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TPH11 - TRABAJO PRÁCTICO Nº11: APARATO REPRODUCTOR FEMENINO OBJETIVOS DEL TP Identificar los órganos que componen el aparato reproductor femenino Reconocer los componentes tisulares y celulares que componen cada órgano y sus estructuras relacionando características tintoriales con ultraestructura y función. Preparados para trabajar en MO 1) Ovario - HyE: Reconocer a seco débil la organización estructural del órgano macizo en corteza y médula e hilio. Reconocer a seco fuerte: epitelio superficial: epitelio cúbico simple (mesotelio). Corteza Ovárica: observar los distintos tipos de folículos ováricos. i) Folículo primordial: oocito + MB + capa unilaminar de células foliculares planas. ii) Folículo primario unilaminar: oocito + membrana pelúcida + una capa de células foliculares cubicas. iii) Folículo primario multilaminar: oocito + membrana pelúcida + dos o más capas de células cubicas de la granulosa. Se forma la teca folicular. iv) Folículo secundario preantral: oocito + membrana pelúcida + varias capas de células de la granulosa + antro en formación (vacuolas de Call Exner) + teca interna + teca externa. v) Folículo secundario antral: oocito + membrana pelúcida + células de la granulosa organizadas en corona radiata y cúmulo ooforo + varias capas de células de la granulosa + antro completo + teca interna + teca externa. vi) Folículos atrésicos: diferenciar atresia folicular de preantrales y antrales vii) Cuerpo lúteo médula: TCCL + vasos sanguíneos.

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OBJETIVOS DEL TP • Identificar los órganos que componen el aparato reproductor femenino • Reconocer los componentes tisulares y celulares que componen cada órgano y sus

estructuras relacionando características tintoriales con ultraestructura y función.

Preparados para trabajar en MO

1) Ovario - HyE: ▪ Reconocer a seco débil la organización estructural del órgano macizo en corteza y médula e

hilio. ▪ Reconocer a seco fuerte:

epitelio superficial: epitelio cúbico simple (mesotelio). Corteza Ovárica: observar los distintos tipos de folículos ováricos.

i) Folículo primordial: oocito + MB + capa unilaminar de células foliculares planas. ii) Folículo primario unilaminar: oocito + membrana pelúcida + una capa de células foliculares cubicas. iii) Folículo primario multilaminar: oocito + membrana pelúcida + dos o más capas de células cubicas de la granulosa. Se forma la teca folicular. iv) Folículo secundario preantral: oocito + membrana pelúcida + varias capas de células de la granulosa + antro en formación (vacuolas de Call Exner) + teca interna + teca externa. v) Folículo secundario antral: oocito + membrana pelúcida + células de la granulosa organizadas en corona radiata y cúmulo ooforo + varias capas de células de la granulosa + antro completo + teca interna + teca externa. vi) Folículos atrésicos: diferenciar atresia folicular de preantrales y antrales vii) Cuerpo lúteo

médula: TCCL + vasos sanguíneos.

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2) Trompa uterina - HyE: ▪ Reconocer a seco débil la organización estructural del órgano hueco en túnicas: mucosa con

pliegues foliados, muscular y serosa. Reconocer en el preparado la porción de la trompa que se observa: istmo, ampolla o infundíbulo con fimbrias (en algunos preparados de ovario se observan las fimbrias).

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▪ Reconocer en seco fuerte: mucosa: epitelio cilíndrico simple ciliado con células cilíndricas ciliadas y mucosas + lámina propia de TCCL muscular: capa circular interna y longitudinal externa, serosa

3) Útero - HyE: ▪ Reconocer a seco débil la organización estructural del órgano hueco en endometrio, y

miometrio. El perimetrio no se observa en estos preparados. Endometrio: epitelio cilíndrico simple con células ciliadas y células secretoras de mucus, las glándulas uterinas tubulares ramificadas y la lámina propia de TCCL con abundantes vasos sanguíneos entre las glándulas. Reconocer en el preparado si se encuentra en fase proliferativa o secretora según la morfología de las glándulas. Miometrio: músculo liso en distintas incidencias de corte y TCCL con abundantes vasos sanguíneos de diferente calibre.

4) Extendido vaginal – Tincion de Papanicolaou: (Citologia) ▪ Describir el metodo utilizado para realizar el extendiido vaginal. ▪ Reconocer la citología del extendido: células parabasales, intermedias, cianófilas

superficiales y eosinófilas superficiales, elementos formes de la sangre (eritrocitos, leucocitos) , bacilos y mucus.

▪ Reconocer en el preparados si el extendido corresponde a una mujer durante el climaterio o en edad fértil.

▪ En un extendido de mujer en edad fértil reconocer la etapa del ciclo femenino en que se encuentra según las características citologicas del extendido (ayudarse con el cuadro al final de la guía)

▪ Observar las diferencias del extendido con el preparado fijo de vagina donde se muestra histología en estratos del epitelio.

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5) Glándula mamaria HyE: ▪ Glándula en reposo: observar escasos adenómeros de tipo alveolar y los conductos

excretores. Observar los tabiques interlobulillares gruesos de TCCD y la abundancia de tejido adiposo.

▪ Glándula en actividad: observar un mayor número de adenómeros túbulo alveolares ramificados (algunos con producto de secreción) dispuestos en lobulillos delimitados por tabiques de TCCD mas delgados donde se observan los conductos extralobulillares. Reconocer las células mioepiteliales rodeando a los adenómeros.

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Preparados fijos

1) Cuello uterino – HyE: ▪ Observar la organización estructural del órgano en

endocérvix: epitelio cilindrico simple que se invagina formando criptas, exocérvix: epitelio plano estratificado y TCC con haces de fibras musculares lisas formando un tabique entre ambos epitelios.

▪ Si el corte es longitudinal puede observarse la zona de transición (región ubicada entre exo y endoceevix donde se produce el cambio de epitelios).

2) Vagina - HyE: • Describir el epitelio plano estratificado que se continua con el exocervix y tapiza los fondos de

saco de donde se va a tomar la muestra para el extendido vaginal.

APOYO TEORICO: COLPOCITOLOGÍA

Extendido vaginal Técnica: la nuestra se obtiene de los fondos de saco vaginales, aspirándolo con una pipeta o arrastrándolo con una espátula o hisopo. Luego de ser depositado y extendido sobre un portaobjeto, es fijado (inmersión en alcohol o rociar con aerosol fijador) y coloreado (tinción de Papanicolaou o Shorr).

Elementos del colpocitograma: • Normales: células vaginales superficiales, intermedias y parabasales, células cervicales,

células de la sangre y gérmenes de la flora vaginal. • Anormales: células inflamatorias, células neoplásicas, tricomonas, hongos y gérmenes

patógenos.

Técnica tinción Shorr Papanicolau

Colorante nuclear Biebrich escarlata Hematoxilina de Harris

Colorante citoplasmático Verde rápido / Naranja G Naranja G / Eosina / Ligth green

Células eosinófilas Rojas Rojo-naranja

Células cianófilas Verde azulado Azul

Nucleos picnóticos Rojo Púrpura

Núcleos no picnóticos Azul Azul-violeta

Ventajas Técnica simple y rápida Excelente detalle nuclear y transparencia

Desventajas Se observa poco detalle nuclear y citoplasma no transparente. Los eritrocitos se observan retraídos

El contraste entre las células cianófilas y eosinófilas a veces no es nítido.

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Tipos celulares de las diferentes capas del epitelio vaginal en un colpocitograma:

Fases del ciclo sexual normal y correlación con el colpocitograma Una vez comenzados los ciclos ovulatorios se destacan en el colpocitograma modificaciones citológicas que pueden ser clasificadas en fases o períodos.

Bibliografía: Leoncini, L.F. Colpocitograma. Ed. Panamericana.

Estrato Basal Intermedio Superficial

Zona Profunda y parabasal Profunda funcional

Dibujo al MO

Células Cilíndricas en empalizada, forma redondeada u oval

Forma oval y poligonal Poliédricas aplanadas, con granulaciones

Poliédricas, grandes y aplanadas

Tamaño (µm) 12 -25 20-30 35-60 35-60

Núcleo 6-8µm, vesiculoso, no picnótico.

6-9µm, comienza a tener características picnóticas

Picnótico picnótico

Células extendido Cianófilas profundas Cianófilas intermedias Cianófilas superficiales

Eosinófilas superficiales

Período Día del ciclo

Elementos vaginales Índice picnótico

Elementos no vaginales

Menstrual 1-5 Predominan las células cianófilas intermedias. Las células están agrupadas y presentan pliegues.

11-14 % Eritrocitos y leucocitos. Macrófagos y células endometriales.

Post-menstrual 5-10 Predominan las células cianófilas intermedias, las células están separadas y poco plegadas.

14-23 % Abundante mucus. Prácticamente desaparecen los eritrocitos y leucocitos.

Pre-ovulatorio 10-13 Predominan las células superficiales. Células aisladas, desaparecen las agrupaciones.

27-47 % Poco mucus. Ausencia de eritrocitos y leucocitos

Ovulatorio 13-15 Predominan las células eosinófilas superficiales. Células planas y bien coloreadas.

47-67 % Ausencia de elementos (extendido limpio).

Post-ovulatorio 15-17 Disminuyen las células eosinófilas y a u m e n t a n l a s c i a n ó f i l a s superficiales. Pocas intermedias. Hay algunas células plegadas.

55-38 % Mucus grumoso. Pr e s e n c i a d e a l g u n o s leucocitos.

Luteínico 17-25 Disminuyen aún más las células eosinófilas, predominan las células intermedias, hallándose algunas naviculares. Las células están agrupadas, se observa degeneración celular y reducción de tamaño.

38-15 % Mucus espeso y abundante. Pr e s e n c i a d e a l g u n o s leucocitos

Pre-menstrual 25-28 Predominio de células intermedias, algunas naviculares. Pocas células eosinófilas. Disminuye la agrupación celular.

11-15 % Abundantes leucocitos. Pueden aparecer algunos eritrocitos.

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GUIA DE AUTOEVALUACION

1) Describa características estructurales y ultraestructurales del ovocito. 2) Realice un cuadro mencionando características que hacen al diagnóstico diferencial de los

distintos tipos de folículos ováricos. 3) Defina y esquematice un cuerpo lúteo.

4) Las células de la granulosa sintetizan a) estrógenos y prolactina. b) andrógenos que aromatizan a estrógenos. c) estrógenos que difunden a circulación por los capilares tecales. d) andrógenos y estrógenos.

5) Las células de la teca interna a) Presentan abundante REL y mitocondrias para la síntesis de esteroides sexuales. b) Tienen receptores a FSH cuya activación desencadena la expresión de la enzima

aromatasa. c) Presentan citoplasma basófilo con inclusiones lipídicas. d) Forman parte del cuerpo lúteo durante la etapa folicular del ciclo femenino.

6) El folículo secundario antral a) Tiene células de la teca que sintetizan andrógenos en presencia de FSH b) Sintetiza estrógenos que generan proliferación de células endometriales. c) Presenta un antro folicular rodeado por células de la teca. d) Carece de receptores a gonadotrofinas.

7) La glándula mamaria es estimulada por a) ocitocina para la síntesis de estrógenos. b) vasopresina para la síntesis de estrógenos. c) estrógenos y progesterona. d) LH y FSH para la síntesis de estrógenos y progesterona.

8) Describa los tipos celulares que pueden observarse en el extendido vaginal de una mujer durante el climaterio y realice un esquema al MO de cada uno.

9) Realice un esquema mencionando las etapas del ciclo endometrial y describa las diferencias que pueden observarse al MO.

10) Describa estructura y ultraestructura de los tipos celulares del epitelio tubario.