Práctica 6 Vías Admon.
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Práctica 6.
Vías de Administración
Objetivo
El alumno observará la influencia de las diferentes vías de administración, utilizando
animales de laboratorio y una solución que permitirá apreciar la llegada de los compuestos
administrados a diferentes órganos y tejidos.
Competencia
Aplica los conceptos teóricos en el manejo de los animales de laboratorio para la
administración de la solución que alcanzará distintos órganos deduciendo las ventajas y
desventajas que tienen las diferentes vías de administración.
Introducción
Existen diversos medios por los que el medicamento puede introducirse en el organismo. Es
posible que un mismo medicamento esté preparado para utilizar más de una vía, del mismo
modo que existen fármacos diseñados para acceder al organismo por un único camino.
Existen varias vías de administración para los medicamentos como la oral, sublingual, bucal,
tópica, transdérmica, inhalación, instilación ocular, rectal, vaginal o parenteral (subcutánea,
intramuscular, intravenosa). Cada medicamento está preparado para ser administrado por vía
determinada y que ejerza su acción de la forma más conveniente. Para cada vía de
administración existen diferentes formas farmacéuticas. Por ejemplo, para la vía oral se
preparan cápsulas, comprimidos, comprimidos recubiertos, comprimidos efervescentes,
comprimidos masticables, suspensiones, soluciones, jarabes, elixires, etc.
La elección depende de diversas variables. Algunas son: el tipo de medicamento, es decir,
sus particularidades. La absorción del mismo: en qué lugar del organismo (estómago,
duodeno, piel, etc.) conviene que se produzca y a qué velocidad. El propio paciente; hay que
tener en cuenta los condicionantes fisiológicos (como el estado de su aparato digestivo,
necesidad de una acción más o menos rápida, etc.) y condicionantes psicológicos (es
frecuente que a los niños les entre mejor un jarabe que una grageas).
Procedimiento
1. Pesar las ratas y calcular para cada una el volumen de anestésico a administrar de
acuerdo al peso del animal y a una dosis ponderada de 15mg/100gr de peso.
2. Anestesiar las ratas administrando el volumen total de anestésico por vía
intraperitoneal (IP), dejar reposar 10 minutos.
3. Administrar azul de metileno al 0.01%, utilizar una rata para cada vía de
administración de acuerdo a la siguiente tabla:
Vía de Administración Volumen a Administrar
(ml)
Intravenosa (IV) 0.5
Intramuscular (IM) 1-2
Intraperitoneal (IP) 5-10
Subcutánea (SC) 5-10
Oral (PO) 1-2
4. Dejar reposar 20 minutos y hacer la disección de cavidad abdominal.
5. Llevar a cabo una exploración física interna y por observación buscar azul de
metileno en órganos y tejidos.
6. Anotar tus datos en la tabla de resultados.
Cuestionario Complementario
1. Cuales son las principales vías de administración de fármacos?
2. Explique ventajas y desventajas en la terapéutica con fármacos en las siguientes vías
de administración: oral, sublingual, rectal, inhalación, subcutánea, intravenosa,
intratecal y tópica.
3. Define administración parenteral y menciona todos los tipos que conozcas.
4. Mencione dos fármacos que se apliquen por cada vía de administración.
Práctica 7.
Distribución de Fármacos
Objetivo
Por medio del análisis cualitativo y cuantitativo determinar la distribución de un fármaco en
los diferentes compartimentos del organismo.
Introducción
La distribución es un proceso farmacocinética en el que tiene lugar el transporte del fármaco
desde su lugar de absorción hasta el órgano donde va a ejercer su efecto. No obstante, es
importante considerar que una vez absorbido el fármaco es distribuido no solo hasta el sitio
donde va a actuar, si no que al mismo tiempo llega a otros órganos en donde va a ser
eliminado, metabolizado o acumulado.
La mayoría de los fármacos se unen a proteínas plasmáticas para circular en el organismo.
La albúmina es la principal de estas proteínas acarreadoras; tiene dos sitios de unión para
fármacos, uno para fármacos de carácter ácido, y otro para fármacos de carácter básico. Los
esteroides corticales y algunos otros fármacos de carácter básico se unen también a las alfa-
1-globulinas.
La unión de los fármacos a las proteínas depende esencialmente de la afinidad que tengan los
fármacos, y constituye una cifra estable para cada fármaco. Esta unión es reversible,
encontrándose siempre un determinado porcentaje libre y cuando éste se elimina del plasma
una nueva cantidad de fármaco se desprende de su unión a proteínas y toma su lugar, de tal
modo que las fracciones libre y unida a proteínas permanecen constantes. Ocasionalmente,
cuando se sobrepase la capacidad de fijación de la albúmina, aumenta la fracción libre.
Solamente el fármaco libre es activo, puesto que es el único capaz de atravesar barreras y
difundir a los tejidos.
Una vez que el fármaco se encuentra en plasma, la concentración que alcanza en los
diferentes tejidos depende esencialmente de dos factores: el flujo sanguíneo regional, y la
salida del fármaco del interior vascular.
La unión del fármaco a las proteínas y la salida del fármaco del interior vascular condicionan
un parámetro que conocemos con el nombre de volumen de distribución (Vd). Se define
como Vd el volumen de agua corporal en el que el fármaco se encuentra realmente disuelto.
Pero este parámetro de “Vd real” no es fácilmente medible, por lo que recurrimos al “Vd
aparente” que corresponde a:
Vd = DOSIS
Cp
Decimos que este volumen de distribución es aparente por que no refleja con exactitud donde
se encuentra el fármaco. Por ejemplo, Si la Cp es muy baja el Vd será muy alto, indicándonos
que esta acumulado en algún tejido; por el contrario, si el fármaco está muy unido a proteínas
la Cp será alta y el Vd será bajo. A pesar de ello nos sirve para conocer la distribución
corporal de un fármaco:
Vd 3 Litros --------------------- Fármaco en plasma
Vd 12 Litros --------------------- Fármaco en plasma + intersticio
Vd 40 Litros --------------------- Fármaco en plasma + intersticio + células
Material y Equipo
Espectrofotómetro UV-VIS Matraz volumétrico de 500 cc (1)
Balanza analítica Matraz volumétrico de 100 cc (1)
Balanza granataria Matraz volumétrico de 25 cc (8)
Balanza para roedores Matraz volumétrico de 10 cc (5)
Mesa de cirugía para roedores Pipeta volumétrica 0.5 cc (1)
Equipo de disección completo Pipeta volumétrica 1 cc (3)
Jaula metabólica Pipeta volumétrica 2 cc (1)
Centrífuga Pipeta volumétrica 3 cc (1)
Agitador Vortex Pipeta volumétrica 5 cc (1)
Portaobjetos (6) Pipeta graduada 20 cc (1)
Jeringa de 1cc (2) Pipeta graduada de 10 cc (2)
Tubo de ensaye 16x100 con tapón de rosca (10) Pipeta graduada 5 cc (1)
Tubo de ensaye 16x125 con tapón de rosca (10) Pipeta graduada 1 cc (1)
Soluciones y Reactivos
Pentobarbital sódico Sulfacetamida 4 mg/cc (10cc)
Ácido tricloroacético (TCA) Hidróxido de sodio 0.1 N ( 60cc)
Nitrito de Sodio Ácido tricloroacético 15% (25cc)
Sulfacetamida Ácido clorhídrico 4 N (10 cc)
Cloroformo Nitrito de sodio 0.1% (10cc)
Hidróxido de sodio Sulfamato de amonio 0.5% (10cc)
Alfa-naftiletilendiamina Alfa-naftiletilendiamina 0.1% (10cc)
Sulfamato de amonio
Ácido clorhídrico
Procedimiento
Sesión 1 (primera parte)
1. Se administra a la rata sulfacetamida en dosis de 10 mg/Kg de peso.
2. Se coloca el animal en una jaula metabólica por espacio de 30 minutos.
3. Si no se ha colectado orina en este intervalo de tiempo, induzca al animal
presionándole levemente la parte inferior del abdomen.
4. Anestesie al animal y prepárelo en la mesa de cirugía. Abra la cavidad abdominal (en
este momento puede obtener orina por insición directa en la vejiga, si no se logro
anteriormente).
5. Abra además la cavidad toráxico y craneana. Obtenga 1cc de sangre por punción
directa al corazón del animal.
6. Obtenga también muestras de 0.5-1.0 gr de los siguientes órganos: hígado, riñón,
intestino, corazón, cerebro y músculo de la región glútea.
7. Coloque las muestras obtenidas en un portaobjetos y péselo, después de esto proceda
a desmenuzarlas con la ayuda de una navaja de bisturí y transfiéralas a un tubo de
ensaye que contenga 10cc de NaOH 0.1 N, lave el portaobjetos y péselo de nuevo por
diferencia conocerá el peso de la muestra.
8. Procese cada una de las muestras de acuerdo al procedimiento indicado.
Procesamiento de las muestras:
Sangre: Lleve 1cc de sangre a un tubo que contenga 9cc de agua y agite en vortex. Tome
1cc de esta dilución y transfiérala a otro tubo, adicione 12cc de agua y agite de nuevo.
Agregue 4cc de ATC al 15% y agite por 1 minuto. Centrifugue a 3,000 rpm por 3 min. Del
sobrenadante tome una muestra de 5cc y pásela a un tubo limpio. Etiquetar el tubo
especificando fecha, laboratorio, número de equipo y contenido. Guardar en congelación para
la segunda parte de esta práctica.
Orina: Tome 100 mcl de orina y agregue a un tubo que contenga 1.9cc de agua. Agite y tome
1cc de esta orina diluida y transfiérala a otro tubo conteniendo 11cc de agua. Adicione 4cc
de TCA al 15% agite y centrifugue a 3,000 rpm por 3 minutos. Del sobrenadante tome una
muestra de 5cc y pásela a un tubo limpio. Etiquetar el tubo especificando fecha, laboratorio,
número de equipo y contenido. Guardar en congelación para la segunda parte de esta práctica.
Tejidos y Órganos: En el tubo que contiene la muestra y la solución de NaOH deberá
agitarse en vortex por 1 minuto en 3 ocasiones, en un período de 10 minutos. Después se
dejará reposar por 15 minutos. Se toman 2cc del sobrenadante y se adicionan 2cc de TCA al
15%, agitar por 30 seg. Adicionar 6cc de agua y agitar de nuevo. Centrifugar por 5 minutos
a 3,000 rpm. Tomar del sobrenadante una muestra de 5cc y pasar a un tubo limpio. Etiquetar
el tubo especificando fecha, laboratorio, número de equipo y contenido. Guardar en
congelación para la segunda parte de esta práctica.
Sesión 2 (segunda parte)
Para iniciar con esta sesión, permita que las muestras se descongelen a temperatura ambiente,
o en baño de agua a temperatura ambiente.
Cuantificación de Sulfacetamida por la técnica analítica de Bratton-Marshal
1. A 5cc del sobrenadante se le adicionan 1cc de HCl 4N, 1cc de Nitrito de sodio al 01%
y se agita en vortex por 5 minutos.
2. Posteriormente agregar 1cc de Sulfamato de amonio al 0.5% y agite de nuevo por 3
minutos, manualmente de manera vigorosa.
3. Por ultimo adicione 1cc de alfa-naftiletilendiamina al 0.1%, agite y repose en la
oscuridad por 10 minutos.
4. Lea la absorbancia en espectrofotómetro a una longitud de onda de 546 nm.
5. Hacer exactamente este mismo procedimiento a un blanco que consiste en 5cc de
agua, que se trata a la par con las muestras..
Curva patrón de sulfacetamida:
Solución patron de Sulfacetamida (100 mcg/cc): Pesar en balanza analítica 50mg de
Sulfacetamida, colocarla en un matraz volumetrico de 500cc. Llevar al aforo con agua.
Soluciones estándar de Sulfacetamida: Tomar la alícuota necesaria de la solución patrón
de sulfacetamida y preparar 25 cc de cada una de las concentraciones descritas a
continuación: 1, 2, 4, 6, 8, 12 y 16 mcg/cc.
Tomar 5 ml de cada una de las soluciones estándar de sulfacetamida y colocar en un tubo de
ensaye y proceder de acuerdo a la técnica de Bratton-Marshal. Hacer este procedimiento por
duplicado para cada una de las concentraciones. Incluir un blanco con 5cc de agua.
Resultados
Con los resultados de la curva estándar calcular el promedio, desviación estándar y el
coeficiente de variación de las absorbancias obtenidas para cada concentración.
Elaborar una gráfica de concentración de sulfacetamida (mcg/ml) vs Absorbancia promedio;
calcular por mínimos cuadrados el coeficiente de correlación.
Con la gráfica obtenida hacer interpolaciones con los valores de absorbancias de las muestras
y calcular las concentraciones de sulfacetamida en sangre, orina y en los diferentes órganos
y tejidos.
Reporte sus resultados en una tabla donde se especifiquen los valores de absorbancia y
concentraciones obtenidas, y la gráfica correspondiente.
Elabora tus conclusiones.
Cuestionario Complementario
1. Que propiedades deberá tener un fármaco para poder encontrarse en el eritrocito?
2. Cual es el componente proteico más importante en la distribución de fármacos.
3. La distribución será un proceso reversible?