Ana Judith Marmolejo Rodriguez

7/25/2019 Ana Judith Marmolejo Rodriguez

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UNIVERSIDAD DE COLIMA

FACULTAD DE CIENCIAS MARINAS

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN

CAMARON BLANCO ADULTO (Penaeus vannamei) CULTIVADO EN

LABORATORIO.

TESIS

PARA OBTENER EL GRADO DE MAESTRIA EN ACUACULTURA

PRESENTA

ANA JUDITH MARMOLEJO RODRIGUEZ

ASESOR DE TESIS:DR. ALEJANDRO OTTO MEYER WILLERER

ASESOR DE TESIS EXTERNO:DR. FELIPE VAZQUEZ GUTIERREZ

CAMPUS EL NARANJO MANZANILLO, COLIMA, NOVIEMBRE DE 1999.


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Facultad de Ciencias Marinas

M. en C. Sergio Alberto Lau ChamDirector de la Facultad de Ciencias MarinasP r e s e n t e .

Los que suscriben, Sinodales de la Comisin nombrada para examinar el

manuscrito de Tesis titulado:

Determinacin de plaguicidas organoclorados en camarn blancoadulto Penaeus vannamei , cultivado en laboratorio.

que presenta la candidato al Grado Acadmico de Maestra en Ciencias:Area. Acuacultura, la C.

Ana Judith Marmolejo Rodrguez

Manifiestan su aceptacin a dicho trabajo en virtud de que satisface lo srequisitos sealados por las disposiciones reglamentarias y que

s elas correcciones que cada uno en particular consider pertinentes.

han hecho

A t e n t a m e n t e

Sinodal Propietario

_


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INDICE

ResumenAgradecimientosDedicatoriaIntroduccinAntecedentesGeneralesNormatividadJustificacinObjetivosMaterial y MtodosLocalizacin del rea de EstudioProcedencia de los camaronesTratamiento de los camarones en laboratorio

Obtencin de los camarones, agua y sedimentoTcnica Lab. Nutricin Fac. de VeterinariaTcnica Instituto de Fisiol. CelularTcnica Lab. Fisicoqumica ICMyL

ResultadosPatrones de plagucdas organoclorados estndaresPatrones de plagucidas organofosforados estndaresBlanco

Camarn hmedo por la Tcnica de Fac. VeterinariaCamarn seco Tcnica de Fisiol. CelularCamarn Material de Referencia (Soxhlet)Camaron Material de Referencia (Microondas)Camarn Lab. Ciencias Mar. (Soxhlet)Camarn Isla Navidad (Soxhlet)Camarn Lab. de Ciencias Marinas (Microondas)Camarn Isla Navidad (Microondas)Plaguicidas en AguaPlaguicidas en SedimentoPlaguicidas en Alimento

Discusin

i

ii

iV

1

6

6

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27

27

27

28

293 1

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33

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41

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49

50

5 1

52 .53

54

55

Conclusiones 60

Recomendaciones 62

Bibliografa 64

Anexos 72


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INDICE DE FIGURAS

Fig.1. Cromatograma de estndares con once plaguic idas organoclo:ados ............................ .41

Fig. 2. Cromatograma de la mezcla de estndares de tres plaguicidas organofosforados ..... ..4 2

Fig. 3. Cromatograma delanlisis de u n blanco de muestra y solventes .................................. .43

Fig. 4. Cromatograma de la tcnica 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 4

Fig. 5. Cromatograma de la tcnica 2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 5

Fig. 6. Cromatograma de muestra de control MRE procesada con la tcnica 3 ....................... .46Fig. 7. Cromatograma de muestra de control SRM analizada con la tcnica 4 ......................... .47

Fig. 8. Cromatograma de muestra de camarn del LCM UAG procesadas .............................. .48

Fig. 9. Cromatograma de muestra de camarn procedentes de Isla Navidad, Col.,utilizando la tcnica No. 3 ............................................................................................... 49

Fig. 10. Cromatograma de muestra de camarn del LCM UAG procesadas conla tcnica 4 ..................................................................................................................... .50

Fig. ll. Cromatograma de muestra de camarn de Isla Navidad, Col., utilizandola tcnica No. 4 ............................................................................................................... 51

Fig. 12. Cromatograma del anlisis de agua marina de los estanques de cultivo de

camarn en el LCM, Barra de Navidad, Jal. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 2

Fig. 13. Cromatograma del anlisis de sedimento marino de la laguna Barra de Navidad, Jal . . 53Fig. 14. Cromatograma del anlisis de alimento comercial para camarn adulto analizado

segn la tcnica 4 ........................................................................................................... 54

Fig. 15. Cobre determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes

fuentes y e n alimento para; camarn .............................................................................. 73Fig. 16. Cadmio determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes

fuentes y en alimento para camarn .............................................................................. 74

Fig. 17. Nquel determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentesfuentes y en alimento para camarn .............................................................................. 75

Fig. 18. Plomo determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentesfuentes y en alimento para camarn .............................................................................. 76

Fig. 19. Cromo determinado en cabeza y msculo de camarn de diferentes

fuentes y en alimento para camarn .............................................................................. 77Fig. 20. Extraccin de plaguicidas en muestras de sedimento y alimento.

Mtodo EPA D5369-93 .................................................................................................. 7 8

Fig. 21. Extraccin de plaguicidas organoclorados en muestras de agua.Mtodo EPA 508 ......................... ................................................................................... 79

Fig. 22. Concentracin de extractos de muestras de organismos, agua sedimento

y alimento ....... .............................................................................................................. 80


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RESUMEN

Marmolejo-Rodrguez A. J. 1999. Determinacin de plaguicidas organoclorados encamarn blanco adulto (.Penaeus vannamei) cultivado en laboratorio. Tesis paraobtener el grado de Maestra en Acuacultura. Facultad de Ciencias Marinas,

Universidad de Colima.

Los camarones reproductores utilizados en el LCM de la Universidad AutnomaGuadalajara ubicado en la Laguna de Barra de Navidad, en algunas ocasionesdisminuan la produccin de larva, sospechndose la presencia de plaguicidascomo inhibidores. Se realizaron determinaciones de plaguicidas organocloradosen agua, sedimento, alimento y camarones cultivados durante cinco meses. Unavez cosechados fueron congelados, transportados a la UNAM, D.F. y analizadosen el ICML. Se probaron cuatro tcnicas de extraccin, de las cuales las ms

apropiadas resultaron la del equipo soxhlet y aquella con microondas. Se inyectl L de cada muestra concentrada en un cromatgrafo de gases HP5890 concolumna capilar. Se cont con estndar de referencia certificado de camarnliofilizado obtenido de la Internationa/ Atomic Energy Agency, Mnaco. LOScromatogramas no mostraron plaguicidas de los camarones analizados ni enagua, sedimento y alimento. Se concluy que ese cu!tivo de camarn en 1995 seencontr libre de plaguicidas organoclorados y organofosforados.

ABSTRACT

Marmolejo-Rodrguez A. J. 1999. Determination of organochloride pesticides inwhite adult shrimp (fenaeus vannamei) cultured in laboratory. Thess for Master

Degreein

Aquaculture. Faculty of Marine Sciences, Colima University, Mxico.Adult reproducing shrimp utilized in the LCM laboratory of the UniversidadAutnoma Guadalajara in Barra de Navidad Lagoon, presented decrease of larvaeproduction, presuming the presence of pesticides as inhibi tors. Pest icidedeterminations were done in water, sediment, feed and shrimp that were culturedduring five months. Once they were harvested, they were frozen and transported tothe ICML of UNAM in Mexico City, where they were analysed. Four extractingtechniques were probed, those with soxhlet equipment and with microwaves were

the most successful . I L of extracted liquid was in jec ted in to a gaschromatographer HP5890 equipped with a capilary column. A certificatedreference of liophilized shrimp (IAEA-Monaco) was used to standardize theequipment. The obtained chromatogramms of the analyzed shrimp showed nopesticides, nor did the water, sediment and feed samples. It was concluded, thatthe shrimp culture in 1995 was free of organochloride and organofosfate


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AGRADECIM IENTOS

El presente trabajo representa la culminacin del esfuerzo conjunto de muchas

person as y varas ins t i tucion es sin las cu ales n o hub iera sido pos ible real izarse y

con las que estar inf in i tamente agradecida. Las con dic iones b ajo las cuales

desarrol leste trabajo n o s on parecidas a las de la m ayora de los estud iantes de

este programa de maestra, sin embarg o al c on cluir esta invest ig acin veo q ue s

bien estuve l lena de retos desde e l pr inc ip io , me s i rv an mas para valorar la

del icada tarea que imp lica la invest igacin cientfica y el cump lim iento c on altos

estndar es acadmicos . El hab er p art ic ip ado co n el Dr. Fel ip e Vzqu ez Gu tirrez m i

aseso r de tesis externo en la puesta en m arch a de las tcn icas analtic as en el

departamento de Cromatografa deGases

del Labor atorio de Fisic oq um ica Marin adel Inst i tuto d e Ciencias d el Mar y Limno loga de la UNAM dedicada principalmente

a in vestgacion es de oceanologa y Iimnologa,donde ciertam ente hu bo gran des

retos que fuero n ms all a de una cls ica nves ti gacn de m aes tra, sta s ituac in

part icu lar , aunque no apreciada en su verdadera dimensin por algunos, ayud

sing ularm ente a mi form acin pro fesion al. Por el lo quero agradecer al Dr.

Alejandro Meyer Wil lerer por su in valuable ayuda, por darme la seguridad de pod er

trabajar en Inst i tu cion es de excelencia acadmica y po r p restar ayud a inm ediata e

inc on dic ion al en esta tesis cu ando as se lo so licit, y poder ver editada f inalm ente

esta tes is , al Dr. Felipe Vzquez Gut irrez por su pers ist ente y pers uas iva d emanda

de un trabajo de alta cal idad, su permanente disp osic in a disc ut ir ideas y resolv er

problemas de todo tipo . Para ambos su apoy o y g uianza durante esta invest igacin

fueron escencia les para la consecucin de las metas or ig inalmente establecidas.

La p ar tic ipac in de mis s inodales , M en C. A lber to Lau Cham, y M. en C. Car los

Lezama Cervantes agradezco sus val iosos comentar ios porque me alentaron a

conclu i r este estudio.

La inves tig acin de m i tsis se v i fuertemente favorecida por la val iosa ayuda

prestada, po r la M. en C. Carm en Mrquez, del Ins tit ut o d e Qum ica qu ien m e

ense Cromato g rafa de gases ; del Dr. Gi lb ert o Daz-Gonzlez, del ICMyL por

darme buenos tips.


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La Dra. Victo ria Chagolla d el Ins ti tu to d e Fisiolo ga Celular, el MVZ Ju an Ortadel

Depto . de Nut ricin d e la Fac. De Veter in aria, La Dra. Vic en ta Pea y el Tc.

Gerardo, del In s ti tu to de Bomdcas , la Qum en A . Alejandra Guerr ero Rodrguez,

tod os ellos d e la UNAM, agradezco su tiempo y su ayuda acadmic a.

Tam b in agradezco al Dr . Virender Sharma, d e Texas A&M Unversty s u in ters en

pub l icar , su co nstante apoyo y dispo nibi l idad fue c ier tamente una gran apor tac in

a mfo rm acn.

Deseo hac er un r eco no cim ient o a la f ami la Navarro lver po r tod os s us nim os y

buena v olun tad, asimism o a mMadre Glor ia Rodrguez Rueda po r tod o s u ejemplo

y respaldo moral .

Muy espec ialmente ag radezco a m i espos o Vcto r RenMagallanes Ordez, po r

sus comentar ios y orientaciones relacionadas con mi trabajo de tesis ascomo por

su apoyo incondic ion al para seguir con mis m etas profesionales y...

. ..eternamen te agradecid a con Jess p or perm it i rme s entr s u presenc ia en c ada

microsegundo de mvida.


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iv

. ..a Pablo Ren

y a Romn Vinicioo Ana Fabiola.


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1. INTRODUCCIN

El uso extendido de contaminantes orgnicos como plaguicidas,

hidrocarburos, y bifenilos policlorados (PCBs), ocasiona problemas de gran

complejidad, su persistencia es tal que ya se han encontrado en muchos

ecosistemas del planeta e incluso en sangre y secreciones de seres humanos,

por lo que es importante su estudio y seguimiento en todos los sistemas de vida

del planeta.

Se define como plaguicida a la sustancia o mezcla de ellas, destinada a

prevenir, destruir o controlar plagas incluyendo los vectores de enfermedadhumana o animal, las especies no deseadas de plantas o animales que ocasionan

dao duradero u otras que interfieren con la produccin, procesamiento,

almacenamiento, transporte y comercializacin de alimentos, artculos agrcolas

de consumo (como cereales en rama, azcar de remolacha y semillas de

algodn), madera y sus productos, forraje para animales o productos que puedan

administrrseles para el control de insectos, arcnidos u otras plagas corporales.Este trmino incluye sustancias destinadas al crecimiento de plantas, defoliantes,

desecantes, agentes para ralear frutas o sustancias para evitar la cada prematura

del fruto y productos aplicados a los cultivos, ya sea antes de la cosecha o

despus de ella para prevenir su deterioro durante el almacenamiento o

ransporte (FAO, 1990).

Descripciones parecidas han sido adoptadas por la Comisin del Codex

Alimentarius y por pases del Consejo Europeo en 1984. Se excluyen los

fertilizantes, los nutrimentos de plantas y animales, los aditivos alimentarios y las

drogas para animales (Henao, et al., 1991). Algunos plaguicidas pueden ser de

orgen biolgico, por ejemplo el Bacllus thuringiensis, empleado en campaas de

salud pblica para el control de los mosquitos que transmiten la malaria y el

Simulium Sp. vector de la oncocercosis.


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La mayora de los plaguicidas son de origen qumico sinttico y para su

venta comercial, combinan algn ingrediente activo que est elaborado para

combatir determinados tipos de plagas, con uno o varios ingredientes inertes que

diluyen el producto txico o constituyen su excipiente.

La agencia de Proteccin al Ambiente de Estados Unidos de Norteamrica

(EPA. 1991) por ejemplo, mantiene un registro de 1500 ingredientes activos, la

mayora de los cuales se caracterizan por ser compuestos orgnicos. LOS

formuladores mezclan estos compuestos con uno o varios de aproximadamente

900 excipientes para elaborar los aproximadamente 50,000 plaguicidas

comerciales registrados para su empleo en los Estados Unidos de Norteamrica.

En general, rara vez se tienen en cuenta las consecuencias del empleo de

sustancias excipientes, aunque por si solas constituyen una gran parte del

producto comercial, y a veces sus efectos nocivos superan a los de los propios

ingredientes activos. Por ejemplo el tetracloruro de carbono y el cloroformo que

son sustancias txicas para el hgado y el sistema nervioso central, pueden

utilizarse como ingredientes inertes sin ser mencionados en la etiqueta del

producto (Henao, 1991)./

Los efectos adversos de los plaguicidas para la salud pueden deberse

tambin a impurezas, tales como las dioxinas en ciertos herbicidas de tipoclorofenoxi, la etilentiourea en los fungicidas a base de bisditiocarbamatos o el

isomalatin en el malatin. Entre los efectos provocados por estos productos

tenemos la neurotoxicidad, neuropatas, dermatitis, cncer, teratognesis, etc.

(Henao, 1991)


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El conocer las ventajas y desventajas de utilizar plaguicidas, permite

determinar la conveniencia de utilizar productos menos persistentes, pero ms

txicos, o buscar alternativas biolgicas (biocontroles), que son menos peligrosas

para los seres vivos, pero desafortunadamente en la actualidad son menos

eficientes. Esto tiene relevancia debido a las tasas de mortalidad que se

presentan en pases de Amrica Latina, con especial inters en nuestro pas

(CPEHS, 1986).

Los casos de intoxicacin con plaguicidas se producen por utilizar

productos altamente txicos como los carbamatos, o demasiado persistentes

como los organoclorados. En muchos de los casos se manejan mezclas de

plaguicidas al libre arbitrio, sin que sean supervisadas por personal especializado,

reutilizndose los envases, y aplicndose los productos sin ninguna proteccin.

Es comn encotrar residuos de compuestos organoclorados y organofosforados

en aguas de los pozos y en ros. En las zonas agrcolas, los suelos pueden

contener residuos de plaguicidas utilizados en los cultivos. La persistencia de

estas sustancias fluctan de unos meses a varios aos (Albert, 1988).

Por otra parte, el problema de la reutilizacin en envases provoca

numerosas intoxicaciones tanto en seres humanos como en diversas especies. El

problema radica principalmente en que un residuo de plaguicida es catalogado

como peligroso (SEDESOL, 1994), por lo tanto se le debe dar un manejo especial

(lo cual no siempre sucede). En Mxico la nica empresa autorizada para el

confinamiento (forma de disposicin final de residuos peligrosos) de este tipo de

residuos, es la empresa Residuos Industriales Multiquim que solo acepta

recipientes o contenedores de algunos plaguicidas como volatn, cupravit,

manzate, hinosan, racumin y hemacur (PROFEPA,1994).


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Los plaguicidas organoclorados se encuentran distribudos en el medio

ambiente y en cantidades considerables son introducidos al medio acutico

intencionalmente para controlar larvas de insectos indeseables o bien entran por

lixiviacin a los sistemas de riego. Tambin pueden provenir de las descargas

domsticas o industriales de las grandes ciudades.

El problema de la presencia de plaguicidas tambin se presenta en lugares

tursticos donde existen playas cercanas a una vegetacin exhuberante, y que al

proliferar plagas, se ponen en prctica programas de fumigacin para no tener unimpacto negativo sobre la afluencia turstica.

Las tierras que son tiles para la agricultura se ven expuestas a ser

atacadas por plagas de insectos; por practicar el monocultivo (por no cultivarlas en

forma rotativa) con la presencia de alguna plaga, se utilizan estos biocidas paraproteger las siembras, pero al esparcir hidrocarburos organoclorados tales como

aldrn, lindano, dieldrin, DDT, DDD y DDE, se afectan tambin las aves

insectvoras y hasta el ser humano a travs de los productos extrados del campo.

La determinacin de plaguicidas organoclorados en acuacultivos es

necesaria, debido a que stos tienen una gran persistencia en el agua y en los

seres que la habitan. Son bioacumulables en peces, crustceos y moluscos entre

otros, volvindose txicos, segn la cantidad que tiende a incrementarse (Galindo

Reyes, 1996, Daz- Gonzlez, 1992). Esto es de considerarse, ya que el consumo

de estos organismos con gran potencial alimenticio y de popularidad general a

nivel mundial, estando contaminados con alguno de estos pesticidas, provocaran

entre otros efectos carcinognicos en el ser humano.


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Se encuentran los plaguicidas sobre todo en acuacultivos, que de alguna

manera se ven afectados por actividades agrcolas. Estos campos agrcolas al

ser sometidos al uso de insecticidas, herbicidas y fungicidas para su buen

desarrollo, permiten el ingreso de los plaguicidas organoclorados y

organofosforados al agua de riego.

Tambin con las precipitaciones pluviales se integran stos a lagos, ros o

esteros, de donde se toma el agua para los acuacultivos y son asimilados y

acumulados por los peces, crustceos o moluscos.


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2. ANTECEDENTES

2.1. Generales

Histricamente las primeras medidas para mitigar plagas fueron a base de

sales vegetales e inorgnicas. Desde el ao 1000 a.C., se conocen formas de

mejorar la produccin de alimentos, y el cuidado de las cosechas de insectos

nocivos. A continuacin se describe el uso de plaguicidas a travs del tiempo

segn William (1967) y Hernndez, (1982) en: Garca-Almanza, (1996).

Entre 1915-1920, se desarrollaron y se usaron varios insecticidas

arsenicales como resultado de la la.Guerra Mundial. En 1929, se utilizaron

compuestos del flor como insecticidas de ingestin en sustitucin de los

arsenicales no dejando residuos venenosos en las cosechas. El azufre, arsnico y

plomo se utiliz para eliminar gorgojos de plantas, y en 1929 se emple la nicotina

para destruir piojos de plantas sin causar dao al follaje. En 1948 el empleo de larotenona en los Estados Unidos de Norteamrica en sustitucin de las sales de

arsnico y plomo. En 1959 se emple mundialmente el polvo de Piretro como

veneno para piojos y pulgas.

Dentro de los txicos orgnicos de amplio espectro, comienza en 1932 la

era moderna de los insecticidas orgnicos usando el ter tiocano dietlico.

En 1939 se descubren las propiedades del DDT y entre 1940 y 1948

comienza el desarrollo y empleo de una gran variedad de insecticidas

organoclorados como BHC, Toxafeno, dieldrin, endrin, heptacloro, aldrn, lindano

y clordano.


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En 1944 se abre la industria de los plaguicidas organofosforados, al

comercializar Bayer el paratin etlico. En 1949 sintetizan el primer piretroide

sinttico Cinexin Y. En el periodo comprendido entre 1952-1965 se desarrolla el

uso de otros organofosforados como Usatin, Folimat, Asunto, Malatin, Naleo,

Dipterex, etc. En 1953 se comercializa el carbaryl como primer carbamato.

Desde 1956 se utilizan tambin hormonas y otros productos biolgicos de

espectro restringido junto con el control biolgico, mediante hormonas juveniles y

anlogos sintticos para controlar poblaciones de insectos. En 1959 se

identificaron las feromonas y en 1973 se sintetiza el Altosid juvenoide cientfico

siendo el primer agente morfogentico aprobado por la EPA. En 1976-1982

nuevos agentes qumicos de este tipo son utilizados, como feromonas y

juvenoides.

En el primer mundo para utilizar un plaguicida, se requiere de muchas

horas y dinero en investigacin previa. El costo puede variar desde el

descubrimiento hasta la comercializacin, lo cual lleva un tiempo promedio de 8

aos y en 1987 se estim un costo promedio de 50 millones de dlares.

La introduccin de plaguicidas en la actualidad es ms dificil por la cantidad

de requisitos que se deben de cubrir y de justificar para ser utilizados. La

composicin qumica tiene bsicamente un ingrediente activo el cual puede ser un

compuesto inorgnico, como los derivados de cobre, azufre, zinc y alumnio,

compuesto orgnico donde la mayora proviene de origen sinttico, como los

plaguicidas, aunque tambin son considerados los de origen botnico como lo son

los extrados de plantas. Los plaguicidas biolgicos pueden ser virus,

microorganismos o derivados de su metabolismo, formulados como insumos, para

una plaga en particular.


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Para aplicar un plaguicida es importante conocer su persistencia, SU

movilidad, los usos, el ingrediente activo, entre otras caractersticas.

La persistencia es la duracin sin cambio molecular que experimenta el

plaguicida desde que entra al ambiente. Es importante notar que existen algunos

plaguicidas ligeramente persistentes que duran menos de 4 semanas como lo

son el malatin, metil paratin dentro de los organofosforados; Poco persistentes

de cuatro a 26 semanas como lo son el paratin, Timet; medianamente

persistentes de 27 a 52 semanas, y altamente persistentes con ms de un ao

y menos de veinte (organoclorados) y mas de veinte aos como puede ser casos

especficos de aplicaciones del DDT. (CICOPLAFEST, SARH, SSA, SEDESOL,

SECOFI, 1994).

Su movilidad puede deberse a su dosificacin area, la lixiviacin delos

suelos cuando hay lluvias, y el arrastre por el viento en el caso de follajes.

Tambin pueden presentar fotodescomposicin, la cual se debe principalmente a

la radiacin solar. La descomposicin qumica puede ser por medio de reacciones

como oxidacin, reduccin, e hidrlisis, y pueden darse en el agua, en el suelo y

en el aire. Mediante estas reacciones se pueden descomponer algunos

plaguicidas y activar otros, dando lugar a la formacin de compuestos inactivos ode otros potencialmente ms peligrosos para la vida. Tambin puede haber

adsorcin por coloides en el suelo, siendo los suelos arcillosos los ms

susceptibles. (Garca-Almanza, 1996).

La actividad microbiolgica es el principal medio para su degradacin en elsuelo, y se ve afectada por la temperatura, humedad, pH, contenido de materia

orgnica y presencia de nutrimentos. Un suelo con buen contenido de nutrimentos

favorece el desarrollo de microorganismos y los plaguicidas orgnicos se


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El uso de los insecticidas puede variar desde agrcola, forestal, urbano

(areas domsticas, medios de transporte, lugares tursticos), jardinera (jardines y

plantas de ornato), salud pblica, pecuarios (incluso para animales domsticos)

industriales (procesamiento de productos y subproductos y para el cuidado de

reas industriales). (Daz-Gonzlez, 1992)

El ingrediente activo principal que los forma los clasifica en

organoclorados, organofosforados, carbamatos, de cobre, de azufre etc. La

formulacin puede ser slida, lquida y gaseosa.

Los plaguicidas organoclorados comprenden una pequea parte de

sustancias orgnicas sintticas, que se han utilizado en Estados Unidos desde

hace medio siglo para usos agrcolas y forestales. Estas a su vez afectan a los

organismos acuticos, tanto en ros y lagos y finalmente los que se encuentran en

zonas costeras (Mearns et a/.,1988).

En pases desarrollados se han tomado serias medidas para reducir el

efecto futuro ocasionado por la accin de los plaguicidas como es el caso de la

cancelacin del uso del DDT y el arochlor. Tambin se han propuesto

descontinuar, es decir, utilizar el dieldrin hasta agotar existencias. La fbrica

productora del clordano puede decidir en cualquier momento eliminar este

producto del mercado, ya que se han revelado estudios de su toxicidad y

persistencia en el medio (FAO/UNEP,1991).

La estructura de la industria de los plaguicidas en Mxico est conformada

por empresas que efectan dos procesos productivos bien definidos, como las


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1 0

que fabrican los ingredientes activos (grado tcnico), que para su procesamiento

requiere de materias primas bsicas y productos intermedios que pueden ser

derivados de la industria petroqumica, metalrgica, y de fermentacin. Son

ingredientes de alta concentracin y toxicidad, por lo que su manejo inadecuadoes muy riesgoso. (Albert, 1990)

Tambin hay empresas formuladoras que se dedican a mezclar los

ingredientes activos con otros materiales (inertes, disolventes y emulsificantes)

para elaborar los productos terminados a diferentes concentraciones. Estos son

los que se aplican en la agricultura. (Albert, 1988)

En 1959 se comienzan a fabricar los agroqumicos en nuestro pas (DDT,

BHC), los fungicidas a base de tiocarbamatos y algunos otros productos

inorgnicos. Desde entonces la industria se vio favorecida y creci gracias al

cultivo del algodn altamente tecnificado el cual requera grandes cantidades de

plaguicidas, (Toxafeno) pero tambin por la presencia de buenas condiciones

para instalar nuevas plantas qumicas y la construccin de grandes obras de

irrigacin que estimulaban el uso masivo de diversos insumos agrcolas. A pesar

del crecimiento de la industria el continuo aumento en la demanda de

agroqumicos provoc que durante los aos sesenta se importaran 165 diferentes

productos (Restrepo, 1988). Para cubrir este dficit, el Gobierno Federal inici en

1968 un programa de fabricacin de DDT, BHC y Toxafeno, a travs de

Guanomex (hoy Fertilizantes Mexicanos FERTIMEX). Actualmente 35 empresas

conforman la industria de plaguicidas. Entre ellas destacan 11 que son solamente

importadoras mientras que 24 empresas producen los ingredientes activos, estas

ltimas disponen de una capacidad de 62,000 toneladas por ao. (Garca-

Almanza, 1996)


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l l

Los plaguicidas importados provienen en su mayor parte de los Estados

Unidos, alrededor de 12,000 toneladas promedio anual, y poco ms de un 10% de

Alemania, aunque tambin se importan de Suiza, Italia, Dinamarca, Israel, Japn,

Francia y el Reino Unido, en orden de importancia. ( Tycooly-lnternational 1982).

El mercado de los plaguicidas en el pas ha ido en constante aumento; en

960 se vendieron 14,000 toneladas y 34,000 toneladas seis aos despus. La

Asociacin Mexicana de Estudios para la Defensa del Consumidor, calcul que en

986 se vendieron en Mxico alrededor de 60 mil toneladas. Dentro de S

volmenes vendidos los insecticidas ocuparon en promedio 51 , los herbicidas

los fungicidas 15% y el 3% restante, otros (Restrepo, 1988).

Con frecuencia la prensa y las publicaciones especializadas recogen

denuncias sobre intoxicacin de personas y daos al medio en todo el pas. En el

agro las cosas son mas difciles, se ha llamado la atencin sobre el uso anrquico

y elevado de plaguicidas y se enfatiza la falta de proteccin a los trabajadores del

campo. ( Rosales-Hoz, 1979).

Desde el punto de vista sanitario, muchas de las enfermedades humanas

en s trpicos pueden ser transmitidas por huspedes intermedios como lo son

malaria, enfermedad de Chagas,dengue, oncocercosis, filariasis, tripanosomiasis,esquitosomiasis,

leishmaniasis, pes te , fiebre amarilla y tifo, aunque la

contaminacin por residuos de plaguicidas organoclorados puede tener efectos

adversos a largo plazo para la salud humana. Estos efectos se irn descubriendo

en personas expuestas a estos productos durante lapsos prolongados y en

cantidades considerables. Existen estudios donde se relacionan la salud humana

con el incremento de estos productos en la naturaleza o con el uso de estospesticidas en la casa o jardn, ya que se introduce por medio de la respiracin o

de la alimentacin.


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1 2

En los mamferos se acumula en tejidos con mayor cantidad de lpidos,

como es el caso de la leche materna, hgado y cerebro (Albert y Brcenas, 1988).

Un estudio reciente efectuado por el WorldHealfh Organizafion(WHO) sobre DDT

en la leche materna mostr mas akos niveles en pases en subdesarrollo, que en

pases europeos desarrollados. En estos ltimos se controla el uso del DDT desde

hace una dcada Infernafional Mussel Wafch Commifee, 1992). Aunque el uso

de este producto est prohibido o severamente restringido, en muchos pases se

mantiene su aprobacin para las campaas de salud pblica.

En la acuacultura hay monitoreos para evaluar la concentracin de

pesticidas organoclorados, como es el caso del proyecto MusselWafch Projecf ,

donde utilizan bivalvos como indicadores biolgicos, por su habilidad de

concentrar la mayora de los contaminantes y por sus hbitos sedentarios

Infernfafional Musselwafch Commifee, 1992). Otros estudios utilizan el msculo

de Plafichfhys flesus para monitorear la contaminacin por plaguicidas en reascosteras (Cossa et al., 1992).

En Mxico se han realizado muy pocos estudios de plaguicidas en cultivos

de camarn. En la Baha Santa Mara y en el estero de Teacpan, en el Estado de

Sinaloa, se encontraron plaguicidas en agua, sedimento, en almejas y en

camarones, sobresaliendo la concentracin de lindano con un nivel

potencialmente daino, al sobrepasar el lmite permisible por la Federal Water

Pollution Control Administration of the United States (FWPA) (Galindo Reyes et

al., 1996). En camarn y en el agua del estero de Uras Sinaloa, se encontraron

cantidades de plaguicidas potencialmente peligrosos, siendo una zona agrcola

con un buen potencial acucola. (Galindo Reyes, 1992).

Algunos niveles de concentracin corresponden a los causales de daos

fi i l i bi i d l l i i


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1 3

plaguicidas est relacionada con el lento crecimiento y diversas patoligas en

estos organismos. El consumo humano de este alimento marino podra

representar un riesgo para la salud porque el factor de bioacumulacin de los

plaguicidas encontrados en la Bahia de Ohura Sinaloa tienen un rango de 3.6 a

675 ppb. Estos fueron encontrados en 6 de 20 estaciones donde se obtuvieron

camarones y los analitos presentes fueron Aldrin, Endrin, Methyl Paratin, DDT y

Lindano. (Galindo Reyes et al., 1999).

Para poder determinar los plaguicidas que estn en agua, sedimento y en

organismos o tejidos de organismos, se tiene que extraer y concentrar cadamuestra para poder detectar hasta cantidades en el orden de partes por billn

(ppb). Para esto sirve la cromatografa, que es una herramienta bastante til y que

permite medir estos compuestos con una excelente precisin. Con el detector de

Captura de Electrones se pueden observar lmites mnimos de plaguicidas

organoclorados en bajas concentraciones (ppb). En el caso de los plaguicidas

organofosforados si no se tiene el detector de Nitrgeno-Fsforo, se puede usar eldetector de ionizacin de flama, el cual permite cuantificar en orden de partes por

milln (ppm) (Hewlett Packard, 1992).

2.2. NORMATIVIDAD

2.2.1. Internacional

El Principio de Informacin y Consentimiento Previo (PIC) se desarrolla a

partir del intercambio de informacin que se fomenta en el cdigo donde el

Artculo No. 9 establece, que cualquier pas que tome una decisin para prohibir o


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debe notificar a la FAO de inmediato para que proporcione a las autoridades

competentes la informacin referida. Se deber informar la identidad del producto

con el nombre qumico especfico del principio activo, un resumen de las acciones

adoptadas y sus fundamentos, y en caso de restricciones de uso, el nombre y

direccin del punto de contacto,si se requiere. Si un plaguicida ha sido objeto de

prohibicin o restriccin y el pas se encuentra inscrito en elPIC,

ese plaguicida

no ser exportado a dicho pas.

Listado del Registro Internacional de Productos Qumicos Potencialmente

Txicos segn el Principio de Informacin y Consentimiento Previos (PIC)

(FAO/UNEP,1991).

Aldrn Clordano Clordimeform

Cihexatin Dieldrn Dinoseb

DD T Dibromuro de etileno EDB Fluoracetamida

Hexacloruro de benceno Heptacloro Mercurio Inorgnico.

@CH)

Mercurio Orgnico Paraquat Paratin etlico

Paratin Metlico 2,4,5,

T


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15

Candidatos al procedimiento de informacin y Consentimiento previo PIC.

Aldicarb Amitrol Bromuro de Metilo

Compuestos de Arsnico Captafol Carbofurn

Clorobencilato Cloropicrina Demetn (Systox)

Diclorvox Dicofol

Estricnina Fluoracetato de SodioI

I

Generadores de Fosfina Lindano

Metamidofos

Endosulfn

Fosfamidn

MetadomilI

Metoxicloro Mirex

Monocrotofos Pentaclorofenol Pirofosfato de tetraetilo

(TEPP).

Plaguicidas de los cuales se cree que su ingrediente activo ya no ser producido

distribuido o utilizado.

Compuestos de Plomo

Kelevan

Shraden

Dibromocloropropano

(DBCP)

Leptofos

Strobano

Endrn

Nitrofen

Sulfato de Talio

Telodrn Toxafeno

La red Internacional de Accin sobre Plaguicidas (Pesticide ActionNetwork

Internafional-PAN) es una coalicin de grupos de ciudadanos en todo el mundo

para detener el mal uso de los plaguicidas y promover el control sustentable de


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plagas. La campaa internacional de la Docena Sucia fue lanzada el 5 de Junio

de 1985 como la primera accin conjunta de PAN, (PAN Internafional, 1990).

Para esta campaa fueron seleccionados varios productos basndose en varioscriterios:

Riesgos comprobados para los seres humanos o el ambiente

Uso extensivo especialmente en los pases en vas de desarrollo existencia

de prohibiciones y

Restricciones en pases exportadores e importancia como ejemplos de

otros aspectos ms amplios de los problemas que ocasionan los plaguicidas en elnivel internacional.

Esto es para garantizar que la seguridad de la salud humana y del

ambiente sean consideradas como prioridades en todas las decisiones polticas

sobre plaguicdas, acabar con el uso de plaguicidas si no se cuenta con las

medidas de seguridad adecuadas, eliminar las dobles normas en el comercioglobal de plaguicdas y generar apoyo para la investigacin y utilizacin de

mtodos seguros y sustentables de control de plagas. Colectivamente, los

plaguicidas de la docena sucia causan intoxicaciones, muerte y destruccin

ambiental cada ao. Entre este grupo de plaguicidas se encuentran :

Aldicarb (Temik) Canfeclor (Toxafeno)Heptacloro Clordimeform

DDT Aldrn, Dieldrn y Endrn

Clordano

DBCP

EDB

HCH (BCH)1 I

Lindano

1Paraquat

Paratin

2,4,5,~

Metil-paratin Pentaclorofenol


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.2.2. Nacional.

a Ley General del Equilibrio Ecolgico y la Proteccin al Ambiente (SEDESOL,

establece:

Segn el artculo lo. Esta Ley es reglamentaria de las disposiciones de la

Constitucin Poltica de los Estados Unidos Mexicanos que se refieren a la

reservacin y restauracin del equilibrio ecolgico, as como a la proteccin al

mbiente, en el territorio nacional y las zonas sobre las que la nacin ejerce su

oberana y jurisdiccin. Sus disposiciones son de orden pblico e inters social y

n sus objetivos est establecer las bases para la prevencin y el control de la

ontaminacin del aire, agua y suelo.

.2.2.2. Caractersticas de los compuestos analizados:

A continuacin se listan algunas caractersticas de los analitos que fueron

uscados en las muestras (SEDESOL, 1994; CICOPLAFEST, 1994):

El DDT (CAS 50-29-3)

Su frmula molecular es C14H9Cl5. S inn imos p-pDDT, 2,2,bis(p-

,l ,l tricloroetano, Diclorodifeniltricloroetano. ENT 1506, Dicofano,

Clorofenotano Guesarol yNeocid.

El DDT y sus metabolitos son txicos y cancergenos con largo tiempo de

persistencia en suelos y agua. En los humanos la exposicin por DDT es por

ngestin de comida contaminada. En el aire y agua y de consumo, SU


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concentracin para la proteccin de animales marinos debe ser de O.OOlpg/L en

un promedio de 24 horas y nunca exceder 0.13 pg/L. En el humano

preferentemente debe ser de cero. Puede penetrar por inhalacin, absorcin de la

piel, por ingestin y por contacto con piel y ojos. El DDT es moderadamente mstxico en el hombre que en otros organismos, sin embargo su solubilidad en agua

es baja (0.0012ppm) y es mas alta en grasa (100,000 ppm). Es un producto que

puede dividirse de tal manera que el DDE (metabolito = tiene propiedades

similares. Ambos compuestos son altamente persistentes en los organismos

vivientes. Es un plaguicida restringido, de uso oficial, forma parte del registro del

ICy de la docena sucia.

LD 50 oral, es de 250 mg/kg. Su ingestin diaria admisible (EPA) es de

0.021 mg/persona. Su lmite permisible para agua de abastecimiento O.O5mg/L.

Su lmite mximo permisible para cuerpos de agua (EPA) es de O.O02pg/L. Los

sntomas incluyen parlisis de la lengua, labios y cara, confusin, convulsiones,

\vmitos, irritacin de la piel y ojos atacando al Sistema Nervioso Central, hgado,

riones y piel.

DDD (CAS 72-54-8)

Sinnimo: 1,2, Dicloro-2,2-di(P-clorofenil)etano, T D E , Rotano. T i p oinsecticida organoclorado, metabolito del DDT. Su uso es agrcola, existe baja

toxicidad en mamferos, LD50 (oral, ratas) es de 5000mg/kg.

En cuanto a efectos a la salud altera el sistema nervioso central y se

considera txico para aves y peces ya que es fuertemente bioacumulable en su

tejido (Factores de bioconcentracin reportados en el rango de 933-6500 veces).Es altamente persistente en suelo, sedimentos y agua ; su vida media reportada

es aproximadamente de 190 aos tambin es extremadamente txico en

invertebrados acuticos


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DDE (CAS 72-55-9)

Su nombre qumico es 1 ,l ,-diclore-2.2-bis(p-clorofenil)etileno. es un

nsecticida, tiene algunos ismeros como pp DDE: 1 ,l ,dicloro 2,2-bis (p-clorofenl),

tileno.

Es altamente persistente en suelo y sedimentos pero no en agua. Su vida

media es de 15 aos en suelos y ms de 1100 das en sedimentos como el DDT y

l DDE, es altamente bioacumulable con factor de concentracin en tejido de

peces y es altamete txico en una gran variedad de vertebrados e invertebrados

acuticos.

DIELDRIN (CAS 60-57-I)

Frmula moleklar Cl2 HI8 Cl 6 0. Su punto de fusin 175176C. Slido

cristalino, cancergeno y txico.

Sinnimos 1,2,3,4,10,10 hexacloro-6, 7- Epoxy 1,4,4a,5,6,7,8,8a-Octahidro-

Oc ta lox , Heod, ENT-16225. Es un

compuesto que junto con el aldrn pertenecen al grupo de los insecticidas

hidrocarbonados.

ES persistente en el medio ambiente con vida media reportada entre 175

das y 3 aos) y tiene una volatilidad extremadamente baja (a presin de vapor de

0.000000178 mm de mercurio a 20 C y una baja solubilidad en agua (186pgIL a


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animales, en la cera de las plantas y otras sustancias orgnicas en el medio

ambiente por eso se puede decir que es bioacumulable en la cadena alimenticia.

En animales marinos la concentracin no debe exceder de 0.71ug/L y en los

humanos es de cero. Su determinacin en agua puede ser por extracciones con

cloruro de metileno seguido por cromatografa de gases. Sus rutas de entrada son

por inhalacin, absorcin en la piel, contacto con piel y ojos, ingestin. LOS

sntomas que pueden causar son vmitos, nuseas, convulsiones, coma entre

otros. Ataca al Sistema nervioso central, hgado riones y piel.

ALDRIN (CAS 309-00-Z)

Slido cristalino, Cl2 HI 8Cl6.

Punto de fusin 104C. Sinnimos HHDN.

1,2,3,4,10,10-hexacloro,

1,4,4a,5,8,8a-hexahidro-1,4,-endo-exo-5,8,- dimetano-

naftaleno.

Es carcingeno y su exposicin puede ser por aire, agua y alimentosdebido a su persistencia en el medio ambiente. Su concentracin en aguas no

debe excederse de 3.0 ug/L para aguas marinas el lmite es de 1.3ug/L.

Las rutas

de exposicin son por inhalacin, absorcin de la piel, ingestin, irritacin deIOS

ojos y contacto por piel. Ataca principfiente al Sistema nervioso central, riones,

hgado y piel. El aldrin es muy estable trmicamente y su descomposicin no se

aprecia a 250 C, puede ser degradado por actividad con metales como el sodioen alcohol.

Este analito es entre moderadamente a altamente persistente en suelos

donde rpidamente se convierte en dieldrin. Su vida media se ha estimado entre

20 das a 1 ao.


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CLORDANO (CAS 57-74-9)

Sustancia lquida, flamable, cancergena, muy peligrosa y contaminante

txico. Su frmula molecular es Cl0 H6 Cl8

Sinnimos 1,2,4,5,6,7,8,8-octacloro-2,3,3a,4,7,a-hexahidro-4,7-metano-l H-

indeno, o tambin como octacloro.

Es el modelo general de insecticidas del grupo de hidrocarburos policclicos

clorados, llamados insecticidas ciclodienos. Es un insecticida de casas y jardines

que afecta principalmente a nios como resultado del consumo de leche materna.

En agua subterrnea donde hay biodegradacin, la vida media ha sido

reportada arriba de 7.6 aos y en suelo puede ser de ms de 20 aos.

La concentracin mxima para la proteccin de la vida marina es de

O.O04yg/L en un promedio de 24 horas y no debe exceder de 0.09 pg/L. Para

proteger la salud humana la concentracin debe ser de cero. Las rutas de entrada

en el cuerpo humano son por in acin, absorcin en la piel, ingestin y contacto

con la piel y ojos. Entre los efectos que puede producir estn la visin borrosa,

confusin, ataxia, delirio, dolor abdominal, nuseas, vmitos, diarrea, irritabilidad,convulsiones, anurias, etc.

LINDAN0

Sinnimo: 1,2,3,4,5,6-hexaclorociclohexano (ismero gama), es de uso agrcola,

slido, su solubilidad es de 10 ppm en agua, es un plaguicida restringido en

Mxico, forma parte de la docena sucia y es candidato al registro del PIC

(Principio de Informacin y Consentimiento Previo) La ingestin diaria admisible


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egn la EPA es deO.O035mg/persona,

el lmite para agua de abastecimiento

ambin de acuerdo con la EPA es de O.O05mg/L. Siendo el lmite mximo

ermisible para cuerpos de agua (EPA) de 0.020 pg/L. El lmite permisible para

gua potable segn la NOM-127 es de 2pg/L.Afecta al sistema nervioso, es txicoara los peces. En cuanto al tratamiento/disposicin: Tratamiento en suelos

aerobio-anaerobio) encapsulacin y relleno sanitario, e incineracin a altas

emperaturas. Su L.D. 50 (oral) es de 88mg/kg.

MALATION

U nombre qumico es 5-(1,2-bis(Etioxicarbonilo)etil) O,O-dimetilfosforoditionato.

El uso principal es agrcola, pecuario en jardinera y urbano, es un

nsecticida organofosforado de contacto, y es poco persistente.

Su vida media es en suelo de 168-72 horas, en aire de 9.8-1.0 horas, en

gua superficial de 1236-100 horas, en agua subterrnea de 2,472-200 horas. Se

iodegrada en cuanto a sus propiedades fsicas es lquido, de color amarillo o

af obscuro, es ligeramente soluble en agua. /

Su toxicologa LD50 (oral, ratas) es de lOOmg/kg. Su ingesta diaria

admisible segun la CICOPLAFEST, (1994) es de 0.02 mg/kg. El criterio de la

calidad del agua de abastecimiento es de O.lpg/L. Su lmite mximo permisible

para cuerpos de agua (EPA) es de 0.008 pg/L.

En cuanto a efectos a la salud es moderadamente peligroso irritante


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al sistema nervioso central, produce cianosis, y dao al miocardio. Es altamente

txico para peces y abejas. Su tratamiento y disposicin es en suelos (anaerobio),

relleno sanitario (solo en pequeas cantidades) y disposicin despus de

incinerarlo a altas temperaturas.

Nombre qumico: 1 ,l ,Dimetil-4.4-bipiridium bis (metil sulfato)

Sinnimos: Gramoxones, Dextronax, Esgram, Weedol, metilviologen. SU

USO es agrcola el tipo es herbicida orgnico y desecante del grupo de IOS

bipiridilos de contacto y postemergente. Es poco persistente, slido de color

amarillo, inodoro, es muy soluble en agua, muy ligeramente soluble en alcohol e

insoluble en hidrocarburos. Su toxicologia LD50 (oral, ratas) es de 150mg/kg,

ingesta diaria admisible segn CICOPLAFEST, (1994) es de 0.004mgIkg. Provoca

muerte por ingestin si se ingiere una solucin de 114ml al 20%. Es un plaguicida

restringido en Mxico, restringido por la ONU, forma parte del PIC y de la docena

sucia. En cuanto a efectos a la salud es moderadamente peligroso, si se ingiere

produce fibrosis pulmonar, es irritante ocular y drmico, provoca dao al

miocardio, tambin produce alteraciones respiratorias severas asi como edema

pulmonar. Es txico para peces y aves, en suelos aerobio, anaerobio (mezclarcon detergente casero y enterrar en suelo de arcilla) como tratamiento para los

suelos.


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2.3 JUSTIFICACIN:

El propsito de realizar un estudio sobre plaguicidas es debido a que en las

ltimas dcadas se ha detectado la presencia de estos compuestos qumicos en

casi cualquier parte de nuestro ambiente, lo cual trae consecuencias muy

peligrosas para el ser humano.

Entre los agentes qumicos ambientales que pueden afectar el material

gentico y causar malformaciones congnitas y mutaciones, se encuentran los

plaguicidas, siendo la anencefalia una de las afecciones relacionadas con estos

productos, ATSDR, 1995. En nuestro pas, se han presentado nios recin

nacidos con problemas de anencefalia, relacionado con la contaminacin porplaguicidas (SSA, 1994).

Existen contados estudios en Mxico sobre la determinacin de plaguicidas

en cultivos de camarn. Se desconoce si existen trabajos con reproductores de

vannamei o Lifopenaeus vannamei como propuesto por Prez Farfante

y Kensley (1997). No se ha determinado el efecto que ocasionan stos en

distintos eslabones de la cadena trfica costera, por lo que es importante SU

seguimiento para poder controlar su uso.

Adems son contados los trabajos publicados donde se pueda conocer la

contaminacin por plaguicidas a nivel nacional. En la zona comprendida entre los

Estados de Jalisco, Colima y Michoacn no se encontraron reportes de estudios


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LOS principales contaminantes de los alimentos en Mxico son S

plaguicidas organoclorados y sus productos de biotransformacin, en segundo

ugar estn los residuos de plaguicidas organofosforados (Albert, 1990).

La presencia o ausencia de cantidades detectables de plaguicidas

organoclorados en camarn se podr afirmar con el presente trabajo y en caso de

enoctrarse estos analitos, cuantificar en forma confiable, ya que los agricultores

del valle de Cihuatln utilizan plaguicidas biodegradables para sus plantaciones

de coco, limn y pltano.

La presencia de plaguicidas puede deberse a la contaminacin del agua

con la que fueron regados talescultivos y arrastrados al Ro Marabasco llegando

a la Laguna de Barra de Navidad, que forma el lmite entre los Estados de Clima

y Jalisco. Tambin se podr deber a los ingredientes del alimento suministrado

durante su cultivo. Otra causa puede ser la inclusin de estos plaguicidas en el

sedimento que los adsorbe del agua a travs del tiempo.

Dada la necesidad de vender productos con un alto valor comercial, se

ustifica encontrar camarones libres de plaguicidas de plaguicidas que cumplan

con los requerimientos internacionales y que se puedan por lo tanto exportar. Esto

ustifica el presente estudio en donde se aplican tcnicas de Qumica Analtica

ambiental . Tambin es necesario efectuar los anlisis correspondientes del agua

del sedimento de la zona, ya que se podrn efectuar estudios de construccin

de granjas camaroncolas en un futuro cercano y con mayor seguridad de contar

con fuente de agua y sedimento que cumplen con las normas nacionales e

nternacionales.


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3. OBJETIVO GENERAL

Determinar cuantitativamente la presencia de plaguicidas organoclorados

en camarones blancos adultos Litopenaeus vannamei (Boone) (Mopenaeus

cultivados y madurados en laboratorio bajo condiciones controladas.

3.1. OBJETIVOSESPECFICOS:

3.1.1. Determinar la concentracin de plaguicidas como aldrn, lindano, dieldrn,

DDT, DDE y DDD en el msculo y en la cabeza del camarn blanco del Pacfico,

mantenido en cautiverio bajo condiciones ptimas de cultivo durante por cuatro

meses en agua tratada por dos diferentes sistemas de filtracin y preparacin.

3.1.2. Evaluar la concentracin de plaguicidas en el agua que se utiliza para el

cultivo de esos camarones.

3.1.3. Detectar la concentracin de plaguicidas en el sedimento de la Laguna de

Barra de Navidad, Jal., de donde se obtiene el agua para el cultivo de IO S

camarones.

3.1.4. Encontrar la concentracin de plaguicidas en el alimento suministrado a los

camarones durante su cultivo.

3.15 Investigar posibles fuentes de plaguicidas que se lleguen a detectar en los

organismos cultivados con agua de la Laguna de Barra de Navidad.


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4. MATERIALES Y METODOS

4.1 Localizacin del rea de estudio

El cultivo de camarn y su respectiva reproduccin en cautiverio, se

desarrollaron en el Laboratorio de Ciencias Marinas de la Facultad de Ciencias

Naturales y Agropecuarias de la Universidad Autnoma de Guadalajara (U.A.G.),

con sede en Barra de Navidad, que se localiza al surdeL

Estado de Jalisco. Esta

es una zona donde desemboca temporalmente el Ro Marabasco que atraviesa la

zona agrcola montaosa y el valle frtil de Cihuatln entre los Estados de Colima

y Jalisco. El agua proveniente de la Laguna de Barra de Navidad, fue introducida

por medio de una bomba de 3 caballos de fuerza a travs de una red hidrulica,

ue previamente tratada con Na2EDTA (1 Ippm) a fin de disminuir el grado de

oxicidad de metales pesados como lo recomienda Castilleet al.,(l981). Y segn

anlisis realizados presenta condiciones ptimas de salinidad, oxgeno disuelto ynutrientes para su cultivo (Lin Cabello, 1995).

4.2. Procedencia de camarones :

En este estudio se realizaron mediciones en organismos cultivados, en

en sedimento y en alimento nico suministrado. Los organismos

eproductores fueron transportados de un centro de acopio en el Puerto de San

Blas Nayarit, hasta las instalaciones del Laboratorio de Ciencias Marinas, en

Barra de Navidad, Jal., Facultad de Ciencias Naturales y Agropecuarias de la

Universidad Autnoma de Guadalajara.


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4.3. Tratamiento de camarones vivos dentro del Laboratorio.

Los organismos fueron aclimatados y observados durante 20 das en unas

instalaciones en Isla Navidad, Colima, fuera del Laboratorio de Ciencias Marinas(U.A.G.), Al final de este periodo los camarones se trasladaron a las

instalaciones del Laboratorio, en donde fueron separados por tanques en el lapso

de la cuarentena y posterior a ella, los camarones obtuvieron dieta comercial

dividida en tres raciones diarias.

LOS camarones se mantuvieron en las instalaciones del Laboratorio con el

fin de iniciar desoves con cuatro diferentes tratamientos alimenticios. Se

seleccion un tratamiento con alimento comercial, para que se pudieran

comparar con aquellos camarones que se quedaron en Isla Navidad con el mismo

alimento comercial. Los camarones que se mantuvieron en Isla Navidad se

utilizaran para reponer los que se murieran antes del inicio del experimento en el

Laboratorio. Esta corrida dur cuatro meses al igual que los camarones

guardados en Isla Navidad.

La diferencia entre los dos tratamientos consisti nicamente en el

tratamiento que se le dio al agua. En Isla Navidad el agua es bombeada

directamente de la Laguna de Barra de Navidad a un sistema de almacenamientoen tinacos previa filtracin por filtro de arena. En el Laboratorio de Ciencias

Marinas el agua se extrae de un pozo de 4 metros de profundidad y a 10 metros

de la playa, pero dentro de la Laguna. Posteriormente el agua es filtrada por

arena, por cartucho de 10 y 1 vrn de poro y una adicin de ll ppm de Na

tratada por Luz Ultravioleta y finalmente almacenada en depsito obscuro.


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4.4. Obtencin de camarones, agua, sedim ento y transporte.

Para el anlisis de plaguicidas se obtuvieron del Laobratorio 5 kg de

camarones (estos fueron comprados a la U.A.G.) se colectaron vivos de dos

cultivos en estanques bajo condiciones controladas. Uno se efectu en Isla

Navidad, Col. Con filtracin sencilla por arena y sin otro tratamiento previo, y el

otro se efectu en el Laboratorio de Ciencias Marinas (U.A.G.) ubicado en Barra

de Navidad, Jal.

Una vez congelados los dos lotes de camarn a -15C, congelados junto

con el agua colectada en el Lab. Ciencias Marinas y de Isla Navidad as como el

sedimento de la Laguna de Barra de Navidad fueron transportados va area a la

Ciudad de Mxico, hasta su procesamiento.

4.5. Manejo y anlisis de muestras :

Es de gran importancia enfatizar las medidas de higiene previas al

anlisis, esto es porque cualquier contaminacin presente puede alterar el

contenido del cromatograma..

Los reactivos debern ser grado plaguicida (G.P.), y verificarse mediante un

blanco. El reactivo cuando ya tiene mucho tiempo y fue destapado, puede generar

impurezas que al inyectar directamente casi no se observan o se ven unos picos

muy pequeos, pero despus del proceso estos picos se concentran en un 1 :120-

200% y estos picos que se vean pequeos, crecen considerablemente al grado

de que pueden interferir en el cromatograma cuando se pretende analizar la

muestra.


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Por este motivo existe un sistema de limpieza, el cual consiste en lavar el

material de vidrio (ya que para nada se utilizan materiales de origen plstico) con

abn Extran diludoal 5% y se enjuaga con abundante agua, luego con mezcla

dejando de 15min a 2 hrs el material. Posteriormente enjuagar, dejarescurrir hasta sequedad y luego enjuagar con diclorometano grado plaguicida, (0

para residuos orgnicos), y de preferencia colocarlo en un horno a 5OOC

(Recordar que a mas de 700C se puede fundir el vidrio) poner una capa de

papel aluminio enjuagado en la superficie de la boca del frasco y se cierra. Esto

mismo es para matraces erlenmeyer, pipetas, frascos colectores de muestra,

viales, etc. los matraces volumtricos no se someten al calentamiento del horno o

mufla. Pero este y todo el material se debe enjuagar generosamente con el mismo

solvente inmediatamente despus de usarse.

Las jeringas (marca Hewlett Packard y Hamilton) de 10l~L de inyeccin

para el cromatgrafo se lavaron con solvente (acetona-metano1 1 :l en un bao

ultrasnico. Las jeringas se encuentran calibradas con sus respectivos mbolos

por lo que no deben de intercambiarse. Tambin al cabo de un mes de uso, es

conveniente lavarlas con cido actico al 40% pasndose una corriente de ste

por la jeringa y posteriormente enjuagarse con agua grado plaguicda,succionando con un matraz kifasatto ayudado con vaco y sus respectivas

trampas de humedad. Esto se debe realizar cada 20 inyecciones, y despus de

cada inyeccin se deber enjuagar 30 veces con acetona grado plaguicida.


39/88

3 1

Las cuatro tcnicas en relacin a la extraccin en tejido de camarn, son :

0 Realizada Eon el apoyo del Laboratorio de Nutricin de la Facultad de

Veterinaria UNAM.Q

Aprendida en el Laboratorio del Instituto de Fisiologa Celular UNAM.

Q La que se mont con el equipo soxhlet en el laboratorio de Fisicoqumica

Marina UNAM de acuerdo a las tcnicas del ASTM, 1993., EPA, 1992,

GERGJ 992.

0 La que se realiz con el equipo de extraccin de compuestos orgnicos

por tecnologa de microondas.

4.51. Laboratorio de Nutricin de la Facultad de Veterinaria UNAM

Se le inyect estndar interno a un camarn testigo y a otro no,

posteriormente se licu con ter de petrleo, se filtr con fibra de vidrio preparada,

que consiste en un calentamiento en mufla a 500C por 5 horas, colocada en un

embudo previamente lavado y se concentr con aire. Se pas por una columna

cromatogrfica deIcm

de dimetro empacada con florisil activado y desactivado

para purificacin, se reconcentr con airey

se inyect en el cromatgrafo. El

florisil se activa colocndolo sobre un filtro whatman en un filtro Gooch en un

matraz kitasatto, se le agrega a saturacin agua destilada libre de plaguicidas, (el

agua libre de plaguicidas se puede preparar si es que no se compra, realizando

una extraccin con embudos de separacin utilizando agua destilada. Se realizan

3 extracciones con 20mL de cloruro de metileno para un litro de auga destilada y

se puede considerar como agua libre de plaguicidas) y se filtra.


40/88

32

El filtrado se reparte en una o varias cpsulas de porcelana y se mete a la

mufla a 660C por 6horas y posteriormente se coloca en una estufa a 130C y se

deja toda la noche (12 horas). Despus se deja reposar en temperatura ambiente

y en una hora se puede utilizar.

El florisil se desactiv con el 5% de agua libre de plaguicidas en rotavapor

hasta que se homogenize, esto es para dar a las molculas una textura apropiada

para que al pasar el extracto y elur con solventes, ste se purifique

adecuadamente. La desactivacin se debe hacer antes de usarse y no se debeutilizar el florisil desactivado despus de 7 das.

El sulfato de sodio anhidro se coloca en una mufla y se somete a una

temperatura de 440C por 4 horas. Y se guarda en un frasco previamente lavado,

El Sulfato de sodio es ms estable, puede durar hasta un mes pero de preferencia

se prepara cada 15 das.

4.5.2. Laboratorio de Fisiologa Celular UNAM.

El mtodo Foltch.

El camarn se puso a secar a 60C en una estufa por 8 horas.

Se coloc un mortero dentro de un recipiente plstico ms grande donde tena

hielo seco y NaCI. Dentro del mortero se realiz la maceracin del camarn con

ayuda de nitrgeno lquido para que ste lo cristalice y pudiera hacerse polvo. La

extraccin se efectu mediante maceracin con nitrgeno lquido y utilizando

posteriormente una mezcla 2 : 1 cloroformo-metano1 aproximadamente 50mL/g se

esperaron 2 dias para que se extrajeran los lpidos ( hasta que el tejido deja de

flotar y se precipita hasta el fondo del recipiente. Se filtr en buchner, se recogi el

filt d d i it d i t t d S li dili i El


41/88

33

vaso se llen de agua y se meti en un reciupiente lleno de agua. Asi se hace una

extraccin. Los vasos quedaron parados en el fondo del recipiente). Despus de

12 horas aproximadam te se sacaron los vasos y se retir la mayor cantidad de

agua posible, se agreg Cloroformo hasta que cambi el color blanco. Se evapora sequedad con luz infraroja y se pes. para la extraccin de los analitos se

purific el extracto y se concentr con nitrgeno.

4.53. Laboratorio de Fisicoqumica en el Instituto de Ciencias del Mar y

Limnologa de la UNAM.

Primero se separaron las cabezas, el cefalotorax, telson, pleopodos etc. del

msculo y se trat por separado.

Las muestras consistieron en :

a). Camarones de Isla Navidad, sin marca, msculo.

b). Camarones de Isla Navidad, sin marca, cabeza, telson, cefalotorax, plepodos.

c). Camarones del Laboratorio, con marca, msculo.

d). Camarones del Laboratorio, con marca, cabeza, telson, cefalotorax, plepodos

En el Instituto de Investigaciones biomdicas-UNAM se liofilizaron los

camarones 125g peso hmedo correspondieron a 20g en peso seco. Para la

iofilizacin se tuvieron que moler con un homogenizador de tejido los camarones

agregndole un poco de agua hasta formar una especie de pasta, la cual fue

congelada con acetona y CO2 slido y distribuda en toda la superficie del

contenedor del vidrio del vaso especial del liofilizador, ah se coloc a una presion

reducida aprox. loe-3 mbar y temperatura -46C controladas, y se dej por 24

horas. Al da siguiente se recolect la muestra seca.


42/88

34

4.4.3.1. Extraccin con equipo soxhlet.

Se colocaron ell cartuchos de acetato de celulosa de 90X33mm, 20 g del

camarn liofilizado y se realiz la extraccin con 300mL de cloruro de metileno por18 horas y 16 ciclos por hora, se concentr en equipo kuderna-danish colocado en

un bao mara a una temperatura de 64C para que en la parte superior de la

columna Snyder de tres bolas, se tuviera una temperatura de 34C que es el

punto de ebullicin del cloruro de metileno a la altura de la Ciudad de Mxico. Se

purific con florisil adicionndole 2.5cm de sulfato de sodio anhidro para evitar

humedad y se eluy con IOOml de diclorometano, el cual se concentr en kudernadanish, se sec con gas nitrgeno y se le adicion ImLde MTBE (Metil ter-butil-

eter). Esto se realiz por duplicado.

Es importante hacer notar que se cont con un material de referencia de

tejido de camarn con fines de certificacin de la tcnica.

4.5.3.2. Extraccin por microondas

La separacin y clasificacin de muestras de camarn, adems de la

liofilizacin, fueron iguales que las descritas en 453.1. Se utiliz un sistema de

microondas para extraccin por solventes modelo MES 1000, de Materiales y

Equipos Falcn S.A. de C.V. el cual reemplaza totalmente el uso del sistema

soxhlet, reduce el tiempo de extraccin a menos de 30 minutos, posee la

capacidad para correr 12 muestras simultneamente, reduce el volumen de

solvente a 50ml por muestra, mejora la eficiencia de extraccin siendo superior a

los mtodos tradicionales cuando se trata de muestras pequeas (5g mximo),

controla y reproduce estrictamente las condiciones de extraccin y mejora la


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35

Para la extraccin, se colocaron 5 gramos de muestra y se les adicionaron

de una mezcla de 1 :l acetona-hexano y se someti a una presin de 30

psi por 30 minutos (2weces). Esto se realiz por triplicado, tanto al material de

referencia, como las muestras.

El material de referencia que se utiliz fue el MA-A-YOC. Estos estndares

se compraron en el Laboratorio Internacional de Radioactividad Marina de la IAEA

Atomic Energy A g e n c y ) e n M n a c o . Y s u c o s t o e s d e

aproximadamente $350 dlares por 200g de msculo de camarn.

La preparacin del estndar de referencia en el Laboratorio de Mnaco

SRM-MA-A-3/0C fue realizado por personal calificado que se dedica a preparar

estndares de referencia. Su preparacin se describe a continuacin : 200 kg de

camarones congelados fueron colectados y cada organismo fue tratado de lamanera siguiente : El abdomen fue separado del cefalotorax el cual fue

descartado. La cutcula fue removida y slo el msculo fue conservado, luego el

ejido suave fue congelado y liofilizado. El tejido fue tratado en material de acero y

vidrio solamente (evitando el contacto con plstico). Se realiz una

en un tambor rotatorio por una semana, posteriormente se

prepararon alcuotas de 25g las cuales fueron almacenadas en frascos de vidrio.

Se realiz una prueba de homogenidad y se obtuvo una variacin entre el

13% y 22% de los diferentes compuestos. El agua contenida del material

iofilizado como determinacin de secado a peso constante de 105C de un

7.8%. Sin embargo el contenido de la mezcla puede cambiar con la humedad

ambiental y el tiempo.


44/88


45/88

37

Se pesaron aproximadamente de 0.0007g - O.OOlg de cada analito y se

afor en los matraces de IOmL.Posteriormente se hicieron diluciones para que se

tuvieran concentraciones de 0.5, 1,5,10 ~15, partes por billn.

Los estndares y los analitos de la curva de calibracin fueron diludos en

MTBE (Metil Terbutil Eter) en frascos de 10 mL, esto fue para trabajar con el

mismo solvente del estracto final de las muestras o en otras palabras, para tratar

de igualar matrices.

4.5.4. Extraccin de plaguicidas organoclorados en sedimento.

El sedimento fue extrado por soxhlet y por microondas, la tcnica fue muy

similar, slo que se realiz una maceracin en mortero con mazo y liofilizacin en

el caso del soxhlet utilizndose 50 gramos como muestra. Se realiz tambin un

blanco (sulfato de sodio anhidro) con estndar interno para ambos casos. Esta

cnica para evaluar plaguicidas organoclorados en sedimento fue segn

ASTM, (1991), E.P.A. (1990) y en soxhlet. Para la extraccin con

microondas segn Onuska et al (1993). Estos autores mostraron que un proceso

de extraccin en perodos de 30 segundos repetido en una secuencia de 5 veces

provee generalmente mejor recuperacin que 8 horas de extraccin por equipo

soxhlet. . .

5 5 Extraccin de plaguicidas organoclorados en agua.

El agua fue tratada como lo marca el Mtodo 508 de la EPA,(1990) y enMtodos Normalizados, (1989).

Se coloc en un embudo de separacin por duplicado de 600 mL y se


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38

de 75mL el cual fue concentrado en Kuderna danish hasta 2ml. Despus fue

secado y purificado respectivamente con sulfato de sodio anhidro yflorisil

activado

y desactivado, eluyndolo conIOOml

de hexano y luego fue reconcentrado en

Kuderna danish hasta 5ml y secado con nitrgeno hasta sequedad. Se le adicion

1mL

de Metil Terbutil Eter y posteriormente se inyect al cromatgrafo de gases.

4.5. Cromatografa de gases.

La Cromatografa de gases es una separacin fsica entre dos o ms

compuestos, basada en su distribucin diferencial entre dos fases, una de las

cuales es estacionaria (columna) y la otra es mvil (gas).

Para el anlisis de plaguicidas organoclorados, la EPA (1991), recomiendautilizar como fase estacionaria una columna capilar ultra 2 de 25 metros de

longitud con 0.32mmde dimetro interno y 0.52pm de grosor de capa de 5% fenil

metil silicn. Las muestras fueron analizadas en un cromatgrafo de gases

Hewlett Packard 5890 Series ll equipado con un detector de Captura de

Electrones, con fuente de poder Nquel 63 acoplado a una computadora Vectra

486 con un software llamado chemstation. Para organofosforados se utiliz eldetector de flama (FID) ste detecta plaguicidas organofosforados del orden de

ppm porque el detector nitrgeno-fsforo (NP) no lo contena el equipo.

Existen dos formas de mover los analitos desde el inyector hacia el

detector, una utilizando un gas acarreador y la otra variando la temperatura.Gracias al uso de estos equipos, esto es bastante controlable, por lo que los

tiempos de retencin varan en 0.001 minutos. Como gas acarreador se utiliz

helio grado cromatogrfico Con un flujo de La volatilidad


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39

de la muestra es muy importante, tambin que el extracto se encuentre limpio de

impurezas que puedan interferir en la identificacin. Se requiere entrenamiento y

experiencia para ,el manejo del equipo. Los compuestos con muy alto peso

molecular >600 UMAS, no pueden ser analizados, esto es debido a la longitud de

la columna y por la temperatura mxima que sta soporta.

La temperatura es muy importante, porque provoca que se genere una

volatilizacin de los compuestos al entrar por el inyector, el cual estuvo a una

temperatura de 320C. Es en esa parte donde se introdujo un microlitro (IpL

de

estndar (y/o muestra) y en ese microlitro es en donde se encuentran los analitos.Al entrar al puerto de inyeccin se volatilizan y se separan los compuestos,

mismos que son arrastrados a travs de la columna ; primero los ms voltiles y

los de ms alto peso molecular o mayor nmero de enlaces fueron mas lentos, en

entrar a la columna y por lo tanto llegaran despus para ser detectados y generar

una seal cualificable y cuantificable.

En la columna tambin debe existir una afinidad entre la fase y la matriz

que deber ser relacionada con la polaridad de los compuestos para que se

puedan separar cuando ciertos compuestos tienen alta polaridad, estos no son

voltiles, por lo que no se pueden analizar al igual que algunas sales.

La polaridad en cromatografa es muy importante ya que los compuestos

orgnicos que pasan por el grosor de capa de la columna deben ser no polares a

ste, es decir que no exista posibilidad de adsorberse en las paredes de la

columna y que pueda entorpecer la exactitud en la deteccin. El solvente en el

que se recomienda mantener el extracto final es el MTBE (Metil terbutil ter),

como sugiere la EPA (1990), Mtodo 508, aunque tambin puede ser el

isooctano, o en su defecto el hexano.

Se buscan solventes que sean no polares a la columna, que tengan un

punto de ebullicin bajo que salgan al principio del cromatograma sin generar una


48/88

40

seal grande (compuestos clorados para captura de electrones), es decir que el

detector de captura no los vea, como es el caso del MTBE.

El inyector, el detector y la columna se encuentran dentro de un horno, el

cual tiene un termostato calibrado de tal manera que puede subir gradualmente

como se le indique la temperatura del horno y al mismo tiempo mantener a una

emperatura constante el inyectory

el detector, 20-30C ms elevada que la

emperatura mxima de la rampa diseada para el cromatograma.

Para el presente estudio, se inyect un microlitro iniciando con una

emperatura de 8OC, la cual subi 30C por minuto hasta alcanzar 190C

posteriormente subi 6C por minuto hasta alcanzar 300C y ah se quedo por5

minutos. En total la corrida dur por lo tanto 25 minutos aproximadamente.Los

plaguicidas organoclorados salen desde el minuto 8 hasta el minuto 22.

Para darle mantenimiento al detector, se recomienda subir la temperatura a

unos 300C sin cerrar el gas acarreador (helio) y el gas auxiliar (nitrgeno) y

ejarlo as de 4 a 12 horas, si ste no presenta la seal del equipo baja, digamos

menor de 30 unidades(meV),

se deber seguir calentando e inyectando solventes

omo hexano, o metanol. La acetona no se recomienda porque acta con la capa

e S fenil metil slicon, y se diluyen los silanos o xilanos de la misma fase

stacionara y son detectados.

Para dar mantenimiento a las columnas se recomienda una vez

esconectadas del inyector y detector, llenar los metros de la misma con

cloroformo y dejarla en reposo durante uno o dos das. Posteriormente se recoge

con gas y en un recipiente se recupera el cloroformo y se somete a un

calentamiento con 230C por 4 o6

horas.


49/88

4

5. RESULTADOS

5.1. Patrones de plaguicidas organoclorados estndares.

En la Fig.1 se presenta la mezcla de estndares de once plaguicidas

organoclorados. stos fueron comprados al Accustandard. La mezcla se diluycon MTBE para obtener concentraciones del orden de 15 ppb. Las Condiciones

del cromatgrafo se mantuvieron con las mismas caractersticas que las descritas

en Materiales y Mtodos.

8000 -

7000

l-

6000

5

1

1520 2 5

Tiempo de retencin (minutos)

Fig. 1 Cromatograma de estndares con once plaguicidas organoclorados.

Cromatografa : Detector de Captura de Electrones temp. Iny.32OC,

Temp.

Detector33OC,

Inicio 80C 1min.

Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de


50/88

42

5.2. Patrones de plaguicidas organofosforados estndares.

En la Fig. 2 se presenta la mezcla de 3 plaguicidas organofosforados. Marca

Accustandard. Ca mezcla se diluy con MTBE para tener concentracciones de

ISppm.

1.0 e 4

3

l

5 1 15 2 2 5

Tiempo de retencin (minutos)

Figura 2. Cromatograma de la mezcla de estndares de tres plaguicidas

organofosforados. Detector de Flama (FID) Temperatura del Inyector 280C

Temperatura del Detector 280C Temperatura inicial 50C 1 minuto, y sube a 8 C

por minuto hasta 270C.


51/88

43

5.3. Cromatograma del blanco de muestra para la calibracin del equipo.

En el Laboratorio de Fisicoqumica Marina del ICMYL-UNAM, se extrajo de

acuerdo a la tcnica. Presenta el cromatograma obtenido de una extraccin que

se efectu coti sulfato de sodio anhidro con el objeto de tratar de encontrarimpurezas, ya sea en la columna 0 en los solventes 0 material en general

utilizados.

1. 1e4

1 .Oe4

8000 .82

7000 -

6000 -0 1 15 20 25

Tiempo de retencin (Minutos)

Figura 3. Cromatograma del anlisis de un blanco de muestra y solventes.

Detector de Captura de Electrones temp. lny. 320X, Temp. Detector 33OC, Inicio

80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta

300C.


52/88

44

5.4. La Fig. 4 muestra un Cromatograma de Camarn. En el Laboratorio de

Nutricin de la Facultad de veterinaria UNAM se extrajo de camarn entero

hmedo utilizando como solvente el ter de petrleo y se concentr el extracto

con aire. Posferiormente se sec con sulfato de sodio anhidro, se purific conflorisil y se reconcentr con aire. Finalmente se inyect el producto disuelto en

MTBE.

1.0 e41.0 e4

.z 9000

80008000

70007000

6000 -/

/ / * I

* I

00 55 1010 1515 2020, * /

2 5

6000

2 5Tiempo de Retencin (Minutos)Tiempo de Retencin (Minutos)

Figura 4. Cromatograma de la Tcnica 1.

Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32OC, Temp. Detector 33OC,

Rampa : Inicio 80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por

minuto hasta 300C.


53/88

45

54.1. En el Instituto de Fisiologa Celular-lJNAM se extrajo de camarn entero

secado en estufa a una temperatura menor de 60Cm macerado con ayuda de

nitrgenoIquid;

y la extracin se realiz con una mezcla de cloroformo-metanol.

La concentracinfue con gas nitrgeno (Grado Cromatogrfico), el secado consulfato de sodio anhidro y la purificacin con florisil, la reconcentracin tambin

fue con gas nitrgeno. (Tcnica 2).

1.1 e4-

1.0 e4-

I

d

9000-

8000--

6000

::

n

10 15 i0 2 5

Tiempo de Retencin (Minutos)

Figura 5. Cromatograma de la tcnica 2.


Rampa : Inicio 80C 1 min. Sube 30C hasta 120C ya una velocidad de 6C por

minuto hasta 300C.


54/88

46

5.4.2. En el Laboratorio de Fisicoqumica Marina ICMyL-UNAM se extrajeron

plaguicidas organoclorados del msculo de camarn liofilizado del Material de

Referencia Estndar (MRE) con equipo Soxhlet. La extraccin utilizo como

olvente cloruro de metileno, y se concentr con Kuderna-Danish . El secado y laurificacin se llevaron a cabo como en la tcnica 2. La reconcentracin con

uderna danish y gas nitrgeno y la elucin de los analitos con MTBE.

1. 1e4-

1. 0e4

9000

8

I I

I

5 10 15 20

Tiempo de Retencin (Minutos)

gura 6. Cromatograma de muestra de control MRE procesada con la tcnica 3

etector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32OC, Temp. Detector 33OC,

ampa : Inicio 80C 1min.

Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por

inuto hasta 300C.


55/88

47

5.4.3. De igual forma en ste mismo Laboratorio se extrajo de msculo de\

camarn liofilizado del Material de Referencia Estndar con horno de

microondas. La extraccin utiliz como solvente acetona :hexano 1 :l, y se

concentr con equipo rotavapor. El secado y la purificacin se llevaron a cabo

como en la tcnica No. 2, la reconcentracin con rotavapor y gas nitrgeno y la

elucinde los analitos se llev a cabo con MTBE.

1.1 e4

1.Oe4 ,

9000-1 II

8000 i 18

6000 4

0 ii

10

5 20 25

. .

Figura 7. Cromatograma de la muestra de control SRM analizada por la tcnica 4.


Rampa : Inicio 80C 1 min. Sube 30C hasta 120C ya una velocidad de 6C porminuto hasta 300C.


56/88

48

54.4. Asimismo se extrajo de msculo de camarn liofilizado del Laboratorio de

Ciencias Marinas UAG en Barra de Navidad, Jal., con equipo soxhlet. La

extraccin utiliz como solvente el cloruro de metileno y se concentro y

reconcentr con kuderna danish, el secado y la purificacin de acuerdo a latcnica 2, la reconcentracin con kuderna danish y gas nitrgeno y la elucin de

os analitos se llev a cabo con metil terbutil ter.

Oe

9

000 J

7

6 0 0 0

Tiempo de Retencin (minutos)

Figura 8. Cromatograma de muestras de camarn del Labratorio de Ciencias

Marinas UAG procesadas. Condiciones Cromatogrficas : Detector de Captura de

Electrones. Temp. Iny.32OC,

Temp. Detector33OC,

Rampa : Inicio 80C 1min.

Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta 300C.


57/88

49

54.5. Tambin se extrajo msculo de camarn liofilizado de Isla Navidad, Col.,

UAG, con equipo soxhlet. El liofilizado se trat con cloruro de metileno, y se

concentr con equipo kudema dani sh . El secado y la purificacin se llevaron a

cabo como en la tcnica 2, la reconcentracin con kuderna danish y gasnitrgeno y la elucinde los analitos con MTBE.

1 6e

1 5e

1.4e

1.3e

1.2e

l.le

1 Oe

9 0 0 0

8 0 0 0

ig 1 in C:\HPCHEM\l\DATA\JUDITHO3 D

Figura 9. Cromatograma de muestras de camaron procedentes de Isla Navidad,

Col, utilizando la Tcnica No. 3. Condiciones cromatogrfcas : Detector de

Captura de Electrones. Temp. Iny. 32OC, Temp. Detector 33OC, Rampa : Inicio

80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta300C.


58/88

5.4.6. En el Laboratorio de Fisicoqumica Marina ICMyL UNAM se extrajo de

msculo de camarn liofilizado del Lab. de Ciencias Marinas, Barra de Navidad,

Jal. UAG con horno de microondas. La extraccin utiliz como solvente

acetona-hexano 1 :l , y se concentr con rotavapor. El secado y la purificacin

como en la tcnica 2. Reconcentracin con rotavapor y gas nitrgeno y la

elucinde los analitos con MTBE.

4

1.1 e4

I

I

5

10.

15

Tiempo deretench

(Minutos)

1

20

Fig. 10 Cromatograma de muestras de camaron del Lab. de Ciencias Marinas

UAG. Procesadas con la tcnica 4. Condiciones Cromatogrficas : Detector de

Captura de Electrones. Temp. Iny. 32OC, Temp. Detector 33OC, Rampa : Inicio

80C 1 min. Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta

300C.


59/88

5 1

5.4.7. Aqu mismo se extrajo msculo de camarn liofilizado de Isla Navidad Col.,

UAG. Se llev la extraccin con horno de microondas utilizando como solvente

acetona-hexano 1 :l , y se concentr con rotavapor y gas nitrgeno y la elucion de

os analitos se llev a cabo con MTBE.

Sio ;

1in

C:lHP

CHEWI\

~\ DATA~\JUDITHO~

D

igura ll. Cromatograma de muestras de camarn de Isla Navidad, Col.,

tilizando la tcnica 4. Condiciones cromatogrficas : Detector de Captura de

Electrones. Temp. Iny. 320X, Temp. Detector 330X, Rampa : Inicio 80C 1 min.

Sube 30C hasta 120C y a una velocidad de 6C por minuto hasta 300C.


60/88

52

5.4.8. En el Laboratorio de Fisicoqumica Marina ICMyL- UNAM se extrajo la

fraccin soluble con cloruro de metileno de una muestra de agua marina como lo

indica el mtodo 508 de la EPA (1991). Se concentr con equipo kuderna danish.

El secado y la purificacin se llevaron a cabo como en la tcnica 2, lareconcentracin con kuderna danish , y la elucin de los analitos se llev a cabo

con MTBE. Se presenta a continuacin el cromatograma obtenido de la muestra

de agua marina de los estanques de cultivo de camarn en el Laboratorio de

Ciencias Marina,. Barra de Navidad, Jal. UAG.

1.1 e4

1.0 e4

9000

i 8 0 0 0

7 0 0 0

6000

0 5 10Tiempo de retencin (minutos)

15 2 0 2 5

Figura 12. Cromatograma del anlisis de agua marina de los estanques de cultivo

de camarn en el Laboratorio

Ana Judith Marmolejo Rodriguez

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