PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES POR BIOTECNOLOGÍA

Integrantes :

• Estrada Mendez, Alexander• Huaman Pillco Ruth Rossy.• Soto Acosta, Rita• Sedano Quispe, Lidia•Condori Mendoza, Edgar• Huanca Tintaya, Yamile

Docente: Ing. Chinchay Barragan

IMPACTO DE LA BIOTECNOLOGIA EN LA INMUNIDAD

La Biotecnología

desarrollo de la inmunología

pruebas diagnósticas

fármacos

vacunas

útiles enprofilaxia diagnóstico

tratamiento de una variedad de enfermedades

infecciosas autoinmunitarias

el cáncer

La Biotecnología

efecto directovacunas contra enfermedades infecciosas

cáncer

producción de anticuerpos monoclonales contra el cáncer

generación deanticuerpos específicos

contra ciertos parásitos

síntesis de fármacos, hormonas y productos para la salud

obtención de plantas transgénicas

uso de virus entomopatógenos bioinsecticidas

generación de biocombustibles

Actualidad existen + 200 fármacos y vacunas biotecnológicos esperanza y calidad de vida

en desarrollo400 más contra el cáncer, el Alzheimer, la esclerosis múltiple, la artritis, el SIDA y las enfermedades cardiovasculares

EL SISTEMA INMUNITARIO

Los organismos expuestos virus, bacterias, protozoarios, hongos

mecanismos de defensa Efectos tòxicos

Sistema Inmunológico moléculas antigénicasresponder

células especializadas agente invasor

neutralizan

destruyenreconocer

macrófagos neutrófilos linfocitosLinf. B Linfocitos T

Inmunidad humoral Inmunidad celular

Cel. T coop Cel. T sup-citox

regulan funcionamientoenf. infecc

protegen

cáncer

sust. citotóxicas

med producc

óxido nítrico Factor de necrosis tumoral α

Detec antigeno—macrof fagoc—gang. Linf—fragm de antig. A los Linf T citox q destruy direct cel. Infectadas---es respons respuesta antitumoral y rechaz traspl

INTRODUCCION• Los anticuerpos monoclonales

son glicoproteínas especializadas que forman parte del S.Inmune.

• Reconocimiento de un componente protector en el suero de pacientes convalecientes.

• Los anticuerpos son producidos por cell.B

• La rpta. Inmunológica específica se da cuando un organismo ha sido expuesto a uno o varios antígenos originando rpta. Policlonal.

• La rpta. Monoclonal se da por la selección de un solo clon.

PRODUCTOS USADOS EN INMUNIZACION PASIVA

• ¿ Qué es un clon?– Es una agrupación de células que son idénticas en

estructura, caract. Metabólicas, funciones, etc.• ¿Qué son los Anticuerpos monoclonales?– Son Inmunoglobulinas homogéneas secretadas por un

solo clon.• ¿Cómo se obtienen?– En 1975, Kohler y Milsten demostraron que la hibridación

de Lt. Inmunes de ratón con cell. De mieloma originaban cell. Hibridas.

• ¿Qué diferencias hay entre Anticuerpos monclonales y Anticuerpos policlonales?– Los AcPc se encuentran conformados por una mezcla de

Ac. Los AcMc son específicos con ↑ afinidad

ESTRUCTURA GENERAL DE ANTICUERPOS

• Unidos por 4 cadenas proteicas: dos pesadas (CH) y dos ligeras (CL), unidas x puente S2 .

• Funcionalmente:– Fab Región Variable y

Región coservada– Fc

APLICACIONES GENERALES DE ANTICUERPOS MONOCLONALES

ANTICUERPOS MONOCLONALES

Especificidad de unión

AfinidadCapacidad para ser

producidos en cantidades ilimitadas

PERMITE SU UTILIZACIÓN COMO HERRAMIENTAS ESENCIALES EN INVESTIGACIÓN BIOMÉDICA Y CLÍNICA

APLICACIONES GENERALES DE ANTICUERPOS MONOCLONALES

APLI

CACI

ON

ESEl empleo de Ac monoclonales en la terapia médica : a fin de neutralizar infecciones virales, bacterianas, drogas y/o toxinas, requiere de la obtención de Ac monoclonales humanos.

Diagnóstico y tratamiento de tumores específicos: los anticuerpos monoclonales se usan en la detección de tumores mediante técnicas inmunológicas de diagnóstico y para la inmunoterapia de tumores in vivo.

Las enfermedades autoinmunes son el grupo siguiente de patología humana en el que más se han empleado estos productos y, fundamentalmente, en artritis reumatoide, enfermedad inflamatoria intestinal, esclerosis múltiple, lupus eritematoso,etc.

Inmunodiagnóstico: en el diagnóstico de muchas enfermedades infecciosas y sistémicas al permitir la detección de antígenos y anticuerpos específicos en la circulación o tejidos usando anticuerpos monoclonales en inmunoensayos, y como marcadores específicos para el diagnóstico por imágenes

PRODUCCIÓN Y DESARROLLO DE ANTICUERPOS MONOCLONALES

La producción de anticuerpos monoclonales se estableció con la tecnología creada en 1975 por Georges Köhler y César Milstein.1) Es uno de los métodos básicos de producción de anticuerpos monoclonales contra un determinante antigénico

conocido, 2) Se puede utilizar para identificar antígenos desconocidos presentes en una mezcla, puesto que cada hibridoma

es específico para un solo determinante antigénico

Desarrollo

En 1985 se crearon los primeros anticuerpos quiméricos humanos a partir de ratones, con la tecnología del ADN recombinante : Quimerización

En 1986 se incorporó la técnica de humanización de anticuerpos con el objetivo de minimizar los componentes del anticuerpo de ratón, generadores de la respuesta inmune.

PRODUCCIÓN Y DESARROLLO DE ANTICUERPOS MONOCLONALES

GENERACION DE ANTICUERPOS MONOCLONALES HUMANOS

TECNOLOGÍA DE FAGOS:

A: se generan bibliotecas de los genes de las regiones variables de las cadenas pesadas y ligeras.

B:se cortan estas secuencias por medio de enzimas de restricción y se unen por medio de PRC.

C: estos genes de ScFv se pegan a la secuencia genética de un bacteriófago

ANTICUERPOS HUMANOS GENERADOSEN RATONES TRANSGÉNICOS

• la humanización de los anticuerpos, es la generación de hibridomas de ratón que produzcan anticuerpos totalmente humanos.

• Para este propósito, las Ig nativas procedentes de ratones transgénicos, a los cuales se les han reemplazado los genes de las regiones variables por humanas, en las que los ratones llevan a cabo la recombinación de los genes VDJ que son los responsables de la codificación y ensamblaje de las Ig; estos anticuerpos producidos tienen una alta afinidad con secuencias terminales humanas

• han construido cromosomas artificiales de levadura (YAC) que albergan fragmentos grandes de los genes de Ig de ambas cadenas pesadas y livianas humanas, los cuales se introducen en una línea germinal de ratones para crear cepas de ratones capaces de producir anticuerpos específicos totalmente humanos, generando ratones con la capacidad de producir anticuerpos similares a los humanos

ESTRUCTURA DE UNA IG

APLICACIONES CLÍNICAS DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES

• El primer anticuerpo monoclonal empleado con fines terapéuticos fue autorizado en Estados Unidos en junio de 1986 para la prevención del rechazo en los trasplantes de riñón (Muromonab Orthoclonne).

• Otro anticuerpo monoclonal, el nebacumab (Centoxino), inactiva selectivamente la fracción lipidica de la endotoxina presente en la membrana exterior de las bacterias Gram negativas; fue retirado en 1993 debido a la detección de un exceso de mortalidad en los pacientes tratados.

Anticuerpos monoclonales aprobados

para uso terapéutico

Nofetumamab20/agosto/1996

Incicromab pentetate

03/julio/1996

Arcitumomab28/junio/1996

Daclizumab26/febrero/1999

Abciximab5/noviembre/1997

Capromab pendetide

28/setiembre/1996

Rituximab02/junio/1998

Basiliximab5/diciembre/1998

Trastuzumab28/agosto/2000

Gemtuzumab17/mayo/2000

Alemtazumab7/mayo/2001

Ibritumomab16/enero/2004

Adalimumab08/setiembre/2003

Bevacizumab12/enero/2005

Infliximab13/agosto/1999

ANTICUERPOS MONOCLONALES EN LISTA DE ESPERA

Natalizumab: recaídas en pacientes con esclerosis múltiple y enfermedad de Crohn. colitis ulcerativa (preliminar)

Nerelimomab: evaluado en artritis reumatoide, colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn .

Oregovomab: es un anticuerpo monoclonal deratón que reconoce el antígeno CA125 asociado a tu- mores de ova rio,es capaz de incrementar el tiempo de recaída en pacientes con carcinoma avanzado de ovario.

Priliximab: Intravenoso supresión CD4 circulantes. Su eficacia en: micosis fungoide, profilaxis del rechazo en el trasplante de corazón

Afelimomab: tratamiento de la sepsis y el choque séptico. Limitado est. Clínico

Apolizumab: contra el antígeno leucocitario. recaídas con linfomas no Hodgkin, especialmente linfoma folicular.

Bectumomab: unido al tecnecio 99. Usado en imágenes para linfomas no Hodgkin

Edrecolomab: como terapia ayudante en el pos-operatorio del carcinoma colorrectal.

• Enlimomab: unido ICAM-1 inhibir adhesión neutrófilos al endotelio vascular. Datos limitados sugieren en :trasplante renal, artritis reumatoide y el trasplante hepático.

• Felvizumab: tratamiento y prevención en niños de la infección grave por el virus sincitial respiratorio.

• Inolimomab: Datos preliminares, ha demostrado ser promisorio en la prevención y el tratamiento del rechazo de trasplantes.