TÉCNICA INMUNOLÓGICA LINFOPRED

FUNDAMENTO

• La técnica LINFOPRED consiste en la obtención de linfocitos totales. Esta técnica inmunológica es muy manual.

MATERIALES, REACTIVOS Y MUESTRA

TECNICA

• En dos tubos de ensayo añadimos líquido separador (llenamos 1/3 de éste por tubo)

• repartimos los 3 tubos de sangre del paciente en esos dos tubos de ensayo con una pipeta Pasteur por las paredes, para evitar mezclar el líquido con la sangre.

• centrifugamos los 2 tubos 20 min a 2500 rpm• recogemos con pipeta Pasteur los linfocitos.

• una vez recogidos los linfocitos y depositados en otro tubo de ensayo le añadimos medio lavador suplementado al 1% con un antibiótico de amplio espectro y lavamos dos veces a 1400 rpm durante 7 min.

• decantamos el sobrenadante.

• para mantener vivos los linfocitos (serán usados en 1ó 2 días) añadimos en un frasco de 100 ml, 20 ml de FSC (medio liquido que nutre las células) y antibiótico.

• hacer el “ajuste de células en una cámara de Neubauer.

• dejamos los linfocitos en nevera hasta que se necesiten.

TÉCNICA REALIZADA EN EL HOSPITAL UNIVERSITARIO DOCE DE OCTUBRE EN EL DEPARTAMENTO DE HLA (INMUNOLOGÍA)

Lara Romero Reyes