2- La Técnica Histológica (1)

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Guía Teórica Técnica Histológica Med. Díaz, Pablo Javier U.N.A.J.- Licenciatura en Kinesiología y Fisiatría - Cátedra de Biología Celular, Histología, Embriología y Genética

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Transcript of 2- La Técnica Histológica (1)

  • Gua Terica Tcnica HistolgicaMed. Daz, Pablo Javier

    U.N.A.J.- Licenciatura en Kinesiologa y Fisiatra - Ctedra de Biologa Celular, Histologa, Embriologa y Gentica

    http://enciclopedia.us.es/images/d/d6/Microscopio-optico.jpg

  • La Tcnica Histolgica

    Histologa: Ciencia* que estudia la microanatoma de las clulas, los tejidos y los rganos, y que correlaciona la estructura con la funcin.

    *Ciencia: acopio de conocimiento obtenido a travs del mtodo cientfico.

    Clula: Unidad bsica estructural y funcional de la vida.

    Tejido: Agregado o grupo de clulas organizadas para efectuar una o mas funciones y que estn rodeadas por una matrz extracelular (que puede ser mnima o abundante).

    rgano: Estructura diferenciada del cuerpo que realiza una funcin especfica.

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  • Adaptabilidad celular: Capacidad biolgica que poseen las clulas de organizar sus elementos estructurales para realizar sus funciones fisiolgicas de manera ptima. Ejemplos

    - Clulas musculares abundante citoesqueleto para la contraccin - Macrfagos abunadantes lisosomas para la fagositosis - Enterocito (clula epitelial del intestino delgado) abundantes microvellosidades para la absorcin

    Componentes extra-celulares: Agua, proteoglucanos, glucosaminoglucanos (GAG), glucoprotenas, fibras (elsticas, colgenas, reticulares), etc

    Relacin clula- ncleo: El ncleo acompaa a la clula en forma y tamao.

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  • Tipos de Microscopa:

    Microscopa ptica (m/o) utiliza mtodos de rutina:

    Tipo de imagen

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  • Microscopa:

    Microscopa electrnica por trasnmiscin de electrones

    de barrido

    Tipo de imagen

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  • Tcnicas Histolgicas:

    - Hematoxilina Eosina (H-E):

    Aprecia las estructuras, NO las caractersticas qumicas.

    Hematoxilina Colorante bsico Carga (+) Reacciona con los componentes anionicos (-) de las clulas y tejidos.

    La capacidad de reaccionar con la hematoxilina se llama BASOFILIA, y al m/o da tonos . AZULES.

    Eosina Colorante cido Carga (-) Reacciona con los componentes catinicos (+) de las clulas y tejidos (especialmente con los grupos aminos de las protenas)

    La capacidad de reaccionar con la eosina se llama ACIDOFILIA, y al m/o da tonos . ROSADOS .

    Basfilo (azul) Acidfilo (rosa)

    Ncleo NucleoloHeterocromatina

    Eucromatina

    XX

    - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

    Citoplasma RERGolgi

    Mitocondrias Filamentos

    X- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

    XX

    Matrz X

    La grasa NO se ve, en su lugar se ve un espacio vaco (blanco), ya que la grasa se pierde en el proceso de preparacin de la muestra.

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  • - Tcnicas especiales:

    Tcnica de Mallory Azul de anilina Colgeno

    Fucsina cida Citoplasma

    Naranja G Eritrocitos

    Tcnica de Gommory Verde brillante Tejido Conectivo

    Tcnica de Azan Celeste Tejido Conectivo

    Azocarmn Ncleos Rojos

    Orange Citoplasma

    Aldehido Fucsina Violeta Para los Islotes de Langerhans (pncreas endcrino) y fibras elsticas.

    Orcena Marrn / Ladrillo Fibras elsticas.

    Reaccin del cido perydico de Schiff (PAS) Tie los glcidos y a las macromoleculas ricos en glcidos de color magenta. Buena para ver glucgeno, mucus, membrana basal y fibras reticulares.

    Impregnacin argntica tie de color azul / negruzco a los proteoglucanos y fibras reticulares.

    Histoqumica y citoqumica.

    Inmunohistoquimica.

    Radoautografia

    Cultivo de clulas y tejidos.

    Las tcnicas tricrmicas suelen utilizarse para diferenciar bien al tejido conectivo

    Tcnica Tricrmica Tcnica de P.A.S.

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  • Cmo se llega a un preparado histolgico?

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  • Qu veo cuando miro con el m/o?

    1) Clulas Ncleo

    Citoplasma

    Contorno (memb plasmtica) SE VEN

    Especializacion de la membrana Cilios

    ( a veces) Flagelos

    Microvellosidades

    Organelos SE INFIEREN (por ejemplo; ante una clula basfila puedo . P sospechar un alto contenido de RER)

    2) Matrz Los distintos tipos de fibras se logran ver mediante las tcnicas de H-E y algunas especiales.

    Artificios de Tcnica: Es todo hecho que produce que la muestra no est ptima para su visualizacin en el m/o. Los ms comunes son los pliegues, los desgarros, las burbujas, mala obtencin de la muestra, mala fijacin, mala inclusin, mala tincin, etc..

    Si al momento de observar el preparado me encuentro con un artificio de tcnica debo mover la muestra para cambiar de campo.

    Dimensin Rama Estructura Mtodo

    > 0,1 mm Anatoma rganos Ojo o lente simple

    100 10 um Histologa Tejidos Microscopio ptico

    10-0,2 um Citologa Clulas (procariotas y

    eucariotas)

    Microscopio ptico

    200- 0,4 nm Ultraestructuras Organelos y virus Microscopa electrnica

    < 1 nm Molculas Disposicin de tomos

    Difraccin de RX

    1 mm = 1000 um 1 um = 1000 nm

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  • Conceptos claves:

    1) Al momento de describir la histologa de los rganos, aquellos que poseen luz (vasos, tubo digestivo, va area, va urinaria) deben ser descriptos de la luz a la periferia, en cambio los rganos macizos se describen desde su superficie a su profundidad.

    2) Cuando se hace referencia al trmino PARENQUIMA, nos referimos a la parte funcional del rgano, y cuando hablamos de ESTROMA al tejido de sostn (que suele ser tejido conectivo)

    3) Nunca debo imaginar estructuras, describir solo lo que el ojo (al que hay que acostumbrar) est viendo.

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