VIII Con antecedentes de haber padecido paludismo se practicarán cualquiera de las pruebas siguientes:

-investigación microscópica del parásito mediante extendidos de sangre teñidos, examen de gota gruesa o con microtubo con naranja de acridina

-- Prueba serológica (inmunofluorescencia o ensayo inmunoenzimático).

ZONAS ENDÉMICAS EN MÉXICO

HEMOPARÁSITOS EN MÉXICO

Plasmodium

Trypanosoma cruzi

vivax

malarie

falciparum

ovale

PlasmodiumPlasmodium

Formas parasitarias en sangre:

a) Trofozoitos

b) Esquizontes

c) merozoitos

Morfología de Plasmodium vivax en sangre periférica

Trofozoitos de plasmodium

Esquizonte de plasmodiumgametocitos de plasmodium

Técnica1. Gota fina. Se recoge una gota de sangre en un

portaobjetos y con otro se realiza la extensión en capa fina, secar.

2. Gota gruesa. Para la gota gruesa se recogen 3 ó 4 gotas sobre un portaobjetos y con la esquina de otro unir con movimientos rápidos y circulares (de 3 a 6 movimientos) las tres gotas de sangre más grande, hasta extenderlas formando una capa gruesa y uniforme, dejar secar 24 hrs.

TINCIÓN DE GIEMSA

La gota gruesa permite analizar una mayor cantidad de sangre, facilitando la detección de parasitemias bajas y un ahorro de tiempo en el examen, aunque al romperse los eritrocitos resulta difícil la identificación de especie.

Al remover de esta forma la sangre, se logra la desfibrinación de la sangre.

3. Colocar los frotis en un puente de tinción.4. El frotis de capa fina se fija cubriendo con metanol

durante 3 minutos. Escurrimos y lo dejamos secar al aire

5. Diluir en un tubo 2 gotas de colorante de giemsa en 2 ml de buffer pH 7.2. Es importante realizar esta dilución en el momento de la tinción, ya que el colorante precipita y no es válido para el otro día.

6. Mezclar suavemente el tubo y con una pipeta pasteur cubrimos los dos frotis con la dilución del colorante, dejándolos actuar por 30 minutos.

7. Escurrir y lavar con agua corriente.8. Escurrir y dejar secar.9. Observar adicionando una gota de aceite al

microscopio con el objetivo 100x

Realización de las extensiones de sangre periférica:

1.- Depositar una pequeña gota de sangre en el extremo de un porta objetos.

2.- Con el borde de otro portaobjetos a 45 grados, tocar la gota, esperar a que la sangre se distribuya por capilaridad y después deslizar suavemente un portaobjetos sobre el otro en sentido longitudinal hasta que la gota quede bien extendida sobre la superficie del primer portaobjetos.

3.- Dejar secar el frotis.

FROTIS GOTA GRUESA

FROTIS GOTA DELGADA

Trypanosoma cruzi

Fases circulantes: tripomastigotes

tripomastogotes

IX. Con antecedentes de residir o proceder de zonas endémicas de Tripanosomiasis americana, se practicará cualquiera de las pruebas serológicas siguientes:

-Ensayo inmunoenzimático- Fijación de complemento- Hemoaglutinación indirecta- Aglutinación directa- Inmunofluorescencia indirecta