuidando que no se seque la columna).Colecte fracciones (eluatos) de 6 mL en los frascos viales y verifique la separaciónHaciendo cromatoplacas (Notas 3 y 4) de cada una de las fracciones usando unaMuestra testigo como se indica en la figura I.Eluya las cromatoplacas en mezcla de hexano-acetato de etilo (2:1) y observe encualesfracciones hay presencia del compuesto separado (Figura 1). En cadacromatoplacas observe el cambio de la coloración de la mancha del productoprincipal (a menor concentración menor intensidad de color).

La elución y separación termina en el momento en el que ya no se observa en laCromatoplacas presencia del producto separado. En un matraz reúna lasfracciones que contienen producto. Para recuperar la sustancia: destile el excesode disolvente utilizando una destilación simple, calentando el matraz en un bañomaría (Nota 5), deje en el matraz un residuo de 5 mL aproximadamente yviértalo en un vidrio de reloj o en un vaso, para que termineDe evaporarse en la campana. Pese el producto recuperado y calcule elrendimiento.





Testigo Fracción 1Seguimiento de la separación por cromatografía en capa finaNotas:

1) Otra opción para preparar la columna es, agregando 10 mL de eluyenteindicado. Y después colocar en el fondo de la columna un pedazo de algodón ofibra deVidrio ayudándose con la varilla de vidrio presionando suavemente sin apretar elAlgodón.

2) Mantenga siempre el nivel del eluyente 0.5 cm por arriba del nivel deladsorbente.3i Para preparar idas cromatoplacas se introducen 2 portaobjetos juntos, limpiosySecos en una suspensión de silica gel al 35% en acetato de etilo.4) Para aplicar las muestras a la cromatoplacas utilice los capilares, los quePreviamente deben ser estirados en la flama del mechero con el fin de que tenganel diámetro adecuado.5) Para recuperar un sólido disuelto en un disolvente, siempre se destila elDisolvente calentando en un baño-maría.

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

OBJETIVOSa) Conocer la técnica de cromatografía en capa fina, (ccf), sus características y losfactores que en ella intervienen.b) Calcular valores de Rf de varias sustancias y correlacionarlo a la selecciónadecuada del eluyente y deducir la relación que existe entre la polaridad de lasSustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados.c) Aplicar la técnica de cromatografía en capa fina como criterio de pureza eIdentificación de sustancias.ANTECEDENTESa) Concepto de cromatografía. Tipos de cromatografía. Cromatografía de adsorcióny cromatografía de partición. Ejemplos.b) Fenómeno de adsorción. La propiedad de retención. Concepto de Rf c) La cromatografía en capa fina. Sus características y aplicaciones.d) Eluyentes, soportes y reveladores más comunes para cromatografía en capaTtna.e) Factores que ¡influyen en una separación por cromatografía de capa fina.





INFORMACIÓNConcepto de cromatografíaLa cromatografía se define como la separación de una mezcla de dos o más compuestospor distribución entre dos fases, una de las cuales es estacionaria y la otra una fasemóvil. Varios tipos de cromatografía son posibles, dependiendo de la naturaleza de lasDos fases involucradas: sólido- Liquido (capa fina, papel o columna), liquido-Liquido yGases-líquido (fase vapor).Todas las técnicas cromatográficas dependen de la distribución de los componentes deLa mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase móvil, llamada también activa, queTransporta las sustancias que se separan y que progresa en relación con la otra,Denominada fase estacionaria. La fase móvil puede ser un líquido o un gas y la

Estacionaria puede ser un sólido o un líquido.

Todos los solidos finamente pulverizados tienen el poder de absorber de menor a mayor gradootras sustancias sobre su superficie; y, similarmente' todas las sustancias puedenSer adsorbidas, unas con más facilidad que otras. Este fenómeno de adsorción selectivaEs el principio fundamental de la cromatografía.

Concepto de Rf

Rf es el registro, es una relación de distancias, y se define como:

p1 = (a) distancia que recorre la muestra desde el punto de aplicación





(b) distancia que recorre el disolvente hasta el frente del eluyente.

El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra (tipo

de adsorbente, eluyente, así como las condiciones de la placa, temperatura,

vapor de saturación, etc."). Tiene una reproducibilidad de t 20%, por lo que es

mejor correr duplicados de la misma Placa. Cromatografía en capa fina

En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria

manteniendo un pequeño espesor constante a lo largo de la placa. Eleluyentes ascenderá, por tap ¡tarida o, por la placa y arrastrará los

componentes a lo largo de ésta produciendo "manchas" de los componentes.

En la cromatografía en capa fina (ccf), el grado de elución de las sustancias

depende

tanto de su propia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado'El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre un soporterígido,





qué pueden ser placas de vidrio, aluminio o poliéster. Los tamaños de la placa

para ccf

Convencional son: 20 x 20; 't0 x20 y 5x2 cm.

Hay adsorbentes que contienen un indicador de fluorescencia para facilitar laIdentificación de muestras. Si no se usa indicador y los componentes no son coloridos,se requerirán otras técnicas de revelado.

Eluyentes más comunes para cromatografía en capa fina





- éter de petróleo - cloruro de metileno-hexano - acetato de etilo- ciclo hexano - acetona‘tolueno - ruso-propanol- dietil-éter - etanol- f-butil-éter - metanol- cloroformo - ácido acético

Reveladores más comunes para cromatografía en capa fina

Las manchas de color son, por supuesto, inmediatamente visibles; las incoloras puedenRevelarse mediante:

a) Luz UV: si la sustancia absorbe luz ultravioleta, se puede usar una faseEstacionaria impregnada con un indicador fluorescente (F25a ó F366), el númeroque aparece como subíndice nos indica Ia longitud de onda de excitación delIndicador utilizado"

b) La introducción de la placa en vapores de yodo

c) El rocío con una solución de agualH2SOa 1 :1 (dentro de un compartimiento

Especialmente protegido y bajo una campana de extracción de gases). DespuésCalentar intensamente, por ejemplo, con un mechero. hasta carbonizar losCompuestos.

Adsorbentes más comunes para cromatografía en capa fina.

a) Gel de sílice (se utiliza en el 80% de las separaciones)b) Oxido de Aluminio ó Alúmina (ácida, neutra ó básica)c) Celulosa (Nativa o micro-cristalina)d) Poliamidas

Para la selección del adsorbente deber tomar las siguientes consideraciones:

a) Polaridadb) Tamaño de partículac) Diámetrod) Área Superficiale) Homogeneidad fl Pureza





Factores que influyen en una separación por cromatografía de capa fina.

a) Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben más en la faseEstacionaria.

b) La cromatografía debe llevarse a cabo en un área sin corrientes de aire.

c) Limpieza de las placas. Muchas placas están contaminadas con grasa o agentesPlastificantes o adhesivos. Para el trabajo a pequeña escala, éstas deben

Limpiarse corriendo primero una mezcla de cloroformo y metanol y después dejarSecar completamente antes de aplicar la muestra.

d) Pureza de los disolventes.





Cromatografía

La palabra cromatografía significa “escribir en colores”, ya que cuando fue

desarrollada, los componentes separados eran colorantes. Las técnicas

cromatográficas se basan en la aplicación de la mezcla en un punto (punto

de inyección.

Clasificación de la cromatografía

Cromatografía Se utilizan columnas de vidrio rellenas de Alúmina

En columna Sílica u Oxido de Magnesio.

.

Cromatografía en Las técnicas cromatográficas para el análisis

Capa Fina y purificación de los productos de reacción son

Ampliamente utilizadas en el laboratorio





Orgánico.

Cromatografía de Las columnas se rellenan con un adsorbente, como

Adsorción alúmina o gel de sílice (fase estacionaria), mojado con

El disolvente que se vaya a emplear en proceso

Cromatográficas. Los componentes de la mezcla son

Adsorbidos por la fase estacionaria con diferente

Intensidad.

Es una técnica empleada como fase estacionaria una

Cromatografía de capa delgada de gel sílica o alúmina adherida a un

Capa fina (TCL) soporte de vidrio o aluminio. Para llevar a cabo esta

Técnica se disuelve una pequeña cantidad de la mezcla

A separar y, con la ayuda de un capilar, se deposita sobre la

Parte inferior de la placa.

Los compuestos que se pueden separar por cromatografía

Cromatografía de de gases deben ser volátiles y Térmicamente Estables.

Gases (CG)

Cromatografía en Es básicamente el mismo, solo que se usan tiras de papel





Papel cromatográfico en la cuba cromatográfica.

Es parecida a la cromatografía en columna, Sólo que se

Cromatografía de aplica el flujo a presión, el tamaño de partícula es entre 30

Líquidos de Alta y 10 micras, la longitud de la columna es entre 5 y 25 cm y

Eficiencia (HPCL) requiere de equipo sofisticado.

Intercambio Iónico La fase es una resina de intercambio Iónico y tiene la

Propiedad de separar especies Ionizadas.

A la fase estacionaria se le llama también Exclusión

2 CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA:

Técnicas analítica y preparativa

Cromatografía en capa fina (CCF)

a) Usos

Para comprobar la pureza

Pruebas preliminares antes de la separación

Comparación cualitativa con sustancias conocidas

Llevar el control en reacciones

b) Procedimiento

i. Corte algunas placas de vidrio comercial (20 x 20 cm) con un cortador de vidrio.

ii. Elija la fase estacionaria: alúmina o gel de sílice, aproximadamente .2 de grueso

iii. Aplicación de la sustancia

iv. Desarrollo de cromatograma





v. Identificación: manchas de color, inmediatamente visibles; las incoloras pueden revelarse

mediante:

1. Luz UV

2. Introducción en la placa en vapores de yodo

3. El roció con una solución de agua H2SO4 a una Conc. 1:1

4. Rociarlas con activos colorantes convenientes.

c) Registro

Marque la cromatografía usando papel carbón. Señale las manchas, posición de inicio y frente del

disolvente. Indique el tipo de placa, eluyente y la técnica de desarrollo.

d) Corrimientos múltiples

Algunas veces es útil volver a correr una placa, después que se ha secado, hasta que el frente del

disolvente alcance la misma posición del frente del disolvente en el corrimiento anterior.

CCF PREPARATIVA (CROMATOGRAFIA EN CAPA GRUESA)

a) Usos: es la separación preparativa de mezclas.

b) Procedimiento

El sistema de separación se optimiza por medio de la CCF Aplique una solución concentrada de la mezcla a la placa, formando una banda lo

mas angosta posible por medio de una pipeta de punta muy fina

Eluya de la misma manera que para CCF

Si es necesario, se utiliza una lámpara de rayos ultravioleta, se localiza las bandas

individuales y se señalan con un lápiz.

Separe raspando las bandas en forma individual

Eluya la sustancia con un disolvente mas polar que el eluyente

Evapora el disolvente. Se cristaliza o se destila el producto y se identifica

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