““Inducción de la Respuesta InmuneInducción de la Respuesta Inmune”” RespuestaRespuesta Efectores como Efectores como

Ag Ag Mamífero respuesta a los Ag Mamífero respuesta a los Ag

Inmonoglobulinas y citocinasInmonoglobulinas y citocinas

Respuesta humoral y Respuesta humoral y celularcelular

AbIAbI

Ej. Ag1 Ej. Ag1 Mamífero AbIIMamífero AbII

AbI´ AbI´

15 min

2-7días

M

IgM

IgGRespuesta Primaria

Respuesta Secundaria

Efecto de memoria

Mayor intensidad, afinidad y fortaleza

Afinidad y AvidezAfinidad y Avidez

Afinidad:Afinidad: Fuerza con la que se unen los Fuerza con la que se unen los Ag con los Ab (es difícil separarlos)Ag con los Ab (es difícil separarlos)

Ej. Ej. IgG > IgM IgG > IgM

Avidez:Avidez: Respuesta primaria a la infección; Respuesta primaria a la infección; Capacidad que tiene 1 Ab para tener Capacidad que tiene 1 Ab para tener muchos Ag pero los enlaces son débiles.muchos Ag pero los enlaces son débiles.

Ej. IgM > IgG Ej. IgM > IgG (IgM es pentámera (IgM es pentámera tiene muchos tiene muchos sitios de unión a Ag)sitios de unión a Ag)

Isótopo IgM vs IgGIsótopo IgM vs IgG IgMIgM es la primo respuesta para que los es la primo respuesta para que los

macrófagos fagociten a los Ag.macrófagos fagociten a los Ag. IgGIgG es la respuesta secundaria y sirve para que es la respuesta secundaria y sirve para que

se unan a los Ag de manera eficiente.se unan a los Ag de manera eficiente.

Si se cultivan y se agrega 1 Ag se producen AbSi se cultivan y se agrega 1 Ag se producen Ab

Ej.Ej.

Se agregaSe agrega Ag Ag Se produceSe produce Ab Ab

(Macerado)(Macerado)

AdherentesAdherentes

No adherentesNo adherentes

Bazo, Ganglios e HígadoBazo, Ganglios e Hígado

Tienen que estar unidos para que se produzcan Ab

Se separan en:Se separan en:

a)a) Células Células Adherentes + Ag Adherentes + Ag 0 Ab0 Ab (macrófagos)(macrófagos)

a)a) Células Células no adherentes + Ag no adherentes + Ag 0 Ab0 Ab

(linfocitos)(linfocitos)

c) Células Adherentes + No adherentes c) Células Adherentes + No adherentes + Ab + Ab

Para que se Para que se produzcan Ab debe haber unaproduzcan Ab debe haber una cooperación entre cooperación entre célulascélulas

Macrófagos + LT + LB (Th2)Macrófagos + LT + LB (Th2)

Ej. En un experimento:Ej. En un experimento:

Ag Ag Mamífero (pollo) Mamífero (pollo) Ab Ab

Sin timo un pollo disminuye su producción de Ab y no hay Sin timo un pollo disminuye su producción de Ab y no hay rechazo a tejidos.rechazo a tejidos.

Si se quita la bolsa de Fabricio no hay producción de AbSi se quita la bolsa de Fabricio no hay producción de Ab

Por lo tanto:Por lo tanto:

Si se quita: Ab Rechazo en transplantesSi se quita: Ab Rechazo en transplantes

Timo + NoTimo + NoBolsa de Fabricio - SiBolsa de Fabricio - SiMédula ósea - Muere Médula ósea - Muere

Linfocitos B y TLinfocitos B y TPara separar a los linfocitos T y B se tratan con Para separar a los linfocitos T y B se tratan con

suero antilinfocitos y se separan en:suero antilinfocitos y se separan en:

Linfocitos B (LB) y Linfocitos T (LT)Linfocitos B (LB) y Linfocitos T (LT)

LT + LB LT + LB No hay producción de Ab No hay producción de Ab

Macrófago + LB Macrófago + LB No Ab (o se produce muy poco debido a que No Ab (o se produce muy poco debido a que el LB es timo-independiente y es capaz de presentarse Ag)el LB es timo-independiente y es capaz de presentarse Ag)

Macrófago + LT Macrófago + LT Primera cooperación de Ab pero no hay Primera cooperación de Ab pero no hay producción de Abproducción de Ab

Macrófago + LT + LB Macrófago + LT + LB Si hay Ab Si hay Ab Cooperación TB Cooperación TB

Hay una cooperaciónHay una cooperación

Ejemplo:Ejemplo:

LAFLAF (Factor activador de linfocitos)(Factor activador de linfocitos) Sobrenadante sin célulasSobrenadante sin células

AgAg

Ab+++ Ab+++ Macrófago Células no adherentes Macrófago Células no adherentes

(Medio condicionado)(Medio condicionado)

Para activar y clonar LTPara activar y clonar LT

Se convierte enSe convierte en

*Piroendógeno: LAF IL1*Piroendógeno: LAF IL1(( función de la citosina) función de la citosina)

Ab sln. FGTC Ab sln. FGTC (Factor de Crecimiento de Cel. T)(Factor de Crecimiento de Cel. T)

LT LB LTLT LB LT

Se comunica con Células T; Es la IL2 para que haya Se comunica con Células T; Es la IL2 para que haya expansión de estas células para separar las clonas expansión de estas células para separar las clonas específicas de Células Tespecíficas de Células T

Cuantificación de Células TCuantificación de Células TLos eritrocitos de carnero tienen receptores que se unen a las células T Los eritrocitos de carnero tienen receptores que se unen a las células T

Centrifugación: Centrifugación: PlasmaPlasma Paquete globularPaquete globular

Se usa un Se usa un Ficoll hypackFicoll hypack para separar por gradiente la sangre según su para separar por gradiente la sangre según su densidad.densidad.

Ej. GradienteEj. Gradiente 10 10 20 Solo linfocitos20 Solo linfocitos 30 Solo monocitos (90%)30 Solo monocitos (90%) 4040

Linfocitos + Eritrocitos de carneroLinfocitos + Eritrocitos de carnero LTLT

Se forma una roseta para cuantificar la cantidad de LT Se forma una roseta para cuantificar la cantidad de LT

Aplicación: HIVAplicación: HIV1971 1971 se descubre 1 enzima que del RNA se sintetiza RNA se descubre 1 enzima que del RNA se sintetiza RNA

Transcriptasa inversaTranscriptasa inversa

RNA RNA DNA DNA RNAm RNAm (Proceso inverso)(Proceso inverso)

Para lisogama y fase lítica de los virus de RNAPara lisogama y fase lítica de los virus de RNA

Fases del virus:Fases del virus:

Fase lisogénicaFase lisogénica Fase lítica (explota a las células)Fase lítica (explota a las células)

Seropositivo a VIH: Integrado genoma de 10000pares Seropositivo a VIH: Integrado genoma de 10000pares de bases en el genoma de las células inserto.de bases en el genoma de las células inserto.

Dropismo: Afinidad hacia una célulaDropismo: Afinidad hacia una célula

Blanco: Linfocitos TBlanco: Linfocitos T

*Citotóxicos TCD8 *Citotóxicos TCD8

**Cooperadores TCD4Cooperadores TCD4

TCD4 TCD4 Contiene receptos para la estructura del virus Contiene receptos para la estructura del virus

Inductor de la respuesta inmuneInductor de la respuesta inmune

(Fenotipos)(Fenotipos)

Para inducir la respuesta inmune se usa: Ab monoclonal Para inducir la respuesta inmune se usa: Ab monoclonal dirigido vs CD4 (AntiCD4) lo cual inhibe la unión del HIV dirigido vs CD4 (AntiCD4) lo cual inhibe la unión del HIV pero aun así hay infección debido a que hay varios pero aun así hay infección debido a que hay varios receptores (quimiosinas) CCRS y CXCR4; estos tipos de receptores (quimiosinas) CCRS y CXCR4; estos tipos de receptores son requeridas por el HIV.receptores son requeridas por el HIV.

Esto ocurre por la siguiente Respuesta:Esto ocurre por la siguiente Respuesta: Respuesta inmediata:Respuesta inmediata: llegan los polimorfonucleares llegan los polimorfonucleares

(neutrófilos que se pueden observar por tinción de (neutrófilos que se pueden observar por tinción de Komonovsky y se observan neutros); hay inflamación.Komonovsky y se observan neutros); hay inflamación.

Respuesta mediata:Respuesta mediata: Por linfocitos y macrófagos los Por linfocitos y macrófagos los cuales secretan quimiosinas que atraen a las células cuales secretan quimiosinas que atraen a las células para aislar el evento de infección para aislar el evento de infección Se llega a producir Se llega a producir edema por el proceso inflamatorio.edema por el proceso inflamatorio.

Producción de quimiosinasProducción de quimiosinas de las cuales requiere el HIV de las cuales requiere el HIV para producir su virulencia.para producir su virulencia.

Anti CD4

Anticuerpo Monoclonal

Isótopos da lugar a:Isótopos da lugar a:

Tho Th1Tho Th1

Ag Ag Barreras Barreras LTCD4 Th1 Th2 LTCD4 Th1 Th2

Th2Th2

Th3Th3

Tr1 Tr1

Cuando hay producción de:Cuando hay producción de:

ReceptoresReceptores

IL-2 y TNFIL-2 y TNF la polarización se da a Th1 Respuesta inmune la polarización se da a Th1 Respuesta inmune celular celular Linfocitos T activados Linfocitos T activados Citosinas Citosinas

IL-3 – IL10 IL-3 – IL10 la polarización va a Th2la polarización va a Th2 Respuesta inmune humoral Respuesta inmune humoral AbAb

Se polariza Se polariza la respuesta la respuesta inmune al inmune al hacerlos y hacerlos y depende del depende del Ag y de las Ag y de las citosinas.citosinas.

Ag que produce *Respuesta celular IntracelularAg que produce *Respuesta celular Intracelular *Respuesta humoral Extracelular*Respuesta humoral Extracelular

Las IL son pleomórficas y tienen diferentes funcionesLas IL son pleomórficas y tienen diferentes funciones La IL2 y el TNF se van a regular entre sí.La IL2 y el TNF se van a regular entre sí. Cuando hay preferencia en Th, inhiben las de Th2 y viceversa.Cuando hay preferencia en Th, inhiben las de Th2 y viceversa.

Respuesta vs. El virus:Respuesta vs. El virus: De preferencia debe ser celular; también existe De preferencia debe ser celular; también existe la de tipo humoralla de tipo humoral

Única función del Ab: la neutralizaciónÚnica función del Ab: la neutralización

HIVHIV No llega al receptor por que esta neutralizado pero para No llega al receptor por que esta neutralizado pero para subsistir tiene que promover la respuesta de tipo celularsubsistir tiene que promover la respuesta de tipo celular

Relación aprox. CD8/CD4Relación aprox. CD8/CD4 0.2/ 0.5 (0.2/ 0.5 (Cuando baja es que el paciente esta muy mal)Cuando baja es que el paciente esta muy mal)

Clínicamente la respuesta de tipo celular da el diagnóstico y se convierte en Clínicamente la respuesta de tipo celular da el diagnóstico y se convierte en la parte central del mecanismo de inmunidad.la parte central del mecanismo de inmunidad.

Receptores Linfocito con Ag del virusReceptores Linfocito con Ag del virus

LinfocitoLinfocito

VirusVirus

Linfocito normal: Destruye a ambosLinfocito normal: Destruye a ambos

Fase lítica:Fase lítica: Ag del virus que reconoce el linfocito y destruye a la célula. Ag del virus que reconoce el linfocito y destruye a la célula.

Virus sincinal respiratorio: Se unen entre células afectadas y forman Virus sincinal respiratorio: Se unen entre células afectadas y forman acumulaciones o acumulaciones o sincisios sincisios de células por unión a receptores.de células por unión a receptores.

LTCD8 Y NK son las que pueden llegar a ayudar a destruir a las LTCD8 Y NK son las que pueden llegar a ayudar a destruir a las células infectadascélulas infectadas

FASES DEL HIVFASES DEL HIV

FUSIÓNFUSIÓN Para invadir una célula CD4, el VIH necesita adherirse o encajarse Para invadir una célula CD4, el VIH necesita adherirse o encajarse

en ella. Este proceso se conoce como fusión. Para eso usa dos en ella. Este proceso se conoce como fusión. Para eso usa dos receptores: el receptor CD4 y su coreceptor. Las células CD4 se receptores: el receptor CD4 y su coreceptor. Las células CD4 se conocen de esa manera porque tienen el receptor CD4. Estos conocen de esa manera porque tienen el receptor CD4. Estos receptores son como unos candados. El VIH en su cubierta tiene receptores son como unos candados. El VIH en su cubierta tiene unas proteínas que son afines con el receptor CD4. Estas proteínas unas proteínas que son afines con el receptor CD4. Estas proteínas funcionan como llaves que encajan en los receptores. Las llaves del funcionan como llaves que encajan en los receptores. Las llaves del VIH son específicas para los receptores de las CD4, no encajan en VIH son específicas para los receptores de las CD4, no encajan en otras células del cuerpo. otras células del cuerpo.

Con sus llaves el VIH puede abrir los candados de la CD4 e invadir Con sus llaves el VIH puede abrir los candados de la CD4 e invadir la célula. El VIH deposita en la célula su ARN (su menú de la célula. El VIH deposita en la célula su ARN (su menú de ingredientes) además de sus enzimas o ayudantes. Estas enzimas ingredientes) además de sus enzimas o ayudantes. Estas enzimas son la intregrasa, la transcriptasa reversa y la proteasa. son la intregrasa, la transcriptasa reversa y la proteasa.

Transcripción Reversa Transcripción Reversa La meta del VIH es infiltrar su menu de La meta del VIH es infiltrar su menu de

ingredientes al cocinero ADN, para que éste ingredientes al cocinero ADN, para que éste produzca más VIH. Para lograrlo, lo primero que produzca más VIH. Para lograrlo, lo primero que hace después de infectar la célula es traducir su hace después de infectar la célula es traducir su ARN a una forma que el ADN de la célula pueda ARN a una forma que el ADN de la célula pueda entender, cambiando su forma de un solo hilo o entender, cambiando su forma de un solo hilo o hélice a una doble hélice. El ADN tiene dos hélice a una doble hélice. El ADN tiene dos hélices. El VIH logra esta transformación usando hélices. El VIH logra esta transformación usando una enzima o ayudante llamada transcriptasa una enzima o ayudante llamada transcriptasa reversa. El ARN transformado se conoce como reversa. El ARN transformado se conoce como ADN-VIH. El proceso es conocido como ADN-VIH. El proceso es conocido como transcripción reversa. transcripción reversa.

Integración Integración Como habíamos dicho Como habíamos dicho

anteriormente el VIH desea anteriormente el VIH desea infiltrar, integrar su ADN-infiltrar, integrar su ADN-VIH a la lista de VIH a la lista de ingredientes del cocinero. ingredientes del cocinero. Pero el cocinero o ADN Pero el cocinero o ADN está protegido en el núcleo está protegido en el núcleo de la célula. El núcleo es de la célula. El núcleo es como la cocina de la célula como la cocina de la célula donde el ADN produce donde el ADN produce substancias que nos substancias que nos ayudan a combatir ayudan a combatir enfermedades. Para entrar enfermedades. Para entrar al núcleo e integrar su al núcleo e integrar su ADN-VIH al ADN cocinero, ADN-VIH al ADN cocinero, el VIH usa otra enzima el VIH usa otra enzima conocida como integrasa. conocida como integrasa.

Transcripción Transcripción El nuevo ADN célular (cocinero) tiene ahora pedazos del El nuevo ADN célular (cocinero) tiene ahora pedazos del

VIH en su lista de ingredientes. El ADN usando una de VIH en su lista de ingredientes. El ADN usando una de sus enzimas celulares comienza a producir ARN-VIH y sus enzimas celulares comienza a producir ARN-VIH y otras hélices sencillas de ARN, conocidas como ARN otras hélices sencillas de ARN, conocidas como ARN mensajero (mARN), necesarias para producir nuevos mensajero (mARN), necesarias para producir nuevos virus de VIH. En esencia, el cocinero es controlado por virus de VIH. En esencia, el cocinero es controlado por el VIH; el VIH es el nuevo gerente. Su función ya no es el VIH; el VIH es el nuevo gerente. Su función ya no es protegernos si no producir más VIH. Este proceso de protegernos si no producir más VIH. Este proceso de producir hélices sencillas partiendo del material genético producir hélices sencillas partiendo del material genético de hélices dobles es conocido como transcripción. de hélices dobles es conocido como transcripción. (Nota: El producir hélices dobles de hélices sencillas se (Nota: El producir hélices dobles de hélices sencillas se conoce como transcripción reversa o inversa.) conoce como transcripción reversa o inversa.)

Traducción Traducción Las enzimas de la célula Las enzimas de la célula

CD4 de manera natural CD4 de manera natural expulsan o sacan las expulsan o sacan las hélices de mARN y hélices de mARN y ARN-VIH de núcleo ARN-VIH de núcleo celular. Ya afuera del celular. Ya afuera del núcleo, el VIH usa el núcleo, el VIH usa el mecanismo natural de la mecanismo natural de la célula para crear célula para crear proteínas, y el menú de proteínas, y el menú de ingredientes en el ingredientes en el mARN para producir mARN para producir piezas del virus como piezas del virus como las proteínas que las proteínas que formarán su cubierta e formarán su cubierta e interior y las enzimas interior y las enzimas ayudantes que formarán ayudantes que formarán nuevos virus. nuevos virus.

Ensamblaje y Brote Ensamblaje y Brote Las largas cadenas de Las largas cadenas de

proteínas emigran hacia la proteínas emigran hacia la membrana o corteza de la membrana o corteza de la célula y comienzan a célula y comienzan a reensamblarse, creando reensamblarse, creando un virus de VIH inmaduro. un virus de VIH inmaduro. Este VIH inmaduro brota Este VIH inmaduro brota de la célula y se lleva de la célula y se lleva parte de la membrana parte de la membrana celular. Esto daña la celular. Esto daña la célula CD4 y célula CD4 y eventualmente causa que eventualmente causa que muera después de haber muera después de haber creado muchas copias del creado muchas copias del VIH. VIH.

Maduración Maduración Las proteínas básicas Las proteínas básicas

del VIH producidas del VIH producidas durante el proceso de durante el proceso de traducción todavía no traducción todavía no forman un virus. Para forman un virus. Para eso el VIH tiene que eso el VIH tiene que dividir el mARN en dividir el mARN en pequeñas piezas o pequeñas piezas o proteínas para hacerlo proteínas para hacerlo útil. Esto se logra con la útil. Esto se logra con la ayuda de una enzima ayuda de una enzima del VIH conocida como del VIH conocida como proteasa. proteasa.

Este nuevo virus es Este nuevo virus es totalmente funcional. El totalmente funcional. El VIH busca una nueva VIH busca una nueva célula CD4, la invade y célula CD4, la invade y el ciclo comienza de el ciclo comienza de nuevo. nuevo.