Actividad enzimática

• Las enzimas son catalizadores biológicos que disminuyen la energía de activación de las reacciones que catalizan, pero no modifican la constante de

equilibrio.

Enzimas

Por tanto aceleran en igual proporción la velocidad de la reacción en las dos direcciones.

Unión específica

•La(s) molécula(s) que va(n) a reaccionar, sustrato(s), se unen a una región en la superficie de la enzima llamada sitio activo.

La actividad catalítica de una enzima depende de su integridad como ESTRUCTURA NATIVA.

Algunas enzimas requieren de otras moléculas para catalizar una reacción.

ENZIMAS

SIN GRUPOS QUÍMICOS ADICIONALES GRUPO PROSTÉTICO

COFACTORESIONES METÁLICOS

(Fe2+, Mg2+, Mn2+, Zn2+)

GRUPOS COMPLEJOSCOENZIMAS

Holoenzima

Apoenzima

UNIDADES DE ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

Actividad

Unidad Internacional (U)=μmol producto formado/min Katal = mol producto formado/s

Actividad específica

U/mg proteína Katal/mg proteína

Velocidad inicial

• La velocidad de una reacción que no sea de orden cero disminuye a medida que ésta progresa porque va disminuyendo la concentración del o los reactantes, y porque si la reacción es reversible se da la reacción inversa.

• Por ello es conveniente medir la velocidad inicial (vo)de la reacción, que es la velocidad antes de que la concentración de los reactantes disminuya significativamente y de que los productos alcancen una concentración que produzca una significativa reacción inversa.

• En el caso de las reacciones catalizadas por enzimas, otras dos razones que hacen muy conveniente medir velocidades iniciales son:

– 1) el producto es un inhibidor de la reacción, aun cuando la reacción no sea reversible.– 2) la enzima puede ser inestable en el medio de reacción.

Procedimiento

Volumen de la fracción (mL)

Proteína total en la fracción (mg)

Actividad enzimatica (µmol/min mL)

Actividad total Unidades totales(µmol/min )

Actividad especifica (µmol/min mg )

Actividad específica total(µmol/min mg totales )

Veces de purificación

Rendimiento

TABLA DE PURIFICACIÓN