Post on 28-Nov-2014
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLOFACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
CIRCULO DE ESTUDIANTES DE MICROBIOLOGIA
Aislamiento e identificación de Bacterias Gram (+)
CURSO: TECNICAS EN MICROBIOLOGIA
1
ESTRUCTURA DE Staphylococcus aureus
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ESTRUCTURA
3
Factores de Virulencia de S. aureus
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FACTORES DE VIRULENCIA DE S.aureus
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A: disposición clásica del antígeno en el receptor de linfocitos T B: disposición del superantígeno (SAg) en la región Vb lateral.
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ESTRUCTURA DE Streptococcus pyogenes
7
FACTORES DE VIRULENCIA DE FACTORES DE VIRULENCIA DE S. S. pyogenespyogenes
8
FACTORES DE VIRULENCIA DE FACTORES DE VIRULENCIA DE S. S. pyogenespyogenes
9
Proteína M
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Ayudan a la bacteria a invadir al huésped, evadir las defensas del huésped para poder llegar a su diana.
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13
14
Colocar una gota
de H2O2 en la lamina
porta objeto
Tomar una asada de la
muestra
Hacer una
suspensión
Cultivo de Staphylococ
cus
(+) = Aparición de burbujas
(-) = No hay cambios
(+) = Aparición de burbujas
(-) = No hay cambios15
CATALASA +CATALASA +Staphylococcus
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El peróxido de hidrógeno se produce cuando la bacteria utiliza el azúcar
por vía oxidativa. Al ser éste un compuesto muy oxidante las bacterias la eliminan mediante la producción de la enzima catalasa (H2O2 -> H2O +
½ O2).
El peróxido de hidrógeno se produce cuando la bacteria utiliza el azúcar
por vía oxidativa. Al ser éste un compuesto muy oxidante las bacterias la eliminan mediante la producción de la enzima catalasa (H2O2 -> H2O +
½ O2).
CATALASA Esta enzima descompone el peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua.
Esta enzima descompone el peróxido de hidrógeno en oxígeno y agua.
QuímicamenteQuímicamente
es una hemoproteína de estructura similar a la de la hemoglobina, excepto por que los 4
átomos de hierro que posee la molécula están es estado oxidado (Fe+++) en lugar de reducido (Fe+
+).
es una hemoproteína de estructura similar a la de la hemoglobina, excepto por que los 4
átomos de hierro que posee la molécula están es estado oxidado (Fe+++) en lugar de reducido (Fe+
+).
De esta manera las bacterias se protegen del efecto tóxico del H2O2, presente en los
fagocitos como principal bactericida
De esta manera las bacterias se protegen del efecto tóxico del H2O2, presente en los
fagocitos como principal bactericida
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El peróxido de hidrógeno ;s i se deja acumular, éste puede ser letal para las células bacterianas.
El peróxido de hidrógeno ;s i se deja acumular, éste puede ser letal para las células bacterianas.
CATALASA
protege a los microorganismos del H2O2 tóxico que re acumula durante el metabolismo bacteriano y es liberado después de la fagocitosis.
protege a los microorganismos del H2O2 tóxico que re acumula durante el metabolismo bacteriano y es liberado después de la fagocitosis.
Transforma el peróxido de hidrogeno en agua y oxígeno de acuerdo a la siguiente reacción:Transforma el peróxido de hidrogeno en agua y oxígeno de acuerdo a la siguiente reacción:
H2O2 ----------------> H2O + O2 (burbujas de gas) H2O2 ----------------> H2O + O2 (burbujas de gas)18
Punción cardíaca
4.5 mL
0.5 mL de
citrato de
Sodio 3.8%
Sangre +
citrato de
Sodio 3.8%
Separación del plasma
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Incubar a 37 ºCCultivo puro
de S. aureus
Controlar la aparición de
“coagulo ” a partir de los 5 min hasta
las 24 hrs
Controlar la aparición de
“coagulo ” a partir de los 5 min hasta
las 24 hrs
plasma citratado de conejo
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RESU
LTAD
O P
OSI
TIVO
:S.
aure
usRE
SULT
ADO
PO
SITI
VO:
S.au
reus
Se debe observar continuamente para evitar reportes negativos, debido
a que usualmente la bacteria posee otra enzima la fibrinolisina la cual actúa
revirtiendo el proceso de coagulación
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Tipos de Coagulasa
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Staphylococcus
aureus
cc
cc
c
COAGULOS DE
FIBRINA
•Causa agregación del fibrinógeno sobre S. aureus.
•Aglutinación rápida de las células.
FIBRINOGENO PRESENTE EN EL
PLASMA
FIBRINOGENO PRESENTE EN EL
PLASMA
COAGULASA EN LA
SUPERFICIE DE
LA PRED
CELULAR
COAGULASA EN LA
SUPERFICIE DE
LA PRED
CELULAR
ACTUA DE MANERA DIRECTA
MODIFICAMODIFICA
FIBRINAFIBRINAFIBRINOGENOFIBRINOGENO
No es dependiente de
Ca2+
No es dependiente de
Ca2+
Staphylococcus aureus
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Pesar 120 g de Agar base
Disolver en 110 mL de agua
destilada
Agar Base
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Licuar el Agar base
(45 ºC)
Agregar inmediatamente del 6 – 7 % de sangre al
medio
…..…..
…..….. Verter en placas petri
…..…..
Asegurar que las placas queden
secas antes de la siembra
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Produce una zona clara, incolora, alrededor de la
colonia del microorganismo por destrucción completa
de la hemoglobina.
no se produce actividad hemolítica o decoloración por la
colonia del microorganismo.
Es la parcial destrucción de los glóbulos rojos cerca de la colonia, ejerce su acción a nivel de la hemoglobina,
la que puede transformarse en biliverdina o bilirrubina de color amarillo verdoso.
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2929292929
β - Hemolisisβ - Hemolisis
Es una esfingomielinasa que actua en el complejo
esfingolmielina lipocarbohidrato.Requiere de iones magnesio y la
especificidad de sustrato esta restringida a esfingomielina y
lisofosfatidilcolina
Es una esfingomielinasa que actua en el complejo
esfingolmielina lipocarbohidrato.Requiere de iones magnesio y la
especificidad de sustrato esta restringida a esfingomielina y
lisofosfatidilcolina
La sensibilidad variable de los eritrocitos de diferentes especies de animales se deba a diferencias en el contenido de esfingomielina de la membrana
La sensibilidad variable de los eritrocitos de diferentes especies de animales se deba a diferencias en el contenido de esfingomielina de la membrana
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Posteriormente la enzima biliverdina reductasa, que también requiere NADPH, reduce la biliverdina a bilirrubina. Diariamente se producen unos 300 mg de este compuesto de intenso color amarillo que tiene como único destino su excreción.
Posteriormente la enzima biliverdina reductasa, que también requiere NADPH, reduce la biliverdina a bilirrubina. Diariamente se producen unos 300 mg de este compuesto de intenso color amarillo que tiene como único destino su excreción.
El núcleo tetrapirrólico del grupo hemo sufre la acción de la hemo oxigenasa, un sistema enzimático que produce ruptura entre los anillos A y B de la protoporfirina, liberando el hierro y dando lugar a un tetrapirrol lineal, la biliverdina. El sistema requiere NADPH y O2.
El núcleo tetrapirrólico del grupo hemo sufre la acción de la hemo oxigenasa, un sistema enzimático que produce ruptura entre los anillos A y B de la protoporfirina, liberando el hierro y dando lugar a un tetrapirrol lineal, la biliverdina. El sistema requiere NADPH y O2. α
hemolisis
βhemolisis
Halo Transparent
e
Halo amarillo verdoso
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