Clase Taller Cinetica Enzimatica UPP2 2012

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Cinética Enzimatica

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Taller de Bioingeniería

Clase: Mecanismos de regulación enzimática y catálisis.

Presenta:

Dr. Jorge Lozada Lechuga

Juan C. Bonilla, a 27 de septiembre del 2012

Enzimas Regulatorias

3. Pro-enzimas Activadas por proteolisis.

Muchas enzimas se secretan como proenzimas o

zimógenos, que son catalíticamente inactivos.

Efecto De La Concentración De Sustrato Sobre

La Velocidad Enzimática

Los principios generales de las reacciones químicas se aplican también a las reacciones enzimáticas.

Modelo de Michaelis-Menten:Cálculo de la KM y la Vmax de una enzima

Cinética Enzimática

Leonor Michaelis Maude Leonora Menten

Cinética de Michaelis - Menten

Cinética de Michaelis - Menten

Vmax

KM

1/2 Vmax

Cinética de Michaelis - Menten

Cinética de Michaelis - Menten

Catalasa H2O2 25.0

Hexoquinasa ATP 0.4

D-Glucosa 0.05

D-Fructosa 1.5

Anhidrasa carbónicoa HCO3- 9.0

Quimotripsina Gliciltirosinilglicina 108.0

N-Benzoiltirosinamida 2.5

-Galactosidasa D-Lactosa 4.0

Treonina deshidrogenasa L-Treonina 5.0

Km de algunas enzimas

ENZIMA SUSTRATO Km (mM)

La KM es un parámetro de Actividad Enzimática

La KM es inversamente proporcional con la afinidad de la enzima.

Valor de KM grande, baja afinidad.

Valor de KM pequeño, alta afinidad.

pendiente

Transformación de los Dobles Recíprocos

(Lineweaver-Burk)

Inhibidores

Reactivos químicos específicos que pueden inhibir a la mayor parte de las enzimas.

INHIBIDORES

Irreversibles

Reversibles

• Inhibición permanente

• Unión irreversible por medio de enlaces covalentes.

• Modificaciones químicas de los grupos catalíticos.

• Modificada la enzima, está siempre inhibida.

Para distinguirlo de los reversible se someten a diálisis y si no se separan enzima e inhibidor, éste es permanente.

Inhibidor Irreversible

Inhibidor Irreversible

Fluorofosfato de diisopropilo (DFP)

Acetilcolinesterasa

Acetilcolina

Acetato + Colina

• La unión del inhibidor y la enzima es reversible.

• Al quitar el inhibidor del medio, se recupera la actividad.

Hay 3 tipos:

Competitiva

No Competitiva

Acompetitiva  (Alostérica)

Inhibidor Reversible

Inhibición Competitiva

Inhibición acompetitiva

I

El inhibidor se une a una SUBUNIDAD reguladora

La subunidad catalítica une al sustrato y cataliza la reacción

Cinéticas de Inhibición

CompetitivoVmax igualKM diferente

No competitivoVmax diferenteKM igual

Sin inhibitor

1

V

1/[S]0

Gracias por su atención

Dr. Jorge Lozada LechugaDr. Jorge Lozada LechugaUniversidad del Valle de México, campus Cuernavaca