N°7 marzo 2004

• REVISTA DE BIOQUÍMICA ONLINE

• LA INMUNOFLUORESCENCIA: DIAGNÓSTICO CLÍNICO DE INMUNOPATOLOGÍAS. Ingeniería Matemático Erick Goles.

• PIONEROS DE LA BIOQUÍMICA

Marie Curie “Una mujer pionera en la ciencia, humanista y tenaz” .

• CIENCIA AL DIA Una nueva teoría sobre el Alzheimer

Numerosos avances en el estudio de los priones. Proteína TRIM5-alfa bloquea el VIH-1 en monos. Macrófagos actúan a través de las vías FAS y FASL en la destrucción

articular.

• NUEVA SECCIÓN: TECNICAS QUE UN BIOQUÍMICO DEBE SABER Citometria de flujo.

3 CARTA DEL DIRECTOR

4-CIENCIA EN CHILE. Dr. Eric Goles: “…la formación de recursos humanos es prioritaria.”

5-8 CIENCIA AL DIA.

Una nueva teoría sobre el Alzheimer. Numerosos avances en el estudio de los

priones. Proteína TRIM5-alfa bloquea el VIH-1 en

monos. Macrófagos actúan a través de las vías

FAS y FASL en la destrucción articular.

9-14 PIONEROS DE LA BIOQUIMICA. Marie Curie.

30 HUMOR GRAFICO

15-18 BIOQUIMICA PATOLOGICA Fibrosis Quistica.

19-24 CITOMETRIA DE FLUJO.

27 TRIBUNA DEL PROFESOR. José Zamora Silva

28 AGENDA BIOQUIMICA

25 TRIBUNA DEL TESISTA. Pablo Tapia

Carlina Valle

26 TRIBUNA DEL ESTUDIANTE. German Colque Sebastián Belmar

31 CRUCIGRAMA.

32 GALERIA FOTOGRAFICA.

29 PERSONAJE DEL MES Alex Vielma

CARTA DEL DIRECTOR

DIRECTOR CARLOS LIZAMA

EDITORES KELLY CAUTIVO CARLOS LIZAMA PABLO TAPIA REDACCION KELLY CAUTIVO CARLOS LIZAMA PABLO TAPIA

REPORTEROS KELLY CAUTIVO PABLO TAPIA CARLOS LIZAMA RODRIGO AZUA

DISEÑO GRAFICO

KELLY CAUTIVO CARLOS LIZAMA NUESTRA PORTADA

Como muchos saben nuestra carrera pasó por un proceso de acreditación el cual aun esta inconcluso, además en estos momentos nos encontramos sin un centro de alumnos articulado por ya casi un año y medio. Sin embargo, cabe destacar los cambios que han surgido en nuestro instituto después de la venida del comité acreditador, como es la creación de tutorías, la habilitación de la sala de computadores del tercer piso para los alumnos de bioquímica y lacreación un jefe de carrera. Por otra parte, a pesar de estar sin un centro de alumno por mas de un año, se han logrado la realización de diversos proyectos, y para este año esperamos la ejecución de nuevos seminarios ya que el proyectose encuentra en marcha gracias a algunos compañeros que han decido continuar con estos. En este último tema me gustaría dar las gracias a todas las personas que sin haber sido nombradas en la organización de los seminarios pasados no hubiese sido posible verlos llevado acabo, entre ellos me refiero principalmente a Arturo Santibáñez, Kelly Cautivo y Oscar Jara. Me gustaría también darles a conocer que el próximo 30 de abril en la cafeta de nuestra casa central se realizara una tocata en la cual podrán participar todos aquellos que quieran cantar, tocar algún instrumento, hacer alguna gracia o simplemente disfrutar del ambiente. Por ultimo, quiero comunicarles a todos aquellos que tengan proyectos en mente, y que estén interesados en llevarlos acabo que se dirijan a la Dirección de Asuntos Estudiantiles (DAE) y averigüen por las bases de los proyectos CONFIAS para este año.

RECURSOS HUMANOS

ESPEREMOS QUE LOS CAMBIOS SIGAN…..

Carlos Lizama V.

HAY POCOS CIENTÍFICOS... LA FORMACIÓN DE RECURSOS HUMANOS ES PRIORITARIA.

Ph.D Eric Goles Chacc. Premio nacional de Ciencias Exactas. Presidente de la Comisión Nacional de Investigación Científica y Desarrollo Tecnológica (Conicyt) El Dr. Eric Goles es ingeniero matemático de la Universidad de Chile, donde se tituló el año 1975. Paralelamente, entre 1972 y 1973, siguió cursos de Licenciatura en Filosofía en la Pontificia Universidad Católica. Obtuvo su doctorado en Ingeniería Matemática en Francia. Hasta marzo del 2000 se desempeñó como profesor titular de Ingeniería en la U. de Chile, donde dictó clases para los primeros años de la carrera y para la especialidad de ingeniería matemática. Ha dirigido múltiples proyectos de investigación en Chile y en colaboración con extranjeros. Tiene más de 100 publicaciones científicas y ha sido invitado a variadas conferencias internacionales. Una de las preocupaciones de Eric Goles durante los últimos años ha sido acercar los

avances de los descubrimientos científicos y tecnológicos a la población y muy en particular a los niños y jóvenes chilenos. Esta preocupación se ha traducido en un trabajo constante en el mundo de las comunicaciones, que lo llevo a conducir el Programa Enlaces de Televisión Nacional, además fue columnista en el diario La Época y actualmente, escribe periódicamente en la Sección Artes y Letras de El Mercurio, artículos en que mezcla el conocimiento científico con la historia del hombre, esforzándose siempre en acercar la ciencia a la comunidad, para demostrar que es parte fundamental de la sociedad y la cultura.

La manera de empujar el desarrollo de la ciencia y tecnología en Chile es través de la multiplicación de los recursos humanos, y para ello se ha creado una política que impulse la formación doctoral, pero sin descuidar la transferencia al sector productivo, en proyectos como Genoma Chile, o los del ámbito de la bio-minería.

Gracias al trabajo de Fondecyt en los últimos 20 años tenemos hoy una comunidad profesional, pero somos pocos, y tenemos que tener densidad en ciertas áreas de conocimiento que hoy en día no tenemos. ¿Cómo hacemos para tener más? El punto prioritario a futuro es la formación, de excelencia obviamente, de recursos humanos para colocar masivamente nuevos investigadores en el sistema. Hoy en día contamos -con suerte- entre 100 y 130 doctores anuales entre chilenos y formados en el extranjero, pero para el 2008 esperamos, gracias a los recursos entregados por el Banco Mundial que contemos con alrededor de 500 nuevos doctorados por año. Para ese número de profesionales tiene que tener una política desde ya, un modo de mirar hacia el futuro que permita que esa gente se inserte, tenga facilidades de trabajo y que algún sector industrial acoja los emprendimientos que vienen desde la ciencia y la tecnología. Para ello debemos apuntar a nuestras áreas prioritarias.

El año 1999 Conicyt daba 66 becas doctorales al año. Ya el año pasado y el anterior dimos 180 becas por doce meses, no por diez meses como antes, lo cual es un aumento grande. Este año vamos a llegar a un orden de 200 a 220 becas, y eso va a seguir aumentando. Lo que hemos hecho con el Banco Mundial es crear una política de manera que el eje central se centre en la formación de recursos humanos. Pero eso no significa que se hayan dejado de lado otros temas, también hay transferencia al sector productivo, por ejemplo el proyecto Genoma Chile o lo que se está desarrollando en bio-minería. Y estamos pensando en tener dos, tal vez tres, nuevos consorcios concursables para éste y el próximo año, que cubran otras áreas prioritarias para el país.

Aquí en Chile ese ir y venir entre la academia y sector productivo no existe. Si lo logramos estamos al otro lado. Es un problema fregado y duro, pues no sólo requiere el incentivo de que la universidad le dé al investigador facilidades, o que haya capital de riego, es una cuestión que pasa por cada uno.

Lo que me gustaría a mí es que -a través de todas estas iniciativas- un joven chileno que está haciendo un doctorado, no te digo necesariamente todos, piense: “voy a terminar e irme a trabajar a una empresa tecnológica” o mejor aún “voy a incubar una empresa y a meterme en este negocio”… eso todavía es anecdótico...

Por el año 1975, en el ámbito de las ciencias exactas, muy en particular en matemáticas, no había una cultura que hacer ciencias conllevaba publicar en revistas de muy buen nivel internacional, probablemente había algo pero no era la regla. La emoción de hacer investigación de punta en el mundo era una cosa que no estaba adquirida.

En cambio hoy todas las universidades le exigen a un investigador que tenga papers. Eso se logra a partir de los años ’80, a través de Conicyt, pues se profesionalizó el ser investigador. Ahora un investigador chileno, no sólo debe ser muy inteligente, sino que sabe que su carrera académica exige estar publicando y estar presente en su disciplina a nivel internacional. Ese es un tema adquirido y que no es menor.

En nuestro país hay 15 millones de cerebros, de los cuales hay como tres millones en edad escolar. Estos cerebros no se fugan, están ahí. El talento está repartido en todos más allá de los científicos. Sin embargo, como país, no dejamos que todo ese talento se colme, porque nos falta plata, no estamos haciendo un esfuerzo de difusión cultural, científico, tecnológico, para mejorar aún más la educación. El perder estos talentos nos hace pésimo. La única ventaja comparativa que tiene este país en el largo plazo, en el viaje que hace este planeta por el cosmos, es el talento de sus ciudadanos y de sus jóvenes. Un maestro en Putre o en Santiago siempre tiene la posibilidad de asombrar a sus alumnos, pero se requiere que él mismo se asombre. Tenemos que cultivar esta realidad más allá de la técnica que uno aprende en un colegio o en una universidad.

Imagen de un cerebro con un hemisferio atrófico

UNA NUEVA TEORÍA SUGIERE QUE LA INFLAMACIÓN ORIGINA EL ALZHEIMER.

Un suceso inflamatorio, ocurrido en cualquier etapa de la vida, puede ocasionar años más tarde la aparición de la enfermedad de Alzheimer. Así lo propone en Proceedings of the National Academy of Sciences un equipo

del Instituto The Scripps, en California, que ha demostrado que la inflamación puede generar metabolitos anormales capaces de promover el desplegamiento de la proteína beta amiloide. La edición electrónica de la revista Proceedings of the National Academy of Sciences recoge esta semana una nueva hipótesis, que cuenta con indicios previos y pistas válidas, sobre el origen de la enfermedad de Alzheimer. Según investigadores del Instituto The Scripps, en La Jolla (California), la enfermedad surgiría como consecuencia de la inflamación, capaz de crear metabolitos anormales a partir de moléculas cerebrales normales. Estos metabolitos modificarían las proteínas beta amiloides y provocarían su desplegamiento. El proceso inflamatorio que generan los metabolitos anormales puede desencadenarse por innumerables estímulos, incluyendo infecciones ocurridas años antes de que debute el Alzheimer. "Si algunos metabolitos inflamatorios pueden suponer un riesgo en etapas posteriores de la vida, debemos conocerlo para poder frenar el problema", ha confirmado Jeffery W. Kelly, vicepresidente de Asuntos Académicos en The Scripps y principal autor del trabajo. La teoría surgió cuando el equipo de Kelly se planteó que los traumatismos craneales eran uno de los principales factores de riesgo para desarrollar Alzheimer. El organismo responde a estas lesiones con reacciones inflamatorias que provocan la liberación de componentes de las membranas lipídicas, como el colesterol. En un primer paso, el equipo descubrió cómo la inflamación puede generar algunos tipos de oxígeno reactivo, como el ozono, capaz de desencadenar cambios patológicos en otras moléculas del organismo, como el colesterol. En un trabajo del año pasado de otro equipo de The Scripps se describió cómo el ozono reacciona con metabolitos normales para producir compuestos tóxicos durante los procesos inflamatorios que tienen lugar en el organismo. Los científicos describieron dos compuestos, que denominaron ateronales, que parecían fundamentales para la patogénesis de la aterosclerosis, ya que se encontraron en las placas de ateroma extirpadas quirúrgicamente. En el presente trabajo, el equipo de Kelly ha encontrado que la inflamación cerebral puede generar una tormenta en la que colesterol y lípidos reaccionan con el ozono y otras sustancias inflamatorias

produciendo metabolitos reactivos anormales. A su vez, estos metabolitos son capaces de modificar el plegamiento de la proteína beta amiloide normal que puede catalizar el desplegamiento en otras proteínas beta amiloides no modificadas. "De esta forma se inicia una avalancha de desplegamientos que ocasiona, quizá décadas más tarde, la aparición del Alzheimer", ha indicado. Examen de cadáver. Para comprobar que estos metabolitos son el origen del Alzheimer, examinaron postmorten los cerebros de pacientes con Alzheimer y los compararon con un grupo control de la misma edad. En el análisis se halló evidencia de ateronales en los cerebros de todos los pacientes y aquéllos con Alzheimer no presentaron niveles más elevados, aunque esto no sorprendió a los investigadores. "De acuerdo con nuestra teoría, la propagación del desplegamiento y la construcción de ovillos cerebrales no depende de la exposición continua a metabolitos modificados, sino a la exposición precipitada que puede ocurrir años antes". Nicotina protector. El efecto protector de la nicotina con respecto a las enfermedades neurodegenerativas se había contemplado en numerosas ocasiones desde hace unos años. Una forma derivada de la nicotina parece prevenir la formación de la acumulación proteínica implicada en la enfermedad de Alzheimer. La sustancia, llamada nornicotina, se combina con azúcar y se adhiere a las proteínas potencialmente dañinas de forma tal que no se puedan acumular, según demuestran últimas investigaciones. Kim Janda, y su colega de Scripps, Tobin Dickerson, combinaron nicotina, glucosa y beta amiloidea en tubos de ensayo para ver qué pasaba. En la presencia de las otras dos

moléculas, los investigadores encontraron que la acumulación de amiloidea disminuyó en aproximadamente 20 por ciento. Análisis de la reacción química mostró que la nicotina y la glucosa se adhieren a la beta amiloidea en un proceso

llamado glicación, que (con excepción de la nicotina) también está involucrado cuando se dora la comida. Este proceso hace que cambie la estructura del cerebro de tal forma que las fuerza a pasar una al lado de la otra sin adherirse. "No pueden estar juntas", sostuvo Janda. Los sistemas de limpieza celular remueven las proteínas glicadas, explicó. Ahora, el equipo de Douglas Shytle, de la Universidad del Sur de Florida, en Estados Unidos, ofrece nuevas evidencias sobre el mecanismo antiinflamatorio mediado por la nicotina en el cerebro, que puede protegerle de la muerte neuronal. Los resultados del trabajo se publican en el último número de Journal of Neurochemistry. Los estudios en el laboratorio han demostrado que la nicotina inhibe la activación de las células del

Imagen tridimensional de una proteína priónica normal

sistema inmune de la microglía. También se ha constatado que el receptor de la acetilcolina alfa-7, donde se une la nicotina, bloquea la activación microglial. "Creemos que la capacidad de la nicotina para prevenir la sobreactivación de la microglía puede ser un mecanismo adicional sobre las propiedades neuroprotectoras de la nicotina". Los investigadores de la Universidad del Sur de Florida han hipotetizado que la acetilcolina actúa como una sustancia antiinflamatoria endógena que previene que la microglía ataque al cerebro. "En los pacientes que se encuentran en riesgo de Alzheimer u otras neurodegeneraciones, la nicotina puede actuar como un neurotransmisor similar a la acetilcolina. Puede enviar señales que supriman la respuesta en la microglía y limitar la inflamación cerebral".

Para mayor información: PNAS 2004; DOI: 10.1073/0400924101.

NUMEROSOS AVANCES EN EL ESTUDIO DE LOS PRIONES.

La encefalopatía espongiforme

bovina (EEB) o enfermedad de las vacas locas está causada por priones, que no son más que una forma scrapie mal plegada de una proteína celular normal que

se encuentra en la superficie de las neuronas humanas, bovinas y ovinas. Las infecciones priónicas también provocan la forma humana de la enfermedad, la Creutzfeldt-Jakob, una patología incurable que provoca alteraciones neurológicas, demencia y, finalmente, la muerte. Al contrario de lo que ocurre en la mayoría de enfermedades infecciosas, en la EEB el material infeccioso no es un virus o una bacteria, sino una proteína mal plegada. Los priones carecen de ARN o ADN, los ácidos nucleicos que contienen la información genética para replicarse. Normalmente, las proteínas priónicas se expresan por todo el organismo y se asientan en las superficies celulares de una amplia variedad de tejidos, especialmente el nervioso central. Aunque se desconoce lo que hacen allí en condiciones normales, cuando su funcionamiento es anormal las consecuencias son notorias.

Las proteínas priónicas sanas son cómplices en la neurodestrucción.

Los priones responsables de la enfermedad de las vacas locas no destruyen las neuronas por sí mismos. Hasta hace pocos meses los científicos contemplaban a las proteínas priónicas

normales como mero pasto que los priones scrapie convertirían en

más priones de su mismo tipo hasta formar una masa espongiforme capaz de destruir las células cerebrales y provocar el deterioro neurológico que caracteriza a la enfermedad. En febrero de este año, el equipo de Anthony Williamson, investigador del Departamento de Inmunología de The Scripps (California), ha conseguido inducir esta catastrófica neurotoxicidad in vivo sin emplear ningún prión scrapie. En su lugar añadieron anticuerpos que se mezclaron con las proteínas priónicas normales. De esta forma, ocupando y activando las proteínas priónicas normales desencadenaron el tipo de neurodegeneración que caracteriza a la EEB y a su variante humana. Este hallazgo sugiere un posible mecanismo para las patogénesis priónicas.

"Los priones scrapie se entrecruzan con priones celulares normales, destruyendo a las neuronas en el proceso. En lugar de ser inocentes transeúntes hasta que se convierten en priones scrapie, los priones celulares normales parecen actuar como agentes esenciales en las enfermedades priónicas", comentan Anthony Williamson.

Los resultados de este estudio que propone que las proteínas sanas son cómplices directos de esta destrucción neuronal fueron publicados en la revista Science del mes de Febrero. La forma de plegamiento del prión afecta a su capacidad de infectar.

Las cepas de priones se

diferencian entre sí por las variaciones en el plegamiento de una misma proteína, según demuestran dos estudios publicados en la última edición de la revista Nature. El hallazgo confirma que los cambios en la forma de plegarse de la proteína priónica también influyen en sus propiedades infecciosas.

En el primer trabajo, el equipo de Chih-Yen King, de la Universidad del Estado de Florida, en Estados Unidos, utilizó un fragmento de la proteína Sup35, responsable de la propagación priónica en la levadura Saccharomyces cerevisiae. Para sus ensayos marcaron la Sup35 con una proteína fluorescente y la introdujeron en diferentes grupos de células de levadura que contenían cepas priónicas distintas. Posteriormente, reaislaron los fragmentos y los emplearon como "semillas" para hacer crecer extracelularmente fibras de Sup35 derivadas de bacterias. "Cuando introdujimos estas fibras en células de levadura no infectadas, propagaron fielmente la cepa a la que habían pertenecido. Este hecho demuestra que se pueden generar diferentes cepas a partir de un único fragmento de Sup35", concluyen los investigadores de la Universidad de Florida.

En un segundo ensayo, el equipo de la Universidad de California en San Francisco (UCSF) encabezado por Jonathan Weissman ha alcanzado conclusiones similares. En su laboratorio, introdujeron formas mal plegadas de una proteína priónica en una Saccharomyces cerevisiae normal, libre de patología priónica.

Las células fueron cultivadas en un ambiente que provoca que la levadura normal se agrupe en

PrPc

PrPSc

Astrocito reactivo de una vaca con la nueva variante.

pequeñas colonias rojas, mientras que la infectada por priones forma colonias de otros colores. "Encontramos que la introducción de la proteína mal plegada daba paso a una levadura infectada por priones", han explicado.

Al igual que ocurre con los priones que provocan enfermedad en los mamíferos, los de la levadura se agrupan en diferentes cepas. Para estudiar la relación entre las cepas priónicas y la formación de placas amiloides por proteínas mal plegadas, el equipo generó amiloides a diferentes temperaturas. Al estudiar las temperaturas a las que se derretían los priones y su resistencia a la rotura por enzimas, se demostró que las condiciones ambientales influían en la formación de priones con propiedades físicas diferentes.

El estudio demuestra que una única proteína infecciosa puede adoptar diferentes formas, que caracterizan a las distintas cepas. Trabajos previos del equipo de Weissman habían demostrado que las diferentes cepas priónicas tenían capacidades distintas para saltar entre especies. El nuevo estudio demuestra que esta habilidad radica en la forma de plegamiento del prión.

En un comentario que acompaña a los estudios en Nature, Mick Tuite, de la Universidad de Kent, en el Reino Unido, considera que los hallazgos confirman la hipótesis de la existencia de una única proteína.

A partir de ahora, al menos en los priones de la levadura, "la atención puede dirigirse a cómo se propaga la forma amiloide, asegurando la correcta transmisión a las células hijas", ha considerado Tuite. Para ello, pueden emplearse los datos obtenidos con estos ensayos de transformación priónica.

El experto propone ahondar en la forma de propagación de los priones en la levadura y considera que "estos hallazgos pueden aplicarse de la misma forma a organismos superiores". Nueva variante de proteína priónica patógena.

El equipo de Cristina Casalone, del Centro Nacional de Referencia de Encefalopatía Animal de la Universidad de Turín en Italia, descubrió el mes pasado una nueva variante de la proteína priónica que produce enfermedad de Creutzfeldt-Jakob. Los signos que presenta la nueva variante son similares a la forma esporádica de la neuropatía. Los resultados del trabajo fueron publicados en la edicion del mes de febrero de la revista electronica Proceedings of the National Academy of Sciences. Los autores analizaron los cerebros de ocho vacas que presentaron test positivos para la encefalopatía espongiforme bovina y se descubrió una nueva variante en dos animales.

Además de

presentar los orificios típicos, el cerebro de los dos animales tenían una acumulación de placas de proteína amiloide. También se determinó que había diferentes regiones cerebrales afectadas.

En términos moleculares, es

interesante destacar que la nueva cepa se asemeja a los priones implicados en la mayor parte de los casos de la forma esporádica de la enfermedad en humanos.

La descodificación de las características de la nueva variante de priones, tanto en muestras de animales como de humanos, puede ayudar a identificar un factor de riesgo potencial para enfermedades humanas de etiología desconocida, como la Creutzfeldt-Jakob.

No obstante, aunque la encefalopatía espongiforme bovina y la ECJ comparten numerosas características, es importante establecer cierta cautela en la valoración del posible nexo entre las condiciones que afectan al hombre y a los animales, basándose en las propiedades bioquímicas de la enfermedad asociadas a los diferentes tipos de priones que se han localizado en los diversos estudios llevados a cabo.

Para mayor información:

Nature 2004; 428: 319-323, 323-328. Nature 2004; 428: 266-267.

PNAS 2004; Doi: 10.1073/pnas. 0305777101. www.science.com

HALLAN UNA PROTEÍNA QUE BLOQUEA EL VIH-1 DE FORMA NATURAL EN MONOS. La identificación de una proteína en la familia de primates cercopitecos, o monos del Viejo Mundo, que bloquea la infección del virus de inmunodeficiencia humano (VIH-1), puede abrir una nueva vía para desarrollar un tratamiento preventivo frente a esta patología en los humanos.

En un trabajo publicado en anterior edición de la revista Nature, se explica que esta proteína, la TRIM5-alfa, es capaz de bloquear de forma natural al VIH-1 y se subraya que si existiera la misma molécula en humanos podría constituir una pieza esencial para el manejo de la infección.

"Por vez primera se vislumbra la existencia de factores naturales de inmunidad celular que potencialmente bloquean de forma específica los retrovirus como el VIH-1", señala Joseph Sodroski, del Instituto Dana Farber, en Boston (Estadios Unidos) y coordinador de la investigación. "Los resultados amplían nuestra visión acerca de la forma en que se podría bloquear la infección por el VIH-1 en las fases iniciales".

Los investigadores explican que las células humanas contienen una proteína similar a la TRIM5-alfa, pero una versión menos eficaz que la de los monos a la hora de bloquear la infección. También plantean la posibilidad de que la potencia de la TRIM5-alfa difiera en función de las variaciones genéticas, lo que explicaría por qué algunos VIH+ progresan más rápidamente a sida que otros infectados que permanecen sanos durante décadas.

Sin embargo, mientras que hablar del uso

terapéutico de este descubrimiento parece especulativo, Sodroski sugiere hallar vías para incrementar la efectividad de la molécula TRIM5-alfa en los humanos o, si es posible, emplear las proteínas de los monos como tratamiento.

Las TRIM5-alfa residen en los cuerpos citoplasmáticos en el interior de las células. Su hallazgo, de acuerdo con lo que se expone en el ensayo, ofrece más información de cómo el virus, una vez que ha atravesado la membrana celular, convierte su material genético ARN en ADN para la replicación. En un momento clave de este proceso, el núcleo interno del virus se despoja de su cápside en preparación de la transcripción inversa. Hasta ahora, este proceso era un misterio, pero Sodroski y su equipo han demostrado que la TRIM5-alfa reconoce de forma específica la cápside viral e interrumpe el proceso descrito. "Al bloquear este paso, la proteína TRIM5-alfa hace que el virus sea incapaz de alcanzar al material genético en el núcleo de la célula del hospedador", indica Sodroski.

En un comentario que acompaña al trabajo, Stephen P. Goff, de la Universidad de Columbia, en Nueva York, destaca la importancia de este hallazgo, aunque advierte del trabajo que aún queda por hacer.

Nature 2004; 6.977 (427): 849-853, N&V.

LOS MACRÓFAGOS ACTÚAN A TRAVÉS DE LA VÍA FAS Y SU LIGANDO EN LA DESTRUCCIÓN ARTICULAR.

La proteína Fas y su ligando FasL intervienen en los procesos inflamatorios que se producen en las articulaciones de los pacientes con artritis reumatoide, según los datos de una investigación que se publica en Nature Immunology y, que según sus autores, puede ayudar a explicar los mecanismos patogénicos que subyacen en

algunas patologías autoinmunes, como la artritis reumatoide. Los resultados de la investigación pueden explicar por qué las articulaciones de los pacientes con artritis reumatoide tienden a sufrir una inflamación severa con el curso de la enfermedad. El estudio coordinado por Richard M. Pope, de la Universidad Northwestern, en Chicago, sugiere que las interacciones entre la proteína Fas y su ligando FasL fomentan la activación a través de la vía de señalización del receptor de la interleucina 1 (IL-1R1), lo que puede contribuir a la patogénesis de la artritis crónica. Los investigadores explican que la proteína Fas y su ligando habitualmente están implicados en la muerte celular. Ahora han observado que los macrófagos actúan entre ellos a través de la vía Fas y de su ligando. Es decir, los macrófagos están implicados en el desencadenamiento de la destrucción articular que caracteriza a la artritis reumatoide a través de la secreción de citocinas proinflamatorias. "Nuestros resultados pueden empezar a explicar la forma por la que los macrófagos, un tipo de célula del sistema inmune con múltiples funciones, empiezan a ser parte del problema, más que la solución". Debido a que las funciones no apoptóticas de Fas y de su ligando FasL están todavía sin caracterizar totalmente, el equipo de Pope comenzó a estudiar su papel en un modelo de ratones deficientes de Fas que habían desarrollado un tipo de artritis reumatoide inducida por colágeno menos severa que la de los ratones controles. "Los animales deficientes en Fas tenían mayor cantidad de IL-1b proinflamatoria en sus articulaciones, algo que sugería una activación ineficiente a través del receptor de la interleucina 1 cuando las señales del Fas eran defectuosas". Parece que cuando Fas y el ligando FasL interaccionan entre ellos liberan una cascada de señales de un grupo de moléculas de superficie, como el receptor de la interleucina 1 o el receptor Toll-like 4, en un estado inhibido. "Cuando bloqueamos las relaciones entre Fas y FasL, la producción de citocinas se redujo considerablemente, al igual que la severidad de la artritis en el modelo animal". Debido a que Fas y su ligando FasL están presentes en los macrófagos en situaciones como la aterosclerosis, "estos resultados pueden mejorar nuestro conocimiento sobre las enfermedades inflamatorias crónicas".

Nature Immunology. doi: 10.1038/ni 1054.

“Un científico en su laboratorio no es simplemente un técnico: es también un niño enfrentado a fenómenos naturales que lo impresionan, como si fueran cuentos de hadas”.

Marie Curie fue una pionera mujer de ciencias, humanista y tenaz, con el descubrimiento del radio, esta investigadora de origen polaco, abrió el campo de la física nuclear y la terapia del cáncer. Trabajos que le costarían la vida. El 7 de Noviembre de 1867, nace en Varsovia, Marya Salomee Sklodowska, hija de Bronislawa y Vladislav

Sklodowski, polacos patriotas y nacionalistas que se dedicaban a la educación. Para ese entonces, Varsovia pertenecía a la Polonia controlada por el Zar Alejandro II, quien intentaba apagar el nacionalismo entre los polacos, manteniéndolos ignorantes de su cultura y su lenguaje. Fue la menor de cinco hijas. Su padre era profesor de física y matemáticas. Era un hombre amante de la música, la literatura y la ciencia y ocupo cargos importantes en instituciones educativas, su madre igualmente fue directora de un colegio de señoritas. Victima de sus convicciones patriotas, la familia Sklodowski ve como su situación económica se va deteriorando poco a poco, ya que los puestos educativos para ambos padre y madre, van siendo menos dignos y mal remunerados. Finalmente la desgracia abate a la familia ya que en enero de 1876 cuando Marya tenía ocho años, muere Sofía, su hermana mayor, de tifus. Dos años mas tarde, en 1978, muere prematuramente su madre Madame Sklodowska a la edad de 42 años, victima de la tuberculosis, esto la dejaría en medio de cierto abandono y desconsolación aminorando su fe religiosa. La familia restante, el Profesor Sklodowski, su hijo Joseph y sus hijas Bronya, Hela y Marya sobreviven y forman un núcleo familiar muy unido. Maria recordaría años después la perdida de su madre como el momento mas triste de su vida y causa de una gran depresión. Nacida en un hogar de maestros e intelectuales, pudo dedicarse al estudio en un hogar privado de lujos o comodidades, característica que habría de marcar su vida de una vez y para siempre Marya desde muy pequeña demostraba grandes cualidades: era autodidacta, dedicada a la lectura y al estudio, tenía una gran memoria, una excelente concentración y el deseo imperioso de aprender, tal que a los 4 años de edad comenzó a leer perfectamente.

A pesar de todo el sufrimiento que había golpeado su vida, era la primera en su clase, hablaba ruso, polaco, alemán, francés y estudiaba ingles, historia, literatura, matemáticas… El 12 de Junio de 1883 a los 15 años de edad termina sus estudios secundarios con medalla de oro y con dos años menos de edad que la demás chicas de su promoción. Pero los esfuerzos físicos, psíquicos y el enriquecimiento constante al que obligaba a su mente hicieron que se desmonorara y sufriera grandes crisis nerviosas. Su padre decidió contener los estímulos intelectuales de su inquieta hija y enviarla a reposar al campo durante un año. A su regreso y dada la situación precaria de su familia tiene que trabajar para ganarse la vida y como la gran mayoría de los jóvenes de su país lo intenta dando clases particulares pero así no consigue para nada sus objetivos. En aquella época los estudios superiores estaban restringidos sólo a los hombres, por ello se encuentra que no puede continuar su aprendizaje en Varsovia si no es de forma clandestina. Así es como se une a la Universidad Volante, un grupo de estudiantes, en su mayoría mujeres, que se reunían de casa en casa, de forma clandestina, para estudiar, debatir y en definitiva aprender. Este grupo se vio muy influido por los escritos de August Comte cuyos textos sobre filosofía positiva le dio el nombre al grupo de "positivista". Las sesiones de la Universidad volante pronto se hacen insuficientes y un día ella y su hermana Bronia hacen un trato: Bronia que había estado ahorrando iría a París a estudiar medicina mientras Marya quedaría en Polonia trabajando y apoyando económicamente a su hermana, de esta forma cuando Bronia terminase su carrera podría hacer lo mismo con Marya que iría a París a estudiar. Así fue. En los años siguientes trabajó como institutriz e casa de la familia Zorawski para conseguir así el dinero necesario. Cuando por fin Bronia termina su carrera, Marya deja su trabajo, vuelve a la Universidad Volante y se encuentra con la oportunidad de comprobar sus conocimientos. En el otoño de 1891 viajó a París y con sus escasos ahorros y el poco dinero que su padre podía enviarle, se matriculó en el curso de ciencias de la Universidad parisiense de la Sorbona. Es aquí donde cambia el idioma de su nombre, de Marya a Marie. Para ahorrar carbón no encendía el calentador, y pasaba horas y horas escribiendo números y ecuaciones sin apenas enterarse de que tenía los dedos entumecidos y de que sus hombros temblaban de frío. Llegó a pasar semanas enteras sin tomar otro alimento que té con pan y mantequilla. Cuando quería festejar algo compraba un par de huevos, una tableta de chocolate o algo de fruta. Este escaso régimen alimentario la volvió anémica. Frecuentemente, al incorporarse, sentía desvanecimientos y tenía que recostarse en la cama, donde a veces perdía el conocimiento. Al volver en si, pensaba que estaba enferma, pero procuraba olvidarse de ello, igual que

hacia con todo lo que pudiera entorpecer su trabajo. Jamás pensó que su única enfermedad era la inanición. Además de los problemas económicos se encuentra con problemas con su francés y con el nivel de conocimientos necesarios para la carrera. Durante tres años estudia día y noche para, de esta forma, quedar la primera de su promoción en su grado de Master en Física. Después de este esfuerzo pasa las vacaciones de verano en Varsovia. Vuelve a París el curso siguiente con la beca Alexandrovitch para cursar esta vez la carrera de Matemáticas, que terminaría con el segundo puesto de la promoción. Esto la hace merecedora a una beca e incluso es comisionada por la Sociedad de Mejoramiento de la Industria para realizar un estudio relacionado con las propiedades magnéticas de diferentes aceros de acuerdo a su composición química. Marie entonces busca un laboratorio, en donde realizar esos estudios. Al realizar la búsqueda de un laboratorio apropiado, Marie recurre a un amigo de su confianza, también físico polaco, quien la presenta con un colega suyo, Pierre Curie ya que sabia que Pierre había hecho investigaciones primarias de magnetismo y era el jefe del laboratorio en la Escuela Municipal de Física y Química en Paris. De esta manera Pierre le dio a Marie un espacio en su laboratorio.

El encuentro entre Curie y

Sklodowska no solo cambio el rumbo de sus vidas, sino el curso de la ciencia en general.

Mientras la relación entre ambos pasaba de un mutuo respeto y afecto al enamoramiento, en el aspecto científico ambos fueron piezas fundamentales para convencerse mutuamente de lograr cada quien su doctorado. Pierre lo obtiene en Marzo de 1895. A los veintiséis años de edad Marie, tenía una decidida independencia personal. Pierre tenía treinta y cinco años, era soltero y al igual que Marie, estaba dedicado en cuerpo y alma a la investigación científica pero la necesidad de estar en compania de Marie era cada vez mas intensa. Lo que fascinaba a Pierre de ella, era su valor y nobleza de espíritu. A los pocos meses, Pierre Curie le propuso matrimonio, pero casarse con un francés, abandonar para siempre a su familia y su amada Polonia, parecía imposible para la señorita Sklodowska. Hubieron de pasar diez meses antes de que Marie aceptara la propuesta. En una ceremonia sencilla por el civil, en Julio de 1895, Marie y Pierre contraen matrimonio y establecieron su hogar en un diminuto departamento. Durante el segundo año de su matrimonio, el 12 de Septiembre de 1897 nacía la primera hija Irene, que con el correr de los años

ganaría un premio Nobel. Jamás pensó Marie Curie que se vería en la necesidad de elegir entre el hogar y su carrera científica. Después del nacimiento de su hija se incorporo rapidamente a su trabajo. Mientras preparaba una monografía sobre aceros, comenzó a buscar un tema para su tesis doctoral. La elección de este tema sería la decisión más importante de su vida científica y personal. El mundo de la física estaba revolucionado, en 1985 se habían descubierto los rayos X y se había iniciado así un nuevo campo de investigación. En 1896 Becquerel observa las radiaciones de las sales de Uranio. Por su parte Marie, decide tomar como tema de su tesis doctoral, el comportamiento de los rayos provenientes de Uranio; ya Henri Becquerel había realizado algunos trabajos respecto del Uranio, pero la comunidad científica de esa época dedicaba toda su atención al tema de los rayos “X” traído a la luz por el físico alemán Wilhelm Roentgen. Roentgen gana el primer Premio Nobel de Física en 1901 por su descubrimiento de los Rayos “X”. Marie comienza experimentos de inmediato en un galpón de la escuela Municipal, adaptado como laboratorio y utiliza un dispositivo desarrollado por Pierre su marido varios años antes, mediante el cual se podían mediar corrientes eléctricas extremadamente bajas. Pierre y su hermano mayor Jacques habían llamado a este dispositivo “electrómetro” y Marie lo utilizo para medir la corriente eléctrica casi imperceptible que pasaba por el aire cuando este había sido bombardeado con rayos de Uranio. “En lugar de hacer actuar a estos rayos contra placas fotográficas, preferí determinar la intensidad de su radiación, midiendo la conductividad del aire que había sido expuesto a la acción de los rayos”, explicaba Marie tiempo después. Este experimento no tuvo buen fin dadas las condiciones precarias del laboratorio. Pero esto no sería obstáculo para la realización de nuevos experimentos. Pidió a los conocidos todas las muestras de metales, de compuestos metálicos y minerales que pudieran darle, el experimento consistía en investigar si existían otras sustancias distintas del uranio capaces de hacer que el aire fuese conductor de la electricidad. Así pudo comprobar que el Torio y sus compuestos se comportaban de forma parecida al Uranio. Con otros experimentos midió la intensidad de la corriente producida observando así que la actividad del Uranio

sólo dependía de la cantidad de este y no de su estado. Con numerosos experimentos, Marie confirmó las observaciones de Becquerel de que los efectos de los rayos de Uranio eran constantes, sin importar si el Uranio estaba en estado sólido o pulverizado, puro o compuesto, húmedo o seco, o bien expuesto a la luz o al calor. Marie fue mas allá de los trabajos de Becquerel, formulando una hipótesis crucial: “La emisión de rayos por compuestos a base de Uranio, pueden ser una propiedad atómica del elemento Uranio, algo que se encuentra en la estructura de sus átomos”. Esta hipótesis de Marie Curie que pudiese parecer simple, probó ser totalmente revolucionaria. Simplemente, contribuyó a dar un giro total en el entendimiento científico. En aquel tiempo con relación al átomo, los científicos tenían la certeza de que era la partícula más elemental. Por la misma época, el descubrimiento del electrón probó que esta idea ancestral era errónea, pero nadie profundizó en la compleja estructura interna o en la inmensa energía almacenada de los átomos. En un inicio, Marie y Pierre no estaban convencidos de que tal cantidad de energía proviniera del átomo. Marie hizo pruebas con todos los elementos hasta ese entonces conocidos, para determinar si otros elementos o minerales hacían que el aire condujera electricidad mejor o si bien solo el Uranio tenia esta capacidad. En Abril de 1898, sus investigaciones revelaron que compuestos a base de Torio, emitían también los rayos de Becquerel. Nuevamente la emisión de rayos parecía ser una propiedad atómica. Para describir este comportamiento del Uranio y el Torio, Marie invento la palabra “radioactividad”, basada en el vocablo latino “ray”. Por primera vez se utilizaba el término radioactivo en una comunicación científica.

En sus experimentos posteriores añadió a sus muestras fragmentos de pechblenda y calcolita (minerales de Uranio) y comprobó que la primera era cuatro veces más activa que el Uranio y la segunda dos veces, si su teoría era cierta entonces

lo más probable sería que en estos minerales se encontraran cantidades pequeñas de otra sustancia considerablemente más activa que el Uranio. Publicó rápidamente (12 de Abril de 1898) sus observaciones pero dos meses antes Gerhard Schmidt había publicado observaciones parecidas. En la cabeza de Marie daba vueltas la idea de que podría haber encontrado un nuevo

elemento. El 14 de Abril comenzaba la búsqueda de dicho elemento con la ayuda de Pierre que abandonaría sus investigaciones para trabajar con ella. Empezaban con 100gr de pecblenda, pronto se darían cuenta de que necesitaban toneladas. Fue por esta época cuando los dos comienzan a sufrir molestias y Marie presentaba síntomas de lesión tuberculosa. El 6 de Junio de 1898 consiguen obtener un sólido 150 veces más activo que el Uranio y poco después obtenían una muestra que tenía 330 veces más actividad que el Uranio. El 27 de Junio Marie obtenía precipitados de hasta 300 veces más activos: ahí estaba el nuevo elemento. En el mes de julio de 1898 los esposos Curie pudieron anunciar el descubrimiento de una nueva sustancia radiactiva, el polónium, localizado en las fracciones que contenían bismuto. Polonio, nombre que le dio Marie en recuerdo de su amada Polonia. Pero, la actividad del polónium era insuficiente para explicar la enorme energía que irradia de la pechblenda. La actividad continuó, llegando Marie a manejar unas ocho toneladas de residuos de mineral, del que ya se había separado del uranio. La salud de los Curie era cada vez más frágil a causa de las radiaciones y después de estos trabajos se vieron obligados a tomarse unas vacaciones. Cuando volvieron hicieron un nuevo descubrimiento, el líquido residual de la obtención del Polonio seguía siendo radioactivo, novecientas veces más radioactivo que el Uranio. El nuevo elemento sería bautizado con el nombre de Radium, ya que era un elemento de enorme radiactividad. Pero nadie había visto el radio; nadie podía decir cuál era su peso atómico. Tendrían que pasar cuatro años para que los esposos Curie pudieran probar la existencia del Polonio y el Radio, durante los cuales trabajaron en una barraca proporcionada por el gobierno austríaco en precarias condiciones. "A pesar de todo, en aquella miserable barraca pasamos los mejores y más felices años de nuestra vida, consagrados al trabajo. A veces me pasaba todo el día batiendo una masa en ebullición con un agitador de hierro casi tan grande como yo misma. Al llegar la noche estaba rendida de fatiga." Marie Curie.

Sólo les quedaba comprobar que esta sustancia era verdaderamente un elemento, cuestión que demostraron a través del espectroscopio construido por Pierre. A partir de este momento la tarea de la pareja se centró en purificar grandes cantidades de los nuevos metales para investigar sus propiedades. Los tres años siguientes serían los más fructíferos para las investigaciones. Había comenzado la carrera de publicaciones sobre la radioactividad y Piere y Marie estaban a la cabeza. El 28 de Marzo de 1902 Marie llegó a medir el peso atómico del Radio: Ra = 225,93, quedaba así definido el nuevo elemento.

El 25 de Junio de 1903 fue el gran día de la presentación de la tesis de Marie. En ella quedaban reflejadas sus

conclusiones sobre el Radio y el Polonio, métodos de

purificación, observaciones de los rayos,

observaciones sobre

radioactividad inducida,... Así consiguió el

doctorado en ciencias Físicas de la Universidad de París con la mención de "muy honorable". Ese mismo día se conocieron personalmente Marie y Rutherford. Por entonces, las manos agrietadas, quemaduras y dolores musculares eran ya las consecuencias de las largas exposiciones a las radiaciones llegando incluso a abortar en el segundo embarazo. En noviembre de 1903, el Real Instituto de Inglaterra confirió a Pierre y a Marie una de sus más distinguidas condecoraciones: la Medalla de Davy. El siguiente reconocimiento público a su labor vino de Suecia. El 10 de diciembre de 1903, la Academia de Ciencias de Estocolmo anunció que el Premio Nobel de Física correspondiente a aquel año se dividiría entre Antoine Henri Becquerel y los esposos Curie, por sus descubrimientos relacionados con la radiactividad. En 1904, Marie logró obtener empleo como profesora de un colegio de señoritas cercano a Versalles. Los esposos Curie continuaron su labor docente y de investigación científica. Mientras la investigación de la radiactividad progresaba, la pareja de sabios que le había dado vida se iba agotando poco a poco. El último y más maravilloso milagro era que el Radio podía convertirse en un aliado del hombre en su lucha contra el cáncer. El Radio era un excelente destructor de las células cancerosas, pero por otro lado, también destruía las células sanas. Tenía pues, una utilidad práctica, pero los ingenieros sólo podrían producir el "fabuloso metal" si dominaban el secreto de las delicadas operaciones a que había de someterse la materia prima. Los esposos Curie en vez de patentar los derechos de fabricación del radio y obtener una gran fortuna, decidieron describir el proceso en beneficio de la lucha contra el cáncer.

En diciembre de 1904 nació su segunda hija Eve, Marie volvió pronto a la rutina de la escuela y el laboratorio. El matrimonio siguió apasionado por sus investigaciones y rechazaron todas las oportunidades que se les brindó de enriquecerse con sus descubrimientos. Al contrario, le dieron a la ciencia y al mundo entero todos sus logros. Pierre experimenta con el radio sobre su piel; quemadura y a continuación herida: su acción sobre el hombre queda patente. Continuaron sus investigaciones y descubrieron que el Radio cura la lepra, tumores y algunas formas de cáncer. Fue el nacimiento de la “curieterapia” y luego de la cobaltoterapia. Los ojos del mundo estaban puestos en los esposos Curie, y honores de todas clases comenzaron a llegar hasta el cobertizo que había abrigado silenciosamente y durante tantos años su paciente labor. Empero, Pierre Curie y su mujer eran gentes simples y modestas. El rehusó la Legión de Honor, y hubieron de hacerse esfuerzos para que aceptara en la Sorbonne el lugar a que era acreedor. "Pedí, decía, un laboratorio y me ofrecen una cátedra". El 19 de abril de 1906 Pierre Curie murió atropellado por un carro tirado por caballos en la calle Dauphine. Fue enterrado en el cementerio de Sceaux. El 13 de mayo de 1906 el Consejo de la Facultad de Ciencias, por decisión unánime, otorgó a la viuda Curie la cátedra que había desempeñado su esposo en la Sorbona. Era esta la primera vez que se concedía tan alta posición en la enseñanza universitaria de Francia a una mujer convirtiéndose así en la primera Catedrática en la historia de la Sorbona. María continuó sola su tarea que había comenzado con Pierre. Su vida nunca fue fácil. Se la criticó por ser mujer, extranjera, católica, judía, extranjera, polaca, alemana, rusa... pero resistió. Educó a sus dos hijas, continuó trabajando para Polonia y para Francia, sus dos patrias. Obtiene un sillón en la Academia de Medicina. También hubo de enfrentarse a los prejuicios de su época: xenofobia y sexismo que, en 1911 impiden que entre

en la Academia de las Ciencias. No obstante, en 1911 Suecia le concedió el Premio Nobel de Química por el descubrimiento del Radio y del Polonio y por su trabajo para aislar el radio puro y establecer su peso atómico, siendo así la primera persona en la historia en ganar el premio Nobel dos veces. Poco después se centraría en el trabajo de definir un patrón de radio que se hacía tan necesario para la industria y el comercio. La figura de Marie Curie cobra un gran protagonismo. En 1914 fue nombrada directora del Instituto de Radio de París y se fundó el Instituto Curie. Durante la primera Guerra Mundial equiparía y dirigiría una flota de vehículos de rayos X para la asistencia médica en el frente. Poco después sería protagonista de la primera gran campaña de prensa en EEUU protagonizada por un científico para la recaudación de fondos para sus laboratorios. Sus descubrimientos fueron la llave para muchos científicos en la comprensión de la materia y la energía. Su trabajo no solo fue de gran influencia en el desarrollo de la ciencia si no que contribuyo enormemente en la investigación y tratamientos médicos. En mayo de 1934, víctima de un ataque de gripe, se vio obligada a guardar cama. Ya no volvió a levantarse. Cuando al fin falló su vigoroso corazón, la ciencia pronunció su fallo: los síntomas anormales, los extraños resultados de los análisis de sangre, que no tenían precedente, acusaban al verdadero asesino: el radio. Murió el 4 de julio de 1934, en la Alta Saboya, padecía una anemia perniciosa debida a sus largas exposiciones a la radioactividad, tanto en sus experimentos, como en los hospitales con los que colaboraba. Su vida fue la ciencia. Vivió por y para ella hasta el final. Su cuerpo fue sepultado junto a los restos de su marido en el cementerio de Sceaux. Marie Curie es por supuesto recordada también por sus servicios a la medicina, en reconocimiento a las aplicaciones del radio para el tratamiento del cáncer. Ella misma, y también su hija Irene, fueron víctimas del efecto cancerígeno de la radiación. Antes de morir, completó su obra magna, el libro "Radioactivité", que resume el conocimiento del tema hasta ese momento. El libro fue traducido al polaco por un discípulo suyo, Ludwik Wertenstein, y se publicó justo antes de la invasión de Polonia por Alemania. Se utilizó como texto en la universidad clandestina polaca durante la ocupación nazi.

Los últimos años de su vida estuvo muy cerca de sus dos hijas. En el año 1933, traspasaría a su hija Irene la dirección científica del Instituto del Radio. Irene, la hija mayor (1897- 1956), Doctora en Ciencias, se casó en 1926 con Frederic Joliot. Ambos recibieron en 1935 el Premio Nobel de Química por su síntesis de los nuevos elementos radiactivos. La menor, Eve, fue periodista y escribió una notable biografía de su madre Marie en 1957. Marie Curie fue una mujer extremadamente inteligente. Pero no fue únicamente su inteligencia la que la condujo a lograr un destacado lugar en el mundo de la ciencia. Ella supo de su capacidad, estaba convencida de poseerla, y deseo utilizarla conscientemente para ponerla al servicio de su objetivo: la investigación pura que sería capaz de ensanchar el saber. Asumió la soledad de su propia vida, de su trabajo, su inclinación al recogimiento. Deseó siempre la reserva y el silencio. Se vio obligada a desarrollar, en algunos aspectos, una cierta agresividad: la necesitó en un principio para poder penetrar en el territorio de los hombre que excluían a las mujeres de todas aquellas tareas que no fueran ser esposa, madre o amante, aspectos en los que ella no se conformó con ser una mera espectadora pasiva; más tarde para que se la reconociese en toda su valía y, por último, para afirmar su reinado como profesional en un territorio científico dominado por los hombres y que a ella tanto le costó demostrar, defender y conseguir. Marie Curie fue la “primera” en: ¤La primera de su promoción en la carrera de Física ¤La primera mujer en doctorarse en Francia, la segunda en Europa ¤La primera mujer en obtener un premio Nobel ¤La primera mujer en obtener una cátedra en la Sorbona ¤El primer científico en obtener dos premios Nobel A lo largo de toda su vida llegó a recibir más de 100 nombramiento y distinciones. Es intachable el trabajo científico que llevó a cabo, el que realizó sin descanso, no permitiéndose desfallecer ni entonces ni después. En 20 años recibió más radiaciones que ningún otro ser humano que hubiera trabajado expuesto a ellas.El radio es altamente radiactivo y tiene una gran permanencia, ya que su período de desintegración alcanza los 1620 años.

donde trabajaría después como auxiliar de cátedra. En 1882 se hace jefe de laboratorio en la Escuela de Química y Física Industrial. En 1904 fue reclamado para ocupar la nueva cátedra de física de la Sorbona. Pero no era un hombre rico, vivía de sus trabajos científicos en cristalería, que lo llevaron a su primer gran descubrimiento científico. Con su hermano Jacques, descubrió la “piezo-electricidad”, que es la propiedad que poseen algunos cristales de producir electricidad y que se utiliza hoy en elementos de alta tecnología. Estos hermanos inventaron, además un electrómetro capaz de medir pequeñas cargas eléctricas. Asimismo y ya en solitario estudió fenómenos magnéticos en los que basó su tesis doctoral. Obtuvo un Nobel de Física junto con su mujer y Becquerel por el descubrimiento de la radioactividad y demostró que un gramo de radio arrojaba 500J por hora, primera indicación de la energía que puede obtenerse del interior de los átomos y los peligros de la radioactividad.

Pierre, nacido en París en 1859. Tenía una inteligencia precoz y un carácter independiente. Pierre Curie fue educado por su padre, jamás concurrió al colegio. A los 16 años se recibió de Bachiller y a los 18 obtuvo su licenciatura. Pronto se convirtió en jefe de trabajos prácticos en la escuela de física de París. Pero no era un hombre rico, vivía de sus trabajos científicos en cristalería, que lo llevaron a su primer gran descubrimiento científico. Con su hermano Jacques, descubrió la “piezo-electricidad”, que es la propiedad que poseen algunos cristales de producir electricidad. A fines del siglo XIX Pierre ya era un físico muy estimado por sus pares, sobretodo en el extranjero, pero desconocido para el gran público. Estaba tan abocado a su trabajo que consideraba que sus actividades eran incompatibles con el matrimonio

Importancia actual de la radioactividad A nadie se le escapa que la radioactividad es peligrosa en grandes dosis, esto es debido a que produce daños irreversibles en las células sobre todo en aquellas que están en división activa, es decir, sobre todo a las células cancerosas. Desde el descubrimiento del Radio se ha estado utilizando este elemento para los tratamientos con radiaciones controladas contra el cáncer. Además de esta aplicación encontramos otras aplicaciones médicas, por ejemplo se utiliza la radioactividad para seguir el curso de alguna disfunción orgánica: un paciente puede beber un preparado con una pequeña cantidad de yodo radioactivo, incapaz de producir daños, pero que, al ser asimilado, permite conocer el camino que sigue el

yodo en su cuerpo y detectar las anomalías en su metabolismo. Su marcha se sigue por la mínima radiación que desprende. En la industria, en el control de calidad se aplican radiaciones gamma para detectar fallas internas en piezas grandes de fundición o para verificar el espesor de las hojas de material plástico, cartón o vidrio. En la industria química se emplean trazadores para conocer como tienen lugar las reacciones químicas; también se emplean radiaciones como aporte energético para iniciar algunos procesos industriales. Además la radioactividad ha sido utilizada para datar restos arqueológicos, fósiles e incluso a la Tierra. La bomba atómica o las centrales nucleares, tan cuestionadas actualmente, son dos formas algo más negativas del uso actual de la radioactividad.

Palabras de Albert Einstein sobre Madam Curie. En este momento, cuando una personalidad de tan relevada importancia como Madam Curie ha llegado al fin de su vida, no nos contentemos con recalcar lo que le ha dado a la humanidad como fruto de su trabajo. Son las cualidades morales de su destacada personalidad las que más significación tienen para una generación y para el curso de la historia, más aún que sus logros dependen mucho de las dimensiones de su carácter. Tuve la fortuna de estar ligado a Madame Curie durante veinte años de sublime amistad. Llegué a admirar su grandeza humana hasta lo más alto, su esfuerzo, la fuerza de su voluntad, su austeridad consigo misma, su objetividad, su incorruptible juicio, algo que en todo su conjunto raramente se encuentra en una sola persona. Se sintió siempre como una servidora de la sociedad y su profunda modestia jamás dejó espacio para la complacencia. Se sentía oprimida por su permanente sensibilidad hacia las desigualdades y las injusticias de la sociedad. Esto fue lo que le dio ese severo aspecto, muy a menudo mal interpretado por aquellos que no estaban cerca de ella; una curiosa severidad que no quedaba satisfecha por ningún sentido artístico. Una vez que reconoció un camino como el correcto, lo persiguió con compromiso y con extrema tenacidad. La mayor hazaña de su vida -al margen de demostrar la existencia de los elementos radiactivos y aislarlos- se debe no sólo a su clara intuición, sino a su dedicación y tenacidad en su ejecución bajo los inconvenientes más extremos. Si sólo una pequeña de la fuerza de carácter de Madam Curie perdurara en los intelectuales de Europa, ésta afrontraría un futuro más esperanzador.

Albert Einstein (Alemania, 1879-1955) (El libro de las virtudes femeninas, 1997, Editorial Planeta Argentina S.A.I.C

Pierre, nacido en París en 1859. Tenía una inteligencia precoz y un carácter independiente. Pierre Curie fue educado por su padre, jamás concurrió al colegio. A los 16 años se recibió de Bachiller y a los 18 obtuvo su licenciatura. Cursó sus estudios en la Sorbona

PIERRE CURIE (1856-1906)

FIBROSIS QUISTICA La Fibrosis Quística o también llamada Mucoviscidosis es una enfermedad crónica, en la mayoría de los casos degenerativa, de carácter genético y hereditario. Es una enfermedad autosómica recesiva. La herencia autosómica recesiva se presenta cuando el gen está ubicado en uno de los autosomas (pares de cromosomas 1 a 22). Esto significa que afecta a hombres y mujeres por igual. "Recesivo" significa que para que se presente un determinado rasgo son necesarias dos copias del gen, uno heredado de la madre y el otro, del padre. ) Es la enfermedad genética más letal entre caucásicos y europeos con una incidencia de 1 en 2.500 nacimientos vivos. Sin embargo, su distribución es universal, habiéndose reportado incluso en la raza negra y oriental. Se caracteriza clínicamente por la obstrucción de los conductos en el pulmón, páncreas y tracto genital principalmente debido a que el tejido epitelial de los órganos afectados se resiente por su incapacidad de transportar eficientemente el cloruro a través de la membrana celular. La alteración física y química de las secreciones produce espesamiento y precipitación de las mismas en los conductos excretores de las glándulas. Por un aparente sencillo defecto en el transporte del cloro entre las células, las mucosidades que producen varias glándulas son exageradamente más viscosas de lo normal, lo que dificulta su expulsión de los bronquios, de tal manera que obstruye las vías respiratorias y las convierte en caldo de cultivos para diferentes agentes infecciosos, lo que provoca tos y expectoración. Como se manifiesta La enfermedad suele manifestarse por problemas respiratorios asociados con manifestaciones digestivas, diarrea crónica y retraso del crecimiento. Esta es la forma de presentación más frecuente. Sin embargo, a lo largo de la vida pueden aparecer signos y síntomas que configuran la historia natural de la enfermedad. En el recién nacido se observan: retraso en la evacuación del meconio, ictericia prolongada o anemia, hipoproteinemia y edemas. La afección del páncreas se caracteriza por un bloqueo del flujo de las enzimas digestivas al duodeno, produciendo una mala absorción de las proteínas, hidratos de carbono y grasa, ocasionando trastornos digestivos, dolor y distensión abdominal. Se produce un estado de pérdida de peso, malnutrición y alteraciones en el crecimiento de los pacientes de FQ. Con respecto a las glándulas sudoríparas, los pacientes de FQ pierden cantidades excesivas de sal en el sudor, por lo que en tiempo caluroso deben tomarse precauciones, así como en períodos de actividad física intensa o procesos febriles. Es necesario por tanto beber importantes cantidades de líquido y en ocasiones administrar suplementos de sal. Base Genética. En el año 1989 comienza una etapa decisiva para la FQ, pues por fin se lograr identificar e gen responsable de la fibrosis quística, el que se localiza en el brazo largo del cromosoma 7. Se trata un gen muy grande que tiene unas 6.500 bases o nucleótidos. Abarca una

región de 250 kb con 27 exones, que contienen la información para una proteína de 1.480 que codifica una proteína, denominada Regulador de Conductancia de Transmembrana de Fibrosis Quística (CFTR), que se localiza en la membrana apical de las células epiteliales, la cual funciona como un canal de cloro, dependiente de ATP permitiendo un transporte pasivo de iones por gradiente electroquímico. La alteración de esta actividad juego un rol fundamental en la deshidratación crónica con las secreciones de la vía aérea características de la enfermedad. (figura 3)

Esta proteína es anormal en estos pacientes, y el resultado final es un transporte alterado de agua y electrolitos, así como un aumento en la absorción de sodio en los órganos afectos. Todo esto, unido al ADN procedente de los neutrófilos, produce en la vía aérea un espesamiento de las secreciones, originando alteración en el transporte mucociliar, dificultad para la eliminación bacteriana, infección y predisposición al daño pulmonar. La CFTR también regulan la función de otros canales iónicos, particularmente los canales de sodio, los que se encuentran sobreactivados en la FQ, produciendo elevada concentración se sal en la superficie de la vía aérea y mayor deshidratación. La enfermedad es causada por la presencia de copias mutadas del CFTR. Dicho gen produce una proteína que se encuentra principalmente en el páncreas, glándulas sudoríparas, intestino, tracto reproductivo y pulmón; es decir, todos los órganos que se ven afectados en la fibrosis quística. Existen más de 800 mutaciones asociadas con la FQ, por lo que se han dividido en seis clases diferentes basados en la influencia en la

Figura 1.

función y estructura del CFTR:

Mutaciones Clase I (7%): provocan alteración de la síntesis de la proteína de CFTR. Mutaciones Clase II (85%): Desorganiza el mecanismo de transporte del CFTR desde el retículo endoplásmico al sitio de operación en la membrana apical. Mutaciones Clase III (3%): Causa defectos en la regulación del CFTR

dependiente del ATP o fosforilación. Mutaciones Clase IV: Altera la conductancia de los canales iónicos de CFTR. Hay un descenso en esta Mutaciones Clase V: se reduce la función de los canales de la CFTR en la membrana apical Mutaciones Clase VI: descenso de la estabilidad de la proteína y, por lo tanto, alteración de la función transportadora.

Figura 2: Superficie apical de las células. De todas las mutaciones hasta ahora identificadas la ∆F508; llamada así por la delección de un aminoácido (Fenilalanina) en la posición 508, es la más frecuente, constituyendo el 70% de las mutaciones y generalmente se asocia con la enfermedad clásica. En condiciones normales hay dos canales de cloro: uno dependiente de ATP que es el regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística y otro dependiente de calcio; por otro lado hay un canal para el sodio de transporte pasivo; el adecuado funcionamiento de estos canales permite el óptimo funcionamiento del mecanismo mucociliar, lo cual permite que el moco producido permanezca húmedo, fluido y fácil de eliminar. Los pacientes con fibrosis quística presentan una alteración en el canal del cloro que impide su salida a través de la superficie apical de las células ciliadas, lo cual aumenta la carga negativa en el citoplasma; por esta razón de manera secundaria hay una hiperabsorción de sodio y agua desde la capa de moco, el cual se vuelve más espeso y difícil de

eliminar; las bacterias proliferan, atraen células inmunitarias que lesionan el tejido sano. El ADN liberado por las bacterias incrementa la adhesividad del moco alterando más el mecanismo de abatimiento ciliar. (Figura 3) Las alteraciones mencionadas producen éstasis de secreciones sobreinfectadas principalmente por Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae y anaerobios en las cavidades de los senos paranasales etmoidales y maxilares principalmente, que con el tiempo puede terminar con el desarrollo de pólipos nasales por hipoxia, edema e inflamación crónica, lo cual puede predisponer además al deterioro acelerado de la vía respiratoria baja. La adherencia al epitelio respiratorio de moco ha sido considerada el primer paso para el establecimiento de la infección sinubronquial por Pseudomonas; los mecanismos de la adherencia específicos para esta bacteria son complejos. Las células epiteliales de los individuos normales son relativamente resistentes a la Pseudomonas y por tanto hay sugerencias que evidencian las células epiteliales respiratorias en los pacientes con fibrosis quística los cuales son más susceptibles incrementando la adherencia de cepas no mucoides de Pseudomonas en las células epiteliales bucales de los pacientes con fibrosis quística comparados con los pacientes normales. El incremento de la adherencia se correlaciona con la disminución de la cantidad de fibronectina en la superficie celular e incremento de los niveles de las proteasas de la saliva; se presenta una alteración de los gliconjugados que es la clave de los receptores de la superficie del epitelio celular, particularmente los residuos terminales de ácido siálico; éste defecto en la acidificación y en los organelos terminales conducen a una disminución de los gliconjugados en las células de los pacientes con fibrosis quística y que pueden predisponer a la adherencia de Pseudomonas aeruginosa; además ésta produce hialunonidasas que tienen la capacidad de alterar los gliconjugados facilitando la adherencia al epitelio . Al parecer el balance entre proteasas y anti proteasas está alterado en los fluidos a nivel de las vías aéreas en FQ por un exceso de Elastasa Neutrófilo Derivada. Aparte de la destrucción local inespecífica de las fibras de elastina e la potente estimulación a la producción de moco, esta enzima interfiere con la opsonización y eliminación de las Pseudomonas a través de la digestión de la opsonina C3bi en la superficie de la bacteria y del receptor para la fracción C3b del Complemento en la superficie del Neutrófilo. Además escinde la porción Fc de los anticuerpos AntiPseudomonas haciendo que éstas sean imposibles de atacar y favoreciendo su persistencia en la vía aérea. Finalmente las bacterias fabrican y exponen toxinas que a su vez provocan la llegada de más Neutrófilos que darán origen a una nueva respuesta inflamatoria creando un círculo vicioso de inflamación e infección. Por otra parte, los Neutrófilos liberan grandes cantidades de ADN dentro de la vía aérea como parte de la respuesta inflamatoria y este elemento aumenta en una forma considerable la viscosidad de las secreciones.

CELULAS EPITELIALES El cloruro se segrega en la vía respiratoria y se elimina sodio

SECCIÓN DEL EPITELIO Y CONDUCTO RESPIRATORIO El moco húmeso y fluido atrapa particulas inhaladas; los cilios empujan el moco hacia la garganta para su expulsión

Se impide la salida de cloruro fuera de la célula; se potencia la catación de sodio

El moco se torna espeso y difícil de liminar. las bacterias proliferan y atraen a células inmunitarias, que pueden lesionar el tejido sano. El ADN liberado por las bacterias y las células pulmonares incrementan la adhesividad del moco.

Figura 3. Mecanismo de abatimiento ciliar.

Las mutaciones provocadas por la fibrosis quística pueden afectar a la calidad de los espermatozoides, provocando azooespermia. Según reciente investigaciones publicadas en la revista “Nature”, el regulador transmembrana de la fibrosis quística (CFTR) es expresado por las células de la pared del útero femenino, afectando al normal funcionamiento de los espermatozoides, lo que podria explicar la esterilidad asociada en estos enfermos. Los investigadores han observado que las células de la pared del útero segregan aniones bicarbonatados "que se sabe que median en la activación del esperma en el tracto reproductivo femenino" lo que llevó a la sospecha de que CFTR podría tener alguna relación. Diagnostico Clínico. Un diagnóstico temprano es fundamental para que los tratamientos adecuados se desarrollen lo antes posible. Está demostrada la relación directa entre un diagnóstico temprano y una calidad de vida mejor en los enfermos. El sistema ideal para la detección de todos los casos de nacimientos de afectados, es la realización de un Screnning neonatal, un sencillo análisis de sangre que puede indicar la posibilidad de una FQ. Desgraciadamente, este sistema no está implantado por todas las Administraciones Sanitarias, principalmente por los costes y la posibilidad de falsos positivos. Si estos síntomas se manifiestan en un niño o niña, es aconsejable realizar un Test de Sudor ( iontoforesis). Este test es, hoy en día, la base fundamental del diagnóstico de la FQ. Se trata de un análisis de unas gotas del sudor del paciente, recogidas en una máquina especial, que determina la concentración de iones en el mismo.

Los valores normales son los siguientes: Sodio:

Normal: < 70 mEq/L Anormal: > 90 mEq/L Equívoco: 70 a 90 mEq/L

Cloruros: Normal: < 50 mEq/L Anormal: > 60 mEq/L Equívoco: 50 a 60 mEq/L Nota: mEq/L = miliequivalentes por litro. Si la concentración de sal en el sudor alcanza ciertos límites, es indicativo de una FQ. En los casos de resultados positivos en el test de sudor, el paso siguiente es un estudio genético (prueba de ADN) que concluya la mutación concreta y verifique el diagnóstico. El análisis genético no sólo se ha de realizar al paciente afectado, sino también a sus padres y hermanos.

Otras pruebas que sirven para diagnostico son.

Examen de grasa fecal: Es un examen que mide la cantidad de grasa en las heces y el porcentaje de grasa en la dieta que no se absorbe. Serie GL y del intestino delgado: Es una serie de placas de rayos X para examinar el esófago, el estómago y el intestino delgado y se realizan luego de que la persona ha tomado una suspensión de bario (medio de contraste). El propósito del examen es detectar anomalías anatómicas o funcionales en el esófago, estómago e intestino delgado. Tripsina y quimotripsina en heces: Este examen es una prueba sencilla de tamizaje utilizada, en ocasiones, para examinar a los niños pequeños en los cuales hay sospecha de fibrosis quística, la cual provoca la formación de tapones de mucosa que pueden obstruir los conductos pancreáticos que desembocan en el intestino delgado. Examen de estimulación de secretina: Es una prueba que mide la capacidad del páncreas para responder a la secretina. Los cuerpos de las personas con fibrosis quística forman tapones mucosos que pueden obstruir los conductos pancreáticos que desembocan en el intestino delgado. Estos tapones impiden la neutralización de la acidez producida por los alimentos, lo cual finalmente reduce la capacidad de digerirlos y absorberlos. Radiografía de tórax o TC Pruebas de la función pulmonar

Tratamiento Partimos de la base de que la Fibrosis Quística es, hoy por hoy, una enfermedad incurable. Los tratamientos que actualmente se aplican se destinan a paliar los efectos de la afección y a lograr una mejora integral de la salud del afectado. Paralelamente se desarrollan investigaciones que mejoran estos tratamientos o desarrollan nuevas técnicas. La FQ es una enfermedad compleja, multisistémica, y por ello su tratamiento es también complejo, pues ha de incidir sobre cada uno de los aspectos en que la enfermedad se ponga de manifiesto en cada persona. También está demostrado que el tratamiento temprano favorece a una mejor calidad y esperanza de vida. Actualmente se investiga en distintas técnicas antibióticas y de terapia génica que inciden en la raíz del problema. Estas investigaciones suponen una gran esperanza para el tratamiento de la FQ. La terapéutica convencional consiste en 4 componentes principales:

i. Tratamiento antibiótico para la endobronquitis crónica.

ii. Movilización de secreciones para reducir la obstrucción de la vía aérea.

iii. Intervención nutricional para compensar la insuficiencia pancreática y malabsorción.

iv. Control de la inflamación de la vía aérea. v. Terapia Génica. (Ver tabla 1)

El gen para la fibrosis quística (CF) era un objetivo importante para la terapia génica. In vivo se habían descrito anormalidades en la conductancia en los canales de cloro, y una línea celular CF- expresaba el mismo defecto. Esta línea celular se utilizó en ensayos que intentaban estudiar la actividad del gen CF

introducido en la célula. Uno de los vectores que más se han utilizado en la lucha contra la fibrosis quística ha sido el vector retroviral. Un ADNc para el gen regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR) era construido por el solapamiento de tres clones ADNc, y un ADNc completo era clonado en un vector retroviral. Las células CF- eran infectadas por un vector retroviral que llevaba un gen CFTR, y la célula con el provirus integrado eran seleccionadas por su resistencia al G418. Las células expresaban el gen CFTR. Los datos más interesantes procedían de las medidas del grado de funcionamiento de los canales para el cloro. El flujo aniónico de las células en respuesta a una estimulación por la adenilato ciclasa proporciona una conductancia para el cloro semejante. En ausencia de un determinado estimulador de la adenilato ciclasa, el flujo aniónico de las células CF- y de las células CF- que contienen el gen CFTR introducido se pierde. Si se le adiciona este determinado activador de la adenilato ciclasa, el flujo aumenta rápidamente en células CF- con CFTR, pero en las células CF- el flujo permanecía bajo. Se utilizaron técnicas electrofisiológicas para determinar si la conductancia para el cloro influía en ese flujo aniónico. Estos experimentos mostraron que las corrientes de cloro se detectaban únicamente en las células CF- con CFTR. Significativamente, la respuesta de las células CF- con CFTR es comparable con las respuestas traqueales humanas normales y alienta la esperanzas de que la terapia génica para la fibrosis quística , usando vectores retrovirales directamente sobre el epitelio pulmonar por medio de aerosoles, sea posible.

TABLA Nº 1 NUEVAS PERSPECTIVAS DE TRATAMIENTO EN LA FIBROSIS QUISTICA DIRIGIDAS AL DEFECTO BASICO. Regulación del transporte iónico.

• Activación CFTR mutada: Milrinona, genisteína, CPX.

• Estimulación de canales alternativos de cloro:Uridintrifosfato y adenosintrifosfato.

• Bloqueo de los canales NA+: Amiloride Terapia proteica.

Protección CFTR: Chaperones, glicerol, dimetilsulfoxido.

Aumento de producción de CFTR: Fenilbutirato.

Estimulo de la expresión de proteínas emparentadas con la CFTR como la MCR y MRP (colchicina).

Terapia génica.

Viral: Adenovirus, virus asociados a adenovirus.

No viral: Liposomas, conjugados moleculares.

CITOMETRIA DE FLUJO. La Citometría de Flujo (CMF) es una técnica de análisis celular multiparamétrico. Esto significa que ofrece información simultánea de un gran número de parámetros de cada una de las células que se analizan y la relación entre estos parámetros de una célula y los parámetros de otra célula también analizada. Es un método de lectura rápido, que permite analizar un elevado número de células (de 10.000 a 50.000 para cada anticuerpo monoclonal) y proporciona un registro computerizado de los resultados. La citometría de flujo permite la determinación de antígenos celulares de superficie, y por tanto, tiene utilidad en el inmunotipaje de leucemias agudas y síndromes linfoproliferativos crónicos. Así mismo, permite la cuantificación del ADN y la determinación de la actividad proliferativa de la población celular. La cuantificación de ARN celular se aplica al recuento de reticulocitos. La citometría de flujo se ha beneficiado de los avances ocurridos en los últimos años en informática, electrónica, óptica y tecnología láser. Así mismo, la producción de nuevos anticuerpos monoclonales con diferentes fluorocromos y los nuevos procedimientos de tinción en citoquímica han permitido ampliar las áreas de estudio en diagnóstico clínico e investigación biomédica. Actualmente, esta tecnología ha pasado de ser una herramienta útil en investigación básica a ser empleada en la práctica habitual de muchos laboratorios de hematología y anatomía patológica. UN POCO DE HISTORIA… La citometría de flujo se inició en la década de los 60 como un importante avance en el proceso de contar y medir el tamaño de partículas o células en poblaciones no homogéneas. El primer contador celular automático fue desarrollado por Moldavan (1934) y consistía en un tubo capilar por el que se hacían pasar células teñidas, el capilar estaba montado sobre un microscopio óptico con un objetivo sobre el cual había un detector fotoeléctrico que registraba el paso de células como un cambio en la luz que recibía. Luego, W. coulter describe en 1949 el principio que lleva su nombre. Desarrolló un contador celular basado en el cambio que produce una partícula al pasar por un agujero en el que hay una diferencia de potencial conocida. En 1966 también usó cambios en ondas de radiofrecuencia. En 1953 Crosland y Taylor inventan una cámara de flujo basada en la inyección de la muestra en el seno de un fluido de arrastre a través de un capilar que se estrecha y centra el flujo de la misma. Con este sistema se evitaban dos grandes problemas: el capilar tiene mayor diámetro con lo que su obstrucción es mucho más difícil y en segundo lugar permite mejor el enfoque de la muestra con la fuente de luz que es la base de las cámaras que se usan en la actualidad. Katmentsky (1965) introdujo dos avances capitales en la citometría: el uso de la espectrofotometría (luz absorbida) para cuantificar ADN y la medida multiparamétrica de luz dispersada. Fue el primero en emplear histogramas biparamétricos. En 1967-69 Van Dilla describe el primer citómetro de flujo con configuración ortogonal usando la cámara descrita por Crosland-Taylor. Demostraron la relación existente entre ploidía e intensidad de fluorescencia en la cuantificación de ADN, y producen histogramas donde se pueden visualizar las fases del ciclo celular (G0G1, fase S, G2M). FUNDAMENTOS DE LA CMF.

Su fundamento se basa en hacer pasar una suspensión de partículas alineadas y de forma individual por delante de un haz de láser focalizado. La suspensión en solución isotónica se hace pasar a través de un orificio pequeño de modo que cuando salen lo hacen una a una (en fila india) formando parte de una corriente continua o flujo cilíndrico. Sobre esta corriente de células se hace incidir un haz de luz láser, cuya dispersión y reflexión son analizadas en duración, intensidad y espectro, los datos obtenidos almacenados en memoria de ordenador y desde allí pasados a archivos binarios que posteriormente pueden ser analizados con detenimiento El impacto de cada célula con el rayo de luz provoca la emisión de una serie de señales luminosas

corresponden a diferentes parámetros de la célula y que son recogidos por distintos detectores. Estos convierten dichas señales en señales electrónicas que posteriormente serán digitalizadas para permitir la medida simultánea de varios parámetros en una misma célula. Estos parámetros son:

Parámetros relacionados con características intrínsecas de la célula, como su tamaño y la complejidad de su núcleo y citoplasma.

Parámetros relacionados con características antigénicas de cada célula (inmunofenotipo).El inmunofenotipo es el conjunto de estructuras propias de la célula con funciones varias y que actúan como antígeno. Estas estructuras pueden estar localizadas en la membrana, intracitoplasmicos y nucleares.

La dispersión de la luz es un fenómeno complejo que tiene importantes usos en citometría, particularmente en discriminación celular. Se emplea la luz dispersada a 90 grados que es función de la estructura celular (diferencia de índices de refracción en la célula) y la luz dispersada a bajo grado (0,5 - 2/10/15 grados) que es función del tamaño celular. También se ha empleado la luz polarizada para diferenciar varios tipos de leucocitos, o la dispersión multiángulo. CARACTERÍSTICAS.

La CMF es una técnica sencilla que se aplica en la rutina diaria de muchos laboratorios clínicos y de investigación, capaz de proporcionar resultados de forma rápida que pueden ser aplicables al diagnostico. Gracias a su gran especificidad es capaz de distinguir entre varias poblaciones celulares diferentes, y detectar una población celular en una muestra en la que predominan otras poblaciones celulares mayoritarias. En citometría de flujo se denomina población celular a un conjunto homogéneo de puntos. La principal característica de la CMF es que puede ofrecer información simultánea de varios parámetros de cada una de las células analizadas y la relación entre los parámetros de una célula y los de otra célula también analizada. Permite el análisis de dos parámetros de dispersión, SSC/FSC y tres de fluorescencia (en equipos con un solo láser), Fl1, Fl2 y Fl3, y de una cuarta fluorescencia en equipos con dos láseres. En la defección de células el haz de luz láser cuando atraviesa una célula sufre

una dispersión que puede ser evidenciada en un fotodetector, situado detrás de la corriente de células y justo enfrente de la fuente emisora, como una disminución de la luz incidente. El tiempo que dure el corte en la llegada de fotones al detector será proporcional al diámetro, y por tanto el volumen, celular. Este estudio de interrupción frontal del haz laser se denomina en términos anglosajones como Forward Scatter (FS). EL CITOMETRO DE FLUJO. A diferencia de otras técnicas, el citómetro de flujo mide características celulares individuales de un gran número de células (no una media de los resultados), y además permite medir características de poblaciones en muestras heterogéneas. Todos los citómetros de flujo comparten un aspecto común: las partículas son obligadas a fluir hacia una región sensible donde se miden sus propiedades o características. En los citómetros se necesita que las partículas fluyan con una trayectoria bien definida en el seno de un fluido de arrastre, que sea estrecha y estable; es decir que se requiere la presencia de un flujo laminar en la cámara de flujo (el flujo laminar se caracteriza por la no mezcla de las líneas de flujo del sistema; es decir que en un tubo en el que fluye un líquido en régimen laminar si se introduce un colorante, éste fluye por el sistema como una línea más o menos estrecha sin mezclarse con el líquido circundante). 1.- El sistema óptico: Consta de: láser, filtros, lentes y detectores. La fuente de luz es producida normalmente por un láser (en algunos modelos, sobre todo en investigación, se combinan varias fuentes de luz). En la mayoría de los citómetros se instala un láser de gas (comunmente argón) refrigerado por aire, que produce una luz monocromática de 488 nm. Esta luz es utilizada para la excitación de la mayoría de los fluorocromos y provoca la dispersión de luz que nos informa de las características celulares. Los emisores láser (fuentes de luz) más empleados son los de helio-neón (atómicos), argón-kriptón (iónicos) y helio-cadmio (moleculares). Recientemente se han empezado a introducir los basados en semiconductores (láser diodo). Aunque existen modelos antiguos de citómetros con fuente emisora de lámpara de arco, la casi totalidad de los modelos actuales llevan una fuente emisora láser. La luz emitida por el láser es una mezcla

de longitudes de onda, conocidas como líneas láser, definidas por la energía emitida por el electrón al caer de una órbita alta a otra baja. La longitud de onda utilizadas en citofluorometría son 488, 568, 630 y 647 nm siendo la primera la más habitual. Los láser ultravioleta cada vez se usan menos debido a que han ido apareciendo fluorocromos excitables con luz visible que pueden sustituir perfectamente a los que solo se podían utilizar en UV. Los citómetros de investigación suelen equipar varios láser, sin embargo los de rutina trabajan con longitud de onda del fija (casi siempre 488 nm). Los filtros se usan para eliminar y separar la luz recogida. Debe tener: alta transmitancia dentro de su banda de paso, banda de paso limitada y estrecha, baja autofluorescencia, buena estabilidad y resistencia a la luz.

Existen dos tipos de detectores de la luz. Los fotodetectores diodos o de estado-sólido situado frente al haz láser y que se usan para detectar la dispersión frontal de la luz. El otro detector óptico son los fotomultiplicadores (PMT) que detectan la luz dispersada por las células y que se coloca formando un ángulo de 90º con el haz láser. Esta luz es descompuesta, mediante los filtros apropiados para poder estudiar tanto la dispersión de luz de la misma longitud de onda del láser como la emitida por los fluorocromos. La mayor o menor dispersión de la luz y por tanto la mayor o menor detección de luz en éste detector, será proporcional a la rugosidad de la superficie celular y a las estructuras y organelas celulares. Las Cámaras de flujo son muy diferentes según sea la fuente de iluminación de aparato. Estas pueden ser abiertas o cerradas.

2.- Componente electrónico: Los pulsos detectados por los fotodetectores pasan a un amplificador y después son convertidos de señal analógica a digital (ADC). Después del procesamiento informático de la señal se obtienen histogramas mono o biparamétricos. La perfecta integración de estos sistemas permite un rápido y preciso análisis de un elevado número de células en poco tiempo. PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS. Debido a las especiales características de los citómetros de flujo, la muestra a analizar debe encontrarse en forma de suspensión monodispersa. Hay muestras como la sangre periférica, médula ósea, o otros fluidos biológicos, que precisan de un mínimo procesamiento; en cambio los tumores sólidos o las muestras parafinadas necesitan de una disgregación más o menos intensa (mecánica, enzimática, etc.). En ocasiones puede ser conveniente o necesario enriquecer la concentración celular en la muestra antes de su procesamiento por citometría, ya sea para obtener una concentración celular adecuada para la incubación con los reactivos, o para acelerar el proceso de sorting. La suspensión celular es preparada previamente con anticuerpos monoclonales conjugados (anticuerpos indirectos) con diferentes fluorocromos (FITC, PE, PerCP, PECy5, APC, etc.) y es introducida en el sistema hidráulico ( conjunto de controles neumáticos y fluídicos necesarios para establecer un flujo laminar que permita a la suspensión celular atravesar la cámara de flujo de forma estable e individual) de manera que las células atraviesen individualmente la cámara de flujo, donde el haz del láser intercepta las células. El contacto del haz del láser con una célula produce dos tipos diferentes de dispersión: frontal y lateral (90º). La dispersión frontal (Forward Scatter,A) nos da información acerca del tamaño celular, mientras que la dispersión lateral (Side Scatter,B) nos informa de la complejidad celular. Los anticuerpos monoclonales adheridos a la superficie celular son a la vez excitados por la luz del láser y generan fluorescencias que son recogidas por fotomultiplicadores (hasta 4 fluorescencias actualmente) que transforman la señal óptica en eléctrica, enviándose toda la información al sistema informático para su análisis. La suspensión celular debe cumplir una serie de requisitos:

Representatividad del tejido. Suspensiones celulares de alta calidad, con pocos agregados, y bajo

coeficiente de variación (CV). Preservación de las características celulares. Suficiente muestra celular.

LECTURA. Para la lectura por citometría de flujo, las células son teñidas con fluorocromos que se unen específicamente a un constituyente celular. Las células son inyectadas en un flujo líquido laminar y pasan una a una por un punto de medida iluminado con luz de alta intensidad (láser). Cada célula en el punto de interacción produce una señal fluorescente que es de intensidad proporcional a su contenido en fluorocromo. Uno o varios detectores recogen la fluorescencia emitida y transforman la señal a pulsos eléctricos. También se recoge la luz dispersada por la célula, que es función del tamaño, forma, y estructura de la misma.

Cámara de flujo

Sensor FALS

Forward Scatter

Side Scatter

Las señales producidas por la interacción de las células con el haz de luz son de dos tipos: - Señales de dispersión. - Señales de fluorescencia. a) Señales de dispersión: La dispersión resulta de la interacción de la luz con una partícula que produce un cambio de dirección (no de la longitud de onda) en todas las direcciones del espacio. Las características morfológicas que determinan la dispersión de la luz son fundamental-mente el tamaño celular, la membrana, el núcleo y el material granular del interior de la célula, llamado complejidad. En los Citómetros de Flujo se miden dos fracciones de dispersión: -La luz dispersada en ángulo cónico pequeño (0-10º) que casi coincide con la dirección de la luz incidente, llamada FSC (Forward Scatter). Es una medida proporcional al tamaño de la partícula que produce la dispersión. -La luz dispersada en ángulo recto llamada SSC (Side Scatter). Es proporcional a la complejidad de la estructura interna de la partícula.

b) Señales de Fluorescencia: Para la lectura por citometría de fLujo, las células son teñidas con fLuorocromos que se unen específicamente a un constituyente celular. Las células son inyectadas en un fLujo líquido laminar y pasan una a una por un punto de medida iluminado con luz de alta intensidad (láser). Cuando un fluorocromo interacciona con la luz de excitación procedente del láser emite energía radiante (señal fluorescente que es de intensidad proporcional a su contenido en fluorocromo). Debido a que parte de la energía se utiliza para la absorción, la luz emitida es de menor energía que la luz de excitación, es decir la longitud de onda emitida es mayor. La diferencia entre la longitud de onda de absorción y emisión se denomina Stokes shiff. Uno o varios detectores recogen la fLuorescencia emitida y transforman la

señal a pulsos eléctricos. Los citómetros de flujo permiten detectar señales de fluorescencia procedentes de complejos Antige-no/Anticuerpo marcados con un fluorocromo y situados en una célula, siendo la cantidad de señal de fluorescencia emitida igual a la proporción de la cantidad de componentes fluorescentes de la partícula FLUOROCROMOS PARA CITOMETRÍA DE FLUJO: Los fluorocromos son moléculas químicas que absorben luz a una determinada longitud de onda y emiten a otra diferente. Se caracterizan por sus espectros de excitación y de emisión, por lo que su utilización está condicionada por el tipo de láser del que disponga el citómetro y de la longitud de onda a la que se exciten ellos mismos. El espectro de absorción es el rango sobre el que un fluorocromo absorbe luz, y el espectro de emisión es el rango sobre el que un fluorocromo emite luz. El espectro de excitación y emisión varía con los diferentes fluorocromos. La intensidad de fluorescencia también depende del fluorocromo utilizado, ya que hay fluorocromos que emiten con mayor intensidad que otros. En algunas ocasiones ciertos fluorocromos producen el llamado fenómeno Quenching referido como la transferencia de energía entre dos moléculas marcadas con el mismo fluorocromo, y que están suficientemente cercanas. Debido a ello una molécula puede ser excitada por la luz del láser y por la luz que emite la otra molécula. Los Fluorocromos mas utilizados son: Isocianato de fluoresceína (FITC), Ficoeritrina (PE), Proteína Clorofila Peridinina, Rojo Texas,Ficocianina, ETC. Los Fluorocromos para marcar ácidos nucleicos son: Yoduro de Propidio, Bromuro de Etidio, Naranja de Acridina que para marcar DNA se excita a 480nm y emite a 510nm y para RNA se excita a 440/470nm y emite a 650nm, Hoescht, Naranja de Triazol, Mitramicina, Cromomicina A3, y el DAPI. Para la selección del flurocromo se deben tener en cuenta varios factores:

Su espectro de absorción debe ser lo mas cercano posible al espectro de emisión del láser utilizado.

La probabilidad que posee para absorber luz debe de ser alto. En unos fluorocromos es mayor que en otros, como por ejemplo el PE tiene mayor probabilidad que el FITC.

La probabilidad de emitir fotones (rendimiento cuántico) en el momento de absorber luz debe de ser alto. En el PE también es mayor que en FITC.

El espectro de emisión debe ser diferente al de emisión para asegurar que ambas señales se separan.

El tamaño del conjugado puede hacer insoluble el complejo AcMo/fluorocromo. Esto puede ocurrir sobre todo con el PE.

Hay que tener en cuenta el número de moléculas unidas al anticuerpo, ya que si aumenta, también aumenta la fluorescencia, produciendo artefactación de la emisión por proximidad.

Que posean un corto estado de excitación. Que sean fotoestables.

APLICACIONES DE LA CITOMETRIA DE FLUJO: 1. Detección y cuantificación de antígenos:

Identificación de antígenos mediante anticuerpos monoclonales marcados con diferentes fluorocromos, que permiten la identificación y clasificación de diferentes células tanto normales como patológicas. El isotiocianato de fluoresceína, la ficoeritrina y el PerCP son los fluorocromos más empleados en el marcaje de anticuerpos monoclonales. Todos ellos se excitan a 488 nm (luz azul) y emiten en la zona del verde, naranja y rojo, respectivamente. El citómetro mediante una compensación electrónica permite su utilización simultánea. La posibilidad de realizar un triple marcaje con diferentes anticuerpos monoclonales en una misma muestra ha permitido profundizar en el conocimiento de las diferentes poblaciones celulares estudiadas. Así, se han logrado importantes avances en el diagnóstico clínico y clasificación de leucemias y linfomas. En otras áreas también se ha demostrado su utilidad como en la

detección de autoanticuerpos e inmunocomplejos, en el diagnóstico de trombocitopatías adquiridas, y en la realización del test cruzado linfocitario 2. Cuantificación de ADN: Existen diferentes fluorocromos capaces de unirse al ADN celular como mencionamos anteriormente, de ellos el yoduro de propridio y el bromuro de etidio son los más utilizados en citometría de flujo. Ambos se excitan a una longitud de onda de 488 nm y se une de forma estequiométrica a la doble cadena de ADN. Hay diversos factores que influyen en la unión del fluorocromo al ácido nucleico. Una de ellas es la muestra a analizar; la que depende del del ADN, de la composición de bases (AT, CG), de la presencia de bases modificadas (bromodeoxiuridina) o metilación, estructura del ADN. También depende de la unión entre las proteínas cromosómicas (histónas) y ADN, una unión fuerte entre ellos (formol) dificulta la incorporación del fluorocromo, se puede hacer incubación con proteasas. Hay que tener en cuenta la membrana citoplasmática (el ioduro de propidio no la atraviesa), y componentes intracelulares. Otro problema corresponde a la Química, cinética y equilibrio de la unión Se debe tener cuidado con la concentración, las condiciones y el tiempo de incubación. La cuantificación de ADN nos informa sobre la existencia o no de anomalías clonales de ADN (aneuploidias de ADN) y, por otra parte nos permite conocer la distribución de una población celular determinada a lo largo de las distintas fases del ciclo celular. El término aneuploidía de ADN o por citometría de flujo significa: presencia de una población con un contenido en ADN diferente a un control de células semejantes y en igual fase del ciclo celular.En el área de la patología tumoral contribuye al diagnóstico y a la valoración pronóstica de estos pacientes. Se deben tener en cuenta ciertos criterios para la detección de aneuploidia de ADN como la presencia de dos poblaciones en la muestra, el coeficiente de variación de la población aneuploide mayor que la euploide, la presencia de células en la región de G2M de la población problema dudosamente aneuploide, la proporcionalidad entre las fases, y comprobar los picos con distintas técnicas. El empleo combinado de cuantificación de ADN y marcaje para diferentes antígenos de células tumorales y/o oncoproteínas permite la identificación y cálculo selectivo del ciclo celular de la población neoplásica. 4 3. Cuantificación de ARN: La cuantificación de ARN con fluorocromos como el naranja de tiazol, la tioflavina T o la pironina Y se utiliza como técnica de rutina en el recuento de reticulocitos y en general en la producción celular de la médula ósea. Además la citometría de flujo proporciona información sobre el contenido de ARN de cada reticulocito dato que indica su estadío madurativo.

4. Otras aplicaciones de la citometría de flujo: El cariotipo de flujo representa un complemento y una alternativa a los métodos clásicos de estudio de los cromosomas en metafase. Los cromosomas se aíslan a partir de preparaciones en metafase y se tiñen con fluorocromos. Los cromosomas en suspensión se analizan pasando de uno en uno por delante de la fuente de luz del citómetro. Permite la detección de anomalías cromosómicas. La separación de cromosomas permite purificar cromosomas en relación con su intensidad de fluorescencia o contenido en ADN. Es de utilidad en la realización de mapeo genético y en la producción de librerías de ADN recombinante. La utilización conjunta de hibridación in situ por métodos fluorescentes y de la citometría de flujo permite una cuantificación rápida y precisa de distintas proteínas a estudiar como es el caso de la P-glicoproteina y del gen MDR1 en los fenómenos de resistencia a multidrogas de células tumorales. La citometría de flujo, utilizando yoduro de propridio, también permite realizar cuantificación de células en situación de apoptosis (muerte celular inducida). Esta técnica se ha utilizado para estudiar células CD4+ de pacientes VIH+ con una alta tasa de apoptosis. VENTAJAS E INCONVENIENTES DE LA CITOMETRIA DE FLUJO. Debido a la necesidad de utilizar una suspensión de partículas (células, núcleos, cromosomas, etc), para ser leídos de una en una hace que se pierda información sobre la arquitectura de los tejidos que componen las células o de las propias células, así como la interacción entre estas y el medio que las rodea (patrones nodulares o difusos de los linfomas). Frente a este inconveniente la CMF presenta múltiples ventajas frente al microscopio de fluorescencia y las técnicas citoquímicas, como:

Posibilidad de empleo de múltiples marcajes frente a un solo marcaje de la citoquímica y la microscopia de fluorescencia.

Posibilidad de analizar un elevado número de partículas en un corto período de tiempo (5000 partículas/segundo). Posibilidad de cuantificar la intensidad antigénica por medio de los canales medios de fluorescencia. Mayor sensibilidad y objetividad que le permiten detectar enfermedad mínima residual y caracterizar poblaciones

celulares poco abundantes en condiciones normales como los basófilos. Posibilidad de analizar poblaciones celulares y epitopos celulares. Permite almacenar informáticamente la

información del análisis para poderla utilizar en cualquier momento y reanalizar análisis hechos con anterioridad. Posibilidad de cuantificar las moléculas antigénicas presentes en un grupo celular.

LO ÚLTIMO EN EQUPOS DE CITOMETRIA. El FACSVantage ha sido diseñado como el más completo citometro de flujo de uso en investigación. Combina un excelente diseño ergonómico con una concepción modular que provee características de flexibilidad y expansión operativa insuperadas. Características técnicas:

5 parámetros simultáneos: Forward scatter, Side Scatter, y 3 fluorescencias.

Posibilidad de instalar hasta 3 láseres, y capacidad de análisis de hasta 5 fluorescencias simultáneas.

Resolución de hasta 1024 canales completos. Alta velocidad, con circuito de retardo temporal

para doble laser incluído. Controlador MasterSORT.

DEFENSA Y EDUCACIÓN. Recuerdo que cuando entré a la Universidad, caminaba entre el Rubén Castro y la Casa Central, cuando encontré en el suelo un papel que decía más o menos “¿Porqué gastar US 600 millones en aviones de combate,

cuando falta plata para la educación?” Firmaba la FEUCV de esa época. Bueno lo primero que pensé era que la FEUCV no servía para nada que yo supiera. Y le achunté, porque todavía, después de 6 años de universidad, no tengo ni la más mínima idea si es que han hecho algo (además de inútiles tomas, paros, llamados a...., y sus famosas declaraciones públicas que nadie lee); y segundo que quienes escribieron ese cuestionamiento (con carácter de proverbio chino) no tenían idea del tema (o carecían de todos los antecedentes, como me dicen que debo decir las cosas). En vez de haber donado el dinero que gastaron en imprimir y comprar el papel en todas las fundaciones habidas y por haber, decidieron compartir su idea con todos los transeúntes, incluyendo a los barrenderos. Bueno, para abordar el tema en sí, tengo que comenzar diciendo que las armas, ya sean F-16, submarinos, tanques y todo lo demás, no tienen el objetivo de ser usados en la guerra, sino de evitar la guerra. Aunque para muchos esto suene una estupidez, es verdad. Pongo como ejemplo el caso de Bolivia, que si tuviera el suficiente poder militar para poder recuperar su pedazo de tierra y costa (con sus 200 millas marinas incluidas) y ser felices, no dudarían en usarlo. Es por ello que las “malvadas personas” (como deben pensar algunos) que compran material militar, en vez de gastar esa plata en los pobres, educación, salud, etc., no están viviendo en un mundo al revés. Sino que ese planteamiento, totalmente lógico, no tiene otro fin que evitar la guerra, que sería mucho más costosa en el ámbito cultural, comercial y todos lo demás, que gastar plata en material militar que sirve para la disuasión. Esto ha cobrado mayor relevancia en el contexto Latinoamericano actual, ya que como podemos ver, los gobiernos de los países limítrofes no están nada estables. En el caso de Argentina, esta un Kirchner dándoselas de gaucho con el FMI para ganar una efímera popularidad; en el de Perú con un presidente desgastado con un índice de popularidad que sube y baja como el riesgo país de Argentina, planteándonos que los límites marítimos no están definidos y gritándoles a todos que estamos en una carrera armamentista (con una especie de histeria parcial), y finalmente Bolivia con sus pataletas de cabro chico, haciéndonos ver como “malvados” y a ellos como los “desposeídos” para ganar ternura internacional (no está demás decir que lo han logrado, aunque E.E.U.U. nunca dejaría que Bolivia tuviera acceso al mar debido a que lo consideraría un pasadizo para el transporte de cocaína a su país). En conclusión, el gasto en defensa por parte de Chile obedece a políticas del bien común y no a caprichos esporádicos de uno u otro gobierno, lo cual aunque muchos no lo crean, favorece la economía, ya que seguir políticas que trascienden a cualquier gobierno (sea de izquierda o derecha), da confianza para aquellos que desean invertir en Chile. Pablo Tapia Ossa

TRIBUNA DEL TESISTA. Espero que este año las

relaciones entre la carrera mejoren sustancialmente, que aunque tengamos diferencias sepamos que nuestra meta va por una misma senda, y que mientras más comprometidos estemos con

nuestra carrera, más beneficios obtendremos nosotros mismos.

Puedo decir con orgullo que mi generación ha sido muy unida, que el compañerismo es tan grande que la amistad y el cariño generado desde un comienzo no se ha agotado aún después de cinco años. Pero también es necesario mencionar que esta unión no representó jamás a la carrera.

Actualmente, debo decir que fue una gran sorpresa la actitud que han tomado los profesores al crear el sistema de tutorías que los acercará a los alumnos nuevos, es una idea muy buena que seguramente se generó cuando estábamos en “plena guerra” por el tema de la acreditación de la carrera. Este tema afloró todas las necesidades que tenemos, todas las frustraciones se hicieron eco en el tercer piso y no podemos quedarnos en el mismo estado, tenemos que generar nuevas ideas que aporten a nuestra formación y a la de todos los que conformamos esta comunidad. No debemos tirar por el suelo las iniciativas que sean dadas por personas que tal vez no sean de nuestro total agrado, sino que tenemos que ver más allá de eso y evaluar la idea. Hay que pensar que si no damos ideas nosotros, lo mínimo que podemos hacer es ayudar a quienes sí las generan. El cambio va por nosotros, y me incluyo, tratemos de generar una unión que sobrepase a los compañeros del curso en que estamos y que incluya a la carrera en general. Y debemos felicitar todas las iniciativas que han hecho a esta carrera más grande.

Carolina Valle.

TRIBUNA DEL TESISTA

Nueva Sección : Bioinformática Técnicas : Microarrays Entrevista : Al nuevo Jefe de Carrera Pioneros de la Bioquímica : Cori Resultados del Concurso del Logo para la polera de bioquímica, y noticias del próximo centro de alumnos.

En algún momento

del 2003: “Me siento en la

mesa a tomar once y me encuentro solo, siento ganas de no hacer nada sabiendo que mañana hay prueba de bioquímica y

aun falta que estudiar. Aun me cuesta comprender muchas cosas, hay veces en las cuales las tengo muy claras, pero hay momentos en los cuales todo se me oscurece y este es uno de esos momentos, todo lo que veo se me hace raro y cada momento que pasa es peor, como poder desligarme de todo este pensamiento y todo este sentimiento, me cuesta mucho… alguien me dijo “tu sinceridad te lleva a decir las cosas que piensas sin medir el sentido de lo que puedes llegar a decir y hacer”, sigo estando solo y me lleva a pensar el porque de lo que me pasa, me doy cuenta todo lo que he cambiado, la forma de ver las cosas, la forma de actuar, mis relaciones con las demás personas, pero vuelvo a caer en estupideces, de que me sirve todo esto…” Extraído de “La vida se Manifiesta de muchas Formas” (cuaderno en el cual escribo) Comienzo a leer parte de lo que escribí y me doy cuenta que no solo por el estudio estamos aquí sino que estamos construyendo nuestras vidas , junto a las personas que nos rodean las situaciones etc. Es increíble lo que nos ayuda a forjar las experiencias las situaciones de cada día, y me doy el tiempo para agradecer a través de este espacio a cada persona que estuvo cuando la necesite, gracias por escuchar parte de lo que hay guardado en el mas profundo lugar de mis pensamiento, a todos ellos… Gracias. Por otra parte espero que este año sea el mejor para todos, que la carrera se una mas aun y sigamos por la senda que nos une a todos ya que el año anterior se hizo muchos progresos esperemos que todo ayudemos a seguir haciendo que nuestra carrera se haga valer porque somos carrera de futuro……

German Colque P.

Una mención honrosa.

Durante estos tres años y fracción que llevo estudiando fuera de mi casa, acá en la PUCV, he podido comprobar cuan difícil es la vida del estudiante universitario, mas aun si este es de otra región.

Quien no ha pasado por situaciones tan DRAMATICAS, como los momentos de MAMITIS AGUDITIS que se presentan durante los primeros semestres, o si estuviste de cumpleaños y echaste de menos a aquellos infaltables amigos de la infancia que acudían siempre a tu fiesta con regalos de la misma estirpe que no sobrepasaban las 2 Lucas que luego se convertirían en una botella de pisco que solo la verías cuando te la entregan y nada mas. También aquellas situaciones EXTREMAS como cuando te decían: ¡Vamos a hacer una vaca para salir a comprar! - y uno por dentro piensa: ¡Put..., estoy PATO! - y lo que único que te queda por decir: ¡Es que no estoy tomando!.(Aunque no sé porque fuerza milagrosa sobrenatural uno termina totalmente: ON THE BALL). Hay que recordar también las situaciones de INICIACION, tales como cuando perdiste los escrúpulos culinarios-gastronomicos y tuviste que comer la "RECETA A LA Chernobil" de tus compañeros que mezclaba heterogéneamente los mas variados y económicos ingredientes nunca antes vistos. No hay que olvidar aquellas situaciones tan BIZARRAS como el ponerse los trajes de baño como ropa interior, porque ya se te acabaron todas las provisiones y para mal remate ese dia hacen como nunca 40° C en toda la Región. Para que mencionar las tristes y decepcionantes expulsiones de las pensiones o casas arrendadas, a causa de la poca paciencia de los encargados, que no se acuerdan de cuando ellos eran jóvenes y liberaron toda su ira a través de la frase: ¡Se me van mier..s, tienen hasta el fin de mes!. Y si a todas estas situaciones le sumamos toda la carga y exigencia académica de nuestra querida PUCV, podemos darnos cuentas de cuan difícil es la vida del estudiante universitario. Es por eso compañeros que esta mención honrosa solo tiene el objetivo de felicitaros por todos los años que han pasado con vida en la PUCV y de fortalecer vuestros espíritus para poder sobrellevar todos los que puedan venir. FUERZA y ADELANTE NO MÁS. Sebastian Belmar Willatt. 4º Año. Bioquímica

APRENDIZAJE BASADO EN PROBLEMAS, UN NUEVO MÉTODO ESTRATÉGICO PARA EL APRENDIZAJE. Frente a las nuevas tendencias educacionales que plantean el focus del aprendizaje en el estudiante, el Aprendizaje Basado en Problemas (ABP) trabajado en tutoriales ha sido planteado como la estrategia más eficaz para responder a esta exigencia. El ABP ha sido implementado en algunas universidades como parte fundamental del currículo. Un grupo tutorial ha sido descrito como un grupo pequeño de alumnos, 5 a 8 estudiantes por tutor, en donde el tutor forma parte del grupo, motivando y guiando a los integrantes para que se conforme un equipo de estudio. Así el tutor estimula el desarrollo de un pensamiento crítico y reflexivo. Adicionalmente se usa esta instancia para evaluar tanto el comportamiento del grupo en general, como las actividades, fortalezas y debilidades de los integrantes en particular. Se considera además, como una estrategia educacional que permite la integración de las áreas básicas y profesionales, entrega una visión holística del saber y es una buena instancia para aprender a dar y recibir criticas. Sin embargo esta metodología en nuestros ambientes académicos es cuestionado por la alta relación profesor-alumno que se requeriría y por lo tanto el alto costo de implementación. Sin embargo, he podido estudiar este tipo de metodología para el aprendizaje llevando a cabo este método con cierto grupo de alumnos de la Universidad de la Frontera. En los talleres de ABP se trabajó con un total de 6 cursos (1 por semestre) durante tres años, en la asignatura de Bioquímica General de la carrera de Nutrición de la UFRO. El número de alumnos por curso osciló entre 19 a 32, de aquí se trabajó con 3 ó 4 grupos de 6 a 8 alumnos cada uno. Cada taller tiene una duración de 120 a 150 minutos. Dentro del taller se entrega dentro del material escrito, una guía que debe dar a conocer el propósito de la actividad, los objetivos generales por áreas, los criterios de evaluación orales y escritos entre otros. Las actividades realizadas en todo el curso fueron: el ejercicio de tormento de ideas, general o por grupos y las presentaciones orales libres por grupo en donde se atorga amplia libertad para la estrategia de exposición. Dentro del taller los integrantes, alumnos–profesor, solucionan y elaboran los objetivos de aprendizaje. Se define los recursos didácticos a los que se recurrirá. También hay una elaboración de compromisos de tares individuales o grupales. Todo esto se avala con una pauta por cada caso, entregada dentro del material escrito. Como resultados entonces, durante los 3 últimos años realizando taller de ABP se ha podido trabajar sin problemas hasta con cursos de 32 alumnos en cuatro grupos de 8 integrantes. El permitir una amplia libertad en la modalidad de la presentación oral, se ha traducido en una gran creatividad de parte de los alumnos, lo que denota un gran grado de comprensión al devolver en forma creativa los conocimientos adquiridos.

Otros profesores han trabajado en ABP, con estudiantes de Ingeniería Química, en cursos de 30 a 50 alumnos y han comparando aspectos tales como, las destrezas para el pensamiento critico, capacidad de resolver problemas, capacidad de elaborar tópicos de estudio y otras ventajas que se considera provee el ABP. Woods encontró que tales alumnos desarrollan más esas características que alumnos de otros cursos con metodologías tradicionales. Algo muy importante dentro del sistema ABP son los compromisos que cada alumno toma como tarea lo que permite al tutor , percatarse en la sección siguiente quienes cumplen tales compromisos a así evaluar la calidad de trabajo realizado fuera de las aulas en forma individual, lo que se considera en la evaluación personal de cada alumno. Por ultimo, la evaluación de una actividad docente siempre es la que presenta mayores dificultades. Particular mención requiere la evaluación formal por pares, esto es, con un documento escrito y de carácter confidencial que evidencian como perciben los alumnos el trabajo y el aporte de cada compañero y del profesor. Profesor Mg. José Zamora Silva. Departamento de Cs. Basicas. Facultad de Medicina. Universidad de la Frontera. Av. Francisco Salazar 01145. Casilla 54-D Temuco-Chile.

TRIBUNA DEL PROFESOR

• Este 24 de marzo finaliza el plazo para entregar los logos para la polera de bioquímica, el lunes 29 de marzo se harán las votaciones, y el resultado será entregado el día 5 de abril por nuestra pagina Web y nuestra revista, día que se entregara el premio también. • Curso Intensivo de Herramientas de Bioinformática. Profesor: Dr. Eric Bongcam-Rudloff. Linneaus Centre for Bioinformatics. El Curso comienza el Lunes 29 de marzo y dura hasta el 1 de abril. Horario: 9:00 – 18:00 hrs. Lugar: Universidad de Valparaíso. Mayor Información. Dr. Adrián Palacios Fono: (32) 508048 www.cnv.cl

PERSONAJE DEL MES

Nombre IUPAC : Alex Vielma Isotipos : chupacabras, aaaaaaale ...., chupi. Medio : la torre, balmaceda, sentado en el tercer piso mirando para cualquier lado. Localización subcelular: oficina del carloco sin rumbo alguno Frase típica : vamo a tomar, no tengo na q hacer, soy el chupacabraaaaaa !!!!!, aaaaaaaaaaaa!!!!. L.Q.N.S.Vio : cuando logro el jackass en la escalera de la torre, el día q conoció a las kambo, la mochila nueva que le regalaron, la cara que puso cuando no llego el amplificador. L.Q.N.S.Supo : el día q le dio vuelta la mesa al canario en la torre, cuando le puso una piña al che porq este le toco, el día q casi le pego el hombre porq este lo hincho poco pa q le enseñara a tocar guitarra. Regalo útil : una mochila nueva, ramos para este semestre, pilotos disponibles las 24 hrs. Para ir pa la torre, un curso de coordinación. Mayor virtud: Confiable, no falla nunca.

MEMORIAS DEL PERSONAJE

COMO VERAN ES DIFICIL

OBTENER FOTOS DE LOS VERDADEROS

Y MAS ANTIGUOS PERSONAJES DE LA CARRERA

EL CHUPACABRAS

VERTICAL 1. Compuesto orgánico que posee metales, presente normalmente como componente esencial de los organismos vivos. 2. Técnica de separación de proteínas. 3. Resonancia Magnética Nuclear. 4. Célula animal en la que se depositan grandes cantidades de triacilgliceroles 5. Proteína producida por glóbulos blancos. 6. Cofactor orgánico que se necesita para la acción de determinados enzimas.Suele contener una vitamina. 7. Ruta catabólica mediante la que se rompe una molécula de glucosa en dos moléculas de piruvato.

HORIZONTAL 1. Estudio de la Química de los seres vivos (en ingles). 2. Ciencia que analiza en profundidad molecular el codigo genético. 3. Proteína responsable de la enfermedad de Creutzfeld & Jacob. 4. Enzimas que catalizan la transformación de compuestos en sus isómeros posicionales. 5. Macromolécula compuesta por una o varias cadenas polipeptídicas,cada una de las cuales tiene una secuencia característica de aminoácidos, unidos por enlaces peptídicos. 6. Propiedad de la materia de la materia de emitir luz. 7. Sustancia orgánica que se necesita en pequeñas cantidades en la dieta de algunas especies.Generalmente funciona como componente de un coenzima. 8. Unidad de medida Química, utilizada por conveniencia, cuyo valor es de 6,02 EXP23 átomos o moléculas 9. Ribonucleósido 5'-difosfato que actúa como grupo aceptor de fosfato en el ciclo energético celular. 10. Compuesto activo presente en el vino, alabado por sus propiedades benéficas. 11. Elemento número 15 en la tabla periodica 12. Ruptura de un enlace por adición del elemento agua, dando dos o más productos 13. Compuesto específico sobre el que actúa un enzima 14. Proceso en el que se separan componentes en solución, a través de una membranasemipermeable. Sólo los componentes con cierto tamaño molecular pueden pasar de un lado al otro. 15. Elemento químico que necesita un organismo en cantidades mínimas. 16. Enzimas que catalizan la eliminación de pares de átomos de hidrógeno de sus sustratos

Ya comenzamos a trabajar…. Seguimos con algunos defectos…

El 30 de abril se nos viene la gran tocata …. Pronto nuevas charlas…

Y para abril esperamos poder tener nuestra propia