Medios de Cultivo Nociones Basicas (1)

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    MICROBIOLOGÍA CLÍNICA“Nociones básicas de los fundamentos

    bioquímicos de los medios de cultivo”

    Implementación y Ejecución del Programa de“ECOEFICIENCIA” en la Universidad Católica

    Los Ángeles de Chimbote –

    Sede Central

    Ponencia:

    Mg. Blgo. Mblgo. Luis Alberto Sánchez Angulo

    Ponente:

    SESIÓN 01: Medios de cultivo, características,clasificación, importancia

    Ponencia:

    27 de marzo – 22 de abril de 2016

    Chimbote - Perú

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    MEDIOS DE CULTIVO

    •   Los medios de cultivo se definen como un conjunto

    de nutrientes orgánicos e inorgánicos que van a

    permitir el desarrollo satisfactorio de las bacterias a

    nivel del laboratorio.

    •   Otra definición menciona que los medios de cultivo

    son soluciones acuosas (bien como tal, o bienincorporando un coloide en estado de gel), en la

    que están presentes todas las sustancias

    necesarias para el crecimiento y multiplicación de

    los microorganismos en el laboratorio; con el

    propósito de aislar las diferentes especies

    bacterianas, para luego proceder a su identificación

    y llevar a cabo una serie de estudios

    complementarios.

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    •   El gelificante que más se utiliza es el agar   –   agar,

    que es un extracto de una alga roja (Rodophyta) del

    género Gelidium.

    •   La ventaja del agar    –   agar es que una vez

    gelificado, no funda hasta casi los 80°C, lo que

    permite su uso para la inmensa mayoría debacterias que son mesófilas.

    •   Los medios de cultivo se presentan en forma sólida

    (granulados o en polvo), listos para ser hidratados.

    CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

    •   Para clasificar a los medios de cultivo existen

    diferentes formas: por su consistencia, por su

    composición química, por su origen, etc. Se

    analizará cada uno de ellos.

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    CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO(continuación…)

    1. Por su consistencia:

    Medios líquidos (“caldos de cultivo”).-   es unmedio de cultivo fluido (líquido), exento de agar, que

    comúnmente contiene proteínas en su constitución

    (peptonas, extractos). Ejemplos: caldo tioglicolato,caldo nutritivo o común, agua peptonada, etc.

    Medios de cultivo sólidos (“agar”).-   son medioslíquidos a los cuales se les agrega un coloide en

    estado de gel, que solidifica (da consistencia) a la

    solución. Estos medios se sirven en placas Petri oen tubos de ensayo, los cuales tienen un contenido

    del 1% o más de agar. Ejemplos: agar Mac Conkey,

    agar sangre, agar TCBS (Tiosulfato Citrato Bilis

    Sacarosa), etc.

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    Medios de cultivo semisólidos.-  son aquellos quese preparan a partir de los medios líquidos, a los

    cuales se les añade un solidificante, pero en una

    proporción menor que para realizar la preparación

    de un medio sólido (menos del 1% de agar). Estospueden ser usados para verificar la movilidad de las

    bacterias o también para la conservación de las

    mismas.

    2. Por su composición química:

    Medios mínimos o comunes.-   son aquellos queposeen los nutrientes indispensables para quebacterias nutricionalmente no exigentes puedan

    crecer, pudiendo ser estos sólidos o líquidos.

    Ejemplos: caldo común, agar común o agar 

    nutritivo, agar tripticasa de soya, etc.

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    Medios enriquecidos.-   son los mismos mediosmínimos o comunes, a los que se les incorpora

    ciertos componentes que hacen las veces de

    suplementos nutritivos. Por ejemplo: glucosa,

    sangre, suero, etc.Medios selectivos.- son aquellos medios de cultivoque van a permitir el crecimiento de ciertas

    bacterias, pero van a inhibir el crecimiento de otras.

    Son medios en los cuales la selectividad se

    consigue modificando las condiciones físicas del

    medio de cultivo y añadiendo sustancias químicas al

    mismo. Por ejemplo: el agar manitol salado.

    Medios selectivos y diferenciales.-  dichos mediosde cultivo además de permitir seleccionar un tipo de

    bacterias, estas pueden diferenciarse en dos  ………

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    grandes grupos: Por ejemplo: el

    agar Mac Conkey.

    Medios de transporte.-   sonaquellos que van a permitir la

    viabilidad de las bacterias desde latoma de muestra hasta su

    procesamiento, dentro de las 72

    horas. En estos medios de cultivo

    las bacterias no se reproducen

    significativamente, debido a que no

    existen una fuente orgánica de

    carbono. Por ejemplo: el medio de

    transporte Stuart.

    COMPOSICIÓN QUÍMICA –

    MEDIO STUARTFórmula química Cantidad

    NaCl 3 g

    KCl 0, 2 g

    HNa2PO4 1,15 g

    H2KPO4 0,2 g

    Na2S2O3 1 g

    CaCl2.H2O 10 g

    MgCl2.H2O 10 g

    Agar 4 g

    H2O 1 L

    7,3 + ó – 0,2 a 25ºC

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    3. Por su composición química:

    Medios sintéticos o definidos.-   son aquellos quese obtienen disolviendo en el agua destilada

    cantidades exactas de distintas sustancias químicas

    puras orgánicas y/o inorgánicas.

    Medios complejos o indefinidos.-   son aquellosque son preparados a partir de sustancias naturales

    de composición no constante. Su composición

    química se desconoce.

    Medios semisintéticos.-   es un tipo de medio,mezcla de los anteriores. Llevan algunas sustancias

    química cuya naturaleza y cantidades se conocen,

     junto con sustancias de naturaleza y composición

    química indefinidas.

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    AGAR MACCONKEY

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    COMPOSICIÓN TÍPICA (g/litro)Peptona de gelatina 17,0

    Peptona de caseína 1,5

    Peptona de carne 1,5

    Cloruro de sodio 5,0

    Lactosa 10,0

    Mezcla de sales biliares 1,5

    Rojo neutro 0,03

    Cristal violeta 0,001

    Agar - agar 13,5

    50,031

    Es importante tener en cuenta que cada uno

    de los componentes de un medio de cultivo

    tiene una función específica.

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    Muchas gracias...!!!