Reactivo de glucosa enzim+ítica

Siemens Healthcare Diagnostics Inc.

© 2012 Siemens Healthcare Diagnostics. Reservados todos los derechos.Siemens Healthcare Diagnostics Inc., Tarrytown, NY 10591-5097 USA10698787_ES Rev. D, 2012-02 1 - Español

Instrucciones de uso2012-02

Glucosa-hexocinasa_3 (GLUH_3)

Resumen del ensayo

Sistema Información nuevaADVIA® 1200 Actualizaciones: Nuevo número de documento; Resumen del

método; Manipulación de las muestras; Correlación del sistema

ADVIA 1650/1800 Actualizaciones: Nuevo número de documento; Resumen del método; Manipulación de las muestras; Correlación del sistema

ADVIA 2400 Actualizaciones: Nuevo número de documento; Resumen del método; Manipulación de las muestras; Correlación del sistema

Elemento DescripciónPrincipio del análisis HexocinasaTipo de muestra Suero, plasma (heparina de litio, EDTA de potasio, fluoruro

de sodio/oxalato de potasio), orina y líquido cefalorraquídeo (LCR) humanos

Estabilidad en el sistema 60 díasTemperatura de conservación de los reactivos

2–8°C

Frecuencia de calibración 60 díasFrecuencia del blanco de reactivo (RBL)

30 días

Tipo de reacción Punto final (EPA)Longitud de onda de la medición

340/410 nm

Normalización Materiales de referencia estándar del NIST 965a Rango analítico Suero/plasma/orina/LCR: 4

(0,2–700 mg/dl–38,9 mmol/l)

Valores esperados Suero/plasma: Adultos: 74(4,1

–106 mg/dl –5,9 mmol/l)

Neonato 1 día: 40(2,2

–60 mg/dl –3,3 mmol/l)

Neonato > 1 día: 50(2,8


Niño: 60(3,3

–100 mg/dl –5,6 mmol/l)


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Uso previsto Para uso diagnóstico in vitro en la determinación cuantitativa de glucosa en suero, líquido cefalorraquídeo (LCR), plasma y orina humanos en instrumentos ADVIA Chemistry Systems. Estas mediciones se utilizan en el diagnóstico y tratamiento de trastornos del metabolismo de los hidratos de carbono, como la diabetes mellitus, la hipoglucemia neonatal, la hipoglucemia idiopática y la sobredosis de insulina.

Resumen y explicaciónEste análisis enzimático se basa en el método de Slein, que utiliza las enzimas hexocinasa y glucosa-6-fosfato-deshidrogenasa1,2.

La glucosa es fosforilada por el trifosfato de adenosina (ATP) en presencia de hexocinasa. La glucosa-6-fosfato que se forma, se oxida en presencia de la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa provocando la reducción del dinucleótido de nicotinamida y adenina oxidado (NAD) en nicotinamida adenina dinucleótido reducida (NADH)1,2. La absorbancia de NADH se mide a 340/410 nm como reacción de punto final.

Principios del procedimiento El análisis ADVIA Chemistry Glucose Hexokinase_3 (GLUH_3) de los sistemas ADVIA Chemistry usa un reactivo de dos componentes. La muestra se añade al reactivo 1, que contiene el tampón, ATP, y NAD. Se anotan las lecturas de absorbancia de la muestra en el reactivo 1 y se utilizan para realizar una corrección por las sustancias interferentes de la muestra. Se añade el reactivo 2, que inicia la conversión de glucosa y el desarrollo de absorbancia a 340/410 nm. La diferencia entre la absorbancia en el reactivo 1 y en el reactivo 2 es proporcional a la concentración de glucosa.

Ecuación de la reacción

Valores esperados Orina: < 0,5(2,78

g/día mmol/día)

LCR: Adultos: 40(2,2

–70 mg/dl–3,9 mmol/l)

Lactante/Niño: 60(3,3


Código del reactivo 74709

Calibrador Siemens Chemistry Calibrator: REF 09784096 (PN T03-1291-62)

Glucosa + ATP G6P + ADP

G6P + NAD+ 6 fosfogluconato + NADH + H+

Elemento Descripción

Hexocinasa


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ReactivosLos reactivos se suministran tal como se indica a continuación. Los componentes incluidos en el envase sólo están disponibles como kit.

Componentes y concentraciones

NOTA: la azida sódica puede reaccionar con las tuberías de cobre y plomo y formar azidas metálicas explosivas. Cuando se eliminen los reactivos, enjuagar con agua abundante para evitar la acumulación de azidas si la eliminación a través de los desagües sanitarios es conforme a la normativa vigente.

Las fichas de datos de seguridad (MSDS/SDS) están disponibles en www.siemens.com/diagnostics.

Para uso diagnóstico in vitro.

Preparación y uso de los reactivos

Los reactivos están listos para su uso. Antes de utilizarlos, girar con suavidad los reactivos para eliminar las burbujas y garantizar su homogeneidad. Si aún quedan burbujas o espuma, aspirarlas del recipiente con una pipeta de transferencia limpia antes de usar los reactivos.

REF (PN) Tamaño del recipiente Símbolo Contenido Cantidad N.º de análisis

05001429 Reactivos Glucose Hexokinase_3

6 x 660 (ADVIA 1650/1800/2400)6 x 470 (ADVIA 1200)

70 ml Reactivo 1 6 x 68 ml

20 ml Reactivo 2 6 x 20 ml

Reactivo Componente Concentración

Reactivo 1 ATPNADAzida sódicaTampón

4 mmol/l3,21 mmol/l0,05%

Reactivo 2 ATPNADHexocinasa (origen microbiano)G6PD (origen microbiano)Azida sódicaTampón

4 mmol/l3,21 mmol/l> 6,25 U/ml> 11,25 U/ml0,05%


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Estabilidad del reactivo en el sistema (OBS)

Los reactivos sin abrir son estables si se almacenan de 2 a 8°C hasta la fecha de caducidad que aparece impresa en la etiqueta del producto en todos los sistemas. No congele los reactivos.

Para obtener más información, consultar la sección Introducción a los métodos de la guía del usuario específica del sistema.

Manipulación de las muestrasSiemens Healthcare Diagnostics ha validado el uso de suero, plasma (heparina de litio, EDTA de potasio y fluoruro de sodio/oxalato de potasio), orina y líquido cefalorraquídeo (LCR) para este análisis.

Si desea más información, consulte la sección Recogida y preparación de las muestras en la Introducción a los métodos de la guía del usuario específica del sistema.

Para ver las instrucciones sobre cómo cargar los reactivos y procesar las muestras, consulte la sección Inicio diario de la guía del usuario específica del sistema.

Material necesario pero no suministradoEn la lista que aparece a continuación figura el material no suministrado que se necesita para este análisis:• Contenedores para muestras• Soluciones del sistema• Calibrador (consulte las REFs en la sección Resumen del método)*• Materiales de control (consulte la sección Control de calidad)*• Adaptadores para los recipientes de reactivo:

• Adaptador de 20 ml (REF 02404085; PN 094-0159-01) para ranura de 40 ml (ADVIA 1200/ADVIA 1800)

• Adaptador de 20 ml (REF 05249323; PN 073-0936-01) para ranura de 70 ml (ADVIA 1200)

• Adaptador de 20 ml (REF 00771668; PN 073-0345-02) para ranura de 70 ml ADVIA 1650/ADVIA 2400)

*Para obtener información sobre la conservación y la estabilidad, consulte los prospectos.

Sistema Estabilidad

ADVIA 1200 60 días

ADVIA 1650/1800 60 días

ADVIA 2400 60 días


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CalibraciónConsultar en el prospecto que acompaña al Siemens Chemistry Calibrator (REF 09784096; PN T03-1291-62) las instrucciones sobre la manipulación y los valores. Utilice el valor específico del sistema (SSV) para glucosa-hexocinasa del prospecto. Para obtener información sobre la configuración y la utilización, consulte la sección Descripción de la calibración en la guía del usuario específica del sistema.

Frecuencia de calibración

Lleve a cabo una calibración al implementar este análisis en el sistema. La calibración deberá volver a realizarse cuando ocurra lo siguiente:• Cuando cambie el número de lote del reactivo.• Tras la sustitución de componentes ópticos o hidráulicos fundamentales.• Cuando lo indiquen los procedimientos de control de calidad.

Siemens ha validado la estabilidad de calibración para este análisis como se muestra en la tabla siguiente:

Siemens recomienda calibrar los cartuchos de reactivos nuevos si el cartucho de reactivo anterior se calibró en cualquier momento durante su periodo de estabilidad en el sistema con un cartucho que no fuera nuevo.

Los programas y procedimientos de control de calidad propios del laboratorio pueden requerir calibraciones más frecuentes.

Frecuencia del blanco de reactivo (RBL)

El blanco de reactivo (RBL) se mide en el momento de la calibración del método y cada 30 días. Si en el cartucho de reactivos anterior se procesó RBL usado, se deberá realizar un RBL con el nuevo cartucho de reactivos.

Sistema Estabilidad mínima de calibración*

ADVIA 1200 60 días

ADVIA 1650/1800 60 días

ADVIA 2400 60 días

*o bien cuando lo indiquen los datos del control de calidad


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Control de calidadSiga las reglamentaciones gubernamentales o los requisitos de acreditación para conocer la frecuencia de control de calidad.

Siemens recomienda el uso de materiales de control de calidad comercializados con al menos 2 niveles (bajo y alto). Se consigue un nivel de rendimiento satisfactorio cuando los valores de analitos obtenidos se encuentran dentro del Rango de control aceptable para el sistema o cuando se encuentran dentro de su rango, determinado mediante un sistema interno adecuado de control de calidad del laboratorio.

La frecuencia real de controles en un laboratorio se basa en diversos factores, tales como la carga de trabajo, la experiencia con el sistema y la normativa aplicable. Cada laboratorio deberá evaluar los controles según la frecuencia establecida en sus propias directrices internas.

Cuando realice el análisis, analice al menos 2 niveles de controles al día.

También deberán analizarse los controles en las situaciones siguientes:• Siempre que se use un nuevo lote de reactivos.• Después de realizar cualquier actividad de mantenimiento, limpieza o resolución de

problemas del sistema.• Después de efectuar una nueva calibración.

Para obtener más información, consultar la sección Descripción del control de calidad en la guía del usuario específica del sistema.

Limitaciones del procedimiento Se han identificado diversas sustancias que causan cambios fisiológicos en las concentraciones de analitos séricos, plasmáticos, urinarios o en el LCR. Un comentario extenso de éstas y otras posibles sustancias interferentes, de sus concentraciones séricas, plasmáticas, urinarias o en el LCR y de su posible implicación fisiológica excede el objetivo de este documento. Consulte las referencias bibliográficas incluidas para obtener detalles específicos sobre las posibles sustancias interferentes conocidas3.

Como en el caso de cualquier otra reacción química, será preciso estar atento al posible efecto sobre los resultados de interferencias desconocidas producidas por medicamentos o sustancias endógenas. El laboratorio y el médico deben evaluar todos los resultados de pacientes en función del estado general del paciente.


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Interferencias En la ventana de parámetros analíticos (suero) es posible configurar el sistema ADVIA Chemistry para indicar distintos niveles para las muestras lipémicas (turbias), hemolizadas y con ictericia que se procesen en el sistema.

Al analizar las posibles sustancias interferentes que aparecen a continuación, Siemens obtuvo los resultados siguientes:

Todos los sistemas ADVIA Chemistry: Suero

Sustancia interferenteConcentración de la

sustancia interferente Concentración de

glucosa Interferencia*

Bilirrubina (conjugada)

30(514

mg/dlµmol/l)

54(3,0

mg/dlmmol/l)

INS

Bilirrubina (no conjugada)

30(514

mg/dlµmol/l)

54(3,0

mg/dlmmol/l)

INS

Hemólisis(hemoglobina)

1000(10,0

mg/dlg/l)

52(2,9

mg/dlmmol/l)

INS

Lipemia (por Intralipid)

1000(11,3

mg/dlmmol/l)**

53(2,9

mg/dlmmol/l)

INS

* INS = Interferencia no significativa. Se considera interferencia significativa un efecto porcentual ≥ 10%.

** como trioleína

Todos los sistemas ADVIA Chemistry: Orina

Sustancia interferenteConcentración de la

sustancia interferente Concentración de

glucosa Interferencia*

Ácido ascórbico 200(11,4

mg/dlmmol/l)

33(1,8

mg/dlmmol/l)

INS

Salicilato (sal Na) 50(3,6

mg/dlmmol/l)

33(1,8

mg/dlmmol/l)

INS

Cafeína 50(2,6

mg/dlmmol/l)

37(2,0

mg/dlmmol/l)

INS

Creatinina 500(44,2

mg/dl mmol/l)

38(2,1

mg/dlmmol/l)

INS

Urea 500(83,3

mg/dl mmol/l)

37(2,1

mg/dlmmol/l)

INS

* INS = Interferencia no significativa. Se considera interferencia significativa un efecto porcentual ≥ 10%.


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Características de la prueba

Precisión

Cada muestra se analizó 2 veces por serie, con 2 series diarias, durante al menos 10 días. Las estimaciones de precisión se calcularon de conformidad con el documento EP5-A2 del CLSI, Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline4.

Los datos que aparecen en esta sección son representativos del rendimiento típico de los sistemas ADVIA Chemistry. Los datos de cada laboratorio pueden diferir de estos valores.

Factor de conversión: mg/dl x 0,0555 = mmol/l

ADVIA 1200Intraserie Total

Tipo de muestra Nivel DE CV (%) DE CV (%)

Unidades comunes (mg/dl)

Suero 52 0,6 1,1 1,0 1,9

Suero 90 1,0 1,1 1,3 1,5

Suero 306 3,5 1,1 4,5 1,5

Orina 50 0,7 1,3 1,2 2,4

Orina 309 2,8 0,9 8,5 2,7

LCR* 40 0,3 0,8 0,3 0,8

LCR* 106 0,4 0,4 1,0 1,0

Unidades del SI (mmol/l)

Suero 2,9 0,03 1,1 0,06 1,9

Suero 5,0 0,06 1,1 0,07 1,5

Suero 17,0 0,19 1,1 0,25 1,5

Orina 2,8 0,04 1,3 0,07 2,4

Orina 17,2 0,16 0,9 0,47 2,7

LCR* 2,2 0,02 0,8 0,02 0,8

LCR* 5,9 0,02 0,4 0,06 1,0

* 5 días


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ADVIA 1650/1800Intraserie Total



Suero 51 0,2 0,4 0,5 0,9

Suero 87 0,4 0,5 0,7 0,8

Suero 297 1,4 0,5 2,0 0,7

Orina 49 0,3 0,6 0,5 1,1

Orina 301 1,3 0,4 5,6 1,9

LCR* 56 0,2 0,4 0,5 1,0

LCR* 97 0,4 0,3 0,8 0,8


Suero 2,8 0,01 0,4 0,03 0,9

Suero 4,8 0,02 0,5 0,04 0,8

Suero 16,5 0,08 0,5 0,11 0,7

Orina 2,7 0,02 0,6 0,03 1,1

Orina 16,7 0,07 0,4 0,31 1,9

LCR* 3,1 0,01 0,4 0,03 1,0

LCR* 5,4 0,02 0,3 0,04 0,8

* 10 días




Suero 51 0,5 1,1 0,9 1,8

Suero 88 0,6 0,6 1,0 1,2

Suero 299 2,3 0,8 4,3 1,4

Orina 49 0,6 1,3 0,9 1,9

Orina 301 2,6 0,9 7,1 2,4

LCR* 40 0,1 0,3 0,2 0,6

LCR* 105 0,5 0,5 0,7 0,7


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Rango analítico

El rango analítico del análisis ADVIA Chemistry GLUH_3 es lineal de 4 a 700 mg/dl (de 0,2 a 38,9 mmol/l) para suero, plasma, orina y LCR.

Siemens ha validado una condición de reanálisis automático para este análisis que aumenta los rangos reportados hasta 2100 mg/dl (116,6 mmol/l) en todos los sistemas ADVIA Chemistry.

Valores esperados

Los rangos terapéuticos para este ensayo figuran en las tablas siguientes5:

Siemens proporciona esta información como referencia. Cada laboratorio deberá establecer su propio rango normal. Los valores de los rangos normales y los valores de los rangos anormales pueden introducirse en la ventana Parámetros analíticos (Bioquímica).


Suero 2,8 0,03 1,1 0,05 1,8

Suero 4,9 0,03 0,6 0,06 1,2

Suero 16,6 0,13 0,8 0,24 1,4

Orina 2,7 0,03 1,3 0,05 1,9

Orina 16,7 0,14 0,9 0,39 2,4

LCR* 2,2 0,01 0,3 0,01 0,6

LCR* 5,8 0,03 0,5 0,04 0,7

* 4 días

Tipo de muestra Intervalo de referencia

Suero/plasma Adultos: 74(4,1

–106 mg/dl –5,9 mmol/l)

Neonato 1 día: 40(2,2


Neonato > 1 día: 50(2,8


Niño: 60(3,3

–100 mg/dl –5,6 mmol/l)

Orina < 0,5(2,78

g/día mmol/día)

LCR Adultos: 40(2,2


Lactante/Niño: 60(3,3





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Correlación del sistema

Se comparó el rendimiento del análisis ADVIA Chemistry GLUH_3 (y) con el rendimiento del análisis de comparación en el sistema indicado (x).

ADVIA 1200

Tipo de muestra Método de comparación (x) N

Ecuación de regresión Sy.x r

Rango de las muestras

Suero ADVIA 1200 GLUH 56 y = 1,014x - 0,1y = 1,014x - 0,00

2,70,15

0,9990,999

5–0,3–

671 mg/dl37,3 mmol/l

Suero ADVIA 1650/1800 GLUH_3

56 y = 1,013x - 0,3y = 1,013x - 0,02

7,40,41

0,9990,999

4–0,2–


Plasma* ADVIA 1200 (suero) GLUH_3

56 y = 1,000x + 3,5y = 1,000x + 0,20

4,00,22

0,9990,999

4–0,2–


Plasma** ADVIA 1200 (suero) GLUH_3

55 y = 1,003x - 1,0y = 1,003x - 0,05

4,10,23

0,9990,999

8–0,4–


Plasma† ADVIA 1200 (suero) GLUH_3

56 y = 0,994x + 2,7y = 0,994x + 0,15

4,30,24

0,9990,999

10–0,6–


Orina ADVIA 1200 GLUH 47 y = 1,007x + 0,9y = 1,007x + 0,05

3,50,19

0,9990,999

4–0,2–


LCR ADVIA 1200 GLUH 49 y = 1,009x - 0,1y = 1,009x - 0,00

0,40,02

0,9990,999

50–2,8–

102 mg/dl5,7 mmol/l

* Heparina de litio (comparación de matrices)** EDTA potásico (comparación de matrices)† Fluoruro de sodio/oxalato de potasio (comparación de matrices)

ADVIA 1650/1800




Suero ADVIA 1650/1800 GLUH 99 y = 1,001x + 0,3y = 1,001x + 0,02

1,30,07

1,0001,000

5–0,3–


Plasma* ADVIA 1650/1800 GLUH 88 y = 1,001x + 0,2y = 1,001x + 0,01

1,10,06

1,0001,000

5–0,3–

686 mg/dl 38,1 mmol/l

Plasma** ADVIA 1650/1800 GLUH 87 y = 1,002x - 0,0y = 1,002x - 0,00

1,00,06

1,0001,000

6–0,3–


Plasma† ADVIA 1650/1800 (suero) GLUH_3

56 y = 1,003x + 1,5y = 1,003x + 0,08

4,50,25

0,9990,999

11–0,6–


Orina ADVIA 1650/1800 GLUH 51 y = 0,989x - 0,3y = 0,989x - 0,02

0,90,05

1,0001,000

4–0,2–


LCR ADVIA 1650/1800 GLUH 113 y = 1,005x - 0,1y = 1,005x - 0,01

0,90,05

1,0001,000

20–2,7–




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NormalizaciónEl ensayo ADVIA Chemistry GLUH_3 es conforme a los materiales de referencia estándar 965a del National Institute of Standards and Technology (NIST). Los valores asignados al calibrador para bioquímica de Siemens son conformes a esta normalización.

Referencias 1. Bergmeyer HU, ed. Slein MW. Methods of Enzymatic Analysis. New York, NY:

Academic Press; 1974:1196-1201.

2. Slein MW, Cori GT, Cori CF. A comparative study of hexokinase from yeast and animal tissues. J Biol Chem. 1950;186:763-780.

3. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 5th ed. Washington: AACC Press (2000).

4. Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline - Second Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2004. NCCLS Document EP5-A2.

5. Wu AHB. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests. 4th ed. St. Louis, MO: WB Saunders Company; 2006:444–450.

ADVIA 2400




Suero ADVIA 2400 GLUH 56 y = 1,006x - 0,2y = 1,006x - 0,01

1,10,06

1,0001,000

5–0,3–


Suero ADVIA 1650/1800 GLUH_3

56 y = 0,998x - 0,1y = 0,998x - 0,00

5,70,32

0,9990,999

4–0,2–


Plasma* ADVIA 2400 (suero) GLUH_3

56 y = 1,011x + 2,7y = 1,011x + 0,15

6,90,38

0,9990,999

4–0,2–


Plasma** ADVIA 2400 (suero) GLUH_3

55 y = 1,010x - 0,7y = 1,010x - 0,04

6,40,36

0,9990,999

8–0,4–


Plasma† ADVIA 2400 (suero) GLUH_3

56 y = 1,004x + 1,8y = 1,004x + 0,10

5,50,31

0,9990,999

10–0,6–


Orina ADVIA 2400 GLUH 44 y = 0,997x - 0,1y = 0,997x - 0,00

1,10,06

1,0001,000

4–0,2–


LCR ADVIA 2400 GLUH 49 y = 1,003x - 0,2y = 1,003x - 0,01

0,20,01

0,9990,999

49–2,7–

101 mg/dl5,6 mmol/l



10698787_ES Rev. D, 2012-02 13 - Español

Asistencia técnicaPara obtener servicio al cliente, póngase en contacto con el proveedor local de servicio técnico.

www.siemens.com/diagnostics

Marcas comercialesADVIA es una marca comercial de Siemens Healthcare Diagnostics.Intralipid es una marca comercial de Fresenius Kabi AB.


10698787_ES Rev. D, 2012-02 14 - Español

Descripción de los SímbolosLos siguientes símbolos pueden aparecer en la etiqueta del producto:

Símbolo Definición Símbolo Definición

Dispositivo médico para diagnóstico in vitro Número de referencia

Fabricante legal Representante autorizado en la Unión Europea

Símbolo de la CEMarca de la CE con número de identificación del organismo notificado

Consulte las instrucciones de uso Riesgo biológico

No congelar (> 0°C) Limitación de la temperatura (2–8°C)

Temperatura mínima (≥ 2°C) Limitación superior de la temperatura (≤ -10°C)

Mantener protegido de la luz solar y del calor Arriba

Fecha de caducidad Contiene material para (n) pruebas

Código de lote Rev. Revisión

YYYY-MM-DD Formato de fecha (año-mes-día) Imprimido con tinta de soja

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