Proteínas

• Compuestos químicos formados

principalmente por C, O, H y N.

• Son polímeros de aminoácidos

• Químicamente son poliamidas

• Secuencia codificada en los genes

Estructura base :Aminoácidos

• Presentan un grupo amino y un grupo

ácido

• Corresponden a la serie a L

• Se diferencian en la naturaleza de R

Aminoácidos

glicina serina

ácido glutámico

lisina

cisteina

tirosina prolina

En total son 20 alfa aminoácidos.

Zwitterion

La carga neta del aminoácido depende del pH del

medio

Punto isoeléctrico: valor de pH al cual el aminoácido no

presenta carga neta

Unión de aminoácidos: Enlace

peptídico

Es una unión amida

Hidrólisis Síntesis

10 aminoácidos : oligopèptido.

10 a 50 aminoácidos: polipèptido.

Mayor a 50 aminoácidos: Proteína .

Especificidad Proteica: Estructura primaria y

conformación espacial…… FUNCION

Desnaturalización: perdida de todas las

estructuras excepto la primaria.

Proteínas - estructura

Estructura primaria:

• Determinada genéticamente

• Uniones amidas

• Responsable de la funcionalidad

• No es afectada en la desnaturalización

Estructura secundaria:

• Plegamiento regular local entre aminoácidos

cercanos

• Son interacciones debiles (Interacciones de van

der Waals y puentes H)

• 2 formas principales:

Lamina b

a hélice

Proteínas - estructura

Proteínas - estructura

Estructura terciaria:

• Acomodo espacial de la cadena polipeptídica

• Estabilizada principalmente por puentes diS

• Aminoácidos hidrófobos se sitúan hacia el

interior y los hidrofílicos hacia el exterior.

Estructura cuaternaria:

• Arreglo espacial de la distintas subunidades de

la proteína.

• Proteínas oligoméricas

• Intervienen puentes de

hidrógeno, puentes salinos

y otras interacciones débiles

Proteínas - estructura

Clasificación

Fibrosas:

Estructurales

Lineales – insolubles en agua

Predomina la estructura secundaria

Globulares

Funciones diversas

Esferoproteínas – solubles en agua

La est. terciaria es la responsable….

Funciones

Estructurales: queratina

Contráctil: miosina

Transporte: hemoglobina

Reserva: albúmina

Enzimática: sacarasa

Defensa: inmunoglobulinas

Hormonales: Insulina

Parte Práctica

Objetivos:

• Reconocer distintos agentes desnaturalizantes

• Caracterizar los aminoácidos de la albúmina

• Cuantificar proteínas solubles en distintas

muestras biológicas.

Desnaturalización

Perdida de las estructuras 2º, 3º y 4º

Perdida de la actividad biológica

Puede ser reversible

Agentes desnaturalizantes

• Calor

• Ácidos

• Sales de metales pesados

• Solventes orgánicos

Coagulación

Albúmina 1 ml Sulfato reposar 10 minutos

de amonio

Prueba de Sulfato de Amonio

Reacciòn Xanoproteica: reconocimiento de

Aa aromáticos.

Reconocimiento de Aa azufrados

Desnaturalizaciòn

Reconocimiento de aa. proteinas por el Mètodo de

Biuret.

Resultado positivo: coloraciòn violeta-purpura.

Reconocimiento de aa. aromàticos. Reacciòn

Xantoproteica,

Resultado positivo: Coloraciòn amarilla.

Reconocimiento de aa. azufrados.

Resultado positivo: precipitado negro.

Coagulaciòn: calor.

Precipitaciòn con Sulfato de amonio.

Muestra : clara de huevo

Método colorimétrico de Biuret: formación de un complejo

coloreado debido a la unión del sulfato de cobre a

compuestos con varias uniones peptídicas.

Cuantificación de proteínas

Muestra

biológica

Muestra biològica (higado, pollo, carne).

Homogeneizar

CentrifugarRecuperar sobrenadante.

Agregar reactivo de Biuret.

Incubar a tem. ambiente

Leer en el espectrofotometro a 540 nm.

Calcular la concentacion problema en g% de proteinas solubles.

Calcular el % p/p.

Cuantificación de proteínas

Repasar la utilización del

espectrofotómetro .