Presentacion PRRS

PERSPECTIVAS PARA EL CONTROL Y

ERRADICACION DEL PRRSV

Jairo Jaime C. MV, MSc, PhDMayo 6 de 2010

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HISTORIA

USA: North

Carolina

1989

EUROPA:Alemania

1990

Nuevo virusen Holanda: Lelystad (LV)

1991PRRS

1992

África del Sur

2004

Chile:erradicación

2007

Nuevas variantes(Vietnam y China)

2008

Libre de enfermedad:Suiza, Nueva

Zelanda y Australia

Mistery SwineDisease (MSD)

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ETIOLOGIA

EUROPA AMERICA DEL NORTE

LELYSTAD (LV)

GENOTIPO EUROPEO (EU)

O TIPO I

• Homología 63% nucleótidos• Igual organización genómica• Igual patogénesis

ATCC - 2332

GENOTIPO AMERICANO

(NA) O TIPO IINO COPIAR

ETIOLOGIA -TAXONOMIA

Arch Virol 1997, 142:629-33.

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PRRS - VIRION

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ORGANIZACIÓNGENÓMICA PRRS

Virology 2001, 287:183-91

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MANIFESTACIONES CLÍNICAS

REPRODUCTIVAS 1, 2, 3 RESPIRATORIAS 3

• Abortos• Incremento en mortinatos• Momificaciones• Lechones débiles

• Pneumonitis linfomononuclearno específica.

* La intensidad de la enfermedad varía entre aislamientos (mediana virulencia y alta virulencia)4

* En animales jóvenes: larga viremia, altas tasas de excreción y replicación en macrófagos.

* Estado inmune del huésped5 1. Vet Rec 1991, 129:102-32. Am J Vet Res 1992, 53:485-83. Vet Q 1991, 13:131-6.4. Vet Immunol Immunopathol 2004, 102:233-475. Vaccine 2003, 21:1952-7

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VARIACIÓN GENÉTICA DEL VIRUS

SECUENCIA % IDENTIDAD REF

Lider (190 nt) 61% J Virol 1999, 73:270-280

ORF 1a 55% Gen Virol 1999, 80:307-15

ORF 1b 63%

GP5 51-59% Arch Virol 1997, 142:993-1001

ORF 7 (N) 57-59% Arch Virol 1995, 140:1451-60

ORF 6 (M) 70-81% J Gen Virol 1996, 77:1271-6

GP2a 63% J Virol 2004, 78:3684-703

E 76%

GP3 58%

GP4 68%

Entre Genotipos EU y NA

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Factor de Uniónde M o M-GP5

No internalización

- Marc 145- PAMs

PATOGENESIS -RECEPTORES

HeparanSulfato1

Sialodesina(CD-169)2

Internalización

CD-163 (Scavenger-R)3

- Marc - 145

Internalización

CD-151 (Tetraspanina)4

↑ Susceptibilidad ↑ 10-100 X en no

permisivas + CD 169

- Marc 145- PAMs

ENDOCITOCIS

1. J Virol 2007, 81:7371-92. Arch Virol 2003, 148:177-873. Virol J 2007, 4:624. J Gen Virol 2008, 89:2943-2953

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TRANSMISIÓN

DIRECTA INDIRECTA

SECRECIONES Y EXCRESIONES1: Botas y overoles4

Semen (43 dpi)2 Agujas5

Saliva Aerosoles: Hasta 4,7 Km6

Heces (discutible) 28-35 dpi3 Insectos7: Aedes vexans, Musca domestica, 2,4 Km

Leche Mamíferos y aves7: No vectores

Calostro

•J Vet Diagn Invest 1994, 6:3-12•J Am Vet Med Assoc 1994, 204:1943-8•Vet Microbiol 1997, 57:69-81•Vet Rec 2002, 150:114-115•Vet Rec 2003, 152:73-6•Vet Res 2009, 40:39•Am J Vet Res 2004, 65:1284-92

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TROPISMO CELULAR

1. J Vet Med B Infect Dis Vet Public Health 2000, 47:9-252. J Virol 1997, 71:9170-93. Vet Pathol 1997, 34:39-434. Vet Pathol 2001, 38:58-665. Arch Virol 2007, 152:289-303

PRRSV1: - Linaje monocito-macrófagos: macrófagos alveolares porcinos (PAMs)

PRRS RNA y NC2:- Células germinales testiculares- Células endoteliales en corazón- Células interdigitales del timo- Células dendríticas en bazo- Placas de peyer

DISTRIBUCION DE PRRSV ES DEPENDIENTE DE LA CEPA:- Mas virulentas: infectan mas tejidos y órganos3

AISLAMIENTOS OVARIOS4: - Responsables episodios de fallas reproductivas

IN VITRO- Cultivos primarios de PAMs5

- MARC – 145- CL 2621

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PRRS - APOPTOSIS

- Apoptosis, necrosis/oncosis, autofagia y pirosis

• Mecanismo de defensa: interrumpe replicación viral

• Inducida por células inmunes: LT CD8+ y NK

• En células infectadas como respuesta a replicación viral

• Limita progenie viral

• VIRUS: estrategias para inhibir apoptosis

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PRRS - APOPTOSIS

1. Virology 1997, 365:419-342. Vet Immunol Immunopathol 2004,

102:131-423. Vet Microbiol 2005, 108:167-774. Vet Microbiol 2007, 122:72-82

DIRECTA (en células infectadas)1

GP 5:

1. Condensación cromatina, fragmentación DNA, activación caspasas

2. Apoptosis dependiente de caspasas

3. Vías intrínsecas y extrínsecas4. ↑ proporción Bax/Bcl-25. PRRS induce estrés oxidativo6. Induce necrosis secundaria

INDIRECTA (Bystander cells)

1. En pulmones y tejido linfoide2

2. Tasa apoptótica (22-24%) vs 3% en circovirus3

3. Solamente 5-10% de PAMs son infectados por PRRSV →TNFα y GP5

4. ↑ Expresión de Fas L4

PRRSV

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PRRS - INMUNIDAD

PRRSV

Inducción y subversión de defensas del

huésped

Estimula inmunidad

pos-infección

Predilección por sistema inmune (replicación en

macrófagos)

Inmunosupresion

Infecciones secundarias

Conocimiento fragmentario de inmunidad

frente a PRRS.

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PRRS – INMUNIDAD INNATA

• Ingesta y degradación de patógenos

• liberación TNFα y IL-1

• APC junto con DCs

RESPUESTAS ATIPICAS:

* Respuesta INF α reducida1

* ↑ inducción de IL-102

1. Res Vet Sci 1999, 67:47-522. Physiol Behav 2007, 90:73-81

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PRRS – INMUNIDAD

Adaptada de Vet Immunol Immunopathol 2004, 102:155-63

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ANTICUERPOS NO PROTECTIVOS

1. Vet Microbiol 1997, 55:277-872. Nature 2003, 422:307-123. Virus Res. 2006, 115:198-206

ADE1 DECOY EPITOPE 2 GLYCANSHIELDING3

MACROFAGOS PERSISTENCIA Cepas españolas de 1991 – 2005

GP5

No Protectivo Protectivo

27 30

37

45X

GP5

N37 N53NO COPIAR

PRRS - VACUNAS

TIPO RECOMENDACION REF

MLV- Cerdas: ↓ viremia y fallas

reproductivas- Lechones: ↓ viremia

Vet Immunol Immunopathol 2006, 109:99-115

KV ↓ fallas reproductivasVet Immunol Immunopathol 2004, 102:299-314

DNAInducción Acs y CMI → protección de viremia y fallas reproductivas

Vet Immunol Immunopathol 2006, 109:151-160

RECOMBINANTES- No más potentes que MLV y DNA- Múltiples aplicaciones

Vet Immunol Immunopathol2006, 109:99-115

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PRRS – CLASIFICACIÓN DE GRANJAS

NECESIDAD• Nomenclatura para describir el estatus de las granjas• Facilitar comunicación entre veterinarios, productores, genetistas, etc.• Sistema de clasificación con base en biología y ecología del virus

AASVUSDA

PRRS - CAP

CLASIFICACIÓN DE GRANJAS

MARZO 9/2010NO COPIAR

CLASIFICACIÓN DE GRANJAS

Subpoblaciones:• Reproductoras adultas• Cerdos en edad de destete (7 días antes – 3 posdestete)• Madres de reemplazo• Cerdos en crecimiento (posdestete)

Estado de eliminación (Shedding)

PCR * AISLAMIENTO VIRAL

Estado de exposición

(Exposition)

ELISA * IFA IPMANO COPIAR

CLASIFICACIÓN DE LAS GRANJAS SEGÚN EL ESTADO DE ELIMINACIÓN Y EXPOSICIÓN DE

PRRSV

GRANJA - CATEGORIA ESTADO DE ELIMINACION ESTADO DE EXPOSICION

I – Positivos inestables Positivo Positivo

IIA – Positivos estables Incierto Positivo

II B- Positivos estables (eliminación no permanente)

Incierto Positivo

III- Negativos provisionales Negativo Positivo

IV - Negativo Negativo Negativo

Adaptado de J Swine Health Prod. 2011, Jan and Feb - 2011

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CRITERIOS DE CLASIFICACION PARA PRRS EN UNA GRANJA DE REPRODUCTORAS


CATEGORIA CRITERIO EVIDENCIA DE SOPORTE

Negativos (IV)

- El “herd rollovers”, inicia al momento de eliminación de todos los animales previamente infectados.

- Cuando categoría III luego de un año son seronegativos por ELISA

- Granjas negativas que inicien programa completo de despoblación y repoblación con animales negativos

- ELISA negativos luego de completar “rollover”

- ELISA negativo en granjas III

- ELISA negativo al menos 30 días pos repoblación

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PROTOCOLO RECOMENDADO PARA EVALUAR ESTADO DE ELIMINACION EN CERDOS EN

EDAD DE DESTETE PARA CATEGORIA IIA Y IIB


PRUEBA PCRAnimales evaluados Animales en edad de destete

Muestra Suero (sangre)

Subpoblacion Machos de bajo peso en las camadas puede incrementar la sensibilidad (opcional)

Muestreo 1 cerdo por camada seleccionado al azar

Numero mínimo de muestras 30 muestras, determinado para una prevalencia del 10% y 95% de confianza.

Pools Pools de 5

Periodicidad Mínimo 4 para determinar variación en prevalencia e incrementar confianza si hay positivos presentes.

Frecuencia (mínima) de pruebas Cada 30 días o mas frecuente

Reglas de clasificación No positivos en un periodo superior a 90 días y no signos clínicos

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PROTOCOLO RECOMENDADO PARA EVALUAR ESTADO DE ELIMINACION DE CERDAS EN

REEMPLAZO PARA GRANJAS CATEGORIA III


PRUEBA ELISA

Animales evaluadosCerdas negativas de reemplazo (negativas cuando entran, sirven de centinelas)

Muestra SueroSubpoblacion No

Procedimiento de muestreo Muestras al azar en multiples edades en cerdas de reemplazo

Numero mínimo de muestras 60 muestras, para prevalencia del 5% y 95% de confianzaPools NoFalsos positivos Reevaluación por ELISA, IFA y PCR.

Frecuencia (mínima) de pruebasUna al menos 60 días luego de la introducción de cerdas de reemplazo negativas.

Reglas de clasificación Ningún positivo luego de descartar los falsos positivos

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PROTOCOLO RECOMENDADO PARA EVALUAR EL ESTADO DE PRRS DE CERDAS DE REEMPLAZO CON

BASE EN EL ESTADO SEROLOGICO (ELISA) Y VIREMIA (PCR) ANTES DE ENTRAR A GRANJA


PRUEBA ELISA Y PCRAnimales evaluados Cerdas de reemplazo negativas en cuarentena Muestra SueroSubpoblacion NoProcedimiento de muestreo Muestreo aleatorioNumero mínimo de muestras 60 muestras (prevalencia 5% y 95% confianza)Pools No para ELISA, pools de 5 para PCR

Falsos positivosPara positivos y muestras sospechosas: reevaluar por ELISA, IFA y PCR.

Frecuencia (mínima) de pruebasUna inmediatamente entra en cuarentena.Una al entrar en producción: ELISA y PCR

Reglas de clasificación Ningún positivo luego de descartar falsos positivos

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PROTOCOLO RECOMANDADO PARA EVALUAR EL ESTADO DE PRRS EN MADRES DE CATEGORIA IV

ESTABLECIDA COMO NEGATIVA POR “ROLLOVER” DONDE HUBO REMOSION DE ANIMALES INFECTADOS


PRUEBA ELISA Y PCR

Animales evaluados Madres

Muestra Suero

Subpoblacion No

Procedimiento de muestreo Muestreo aleatorio de múltiples partos y estado de gestacion

Numero mínimo de muestras 30 muestras (prevalencia 10% y 95% confianza)

Pools No

Falsos positivosPara positivos y muestras sospechosas: reevaluar por ELISA, IFA y PCR.

Frecuencia (mínima) de pruebasUna luego de confirmación que animales infectdos fueron removidos (verificando los registros de producción)


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PROTOCOLO RECOMANDADO PARA EVALUAR EL ESTADO DE ELIMINACION Y EXPOSICION DE

PRRSV EN ANIMALES EN CRECIMIENTOPRUEBA ELISA

Animales evaluados Cerdos en crecimiento

Muestra Suero

Subpoblacion No

Procedimiento de muestreoMuestreo longitudinal: muestreo aleatorio de grupos de multiples edades

Numero mínimo de muestras30 muestras por grupo de edad (prevalencia 10% y 95% confianza)

Pools No

Falsos positivos Reevaluar positivos y sospechosos por ELISA y IFA

Frecuencia (mínima) de pruebasDepende de las razones para determinar el estado de eliminación y exposición


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PRRS – CONTROL REGIONAL Y ELIMINACIÓN

FASE I: VIABILIDAD DEL PROGRAMA

• Densidad poblacional• Prevalencia PRRS• Sistemas producción• Características de flujo

FASE II: IDENTIFICACION SITIOS RELACIONADOS A PRODUCCION DE CERDOS

• Ubicación geográfica• Plantas de sacrificio• Plantas de alimento• Tipos de producción

FASE III: CARACTERIZACION

• Flujo de animales • Riesgo de infección• PCR y ELISA• Medición de Riesgos

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PRRS – CONTROL REGIONAL Y ELIMINACIÓN

FASE IV: DISEÑO DE CONTROL Y ESTRATEGIAS DE ELIMINACION (5)

A. Identificación de objetivosB. Determinar estado de PRRSC. Entendimiento limitacionesD. Opciones de soluciónE. Implementación y monitoreo de

soluciones

FASE V: EJECUCIÓN Y MONITOREO DE ESTRATEGIAS

• Despoblación y repoblamiento• Vacunación en masa• Flujo unidireccional o despoblamiento

parcial

EVALUACION

• Reducción sistemática del riesgo de infección•Revisión medidas bioseguridad•Identificación factores de riesgo

MEDICION• ↓ numero de brotes en región / año• ↓ prevalencia en granjas infectadas• Eliminación de PRRS en la región / periodo de tiempo

USA: 9 proyectosCanada: 1 proyectoMexico: 1 proyecto

Young Swine Conference 2010, 54-59.

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PRRS ERRADICACION – CHILE

• Brote de PRRS: 2000• Organización de la industria porcina: regiones definidas V(Valparaiso) a región VIII (Bio-Bio)• Producción limitada: para 2000, 100 productores industriales, actualmente 80.•Producción: 4 millones•100% de productores: ASPROCER

Am Assoc Swine Vet. 2006. 409-416

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PRRS ERRADICACION – CHILE


Diagnostico: • Laboratorio de referencia: SAG• Laboratorios privados validados: PCR y ELISA

Justificación para erradicar: • Estatus negativo para mantener competitividad de la industria• Pérdidas económicas por infecciones clínicas• Granjas positivas: en área circunscrita (87.5% en RM)• Los mayores productores y reemplazo genético negativo a virus.

No vacunar: • Podría enmascarar la presencia de infecciones de campo y complicar

diagnostico

Programa de erradicación:• Enero 2001, planeado a cuatro años (diciembre 2004)

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PROGRAMAERRADICACION – CHILE


COMITÉ TECNICO:

Visita: propietarios, veterinarios, operarios

Revisión y plan de acción Información discutida y analizada

caso por caso Localización granjas positivas y

categorización Estrategia de acuerdo a cada granja

BIOSEGURIDAD:

Flujo de animales

Niveles de bioseguridad en cada granja: lavado y desinfección de vehículos, acceso restringido, control de plagas.

POLITICO: Decretos: 191 y 235 Declaración obligatoria Destinación exclusiva de positivos: planta de sacrificio

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COSTO ERRADICACION PRRS – CHILE


Contribución ASPROCER a SAG USD 216,667

Fondos SAG USD 326,506

Fondos Salud Animal USD 125, 217

Contribución productores I USD 3,486,973

Contribución productores II USD 498,637

Contribución empresas genética USD 751,518

TOTAL USD 5,405,518

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CONCLUSIONES

CONCLUSIONES****

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GRUPO DE INVESTIGACIÓN EN MICROBIOLOGÍA Y EPIDEMIOLOGÍA

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

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Presentacion PRRS

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Transcript of Presentacion PRRS