UNIVERSIDAD JOSE CARLOS MARIATEGUI 2015 CURSO: BIOQUIMICA
1 Prof. Blgo. Jose Antonio Valeriano Zapana
PRACTICA DE LABORATORIO N° 1
I. OBJETIVOS
Determinar el PH de soluciones utilizando los métodos colorimétricos
(indicadores de PH) y poteciométricos.
Reconocer la capacidad amortiguadora de aminoácidos y aminas.
Relacionar los conocimientos adquiridos del funcionamiento de los
tampones de importancia biológica.
II. INSTRUMENTOS
Tubo de ensayo
Fiola
Pipeta
Gotero
Gradilla
Pera de goma
Envases de vidrio
Peachímetro
Destilador de agua
Balanza analítica
Vaso precipitado
III. REACTIVOS
Soluciones tampón de PH: 3,4,5,6,7,8,9,10 y 12
Indicador universal
Hidróxido de Sodio Neo
Ácidos Clorhídricos.
IV. MÉTODO DE TRABAJO
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4.1. ESCALA PATRÓN
Preparar una batería de 4 tubos de ensayo y colocar en cada tubo 1 ml
de solución de PH: 3, 5,10 y 12, adicionar 5 gotas de indicador universal
y 9 ml de agua destilada.
4.2. EXPERIMENTO 1
Preparar una batería de 4 tubos de ensayo
TUBO 1: 5 gotas de indicador universal + 10 ml de H2O
TUBO 2: 5 gotas de indicador universal + 10 ml de tampón de PH
7
TUBO 3: 5 gotas de indicador universal + 10 ml de H2O
TUBO 4: 5 gotas de indicador universal + 10 ml de tampón PH 7
Determinar el PH de cada solución y anotar el resultado en una tabla
4.3. EXPERIMENTO II
TUBO 1: adicionar de NaOH 0.1 M
TUBO 2: adicionar una gota de NaOH 0.1 M
Observar, determinar el PH y anotar el resultado en la tabla.
Soplar el aire expirado, por 15 segundos en el tubo 1 y por un minuto en
el tubo 2.
Observar, el cambio de color y determinar el PH y anotar el resultado de
la tabla.
TUBO 3 : adicionar una gota de HCl 0.1 M
TUBO4 : adicionar de HCl de 0.1 M
Observar el cambio de color, determinar el PH y anotar el resultado en la
tabla.
Continuar la adición de HCl al tubo 4, gota a gota, hasta obtener e color
del tubo 3.
Determinar cuántas gotas de HCl deben ser adicionadas para obtener la
misma coloración del tubo 3.
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TUBOS MUESTRA INICIAL NaOH 0,1M
PH AIRE
HCL 0,1 M
N° GOTAS
Tubo 1 Agua destilada + 1 gota de NaOH 0,1 M + aire expirado por 15 segundos
3
0,1M
20
5
Tubo 2 Tampón de pH 7,0 + 1 gota de NaOH 0,1M + aire expirado por 1 minuto
5
0,1M
15
3
Tubo 3 Agua destilada + 2 gotas de HCl 0,1 M
10 0,1M 10 2
Tubo 4 Tampón de pH 7,0 + 2 gotas de HCl 0,1 M N° de gotas de HCl para obtener el pH del tubo 3
12
0,1M
8
1
Tabla n°1: resultados de las muestras.
Fuente: elaboración propia.
4.4. CUESTIONARIO:
1) Colocar en orden decreciente la acidez de las siguientes
soluciones: ácido acético 1M,hidroxidode sodio 1M y ácido
clorhídrico 1M
HIDRÓXIDO DE SODIO Na(OH) (1M)
[OHˉ] = 1M PH + PoH = 14
PoH= - log (OHˉ) PH = 14 - 0
PoH= - log( 1M) PH = 14
PoH= O
ÁCIDO ACETICO (C2H4O2 ) (1M)
[H] =√𝐾𝑎(𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜)
[H] = √(1.8 ∗ 10 − 5)(1)
[H] =4.24*10-4
PH = -Log (4.24*10-3)
PH = 2.37
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ÁCIDO CLORHIDRICO HCL (1M)
PH= -Log (1)
PH= 0
2) Colocar en orden decreciente de acidez las siguientes soluciones:
ácido acético 100 mmol, hidróxido de amonio 10 mmol, ácido
clorhídrico 10 M de agua.
HIDRÓXIDO DE AMONIO NH4OH
POH= -Ln (0.1) 100mmol=0.1 m
POH=1
Ph=1
Ph=14-1
Ph=13
ÁCIDO ACETICO C2H4O2
[H]=√𝐾𝑎(𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜) 10mmol=0.01 m
[H]= √(1.8 ∗ 10 − 5)(0.01)
[H]=4.24*10-4
Ph=-Log(4.24*10-4)
Ph=3.37
ÁCIDO CLORHIDRICO HCL
Ph= -Ln(10)
Ph= -1
3) Calcular cuántos iones H y iones OH están presentes en una
solución de HCL 0,001M.
HCL +H2O = CL- +H3O
[H+]= 0.001M
[H+]= 10-3M
[OH] [H+]= 1*10-14
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[OH] = 10-14(10-3)-1
[OH] = 10-11M
4) Calcular la concentración de protones en moles por litro en una
solución 1 M de ácido acético sabiendo que la Ka del acido
acético a 25°C es de 1.86*10(-5).
[H] =√𝐾𝑎(𝑎𝑐𝑖𝑑𝑜)
[H] = √(1.86 ∗ 10 − 5)(1)
[H] =4.31*10(-3)
5) Calcular el punto isoeléctrico de la glicina sabiendo que pKa1=2,4
y pKa2 =9,7
Pl = (pKa + pKa2)
Pl = (2,4+ 9,7)
Respuesta: El punto isoeléctrico de la glicina es de 6.05
6) Como calculo el pH de una solución de a) 0.001M de ácido
sulfúrico? y b) 0.001M de hidróxido de sodio, asumiendo que
ambos solutos están completamente ionizados, cual será el valor
de pH de la solución resultante de la mezcla de 25 ml de la solución
de ácido sulfúrico con 20 ml de la solución de hidróxido de sodio?
a) El ácido se disocia de la siguiente manera :
H2SO4 2H (+) + SO4 (-)
Luego 0,001 mol del ácido produce 0,002 moles de H (+) pH = -log (0,002) pH= 2,69
b) NaOH:0,001M
NaOH Na (+) + OH (-)
pOH = -log(0,001)
pOH= 3
2
2 6.05
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pH = 14-3 pH = 11
c) Como ambas soluciones son fuertes y poseen la misma concentración 20 ml de NaOH neutralizan 20 ml de ácido, luego solo quedan 5 ml de ácido de concentración 0,001 M en un volumen de 45 ml así: [H+]= (0,001*5)/45 [H+]= 1,111*10^(-4) pH = -log( 1,111*10^-4) ph= 3,95