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PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR (POE) MÉTODO STANDARIZADO DE ANALISIS DE MUESTRAS DE

TIERRA POR TECNICAS DE CONCENTRACIÓN EN FLOTACION

Versión: 2

Vigente a Partir de: Agosto 20 2010

Elaborado por:Jaime Eduardo Fajardo Sanchez

Revisado por:Jorge Iván Zapata

Aprobado por:Mercedes Salcedo-Cifuentes

OBJETIVO:Estandarizar el procedimiento de preparación, montaje y análisis de muestras de tierra para diagnóstico de contaminación parasitario en el medio ambiente.

ALCANCE:El instructivo aplica a todo el personal (estudiantes, investigadores y/o profesores) que tengan como objetivo el estudio de la contaminación parasitaria del suelo en espacios públicos o privados.

DEFINICIONES:-Estándar: Manual que sirve de modelo, norma o patrón para seguir los procedimientos bajo un mismo parámetro.-Parásito intestinal: Organismos que viven a expensas de seres vivos, en cuyo aparato digestivo se alojan y con el que compite por el consumo de las sustancias alimenticias que ingiere el hospedero. Su tamaño va desde organismos unicelulares microscópicos hasta alcanzar varios metros. Su presencia en el organismo humano está directamente relacionada con factores de riesgo como la falta de higiene, tanto personal como al preparar alimentos, el contacto con suelos contaminados, presentar pica o geofagia y carecer de servicios públicos óptimos, especialmente de agua potable.-Contaminación parasitaria del ambiente: Presencia de parásitos en etapas de resistencia quiste, ooquiste, huevos o en etapas larvarias en el suelo.

PRODUCTO O SERVICIO:Con la correcta aplicación de este instructivo se obtendrá una muestra para su análisis microscópico en el laboratorio parasitológico. RECURSOS:

LOGÍSTICO: Laboratorio de Parasitología.

HUMANOS: Estudiantes y profesores

MATERIALES: *Tubos de ensayo.

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PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR (POE) MÉTODO STANDARIZADO DE ANALISIS DE MUESTRAS DE

TIERRA POR TECNICAS DE CONCENTRACIÓN EN FLOTACION

Versión: 2

Vigente a Partir de: Agosto 20 2010

Pipetas. Gasa. Palillos de madera. Vasos plásticos. Balanza. Laminas portaobjetos. Laminillas cubre objetos. Reloj. Ansa de argolla. Mechero. Encendedor. Hoja de registro. Marcadores de tinta indelebles. Bolígrafos. Soluciones de Flotación Sulfato de Zinc y Sheather.ELEMENTOS DE PROTECCIÓN PERSONAL: Guantes de látex. Tapabocas. Bata. Gafas.

RESPONSABILIDAD:Profesores y estudiantes de Bacteriología y Laboratorio Clínico de la Facultad de Salud de la Universidad del Valle.BIBLIOGRAFIA:-Alvares Santarém V, Puga Magoti L, Dias Sichieri T. Influencia de variáveis na Técnica de centrífugo-flutuação para a Recuperação de ovos de Toxocara canis em solitario. Rev. Inst. Medicina trop. S. Paulo 2009;  51(3). -Cadiz Martinez A, Determinación de la presencia de huevos de ascárides en arena de playas ribereñas del río valdivia. Trabajo de grado, Universidad Austral de chile, 2008.-Fonrouge R, Guardis M, Radman N, Archelli S. Contaminación de suelos con huevos de Toxocara sp. en plazas y parques públicos de la ciudad de La Plata. Buenos Aires, Argentina. Bol. chil. parasitol.  [revista en la Internet]. 2000  Jul [citado  2014  Abr  25]; 55(3-4): 83-5. Disponible en: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0365-94022000000300009&lng=es.  http://dx.doi.org/10.4067/S0365-94022000000300009.-Hernández S, Contera M, Acufia, A, Elhordoy D, Vignolo J. Toxocara spp. en muestras de suelo y heces de plazas de la ciudad de Montevideo. Revista de Patologia Tropical. [revista en la Internet]. Julio 2008. [citado  2014  Abr  25]; 32. Disponible en: http://www.revistas.ufg.br/index.php/iptsp/article/view/4355/3813.-Polo L, Cortés J; Contaminación de los Parques Públicos de la Localidad de Suba, Bogotá con Nemátodos Zoonóticos; Rev. Salud pública. 2007; 9 (4):550-57.-Sievers G, Concha C, Gádicke P. Prueba de una técnica para recuperar huevos de Toxocara canis de muestras de tierra. Parasitol. latinoam.[revista en la Internet]. 2007  Jun [citado  2012  Oct  07]; 62(1-2): 61-66. Disponible en: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717-77122007000100010&lng=es. 

RECOLECCION DE MUESTRA DE TIERRA

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TIERRA POR TECNICAS DE CONCENTRACIÓN EN FLOTACION

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Item DESCRIPCIÓN DEL PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRA

ÁREA RESPONSABLE

CARGO RESPONSABLE

1.

1.1. De cada unidad de muestra de tierra (180-240 g) se fragmenta y revuelve con una tijera limpia.

1.2. Se pesan 10 g de tierra para su procesamiento y análisis.

1.3. En un vaso A de plástico limpio se vierten los 10 g de tierra y 25 ml de agua de chorro.

1.3.1. Se homogeniza el contenido del vaso agitándose de forma constante durante 10 minutos.

1.3.2. Se filtra el homogenizado a través de una gasa doble, depositándose en un vaso B, como nueva solución de trabajo y se desecha la tierra contenida en la gasa filtro.

1.4. Se deposita el contenido del vaso B en un tubo de ensayo y se centrifuga durante 3 min a 1500 rpm.

1.4.1. Se descarta el sobrenadante del tubo de ensayo y se resuspende el pellet formado al fondo del tubo de ensayo.

1.4.2. Se llena el tubo de ensayo con agua de la llave homogenizando el pellet y se repite el procedimiento de centrifugar durante 3 min a 1500 rpm.

1.4.3. Se descarta el sobrenadante del tubo de ensayo y se resuspende el pellet formado en el fondo del tubo de ensayo.1.4.4. Se llena el tubo de ensayo con la solución de flotación (Sulfato de Zinc a densidad 1,18 o solución de Sheather a densidad 1.260) homogenizando el pellet y se repite el procedimiento de centrifugar durante 3 min a 1500 rpm.

1.4.5. Sin retirar el tubo de ensayo de la centrifuga, se toma con un ansa de argolla de la capa superficial la muestra que se deposita sobre una placa portaobjetos,

Guía de recomendaciones para Análisis de

muestras de tierra en

parasitología

Profesional responsable del

proceso de montaje y análisis de

muestras de tierra

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agregándose seguidamente una gota de solución salina al 0.9% y se cubre con una lámina cubre objetos. Se repite el mismo procedimiento descrito anteriormente pero se agrega solución de lugol y se cubre con laminilla cubreobjetos.

1.5. Observar al microscopio con 4X, 10X y 40X. Se debe tratar de observar de forma inmediata o dejar en cámara húmeda un máximo de 30 minutos.

FORMATO PARA REGISTRAR LA HISTORIA DEL DOCUMENTO

ACTIVIDADES PREVIAS

ACTIVIDAD NOMBRE DE QUIEN LA REALIZO FECHA

Elaboración del primer Instructivo JAIME EDUARDO FAJARDO SANCHEZ FEBRERO 17 DE 2011

HISTORIA DEL DOCUMENTOEVENTO/VERSION

ELABORACIÓN REVISIÓN APROBACIÓN

NOMBRE FECHA NOMBRE FECHA NOMBRE/ CARGO FECHA

Solicitud de creación/01

Jaime Eduardo Fajardo S

02/15/11 Jorge Ivan Zapata

02/19/11 Mercedes Salcedo-Cifuentes/ Directora Programa Académico

Bacteriología y Laboratorio Clínico. Universidad del Valle.

02/21/11

El presente documento se citara así: Fajardo-Sanchez J. Procedimiento Operativo Estandar (POE) Método Estandarizado de análisis de muestras de tierra por técnicas de concentración en flotación. Santiago de Cali. Universidad del Valle. 2011.