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BSQUEDA DE NUEVAS DIANAS TERAPETICAS PARA EL TRATAMIENTO DE LA ESCLEROSIS MLTIPLE.

Eva Ramos Bcares

Grado BioqumicaFacultad de Ciencias QumicasUCM

TUTORES: Dra. Jezabel Varad Lpez.Dra. Elena Urcelay Garca.UGC Inmunologa, Hospital Clnico San Carlos

Curso 2013/2014

Multiple sclerosis:Chronic inflammatory disease of the Central Nervous System that causes demyelinating lesions, probably mediated by the immune system, axonal damage and neurodegeneration.

SYMPTOMS

PREVALENCE

Genetic

FeedSmokeVitamin DEnvironmentalCauses

Viruses5

Viruses

HUMAN ENDOGENOUS RETROVIRUSES (HERVs)

HERV-Fc1

Tripartite motif-containing proteins (TRIM)TRIM5TRIM5

Metodologa

Extraccin de DNAGenotipadoTubo CPT

Tubo con EDTAGenotipado

Metodologa

Extraccin de DNAExtraccin de RNAAnlisisestadsticoGenotipadoTratamientocon DNasaTubo CPT

Tubo con EDTATratamiento con DNasa

Metodologa

Extraccin de DNAExtraccin de RNAAnlisisestadsticoGenotipadoTratamientocon DNasaRetrotranscripcinTubo CPT

Tubo con EDTARetrotranscripcin

Metodologa

Extraccin de DNAExtraccin de RNAAnlisisestadsticoGenotipadoTratamientocon DNasaRetrotranscripcinExpresinTubo CPT

Tubo con EDTAExpresin

Metodologa

Extraccin de DNAExtraccin de RNAAnlisisestadsticoGenotipadoTratamientocon DNasaRetrotranscripcinExpresinTubo CPT

Tubo con EDTAObjetivosReplicar el papel del rs12278842 situado en el exn 1 del gen TRIM5 en poblacin espaola.Analizar el posible papel como eQTL del rs12278842 situado en el exn 1 del gen TRIM5 en clulas mononucleares de sangre perifrica.Analizar el posible papel como eQTL del rs391745 situado en la regin 5 del gen HERV-Fc1 en clulas mononucleares de sangre perifrica.Analizar el posible papel regulador del gen TRIM5 en la expresin de mensajero de HERV-Fc1.Genotipado rs12278842 (TRIM5)

Alelo G :(p= 0,013, OR (95% C.I.)=0,84 (0,73-0,97))Nexo et al.: (p=0,004 OR (95% C.I.)=0,84 (0,73-0,97))Resultados:Replicamos en poblacin espaola lo observado por Nexo et al en poblacin danesa.Compatibles con el papel TRIM5 como inhibidores de la replicacin viralEstudio expresin TRIM5

NO DIFERENCIA SIGNIFICATIVA

NO DIFERENCIA SIGNIFICATIVAResultado: SNP eQTL Otro SNP = eQTL?Diferencia entre enfermos y controlesDiferencia segn rs12278842 (TRIM5)Resultado: no diferencia entre enfermos y controlesGenotipado rs391745 (HERV-Fc1)Resultado: Iguales a los obtenidos por De la Hera et al.

Estudio expresin HERV-Fc1Diferencia segn rs391745 (HERV-Fc1) Diferencia segn rs12278842 (TRIM5) Resultado: Gen no se expresa o se expresa a niveles por debajo del lmite de deteccin de la tcnica empleada.No se pudo detectar la expresin de HERV-Fc1 en PBMCs, ni en enfermos ni en controles.Futuros estudios anlisis mRNA HERV-Fc1 en tejido cerebral de donantes postmortemNexo et al observaron diferencias en la concentracin de mRNA de HERV-Fc1 entre EM y controles en suero mRNA provenga de otra fuente (testculos, piel y trquea)ConclusionesReplicamos el papel del rs12278842 situado en el intrn 1 del gen TRIM5 en poblacin espaola, estando el alelo G de dicho polimorfismo asociado con proteccin a padecer EM.El polimorfismo rs12278842 no parece influir en la expresin del gen TRIM5 en PBMCs, por lo que descartamos el papel del rs12278842 como eQTL en este tipo celular.No hemos podido analizar el papel regulador del gen TRIM5 en los niveles expresin de HERV-Fc1 en PBMCs, ni la influencia del polimorfismo de la regin reguladora, dada la ausencia de expresin a niveles detectables de HERV-Fc1 en este tipo celularMuchas gracias!Eva Ramos Bcares