Republica Bolivariana de Venezuela

Ministerio del Poder Popular para la educación Universitaria

Universidad Central de Venezuela

Facultad de Ciencias

Escuela de Biología

Informe

Unidad I: Transferencia de información genética en eucariotes

Introducción

La mosca de la fruta Drosophila melanogaster presenta una serie de características que la

hacen un material biológico ideal en modelos experimentales, posee un ciclo de vida muy

corto, distinción clara entre cada una de sus fases de desarrollo, gran cantidad de

descendientes, su mantenimiento requiere poco espacio y es de costo reducido. Existen

diferencias entre los machos y hembras de esta especie, la punta del abdomen es elongada

en la hembra y redondeada en el macho, estos últimos también poseen los llamados peines

sexuales, un cepillo de fuertes setas negras en la articulación basal del tarso del primer par

de patas. Otra observación importante es tomar en cuenta la pigmentación abdominal como

criterio de diferenciación entre machos y hembras, pero para esto hay que tener cuidado

debido a que en ejemplares que no están totalmente desarrolladas, esta pigmentación no es

total, por lo cual puede haber confusiones.

Los características que permiten a D. melanogaster como material biológico adecuado para

demostrar algunos principios genéticos en eucariotes son: el bajo número de cromosomas

que posee, cuatro en total; la disponibilidad de una gran variedad de cepas con rasgos

mutados de fácil reconocimiento cuya ubicación cromosómica es conocida y la facilidad de

su crecimiento sobre medios de cultivo sencillos, pudiéndose obtener proles abundantes en

aproximadamente 9 a 10 días.

La condición diploide de estos organismos eucarióticos, se debe a que sus genes existen en

pares denominados alelos, y cada alelo se encuentra en un locus determinado sobre cada

cromosoma homólogo. Cuando la expresión de ambos alelos es idéntica: (AA o aa), se dice

que el organismo es homócigo para ese par de genes. Un par de genes alelos es heterócigo

cuando la expresión de cada gen del par es diferente (Aa). En el caso de un individuo

homocigoto, de genotipo AA o aa, la expresión de ambos alelos idénticos da lugar a un

fenotipo particular, fenotipo A, o fenotipo a, respectivamente. Si la relación entre los

alelos A y a es de dominancia completa de A sobre a, el individuo heterocigoto Aa es de

fenotipo dominante: A, y es fenotípicamente indiferenciable del homócigo AA. Si la

relación entre el par alélico no es de dominancia completa, en los heterocigotos Aa el

fenotipo puede ser diferente a A y a a, o intermedio entre A y a, y estas relaciones alélicas

se denominan de dominancia incompleta, y codominancia, respectivamente.

Estos conceptos anteriores están relacionados con algunos principios genéticos que se

desarrollaran mediante diseños experimentales acerca de la herencia independiente y

herencia ligada al sexo. El cruce monohíbrido es aquel que se realiza entre dos variedades

que difieren en un sólo rasgo: por ejemplo AA x aa. El fenotipo de la primera generación

F1 presentará el rasgo dominante A, y el genotipo será Aa. Al cruzar la generación F1 entre

sí, tanto los machos como las hembras producirán dos tipos de gametos (n): ½ A y ½ a. El

cruce al azar de estos gametos durante la fecundación, originará una generación F2

integrada por 3/4 de individuos de fenotipo dominante A (AA, o Aa) y 1/4 de individuos de

fenotipo recesivo a (aa).

Por otro lado un cruce dihíbrido es el que se establece entre individuos que difieren en dos

caracteres, por ejemplo AA,bb x aa,BB. Los híbridos de la generación F1 presentan el

fenotipo dominante (Aa, Bb) y en la generación F2, producto del cruce F1 por F1, se ve

que cada rasgo se segrega individualmente. Si se analiza la segregación de ambos rasgos

conjuntamente se observa que un par alélico segrega independientemente del otro, lo cual

se conoce como Principio de Segregación Independiente o Segunda Ley de Mendel.

También en este caso las frecuencias genotípicas son consecuencia de las frecuencias

características de la formación de gametos. Los híbridos de la generación F1 forman cuatro

tipos de gametos: A,B; A,b; a,B y a,b, todos con igual probabilidad (0,25 o ¼). Las

frecuencias fenotípicas en la F2 dependerán del tipo de interacción alélica que exista entre

cada uno de los pares alélicos considerados. Si en ambos es de dominancia completa, la

proporción fenotipica en la F2 será: 9/16 Ab, 3/16Ab, 3/16aB, 1/16ab, siempre y cuando

no haya influencia de factores ambientales o se den efectos epistáticos entre los rasgos

involucrados. En conclusión, cuando 2 o más pares de alelos se encuentran ubicados en

cromosomas diferentes, cada uno de ellos segregan independientemente de los otros.

Cuando los rasgos considerados en un cruce están ubicados sobre cromosomas

autosomales, la combinación particular en que se encuentren en los individuos que inician

el cruce, por ejemplo que las hembras sean AA,BB y los machos aa,bb, o que sean aa,BB

y AA,bb, etc., no influirá en la forma como ellos se transmiten de una generación a otra y

los resultados serán similares. La distribución de los fenotipos entre machos y hembras de

la generación F2 será equitativa, tanto si ambos caracteres dominantes son aportados por

uno de los progenitores, como si cada progenitor aporta solo uno de los caracteres

dominantes.

En el caso de caracteres ubicados sobre cromosomas sexuales, el principio antes

enunciado sigue siendo válido con algunas consideraciones. Se ha dicho que las hembras de

D. melanogaster poseen un par cromosómico sexual homólogo XX, y los machos un par

heterólogo XY. El cromosoma Y porta pocos genes y casi todos relacionados con

funciones que determinan la fecundidad del macho. Por otra parte, los cromosomas

sexuales X, contienen numerosos genes relacionados con distintos rasgos. Los alelos

recesivos y ligados al sexo se expresan en hembras homócigas, y en machos debido a su

carácter hemícigo (XY). Los caracteres ligados al sexo siguen una herencia cruzada, los

machos transmiten sus caracteres ligados al cromosoma X a sus nietos F2 a través de sus

hijas F1, nunca a un hijo F1, ni mediante él. Esto es debido a que sólo las hijas F1 reciben

el único cromosoma X del padre, y el otro cromosoma X de la madre. Los machos reciben

el cromosoma Y del padre y el X de la madre. Por tanto, en los cruces de caracteres ligados

al sexo no es indiferente el sexo del individuo que aporta el o los rasgos ligados al sexo y

dependiendo de ello en la generación F2 se observarán diferencias cualitativas y

cuantitativas en la distribución de fenotipos entre machos y hembras.

Otra interacción génica ocurre cuando una característica está determinada por dos o más

genes diferentes, bajo esta condición puede aparecer un fenotipo completamente nuevo.

Además de producir proporciones dihibridas modificadas, en D. melanogaster estas

interacciones por ejemplo en el ojo de tipo silvestre de color rojo ladrillo, cuando se cruzan

dos mutantes autosomicos recesivos, puede resultar en la F2 con la aparición de un nuevo

fenotipo.

En las siguientes tablas se describe los loci de algunos marcadores genéticos para nuestros

experimentos de D. melanogaster. Todas las cepas, normal y mutantes, que serán utilizadas

en los trabajos prácticos se encontraron disponibles en el cepario bajo la forma de cepas

puras, homócigas. (Laboratorio de Genética General, Guía de prácticas, 2008)

Cromosoma I:

Locus Símbolo Mutación Fenotipo silvestre

1.5 w: white (*) ojos de color blanco ojos de color rojo

() El locus correspondiente a la mutación "white" constituye lo que se denomina un

SISTEMA DE ALELOS MULTIPLES. Este locus puede existir bajo diferentes versiones

que difieren unas de otras en la tonalidad del color del ojo. Aca trabajaremos con la

expresión wa (apricot) y w (white, blanco).

Cromosoma II

locus Símbolo Mutación Fenotipo silvestre

13.1 dp: dumpy alas recortadas en el borde

distal

alas largas

57.5 cn: cinabar ojos de color rojo brillante ojos de color rojo

Los cromosomas politenos fueron observadas por E. G. Balbiani en 1881, estos se

encuentran en células interfásicas en distintos tejidos de las larvas de algunas moscas

(glándulas salivales, tubo digestivo, recto y tubos excretores de Malpighi). Las estructuras

son visibles bajo el microscopio óptico y es caracterizada por la presencia de una serie de

líneas de bandas e interbandas alternantes, estas bandas también se denomina cromómeros.

A nivel molecular estas estructuras representan homólogos apareados y su DNA sufre

varias rondas de replicación pero sin que la cadena se separe y sin que haya división del

citoplasma. En su estructura también están presentes regiones llamas Puffs, que son zonas

donde se desdobla el DNA y ponen en manifestó visible la actividad génica,

principalmente la transcripción que da lugar a RNA.

El estudio de los pigmentos oculares presentes en D. melanogaster se basa en las

diferencias bioquímicas existentes entre individuos heterócigos y homócigos cuyas

características fenotípicas pueden ser similares. Estas características varían dependiendo de

las interacciones alelicas en condición heterócigas, a este nivel de observación se pone en

evidencia la actividad o la ausencia de actividad de un gen recesivo. En D. melanogaster

silvestre, la pigmentación de los ojos se debe a la presencia de dos tipos de pigmentos:

pteridinas y ommocromos; los primeros son compuestos de color brillante que fluorescen

y emiten una luz de color característico cuando se observan bajo luz UV. Los ommocromos

son de color marrón y no fluorescen a la luz UV

Métodos

Los códigos y abreviaturas de los marcadores genéticos trabajados en nuestros

cruces de diferentes cepas de D. melanogaster para el caso I y II respectivamente,

corresponden a la nomenclatura utilizada dentro de Laboratorio de Genética General,

Guía de prácticas (2008) de la Unidad de Genética de la Facultad de Ciencias, Universidad

Central de Venezuela. La manipulación de las moscas D. melanogaster sin

narcotizar/narcotizadas, al igual que las condiciones de cultivo en laboratorio también

siguen lo recomendado en esta publicación. Es muy importante resaltar que para los inicios

de cada cruce se utilizaron solo hembras vírgenes y se siguieron los siguientes protocolos

de cruce:

Caso I: Segregación monohibrida autosomal.

Cromosoma II. Locus (13.1). dumpy (dp): alas recortadas en el borde distal (mutación);

alas largas (fenotipo silvestre: +). Mutación autosomal.

Caso II: Herencia ligada al sexo y segregación dihibrida. Aparición de un nuevo

fenotipo.

Cromosoma II. Locus (57.5). cinabar (cn). Ojos de color rojo brillante (mutación); ojos de

color rojo (Fenotipo silvestre: +). Mutación autosomal.

Cromosoma I. Locus (1.5). white apricot (wa). Ojos de color blanco (mutación); ojos de

color rojo (Fenotipo silvestre). Mutación ligada al sexo.

Cruces a desarrollar

Caso I: Segregación

monohibrida autosomal.

Primer cruce (PA X PB):

dpdp (♀) x ++ (♂).

Segundo cruce (F1xF1):

dp+ (♀) x dp+ (♂).

Caso II: Herencia ligada al

sexo y segregación

dihibrida. Aparición de un

nuevo fenotipo

Primer cruce (PA X PB):

wawacn+cn+ (♀) x

wa+Γcncn (♂).

Segundo cruce (F1 X F1):

wawa+cn+cn (♀) x

waΓcn+cn (♂).

Para demostrar la distribución de la información genética con padres de diferente

genotipo, se utilizaron hembras inicialmente vírgenes de una cepa A (dpdp y wawacn+cn+

para el caso I y II respectivamente) y machos de una cepa B (++ y wa+Γcncn para el caso I

y II respectivamente), que fueron depositados en un frasco que contenía medio de cultivo

fresco para su desarrollo. Al cabo de una semana se presentan larvas dentro de cada medio

de cultivo y en este momento se retiraron las cepas parentales del medio para que no se

crucen con la generación F1 que comenzaría a nacer al décimo día de iniciar el cruce. Para

obtener la F2 se cruzaron las generaciones F1 entre sí. Se seleccionaron parejas

respectivamente de los frascos en cuestión y se introdujeron en un frasco de cultico nuevo

debidamente rotulado con los datos pertinentes. Una semana después se extrajeron estas

parejas F1 del frasco para que no se crucen con la generación F2. La generación F2

comienza a nacer a los 10 días aproximadamente, donde se inicia el contaje y

observaciones de las proles. Se cosechan las moscas de F2 mediante narcosis y se separan

por sus características de sexo y/o fenotípicas, se anotaron los resultados y finalizamos con

los individuos descartados luego en la morgue.

Análisis estadístico

Con el objetivo de demostrar las proporciones mendelianas monohibridas (3:1) para el

caso I y dihibridas (2:6:2:6) para el caso II, se trabajo bajo los siguientes supuestos: Cada

alelo es o dominante o recesivo; se produce la segregación; se produce la transmisión

independiente; y la fecundación es al azar. Los tres últimos están sujetos al azar y por ende

se producen fluctuaciones aleatorias (Klug, W. y Cummings, M., 1999). El impacto de las

desviaciones al azar sobre el resultado final se disminuye con una cantidad de muestras

grande.

Para el caso I:

Hipótesis nula: se asume la proporción mendeliana (3:1) y la diferencia aparente entre los

datos observados y los esperados se puede atribuir únicamente al azar.

Para el caso II:

Hipótesis nula: se asume las proporciones mendelianas (9:3:3:1) y la diferencia aparente

entre los datos observados y los esperados se puede atribuir únicamente al azar.

Para ambos casos se rechaza la hipótesis nula si la desviación observada respecto de la

esperada no es atribuible solo al azar. Si la hipótesis nula no se rechaza, las desviaciones

que se observan pueden atribuirse al azar.

El análisis estadístico de Ji-cuadrado es la prueba más simple para comprobar la bondad del

ajuste de la hipótesis nula, este evalúa si los datos observados están de acuerdo o difieren

de los datos esperados. Esta prueba tiene en cuenta las desviaciones observadas de cada

componente de una proporción esperada, asi como el tamaño de la muestra, y las reduce a

un único valor. Este valor (X2) se utiliza luego para estimar cuan frecuentemente la

desviación observada se puede esperar solo se dé estrictamente como consecuencia del

azar.

Para el estudio de los cromosomas politenos se realizaron extracciones de las glándulas

salivales de larvas instar III de la especie Drosophila speck según los procedimientos

señalados en Laboratorio de Genética General, Guía de prácticas (2008).

En el estudio de pigmentos oculares asociados a la especie D. melanogaster se utilizo el

método de cromatografía sobre papel con solvente orgánicos, observando el patrón de

pteridinas en cuerpo y cabeza presentes en las diferentes cepas. Las diferentes cepas

estudiadas fueron: +; w; we; wa; cl+. Se rebeló el resultado de la corrida en un visualizador

con luz UV. Todo el procedimiento y nomenclatura siguen fielmente lo recomendado por

Laboratorio de Genética General, Guía de prácticas (2008).

Resultados

Durante el transcurso de 5 semanas de cultivos y desarrollo de los distintos cruces

experimentales de D. melanogaster acá estudiados, se resumen las siguientes tablas de

trabajo que contiene los valores cuantificados de fenotipo obtenidos para la F1 y F2 de cada

caso particular.

Caso I: Segregación monohibrida autosomal.

Cruce teórico:

Parentales: dpdp (♀) x ++ (♂); Gametos: 1 ♀ dp, 1 ♂ +.

F1: 100% dp+ (Fenotipo silvestre heterocigoto).

Parentales F1 x F1: dp+ (♀) x dp+ (♂); Gametos: (½ dp, ½ +) x (½ dp, ½ +)

F2: ¼ dpdp; ¼ ++; ½ dp+

Cruce practico:

A partir del cruce inicial de 6 ♀ dpdp y 10 ♂ ++, se obtuvieron los siguientes datos

experimentales.

Caso I F1: 100% dp+ F2: ¼ dpdp ; ¾ (dp+; ++)

Machos 17 5 18

Hembras 21 4 21

Total 38 9 39

Las representaciones fenotípicas resultantes del cruce parental se presentaron con

individuos de fenotipo silvestre, no está demás resaltar el hecho de que estos individuos son

100% heterócigos, es decir, presentan el genotipo dp+. (Figura 1)

Figura 1: Hembra heteróciga (dp+) de la F1 con fenotipo silvestre de D. melanogaster

resultante del cruce parental.

Para obtener la F2 se cruzo la F1 X F1 entre sí. Se realizo el contaje y observación de la

generación F2, cosechando las moscas F2 mediante narcosis y se analizan bajo la lupa

(Figura 2). Se anotaron los resultados y posteriormente se descartaron en la morgue.

Figura 2: Macho recesivo (dpdp) de D. melanogaster perteneciente a la F2 con

fenotipo mutante alas dumpy (dp).

Análisis estadístico:

Caso I: Segregación monohibrida autosomal.

Proporciones

esperadas

Observado

(o)

Esperado

(e)

Desviación

(o-e) Desviacion

2 d

2/e

¾ 39 (3/4)(48)=36 (39-36)=3 (3)2=9 9/39=0.23

¼ 9 (1/4)(48)=12 (9-12)=(-3) (-3)2=9 9/9=1

Total= 48 X2=1.23

P=3,8415

Grados de libertad (n-1) = 1 con n=2 y P para 0.05 o 5%, P = 3,8415 > X2= 1,23 por lo

tanto no se rechaza Ho ya que la desviación observada no es estadísticamente significativa.

Caso II: Herencia ligada al sexo y segregación dihibrida. Aparición de un nuevo

fenotipo.

Cruce teórico:

Parentales: wawacn+cn+ (♀) x wa+Γcncn (♂); Gametos: (½ wawa+, ½ waΓ) x (1 cn+cn)

F1: ♀ wawa+cncn+; ♂ waΓcn+cn

Cruce experimental:

A partir de cruce inicial de 5 ♀ wawacn+cn+ y 18 ♂ wa+Γcncn, se obtuvieron los

siguientes datos experimentales.

Caso II F1: ½wawa+cn+cn ; ½ waΓcn+cn F2: wa+,cn+ ; wa+,cn ; wa,cn+ ; wa,cn

Machos 0 35 18 4 21 5

Hembras 45 0 20 4 19 4

Total 45 35 38 8 40 9

Las distintas expresiones fenotípicas observadas durante este cruce se muestran en la

siguiente figura. Arriba a la izquierda (Ojos cinabar : wa+cn ), al centro a la derecha (Ojos

White apricot) y abajo a la derecha (Ojos con nuevo fenotipo: wacn )

Análisis estadístico

Caso II: Herencia ligada al sexo y segregación dihibrida. Aparición de un nuevo

fenotipo.

Proporciones

esperadas

Observado

(o)

Esperado

(e)

Desviación

(o-e) Desviacion

2 d

2/e

3/16 18 (3/16)(95)=17.81 (18-17.81)=0.19 (0.19)2=0.04

0.04/17.81=2.23x10-

3

3/16 20 (3/16)(95)=17.81 (20-17.81)=2.19 (2.19)2=4.8 4.8/17.81=0.27

1/16 4 (1/16)(95)=5.94 (4-5.94)=(-1.94) (-1.94)2=3.8 3.8/5.94=0.64

1/16 4 (1/16)(95)=5.94 (4-5.94)=(-1.94) (-1.94)2=3.8 3.8/5.94=0.64

3/16 21 (3/16)(95)=17.81 (21-17.81)=3.19 (3.19)2=10.2 10.2/17.81=0.57

3/16 19 (3/16)(95)=17.81 (19-17.81)=1.19 (1.19)2=1.4 1.4/17.81=0.08

1/16 5 (1/16)(95)=5.94 (5-5.94)=(-0.94) (-0.94)2=0.9 0.9/5.94=0.15

1/16 4 (1/16)(95)=5.94 (4-5.94)=(-1.94) (-1.94)2=3.8 3.8/5.94=0.64

Total=95 X2=2.99

P=14.0671

Grados de libertad (n-1) = 6 con n=7 y P para 0.05 o 5%, P = 14.0671 > X 2= 2.99 por lo

tanto no se rechaza Ho ya que en los datos no se encuentran diferencias estadísticamente

significativas.

Cromosomas politenos.

Las dimensiones de un cromosoma politeno son 150 veces mayores que un cromosoma

mitótico. A partir del extracto de gandulas salivales de larvas de D. speck se logro observar

mediante un microscopio óptico estas unidades genéticas. Según la literatura se observo las

zonas de desdoblamiento locales de DNA, llamadas puff. Se observo la zona fusión de

centromeros, llamada cromocentro, este tenía la apariencia de una masa central densa de

donde partían varios cordones equivalentes a los cromosomas. (Figura 4: Características al

microscopio)

FIGURA 4: Cromosoma politeno donde se aprecia el cromocentro y los cordones de los

distintos cromosomas, también las bandas y las interbandas no tan detalladas.

Cromatografía de pigmentos oculares

En D. melanogaster la coloración de los ojos se debe principalmente a la presencia de dos

tipos de pigmentos: pteridinas y onmocromos, los primeros son compuestos de colores

brillantes fluorescente y emiten luz de color característico cuando se observa bajo luz UV.

Con el método de cromatografía sobre papel y utilizando un sistema de solventes orgánicos

se logro separar en manchas diferentes identificables, los pigmentos de pteridina de

diferentes cepas de D. melanogaster. Al analizar el resultado de la corrida de las muestras

sembradas en la cromatografía de papel sobre luz UV, se observaron las manchas de

corrida de las diferentes muestras para cabeza y cuerpo de las cepas a estudiar. Se observo

que la distancia de corrida de las manchas para las distintas sepas sembradas era variante,

esto ocurrió en las siembras de cabeza y cuerpo respectivamente.

FIGURA 5: Cromatografía de cabeza de pigmentos oculares de D. melanogaster bajo la

cámara de luz ultravioleta.

FIGURA 6: Cromatografía en papel de pigmentos de cuerpo de D. melanogaster

observada bajo de la cámara de luz UV.

Discusión

Se realizaron cruces experimentales con la especie D. melanogaster cuya metodologia y

resultados fueron descritos anteriormente, en resumen nos referiremos a Caso I y Caso II

respectivamente. Para ambos, se realizo un análisis estadístico (prueba de Ji-cuadrado)

requerido para verificar si los resultados obtenidos se ajustaban a las proporciones teóricas

mendelianas. Para el caso I que corresponde a un cruce monohibrido autosomal, se

obtuvieron las frecuencias fenotípicas esperadas 3:1. El análisis estadístico arrojo que la

desviación observada se debe únicamente al azar y se acepta la hipótesis nula.

Análogamente para el caso II, donde se trabajo un cruce dihibrido con herencia ligada al

sexo, se obtuvieron las frecuencias fenotípicas esperadas 2:6:2:6 y la aparición de un

nuevo fenotipo. La desviación observada también se debe únicamente al azar y se acepta la

hipótesis nula.

Los datos no proporcionan ninguna razón para rechazar la hipótesis nula en ninguno de los

dos casos y por consiguiente, la desviación observada puede atribuirse razonablemente al

azar.

En los cromosomas politenos debido a que el patrón de bandeo que presentan es un reflejo

constante de las secuencias de DNA, las bandas sirven como marcadores para localizar

varias características genéticas (por ejemplo: lugar de los genes). Esta característica se han

utilizado en diversos estudios genéticos (Beermann y Clever, 1964) y evolutivos al ser

estos variantes en la mayoría de Dipteros donde encontramos los cromosomas politenos

(Gunderina, L I. et al. 2005). Actualmente el estudio de estas estructuras es un campo en la

genética que aun avanza lentamente, sin embargo, se han logrado confirmar que existe una

única función génica asociada con cada banda del cromosoma politeno (Lefevre, G. 1974),

este último trabajo no descarta una independencia en la función del gen y la distribución de

los cromomeros.

Un análisis de los productos sintetizados por los genes en cuestión, permitirá reconocer la

actividad o la inactividad oculta del gen alélico recesivo que en el heterócigo se encuentra

enmascarada por la presencia del producto del gen dominante, ello permitirá establecer

diferencias entre individuos homócigos y heterócigos.

Conclusión

Se realizaron dos cruces experimentales con la especie D. melanogaster y en ambos (Caso I

y Caso II) se acepta la hipótesis nula y sin una diferencia estadística significativa, la

desviación observada se debe únicamente al azar.

Se obtuvo, observo y discutió la presencia de cromosomas politenos de glándulas salivales

de la especie D. speck en laboratorio.

Se obtuvo un patrón de las pteridinas presentes en la cabeza y cuerpo de la especie D.

melanogaster mediante cromatografía en papel con solventes orgánicos, revelado luego

bajo una cámara de luz UV. Lamentablemente las cromatografías presentan un error

metodológico importante y los resultados no son apreciados correctamente.

Bibliografía

George, Lefevre Jr. (1974). The Relationship Between Genes and Polytene Chromosome

Bands. Annual Reviews in Genetics: 8 (1):51–62.

Gunderina, L.I.; Kiknadze, I.I.; Istomina, A.G.; Gusev, V.D.; Miroshnichenko, L.A. (2005).

Divergence of the polytene chromosome banding sequences as a reflection of evolutionary.

Russian Journal of Genetics 41 (2): 130–137,

KLUG, W.S. y CUMMINGS, M.R. (1994). Concepts in Genetics. 4ª Edición. Prentice-

Hall, Inc. NJ, USA.