SIMULACIÓN in vitro DE LOS

EFECTOS CAUSADOS POR LA

PLATA EN LAS ESPECIES

XIPHOPHORUS HELLERI Y

CARASSIUS AURATUS Baldarrago Maico Leslie1, Bobadilla Atao Leo2, Cuadros Cuya Ana3, Olivares Rodríguez Ligia4, Oré

Romero Carmen5 & Sandoval Vizcarra Carolina6

Universidad Privada del Norte (UPN). Ingeniería ambiental. Bioquímica y toxicología ambiental.

RESUMEN

La plata es un elemento químico que se usa para diversas actividades. Este no es toxico de

por sí, pero cuando se vuelven sales se convierten en un gran riesgo para la salud si se

entra en contacto, ya que puede convertirse en un cancerígeno. El proyecto busca identificar

cuáles son las reacciones que causan este químico, en forma de nitrato de plata, en el

organismo, a nivel físico y microbiológico.

Para realizar dichos estudio, se usará una simulación in vitro usando como organismos de

muestra a las especies Carassius auratus y Xiphophorus hellari. Para la identificación del

daño celular se usara la técnica de micronúcleos, una técnica fácil de realizar y de bajo

costo; además, que arroja resultados confiables.

Al realizar el proyecto de investigación, arrojo como resultado final la muerte de todos los

peces que se usaron en la prueba. Se observó que sufrieron daños físicos, descamación y

decoloración, y microbiológicos, explotaron las células.

Palabras clave: Plata, tóxico, in vitro, ensayo de micronúcleos, daños.

ABSTRACT

SILVER IS A chemical element VARIOUS ACTIVITIES usa para. This is non-toxic and of itself, but

when sales are Vuelven become Great Health Risk if it comes into contact, and may Becoming a

carcinogen . The project seeks to identify Which child the chemical reactions that cause esta in the

form of silver nitrate in the Agency , a Physical and microbiological level .

Perform For such study , in vitro Using A simulation Agencies As Displays a Species Goldfish and

Xiphophorus hellari be used. For the identification of cell damage Technique micronuclei, A

Technical Easy to make and low cost will be used ; : Also, Reliable Results That throws .

To Perform Research Project , throw As a result m final death of all fish used in the test. It was

noted suffered Physical , peeling and discoloration , microbiological Damage and exploited the cells

.

Keywords : Silver , toxic in vitro micronucleus assay , damages.

INTRODUCCIÓN

Según la ingeniería química Blanca

Elena Jiménez (2001). La plata es un

elemento químico pesado, que si bien

es usado para diversas actividades

económicas, puede causar severos

daños a la salud de los seres vivos, no

es tóxica de por sí, pero la mayoría de

sus sales son venenosas y pueden ser

carcinógenas.

Las sales solubles de plata,

especialmente el nitrato de plata

(AgNO3), son letales en

concentraciones de hasta 2 g. Los

compuestos de plata pueden ser

absorbidos lentamente por los tejidos

corporales, teniendo como

consecuencia pigmentación azulada o

negruzca en piel.

Estudios realizados por el

Departamento de Salud y Servicios para

Personas Mayores de New Jersey,

exponen que el nitrato de plata causa

serios riesgos para la salud, y es que

causa efectos tanto agudos, crónicos a

largo plazo, dependiendo del tiempo de

exposición, también causa un riesgo de

cáncer, así como para la reproducción.

Es por ello, que hemos decidido realizar

una simulación in vitro de los efectos

causados por la plata en un organismo.

Tomaremos como referencia el estudio

realizado por Victoria Barahona

Gomáriz (2000). Para realizar este

proyecto de curso usamos peces para

las pruebas experimentales, del género

Carassius auratus y Xiphophorus hellari,

a los cuales sometimos a diferentes

dosis de nitrato de plata para observar

su reacción, cambio físico y

microbiológico y su mortandad.

El Acuario Paradise (2013), expone que

los peces espada o Xiphophorus hellerii

son de Cuerpo alargado y

medianamente robusto, con la boca

levemente orientada hacia arriba, lo cual

nos indica que se alimenta de la

superficie. Buen nadador. Posee una

aleta caudal cuyos radios inferiores se

proyectan hacia atrás, dándole así una

cola con forma de espada, de ahí su

nombre común. Y los peces Goldfish

Cometa o Carassius auratus son de

cuerpo alargado y cuenta con una sola

aleta caudal. Es muy similar al Japones

Común con la diferencia de que el

cuerpo es más alargado, elegante y

tiene las aletas más desarrolladas. Se

les encuentra en color blanco, plata,

amarillo y tonos rojizos. Esta es la

especie de goldfish más resistente.

Para la identificación de daños a nivel

celular se usará la prueba de

micronúcleos. Según lo expuesto en la

investigación realizado por Gómez

Belinda (2006, Abril), dentro de las

ventajas de la técnica se incluyen la

facilidad y rapidez, la posibilidad de

probar un sólo químico sin otros

compuestos, la abundancia de células

analizables en diferentes periodos del

ciclo celular y el que los micronúcleos

formados durante la división celular

persisten al menos durante la siguiente

interface; además, la prueba no deja

lugar a dudas sobre el daño producido,

pues lo que se observa como

micronúcleos es claramente una

pérdida de ADN. Por otro lado, la prueba

no detecta agentes que no producen

pérdidas de material genético o rezagos

anafásicos, y tampoco es útil en

poblaciones celulares que no se dividen.

MATERIALES Y METODOLOGÍA

I. Materiales y equipos

Materiales

- Comida para peces

- 5 envases de plástico de

5L

- Motor de oxígeno

- Declorador

- Pecera

- Vaso precipitado

- Probeta

Equipos

- Microscopio

- Estereoscopio

Reactivo

- Wright

Especie a estudiar

- 8 Golfish cometa

(Carassius auratus)

- 8 Pez espada

(Xiphophorus hellari)

Muestra problema

- 100ml de solución de

Nitrato de Plata

II. Procedimiento

Preparación de la muestra

1. Se preparó 4 soluciones de AgNO3, en concentraciones de 5%, 10%, 15% y

20%.

Cálculos (Factor gravimétrico)

𝑋𝑔𝑟 𝐴𝑔 =107,87 𝐴𝑔

169,87 𝐴𝑔𝑁𝑂3= 0,63 𝑔𝑟 𝐴𝑔

Es decir, en la solución del Nitrato de plata, el 63% corresponde al elemento: plata.

Preparación de la muestra

2. A las 16 hras, en los 5 recipientes, se colocaron dicha soluciones de la

siguiente manera.

Recipiente 1 2 3 4 5

Concentración 0% 5% 10% 15% 20% , , m

(5ml de la solución por cada litro de agua)*

Ilustración 1. Recipientes donde se llevara a cabo el experimento.

3. Se dejó en periodo de prueba por 24 horas.

Ilustración 2. Inicio del experimento.

Ensayo de micronúcleos

a) Se procede a cortar una parte del pez, con el fin de obtener una cantidad

pequeña (una a dos gotas) de sangre. La cual será esparcida, con ayuda de

un portaobjeto, sobre otro, usando la técnica del raspado.

b) Luego se espera 15 minutos como mínimo para que seque y se sumerge los

portaobjetos en alcohol frio durante 10 minutos.

c) Pasado ese tiempo, y una vez seca la muestra, utilizamos el reactivo Wright

para colorear las células. Aplicamos unas gotas sobre el portaobjeto.

d) Posteriormente, con la ayuda del microscopio se observó el cambio y /o daño

celular que sufrieron los peces.

Ilustración 3. Corte al pez para obtener muestras de sangre.

Ilustración 4. Técnica del raspado.

TABLA Nº 1: Vista microscópica del daño celular

RECIPIENTE CONCENTRACIÓN EXPOSICIÓN AL AgNO3

Blanco 0%

2 5%

3 10%

4 15%

5 20%

RESULTADOS

El ensayo realizado dio como resultado la muerte de todos los peces que se sometieron

a la prueba.

Se pudo observar una decoloración leve en la piel, así como una descamación en varias

zonas de ambas especies, Carassius auratus y Xiphophorus hellari.

El ensayo de micronúcleos arrojo un daño celular, y es que se pudo observar que las

células habían explotado por completo.

Los cuerpos de agua en donde se realizaron las pruebas cambio de color, se tornó de

color marrón oscuro.

TABLA Nº 2: Cambios físicos en el cuerpo de los peces

RECIPIENTE CONCENTRACIÓN EXPOSICIÓN AL AgNO3

Blanco 0%

2 5%

3 10%

4 15%

5 20%

CONCLUSIONES

Finalmente, podemos decir que la experimentación de cuán grande puede ser el daño

de la plata en seres vivos, en este caso con peces de las especies Carassius auratus y

Xiphophonus hellari, es severa; ya que, no solo se obtuvo como resultado la muerte de

todos los peces, sino que pudimos comprobar que el elemento químico ya mencionado

les causo una decoloración y descamación parcial, completa en algunos casos, a los

peces; Además, se pudo apreciar los daños a nivel celular que presentaron los

bioindicadores estudiados, como pudimos ver las células habían explotado por completo

debido al compuesto problema.

BIBLIOGRAFÍA

La Contaminación Ambiental en

México. Ingeniera Blanca Elena

Jiménez (2001). Instituto de

ingeniería de la UNAM y

FEMISCA. México.

FAO (1975) “Curso de

Capacitación FAO/sida sobre

contaminación de las aguas del

mar en relación con la

protección de los recursos vivos.

Gotemburgo Suecia. Supl. 1:328

Gomez, Belinda (2006,abril). La

Ciencia y El Hombre. La prueba

de Micronúcleos.

http://www.uv.mx/cienciahombr

e/revistae/vol19num1/articulos/

micronucleos/index.htm

Olivia Torres-Bugarín, María

Guadalupe Zavala-Cerna, etc.

(2013, Enero- Abril).

Procedimientos básicos de la

prueba de micronúcleos y

anormalidades nucleares en

células exfoliadas de mucosa

oral.

http://www.medigraphic.com/pd

fs/residente/rr-2013/rr131b.pdf

Anónimo (2013). Acuario

Paradise. INFORMACION

GENERAL – Gold Fish,

Cometas, Moros, Red Cap, Ojos

de Burbuja, Escama de Perla y

Variedades.

http://paradisetropicalfish.com.s

v/2010/06/06/gold-fish-cometas-

moros-y-variedades/

Ruiz, Lidia . metales pesados

en los peces y sus efectos.

http://triplenlace.com/2013/01/0

6/los-metales-pesados-en- los-

peces-y-sus-efectos/

Riesgo toxicológico ambiental

de compuestos activos utilizados

para la desinfección de torres de

refrigeración. Victoria Barahona

Gomariz (2000). Editorial

Complutense, S.A. España